Фенотипы лекция Минск

реклама
А.М. Попов
Иммунофенотип клеток нормального костного мозга.
Опухоле-ассоциированные иммунофенотипы при
острых лейкозах
Федеральный Научно-Клинический Центр
Детской Гематологии, Онкологии и Иммунологии им. Дмитрия Рогачева
Задачи иммунофенотипирования ОЛ
Доказать, что исследуемые клетки
опухолевые
Классифицировать ОЛ
Задачи иммунофенотипирования ОЛ
Доказать, что исследуемые клетки
опухолевые
Классифицировать ОЛ
Фенотип, ассоциированный с опухолевой
принадлежностью клеток
Нормальный костный мозг
T-лимфоциты
CD45
В-лимфоциты
В-линейные предшественники 2
В-линейные предшественники 1
Плазмоциты
Предшественники гранулоцитов
Моноциты
Предшественники моноцитов
Нейтрофилы
SSC Log
Эозинофилы
Эритробласты
Лейкоз-ассоциированные иммунофенотипы
Наиболее часто описываемые аберрации
иммунофенотипа при ОЛ
Повышенная экспрессия антигенов (CD10, CD34, CD19,
CD58, TdT, CD99)
Сниженная экспрессия антигенов (CD45, CD38, CD22,
CD19)
Коэкспрессия миелоидных антигенов (CD13, CD33, CD15)
Гомогенная экспрессия антигенов (любых)
Асинхронная экспрессия маркеров разных стадий
дифференцировки (например, CD34 с CD20 при ВП-ОЛЛ
или отсутствие CD2 при наличии CD3 при T-ОЛЛ)
Эктопическая экспрессия антигенов (например,
экспрессия TdT CD3cyt(+)-клетками костного мозга)
Нормальное созревание В-лимфоцитов
SSC
CD45
CD34
CD20
CD45
CD10
SSC
CD10
TdT
CD99
CD38
SSC
CD44
CD20
CD58
CD11a
BCP 1
BCP 2
BCP 3
Зрелые В-лимфоциты
Средняя интенсивность флюоресценции
Экспрессия антигенов нормальными и опухолевыми
клетками
CD10
CD34
В-лф CD10(-)
BCP CD10(+)
В-лф CD10(-)
BCP CD10(+)
CD45
CD58
CD20
В-лф CD10(-)
BCP CD10(+)
CD38
CD10
CD20
CD10
CD45
CD10
CD34
CD10
CD38
CD10
CD11a
CD58
CD44
Рецидив CD10(+) ОЛЛ на фоне нормальной
регенерации
CD45
CD45
SSC
CD45
CD10
CD10
CD10
Нормальное созревание миелоидных клеток
CD11b
CD11b
CD15
CD66b
CD14
CD15
CD16
CD65
CD13
CD64
CD14
CD33
Острый миелоидный лейкоз
CD11b
CD15
CD66b
CD65
CD11b
CD16
Острый миелоидный лейкоз
CD13
CD13
CD64
CD33
CD64
CD11b
CD14
CD33
CD66b
CD11b
CD11b
Острый миелоидный лейкоз
CD66b
Острый мегакариобластный лейкоз
CD61
SSC
CD45
CD45
Острый миелоидный лейкоз
CD11b
CD11b
CD66b
CD66b
SSC
CD45
Нормальные Т-клетки костного мозга
iCD3
CD7
CD3
CD8
CD3
CD2
CD5
CD4
CD2
iCD3
CD3
TdT
CD3
CD2
CD8
CD4
iCD3
TdT
CD1a
TCRγδ
Экспрессия миелоидных антигенов
лимфобластами
CD33
CD15
SSC
CD13
CD117
CD65
Экспрессия лимфоидных антигенов
миелобластами
CD19
CD2
SSC
CD7
CD5
CD22
TdT
Экспрессия лимфобластами антигенов другой
лимфоидной линии
BCP-ALL
T-ALL
CD10
SSC
CD7
T-ALL
CD79a
CD10
Нормальное созревание В-лимфоцитов
CD20
CD10
Нормальное созревание В-лимфоцитов
CD45
Пациент М. (54,8% бластов)
SSC
CD10
CD45
CD10
CD45
CD10
CD20
CD34
Пациент Б.
Диагноз
Рецидив
SSC
SSC
CD45
CD45
Пациент Б. (периферическая кровь)
SSC
SSC
CD45
CD45
Пациент Б. (периферическая кровь)
CD8
CD19
CD3
CD4
Пациент Б. (периферическая кровь)
CD8
CD19
CD3
CD4
CD10
CD7
Пациент Б. (периферическая кровь)
CD8
CD19
CD3
CD4
CD10
CD10
CD7
Костный мозг
Диагноз
CD7
Пациент Б. (периферическая кровь)
CD8
CD19
CD3
CD4
CD10
CD10
CD7
Костный мозг
Диагноз
CD10
CD7
CD7
Костный мозг
Рецидив
День 36
CD10
День 15
День 0
Пациент К.
1,828%
0,0099%
CD38
CD58
CD20
CD45
Пациент Д.
01.2014
CD10
07.2013
CD58
Пациент Д.
07.2013
CD13
01.2014
CD19
CD13
CD33
CD19
CD33
CD13
CD33
Выявление химерного транскрипта
ETV6-RUNX1
-7 DS
мес
ETV6-RUNX1
K+
M
Пациент С.
1,59%
CD34
CD19
CD58
CD45
CD10
CD20
CD38
Пациент С.
CD10
09.2014
01.2015*
CD58
CD58
CD20
CD20
*Данные предоставлены Л.В. Байдун
Выявление опухолевых клеток в СМЖ при Влинейном ОЛЛ
Пациент Г.
CD34
CD45
КМ
СМЖ
CD19
Выявление опухолевых клеток в СМЖ при Т-ОЛЛ
Пациент M.
Пациент С.
CD2
CD99
КМ
СМЖ
CD3
CD45
Выявление опухолевых клеток в СМЖ при ОМЛ
Пациент Д.
NG2
CD65
CD33
КМ
СМЖ
CD45
Пациент Б. (спинномозговая жидкость)
CD7
SSC
CD45
CD99
CD8
CD99
CD4
CD3
Пациентка С.
CD10
CD45
CD38
CD20
CD34
CD34
CD58
CD20
Пациент Б.
CD58
CD11a
CD38
CD34
CD20
CD10
CD45
Пациент Б.
CD20
CD34
CD11a
CD58
CD38
CD10
CD45
CD10
Пациент П.
CD45
CD34
CD19
CD58
CD20
CD38
Пациент П.
CD34
CD20
CD10
Пациент П.
CD19
CD45
CD34
CD20
CD58
Нормальное созревание миелоидных клеток под
воздействием Г-КСФ
CD11b
CD15
Г-КСФ
Норма
CD11b
CD66b
CD16
CD65
Нормальное созревание миелоидных клеток под
воздействием Г-КСФ
CD14
CD16
Г-КСФ
Норма
CD16
CD13
CD16
CD64
Особенности регенерирующего костного мозга
Нормальный КМ
Восстанавливающийся КМ
CD11b
CD11b
CD66b
CD66b
CD15
CD15
CD65
CD65
Особенности регенерирующего костного мозга
Нормальный КМ
Восстанавливающийся КМ
CD10
CD10
CD20
CD20
CD10
CD10
CD34
CD34
CD10
CD20
CD34
HRX
7 дней
HRY
CD10
CD10
CD20
CD20
CD34
HRX
CD34
7 дней
HRY
CD20
CD34
HRX
CD34
7 дней
CD10
CD10
CD10
CD20
CD20
CD34
HRY
15-й день
CD10
Диагноз
Изменения иммунофенотипа (опухолевые
клетки)
CD45
CD34
CD58
«Странные» фенотипы, возникающие под действием
терапии
CD19
МРО
«Странные» иммунофенотипы
МРО
FACS Perm 2
МРО
МРО
CD19
CD19
Fix&Perm
CD19
Фенотип, ассоциированный с определенными
генетическими нарушениями
Иммунофенотип ОЛЛ при наличии перестроек MLL
SSC
SSC
SSC
SSC
SSC
FSC
CD33
CD45
SSC
SSC
CD19
SSC
CD13
CD22
SSC
MPO
SSC
TdT
CD79a
CD10
CD10
CD3 cyt
CD10
CD20
CD10
CD34
Lambda
CD58
Kappa
CD45
Lambda cyt
Kappa cyt
CD19
CD19
CD19
CD15
CD65
CD19
CD133
NG2
Иммунофенотип ОЛЛ при t(12;21)
SSC
SSC
SSC
SSC
SSC
FSC
CD19
SSC
SSC
CD33
SSC
CD13
CD10
SSC
CD45
CD79a
SSC
SSC
CD117
CD10
MPO
TdT
CD10
CD58
CD45
CD20
μ cyt
Kappa
Lambda cyt
CD19
CD133
CD10
CD34
Lambda
CD22
Kappa cyt
Иммунофенотип ОЛЛ при t(8;14)
CD45
CD10
SSC
CD34
CD20
CD38
CD11a
TdT
CD58
Lambda
Kappa
IgM
Kappa
Lambda
Иммунофенотип ОМЛ при наличии перестроек
MLL
SSC
CD45
CD33
CD13
CD19
CD14
CD99
CD117
CD22
CD7
NG2
CD15
CD34
CD56
CD4
CD133
Иммунофенотип ОМЛ при inv16
CD33
CD117
SSC
CD45
CD14
CD15
CD13
CD7
CD11b
CD66b
CD34
Lysozyme
CD64
CD11c
CD4
MPO
Иммунофенотип ОМЛ при t(8;21)
CD33
CD117
SSC
CD45
CD14
CD15
CD13
CD7
CD11с
CD64
CD34
Lysozyme
CD19
iCD79a
MPO
iCD3
Острый миелоидный лейкоз при
синдроме Дауна
CD33
CD13
CD117
CD7
SSC
CD45
CD34
CD61
CD42a
Спасибо за внимание!
Скачать