1 - Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный
реклама
На правах рукописи Шумилин Юрий Александрович ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ И ПРОФИЛАКТИКА ГЕПАТОЗА У ТЕЛЯТ, СОПРОВОЖДАЮЩЕГОСЯ МИОКАРДИОДИСТРОФИЕЙ 16.00.01 — диагностика болезней и терапия животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Воронеж 2007 Работа выполнена на кафедре терапии, клинической диагностики и радиобиологии ФГОУ ВПО «Воронежский государственный аграрный университет им. К.Д. Глинки» Научный руководитель: доктор ветеринарных наук Никулин Иван Алексеевич Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук Самотин Анатолий Митрофанович кандидат ветеринарных наук Прасолов Алексей Алексеевич Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Курская государственная сельскохозяйственная академия имени профессора И.И. Иванова» Защита состоится «24» мая 2007 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 006. 004. 01 при ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии по адресу: 394087, г. Воронеж, ул. Ломоносова, 114-б. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии. Автореферат разослан «_____» апреля 2007 г. Ученый секретарь диссертационного совета Ермакова Т.И. 2 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Гепатоз крупного рогатого скота является одной из сложных проблем, стоящих перед ветеринарной наукой и практикой. В большинстве случаев это заболевание имеет сложную этиологическую структуру и проявляется в форме тяжелых патологических процессов, приводящих к ухудшению воспроизводительной способности животных и качества производимой продукции, сокращению сроков производственного использования коров, снижению молочной продуктивности на 15-26%, уменьшению прироста живой массы на 10-15%, повышению затрат на проведение лечебнопрофилактических мероприятий. Решению данной проблемы за счет правильной и своевременной корректировки технологий и рационов, контроля за качеством кормов и содержанием животных, введения препаратов целенаправленного действия посвящены научные изыскания многих отечественных и зарубежных ученых (В.С.Постников, 1964-1990; Б.В.Уша, 1965-1999; Д.Я.Луцкий, 1969-1980; Н.И.Кузнецов, 1969-2004; А.В.Жаров, 1970-1990; С.М.Сулейманов, 1982; В.Н.Байматов, 1986-1990; И.Ф.Хазимухаметова, 1986-2001; А.М.Самотин 1987-2002; И.А.Никулин, 1991-2006; Ю.Н.Алехин, 1992-2001; E.Blaser, 1987; I.A.Acorda, H.Yamada, S.M.Glamasari, 1995; U.Johannsen, M.Schafer, A.Uhlig, 1988; J.Klein, J.Kucerova, 1998; A.Pechova, J.Inek, I.Pavlata, 2002). Вместе с тем, некоторые стороны патогенеза, диагностики и лечения гепатоза нуждаются в дальнейшем изучении, особенно во взаимосвязи с иммунным статусом, функциональным состоянием органов и систем организма животных, оставшихся без достаточного количества пластических и энергетических ресурсов, необходимых для нормальной работы. Цель и задачи исследований. Цель – усовершенствовать методику диагностики гепатоза и миокардиодистрофии у новорожденных телят и изучить лечебно-профилактическую эффективность пуриветина при данной патологии. Для достижения цели поставлены следующие задачи: 1. Изучить распространённость и этиопатогенетические факторы возникновения гепатоза у новорожденных телят. 2. Разработать иммунологические тесты для прижизненной диагностики гепатоза у крупного рогатого скота. 3. Выявить взаимосвязь между функциональным состоянием печени и сердца у телят при гепатозе и усовершенствовать методику диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят. 4. Выявить лечебную и профилактическую эффективность пуриветина при гепатозе телят и отработать оптимальную дозу. Научная новизна и теоретическая значимость. Определены иммунологические показатели крови у здоровых и больных гепатозом новорожденных телят симментальской породы. Разработан способ приготовления эритроцитарного диагностикума (патент на изобретение №2280867) для выявления уровня свободно циркулирующих в крови антител к тканям печени. 3 Изучены электрокардиографические показатели у здоровых и больных миокардиодистрофией телят и на этой основе предложен способ электрокардиографической диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят (патент на изобретение №2292840). Отработана оптимальная профилактическая и лечебная дозы комплексного препарата пуриветин при гепатозе новорожденных телят, осложненном миокардиодистрофией, и проведено его внедрение в клиническую практику. Практическая значимость работы. Расширено представление о патогенезе гепатоза у крупного рогатого скота. Установлены иммунологические тесты для диагностики гепатоза у сухостойных коров и новорожденных телят. Выявлены форма электрокардиографической кривой в сагиттальных отведениях и величина зубцов и интервалов электрокардиограммы здоровых телят и при миокардиодистрофии. Разработан способ диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят. Предложена схема применения пуриветина в комплексной терапии новорожденных телят при гепатозе сопровождающемся миокардиодистрофией. Апробация работы. Основные результаты работы доложены на Сибирском международном ветеринарном конгрессе «Актуальные вопросы ветеринарной медицины» (Новосибирск, 2005); межрегиональной научнопрактической конференции молодых ученых «Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки» (Воронеж, 2005); международной научнопрактической конференции, посвященной 75-летию УГАВМ «Актуальные проблемы ветеринарной медицины» (Троицк, 2005); международной научнопрактической конференции молодых ученых «Актуальные проблемы диагностики, терапии и профилактики болезней животных» (Воронеж, 2006); международной научно-производственной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А. «Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных» (Воронеж, 2006), а также ежегодных научно-практических конференциях профессорскопреподавательского состава Воронежского ГАУ (2004-2007г). Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 9 работ. Основные положения, выносимые на защиту: 1. Диагностические тесты для выявления гепатоза у крупного рогатого скота. 2. Функциональное состояние сердца при гепатозе телят. 3. Диагностика миокардиодистрофии у новорожденных телят. 4. Лечебная и профилактическая эффективность пуриветина при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 161 странице компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материала и методики исследований, результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 200 источников, в том числе 24 на иностранных языках и приложений. Работа иллюстрирована 24 таблицами и 39 рисунками. 4 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ Данная работа является частью исследований кафедры терапии, клинической диагностики и радиобиологии Воронежского ГАУ по теме №8 «Разработать и внедрить научно обоснованные экологически безопасные методы диагностики, лечения и профилактики массовых болезней животных в условиях ЦЧЗ». Госрегистрация №8.01.200.1.003994. Опытно-производственные и лабораторные исследования по решению поставленных в работе задач осуществляли в 2003-2006 г. в условиях СХА «Никольская» Таловского района Воронежской области и на Опытной станции ВГАУ. Лабораторные анализы проводились на базе кафедры терапии, клинической диагностики и радиобиологии ВГАУ, лаборатории Воронежской ОКБ. Гистологические исследования выполнены на базе НУЗ «Дорожная клиническая больница на ст. Воронеж-1 ОАО РЖД» совместно с заведующим патологоанатомическим отделением Лейбович Б.Е. Материалом для исследования послужили 180 телят с рождения и до месячного возраста и 50 коров симментальской породы. Были изучены клинический статус, морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови сухостойных коров при гепатозе и полученных от них телят 1-3 дневного возраста. С целью изучения лечебной эффективности пуриветина при гепатозе в СХА «Никольская» был проведен научно-производственный опыт на 40 новорожденных телятах. Больных животных распределили на 4 группы: контрольную и три опытные (n=10). Телята контрольной группы содержались на общехозяйственном рационе и получали лечение, принятое в хозяйстве: голодная диета с применением отваров лекарственных трав (зверобой, кора дуба), антибактериальные препараты (дитрим) и регидратационные средства (внутривенно раствор глюкозы). Животные 1, 2 и 3 опытных групп с 1-2 дня жизни, кроме лечения, принятого в хозяйстве, дополнительно к основному рациону, один раз в сутки в течение 20 дней получали пуриветин по схеме: первые 5 дней 80, 40 и 20 мг/кг, следующие 5 дней 60, 30 и 15 мг/кг и последние 10 дней 40, 20 и 10 мг/кг массы тела соответственно по группам. Пуриветин представляет собой сыпучий порошок светло-бежевого цвета. В его состав входят пурины (инозин), метилурацил, кобамамид (коферментная форма витамина В12), аскорбиновая кислота (витамин С), фруктозо-1,6-дифосфат кальция (ФДФ), лимонная кислота. Фармакологические свойства препарата определяются совокупностью свойств входящих в него компонентов. Изучение профилактической эффективности пуриветина проведено на 40 условно клинически здоровых новорожденных телятах, принадлежащих Опытной станции ВГАУ, из которых сформировали 4 группы: контрольную и три опытные (n=10). Животные контрольной группы выращивались по общепринятой схеме хозяйства. Телята опытных групп с 1-2 дня жизни дополнительно к основному рациону, один раз в сутки в течение 20 дней получали с кормом пуриветин в дозе 10, 20 и 40 мг/кг массы тела соответственно. 5 Производственное испытание пуриветина было проведено на 100 телятах. С профилактической целью новорожденным телятам (n=25) препарат назначали с 1 по 20 день жизни в оптимальной дозе — 20мг/кг массы тела. С лечебной целью пуриветин назначали новорожденным телятам (n=25) в оптимальной дозе по схеме: первые 5 дней 40мг/кг, следующие 5 дней 30 мк/кг и последние 10 дней 20мг/кг массы тела. Животные контрольных групп (n=50) выращивались по общепринятой схеме хозяйства. Во всех научно-производственных опытах за подопытными животными в период эксперимента было установлено клиническое наблюдение, в начале и конце опыта проводили взвешивание телят и брали пробы крови (n=4) для морфологических, биохимических и иммунологических исследований. Клинические исследования новорожденных телят проводили согласно общепринятому в ветеринарии плану (А.М. Смирнов, Л.Я. Конопелько, 1988). Пробы крови брали в начале и в конце опыта из яремной вены утром до кормления животных. В крови определяли СОЭ, содержание эритроцитов, гемоглобина и лейкоцитов по общепринятым методикам. В сыворотке крови коров и телят определяли: общий белок - рефрактометрически; общие иммуноглобулины - 18% раствором сульфата натрия; активность аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и γ-глютаминтранспептидазы (ГГТП) - с помощью реактивов фирмы «Лахема»; циркулирующие иммунные комплексы определяли по П.В. Барановскому и B.C. Данилишиной (1983); цинк-сульфатная осадочная печеночная проба проводилась по И.П. Кондрахину (2004). Концентрацию натрия и калия определяли с применением ионселективных электродов на электролитном анализаторе фирмы Kone. Для оценки Т- и В-систем иммунитета использовали метод розеткообразования, предложенный А. С. Закс, А. А. Быковой и Т. А. Юшковой (1986). Функциональное состояние миокарда у телят оценивали с помощью электрокардиографии. Электрокардиограмму регистрировали одноканальным электрокардиографом ЭК1Т – 03М2 по системе сагиттальных отведений М.П. Рощевского (1958) с записью трех биполярных туловищных отведений и усиленных отведений Гольдберга (aVR, aVL, aVF). В качестве электродов использовали зажимы типа «нахвостников». Для лучшего контакта кожу и шерсть на месте фиксации электродов смачивали 10% раствором хлорида натрия. После наложения электродов к ним подключали штепсель проводов электрокардиографа согласно маркировке. Мочу собирали при естественном мочеиспускании. В отобранных пробах определяли тест полосками DEKA PHAN LEUCO удельную плотность, рН, белок, глюкозу, кетоновые тела, уробилиноген, билирубин и клетки крови. Экспериментальные данные обработаны с использованием методов математической статистики, принятых в биологии и медицине (Г.Ф. Лакин, 1973; Е.В. Гульбер, 1978) с учётом рекомендаций Р.Х. Тукшаитова и И.Р. Багаутдинова (1998) и применением прикладной программы «Statistica 5.0». 6 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Этиопатогенетические факторы возникновения гепатоза и миокардиодистрофии у новорожденных телят При диспансеризации коров-матерей принадлежащих Опытной станции ВГАУ и СХА «Никольская» было отмечено, что они содержатся на несбалансированных рационах (с избытком сырого жира, сырой клетчатки, кальция при дефиците кормовых единиц, переваримого протеина, фосфора, микроэлементов) с нарушением структуры рациона. Допускается скармливание грубых кормов пораженных плесенью, силоса с повышенным содержанием масляной кислоты при отсутствии активного моциона. У 40% коров отмечено увеличение области печеночного притупления, значительное рассасывание последних хвостовых позвонков, снижение упитанности и частоты сокращений рубца, матовость и взъерошенность волосяного покрова, алопеции. При исследовании крови и сыворотки крови больных коров за 7-14 дней до отела содержание лейкоцитов и гемоглобина находилось в пределах оптимальных значений; снижено количество эритроцитов на 10,4-17,4%, Т-лимфоцитов на 14-18%; повышен уровень общего билирубина на 46-49%, общих иммуноглобулинов на 43-45%, ЦИК С3 на 48-55% и С4 19-28%, концентрация общего белка на 12-14%, активность АсАТ на 68-80%, АлАТ на 31-46%, ГГТП на 51-92%. Снижение коллоидной устойчивость белков сыворотки крови проявилось положительными коллоидно-осадочными пробами. Антитела к тканям печени зарегистрированы в титре 1:16 у 13-15%, 1:32 у 25-33%, 1:64 у 54-60% коров при гепатозе. При морфологическом исследовании печени отмечена жировая дистрофия гепатоцитов и формирующийся мелкоузловой монолобулярный цирроз печени, что полностью подтверждает клиническую картину. Таким образом, содержание глубокостельных коров на несбалансированных рационах приводит к нарушению обмена веществ, функции печени, что в дальнейшем отражается на развитии и здоровье приплода. 3.2. Клинико-морфологический, биохимический и иммунологический статус здоровых и больных гепатозом новорожденных телят У клинически здоровых новорожденных телят масса тела при рождении, появление устойчивой позы стояния, сосательного рефлекса, клинические показатели: температура тела, количество дыхательных движений, частота пульса находились в пределах общепринятых нормативов. В крови у физиологически зрелых новорожденных телят на 1-3 день после рождения содержалось эритроцитов 7,36±0,1∙1012/л, гемоглобина 109,5±1,8г/л, лейкоцитов 7,96±0,27∙109/л, лимфоцитов (4,03±0,14∙109/л), процентное содержание Т- и В-лимфоцитов соответственно 28,39±0,43% и 5,27±0,14%, и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов соответственно 1,15±0,05∙109/л и 0,21±0,01∙109/л, что соответствует границам оптимальных значений. В сыворотке крови здоровых новорожденных телят уровень общего белка составил 56,9±0,6г/л, общих иммуноглобулинов 16,59±0,35мг/мл, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 — 4,63±0,18Ед.Оп. и 7 С4 6,3±0,28Ед.Оп., активность АсАТ 138±7,38 нмоль/сл, АлАТ 179±8,98 нмоль/сл, титр антител к тканям печени равен 1:4 и 1:8 у 56% и 44% животных соответственно. Показатель цинк сульфатной пробы равен 1,84±0,03мл, количество натрия (Na+) и калия (К+) в плазме крови 144±1,58 и 4,5±0,17 мЭкв/л соответственно, что находится в рамках оптимальных значений. Количество общего билирубина и активность ГГТП на 9,3% и 79,4% соответственно выше общепринятых нормативов. Показатели клинического статуса, крови и сыворотки крови здоровых новорожденных телят взяты в данной работе в качестве критериев для оценки здоровья животных. У новорожденных телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени (остеодистрофия, гепатоз), сосательный рефлекс понижен или слабо выражен. Телята больше лежат, плохо опираются на конечности, движения неуверенные. На 1-3 день жизни у 100% животных развилась диарея. Фекалии разжиженные, кисловатого запаха, желто-серого цвета. Кожа сухая, эластичность ее снижалась, собранные складки с трудом расправляются. Волосяной покров тусклый, в большинстве случаев взъерошен, у некоторых телят отмечены алопеции. Подкожная жировая клетчатка слабо развита. Видимые слизистые оболочки у 60% гладкие, блестящие, преимущественно бледно-розовые, у 27,5% телят с цианотичным оттенком и у оставшихся 12,5% телят матово-красные. У 56% телят наблюдается ослабление сердечного толчка, у 41% болезненность печени при перкуссии и пальпации. В крови новорожденных телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, на 1-3 день после рождения (табл.3) установлено низкое количество эритроцитов (4,48±0,16∙1012/л), гемоглобина (97,8±1,3г/л) при повышенном уровне лейкоцитов (9,51±0,26∙109/л). В сыворотке крови зафиксировано повышение активности АсАТ (199±5,89нмоль/сл), АлАТ (216±6,81нмоль/сл), ГГТП (25,6±1,41мккат/л); уровня общих иммуноглобулинов (22,06±0,92мг/мл); титра антител к тканям печени: так, в титре 1:16 антитела выявлены у 43,7%, а в титре 1:32 у 56,3% животных, при повышенном содержании циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 (9,38±0,42Ед.Оп.) и С4 (10,51±0,31Ед.Оп.). В плазме крови телят отмечено снижение количества натрия (Na+) (116,3±1,85мЭкв/л) и калия (К+) (3,2±0,11мЭкв/л). Цинк сульфатная печеночная проба по Кондрахину положительна и составляет 1,48±0,02мл, что на 19,6% ниже условно здоровых телят. Процентное содержание Т-лимфоцитов (24,97±0,7%) снижено, а В-лимфоцитов (8,04±0,4%), напротив, повышено. Это отразилось и на абсолютном количестве Т-лимфоцитов (1,1±0,04∙109/л) и В-лимфоцитов (8,04±0,4∙109/л). Таким образом, новорожденные телята, полученные от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, при рождении имеют низкую массу тела; в крови у них низкое содержание эритроцитов, гемоглобина, высокий уровень общего билирубина, повышенная активность индикаторных ферментов. В иммунограмме увеличено количество общих 8 иммуноглобулинов, В-лимфоцитов, титр антител к тканям печени. В первые дни жизни у новорожденных телят отмечается диарея, протекающая со снижением упитанности, потерей эластичности кожи и алопециями, что свидетельствует о нарушении обмена веществ и функции печени в форме неонатальной гепатодистрофии, сопровождающейся развитием аутоиммунизации. 3.3. Функциональное состояние сердца клинически здоровых и больных гепатозом телят У здоровых новорожденных телят форма электрокардиографической кривой, зарегистрированная в сагиттальных отведениях, постоянна при изменении положения тела и передних конечностей, с характерным положительным предсердным зубцом Р (Р1 - 0,4±0,1; Р2 - 1,8±0,1; Р3 - 1,5±0,1), начальной желудочковой активностью в виде небольшого зубца r (r1 - 1,5±0,2; r2 - 3,3±0,5; r3 - 3,5±0,5) и глубокого зубца S (S1 - 1,8±0,4; S2 - 14,0±0,8; S3 - 14,3±0,7), а также положительного зубца Т (Т1 - 0,7±0,13; Т2 - 5,2±0,5; Т3 - 5,1±0,5) (таб.1). У клинически здоровых новорожденных телят зубец Р имеет характерную форму (рис.1). Восходящее колено зубца Р1 совпадает по времени с возбуждением левого предсердия. К моменту появления на ЭКГ выемки между зубцами Р1 и Р2 оказывается деполяризованной большая часть поверхности левого предсердия. Восходящее колено зубца Р2 соответствует времени окончания возбуждения правого предсердия. Нисходящее колено зубца Р2 соответствует времени окончания возбуждения левого предсердия. Систолический показатель (СП) у новорожденных телят составил 51±2%, частота серРис.1. ЭКГ здорового дечных сокращений (ЧСС) находилась в предетеленка (V=50мм/с, лах 145±10 ударов в минуту. У телят в возрасте 15-30 дней (табл.1) в 1mV=10мм; II отведение) сравнении с новорожденными отмечается увеличение амплитуды зубца Р1 в 2 раза (Р<0,05), зубца Т2 на 40% (Р<0,01). Таблица 1.Электрокардиографические показатели клинически здоровых телят Зубец Амплитуда зубцов в I, II и III отведениях в возрастном аспекте, мм (при контрольном возмущении напряжения в 1 mV равном 10мм) 1 — 14 дней 15-30 дней I II III I II III P 0,4±0,1 1,8±0,1 1,5±0,1 0,8±0,1 1,9±0,1 1,2±0,1 Q 1,5±0,3 — — 2,8±0,8 — — R 1,5±0,2 3,3±0,5 3,5±0,5 1,8±0,3 1,5±0,2 2,1±0,3 S 1,8±0,4 14±0,8 14,3±0,7 1,6±0,4 14,8±1,5 13,3±1,0 T 0,7±0,1 5,2±0,5 5,1±0,5 1,2±0,3 7,3±0,5 6,5±0,7 Продолжительность интервалов QRS, QT и RR в возрасте 15-30 дней отличается от таковой у новорожденных телят (табл.2). 9 Таблица 2.Продолжительность интервалов ЭКГ у клинически здоровых телят Длительность интервалов у телят разного возраста, с Интервал 1-14 дней 15-30 дней PQ 0.12±0.04 0,12±0,01 QRS 0.05±0.002 0,04±0,003 QT 0.22±0.01 0,24±0,02 RR 0.44±0.04 0,56±0,08 При анализе полученных электрокардиограмм у всех подопытных телят больных гепатозом, установлено наличие различных признаков, характерных для миокардиодистрофии, в связи, с чем мы приводим средние данные, характеризующие группу телят, имеющих сходную ассоциацию признаков ЭКГ. I отведение А I отведение Б II отведение А II отведение Б Рис. 2. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) У 10% телят зубец Р1 практически отсутствует, амплитуда Р2 снижена на 41%, Р3 на 29%. Вершина зубца Q1 расщеплена, амплитуда увеличена в 2,2 раза. Зубец R1 увеличен в 2 раза, а R2 напротив уменьшен в 3 раза. Зубец Т1 — отрицательный, Т3 увеличен на 37% по сравнению со здоровыми животными. Усиленные отведения подтверждают наличие дистрофических изменений в правой половине сердца. У 10% телят отмечается другой комплекс изменений, характерных для миокардиодистрофии. Зубец Р1 отсутствует, R1 увеличен в 2 раза, а его вершина раздвоена, R3 уменьшен в 3 раза. Во втором отведении зубец R отсутствует, а вместо него регистрируется комплекс QS амплитудой 17±0,8мм. Амплитуда зубца S3 увеличена на 26% (рис.2). Локализация патологического процесса в области правого желудочка и желудочковой перегородки отмечена у 22,5% животных, при этом на ЭКГ зубец R1 значительно раздвоен, R2 увеличен на 82% (рис.3). 10 I отведение А I отведение Б II отведение А II отведение Б Рис. 3. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) На ЭКГ 20% телят отсутствует зубец R1, а вместо него регистрируется комплекс QS1. Зубец Т1 отрицательный, амплитуда увеличена в 2 раза по сравнению с клинически здоровыми телятами, а Т2 двухфазный и суммарная амплитуда не превышает 2 мм, Т3 уменьшен на 61%. Такие изменения ЭКГ указывают на угнетение обменных процессов в миокарде. Раздвоение зубца R1, снижение амплитуды S2 на 21% указывает на дистрофические изменения в области предсердий и межжелудочковой перегородки и регистрируется у 12,5% больных телят (рис.4). Выраженные дистрофические изменения в области обоих желудочков и межжелудочковой перегородки отмечаются у 15% животных и проявляются глубоким зубцом Q2 и зубцом R2, который не поднимается выше изопотенциальной линии. Комплекс QRS расширен (до 0,06с) и деформирован, он приобретает W-образный вид (рис.5). При этом зубец Q1 увеличен в 2 раза, а в третьем отведении регистрируется комплекс QS3. I отведение А I отведение Б Рис. 4. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) 11 У 10% телят дистрофические изменения проявились W-образным комплексом QRS в первом отведении, увеличением амплитуды зубца Т2 в 2,3 раза и Т3 в 2,2 раза, при этом вершина зубца Т заостренная. У 20% телят миокардиодистрофия проявилась замедлением проведения импульса от синусового узла к предсердиям, переходящим в синоатриальную блокаду. II отведение А II отведение Б Рис. 5. ЭКГ теленка при миокардиодистрофии: А — до лечения, Б — после лечения (V=50мм/с, 1 mV=10мм) При анализе ЭКГ телят, больных гепатозом, выявлены отклонения в амплитуде зубцов P, Q, R, S, T в основных — I, II, III и усиленных — aVR, aVL, aVF отведениях, выражающиеся в увеличении или уменьшении амплитуды более чем на 25%, полярности или видоизменении формы, что указывает на наличие очагов дистрофии миокарда и нарушение внутрисердечной проводимости, которая всегда сопутствует миокардиодистрофии. 3.4. Морфологические изменения печени и сердца при гепатозе новорожденных телят С целью выяснения морфологических изменений в печени и сердце от трех телят был отобран материал для гистологического исследования. При микроскопическом исследовании печени видно, что в венах наблюдается застой крови и эритроциты скапливаются в синусоидных капиллярах. В центре долек вены и капилляры расширены, полнокровны, печеночные клетки атрофичны, пространства Диссе расширены. В условиях кислородного голодания, ведущего к жировой декомпозиции, печень теряет гликоген и инфильтрируется жиром, при этом в некоторых участках печени отмечаются диффузные мелкие (пылевидные) вакуоли на месте капелек жира. Ядра гепатоцитов теряют форму, иногда вакуолизируются, их граница нечетко выражена, видны небольшие группы клеток с кариопикнозом. Изредка встречаются клетки с нерезко выраженной белковой дистрофией, их цитоплазма зернистая, мелковакуолизирована. При микроскопическом исследовании сердца отмечается сочетание дистрофии (гидропической) с очажками лизиса кардиомиоцитов. Поврежденные участки миокарда чередуются с практически не измененными. В зоне ярко выраженной гидропической дистрофии кардиомиоциты увеличены в объеме, их цитоплазма заполнена вакуолями, содержащими прозрачную жидкость. Ядро смещается на периферию, иногда вакуолизируется 12 или сморщивается. Прогрессирование этих изменений приводит к распаду ультраструктур клетки и переполнению клетки водой. Клетка превращается в заполненный жидкостью баллон или огромную вакуоль, в которой плавает пузырьковидное ядро. Выражением сердечно-сосудистой недостаточности является общее венозное (застойное) полнокровие, при этом вены кровенаполнены, а артерии практически пусты. Длительно существующее венозное полнокровие ведет к дистрофии, а затем к атрофии и последующему лизису кардиомиоцитов. На начальных этапах это проявляется набуханием клеток, увеличением ядер, исчезновением поперечной исчерченности кардиомиоцитов. Таким образом, данные клинического и электрокардиографического обследования телят, полученных от коров-матерей с признаками нарушения обмена веществ и функции печени, результаты биохимического исследования крови свидетельствуют о нарушении обмена веществ, развивающейся дистрофии печени и сердечной мышцы, что полностью подтверждено морфологической картиной, которая характерна для миокардиодистрофии и гепатоза. 3.5. Изучение лечебной эффективности пуриветина при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией 3.5.1. Клинико-морфологические, биохимические и иммунологические показатели у телят при назначении пуриветина с лечебной целью За период научно-производственного опыта в контрольной группе пало 2 теленка, а у 63% оставшихся животных сохранилась матовость волосяного покрова и слабость сердечного толчка, диарея продолжалась 8-12 дней. К концу опыта в крови телят контрольной группы увеличилось количество электролитов крови: натрия на 7,7% и калия на 10,9% относительно фоновых показателей (Р<0,05); возросла активность АсАТ на 11,1% и содержание лейкоцитов на 17,8%, преимущественно за счет абсолютного количества лимфоцитов на 25,8% (Р<0,01). В популяции лимфоцитов возросло абсолютное количество Т- на 18,2% (1,3±0,03·109/л) и В-лимфоцитов на 61,1% (0,58±0,03·109/л). Количество ЦИК С4 составило 14,1±0,35 Ед.Оп., что на 34,2% выше фоновых значений (Р<0,001). Уровень общих иммуноглобулинов снизился на 22,8% (17,03±0,7) относительно фона (Р<0,001). Количество телят с титром антител к тканям печени 1:16 снизилось до 25%, однако с титром — 1:32 возросло до 75% (табл.3). Указанные изменения морфологических, биохимических и иммунологических показателей свидетельствуют о развитии гепатоза и аутоиммунных процессов. Назначение пуриветина телятам опытных групп обеспечило прекращение диареи на 4-6 день дачи препарата. К концу опыта волосяной покров у всех животных приобрел блеск, исчезла болезненность печени, слизистые оболочки стали матово-красные, сердечный толчок умеренной силы. Вместе с тем, из-за прогрессирования патологического процесса в третьей опытной группе один теленок пал. Среднесуточный прирост массы тела у телят в 1, 2, 3 опытных группах и контрольной группе составил 553, 511, 496 и 475 г соответственно. 13 Применение пуриветина благоприятно отразилось на состоянии эритропоэза, иммунологическом и биохимическом статусе. Наиболее статистически достоверные результаты выявлены в крови телят опытной группы 1 (табл.3). О нормализации эритропоэза говорит увеличение количества эритроцитов на 31,5% (до 6,18±0,21·1012/л) (Р<0,01), гемоглобина на 13,9% (до 109,3±3,5г/л) относительно одноименных показателей у животных контрольной группы (Р<0,05). На улучшение функционального состояния печени у телят получавших пуриветин указывает снижение количества общего билирубина на 28,3% (до 4,98±0,17мкмоль/л) (Р<0,05), активности индикаторных ферментов АсАТ на 21,7% (до 173±8нмоль/сл) (Р<0,01), АлАТ на 31,6% (до 143±7нмоль/сл) и ГГТП на 40,5% (до 13,8±0,46мккат/л) (Р<0,001) по сравнению с контрольной группой, что говорит о прекращении разрушения клеток (рис.7). Рис. 6 Уровень антител к тканям печени при назначения пуриветина с лечебной целью Показатель цинк сульфатной пробы увеличился на 17,2% (до 1,7±0,04мл) (Р<0,01), что также свидетельствует о благоприятном действии препарата пуриветин на функциональную деятельность печени. Под действием пуриветина нормализовались показатели электролитного обмена, что проявилось увеличением в крови ионов натрия на 17,1% (до 146,8±2,1мЭкв/л) (Р<0,01) и калия на 38,9% (до 4,93±0,1мЭкв/л) (Р<0,001). В иммунограмме произошло снижение ЦИК С3 на 22,3% (до 8±0,29Ед.Оп.) (Р<0,01), С4 на 38,1% (до 8,73±0,29Ед.Оп.) и общих иммуноглобулинов на 52,8% (до 8,03±0,69мг/мл) (Р<0,001) относительно контрольной группы. Содержание лейкоцитов уменьшилось на 31,4% (до 7,68±0,28·109/л) (Р<0,001), при этом абсолютное количество лимфоцитов снизилось на 38,7% (до 3,44±0,28·109/л) (Р<0,01). Изменилось и процентное содержание лимфоцитов в строну увеличения Т-лимфоцитов до 28,9±0,65% (Р<0,01) и уменьшения В-лимфоцитов до 6,45±0,46% (Р<0,001). Снизился и уровень аутоиммунизации к тканям печени, которые зарегистрированы в титре 1:8 у 25%, а в титре 1:16 у 75% телят (рис.6). 14 Таблица 3. Морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови телят больных гепатозом, при назначении пуриветина Группы телят Показатели фон (n=16) Лейкоциты, 109/л 9,51±0,26 9 Т-лимфоциты, 10 /л 1,1±0,04 В-лимфоциты, 109/л 0,36±0,03 Эритроциты, 1012/л 4,48±0,16 Гемоглобин, г/л 97,8±1,3 Билирубин общ., 6,88±0,23 мкмоль/л АсАТ, нмоль/сл 199±5,89 АлАТ, нмоль/сл 216±6,81 ГГТП, мккат/л 25,6±1,41 Цинк сульфатная 1,48±0,02 проба, мл Натрий (Na+) мЭкв/л 116,3±1,9 Калий (К+) мЭкв/л 3,2±0,11 Общие иммуноглобу22,06±0,92 лины, мг/мл С3, Ед.Оп. 9,38±0,42 ЦИК С4, Ед.Оп. 10,51±0,31 Титр антител 1:16 у 44% к тканям печени 1:32 у 56% контроль опытная 1 % к кон- опытная 2 % к кон% к фону (n=4) (n=4) (n=4) тролю тролю %к опытная 3 контро(n=4) лю 11,2±0,49 1,3±0,03 0,58±0,03 4,7±0,15 96,0±3,9 +17,8** +18,2*** +61,1*** +4,9 -1,8 7,68±0,28 1,0±0,1 0,22±0,02 6,18±0,21 109,3±3,5 -31*** -23,0* -62,1*** +31,5** +13,9* 9,1±0,45 1,17±0,06 0,32±0,02 5,5±0,42 103,8±3,2 -18,8* -10,0 -44,8*** +17 +8,1 10,6±0,43 1,34±0,04 0,47±0,01 5,1±0,16 98,3±3,7 -5,4 +3,1 -19,0* +8,5 +2,4 6,95±0,58 +1,1 4,98±0,17 -28,3* 5,43±0,22 -21,9* 6,13±0,37 -11,8 221±7 209±5 23,2±0,46 +11,1** -3,2 -9,4 173±8 143±7 13,8±0,46 -21,7** -31,6*** -40,5*** 190±8 175±5 16,6±0,51 -14* -16,3** -28,4*** 209±8 198±9 19,1±0,56 -5,4 -5,3 -17,7** 1,45±0,02 -2 1,7±0,04 +17,2** 1,71±0,03 +17,9*** 1,68±0,03 +15,9*** 125,3±3,54 3,55±0,1 +7,7* +10,9* 146,8±2,1 4,93±0,1 +17,1** +38,9*** 138,4±2,63 4,38±0,21 +10,5* +23,4* 130±2,38 3,9±0,13 +3,8 +9,9 17,03±0,7 -22,8*** 8,03±0,69 -52,8*** 9,88±0,57 -42,0*** 14,8±0,64 -13,1 10,3±0,43 14,1±0,35 +9,8 34,2*** 8,0±0,29 8,73±0,29 -22,3** -38,1*** -17,7** -30,9*** 9,25±0,32 10,6±0,54 -10,2 -24,8** 1:16 у 25% 1:32 у 75% - 8,48±0,19 9,75±0,34 1:16 у 100% 1:8 у 25% 1:16 у 75% Примечание: *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001 15 - - 1:16 у 75% 1:32 у 25% - Рис. 7 Уровень индикаторных ферментов при назначения пуриветина с лечебной целью Таким образом, применение пуриветина при гепатозе телят, сопровождающемся миокардиодистрофией, обеспечивает нормализацию эритропоэза, пигментного обмена, иммунологического и биохимического статуса, что ведет к сокращению периода болезни, увеличению сохранности новорожденных телят и повышению темпов их роста. 3.5.2. Влияние пуриветина на функциональное состояние сердца у телят при гепатозе К концу периода наблюдения у телят контрольных групп существенных изменений на ЭКГ по сравнению с началом опыта не отмечено. В опытных группах произошли позитивные изменения в функциональном состоянии миокарда, что отразилось на улучшении электрокардиографических показателей. Наиболее существенные изменения ЭКГ, свидетельствующие об улучшении состояния миокарда, зарегистрированы у телят 1 опытной группы. У телят с дистрофическими изменениями в правой половине сердца под действием пуриветина зубец Р1 стал положительным, амплитуда Р2 увеличилась в 2 раза. Зубец R1 снизился и достиг нормы, а R2 напротив увеличился в 2 раза. Т1 — стал положительным. У телят с комплексом изменений, характерных для миокардиодистрофии, в котором отсутствует зубец Р1, зубец R1 увеличен в 2 раза, а его вершина раздвоена, R3 уменьшен в 3 раза, к концу опыта произошло появление зубца Р1, R1 снизился и раздвоенность вершины практически исчезла, амплитуда R3 возросла в три раза и достигла оптимальной величины (рис.2). Во втором отведении вместо комплекса QS появляется зубец R2 нормальной амплитуды и S2 амплитудой 14±0,9мм. Амплитуда зубца S3 также снижается до 14мм. При локализации патологического процесса в области правого желудочка и межжелудочковой перегородки у телят получавших пуриветин на ЭКГ исчезает раздвоение зубца R1, амплитуда R2 снижается и достигает нормальной величины (рис.3). 16 На электрокардиограмме телят с отсутствуем зубца R1 и наличием вместо него комплекса QS, отрицательным зубцом Т1 и двухфазным Т2 под действием пуриветина появился R1; Т1 стал положительным, а Т2 однофазным. Такие изменения ЭКГ указывают на нормализацию обменных процессов в миокарде в целом, а в правой половине сердца в особенности. При дистрофических изменениях в области предсердий и межжелудочковой перегородки раздвоение зубца R1 исчезает, амплитуда Т1 увеличивается в 2 раза, S2 на 20% (рис.4). Выраженные дистрофические изменения в области обоих желудочков и межжелудочковой перегородки, проявляющиеся комплексом QRS Wобразного вида (рис.5), после назначения пуриветина исчезают. При этом зубец Q2 исчезает и появляется R2. У телят с дистрофическими изменениями миокарда, проявившиеся Wобразным комплексом QRS в первом отведении, увеличением амплитуды зубца Т2 в 2,3 раза, Т3 в 2,2 раза и с вершиной зубца Т готической формы, вид ЭКГ изменяется: в первом отведении регистрируется комплекс QRS нормальной амплитуды, величина Т2 и Т3 снижается на 42 и 45% соответственно. Синоатриальная блокада после назначения пуриветина не регистрируется. Значительные дистрофические изменения в предсердиях, приводящие к изменению полярности зубца Р1 и Т1, увеличению R1 в 5 раз, R2 в 2,1 раза, R3 в 2 раза на фоне снижения S2 на 43%, исчезают после применения препарата. Зубцы Р1 и Т1 восстанавливают свою полярность, R1 уменьшается в 5 раз, R2 в 1,5 раза, R3 в 2 раза на фоне увеличения S2 на 51%. Амплитуда зубца Т3 снизилась на 46% и его форма становится пологой. Таким образом, пуриветин влияет на обменные процессы в миокарде и улучшает функциональную активность проводящей системы. Результатом такого действия является нормализация трофики миокарда, улучшение качества сердечных сокращений – их силы и ритма, что и отражается на ЭКГ. 3.6. Изучение профилактической эффективности пуриветина Все подопытные телята в течение научно-производственного опыта были клинически здоровы. В крови подопытных телят (n=16) в начале наблюдения содержание лейкоцитов (7,96±0,27·109/л), в том числе лимфоцитов (51,1±1,62%), а также эритроцитов (7,36±0,1·1012/л), гемоглобина (109,5±1,8г/л), общего белка (56,9±0,6г/л), общих иммуноглобулинов (16,7±0,35мг/мл), натрия (144±1,58мЭкв/л), калия (4,5±0,17мЭкв/л), активность АсАТ (138±7,38 нмоль/сл), АлАТ (179±8,98нмоль/сл) и показатель цинк сульфатной пробы (4,5±0,17мл) находились в пределах оптимальных значений (табл.4). При этом отмечено увеличение общего билирубина на 9,4%, активности ГГТП на 79,5%. Количество ЦИК С3 и С4 составило 4,63±0,18 и 6,3±0,28Ед.Оп. соответственно, а титр антител к тканям печени 1:4 зафиксирован у 56% и 1:8 у 44% телят. Среднесуточный прирост массы тела за период наблюдения у телят контрольной группы составил 640 г, у телят опытных групп 681, 714, 724 г соответственно, что на 106,4, 111,6 и 113,1% выше, чем у телят контрольной группы. 17 Таблица 4. Морфологические, биохимические и иммунологические показатели крови здоровых телят, при назначении пуриветина Группы телят Показатели фон (n=16) контроль (n=5) %к фону Лейкоциты, 109/л Т-лимфоциты, 109/л В-лимфоциты, 109/л Эритроциты, 1012/л Гемоглобин, г/л Билирубин общ., мкмоль/л АсАТ, нмоль/сл АлАТ, нмоль/сл ГГТП, мккат/л Цинк сульфатная проба, мл Натрий (Na+) мЭкв/л Калий (К+) мЭкв/л Общие иммуноглобулины, мг/мл С3, Ед.Оп. ЦИК С4, Ед.Оп. Титр антител к тканям печени 7,96±0,27 1,15±0,05 0,21±0,01 7,36±0,1 109,5±1,8 8,83±0,64 1,5±0,17 0,61±0,08 6,0±0,53 90,5±4,1 +10,9 +30,4 +190*** -18,5* -17,4*** 8,48±0,7 1,58±0,19 0,46±0,05 7,33±0,25 105±3,5 -4 +5,3 -24,6 +22,2* +16* 8,15±0,43 1,72±0,13 0,49±0,04 7,28±0,4 108,5±5,1 -7,7 +14,7 -19,7 21,3 +19,9* 8,28±0,53 1,73±0,1 0,46±0,02 7,48±0,45 110,3±1,7 -6,2 +15,3 -24,6 +24,7 +21,9*** 5,25±0,4 5,75±0,39 +9,5 4,05±0,21 -29,6** 3,73±0,24 -35** 3,55±0,28 -38,3** 138±7,38 179±8,98 14±1,33 203±24 217±15 17,3±0,46 +47* +21,2* +23,6* 136±17 152±16 16,1±0,73 -33 -30* -6,9 124±7 161±7 14,3±0,36 -38,9* -25,5* -17,3** 145±6 173±8 13,9±0,46 -28,6 -20,3* -19,7** 1,84±0,03 1,55±0,03 -15,8*** 1,68±0,05 +8,4 1,85±0,05 +19,4** 1,7±0,04 +9,6* 144±1,58 4,5±0,17 132,5±3,2 3,8±0,1 -8** -15,6** 141,5±2 4,6±0,3 +6,8 +21,1* 142,0±1,5 4,6±0,2 +7,2* +21,1* 146,0±1,5 4,8±0,2 +10,2** +26,3** 16,7±0,35 9,75±0,36 -41,6*** 8,18±0,61 -16,1 8,05±0,5 -17,4* 7,98±0,36 -18,2* 4,63±0,18 6,3±0,28 1:4 у 56% 1:8 у 44% 5,55±0,23 7,18±0,37 1:8 у 75% 1:16 у 25% +19,9** +13,9* 5,03±0,29 6,75±0,21 1:4 у 50% 1:8 у 50% -9,4 -6 5,2±0,35 7,05±0,1 1:4 у 50% 1:8 у 50% -6,3 -1,8 4,98±0,48 6,8±0,23 1:4 у 75% 1:8 у 25% -10,3 -5,3 - опытная 1 % к кон- опытная 2 % к кон- опытная 3 % к кон(n=7) тролю (n=7) тролю (n=7) тролю Примечание: *Р<0,05, **Р<0,01, ***Р<0,001 18 - - - На 20 день опыта в крови телят контрольной группы установлено снижение содержания общего белка (48±2,2г/л) на 15,6% (Р<0,01), эритроцитов (6,0±0,53·1012/л) на 18,5% (Р<0,05), гемоглобина (90,5±4,1г/л) на 17,4%, показателя цинк-сульфатной пробы (1,55±0,03мл) на 15,8%% (Р<0,001), общих иммуноглобулинов (9,75±0,36мг/мл) на 41,6% (Р<0,001), количества натрия и калия на 8 и 15,6% соответственно (Р<0,01). Отмечено увеличение активности АсАТ на 47%, АлАТ на 21,2% и ГГТП 23,6% (Р<0,05); количества В-лимфоцитов (0,61±0,08·109/л) в 1,9 раза (Р<0,001); уровня ЦИК С3 (5,55±0,23Ед.Оп.) на 19,9% (Р<0,01), а С4 (7,18±0,37Ед.Оп.) на 13,9% (Р<0,05). Титр антител к тканям печени 1:8 зарегистрирован у 75%, а 1:16 — у 25% телят контрольной группы. Применение пуриветина благоприятно отразилось на состоянии эритропоэза, белковом и пигментном обмене. Наиболее выраженные изменения отмечаются в крови телят опытной группы 3, что проявилось повышением содержания эритроцитов (7,48±0,45·1012/л) на 25%, гемоглобина (110,3±1,7г/л) на 21,9% (Р<0,001), общего белка на 21,5% (Р<0,05), показателя цинк сульфатной пробы (1,7±0,04мл) на 9,6% (Р<0,05), снижением уровня общего билирубина (3,55±0,28мкмоль/л) на 38,3% (Р<0,01), активности АсАТ (145±6нмоль/сл) на 28,6%, АлАТ (173±8нмоль/сл) на 9% (Р<0,05) и ГГТП (13,9±0,46мккат/л) на 19,7% (Р<0,01). Под действием пуриветина изменился состав лимфоцитов в сторону увеличения количества Т-лимфоцитов до 35,78±1,45% и уменьшения Влимфоцитов до 9,5±0,5%, а также снизилось количество общих иммуноглобулинов (7,98±0,36мг/мл) на 18,2% (Р<0,05). Увеличение в крови натрия (146,0±1,5мЭкв/л) и калия (4,8±0,2мЭкв/л) на 10,2 и 26,3% соответственно свидетельствует об улучшении электролитного состава крови. Титр антител к тканям печени составил 1:4 и 1:8 у 75 и 25% телят соответственно, что указывает на снижение аутоиммунизации при применении пуриветина с профилактической целью. Таким образом, применение пуриветина в первые 20 дней жизни стимулирует кроветворение, показатели клеточного и гуморального иммунитета, а также снижает уровень аутоиммунизации к тканям печени, что обеспечивает профилактику гепатоза и повышение темпов прироста живой массы тела до 13,1%. 3.7. Результаты производственной апробации препарата пуриветин Производственное испытание пуриветина было проведено в СХА «Никольская» Таловского района Воронежской области. Пуриветин назначали здоровым новорожденным телятам с профилактической целью в оптимальной дозе — 20мг/кг массы тела. Новорожденные телята (n=50) были распределены на 2 группы: контрольная и опытная. Животные контрольной группы выращивались по общепринятой схеме хозяйства. Телята опытной группы дополнительно получали пуриветин с 1 по 20 день жизни с молозивом, а затем и с молоком. 19 Назначение пуриветина новорожденным телятам с профилактической целью обеспечило (табл.5) снижение заболеваемости их гепатозом и миокардиодистрофией на 75%, сокращение продолжительности и тяжести течения болезни и увеличение среднесуточного прироста массы тела на 12%. Таблица 5. Показатели продуктивности и клиническое состояние новорожденных телят при назначении пуриветина С профилактической С лечебной целью целью Показатели контроль опыт контроль опыт Количество животных в группе 25 25 25 25 Средняя масса в начале опыта 29,6±1,3 28,2±1,9 30,0±2,0 29,1±1,7 тела, кг в конце опыта 46,4±2,5 47±2,0 46,5±1,8 48,3±1,2 Количество животных с диа7 2 25 25 рейным синдромом Продолжительность болезни, 9-12 4-6 10-12 4-7 дней Количество павших животных 3 Период наблюдения, дней 30 30 30 30 Среднесуточный прирост 560±31 627±12 462±17 523±27 массы тела, кг Продолжительность назначения 20 20 препарата, дней Количество живот- в начале 25 25 ных с признаками опыта миокардиодистро- в конце 8 2 22 5 фии опыта С лечебной целью пуриветин назначали больным новорожденным телятам в оптимальной дозе по схеме: первые 5 дней 40мг/кг, следующие 5 дней 30 мк/кг и последние 10 дней 20мг/кг массы тела. Применение пуриветина новорожденным телятам с лечебной целью обеспечило (табл.5) снижение заболеваемости миокардиодистрофией на 77%, сокращение продолжительности и снижение тяжести течения болезни, увеличение среднесуточного прироста массы тела на 13%, а также повышение сохранности молодняка. Таким образом, результаты производственных испытаний подтверждают экспериментальные данные о положительном влиянии пуриветина на функцию печени и миокарда, а также интенсивность роста у новорожденных телят. 20 3. ВЫВОДЫ 1. В обследованных типичных хозяйствах Воронежской области у 30-56% новорожденных телят отмечается гепатоз, как следствие нарушения обмена веществ и функции печени у коров-матерей. 2. Гепатоз у новорожденных телят клинически проявляется низкой массой тела при рождении у 45% животных, диареей в первые дни жизни у 100%, отставанием в росте и развитии, взъерошенностью и матовостью волосяного покрова у 72%, алопециями у 21%, анемичностью кожи и слизистых оболочек у 60%, болезненностью печени при пальпации и перкуссии у 41% животных. 3. В крови здоровых новорожденных телят содержится эритроцитов 7,36±0,1∙1012/л, гемоглобина 109,5±1,8г/л, лейкоцитов 7,96±0,27∙10 9/л, лимфоцитов 4,03±0,14∙109/л, процентное содержание Т- и В-лимфоцитов соответственно 28,39±0,43% и 5,27±0,14%, и абсолютное количество Т- и Влимфоцитов соответственно 1,15±0,05∙109/л и 0,21±0,01∙109/л, уровень общего белка 56,9±0,6г/л, общего билирубина 5,25±0,4мкмоль/л, общих иммуноглобулинов 16,59±0,35мг/мл, циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) С3 4,63±0,18Ед.Оп и С4 6,3±0,28Ед.Оп., активность АсАТ 138±7,38 нмоль/сл, АлАТ 179±8,98 нмоль/сл. Показатель цинк сульфатной пробы равен 1,84±0,03мл, количество натрия (Na+) и калия (К+) 144±1,58 и 4,5±0,17 мЭкв/л. Титр антител к тканям печени выявлен в разведении 1:4 или 1:8. 4. При гепатозе новорожденных телят повышается активность АсАТ до 199±5,89 нмоль/сл, АлАТ до 216±6,81 нмоль/сл; снижается уровень натрия (Na+) до 116,3±1,85 мЭкв/л и калия (К+) до 3,2±0,11 мЭкв/л, содержание эритроцитов до 4,48±0,16∙1012/л, гемоглобина до 97,8±1,3 г/л; выявляется положительная цинк сульфатная печеночная проба 1,48±0,02 мл. 5. При гепатозе телят отмечается усиление аутоиммунных процессов, о чем свидетельствует наличие в крови антител к тканям печени в разведении 1:16 и 1:32 соответственно в 43,7% и 56,3% случаев; увеличение циркулирующих иммунных комплексов С3 до 9,38±0,42Ед.Оп. и С4 до 10,51±0,31Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 22,06±0,92мг/мл при снижении абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов соответственно до 24,97±0,7% и 1,1±0,04∙109/л и В-лимфоцитов соответственно до 8,04±0,4% и 0,36±0,03∙109/л. 6. В печени больных гепатозом телят при микроскопическом исследовании выявлено венозное полнокровие, скопление эритроцитов в синусоидных капиллярах, в гепатоцитах – диффузные мелкие вакуоли на месте капелек жира, в отдельных случаях нерезко выраженная белковая дистрофия. 7. Гепатоз новорожденных телят в 100% случаев сопровождается миокардиодистрофией о чем свидетельствуют показатели электрокардиограммы в сагиттальных отведениях, характеризующиеся увеличением или уменьшением более чем на 25% амплитуды зубцов P, Q, R, S, T, в основных — I, II, III и усиленных - aVR, aVL, aVF отведениях, изменением полярности или формы 8. У здоровых новорожденных телят форма электрокардиограммы, зарегистрированная в сагиттальных отведениях, постоянна при изменении положения тела и передних конечностей, с характерным положительным пред21 сердным зубцом Р (Р1 - 0,4±0,1; Р2 - 1,8±0,1; Р3 - 1,5±0,1), начальной желудочковой активностью в виде небольшого зубца r (r1 - 1,5±0,2; r2 - 3,3±0,5; r3 3,5±0,5) и глубокого зубца S (S1 - 1,8±0,4; S2 - 14,0±0,8; S3 - 14,3±0,7), а также положительного зубца Т (Т1 - 0,7±0,13; Т2 - 5,2±0,5; Т3 - 5,1±0,5). 9. Морфологические изменения сердца у телят при миокардиодистрофии характеризуются сочетанием гидропической дистрофии с очажками лизиса кардиомиоцитов, длительно существующим венозным полнокровием. 10. Применение препарата пуриветин новорожденным телятам при гепатозе и миокардиодистрофии улучшает проводимость миокарда, повышает сохранность животных до 100% и прирост массы тела на 7,6%, нормализует гематологический (увеличение количества эритроцитов до 6,18±0,21·1012/л, гемоглобина до 109,3±3,5г/л), биохимический (снижение общего билирубина до 4,98±0,17мкмоль/л, активности АсАТ до 173±8нмоль/сл и АлАТ до 143±7нмоль/сл) и иммунологический статус телят (понижение титров антител к тканям печени до 1:8 у 25% и 1:16 у 75% телят, увеличение Т-лимфоцитов до 28,9±0,65% и уменьшение В-лимфоцитов до 6,45±0,46%, при снижении ЦИК С3 до 8±0,29Ед.Оп. и С4 до 8,73±0,29Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 8,03±0,69мг/мл). 11. Назначение пуриветина клинически здоровым новорожденным телятам в первые 20 дней жизни в дозе 20мг/кг массы тела профилактирует нарушение метаболических функций печени, способствует повышению неспецифической резистентности организма и среднесуточного прироста на 11,6%. 12. Экономическая эффективность при применении пуриветина с лечебной целью составляет 36 руб., а с профилактической 10,1руб. на 1 руб. затрат. 4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 1. В качестве диагностических критериев гепатоза новорожденных телят считать установление антител к тканям печени в титре 1:32, увеличение циркулирующих иммунных комплексов С3 до 9,38±0,42Ед.Оп. и С4 до 10,51±0,31Ед.Оп., общих иммуноглобулинов до 22,06±0,92мг/мл при снижении абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов соответственно до 24,97±0,7% и 1,1±0,04∙109/л и В-лимфоцитов соответственно до 8,04±0,4% и 0,36±0,03∙109/л. 2. При гепатозе для коррекции функции печени и сердца новорожденным телятам применять пуриветин по схеме: первые 5 дней — 40мг/кг, 5 дней — 30мг/кг и последние 10 дней — 20мг/кг. 3. Для профилактики гепатоза и миокардиодистрофии, а также для стимулирования роста животных рекомендуется назначать пуриветин клинически здоровым новорожденным телятам в первые 20 дней жизни в дозе 20мг/кг массы тела. 4. Приведенные в работе нормативы ЭКГ (таблица 1, 2) рекомендуются в качестве диагностических тестов при оценке функционального состояния сердечно-сосудистой системы и диагностики нарушений функции миокарда у телят. Обнаружение признаков электрической нестабильности миокарда у новорожденных телят должно рассматриваться как показание для назначения кардиопротекторной и метаболической терапии. 22 5. СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ 1. Никулин И.А. Взаимосвязь уровня аутоиммунизации с иммунологическим статусом коров при гепатозе / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, М.Ю. Нижегородов // Актуальные проблемы ветеринарной медицины // Матер. междунар. науч.-практ. конф. посвящ. 75-летию УГАВМ: Сб. науч. тр. — Троицк: УГАВМ, 2005 — С.93-95. 2. Никулин И.А. Клинико-иммунологический статус коров при гепатозе / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, М.Ю. Нижегородов // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: Матер. Сиб. Междунар. вет. конгр. / Новосиб. гос. аграр. ун-т. — Новосибирск, 2005. — С.324-325. 3. Никулин И.А. Применение пуриветина для лечения гепатоза новорожденных телят / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин // Ветеринарный врач, — №1. — 2007. — С.37-39. 4. Никулин И.А. Сопоставление электрокардиограммы и морфологии сердца при миокардиодистрофии у телят / И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, К.О. Зернов // Актуальные проблемы ветеринарной патологии и морфологии животных. Междунар. науч.-производ. конф., посвящ. 100-летию со дня рождения профессора Авророва А.А. — Воронеж: Научная книга, 2006. — С.172176. 5. Паршин П.А. Сравнительная оценка способов записи электрокардиограмм у телят / П.А. Паршин, И.А. Никулин, Ю.А. Шумилин, В.И. Паршина // Ветеринарная патология, — №1(20). — 2007. — С.59-61. 6. Патент №2280867 Российская Федерация, МПК G01N 33/49, G01N 33/556. Способ приготовления эритроцитарного диагностикума для определения антител к тканям печени / Никулин И.А., Шумилин Ю.А.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО ВГАУ им. К.Д. Глинки. — №2004138524/15; заявл. 28.12.2004; опубл. 27.07.2006. Бюл. №21. — 4с. 7. Патент №2292840 Российская Федерация, МПК A61B 5/0468, A61B 5/0472, A61B 5/0402. Способ электрокардиографической диагностики миокардиодистрофии у новорожденных телят / Никулин И.А., Шумилин Ю.А.; заявитель и патентообладатель ФГОУ ВПО ВГАУ им. К.Д. Глинки. — №2005128691/13; заявл. 14.09.2005; опубл. 10.02.2007. Бюл. №4. — 8с. 8. Шумилин Ю.А. К вопросу о методике регистрации электрокардиограммы у телят / Ю.А. Шумилин // Вклад молодых ученых в решение проблем аграрной науки: Матер. межрегиональной науч.-практ. конф. молодых ученых. – Ч.II. — Воронеж: ФГОУ ВПО ВГАУ, 2005. — С.172-175. 9. Шумилин Ю.А. Опыт профилактики гепатоза телят / Ю.А. Шумилин // Актуальные проблемы диагностики, терапии и профилактики болезней животных: Матер. международной науч.-практ. конф. молодых ученых. — Воронеж: ВНИВИПФиТ, 2006. — С.122-124. 23