ИНСТРУКЦИЯ

ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для количественного определения общего белка в сыворотке или плазме крови человека
биуретовым методом
«ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS»
Набор «ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS» разрешен к производству, продаже и применению на территории РФ.
Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/09371
Информация для заказа набора «ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS»
Кат. №
Комплектация
ОБЕЛ-018-100
ОБЕЛ-018-500
*v – объем фотометрической ячейки анализатора.
Р1 (100) мл +калибратор (1мл)
Р1 (500) мл + калибратор 2х(2,5мл)
Количество определений
100/v*
500/v
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS» предназначен для количественного определения содержания общего белка в сыворотке или плазме крови
человека биуретовым методом в клинико-диагностических лабораториях и научно-исследовательской практике для целей диагностики заболеваний и
контроля проводимого лечения пациентов.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
2.1.1. В щелочной среде белки образуют с раствором сульфата меди, содержащим тартрат (биуретовый реагент) комплекс фиолетовой окраски. [1,2].
2.1.2. Фотометрическое измерение основано на наличии пика поглощения с максимумом при длине волны 540 нм молекулами окрашенного комплекса.
Все остальные компоненты реакционной смеси слабо поглощают свет при этой длине волны. Таким образом, увеличение оптической плотности
реакционной смеси пропорционально увеличению интенсивности фиолетовой окраски и, следовательно, прямо пропорционально содержанию общего
белка в анализируемом образце.
2.2. Клиническая диагностика
2.2.1. Белки – макромолекулярные органические соединения, широко распространенные в организме. Концентрация общего белка в сыворотке зависит
главным образом от синтеза и распада двух основных белковых фракций – альбуминов и глобулинов. Физиологическая роль белков в организме
многогранна: они принимают участие в процессе свертывания крови; являются переносчиками ряда важных соединений (холестерина, билирубина,
лекарственных препаратов и т.д.); выполняют регулирующую функцию, входя в состав гормонов, ферментов и других биологически активных веществ;
играют важнейшую роль в иммунных процессах. При анализе концентрации общего белка в сыворотке различают нормальный, пониженный
(гипопротеимию) и повышенный (гиперпротеимию) уровень.
Гипопротеимия происходит вследствие длительного голодания или продолжительном соблюдении безбелковой диеты, при различных заболеваниях
почек, кровопотерях, сахарном диабете, новообразованиях.
Гиперпротеимия происходит вследствие деградации клеток организма при тяжелых травмах, обширных ожогах, при появлении в крови парапротеинов
– вырабатываемых при миеломной болезни, при болезни Вальденстрема. На этом основано клиническое значение анализа [2,3].
2.2.2. Клинический диагноз не может быть поставлен по результатам одного анализа, он должен объединять как клинические, так и лабораторные данные.
3. СОСТАВ НАБОРА
3.1. Набор реагентов «ОБЩИЙ БЕЛОК-UTS» поставляется в виде двух растворов: Реагента и калибратора.
Компоненты и их состав:
Наименование
Состав
Концентрация
Реагент
Калий-натрий тартрат
21 ммоль/л
Натрий йодид
100 ммоль/л
Калий йодид
6 ммоль/л
Меди сульфат (II)
6 ммоль/л
Натрия гидроксид
0,75 ммоль/л
Калибратор
Водный раствор бычьего
70 г/л (7,0 г/100мл)
сывороточного альбумина
4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
4.1. Набор обеспечивает линейную область определения концентрации общего белка в диапазоне 2,0 г/л (0,20 г/100 мл) до 120 г/л (12 г/100 мл),
отклонение от линейности не превышает 3%. Чувствительность – не более 2 г/л (0,2 г/100 мл), коэффициент вариации результатов определений – не
более 2,5%.
4.2. Качество набора можно оценивать по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам, аттестованным данным методом.
4.3. Нормальные величины концентрации общего белка составляют:
в сыворотке или плазме крови:
взрослые 66-87 г/л (6,6-8,7 г/100 мл);
новорожденные 53-89 г/л (5,3-8,9 г/100 мл).
4.4. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.
4.5. Перечень лекарственных препаратов, влияющих на определение содержания общего белка, приведены в обзоре [4].
5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
5.1. Потенциальный риск применения набора – класс 1.
5.2. Реагент и калибратор содержат химические вещества. Следует избегать попадания реагента на кожу и слизистые. В случае попадания их на кожу и
слизистые оболочки необходимо промыть поражённые участки большим количеством проточной воды.
53. При работе с набором необходимо соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического
режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).
5.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как
потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель вирусной
инфекции.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
6.1. Биохимический анализатор, спектрофотометр или фотометр, позволяющий проводить измерения оптической плотности раствора при длине волны 540
(520-560) нм и температуре 37±0,5 °С.
6.2. Кюветы или пробирки с длиной оптического пути 10 мм.
6.3. Секундомер (ТУ 25-1894-003-90).
6.4. Перчатки резиновые хирургические (ГОСТ 3-88).
6.5. Дозирующие устройства, позволяющие отбирать объёмы жидкости 20 мкл и 1 мл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов
пипетирования не более 1%.
6.6. Вода дистиллированная (ГОСТ 6709-72).
6.7. Физиологический раствор (NaCl, 9г/л).
7. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
7.1. Негемолизированная сыворотка или гепаринизированная плазма крови [1]. Сыворотку или плазму крови следует отделить от форменных элементов
крови как можно быстрее после забора крови. Образцы стабильны не более 3-х суток при 2 – 8 ОС, 6 месяцев при –20ОС[3].

8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Проведение ручного анализа с использованием фотометра или фотоэлектроколориметра.
8.1. Реагенты перед использованием довести до комнатной температуры.
8.2. Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице:
Объем, мкл
Холостая проба
Калибровочная проба
Реагент
Калибратор
Анализируемый
образец
1000
-
1000
20
-
Анализируемый
образец
1000
20
8.3. Пробы перемешать и инкубировать в течение 10 минут при 15 – 25 ОС или при +37 ОС.
8.4. Измерить оптическую плотность калибратора (Акал) и анализируемого образца (Аобр) при длине волны 540 (530-550) нм против холостой пробы.
Окраска стабильна в течение 30 минут.
8.5. Концентрацию общего белка в сыворотке или плазме крови человека в (г/л) определить по формуле:
С
где:
Аобр
Акал
 Cкал
С – концентрация общего белка, г/л;
Аобр - оптическая плотность анализируемого образца против холостой пробы, ед. опт. пл.;
Акал – оптическая плотность калибратора против холостой пробы, ед. опт. пл.;
Скал – концентрация общего белка в калибраторе, равная 70 г/л
8.6. Если результаты измерений превышают предел линейности, анализируемый образец следует развести физиологическим раствором (NaCl - 9 г/л) в 2
раза, провести повторные измерения и полученный результат определения умножить на 2.
 Для выполнения измерений на полуавтоматическом или автоматическом биохимическом анализаторах следует:
8.9. Установить программу определения содержания общего белка согласно таблице:
Наименование параметра
Значение
Метод измерения
Конечная точка
540 (520-560) нм
Длина волны, нм
Измерение против
дист. вода
Температура реакции
37 ОС
Единица измерения
г/л
Число знаков после запятой
1
Изменение оптической плотности
Увеличивается
Соотношение реагента/проба
50:1
Концентрация калибратора, г/л
70 г/л
Время реакции, мин
5 (37 ОС)
Верхний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.
0,2
Нижний предел абсорбции реагента против воды, ед. опт. плот.
0
Границы линейности, г/л
2,0 – 120,0
Минимум нормы, г/л
66*
Максимум нормы, г/л
87*
* Нормальные значения в сыворотке или плазме крови взрослого человека.
8.10. Если результат измерения содержания общего белка выше 120 г/л, следует разбавить образец физраствором (NaCl - 9 г/л) в 2 раза, повторно провести
измерение, полученный результат умножить на 2.
9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
9.1. Набор реагентов «ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS» должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2-8 ОС в течение всего срока
годности.
9.2. Срок годности набора указан на этикетке набора.
9.3. Калибратор и реагент после вскрытия флакона могут храниться при температуре +2–8 ОС в темном месте в течение всего срока годности.
9.4. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1.Koller A. Total serum protein. Kaplan A at al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto. Princeton 1984; 1316-1324 and 418
2. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
3. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Производится ООО «Эйлитон» по заказу ЗАО «А/О Юнимед».
По вопросам, касающимся качества набора «ОБЩИЙ БЕЛОК - UTS» следует обращаться в ЗАО «А/О ЮНИМЕД» по адресу: 129301, Москва, ул.
Касаткина, 3а; Тел. (495) 734-91-31,
8-800-333-91-31,
Факс: (495) 564-86-41;
E-mail: [email protected];
http://www.unimedao.ru