Комплексный подход к исследованию биоценоза урогенитального тракта у женщин ЗАО «НПФ ДНКДНК-Технология» 2010 г. Микроорганизмы урогенитального тракта женщины Патогены В норме отсутствуют Качественная диагностика «есть» / «нет» Нормофлора Другие Грибы В норме присутствуют в большом количестве Могут присутствовать Могут присутствовать в малом количестве Необходимость количественной оценки Анализ условно-патогенных микроорганизмов Врачу необходима информация о состоянии биоценоза в целом: Информация о соотношении общей обсемененности урогенитального тракта, лактобактерий и различных групп микроорганизмов является ключевой при оценке состояния биоценоза и, как следствие, состояния пациентки u Важна количественная оценка групп микроорганизмов, что позволит оценивать динамические изменения состояния биоценоза u 3 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Состав комплекта реагентов Фемофлор u u u u u u Общая бактериальная масса Лактобактерии Аэробные микроорганизмы (факультативные анаэробы) Анаэробные микроорганизмы Микоплазмы Грибы Количественная оценка 15 групп микроорганизмов Контроль взятия материала u Контроль прохождения реакции u Контроль качества проведенного анализа Что предлагаемый анализ дает врачу: u u u u u u 5 Определение конкретного лекарственного препарата для конкретного пациента Данный анализ более информативен, т.к. позволяет проводить сравнение количества бактериальной массы с лактобактериями – определение объема назначаемой терапии Данный анализ выявляет многие микроорганизмы, которые не видны в микроскоп или не растут на питательных средах – определение этиологии инфекционного процесса результаты могут быть получены в течение суток Возможность проведения динамических наблюдений Оценка биоценоза в целом ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Показания к исследованию Исследования биоценозов урогенитального тракта женщин репродуктивного возраста u Жалобы без клинических проявлений (V,U,C?) u Случаи несовпадения клиники и лабораторных исследований (посев, микроскопия, ПЦР качеств.) u Рецидивирующий баквагиноз u Оценка эффективности проведенного лечения u Оценка восстановления нормофлоры u Оценка объема предполагаемой терапии Исследования биоценозов женщин в менопаузе 6 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Дополнительные лабораторные исследования: Исследование мазка на лейкоциты u Качественный ПЦР анализ на безусловные патогены (хламидия, гонорея, трихомонас) u Medicus Amicus #2, 2006, http://www.medicusamicus.com/index.php?umonth=9&action=1x856-2-4a-5a-13gx2 7 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Алгоритм формирования заключения Алгоритм формирования заключения (2) Примеры результатов проведенных исследований (1) Нормоценоз* Состояние нормоценоза характеризуется следующими показателями: Контроль взятия материала (КВМ) >104 (4 Log) Общая бакмасса от 106 до 108 (6-8 Log) Нормофлора от 106 до 109 (6-9 Log) относительно ОБМ – от 0-до 0,5 – нормальный уровень от 80% всех выявленных МО Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора относительно ЛБ меньше 3 – нормальный уровень Микоплазмы: Mycoplasma (hominis + genitalium) – отсутствуют; Уреаплазмы: менее 104 Грибы рода Candida. менее 104 (<4 Log). диагностически незначимый уровень Нормальный биоценоз обладает свойствами устойчивости и саморегуляции. * для женщин репродуктивного возраста. 10 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Примеры результатов проведенных исследований (2) Относительный нормоценоз* Состояние характеризуется следующими показателями: Контроль взятия материала (КВМ) >104 (4 Log) Общая бакмасса от 106 до 108 (6-8 Log) Нормофлора от 106 до 109 (6-9 Log) относительно ОБМ – от 0-до 0,5 – нормальный уровень Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора относительно ЛБ меньше 3 – нормальный уровень Микоплазмы: Mycoplasma (hominis + genitalium) – отсутствуют; Уреаплазмы: больше 104 диагностически значимый уровень Грибы рода Candida. Менее 103 (<3 Log). диагностически незначимый уровень Нормальный биоценоз обладает свойствами устойчивости и саморегуляции. * для женщин репродуктивного возраста. 11 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Примеры результатов проведенных исследований (3) Умеренный дисбаланс Состояние умеренного дисбаланса характеризуется следующими показателями: Контроль взятия материала (КВМ) >104 (4 Log) Общая бакмасса от 106 до 108 (6-8 Log) Нормофлора (Lactobacillus spp.) от 20 до 80% общей бактериальной массы Микоплазмы: отсутствуют; Уреаплазмы: Ureaplasma (urealiticum + parvum) больше 104 диагностически значимый уровень. Грибы рода Candida. Менее 103 (<3 Log). Диагностически незначимый уровень 12 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Примеры результатов проведенных исследований (5) Выраженный дисбаланс Состояние выраженного дисбаланса характеризуется следующими показателями: Контроль взятия материала (КВМ) >104 (4 Log) Общая бакмасса может иметь нормальный, повышенный или пониженный уровень. Нормофлора (Lactobacillus spp.) – относительно ОБМ - значительно сниженный уровень Менее 20%. Аэробная и анаэробная условно-патогенная флора отличается разнообразием микроорганизмов. Доля большей части представителей условно-патогенной микрофлоры превышает долю лактобактерий в общей бактериальной массе. Значительно повышенный уровень. Микоплазмы: Mycoplasma (hominis + genitalium) – могут присутствовать в диагностически значимых количествах. Уреаплазмы: Ureaplasma (urealiticum + parvum) могут присутствовать в диагностически значимых количествах. Грибы рода Candida. присутствие более 103 (>3 Log) – диагностически значимый уровень. 13 ПЦР - это ДНК-Технология 10 марта 2010 г. Больная Р. 1970 г/р Жалобы: Выделения, дискомфорт, запах. Считает себя больной в течение года Микроскопия: Лейкоциты “V”до 10 п/з Лейкоциты “C” до 40 п/з Ключевые клетки -100% Обильная, кокко-бациллярная флора В зеркалах: Обильные густые светло-зеленые выделения без запаха. DZ: Хронический цервицит Группа клинически здоровых женщин (n=230) Нормоценоз 5,6 4,2 0,5 25,8 Относительный нормоценоз Анаэробный дисбаланс 63,9 Умеренный анаэробный дисбаланс Умеренный аэробный дисбаланс Группа женщин с клиническим признаками дисбиоза (n=191) Выраженный аэробный дисбиоз 1% 6% 4% 23% Выраженный анаэробно-аэробный дисбиоз Выраженный анаэробный дисбиоз 66% Умеренный анаэробный дисбиоз Относительный нормоценоз Структура биоценоза влагалища в течение беременности (n=402) Выводы: Предлагаемое исследование позволяет оценку биоценоза влагалища. давать комплексную Разработаны критерии абсолютной и относительной оценки роли различных микроорганизмов в составе биоценоза. Разработан лабораторный алгоритм этиологической диагностики дисбиотических нарушений. Исследованы биоценозы урогенитального тракта женщин репродуктивного возраста. Разработан критерий оценки выраженности дисбиотических нарушений. Исследованы биоценозы урогенитального тракта беременных женщин и их изменения по триместрам. Спасибо за внимание! Алгоритм назначения антибактериальных препаратов (АБП) Лечение необходимо Выраженность дисбиоза Восстановление нормофлоры Контроль восстановления нормофлоры Нет АБП Контроль излеченности Можно ли назначать выбранный препарат данной пациентке? Да Определение наиболее вероятного этиологического агента Эффективность каких препаратов доказана в контролируемых клинических испытаниях Региональные/локальные данные по резистентности?