Характеристика регуляторных Т-клеток у больных раком яичников

УДК: 618.11–006.6:612.112.94
Характеристика регуляторных Т-клеток у больных
раком яичников
Е.В. Курганова1, М.А. Тихонова1, В.А. Лебедева2, Е.Г. Ласкавая2,
В.Ф. Коваленко2, А.А. Останин1, Е.Р. Черных1
ГУ «НИИ клинической иммунологии СО РАМН», г. Новосибирск1
Городская муниципальная клиническая больница № 1, г. Новосибирск2
630099, Россия, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14,
ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, е-mail: ct_lab @ mail.ru
Охарактеризованы регуляторные Т-клетки (Treg) у 10 больных раком яичника (РЯ) III–IV стадии. Установлено,
что по сравнению с периферической кровью в асцитической жидкости больных РЯ повышено количество CD4+CD25+/
CD4+CD25highTreg. Выявленный факт может свидетельствовать о направленной миграции и накоплении естественных
Treg в зоне опухолевого микроокружения. Увеличение CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+ регуляторных Т-клеток имеет более
генерализованный характер и регистрируется как в периферической крови, так и в асцитической жидкости. Больные РЯ
характеризуются выраженным 14-кратным снижением баланса соотношения цитотоксических CD8+Pfn+Т-лимфоцитов и
CD4+FOXP3+Treg – 0,4 ± 0,1 против 5,7 ± 2,0 у здоровых женщин (pU<0,01). Количественный дефицит цитотоксических
CD8+Pfn+Т-клеток в сочетании с увеличением доли различных популяций супрессорных Treg, очевидно, является одним
из возможных механизмов снижения эффективности противоопухолевого иммунного ответа.
Ключевые слова: регуляторные Т-клетки, FOXP3, цитотоксические Т-лимфоциты, рак яичников.
Regulatory T- cells in ovarian cancer
E.V. Kurganova1, M.A. Tikhonova1, V.A. Lebedeva2, E.G. Laskavaya2, V.F. Kovalenko2, A.A. Ostanin1, E.R. Chernykh1
Institute of Clinical Immunology RAMS SB 1,
Municipal clinical hospital № 1, Novosibirsk2
The aim of the study was to investigate the regulatory T cells (Treg) in the patients with stage III-IV ovarian cancer (OC, n=10). It
was revealed that the level of СD4+СD25+ /СD4+СD25high Treg in OC patients was increased in ascites compared to that in peripheral
blood. These data strongly suggest the directional traffic and accumulation of natural Treg in tumor microenvironment. The level
of CD4+FOXP3+ and CD8+FOXP3+ cells was increased both in ascites and in peripheral blood of patients with OC. Our results
indicate that expansion of these Treg subsets is more generalized. It was also shown, that patients with OC are characterized by
marked (14-fold) decrease of CD8+Pfn+/CD4+FOXP3+ ratio (0,4±0,1 vs 5,7±2,0 in healthy woman, pU<0,01). Therefore, it is highly
possible that quantitative deficiency of cytotoxic CD8+Pfn+Т-cells coupled with enhance level of different subsets of suppressive
Treg represent the important mechanism of of anti-tumor immune response decrease.
Key words: regulatory T cells, FOXP3, cytotoxic T lymphocytes, ovarian cancer.
Известно, что опухолевые клетки могут
распознаваться и уничтожаться иммунной
системой. Однако в условиях клинической
манифестации и прогрессии опухоли иммунный ответ оказывается несостоятельным, а
эффективность иммунотерапии регистрируется
лишь в ограниченных случаях. Одна из причин неадекватного иммунного ответа и низкой
эффективности иммунотерапии связана с возрастанием количества регуляторных Т-клеток
с супрессорной активностью (Treg) [24].
Популяция регуляторных Т-клеток является достаточно гетерогенной. Наибольший
интерес в последние годы привлекают естественные регуляторные СD4+СD25+Т-клетки,
которые играют важную роль в поддержании
периферической толерантности к собственным
антигенам за счет подавления аутореактивных
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)
Т-лимфоцитов [18, 19]. Поскольку опухолевые
клетки экспрессируют аутоантигены, рост опухоли сопровождается появлением аутореактивных Т-клеток, что непременно влечет за собой
компенсаторное возрастание Treg [1]. Наряду
с естественными Treg, имеющими тимическое
происхождение, выделяют также индуцированные регуляторные Т-клетки, которые могут
генерироваться из СD4+ и СD8+Т-клеток периферической крови [15, 18].
В экспериментальных моделях показано,
что опухолевый рост сопровождается увеличением численности регуляторных Т-клеток.
Причем их истощение приводит к отторжению
или уменьшению массы опухоли у мышей,
что демонстрирует ингибирующий эффект
Treg на противоопухолевый иммунный ответ
[19, 21]. Возрастание уровня регуляторных
Характеристика регуляторных Т-клеток у больных раком яичников
СD4+CD25+Т-клеток показано также у больных
с различными формами солидных опухолей и
гемобластозов. Увеличение этих клеток выявляется как в локальном опухолевом микроокружении, так и в периферической крови, что
свидетельствует о генерализованном характере
опухоль-индуцированной супрессии [4, 6, 12,
29]. Причем, по данным ряда авторов, количество Treg коррелирует с показателями выживаемости. Поэтому их определение в клинической
практике может иметь прогностическое значение [3, 10, 16, 20, 25].
Традиционно Treg оценивают как CD4+CD25+
клетки, поскольку они ко-экспрессируют молекулу СD25. Однако у человека популяция
CD4+CD25+ клеток включает не только естественные, но и индуцированные Т reg, а также
активированные CD4+Т-лимфоциты [4, 18, 27].
Определенным прогрессом на пути идентификации Treg стало выявление транскрипционного
фактора FOXP3. Оказалось, что данный транскрипционный фактор является критическим для
развития регуляторных Т-клеток и детерминирует появление у них супрессорной активности
[11, 26]. Поэтому экспрессия FOXP3 рассматривается на сегодняшний день в качестве наиболее
специфичного маркера Treg [9, 14, 17].
Исследованиями Treg при раке яичников
показано, что возрастание CD4+CD25+ клеток
выявляется исключительно в зоне опухолевого
микроокружения (в асцитической жидкости и
среди опухольинфильтрирующих лимфоцитов),
но не в периферической крови [7]. Однако популяция CD4+FOXP3+ клеток при раке яичников
до сих пор не оценивалась. Отсутствуют данные
и о численности регуляторных CD8+FOXP3+
Т-клеток, возрастание которых описано при некоторых других локализациях злокачественных
опухолей [13]. Исходя из этого, целью данной
работы стало изучение различных субпопуляций регуляторных Т-клеток в периферической
крови и асцитической жидкости у больных
раком яичников.
Материал и методы
В исследование были включены 10 пациенток, больных раком яичников (РЯ) III–IV стадии.
Возраст обследуемых варьировал от 25 до 76 лет
(в среднем 56,7 ± 4,5 года). Для иммунологиче-
41
ского исследования у больных перед операцией
проводили забор 20 мл периферической крови,
во время операции – асцитической жидкости.
Все пациентки были обследованы после получения информированного согласия. Контрольную
группу составили 20 здоровых женщин, сопоставимых по возрасту.
Мононуклеарные клетки (МНК) выделяли из гепаринизированной венозной крови
центрифугированием в градиенте плотности
фиколла-верографина. Клетки асцитической
жидкости (АЖ) получали путем центрифугирования в течение 10 мин при 1500 об/мин. МНК
в концентрации 0,1х106/лунку культивировали
в 96-луночных круглодонных планшетах в среде RPMI-1640 (Sigma-Aldrich), дополненной
0,3 мг/мл L-глютамина, 5мМ HEPES-буфера,
100 мкг/мл гентамицина и 10 % инактивированной сыворотки доноров АВ (IV) группы крови
при 370С в СО2-инкубаторе. Для стимуляции
клеток использовали моноклональные анти-CD3
антитела ICO-90 (анти-CD3, «Медбиоспектр»,
Москва) в концентрации 1 мкг/мл. Интенсивность пролиферации оценивали через 72 ч по
включению 3H-тимидина (1 мкКu/лунку), вносимого за 18 ч до окончания культивирования.
Относительное содержание CD4+CD25+ и
CD4+CD25high Т-клеток определяли методом
проточной цитофлюориметрии на лазерном
клеточном сортере-анализаторе FACSCalibur
(Becton Dickinson, США) с использованием
фикоэретрин (РЕ)-меченных анти-CD4 ( «Сорбент», Москва) и FITC-меченных анти-CD25
моноклональных антител (BD PharMingen,
США). Для оценки экспрессии внутриклеточного транскрипционного белка FOXP3 в
CD4 + и CD8 +Т-клетках, а также перфорина
(Pfr) в CD8+Т-лимфоцитах МНК обрабатывали
FITC-меченными aнти-CD4 или анти-CD8антителами («Сорбент», Москва). Пермеабилизацию клеток проводили с использованием
0,2 % раствора Твин-20, после чего клетки
культивировали 30 мин с PE-меченными антиFOXP3-антителами (eBioscience, США) или с РЕмеченными анти-Pfr-антителами (BD PharMingen,
США). Для оценки CD4+FOXP3+CD25+ клеток
использовали PerCP-меченные анти-CD4, РЕмеченные анти-FOXP3 и FITC-меченные антиCD25-антитела. Математическую обработку
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)
42
Е.В. Курганова, М.А. Тихонова, В.А. Лебедева И ДР.
полученных результатов проводили с использованием программы «Statistica 6.0».
Результаты и обсуждение
Известно, что увеличение количества/активности Treg при онкопатологии приводит к
развитию иммунной недостаточности, одним
из проявлений которой является угнетение пролиферативного потенциала Т-клеток. Оценка
уровня анти-CD3-стимулированной пролиферации Т-клеток показала (табл. 1), что у здоровых доноров этот показатель варьировал от
6162 до 68953 имп/мин, составляя в среднем
32700±6990 имп/мин. Интенсивность анти-CD3стимулированного ответа у больных РЯ была в
1,5 раза ниже (от 686 до 48271 имп/мин). Таким
образом, циркулирующие Т-лимфоциты больных характеризовались признаками угнетения
функциональной активности, что может быть
связано с накоплением Treg.
сти больных (n=5; рис. 1В) в 2 раза превышало
содержание таковых в периферической крови.
Известно, что субпопуляция CD4 +CD25 +
клеток является гетерогенной по интенсивности
экспрессии CD25 и функциональной активности. При этом показано, что супрессорной
активностью обладают преимущественно CD4
Т-клетки с высокой экспрессией CD25 молекулы – так называемые CD4+CD25high клетки [2].
а
Таблица 1
Пролиферативная активность Т-клеток
доноров и больных РЯ
Стимул
0
Анти-CD3
б
Уровень пролиферации МНК периферической крови (имп/мин)
Доноры (n=15)
Больные (n=10)
270 ± 50
240 ± 40
32700 ± 6990
22110 ± 4570*
Примечание: * – достоверность различий показателей по
сравнению с донорами, рU <0,05 (U – критерий Вилкоксона–
Манна–Уитни).
Для анализа Treg в периферической крови
на первом этапе была проведена оценка относительного и абсолютного количества Т-клеток
с фенотипом CD4+CD25+. У здоровых женщин
(рис. 1А) относительное содержание CD4+CD25+
клеток в периферической крови варьировало от
3,0 до 11,0 %, составляя в среднем 5,4 ± 0,5 %,
что согласуется с данными литературы [8, 28].
У больных РЯ (рис. 1Б) содержание этих клеток
было в 2 раза ниже – 2,7 ± 0,3 % (рU=0,0009) с
диапазоном от 1,5 до 4 %. Абсолютное количество CD4+CD25+ клеток в периферической
крови больных РЯ составило 46 ± 8 клеток/мкл и
было также достоверно меньше, чем у здоровых
женщин, – 95 ± 7 клеток/мкл (рU=0,001). В то же
время относительное содержание CD4+CD25+
клеток среди лимфоцитов асцитической жидкоСИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)
в
Рис. 1. Индивидуальные значения относительного количества
CD4+CD25+ клеток: А – МНК периферической крови донора;
Б – МНК периферической крови больной раком яичников;
В – лимфоциты асцитической жидкости этой же пациентки.
CD4+CD25+ определяли среди свежевыделенных МНК
Характеристика регуляторных Т-клеток у больных раком яичников
Анализ данной субпопуляции при раке яичников
ранее не проводился, поэтому параллельно с
оценкой CD4+CD25+ Т-клеток, было исследовано относительное содержание CD4 Т-клеток
с высокой экспрессией СD25. Относительное
количество CD4+CD25high клеток у здоровых
доноров (n=15) варьировало от 1 до 2,1 %, в
среднем – 1,1 ± 0,1 %. У больных РЯ (n=8)
количество CD4+CD25high клеток в периферической крови было достоверно ниже – 0,8 ± 0,3 %
(рU=0,02). При этом содержание CD4+CD25high
клеток среди лимфоцитов асцитической жидкости почти в 2 раза превышало таковое в периферической крови – 1,4 ± 0,2 % (рU=0,05).
Полученные результаты свидетельствуют
о возможном перераспределении популяции
CD4+CD25+ у больных РЯ и согласуются с данными Curiel et al., которые впервые продемонстрировали накопление CD4+CD25+ клеток в
асцитической жидкости женщин с РЯ [7]. Авторы
показали, что направленная миграция CD4+CD25+
клеток в асцитическую жидкость обусловлена
взаимодействием хемокина CCL22, продуцируемого опухолевыми клетками и макрофагами, с
его рецептором CCR4 на поверхности естественных регуляторных Т-клеток [22]. Выявленное
нами более высокое содержание CD4+CD25high
клеток в асцитической жидкости по сравнению
с периферической кровью является еще одним
аргументом в пользу миграции естественных
Treg в зону опухолевого микроокружения. Кроме
того, данный факт позволяет предполагать, что
уменьшение доли CD4+CD25+ Т-клеток периферической крови связано не только с уменьшением
в циркуляции активированных Т-лимфоцитов
(на фоне опухоль-индуцированной иммуносупрессии), но и естественных регуляторных
Т-клеток. С другой стороны, учитывая угнетение
пролиферативного потенциала Т-лимфоцитов у
больных РЯ, можно полагать, что в циркуляции
возрастает число других субпопуляций Treg, в
том числе характеризующихся низкой экспрессией или отсутствием на поверхности молекулы
CD25. Чтобы проверить это предположение,
параллельно с оценкой CD4+CD25+ Т-клеток
мы исследовали содержание CD4+Т-клеток с
внутриклеточной экспрессией FOXP3, являющегося маркером не только естественных, но и
индуцированных Treg.
43
В периферической крови здоровых доноров
(n=20) относительное количество CD4+FOXP3+
клеток варьировало от 1 до 8 %, составляя в
среднем 3,3 ± 0,5 % (рис. 2). У больных РЯ
(n=10) содержание этих клеток колебалось в
пределах от 3 до 16 %, и в среднем более чем
в два раза превышало показатель у доноров –
8,5 ± 2,4 % (рU=0,01). Абсолютное количество
CD4+FOXP3+ клеток у больных РЯ было также
повышенным – 15 ± 57 клеток/мкл против
70 ± 19 клеток/мкл у доноров (рU=0,05). Доля
CD4 +FOXP3 + клеток среди лимфоцитов асцитической жидкости составила в среднем
6,2 ± 0,9 % (n=5). Таким образом, относительное
содержание CD4+FOXP3+ клеток среди лимфоцитов периферической крови и асцитической
жидкости больных было сходным и значимо
превышало количество этих клеток в периферической крови здоровых женщин.
Увеличение относительного количества
CD4+FOXP3+ клеток на фоне снижения доли
CD4+CD25+ клеток свидетельствует, что, повидимому, не все СD4+FOXP3+ клетки несут на
своей поверхности молекулу CD25. Действительно, проведенный в отдельной серии экспериментов анализ экспрессии молекулы CD25 в
популяции CD4+FOXP3+ клеток периферической
крови больных РЯ показал, что лишь небольшая
часть этих клеток несла маркер CD25, в то
Рис. 2. Относительное количество CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+
клеток у доноров и больных раком яичников. Примечание:
ПК – периферическая кровь, АЖ – асцитическая жидкость,
* – различия статистически значимы по сравнению с группой
здоровых лиц (рU<0,05)
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)
44
Е.В. Курганова, М.А. Тихонова, В.А. Лебедева И ДР.
время как большинство СD4+FOXP3+Т-клеток
не экспрессировали CD25 и имели фенотип
СD4+FOXP3+CD25- (данные не представлены).
Полученные результаты указывают на то, что
CD4+CD25+ и CD4+FOXP3+ клетки у больных
РЯ являются, по-видимому, различными типами
регуляторных Т-клеток. Учитывая, что молекула
CD25 является неотъемлемой принадлежностью
естественных, но не индуцированных Treg,
можно полагать, что у больных РЯ наблюдается
увеличение обеих этих субпопуляций. При этом
если количество естественных регуляторных
CD4 +CD25 + Т-клеток возрастает преимущественно в асцитической жидкости (очевидно,
за счет их миграции в зону опухолевого микроокружения), то увеличение индуцированных
CD4+FOXP3+CD25- Treg регистрируется как в
зоне опухолевого роста, так и в циркуляции, то
есть имеет более генерализованный характер.
Следует отметить, что, помимо CD4+ Treg,
супрессорной способностью обладают и
CD8+Т-клетки, экспрессирующие транскрипционный фактор FOXP3+ [5]. Данная популяция
клеток является малоизученной и практически
не охарактеризованной при онкопатологии.
Исследование CD8 +FOXP3 + клеток (рис. 2)
показало, что в периферической крови относительное количество этих клеток у больных РЯ
было повышено более чем в два раза – 19,1 ±
4,4 % против 8,5 ± 1,9 % у доноров (рU=0,04).
Такое же количество CD8+FOXP3+ клеток выявлялось среди лимфоцитов асцитической
жидкости – 18,4 ± 5,8 %. Увеличение популяции
CD8+FOXP3+ было недавно опиисано Y. Kiniwa
et al. при раке предстательной железы [13].
Кроме того, S. Wei et al. обнаружили увеличение
CD8+Treg, продуцирующих IL-10, в асцитической жидкости больных РЯ [23]. Однако авторы
не исследовали экспрессию FOXP3 в указанной
популяции клеток.
Изучение регуляторных Т-клеток при онкопатологии представляет особый интерес в том
случае, когда данная популяция анализируется
в контексте баланса Treg и цитотоксических
Т-лимфоцитов (ЦТЛ), играющих важную роль
в противоопухолевом ответе [21]. Поскольку
одним из механизмов цитотоксической активности ЦТЛ является экспрессия перфорина, была
проведена оценка количества CD8+Т-клеток
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)
с внутриклеточной экспрессией перфорина.
Относительное содержание CD8+Pfr+ клеток
в периферической крови здоровых женщин
(n=15) и больных РЯ (n=7) было сходным и составляло в среднем 11,1 ± 1,2 % и 11,9 ± 3,8%
соответственно. Содержание CD8+Pfr+Т-клеток
среди лимфоцитов АЖ было таким же, как в
периферической крови – 9,6 ± 2,6 % (n=5). В
то же время абсолютное количество CD8+Pfr+
клеток у больных РЯ было достоверно ниже,
чем у доноров, – 78 ± 30 и 208 ± 33 клеток/мкл
соответственно (PU=0,04). В результате, если у
женщин контрольной группы соотношение абсолютного количества ЦТЛ и Treg варьировало
от 0,9 до 17, составляя в среднем 5,7 ± 2,0 (n=8),
то у больных РЯ этот показатель был снижен в
14 раз – 0,4 ± 0,1 (n=8).
Суммируя полученные данные, можно заключить, что при раке яичников наблюдается
увеличение различных субпопуляций Treg. Накопление естественных регуляторных Т-клеток
(CD4+CD25+/CD4+CD25high) выявляется преимущественно в зоне опухолевого роста, тогда
как увеличение CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+
регуляторных Т-клеток имеет более генерализованный характер и регистрируется как в
периферической крови, так и в асцитической
жидкости больных РЯ. При этом отмечается выраженное снижение баланса соотношения ЦТЛ
и CD4+FOXP3+ Treg, что может способствовать
опухолевому росту.
Литература
1. Alleva D.G., Burger C.G., Elgert K.D. Tumor growth causes
suppression of autoreactive T-cell proliferation by disrupting macrophage responsiveness to interferon-gamma // Scand. J. Immunol. 1994.
Vol. 39, № 1. P. 31–39.
2. Baecher-Allan C., Hafler D.A. Suppressor T cells in human
diseases // J. Exp. Med. 2004. Vol. 200, № 3. P. 273–276.
3. Bates G.J., Fox S.B., Han C. et al. Quantification of regulatory
T cells enables the identification of high-risk breast cancer patients
and those at risk of late relapse // J. Clin. Oncol. 2006. Vol. 24.
P. 5373–5380.
4. Beyer M., Schultze J.L. Regulatory T cells in cancer // Blood.
2006. Vol. 108, № 3. P. 804–811.
5. Billerbeck E., Blum H.E., Thimme R. Parallel expansion of human
virus-specific FOXP3- effector memory and de novo-generated FOXP3+
regulatory CD8+ T cells upon antigen recognition in vitro // Immunol.
2007. Vol. 179. P. 1039–1048.
6. Chattopadhyay S., Chakraborty N.G., Mukherji B. Regulatory
T cells and tumor immunity // Can. Immunol. Immunother. 2005.
Vol. 54. P. 1153–1161.
7. Curiel T.J., Coukos G., Zou L. et al. Specific recruitment of
regulatory T cells in ovarian carcinoma fosters immune privilege
and predicts reduced survival // Nature Medicine. 2004. Vol. 10,
№ 9. P. 942–950.
Характеристика регуляторных Т-клеток у больных раком яичников
8. Dieckmann D., Ploettner H., Berchtold S. et al. Ex vivo isolation and characterization of CD4+CD25+ T cells with regulatory
properties from human blood // J. Exp. Med. 2001. Vol. 193, № 11.
P. 1303–1310.
9. Fontenot J.D., Gavin M.A., Rudensky A.Y. Foxp3 programs the
development and function of CD4+CD25+ regulatory T cells // Nat.
Immunol. 2003. Vol. 4. P. 330–336.
10. Hiraoka N., Onozato K., Kosuge T. et al. Prevalence of FOXP3+
regulatory T cells increases during the progression of pancreatic ductal
adenocarcinoma and its premalignant lesions // Clin. Cancer Res. 2006.
Vol. 12. P. 5423–5434.
11. Hori S., Nomura T., Sakaguchi S. Control of regulatory T cell
development by the transcription factor Foxp3 // Science. 2003. Vol.
299. P. 1057–1061.
12. Ichihara F., Kono K., Takahashi A. et al. Increased populations of regulatory T cells in peripheral blood and tumor-infiltrating
lymphocytes in patients with gastric and esophageal cancers // Clin.
Cancer Res. 2003. Vol. 9. P. 4404–4408.
13. Kiniwa Y., Miyahara Y., Wang H.Y. CD8+FOXP3+ regulatory
T cells mediate immunosuppression in prostate cancer // Clin. Cancer
Res. 2007. Vol. 13. P. 6947–6958.
14. Kobayashi N., Hiraoka N., Yamagami W. et al. FOXP3+ regulatory T cells affect the development and progression of hepatocarcinogenesis // Clin. Cancer Res. 2007. Vol. 13. P. 902–911.
15. Najafian N., Chitnis T., Salama A.D. et al. Regulatory functions of CD8+CD28- T cells in an autoimmune disease model // J. Clin.
Invest. 2003. Vol. 112. P. 1037–1048.
16. Petersen R.P., Campa M.J., Sperlazza J. et al. Tumor infiltrating Foxp3+ regulatory T-cells are associated with recurrence
in pathologic stage I NSCLC patients // Cancer. 2006. Vol. 107.
P. 2866–2872.
17. Ramsdell F. Foxp3 and natural regulatory T cells: key to a cell
lineage? // Immunity. 2003. Vol. 19. P. 165–168.
18. Sakaguchi S. Regulatory T cells: key controllers of immunologic self-tolerance // Cell. 2000. Vol. 101. P. 455–458.
45
19. Sakaguchi S., Sakaguchi N., Asano M. et al. Immunologic
self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor
α-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance
causes various autoimmune diseases // J. Immunol. 1995. Vol. 155.
P. 1151–1164.
20. Schreiber T.H. The use of FoxP3 as a biomarker and prognostic factor for malignant human tumors // Cancer Epidem. Biomark.
Prevent. 2007. Vol.16. P. 1931–1934.
21. Somasundaram R., Jacob L., Swoboda R. Inhibition of cytolytic T lymphocyte proliferation by autologous CD4+CD25+ regulatory
T cells in a colorectal carcinoma patient is mediated by transforming
growth factor-β // Cancer Res. 2002. Vol. 62. P. 5267 – 5272.
22. Wei S., Kryczek I., Zou W. Regulatory T-cells compartmentalization and trafficking // Blood. 2006. Vol. 108. P. 426–431.
23. Wei S., Kryczek I., Zou L. Plasmacytoid dendritic cells induce
CD8+ regulatory T cells in human ovarian carcinoma // Cancer Res. 2003.
Vol. 65. P. 5020–5026.
24. Wolf A.M., Wolf D., Steurer M. et al. Increase of Regulatory T
Cells in the Peripheral Blood of Cancer Patients // Clin. Cancer Res.
2003. Vol. 9. P. 606–612.
25. Wolf D., Wolf A.M., Rumpold H. et al. The expression of the
regulatory T cell-specific forkhead box transcription factor FoxP3 is
associated with poor prognosis in ovarian cancer // Clin. Cancer Res.
2005. Vol. 11, № 23. P. 8326–8331.
26. Yagi H., Nomura T., Nakamura K. et al. Crucial role of FOXP3
in the development and function of human CD25+CD4+ regulatory T
cells // Int. Immunol. 2004. Vol. 16, № 11. P. 1643–1656.
27. Yi H., Zhen Y., Jiang L. et al. The phenotypic characterization
of naturally occurring regulatory CD4+CD25+ T cells. // Cell Mol.
Immunol. 2006. Vol. 3. P. 189–195.
28. Zou L., Barnett B., Safah H. et al. Bone marrow is a reservoir
for CD4+CD25+ regulatory T cells that traffic through CXCL12/CXCR4
signals // J. Cancer Res. 2004. Vol. 64. P. 8451–8455.
29. Zou W. Regulatory T cells, tumor immunity and immunotherapy // Nat. Rev. Immunol. 2006. Vol. 6. P. 295–307.
Поступила 10.06.08
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2008. №6 (30)