Космический эксперимент «Вакцина-К» Цель эксперимента: Получение кристаллов белка – кандидата в вакцины против вируса иммунодефицита человека (ВИЧ-1) в условиях микрогравитации с целью определения атомной структуры высокого разрешения. Объект исследования: Рекомбинантный искусственный белок TBI, содержащий 4 Т- и 5 И- клеточных нейтрализующих эпитопов вируса иммунодефицита человека 1 (T- and B-cell epitipe containing Immunogen). Объем проведенных исследований на МКС: В период 2004- 2008г проведены предполетная подготовка и летные эксперименты КЭ «Вакцина-К» в количестве 6 сеансов (МКС -9 – МКС-17). Реализация каждого сеанса КЭ по кристаллизации осуществляется в несколько этапов: - предполетная подготовка биокристаллизатора (регламентные работы); - предполетная подготовка препаратов (белки и наборов реактивов); - подбор условий кристаллизации с использованием стандартных наборов реактивов; - подбор условий кристаллизации в рабочей аппаратуре; - заправка биокристаллизационных кассет; - проведение сеанса эксперимента на орбите; - предварительная оценка качества выросших кристаллов и отбор качественных кристаллов для дальнейшей работы. Применяемая аппаратура: Универсальная биокристаллизационная кассета (УБК) «Луч-2» производства НПП «БиоТехСис» предназначена для выращивания монокристаллов биологических препаратов методом диализа через полупроницаемую мембрану или комбинированным методом диализа и диффузии через газообразное состояние. Оба реализуемых в УБК «Луч-2» метода направлены на постепенное изменение концентрации осаждающего агента в камерах с раствором биологического препарата с целью достижения условий образования его монокристаллов. Визуальная инспекция содержимого кристаллизационных ячеек при разборке УБК проводилась на оптическом бинокулярном микроскопе Carl Zeiss, Jena (Германия). Микровидеосъемка в поляризованном свете и предварительный отбор кристаллов осуществлялись с помощью оптического бинокулярного микроскопа МПСУ-1 (ЛОМО, СССР) и видеокамеры графической станции INDY (Silicon Graphic, США). УБК «Луч-2» (слева) и биокристаллизационной кассеты «Луч-1» (справа). Результаты эксперимента по кристаллизации биопрепарата «Вакцина-К» В условиях микрогравитации вырашены кристаллы белка TBI стержнеобразной, трубчатой формы или без определенной огранки с максимальным размером около 200 мкм при наличии аморфного осадка. Выращенные кристаллы в 1,5-2 раза превосходят аналогичные кристаллы, выращенные в контрольных наземных экспериментах. Проведенные предварительные рентгеноструктурные исследования наиболее крупных кристаллов белка TBI (Вакцина-К) показали их непригодность для получения набора дифракционных данных. Обычное освещение Поляризованный свет Микровидеоизображения содержимого кристаллизационных ячеек с белком TBI: стержнеобразные кристаллы с максимальными размерами до 60 х 280 мкм. Необходимость продолжения исследований Исследования необходимо продолжать с применением специальных методов кристаллизации, невозможных в условиях космического полета на МКС в целях создания нового поколения лекарственных и профилактических препаратов против иммунодефицита человека (ВИЧ-1). __________________________________________________________________________________________________________ Постановщик эксперимента – ОАО «Биопрепарат». Научный руководитель эксперимента – д.м.н., профессор Г.Я. Щербаков, e-mail: [email protected], тел. (495) 787-26-97, 787-74-78.