Токсико-фармакологическое влияние пробиотика родафен на

1
На правах рукописи
АМБУЛОВА НАТАЛЬЯ ГРИГОРЬЕВНА
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ
КИШЕЧНОГО СТАБИЛИЗАТОРА В ПТИЦЕВОДСТВЕ
06.02.03 – ветеринарная фармакология с токсикологией
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидат биологических наук
Краснодар - 2013
2
Работа выполнена на кафедре микробиологии, эпизоотологии и вирусологии факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ»
Научный руководитель:
доктор биологических наук, доцент кафедры
микробиологии, эпизоотологии и
вирусологии ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ»
Пашник Татьяна Ивановна
Официальные оппоненты:
доктор биологических наук, профессор
кафедры биотехнологии, биохимии и
биофизики ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ»
Кощаев Андрей Георгиевич
кандидат ветеринарных наук, старший
научный сотрудник лаборатории
фармакологии ГНУ Краснодарский
научно-исследовательский ветеринарный
институт РАСХН
Тяпкина Евгения Викторовна
Ведущая организация:
ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская
государственная академия
ветеринарной медицины»
Защита состоится «_20_» декабря 2013 года в «_1000_» часов на заседании диссертационного совета Д - 220.038.07 при ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный
аграрный университет» (350044, г. Краснодар, ул. Калинина, 13).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Кубанского государственного аграрного университета.
Автореферат размещен на официальном сайте ФГБОУ ВПО «Кубанский ГАУ»
http://www.kubsau.ru и официальном сайте ВАК РФ – http://vak.ed.gov.ru.
Автореферат разослан «___»______________ 2013 года
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор ветеринарных наук
И.А. Родин
3
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность темы. Развитие птицеводства основывается на максимальном
обеспечении населения страны пищевым яйцом и мясом птицы отечественного производства, что необходимо для решения проблемы продовольственной безопасности
страны (Барановский А.Ю., 2000; Василюк А.В. и др., 2001; Данилевская Н.В., 2007;
Малик Н.И., 2002; Borriello S.P., 1986).
В условиях промышленного ведения птицеводства содержание, кормление и
другие факторы технологических приемов не соответствуют биологическим потребностям птицы, что негативно отражается на их физиологическом состоянии. Воздействие неблагоприятных факторов часто отрицательно влияет на иммунитет птицы, что
приводит, в первую очередь, к снижению продуктивности и ослаблению устойчивости
птицы к различным болезням. Одним из важных факторов снижения устойчивости организма и продуктивности птицы является бессистемное применение антибиотиков и
химиотерапевтических средств, что приводит к нарушению нормальной микрофлоры
организма. В результате чего, участились случаи заболевания органов пищеварения и
накопление остаточных количеств лекарственных веществ в мясе и продуктах птицеводства (Бабина М.П., 1998; Барановский А.Ю., 2000; Каноев Б., 2003). Актуальной
задачей ветеринарной практики является не только разработка новых препаратов для
профилактики заболеваний, но также и разработка способов повышения их эффективности (Малик Н.И., 2002).
Пробиотики являются наиболее безвредными препаратами, стабилизируют состав
микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте, повышают иммунитет, сохранность
поголовья, обладают ростостимулирующим эффектом. Но пробиотики не следует использовать бесконтрольно, так как разный состав препарата, дозировка, длительность
применения, возрастной период птицы по-разному определяют фармакодинамику
препарата и соответствующее его влияние на организм (Воробьев А.В. и др., 2001; Зацепилова Т.А., 1999; Каблучеева Т.И., 2004; Красочко П.А. и др.,2008; Панин А.Н.,
1999; Тараканов Б.В., 1999; Хисамов Р.Р., 2001; Collins M.D., 1999).
В связи с этим, изучение фармакодинамики новых отечественных пробиотиков
является актуальным.
Цель работы - разработка фармакологического обоснования использования родафена в птицеводстве.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
 дать физико-химическую и токсикологическую оценку родафена;
 изучить фармакодинамику родафена, его влияние на микробиоценоз пищеварительного тракта птицы, иммунитет, обмен веществ, продуктивность; провести производственные испытания;
 разработать схемы применения препарата;
 разработать нормативную документацию на препарат.
4
Научная новизна. Научно обоснованы оптимальные схемы применения родафена на цыплятах-бройлерах и курах-несушках, обеспечивающие получение максимального фармакологического эффекта, улучшения продуктивного здоровья птицы,
рентабельности производства.
Практическая значимость. Обосновано применение пробиотика родафен на
цыплятах-бройлерах и курах-несушках для нормализации кишечной микрофлоры,
увеличения активности ферментов кишечника, повышения иммунитета, продуктивности, сохранности поголовья. По результатам проведенных исследований была разработана и утверждена инструкция по применению пробиотической кормовой добавки
«Родафен» от 12.09.2012 года, утвержденная заместителем Руководителя Россельхознадзора Е.А. Непоклоновым, технические условия ТУ 9291-006-39988364-2012 и
выдано свидетельство о государственной регистрации (учетная серия 56-2-25.12-5418,
регистрационный номер № ПВР-2-25.12/02863).
Положения, выносимые на защиту:
 результаты изучения состава и токсикологических свойства родафена;
 фармакодинамика пробиотика;
 применение на цыплятах-бройлерах и курах-несушках;
 научно-обоснованные предложения по внедрению в птицеводство оптимальных профилактических доз, схем применения родафена.
Апробация результатов исследований. Материалы диссертации представлены,
опубликованы и одобрены на VI Международной научно-практической конференции
«Актуальные вопросы зоотехническогй науки и практики как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных» (Ставрополь, 2009);
на Всероссийском конкурсе на лучшую научную работу среди студентов, аспирантов
и молодых ученых высших учебных заведений Министерства сельского хозяйства
Российской Федерации по направлению «Ветеринарные науки» в трех этапах с I местом в первых двух (Краснодар, Ростов-на-Дону, Ставрополь, 2010); на Международной научно-практической конференции посвященной 65-летию Краснодарского научноисследовательского ветеринарного института «Актуальные проблемы современной
ветеринарии» (Краснодар, 2011); на Международной научно-практической конференции «Современные проблемы животноводства и ветеринарии: состояние и пути решения» (Краснодар, 2013); на ежегодных научных конференциях преподавателей ветеринарной медицины Кубанского ГАУ.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 6 статей в ведущих научных журналах, рекомендованных ВАК, в которых отражены основные результаты экспериментальных исследований.
Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 138
страницах компьютерного текста, включают введение, обзор литературы, собственные
исследования, обсуждение, выводы, практические предложения, список использован-
5
ной литературы (276 источников, в т.ч. 101 зарубежных авторов). Работа иллюстрирована 22 таблицами, 27 рисунками, имеет приложения.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Работа выполнена в период с 2006 по 2013 год на кафедре микробиологии, эпизоотологии и вирусологии факультета ветеринарной медицины КубГАУ в соответствии с плановыми тематиками НИР.
Научно-производственные опыты и апробацию результатов научных исследований на птице проводили в лабораториях терапии, микробиологии и микологии, фармакологии Краснодарского научно исследовательского ветеринарного института РАСХН; в Межрайонной ветеринарной лаборатории г. Новороссийска; на ЗАО п/ф «Щербиновская»; на ЗАО
ПТФ «Новороссийск», на ООО «Птицефабрика Натухаевская», на ООО «Раевская птицефабрика» г. Новороссийска.
В экспериментах и научно-производственных опытах было использовано 300
цыплят-бройлеров кросса «Росс-308», 300 кур-несушек породы «Ломанн Браун», 120
голов молодняка кур, 20 беспородных крыс-самцов, 125 белых мышей, 38 кроликов,
20 морских свинок. Для проведения исследований подвергнуто изучению после декапитации в опытах 140 голов. Объем лабораторных исследований составил 2985 проб.
При постановке экспериментов были использованы токсикологические, микробиологические, фармакологические, биохимические, морфологические, иммунологические, клинические, патологоанатомические, зоотехнические методы исследования и
методы вариационной статистики. Объектами лабораторных исследований были:
кровь, содержимое подвздошной кишки, толстого кишечника, а также корм и помет.
Всего проведено 4 серии опытов.
Микробиологические исследования проводили согласно современных методов
диагностики дисбактериоза толстого отдела кишечника (Иванов В.П., 2002). Подсчет
общего количества микроорганизмов вели по Бриду (1957). Определяли численность
молочнокислых, амилолитических, лактатферментирующих, целлюлозолитических
микроорганизмов, бактерий группы кишечной палочки. Посевы для бактерий делали
из разведений и вносили на среды по 0,1 мл. Для количественного учета молочнокислых бактерий и их выделения, была использована среда Квасникова Е.И. Бифидобактерии культивировали на среде бифидум, лактобактерии - на лактобакагаре, бактероиды гр. B. fragilis - на кровяном анаэробном бактоагаре с канамицином и желчью;
амилолитические микроорганизмы - на среде Хамлина; лактатферментирующие микроорганизмы - на среде Кистнера; на среде Эндо - бактерии группы кишечной палочки. Методом последовательных разведений от 10-4 до 10-6 определяли титр целлюлозолитических микроорганизмов. Энтерококки - на среде энтерококкагаре, стафилококки - на желточно-солевом агаре, гемолитические микроорганизмы - на 5% кровя-
6
ном агаре, дрожжеподобные грибы - на агаре Сабуро, клостридии – на среде Вильсона-Блера. (Каблучеева Т.И., 2004) Статистическая обработка микробиологических
данных проводилась по В.С. Асатиани.
ЛЖК определяли на газовом хроматографе «Кристалл – 2000М», оборудованном кварцевой капиллярной колонкой HPFFAP с внутренним диаметром 0,32 мм,
производство США. Для количественных расчетов содержания компонентов в пробе
применялся метод абсолютной калибровки. По методу Уголева А.М. (Уголев А.М.,
1965) на фотоэлектроколориметре при красном светофильтре изучали амилолитическую активность ферментов в содержимом желудочно-кишечного тракта. Целлюлозолитическую активность ферментов микроорганизмов определяли в слепых отростках
(Каблучеева Т.И., 2004). Протеолитическую активность - по Херриотту Р., Проскурякову М.Т. (1950, 1973).
Морфологические исследования крови включали в себя определение количества: гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, цветного показателя, скорости оседания
эритроцитов, лимфоцитов, (относительный и абсолютный показатель, Т – и В - клетки), базофилов, псевдоэозиноилов, сегментоядерные нейтрофилов, моноцитов. Подсчет эритроцитов,
тромбоцитов и лейкоцитов проводился по методикам Фриед и Лукачёвой в модификации
И.Ф. Болотникова с помощью камеры с сеткой Горяева; скорость оседания эритроцитов - на аппарате Панченкова; выведение лейкоформулы - на счетчике лабораторном С-5М-стимул плюс (Антипов В.А. и др., 2009; Кассирский И.А., 1970). Подсчёт
лимфоцитов проводился по методике Филипченко (Болотников И.А., 1979; Леонович
В.В., 1953). Биохимические показатели крови: Ca, неорганический Р, К, Fe, Na, Mg, общий
белок, глюкозу, общий билирубин, триглицериды, холестерин, ферменты АЛТ и AST, мочевую кислоту, щелочную фосфотазу, α- амилазу, липазу, мочевину, β-липопротеиды, белковые
фракции -– определяли на биохимическом анализаторе OLYMPUS для «invitro» диагностики с автоматической программой расчета (Бугуев И.П., 2005; Гугушвили Н.Н.,
2000). Калориметрическим количественным методом определяли щелочную фосфатазу, неорганический фосфор - ферментативным UV тестом, общий кальций, общий белок и фракции белка – калориметрическим фотометрическим тестом. Методом электрофореза определяли белковых фракций сыворотки крови на бумаге по А.М. Горячковскому (1994). Изучали фагоцитарную активность, фагоцитарное число, фагоцитарный индекс, фагоцитарную емкость, завершенный фагоцитоз по О.Г. Алексеевой
(1966), в качестве тест-культуры для ОФР использовали золотистый стафилококк- St.
aureus 209 р (Грошева Г.А., 1996; Ковальская Л.А., 1996; Меркулов Г.А., 1969). Фотонефелометрическим методом проводили определение бактерицидной активности
сыворотки крови в модификации О.В. Смирнова и Т.А. Кузмина. При постановке реакции использовали культуру St. aureus штамм 209 р (Вершигора А.Е., 1980, Герберт
У Дж., 1974, Жуковская Н.А. и др., 1966). Тубидиметрическим методом в модификации Х.Я. Грант определяли лизоцимную активность. В качестве тест-культуры использовали ацетоновый порошок M. lysodeicticus (Гугушвили Н.Н., 2000) . Дифферен-
7
цировку Т и В – лимфоцитов проводили по методике Есакова Н.Р (Бернет Ф.М.,
1971; Гурвич А.Е., 1978).
Для гистологических исследований селезенку, поджелудочную железу, печень и
тонкий отдел кишечника фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина.
Проводку материала осуществляли общепринятыми в патоморфологии методами
(Г.А. Меркулов, 1969). Заливку материала осуществляли в парафин и после этого при
помощи санного микротома МС-2 готовили серийные парафиновые срезы толщиной
5-6 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином (Меркулов Г.А., 1969).
Токсикологические исследования пробиотика родафен были проведены на лабораторных животных (белых мышах, крысах, кроликах, морских свинках) на определение: токсичности, острой токсичности, хронической токсичности, раздражающего
действия, микробиоценоза кишечника. Данные показатели определяли согласно методическим рекомендациям по изучению общетоксического действия фармакологических средств, методическим указаниям по токсикологической оценке новых препаратов для лечения и профилактики незаразных болезней животных; ГОСТу Р 540632010 «Средства лекарственные для животных. Методы определения безвредности»;
Методическим указанием по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Определение безвредности препарата проводили на белых мышах массой 18,0-20,0 г, которым вводили однократно через рот по 0,5 см 3 (0,5 дозы) взвеси
добавки с помощью инъекционной иглы.
Результаты всех экспериментальных исследований обрабатывались биометрическими методами вариационной статистики (Ойвин И.А., 1960) и использовалась программа компьютера по программе Excel-7,0 из пакета Microsoft offise – 2000 c определением критерия достоверности. Схема опыта в таблице 1.
Опыт 1 проводили на молодняке кур кросса «СК-Русь» на птицефабрике «Родина» Краснодарского края. Вели учет: состава микроорганизмов зоба, тонкого (подвздошная кишка) и толстого кишечника (слепые отростки).
Токсико-фармакологическое влияние пробиотика родафен на организм лабораторных животных изучали в опыте 2 на базе Межрайонной ветеринарной лаборатории г. Новороссийска. Испытание препарата на токсичность в опыте 2.1 проводили на
здоровых лабораторных белых мышах. Вели учет: клинического состояния и выживаемости животных. Острую токсичность пробиотика определяли в опыте 2.2 на крольчихах. Учитывали: клиническое состояние (термометрию), динамику массы тела и
выживаемость животных.
Хроническую токсичность определяли в опыте 2.3. Испытания проводили в течение 3-х месяцев на белых мышах, морских свинках, кроликах, беспородных крысахсамцах. В период наблюдения учитывали: прирост массы тела, гематологические и
биохимические показатели, патологоанатомические изменения и массу внутренних
органов. Кожно-резорбтивное действие пробиотика изучали в опыте 2.4 на белых кроликах-самцах. Учитывали реакцию по наличию: покраснения, появления кожной
складки.
8
Таблица 1 - Схема опытов
Группа Число
голов
Продолжительность
опыта, дней
1-К
120
1-150
с 1 по
10-О
50
24
11-К
5
24
1-О
5
10
2-О
5
10
3-К
5
10
1-О
2-О
3-О
4-О
5-К
6-К
7-К
8-К
10
10
10
10
10
10
10
10
62
62
62
62
62
62
62
62
1-О
2-О
3-О
1
1
1
3
3
3
1-О
50
13
1-К
2-О
3-О
100
100
100
100-337
100-337
100-337
1-К
2-О
100
100
1-39
1-39
3-О
100
1-39
Условия кормления
Опыт № 1 (молодняк кур)
ОР (основной рацион)
Опыт № 2 (лабораторные животные)
Опыт № 2.1 (белые мыши)
ОР + родафен (1-я группа - 0,1 г/10 мл физраствора, 2-я – 0,2 г/10
мл, 3-я – 0,3 г/10 мл, 4-я – 0,4 г/10 мл, 5-я – 0,5 г/ 10 мл, 6-я – 0,6
г/10 мл, 7-я – 0,7 г/10 мл, 8-я – 0,8 г/10 мл, 9-я – 0,9 г/10 мл, 10-я –
1,0 г/10 мл по 0,5 мл на голову в течение 14-и дней)
ОР
Опыт № 2.2 (крольчихи)
ОР + родафен (500 мг на голову с водой в объеме 3 мл перед
кормлением)
ОР + родафен (1000 мг на голову с водой в объеме 3 мл перед
кормлением)
ОР + (водопроводная вода в объеме 3 мл перед кормлением)
Опыт № 2.3 (лабораторные животные)
ОР + родафен (50 мг/кг белым мышам)
ОР + родафен (200 мг/кг морским свинкам)
ОР + родафен (250 мг/кг кроликам)
ОР + родафен (200 мг/кг беспородным крысам-самцам)
ОР (белые мыши)
ОР (морские свинки)
ОР (кролики)
ОР (беспородные крысы-самцы)
Опыт № 2.4 (белые кролики самцы)
Кожная проба пробиотика родафена (0,01 г/мл)
Кожная проба пробиотика родафена (0,1 г/мл)
Кожная проба пробиотика родафена (1,0 г/мл)
Опыт № 2.5 (белые мыши)
ОР + родафен (0,1 г на 100 г корма с 1-го по 10-й день)
Опыт № 3 (куры-несушки)
ОР
ОР + бифилакт (10 мл на голову)
ОР + родафен (4 г на 2000 голов со 100 дней в течение 3 недель)
Опыт № 4 (цыплята-бройлеры)
ОР
ОР + родафен (1 г на 2000 голов в возрасте 1-4 суток и 2 г в возрасте 21-24 суток)
ОР + родафен (2 г на 2000 голов с 1-4-е сутки и 4 г с 21 по 24-е
сутки)
9
Влияние пробиотика родафен на микробиоциноз кишечника изучали на белых
мышах в опыте 2.5. Определяли популяционный уровень микроорганизмов до и через
5, 10 дней в течение опыта, и через 3-и дня после окончания скармливания пробиотика.
Действие пробиотика родафен изучали на курах-несушках породы «Ломанн Браун» на
ЗАО ПТФ «Новороссийск» в опыте 3. Вели учет: морфологических, иммунологических и
биохимических показателей крови, сохранности поголовья; продуктивности (яйценоскости),
периода продуктивности, качества яйца (количество дефективных яиц; толщину скорлупы, массу, длину и ширину яйца; массу белка и желтка); состав микрофлоры толстого
кишечника.
В опыте 4 на ЗАО ПТФ «Новороссийск» на цыплятах-бройлерах кросса «Росс308» изучали действие пробиотика родафен. Вели учет: морфологических, биохимических и иммунологических показателей крови, сохранности поголовья, летучих жирных кислот в содержимом слепых отростков; микроорганизмов слепых отростков;
целлюлозолитических, амилолитических, протеолитических ферментов содержимого
слепых отростков; массы внутренних органов; живой массы, гистологических, токсико-фармокологических исследований.
2.2.1 Микроорганизмы желудочно-кишечного тракта птицы
в возрастной динамике
Стрессы, рацион кормления и многие другие факторы оказывают влияние на состав микроорганизмов желудочно-кишечного тракта. Но в разные периоды жизни
птицы формирование микрофлоры происходит по-разному.
В результате проведенных исследований было установлено общее число микроорганизмов в подвздошной кишке молодняка кур на протяжении всех исследований
колебалось в пределах от 2,38 до 3,26 млрд/г; в слепых отростках увеличивалось в течение всего периода времени. (Таблица 2)
Молочнокислые бактерии в зобе, подвздошной кишке и слепых отростках являются преобладающими, но в слепых отростках птицы в 84 дня количество молочнокислых бактерий составляло 4925,0 млн/г, а в 112 дней - 4800,0 млн/г. Такое уменьшение молочнокислых бактерий в 112 дней приводит к росту других микроорганизмов, таких как кишечная палочка, амилолитических микроорганизмов. Количество
молочнокислых бактерий в зобе цыплят снижается в 154 дня на 810 млн/г по отношению к 112-и дням, в подвздошной кишке в 112 дней на 66 млн/г по отношению к 56
дню.
Количество амилолитических микроорганизмов в подвздошной кишке и слепых
отростках в 56 дней меньше на 1,4 млн/г, чем в 14 дней, но со 112-и дней возрастает.
На протяжении всего периода исследования количество лактатферментирующих бактерий в зобе возрастает, в подвздошной кишке снижается. Лактатферменти-
10
рующие микроорганизмы в 56 дней были на 2,6 млн/г меньше, чем в 14 дней. В последствие, наблюдалось возрастание лактатферментирующих бактерий в слепой кишке с 84 по 154 день с 4,01 млн/г до 4,32 млн/г соответственно.
Содержание бактерий группы кишечной палочки в зобе снижается в 56 дней на
0,8 млн/г. В слепых отростках количество бактерий группы кишечной палочки в 84
дня было меньше на 0,15 млн/г, чем в 56 дней; с возрастом увеличиваются на 2,2
млн/г. Установлено, что наибольший рост колоний группы кишечной палочки наблюдается до 56-и дневного возраста, затем интенсивность их роста замедляется.Таким
образом, нашими исследованиями установлено, что в возрасте 28-56, 112 дней требуется коррекция микрофлоры кишечника пробиотическими препаратами.
Таблица 2 - Микрофлора желудочно-кишечного тракта птицы с возрастом
Возраст, дней
14
28
56
84
112
140
154
Общее коли- Подвздош2,38
2,49
3,21
3,26
чество микная
роорганизкишка
мов, млрд/г
Слепая
64,4 68,02 72,99
80,74
83,5
84,06 89,03
кишка
МолочноЗоб
785,0
1355,0
1630,0
820,0
кислые,
Подвздош- 172,0
114,0
48,0
51,0
млн/г
ная кишка
Слепая
973,3 3540, 4475,0 4925,0 4800,0 5550,0 5150,0
кишка
0
АмилолитиЗоб
10,7
23,8
29,1
29,9
ческие.
Подвздош14,0
12,6
19,3
21,5
млн/г
ная кишка
Слепая
28,5
30,0
26,0
26,0
39,0
42,5
49,0
кишка
ЛактатферЗоб
0,5
1,9
1,9
2,1
ментируюПодвздош- 0,619
0,545
0,560
0,543
щие, млн/г
ная кишка
Слепая
6,19
3,98
3,59
4,01
4,19
4,18
4,32
кишка
Группа
Зоб
1,2
0,4
1,6
1,4
E.coli, млн/г Подвздош0,37
0,48
0,52
0,56
ная кишка
Слепая
2,7
4,2
5,05
4,9
5,1
5,1
5,75
кишка
11
2.3 Физико-химическая характеристика пробиотика
Для коррекции микрофлоры в желудочно-кишечном тракте в установленные возрастные периоды были взяты пробиотики бифилакт и наш пробиотик родафен. Родафен - порошок белого цвета, без запаха, сладкого вкуса, растворим в воде, 7 Т, не
содержит примесей. Препарат содержит штаммы Bacillus subtilis ВКПМ 2574 и
Bacillus licheniformis ВКПМ Б-020 (1×109 КОЕ/г)
Бифилакт – кисломолочный продукт, вырабатываемый сквашиванием цельного
пастеризованного молока симбиотической закваской, состоящей из молочнокислых и
бифидобактерий. Включает штаммы бифидобактерий B.bifidum 1, B.bifidum 791,
B.longum B379M, лактобактерий Lactobacillus plantarum 8РАЗ, Lact. plantarum 296D,
Lact.fermentum 90TC4, Lact.fermentum 1-20. В 1мл препарата содержится 1,5–2х109
жизнеспособных лактобацилл и 2–4х108 жизнеспособных бифидобактерий.
2.4 Токсикологическая оценка и безопасность применения родафена
В опыте 2 проводили исследования по определению острой и хронической токсичности, кожно-резорбтивного действия, количества кишечной микрофлоры. Животные подбирались и распределялись по группам по принципу парных аналогов, содержались в идентичных условиях кормления и содержания. В опыте 2.1 признаков токсикоза и гибели мышей, получавших пробиотик, не наблюдалось. По результатам исследований в опыте 2.2 пробиотик родафен не обладает острой токсичностью. Гибель
кроликов не наблюдалась. Живая масса тела во 2-й опытной группе стала на 20 г
больше чем в контрольной и 1-й опытной группе. Температурные показатели в группах находились в пределах физиологической нормы. Клинические признаки интоксикации: внешний вид, поведенческие реакции - не выявлены.
Длительное применение пробиотика родафен в опыте 2.3 не позволило выявить
отрицательного воздействия на организм животных: регионарные и мезентериальные
лимфатические узлы, внутренние органы лабораторных животных, ответственные за
метаболизм и элиминацию чужеродных соединений, были без признаков патологии.
Вес животных под конец опыта увеличился в опытной группе на 5,24 г, по отношению
к контрольной (табл. 4). Таким образом, пробиотик вызывал увеличение массы тела
животных без нарушения развития внутренних органов. На протяжении всего срока
эксперимента гибель животных не наблюдалась.
В ходе изучение раздражающего действия пробиотика родафен в опыте 2.4 у
кроликов не отмечалось образования эритемы и отека кожи.
В опыте 2.5. в кишечнике мышей увеличивалось количество бифидобактерий,
энтерококков; снижалось - лактобактерий, с последующим их увеличением (табл. 5).
12
Таблица 4 - Массовые показатели внутренних органов крыс-самцов при изучении
хронической токсичности
Группы
животных
Контрольная
Опытная
Вес жиВес животвотных до ных в конце
опыта, г
опыта, г
87,26±
103,98±
2,91
1,17
88,44±
1,61
109,22±
1,41*
Сердце
0,68±
0,1
Вес внутренних органов(г)
Легкие Печень Почки Селезенка
0,9±
3,9±
1,18±
0,4±
0,13
0,35
0,24
0,08
0,54±
0,07
1,04±
0,19
3,94±
0,37
1,0±
0,17
0,36±
0,12
Таблица 5 - Влияние пробиотика родафен на микрофлору кишечника мышей
Наименование микроорганизмов
Популяционный уровень микроорганизмов, КОЕ/г
до введения
на 5-й день
введения
на 10-й день
введения
Bifidobacterium sp.
1,65×109
2,7×1011
Lactobacillus sp.
±0,35
4,4×108
±0,9
±0,35*
4,1×109
±0,5
4,1×109
±0,55**
Enterococcus sp.
3,9×108
±0,2
Escherichia coli
1,7×107
±0,3
3×109
±0,3*
2,7×107
±0,5
7
на 3-й день после
окончания введения
5,3×1011
±0,42***
5,3×109
±0,6
3,7×10
±0,25
4,1×108
±1,2
5,9×109
±0,25***
4,1×105
±0,4**
5,1×107
±0,49***
Здесь и далее p <0,05* - 0,95; p <0,01** - 0,99; p <0,001*** - 0,999.
Гистологические исследования в опыте 4 на цыплятах-бройлерах показали, что в
контрольной группе при морфологическом исследовании печени птиц определялись
все ее структурные компоненты. В некоторых участках печени выявляли острую венозную гиперемию, по периферии таких участков отмечали гипертрофию отдельных
гепатоцитов. При морфологическом исследовании поджелудочной железы, селезенки,
кишечника патологических изменений в структуре не обнаруживали. С применением
родафена в морфологическом строении печени цыплят отмечали гиперемию сосудов,
гипертрофию гепатоцитов; в структуре селезенки птицы обнаруживали гиперемию
сосудов, отек стенки и десквамацию эндотелия артерий фолликулов. В слизистой кишечника отмечали слизистую дистрофию и десквамацию эпителия кишечных ворсинок. Поджелудочная железа не имела патологических изменений.
13
2.5 Фармакодинамика пробиотика родафен
2.5.1 Влияние пробиотика на состав симбионтных микроорганизмов пищеварительной системы птицы
Применение родафена на курах-несушках в опыте 3 показало, что в тонком и толстом отделах кишечника в 134 дня препарат стимулировал увеличение общего количества микроорганизмов на 44,6 млрд/г и на 734,4 млрд/г соответственно. С возрастом
данная тенденция повторяется. Родафен в 134 дня стимулирует рост молочнокислых
бактерий на 242499,9 млн/г и на 172497,1 млн/г, с последующим снижением в 337
дней. Такая же тенденция наблюдается и с лактатферментирующими бактериями. Количество бифидобактерий в слепых отростках с возрастом достоверно увеличивается
с 24000,0 млн/г до 8550000,0 млн/г. Родафен в 134 дня в толстом отделе кишечника
повышал количество бактерий группы кишечной палочки на 35845 млн/г, в 337 дней снижал на 135000,0 млн/г.
Применение пробиотика бифилакт на курах-несушках в опыте 3 показало, что в
тонком и толстом отделах кишечника препарат стимулирует увеличение общего количества микроорганизмов в 134 дня на 977,7 млрд/г и на 861,8 млрд/г.
В 337 дней бифилакт повышает количество микроорганизмов на 1305,7 млрд/г;
молочнокислых; лактатферментирующих. Бифилакт значительно снижает количество
бактерий группы кишечной палочки в 134 дня в тонком и толстом отделах кишечника
на 0,2565 млн/г и на 154,8 млн/г. Количество бактерий группы кишечной палочки в
337 дней снижалось на 255000 млн/г.
Таким образом, в опыте 3 родафен в 3-й группе в 134 дня способствовал увеличению общего количества микроорганизмов, молочнокислых, лактатферментирующих,
бифидобактерий и бактерий группы кишечной палочки. В 337 дней в 3-й группе количество бактерий группы кишечной палочки снижается. Пробиотик бифилакт в 337
дней способствовал увеличению общего количества микроорганизмов, молочнокислых, лактатферментирующих и бифидобактерий; снижению бактерий группы кишечной палочки.
Родафен у цыплят-бройлеров в опыте 4 в толстом кишечнике значительно увеличивал количество бифидобактерий 1х1012 КОЕ/г. (Таблица 7) С возрастом наблюдалось снижение количества бифидобактерий, энтеробактерий.
Во 2-й группе увеличивалось количество лактозонегативных энтеробактерий, бактероидов; поддерживались на уровне бифидобактерии; снижалось в 2 раза количество
сапрофитных стафилококков; уменьшалось число лактобактерий, лактозопозитивных
энтеробактерий, энтерококков, клостридий.
Родафен в 3-й группе увеличивал число бактероидов, энтеробактерий, кандид;
способствовал стабильному балансу лактобактерий; снижал количество энтерококков
на 8×101, сапрофитных стафилококков 4,9×103 КОЕ/г, клостридий.
14
Таблица 6 - Микрофлора тонкого и толстого отделов кишечника кур-несушек в 134 и
337 дней при даче пробиотиков
№ группы
Общее количество микроорганизмов, млрд/г
Молочнокислые
бактерии,
млн/г
Лактатферментирющие
бактерии,
млн/г
Бифидобак
терии,
млн/г
Бактерии
группы
E.coli,
млн/г
134 дня (тонкий отдел)
1
Контрольная
2
Бифилакт
3
Родафен
1060,5
0,0825±
0,00745
0,02±
0,00101
22,75±
1,125
0,275±
0,145
2038,2
0,6175±
0,01705***
0,1725±
0,0124
282,5±
12,45*
0,185±0,0097
1105,1
242500,0±
3600,0***
16,0±
0,905*
37,75±
17,5***
177,5±12,4
134 дня (толстый отдел)
1
Контрольная
2
Бифилакт
3
Родафен
1007,6
2,9 ±
11,0
0,046 ±
0,0018
182,5±
6,6
155,0±
10,15
1869,4
3,625 ±
0,486***
0,05575±
0,016*
232,5±
11,55*
0,235±
0,01175***
1742,0
172500,0 ±
9500,0**
1,45±
0,08***
24000,0±
1390,0*
36000,0±
910,0***
337 дней (толстый отдел)
1
Контрольная
2
Бифилакт
3
Родафен
1742,0
0,009 ±
0,00079
0,009±
0,00066
250000,0±
195000,0
557500,0±
12000,0
4149,7
542500,0±
12400,0***
2025,0±
91,0***
66000000,0±
1500000,0***
302500,0±
7700,0***
3047,7
0,125 ±
0,0115
0,125±
0,01165
8550000,0±
250000,0***
422500,0±
12400,0**
Здесь и далее p <0,05* - 0,95; p <0,01** - 0,99; p <0,001*** - 0,999.
15
Таблица 7 – Микрофлора толстого отдела кишечника цыплят-бройлеров при даче
пробиотика родафен
№ группы
1 контрольная
2 родафен 1г/2000
голов
11 суток 39 суток
3 родафен 2г/2000 голов
11 суток
39 суток
Микроорганизмы, КОЕ/г
Бифидобактерии
Лактобактерии
11 суток
39 суток
1х1012
1х105
1х1010
1х105
1х1012
1х109
1х108
1х108
1х105
1х106
1х108
1х108
Бактероиды
1х103
1х103
5х105*
1х105
1х103
5х103*
Энтеробактерии Л+
Энтеробактерии ЛЭнтерококки
5х104
3х102
1х102
1,2х102*
5х103
1х103*
1х105
1х102
7х102*
3х103*
1х104
5х103*
1,2х105
1х105
5х107*
5,8х104*
1х103
2х104*
нет
нет
нет
нет
нет
нет
3х103
5х106
5х103*
5х103
1х106*
7х103
1х104
нет
нет
нет
нет
нет
нет
1х102
нет
4х102*
1х103
8х102*
1х103
1х104
1х105
1х103
1х103
1х103
Золотистый
стафилококк
Сапрофитные
стафилокки
Гемолитические м/о
Кандиды
Клостридии
2.5.2 Влияние родафена на иммунитет
Дача пробиотика в опыте 3 вызывала сильный иммунный ответ организма у курнесушек, в результате чего в 134 дня происходило увеличение абсолютного, относительного количества Т-лимфоцитов и γ-глобулинов: 12,44×109/л; 58,0 % и 33,1 % соответственно. В последующем, уже после 10 дней дачи препарата эти показатели нормализовались: 4,86×109/л; 52,0 % и 23,9 %. В сыворотке крови птицы в 337 дней после
дачи пробиотика лизоцимная, бактерицидная, фагоцитарная активность увеличивались на 11,8 мкг /%; 2,67 %; 13 %.
16
Пробиотик бифилакт в 134 дня увеличивал абсолютное количество Тлимфоцитов на 0,13×109/л; снижал ЛАСК на 13,6 мкг/%, БАСК на 5,4 %. С возрастом
во 2-й группе наблюдалось повышение БАСК на 35,3 %.
Проведенные исследования клеточного, гуморального иммунитета цыплят в
опыте 4 показали, что в группах с применением родафена в 39 дней было увеличение
общего и абсолютного количество Т-лимфоцитов; незначительное уменьшение относительного количества В-лимфоцитов, но не выходящее за пределы физиологической
нормы показателей крови. Фагоцитарная активность в 39 дней снижалась во 2-й группе на 8,4 %; 3-й группе - на 2 %, по отношению к контролю.
2.4.3 Влияние на обмен веществ у птицы при использовании родафена
Морфологические исследования крови кур в опыте 3 показали, что количество
эритроцитов и гемоглобина в 134-х дневном возрасте в 3-й группе с родафеном увеличивалось на 0,3×1012/л и на 12,0 г/л, в 337 дней данные показатели находились в
пределах нормы. Количество тромбоцитов и лейкоцитов с возрастом снижалось (табл.
8). Со 134-х дневного возраста по 337-й день наблюдалось снижение сегментоядерных
нейтрофилов на 16,0 % и 33 %; повышение лимфоцитов – на 16,0 % и 40 % соответственно. Моноциты, псевдоэозинофилы, базофилы находились в пределах физиологической нормы. Таким образом, родафен увеличивает количество гемоглобина, эритроцитов; снижает лейкоциты.
Пробиотик бифилакт в 134 и 337 дней увеличивал гемоглобин на 16 г/л и 22 г/л.
Количество тромбоцитов и лейкоцитов с возрастом снижалось. В 134 дня возраста по
337-й день наблюдалось снижение сегментоядерных нейтрофилов на 16,0 % и 33 %;
повышение лимфоцитов – на 18 % и 7 % соотвественно, по отношению к контролю.
Пробиотик родафен в 134 и 337 дней увеличивает количество общего белка на
6,2 г/л и на 4,8 г/л (рис. 1).
80
60
40
1-контроль
20
0
2-бифилакт
3-родафен
Рис. 1 – Изменение биохимических показателей крови кур после применения препаратов
17
ЦП,
Ед.
Лейкоформула
Tr,
109/л
Er,
1012/л
L,
109/л
Hb, г/л
№
группы
Таблица 8 – Морфологические показатели крови кур-несушек после применения пробиотиков в 134 и 337 дней
Б,%
ПЭ,%
С-Я,%
Л,%
М,%
134 дня
60,00±
0,15
40,60±
0,14
1,30±
0,16
94,40±
0,20
1,40±
0,18
1,00±
0,27
1,00±
0,27
46,00±
2,07
51,00±
2,00
1,00±
0,19
2
Биф.
76,00±
***
0,07
72,00±
***
0,17
28,80±
***
0,42
32,00±
***
1,61
1,30±
0,19
96,00±
1,64
1,80±
0,19
1,00±
0,18
1,00±
0,15
92,00±
*
1,14
1,40±
0,10
1,00±
0,25
1,00±
1,52
69,00±
***
1,84
67,00±
***
1,67
1,00±
0,12
1,60±
0,12
28,00±
***
2,12
30,00±
***
1,64
1,00±
0,27
2,00±
**
0,14
1,00±
0,15
6,00±
0,25
4,00±
***
0,25
1,00±
***
0,19
59,00±
1,10
52,00±
***
1,22
26,00±
***
1,52
31,00±
1,10
39,00±
***
1,92
71,00±
***
2,45
3,00±
0,21
3,00±
0,15
5
Род.
1,00±
0,25
337 дней
1
К
2
Биф.
5
Род.
72,00±
0,17
94,00±
***
0,12
72,00±
0,19
34,00±
1,41
18,20±
***
0,11
12,80±
***
0,20
1,40±
0,10
2,00±
***
0,14
1,50±
0,11
96,00±
1,64
69,0±
***
1,30
69,2±
***
0,21
1,50±
0,13
1,40±
0,18
1,40±
0,25
1,00±
***
0,12
17
1
К
18
Причем в 134 дня его значение было наибольшим и составило 53,8 г/л. Дача родафена активизировала жировой обмен. С возрастом родафен способствует увеличению количества альбуминов, глюкозы, общего билирубина, ALT и AST. В 134 дня количество общего билирубина в группе с родафеном находилось в пределах нормы
(3,65 мкмоль/л), при длительной применении пробиотика, наблюдалось его увеличение – 9,99 мкмоль/л (p<0,001). В 337дней показатели ALT и AST увеличились до 12,5
Ед/л и 74,5 Ед/л соответственно. Так как увеличение данных показателей было меньше, чем в пять раз, родафен не оказывал отрицательного воздействия на печень. Бифилакт к 337-у дню снижает общий белок на 2,3 %; повышает β-глобулины на 4,6 % и
глюкозу на 3,4 %. В 337дней показатели ALT и AST увеличились до 9,6 Ед/л и 74,5
Ед/л соответвсвенно. Наибольше значение альбуминов наблюдалось во 2-й группе с
бифилактом.
Морфологические исследования крови цыплят-бройлеров в опыте 4 в 39 суток
показали, что количество гемоглобина, эритроцитов во 2-й группе было больше на
20,0 г/л; 0,74×1012/л, чем в контрольной группе. В 3-й группе с 39 дней увеличивался
гемоглобин на 9,2 г/л, в сравнении с 1-й группой. Применение пробиотика способствует незначительному снижению количества тромбоцитов, цветного показателя. Таким образом, 3-я группа наилучшим образом влияла на морфологические показатели
крови и живую массу цыплят, поэтому с возрастом дозировку препарата следует увеличивать. Отрицательного воздействия родафена на морфологические показатели
крови не наблюдалось. В опыте 4 в сыворотке крови цыплят 2-й группы родафен увеличивал общий белок, альбумины, глюкозу, α-глобулины, нормализовал холестерин,
общий билирубин, ALT и AST; уменьшал β-глобулины. В 3-й группе происходило незначительное увеличение триглицеридов; общего билирубина, α-глобулинов; повышение общего белка, альбуминов, глюкозы, ALT и AST; нормализовал холестерин.
Количественное соотношение кальция и неорганического фосфора в крови находилось в пределах нормы. У цыплят 3-й группы в 39 дней содержание железа (Fe) достоверно увеличивалось (р≤0,05). Применение препаратов незначительно снижало количество каротина.
Активность целлюлозолитических ферментов содержимого кишечника цыплят в
опыте 4 в 11 суток во 2-й и 3-й группах увеличивалась на 1,7 % и на 2,2 %; в 39 - на
8,3 %; 2,1 %, чем в контроле. Амилолитическая активность у цыплят бройлеров 2-й
группы в 11 суток была ниже на 37,9 %, чем в контроле. С возрастом амилолитическая
активность ферментов во 2-й группе повысилась на 16,6 %, а в 3-й - на 1,4 %
В 11 и 39 дней наибольшая протеолитическая активность ферментов слепых отростков была с родафеном в 3-й группе на 2,42 и 1,73 мкМ тирозина/час, чем в контроле; во 11 и 39 дней во 2-й группе соответственно на 1,82 и 0,82 мкМ тирозина/час,
чем в 1-й группе. С возрастом происходило увеличение протеолитической активности
во всех группах.
19
В толстом кишечнике цыплят в 39 дней в группе с родафеном преобладали лактобактерии, энтерококки, бифидобактерии, бактероиды, сапрофитные стафилококки,
энтеробактерии Л-, клостридии, кандиды, энтеробактерии Л+ и соответственно им уксусная, пропионовая, масляная, валериановая, изовалериановая, изомасляная, капроновая кислоты.
2.4.4 Влияние пробиотика на продуктивные показатели
Пробиотики родафен и бифилакт во 2-й и 3-й группе у кур ускоряли начало яйцекладки на 7 дней. Яйценоскость в 3-й группе увеличилась на 2,39 %; выход дефективных яиц снизился на 2,7 % в 134 дня; на 9,1 % - в 337 дней. Бифилакт увеличивал
яйценоскость на 2,4 %; выход дефективных яиц снижал на 9,1 %. дня. С возрастом такая тенденция по группам сохранялась. (Таблица 9)
Таблица 9 - Яйценоскость и качество яиц после применения родафена
№
групы
134 дня
1
К
2
Бифилакт
3
Родафен
Яйценоскость,
шт
337 дней
%
Яйценоскость,
шт
%
%, дефективных
яиц
7,06 ± 0,52
8,00
74,60 ± 0,91
84,5
29,45
11,0 ±0,12
12,5
77,34 ± 0,80
87,6
15,80
9,45 ± 0,87
10,7
75,34 ± 0,68
85,3
20,37
В опыте 4 в результате исследования массы внутренних органов цыплятбройлеров в 39-и дневном возрасте установлено, что родафен во 2-й группе увеличивал массу мышечного желудка и печени на 1,8 и 0,5 г; массу поджелудочной железы
уменьшал на 0,08 г. В 3-й группе наблюдалось увеличение массы печени, массы внутреннего жира и массы кишечника на 9,12; 4,5 и 0,9 г соответственно.
В 39 суток в 3-й группе живая масса цыплят составила 2365 г, что на 347,5 г
больше, чем в контрольной группе и на 219 г, чем во 2-й группе.
2.7 Экономическая эффективность применения родафена в птицеводстве
Применение пробиотика родафен в опыте 3 на цыплятах способствовало повышению затрат на корма на 100 голов на 100 рублей; увеличению денежной выручки от
реализации мяса на 1143 рубля и экономического эффекта на рубль затрат на - 0,2
рубля. Использование родафена на курах в опыте 4 снижает затраты на препарат на
5044 рубля, за счет малой дозировки и небольшой стоимости – 6 рублей за 1 грамм,
чем с бифилактом. Родафен способствовал увеличению денежной выручки от реализации яиц на 80,4 тысячи рублей. Затраты на гидрогемол на 7644 рубля больше, чем с
родафеном, при увеличении денежной выручки на 123 тысячи рублей, чем в контроле.
20
4. ВЫВОДЫ
1. Установлено, что у молодняка кур в желудочно-кишечном тракте с возрастом
общее количество микроорганизмов в подвздошной кишке увеличивается в пределах
от 2,38 до 3,36 млрд/г, в слепых отростках – от 64,4 до 89,3 млрд/г. В 112 дней количество молочнокислых бактерий снижается на 124,0 млн/г по сравнению с 14-ю днями,
что приводит к росту бактерий группы кишечной палочки. В 28-56 дней лактатферментирующие бактерии уменьшаются. В возрасте 56 дней бактерии группы кишечной
палочки увеличиваются на 2,35 млн/г. Указанные изменения в количестве микрофлоры в возрастные периоды связаны с проведением плановых вакцинаций, стрессами,
изменением рациона кормления.
2. Пробиотик родафен, в состав которого входят штаммы Bacillus subtilis ВКПМ
2574 и Bacillus licheniformis ВКПМ Б-020, не оказывает токсического и раздражающего действия. В опытах при определении острой и хронической токсичности гибели
животных не наблюдалось. Препарат не оказывает негативного влияния на обменные
процессы, морфологические и биохимические показатели крови. Внутренние органы
лабораторных животных без признаков патологии. В кишечнике мышей увеличивается количество бифидобактерий, энтерококков.
3. Родафен (с дозировкой 1 г на 2000 голов в возрасте 1-4 суток и 2 г в возрасте
21-24 суток) у цыплят увеличивает в толстом отделе кишечника количество бифидобактерии до 1×105 КОЕ/г, лактозонегативных энтеробактерии – до 3×103 КОЕ/г, лактобактерии – до 1×106 КОЕ/г; преобладали ЛЖК пропионовая, уксусная, масляная.
Способствует увеличению целлюлозолитической и протеолитичекой активности ферментов химуса слепых отростков; количества общего белка в сыворотке крови, железа, гемоглобина, лимфоцитов, бактерицидной активности; нормализует содержание
альбуминов, α-, β-, γ-глобулинов, фосфора. Увеличивает массу сердца, мышечного
желудка, печени; повышает живую массу; сохранность поголовья на 12 %; денежную
выручку от реализации мяса и экономический эффект на рубль затрат.
4. Родафен у кур в кишечнике способствует увеличению общего количества
микроорганизмов, бифидобактерий, лактатферментирующих, молочнокислых бактерий; уменьшает содержание бактерий группы кишечной палочки; повышает фагоцитарную активность – на 13 %, общий белок – на 13 %; снижает количество тромбоцитов на 28 %, псевдоэозинофилов – на 5,0 %, сегментоядерных нейтрофилов– на 33,0
%, моноцитов – на 2 %. Ускоряет начало яйцекладки на 7 дней; увеличивает яйценоскость на 0,8 %, вес яйца и толщину скорлупы на 0,9 г и 0,06 мм; снижает количество
дефективных яиц на 9,1 %, затраты на препарат; увеличивает денежную выручку от
реализации яиц.
21
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
1. Рекомендуем применять пробиотик родафен цыплятам-бройлерам с кормом или
водой на 1-4-е сутки 1 г на 2000 голов и с 21 по 24-е сутки 2 г для нормализации кишечной микрофлоры; увеличения целлюлозолитическую и протеолитическую активности ферментов кишечника, бактерицидной активности сыворотки крови, гемоглобина, лимфоцитов; увеличения живой массы и сохранности поголовья.
2. Курам-несушкам применять со 100 дней в дозе 4 г на 2000 голов в течение 3-х
недель для нормализации микрофлоры, повышения иммунитета, яйценоскости, снижения выхода дефективных яиц.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ
ДИССЕРТАЦИИ
1.
Каблучеева, Т.И. Влияние препаратов «Гидрогемол», «Бифилакт», «Мидивет», «Гидрогемол+» на микробный биоценоз тонкого кишечника кур / Т.И. Каблучеева, Н.Г. Подлесная // Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики: материалы международной
научно-практической конференции / «Агрус». - Ставрополь, 2009. - С. 56-60.
2.
Каблучеева, Т.И. Влияние препаратов «Гидрогемол», «Бифилакт», «Мидивет», «Гидрогемол+» на микробный биоценоз толстого кишечника кур / Т.И. Каблучеева, Н.Г. Подлесная // там же, 2009. - С. 61-63.
3.
Каблучеева, Т.И. Влияние различных дозировок препарата «Родафен» на морфологические показатели крови цыплят-бройлеров в возрастной динамике / Т.И. Каблучеева, Н.Г.
Подлесная // Актуальные проблемы современной ветеринарии: материалы международной
научно-практической конференции, посв. 65-летию ветеринарии Кубани / Краснодар, 2011. –
Часть 1. - С. 47-49.
4.
Каблучеева, Т.И. Влияние препаратов «Бифилакт» «Гидрогемол+», на неспецифическую резистентность организма кур / Т.И. Каблучеева, Н.Г. Подлесная // Тр. /
КубГАУ. – 2011. – Вып. № 3 (30). – С. 195-199.
5.
Каблучеева, Т.И. Влияние препаратов «Гидрогемол», «Мидивет», на неспецифическую резистентность организма кур / Т.И. Каблучеева, Н.Г. Подлесная // Тр. /
КубГАУ. – 2011. – Вып. № 3 (30). – С. 217-221.
6.
Каблучеева, Т.И. Коррекция иммунного статуса цыплят-бройлеров препаратом
родафен / Т.И. Каблучеева, Н.Г. Амбулова // Ветеринария Кубани. - 2012. - № 5. - С. - 810.
7.
Каблучеева, Т.И. Эффективность использования пребиотического препарата Гидрогемол для повышения иммунитета и профилактики колибактериоза у цыплят-бройлеров / Т.И.
Каблучеева, Е.Д. Федосеева, Н.Г. Амбулова // 90 лет со дня Рождения доктора ветеринарных наук, профессора, участника ВОВ ГАРКАВИ БОРИСА ЛЬВОВИЧА: материал научной
студенческой конференции факультета ветеринарной медицины по итогам работы за 2011/12
г. Краснодар, 2013. – С. 168-172.
22
8.
Антипов, В.А. Воздействие пробиотического препарата бифилакт на биоценоз
пищеварительного тракта птиц / В.А. Антипов, Т.И, Каблучеева-Пашник, Т.В. Кушнир, Н.Г. Амбулова // Тр. / КубГАУ. – 2013. – Вып. № 6. – С. 176-178.
9. Каблучеева-Пашник, Т.И. Воздействие пробиотических препаратов бифилакт, ве
том, биокорм пионер на состов микрофлоры пищеварительного тракта птицы // Т.И.
Каблучеева-Пашник, Н.Г. Амбулова, И.Г. Позднякова / Тр. / КубГАУ. – 2013. – Вып. №
6. – С. 179-180.
10. Каблучеева-Пашник, Т.И. Эффективность использования пребиотического препарата гидрогемол для повышения иммунитета и профилактики колибактериоза у
цыплят-бройлеров // Т.И. Каблучеева-Пашник, Н.Г. Амбулова, Е.Д. Федосеева/ Тр. /
КубГАУ. – 2013. – Вып. № 6. – С. 181-182.
Список сокращений:
АЛТ - аланинаминотрансфераза
АСТ - аспартатаминотрансфераза
БАСК – бактерицидная активность сыворотки крови
ЛАСК – лизоцимная активность сыворотки крови
ЛЖК – летучие жирные кислоты
МПА – мясопептонный агар
МПА – мясопептонный бульон
КОЕ – колониеобразующие единицы
ФА – фагоцитарная активность нейтрофилов
ПП – процент переваривания нейтрофилов
ФЧ– фагоцитарное число
ФЕ – фагоцитарная емкость
ФИ – фагоцитарный индекс
СОЭ – скорость оседания эритроцитов
Тл – Т лимфоциты
Вл - В лимфоциты
Лабс. – абсолютное количество лимфоцитов
С-Я – сегментоядерные лимфоциты
Л – лимфоциты
М – моноциты
ЦП – цветной показатель
ПЭ – псевдоэозинофилы
Б – базофилы
Нв – гемоглобин
Тr- тромбоциты
Еr- эритроциты
L – лейкоциты
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт
КОЕ - колониеобразующие единицы
23
Подписано в печать 16.10.2013г.
бумага офсетная
Формат А5 60х84 1/16
Печать цифровая
Усл. печ. л. 1,0
тираж 100 экз.
Заказ № 1789
Типография «Световод»
350004, г. Краснодар ул. Калинина 134/2