Содержание Список сокращений .............................................5 Введение ............................................................7 1. Классификация и структура эстрогенов ...........9 (Сметник В.П.) 2. Синтез эстрогенов ......................................... 12 (Сметник В.П.) 3. Метаболизм эстрогенов .................................. 21 (Касян В.Н., Сметник В.П.) 4. Эстрогеновые рецепторы и их функции ........... 44 (Сметник А.А.) 5. Фармакология препаратов эстрогенов ............. 59 (Сметник В.П.) 6. Теоретические и клинические аспекты эстроген-дефицита и применения эстроген-терапии .......................................... 79 (Сметник В.П.) Сердечно-сосудистая система ..................... 79 3 Estrogen_2011.indd 3 20.10.2011 10:04:14 Эс т рог ен ы: о т с и н т еза до к ли н ичес ког о п ри менен и я Центральная нервная система .................... 90 (Ильина Л.М., Сметник В.П.) Костная система .......................................103 (Сметник В.П.) Реакция молочной железы на эстроген-терапию ................................117 (Касян В.Н.) Урогенитальные расстройства .................. 128 (Сметник В.П.) Кожа как орган-мишень для половых гормонов ............................. 133 (Сметник В.П.) 7. Другие эстрогены: тиболон .......................... 138 (Сметник В.П.) 8. Селективные эстроген-рецепторные модуляторы ..................................................149 (Сметник А.А., Ольховская М.А.) Заключение .....................................................162 Приложение ....................................................165 4 Estrogen_2011.indd 4 20.10.2011 10:04:14 4 Эстрогеновые рецепторы и их функции А.А. Сметник Множественные эффекты эстрогенов осуществляются через ЭР, представленные в клетках-мишенях репродуктивных и нерепродуктивных органов. В настоящее время широко известно два типа ядерных ЭР: α и β. ЭР-α были впервые выделены в 1986 г., а ЭР-β — лишь в 1996 г. [1]. Ген ЭР-α находится на длинном плече хромосомы 6 (локус q2427), тогда как ген ЭР-β расположен в локусе q21-22 хромосомы 14. На сегодня изучено шесть изоформ ЭР-β и предполагается существование ЭР-γ. Также установлено, что эстрогены, несмотря на наличие стероидной структуры, служат модуляторами мембранных функций многих клеток. ЭР-α и -β обладают большой гомологичностью и, как все рецепторы стероидных гормонов, считаются транскрипционными факторами, имеющими центры связывания с регуляторными участками ДНК (промоторами, энхансерами). ЭР организованы в домены (рис. 10). N-концевые домены А-В способны активировать транскрипцию независимо от связанного лиганда и обозначаются как TAF1. ДНК-связывающий домен (DBD), типичный для многих ДНКсвязывающих белков, содержит два характерных мотива «цинковые пальцы» [3]. Домен D — связующая область Н-рецепторов. Домен Е (LBD) — лигандсвязывающий домен, обладает способностью активировать транскрипцию (TAF-2) [4, 5]. Домен F представляется 44 Estrogen_2011.indd 44 20.10.2011 10:04:16 Эстрогеновые рецепторы и их функции 4 Рис. 10. Типы эстрогеновых рецепторов [2]. Проценты указывают на сте- пень гомологичности доменов ЭР-β соответствующим доменам ЭР-α DBD — ДНК-связывающий домен; LBD — лигандсвязывающий домен; ТAF — активационный фактор транскрипции. вариабельной областью, содержащей последовательность аминокислот, которая образует в пространстве 12 α-спиралей. Домен F, возможно, определяет различие в ответах ЭР на Е2 и другие специфические модуляторы этих рецепторов. После открытия ЭР-β представления о сигнальных путях эстрогенов значительно изменились. Теперь известно, что 17β-эстрадиол, главный эндогенный активатор ЭР, неселективен к обеим изоформам рецептора. Однако эффект эстрогенов часто проявляется как балансирующее действие между ЭР-α и ЭР-β, где ЭР-α часто играет проактивную роль, тогда как ЭР-β имеет противоположную функцию [6]. ЭР-β высокогомологичен ЭР-α в области DBD, где гомологичность между двумя видами рецепторов составляет 96 %, однако лишь 30%-е сходство обнаруживается в случае доменов А-В и D. Уровень гомологичности в аминокислотной последовательности в области LBD составляет 53 %, в результате чего некоторые лиганды связываются с данными типами рецепторов с разной степенью сродства (табл. 4) [7]. Важная клиническая иллюстрация различия между двумя изоформами ЭР состоит в регуляции клеточной пролиферации, при которой ЭР-α наиболее часто проявляет пролиферативное действие, тогда как ЭР-β — антипролиферативное. Однако ЭР-β также 45 Estrogen_2011.indd 45 20.10.2011 10:04:16 Теоретические и клинические аспекты эстроген-дефицита и применения эстроген-терапии В.П. Сметник 6 Сердечно-сосудистая система Сердечно-сосудистые заболевания остаются ведущей причиной смерти как у мужчин, так и у женщин в развитых странах. Существует множество доказательств, что эстрогены регулируют важные аспекты функционирования сердечно-сосудистой системы и влияют на риск сердечно-сосудистых заболеваний. Популяционные исследования демонстрируют различия между мужчинами и женщинами, связанные с особенностями развития сердечно-сосудистых заболеваний. Сердечно-сосудистая система женщины служит важным звеном для защитного действия женских половых гормонов — эстрогенов. Эффекты эстрогенов осуществляются через биологические механизмы регуляции активности эндотелиальных, гладкомышечных клеток стенок кровеносных сосудов, а также клеток миокарда (рис. 19). Различают локальные и системные эффекты эстрогенов на сердечно-сосудистую систему. Модуляция функций клеток стенки сосудов и миокарда эстрогенами осуществляется посредством геномных и негеномных эффектов через ЭР. В эндотелиальных, гладкомышечных клетках и кардиомиоцитах обнаружены ЭР-α и -β. 79 Estrogen_2011.indd 79 20.10.2011 10:04:17 6 Рис. 19. Эс т рог ен ы: о т с и н т еза до к ли н ичес ког о п ри менен и я Влияние эстрогенов на кровеносные сосуды [1] В настоящее время известно два типа эстрогеновых ЭР: α и β. Эти рецепторы экспрессируются в сердце и сосудах, что в значительной степени подтверждает идею о том, что сердечно-сосудистая система — орган-мишень для эстрогенов [1]. Эффекты эстрогенов, демонстрирующие изменения в экспрессии гена, оцениваются как геномные. Однако сейчас известно, что эстрогензависимые сигнальные пути и функция ЭР гораздо сложнее. Показано, что ЭР сосудов могут быть транскрипционно активированы и без связи с эстрогеном, а посредством прямого фосфорилирования рецептора различными киназами (процесс обозначается как лиганднезависимая активация рецептора) [2]. Эстрогены оказывают быстрое негеномное действие на сосуды, а также долговременное (геномное) влияние, которое уменьшает ответ на повреждение сосуда и предупреждает атеросклероз. Долговременные эффекты эстрогенов, про которые известно 80 Estrogen_2011.indd 80 20.10.2011 10:04:17 Эстроген-дефицит и применение эстроген-терапии 6 больше, опосредованы ЭР-α и -β и проявляются в результате изменений экспрессии генов клеток сосудов и влияния на синтез белка. Влияние эстрогенов может приводить к кратковременному расширению сосудов эндотелиальным и эндотелиально-независимым способами. Эти быстрые эффекты осуществляются через негеномное воздействие эстрогенов. Быстрое расширение сосудов под действием эстрогенов возможно через влияние на NO и ионный канал. Эти эффекты связаны с тем, что в эндотелиальных клетках, в частности, предполагается наличие ЭР в кавеолах мембраны, которые активируют эндотелиальную NO-синтазу (eNOS — endothelial nitric oxide synthase) с помощью процессов фосфорилирования через протеинкиназные каскады. Экспрессия ЭР может варьировать в зависимости от пола, состояния гонад и выраженности атеросклероза. Различия в ответе сосудов на эстрогены частично зависят от уровня ЭР в стенке сосудов. Установлено, что в поздней постменопаузе (> 9–10 лет) снижено число и активность ЭР, что ведет к уменьшению влияния эстрогенов на кровеносные сосуды [3]. Влияние эстрогенов на циркулирующие липиды Эффекты эстрогенов на липиды служат примером сложного сочетания как потенциально полезных, так и вредных эффектов, которые могут вызывать эстрогены. Известно, что пероральные эстрогены снижают уровень ЛПНП и липопротеина (а), но повышают уровень ЛПВП [4, 5]. Эти эффекты проявляются первично вследствие изменений в печеночной продукции частиц липидов при приеме пероральных эстрогенов, благодаря эффекту первичного прохождения через печень, что не происходит при применении трансдермального пластыря и геля. Экспериментальные исследования на приматах после овариэктомии показали, что КЭЭ замедляют развитие атеросклероза при их назначении сразу же после операции (рис. 20) [6]. Позднее начало эстроген-терапии (ЭТ) оказывает противоположное действие из-за длительного периода негативного влияния дефицита половых гормонов. 81 Estrogen_2011.indd 81 20.10.2011 10:04:17 Селективные эстроген-рецепторные модуляторы М.А. Ольховская, А.А. Сметник 8 СЭРМ — это химические соединения, характеризующиеся избирательным как эстроген-агонистическим, так и эстроген-антагонистическим воздействием на различные органы и ткани. Эти вещества по химическому строению не относятся к эстрогенам. Однако благодаря особенностям структуры, они способны взаимодействовать с ЭР [1]. Область использования СЭРМ определяется поиском альтернативных методов лечения климактерических расстройств у больных, леченных по поводу рака репродуктивных органов, а также при наличии противопоказаний к использованию ЗГТ или при отрицательном отношении пациентки и/или врача к ЗГТ в связи с канцерофобией, возможными менструальноподобными реакциями, а также настроем женщины «перетерпеть» вегетативные расстройства. Особого внимания заслуживают СЭРМ, оказывающие антиэстрогенное влияние на молочные железы и эндометрий. В настоящее время активно исследуются клинические возможности применения СЭРМ для лечения широкого спектра заболеваний, а также для контрацепции. Механизм действия Применение СЭРМ в клинической практике для профилактики и лечения ряда заболеваний основано на их специфическом эстро- 149 Estrogen_2011.indd 149 20.10.2011 10:04:20 8 Эс т рог ен ы: о т с и н т еза до к ли н ичес ког о п ри менен и я ген-агонистическом и эстроген-антагонистическом влиянии на ЭР в различных клетках. Известно, что при связывании с агонистом или антагонистом ЭР подвергается конформационным изменениям, которые способствуют его спонтанной димеризациии и облегчают последующее взаимодействие димера со специфическим ответным элементом для эстрогенов, локализованным в гене-мишени [2]. Установлено, что эстроген облегчает взаимодействие ЭР с белками-коактиваторами, необходимыми для запуска транскрипции генов. При связывании ЭР с антагонистом, наоборот, происходит взаимодействие рецептора с белком-корепрессором. Связывание рецептора с различными СЭРМ позволяет принять ЭР-конформацию, отличающуюся от той, которая вызывается классическими агонистами или антагонистами [3]. Таким образом, эффекты СЭРМ зависят от относительного уровня экспрессии кофакторов (корепрессоров и коактиваторов) (рис. 28) [4]. Каждый класс СЭРМ имеет слегка различающуюся структуру, хотя все они способны связываться с ЭР. СЭРМ Рис. 28. Действие селективных модуляторов на эстрогеновые рецепто- ры [5] 150 Estrogen_2011.indd 150 20.10.2011 10:04:20 Селективные эстроген-рецепторные модуляторы 8 При связывании СЭРМ с ЭР рецептор подвергается конформационным изменениям, которые позволяют ему димеризоваться и взаимодействовать с регуляторными ответными элементами для эстрогенов в генах-мишенях. Комплекс ЭР-лиганд также приводит к связыванию корегуляторных белков. Некоторые комплексы ЭР– СЭРМ вызывают рекрутирование корепрессоров, другие — рекрутирование коактиваторов. Уникальность фармакологии СЭРМ может быть объяснена тремя взаимодействующими механизмами: ● дифференциальная экспрессия ЭР в определенных тканяхмишенях; ● дифференциальная конформация ЭР при связывании с лигандом; ● дифференциальные экспрессия и связывание с ЭР корегуляторных белков [5]. Полагают, что относительный уровень экспрессии двух изоформ ЭР (α и β) влияет на клеточный ответ на эстрогены. СЭРМ могут функционировать как полные антагонисты, действуя через ЭР-β на гены, содержащие ответные элементы, но могут играть роль и частичных агонистов, действуя через ЭР-α [6]. Открыто более 20 корегуляторных белков, которые связываются с ЭР и модулируют их функцию. Недавно был открыт новый 7-трансмембранный рецептор, сопряженный с G-белком (GPR30), который отвечает на стимуляцию эстрогенами быстрых клеточных сигнальных путей. Высказывается предположение, что пролиферативное действие тамоксифена на эндометрий может быть обусловлено увеличением уровня ароматазы посредством стимуляции тамоксифеном GPR30 в клетках эндометрия [7]. Таким образом, СЭРМ способны посредством негеномных эффектов влиять на транскрипцию ряда генов. Также существует мнение, что специфическое эстроген-агонистическое или эстроген-антагонистическое действие модуляторов в различных тканях может быть обусловлено способностью отдельных СЭРМ в разной степени блокировать определенные активационные факторы в составе ЭР. Например, строение молекулы ралоксифена препятствует взаимодействию с активационным 151 Estrogen_2011.indd 151 20.10.2011 10:04:20