ЭНДОКРИНОЛОГИЯ

ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
Гистоморфологические
изменения в легких кроликов при
гипотиреозе и его коррекции
йод@полисахаридными соединениями
ÓÄÊ 616.441-008.64:615.1:619
В.Н. Козлов, филиал ГОУ ВПО Московский государственный университет технологий и
управления (МГУТУ) НИЛ «Пищевые технологии» (Мелеуз)
Êëþ÷åâûå ñëîâà: àêòèâíûå ôîðìû êèñëîðîäà, éîäñîäåðæàùèå áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå äîáàâêè, òèðåîèäíûå
ãîðìîíû, ýêñïåðèìåíòàëüíûé ãèïîòèðåîç
Ñîêðàùåíèÿ: ÀÔÊ — àêòèâíûå ôîðìû êèñëîðîäà,
ÁÀÄ — áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå äîáàâêè, ÈÔÀ — èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç, ÌÒ — ìàññà òåëà, ñÒ4 — ñâîáîäíûé òèðîêñèí, Ò3 — òðèéîäòèðîíèí, ÒÒà — òèðåîòðîïíûé ãîðìîí
Введение
Проблемы эндемического зоба и зобных трансформаций по*
прежнему остаются актуальными, что обусловлено повышен*
ным удельным весом тиреоидной патологии в общей структуре
заболеваемости животных. В механизмах развития тиреопатий
ключевую роль играют так называемые струмогены — ксенобио*
тики, способные блокировать процессы усвоения йода щитовид*
ной железой. Сегодня cпециалисты предпринимают усилия по
разработке БАД, которые способны элиминировать струмогены
из организма животных. В частности, в лаборатории «Пищевые
технологии» филиала МГУТУ в г. Мелеузе разрабатываются но*
вые виды БАД, содержащих органические связанные формы
йода с антиоксидантной активностью [3, 4]. В качестве органи*
ческой матрицы для микроэлементной составляющей (йода) ис*
пользуют пектин — полисахарид растительного генеза, наделен*
ный энтеросорбционной активностью по отношению к ксенобио*
тикам [1]. Физиологическую активность БАД исследуют на
животных, у которых моделируют тиреоидную патологию по эн*
демическому типу.
Цель исследования
Цель настоящего исследования — изучить биологичес*
кий эффект органически связанных форм йода, в частности,
йод*пектина, на основе анализа гистологических изменений
в легочной ткани у кроликов, введенных в состояние экспе*
риментального гипотиреоза.
Кусочки легких размером 0,5×0,5 см фиксировали в 10%*м
растворе формалина. Срезы толщиной 7 мкм окрашивали ге*
матоксилином и эозином по общепринятой методике.
В сыворотке крови — на 29*е и 59*е сутки от начала иссле*
дования — определяли содержание тиреоидных гормонов —
сТ4, 3,5,3/*Т3 и ТТГ методом иммуноферментного анализа с
использованием стандартных наборов тест*систем ОАО
«Алкор*Био» (Санкт*Петербург). Кроме того, исследовали
кровь (клинический и биохимический анализы). Получен*
ные данные статистически обрабатывали с использованием
стандартных методов по программе «Statistica–5.0»
Windos 95. Значимость различий среднеарифметических
оценивали с использованием t*критерия Стьюдента. Статис*
тически значимыми считали различия при Р<0,05.
Результаты и обсуждение
Введение мерказолила в течение 28 сут вызвало экспери*
ментальный гипотиреоз у животных 2*й, 3*й и 4*й групп. От*
мечали гипофункциональное состояние щитовидных желез.
Концентрация сТ4 у гипотиреоидных кроликов составляла
4,34 ± 0,14 пмоль/л против 18,0 ± 0,50 пмоль/л у контрольных
(Р<0,05), концентрация 3,5,3/*Т3 — 1,56 ± 0,06 нмоль/л и 1,86
± 0,11 нмоль/л соответственно (Р<0,05). При этом уровень
содержания ТТГ составил 0,044 ± 0,01 мкМе/мл, а в контро*
ле — 0,032 ± 0,01 мкМе/мл (Р<0,05).
На гистологических препаратах легкого животных 1*й
группы (клинически здоровые) слизистая оболочка респира*
торных бронхиол выстлана однослойным многорядным мер*
цательным эпителием с бокаловидными клетками (рис. 1). В
межальвеолярных пространствах встречаются небольшие
скопления лимфоидной ткани, чаще всего плотно прилегаю*
2
1
Материалы и методы
Гипотиреоз моделировали на половозрелых кроликах*
самцах породы Шиншилла с МТ 2,0 … 2,5 кг, находившихся
на общевиварном питании. Их разделили на 4 группы по 12 в
каждой: 1*я группа — контрольная, кроликам 2*й, 3*й и 4*й
групп внутрижелудочно через специальный зонд вводили
фармакопейный тиреостатик мерказолил в течение 28 дней
ежедневно из расчета 2,5 мг/100 г МТ животного.
Кроликов 2*й группы декапитировали под эфирным нар*
козом на 29*е сут с начала исследования, кроликов 3*й и 4*й
групп — на 30*е сут со дня последнего введения тиреостатика.
При этом животных первых трех групп содержали на общеви*
варном питании в течение всего периода исследования, а кро*
лики 4*й группы после окончания введения тиреостатика по*
лучали йодобогащенный корм из расчета 10 мкг йода/кг МТ.
РВЖ МДЖ №1*2007
3
Ðèñ. 1. Ìèêðîôîòî. Àëüâåîëû è êðîâåíîñíûå êàïèëëÿðû ëåãêîãî
êðîëèêà êîíòðîëüíîé ãðóïïû (êëèíè÷åñêè çäîðîâîå æèâîòíîå).
Îêðàñêà ãåìàòîêñèëèíîì è ýîçèíîì; îê. ×10, îá. × 40 (× 400):
1 — îäèíî÷íî ðàñïîëîæåííûå êëåòêè ëèìôîèäíîé òêàíè; 2 — êðîâåíîñíûå ñîñóäû; 3 — ýïèòåëèé ñëèçèñòîé áðîíõèîë
35
ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
щие к адвентициальной оболочке сосуда. К эпителиальным
клеткам альвеол плотно прилегают кровеносные сосуды уме*
ренного кровенаполнения.
У животных 2*й группы, введенных в состояние экспери*
ментального гипотиреоза, в легких отметили выраженные
деструктивные процессы, расширенные кровеносные сосу*
ды, застой крови, сопровождающийся множественными диа*
педезными кровоизлияниями. Повышенная проницаемость
межклеточных щелей, эндотелиоцитов и их базальной мемб*
раны способствовали развитию периваскулярного отека и
миграции лейкоцитов в интерстициальное пространство.
Кровеносные сосуды и бронхи были окружены скоплениями
лимфоидной ткани в виде узелков округлой или овальной
формы (рис. 2).
Ðèñ. 2. Ìèêðîôîòî. Ðàçâèòèå äåñòðóêòèâíûõ ïðîöåññîâ â òêàíåâûõ ñòðóêòóðàõ ëåãêîãî ïîä äåéñòâèåì àíòèòèðåîèäíîãî ïðåïàðà× 400).
òà. Îêðàñêà ãåìàòîêñèëèíîì è ýîçèíîì; îê. ×10, îá. × 40 (×
Ñêîïëåíèå ëèìôîèäíûõ êëåòîê â ëåãî÷íîé òêàíè. Óçåëêè ëèìôîèäíîé òêàíè â èíòåðñòèöèàëüíîì ïðîñòðàíñòâå ïîêàçàíû ñòðåëêàìè
При этом лимфоидные клетки диффузно располагались в
межальвеолярных перегородках. В просвете альвеол наряду со
слущенными эпителиоцитами определялись макрофаги. Гипо*
тиреоз сопровождался изменениями ряда гематологических
показателей: эритропенией, лейкопенией, тромбоцитопенией.
У гипотиреоидных кроликов содержание эритроцитов состави*
ло 5,63·1012/л, лейкоцитов — 1,36·109/л, тромбоцитов —
302·109/л, у животных контрольной группы — 6,10·1012/л,
3,83·109/л и 525,4·109/л соответственно (Р≤0,05).
На следующем этапе исследований изучали направлен*
ность гистоморфологических изменений у животных 3*й и 4*й
групп в сравнительном аспекте. У кроликов, которых в тече*
ние 30 дней содержали на общевиварном рационе, сохраня*
лась выраженная реакция иммунокомпетентных клеток в ин*
терстициальной ткани вокруг деструктивно измененных
участков (рис. 3). Диффузный характер лимфоидной ин*
фильтрации указывал на сохраняющуюся глубокую дезор*
ганизацию структуры легкого. Рационы, обогащенные йо*
дом в органически связанной форме, способствовали вос*
становлению гормоно*метаболического статуса у кроликов.
Концентрация сТ4 у животных 4*й группы составила 26,04 ±
0,86 пмоль/л, Т3 — 0,054 ± 0,005 нмоль/л, а в 3*й — 12,75 ±
0,32 пмоль/л и 0,045 ± 0,001 нмоль/л соответственно. Вос*
становление гормонопродуцирующей функции сопровожда*
лось тенденцией к нормализации ряда гематологических по*
казателей: содержание эритроцитов в периферической крови
повысилось до 5,8·109/л, число лейкоцитов составило
3,15·109/л, а тромбоцитов — 265·109/л. Аналогичные показа*
тели у кроликов 3*й группы были ниже: общее число эритро*
цитов — 4,98·1012/л, лейкоцитов — 2,35·109/л, а тромбоци*
36
тов — 196·109/л (Р≤0,05). Кроме того, отмечали нормализа*
цию микроморфологического статуса в тканевых структурах
легкого у кроликов 4*й группы. На гистологических препара*
тах отмечали снижение степени выраженности лимфоидной
инфильтрации (рис. 4). Сохранялись признаки выхода фор*
менных элементов крови в периваскулярную зону, застойной
гиперемии, выраженные в меньшей мере, чем у животных,
находящихся на общевиварном рационе.
2
1
Ðèñ. 3. Ìèêðîôîòî. Ëèìôîèäíûå ñêîïëåíèÿ ïî õîäó áðîíõèîë
ó êðîëèêîâ, ñîäåðæàâøèõñÿ íà îáùåâèâàðíîì ðàöèîíå. Îê× 400):
ðàñêà ãåìàòîêñèëèíîì è ýîçèíîì; îê. ×10, îá. × 40 (×
1 — äèôôóçíûé ëèìôîèäíûé èíôèëüòðàò; 2 — ðåñïèðàòîðíàÿ
áðîíõèîëà
1
2
Ðèñ. 4. Ìèêðîôîòî. Ãèñòîñòðóêòóðà ëåãî÷íîé òêàíè ó æèâîòíûõ, ñîäåðæàâøèõñÿ íà éîäîáîãàùåííîì ðàöèîíå. Îêðàñêà
× 400):
ãåìàòîêñèëèíîì è ýîçèíîì; îê. ×10, îá. ×40 (×
1 — åäèíè÷íûå ìàêðîôàãè; 2 — âûõîä ôîðìåííûõ ýëåìåíòîâ
êðîâè â ïåðèâàñêóëÿðíóþ çîíó
Таким образом, основные гистоморфологические признаки
гипотиреоза, достигнутого введением такого тиреостатика как
мерказолил, — это нарушения периферического кровообраще*
ния преимущественно за счет застойных явлений, периваску*
лярный отек и выраженная реакция клеток макрофагической
системы. К факторам, способствующим развитию наблюдае*
мых гистологических изменений, следует отнести снижение об*
щего числа форменных элементов периферической крови, со*
держащих в своем составе соединения, влияющие на проницае*
мость сосудистой стенки: креаторные и антигепариновые
вещества, серотонин, адреналин, норадреналин. Вазодилята*
ЭНДОКРИНОЛОГИЯ
ции, на наш взгляд, способствуют и так называемые АФК, в ча*
стности NО*радикал. В ранее проведенных собственных иссле*
дованиях было установлено, что экспериментальный мерказо*
лиловый гипотиреоз сопровождается активацией функцио*
нального
состояния
системы
свободнорадикального
окисления с образованием АФК — О2·– — супероксид*анион
кислорода; ОH· — гидроксильный и О2H·— гидропероксиль*
ный радикалы [2]. В свою очередь, супероксид*анион кислоро*
да, будучи высокореакционным соединением, активирует NO*
синтетазу с образованием в тканях NO*радикала, обладаю*
щего свойствами вторичного посредника (активирует
растворимую гуанилатциклазу, продукт которой — цГМФ —
проявляет вазодилятаторные свойства). Восстановление ис*
следуемых гистологических структур в 4*й группе живот*
ных — это проявление физиологического эффекта исследуе*
мой БАД посредством нормализации тиреоидного статуса,
тиреоидзависимых звеньев метаболизма и системы свободно*
радикального окисления, что позволяет рассматривать йод*
пектин как одно из эффективных средств для коррекции йодо*
дефицитных состояний животных.
ÁÈÁËÈÎÃÐÀÔÈß
1. Äîí÷åíêî Ë.Â. Òåõíîëîãèÿ ïåêòèíà è ïåêòèíîïðîäóêòîâ.— Ì.: ÄåËè, 2000.
2. Êîçëîâ Â.Í. Èçó÷åíèå ëþìèíîë-çàâèñèìîãî ñâå÷åíèÿ öåëüíîé êðîâè äëÿ
îöåíêè ñîñòîÿíèÿ ãóìîðàëüíî-êëåòî÷íîãî èììóíèòåòà // Ìàòåðèàëû Ìåæäóíàðîäíîé êîíôåðåíöèè ïî ïàòîôèçèîëîãèè æèâîòíûõ.— ÑÏá: Èçäàòåëüñòâî
ÑÏáÃÀÂÌ, 2006, 115—116.
3. Ìàìöåâ À.Í. Îöåíêà àíòèîêèñëèòåëüíîé àêòèâíîñòè éîä-ïîëèñàõàðèäíûõ
ñîåäèíåíèé ìåòîäîì ðåãèñòðàöèè õåìèëþìèíåñöåíöèè íà ìîäåëüíûõ ñèñòåìàõ // Èííîâàöèè â èíòåãðàëüíûõ ïðîöåññàõ îáðàçîâàíèÿ, íàóêè, ïðîèçâîäñòâà: Ñá. íàó÷. òð. ã. Ìåëåóç, 17—18 àïðåëÿ 2006 ã.— Óôà.: Ãèëåì, 2006, 7—12.
4. Ïàò. 2265377 Ñ1 ÐÔ À 23L 1/30, 1/304. Áèîëîãè÷åñêè àêòèâíàÿ äîáàâêà ê
ïèùå äëÿ ïðîôèëàêòèêè éîäíîé íåäîñòàòî÷íîñòè è ñïîñîá å¸ ïîëó÷åíèÿ /
Ìàìöåâ À.Í., Áàéìàòîâ Â.Í., Êîçëîâ Â.Í. è äð. Çàÿâë. 20.07.2004; Îïóáë.
10.12.2005 // Áþë.—2005, 34.
SUMMARY
V.N. Kozlov. Hypothyroidism-specific histomorphological changes in the rabbit’s lungs and its correction by iodinecontaining polysaccharides. Comparative study of histomorphological changes in the rabbit’s lungs was performed following
experimental hypothyroidism development. We found that iodine-linked pectin included in the animal ration promoted recovery of
the thyroid and micromorphological status.
ПОДПИСКА НА РОССИЙСКИЙ ВЕТЕРИНАРНЫЙ ЖУРНАЛ
Читатели могут оплатить стоимость подписки через Сбербанк:
• на весь 2007 год — 660 руб.
• на 1*е или 2*е полугодие — 330 руб.
• за любой номер — 165 руб.
РВЖ МДЖ №1*2007
37