Методичка для студентов (11 занятие)
реклама
Тема занятия: Женская половая система: сведения из общей анатомии, строение шейки матки, гормональная регуляция менструального цикла, условия получения полноценного материала, приготовление, фиксация мазков. Жидкостная цитология. Окрашивание мазков. Молочная железа: получение материала для цитологического исследования, маркировка, доставка, обработка материала в цитологической лаборатории; цитологические особенности клеточных элементов молочной железы. Дыхательная система: цитологические особенности основных клеточных элементов мокроты и материала бронхоскопии. Пищеварительная система: цитологические особенности основных клеточных элементов материала, полученного при гастроскопии. Цель: Знать цитологические особенности клеток при патологии женской половой системы, дыхательной системы и заболеваний желудочно-кишечного тракта. Перечень знаний и практических навыков: 1. Знать строение женской половой системы, гормональную регуляцию менструального цикла, условия получения полноценного материала, приготовление, фиксация и окрашивание мазков. 2. Иметь представление о клеточных элементах молочных желез, получение материала для цитологического исследования, маркировке, доставке, обработке материала в цитологической лаборатории. 3. Уметь оценивать цитологическую картину клеточных элементов мокроты и материала бронхоскопии. 4. Знать цитологические особенности основных клеточных элементов материала, полученного при гастроскопии. ЖЕНСКАЯ ПОЛОВАЯ СИСТЕМА Сведения из общей анатомии Женская половая система состоит из двух яичников, в которых образуются женские половые клетки (яйцеклетки) и синтезируются гормоны, двух яйцеводов (маточных или фаллопиевых труб), матки, наружных половых органов и двух молочных желез. Яичники - несколько уплощенные овальные тела длиной 2,5 – 5,0 см, шириной 1,5 –3,0 см, толщиной 0,6 – 1,5 см. Яичник состоит из коркового и мозгового слоев, покрыт цилиндрическим или кубическим эпителием. Соединительнотканная основа органа (строма) состоит из веретенообразных клеток и волокон. В корковом веществе содержится много соединительнотканных клеток, в мозговом - артерии и венозные сплетения. В эпителиальных пузырьках (фолликулах) коркового вещества расположены яйцеклетки. Фаллопиевы трубы соединяют яичники с маткой. Это полые образования длиной примерно 12 см. Каждая труба проходит через стенку матки, выходит из нее, постепенно расширяется и заканчивается «бахромками» вблизи яичника. Стенка маточной трубы состоит из трех слоев: слизистой оболочки, мышечного слоя и серозной оболочки. В слизистой оболочке расположены реснитчатые и секреторные клетки. Наружные половые органы состоят из лонного возвышения, больших и малых половых губ и клитора. У девственниц вход во влагалище частично закрыт девственной плевой. Матка - полый мышечный орган, в котором происходит развитие зародыша и вынашивание плода. Расположена матка в малом тазу позади мочевого пузыря и впереди прямой кишки. Орган грушевидной формы, уплощенный в передне-заднем направлении. От верхнебоковых краев матки отходят широкие маточные связки, в которых располагаются маточные (фаллопиевы) трубы и яичники. Анатомически в матке различают дно, тело и шейку. Матка состоит из гладкомышечной ткани, изнутри выстлана слизистой оболочкой и так же, как яичники, маточные трубы и связки, снаружи покрыта серозной оболочкой (брюшиной). Полость матки треугольной формы. В верхних углах расположены два отверстия, открывающиеся в маточные трубы, в нижнем углу – перешеек (сужение), ведущий в полость канала шейки матки. Шейка матки – относительно узкий нижний сегмент матки. У девочек и девушек она имеет коническую форму, у взрослой женщины - цилиндрическую. Нижняя часть шейки вдается в полость влагалища, поэтому ее называют влагалищной частью (portio vaginalis cervicis) или эктоцервиксом. Влагалищная часть шейки матки округлой формы, поверхность ее гладкая. В шейке матки имеются два отверстия: внутренний зев – отверстие в верхнем отделе, расположенное на границе тела и шейки матки, и наружный зев – отверстие в нижнем отделе, расположенное в центре эктоцервикса и открывающееся во влагалище. Цервикальный канал или эндоцервикс (канал шейки матки – canalis cervicis uteri) узкий, расширен в средней части. Через цервикальный канал полость матки и влагалище сообщаются между собой. Влагалище (лат. – «vagina», греч. – «colpos») – уплощенная мышечно-эластическая трубка, расположенная в малом тазу; верхней частью охватывает шейку матки, а нижней открывается в половую щель. У влагалища различают переднюю стенку (в верхней трети прилежит ко дну мочевого пузыря) и верхнюю стенку, нижняя часть которой прилежит к передней стенке прямой кишки. Стенки верхней части влагалища, охватывая эктоцервикс, образуют вокруг него узкую щель – свод влагалища. Строение шейки матки Шейка матки состоит преимущественно из плотной коллагеновой ткани, строма слизистой оболочки содержит много эластических волокон. Слизистая оболочка эндоцервикса представлена цилиндрическим (призматическим) слизепродуцирующим эпителием, содержащим реснитчатые клетки. Железы эндоцервикса трубчатые, ветвящиеся; их строение на всем протяжении одинаково: цилиндрический эпителий поверхности слизистой оболочки цервикального канала врастает в строму, образуя железы. Железы содержат секрет в виде густой стекловидной слизи, имеющей щелочную реакцию. Щелочная реакция способствует сохранению жизнеспособности сперматозоидов, их продвижению в полость матки. Секреция слизи в фазу овуляции увеличивается, секрет заполняет цервикальный канал, образуя так называемую пробку Кристеллера, которая благодаря бактерицидным свойствам и механически препятствует проникновению микроорганизмов в цервикальный канал и полость матки. Если железы закупориваются, а слизь продолжает накапливаться, образуются наботовые кисты, способные выпячиваться на поверхность шейки. Слизистая оболочка эктоцервикса и влагалища выстлана многослойным плоским неороговевающим эпителием. В норме в репродуктивном возрасте эпителий состоит из множества рядов, условно разделенных на базальный, промежуточный и поверхностный слои. Только нижний (базальный) слой клеток связан с базальной мембраной, клетки в нем располагаются в один ряд. Базальные клетки способны делиться, и из них развиваются все остальные типы клеток многослойного плоского эпителия. Слой молодых клеток, расположенный над базальным, состоящий из нескольких рядов (нижняя часть промежуточного слоя), называют парабазальным. По мере созревания размер клеток увеличивается, а размер ядер уменьшается. Эпителий влагалища в наибольшей степени подвержен гормональным воздействиям, поэтому на изучении клеточного состава этого эпителия основана гормональная цитологическая диагностика. В связи с тем, что по мере дифференцировки и созревания клеток размер цитоплазмы увеличивается, а размер ядра уменьшается: • клетки с крупным ядром и необильной цитоплазмой в цитологических препаратах сохраняют округлую форму; • клетки с мелким ядром и обильной цитоплазмой принимают неправильно округлую или полигональную форму; цитоплазма располагается свободно, ложится складками, контуры ее становятся неровными; • накопление гликогена в клетках поверхностного слоя изменяет характер окрашивания цитоплазмы (при окрашивании по Папаниколау – в розовые тона, при окрашивании по методу Романовского – в светло-голубые, почти бесцветные, тона). Зона стыка Область шейки матки, в которой цилиндрический эпителий эндоцервикса соединяется с плоским эпителием влагалищной части, называют зоной стыка или естественной зоной стыка. У девочек естественная зона стыка расположена в цервикальном канале, у женщины репродуктивного возраста – на уровне наружного зева. Зона стыка под действием гормональных и других факторов может переместиться на влагалищную часть шейки матки. В постменопаузе зона стыка может опять сместиться в цервикальный канал. Появление цилиндрического эпителия на влагалищной части шейки называют эктопией. Зона трансформации (превращения) Под действием содержимого влагалища участок эктопии подвергается физиологическим изменениям, метаплазии в плоский эпителий. Участок, покрытый незрелым метаплазированным эпителием, носит название зоны трансформации или зоны превращения. У женщин репродуктивного возраста зона стыка, как правило, представлена участками естественной зоны стыка и участками зоны трансформации (метаплазированным эпителием). Зона трансформации может располагаться на влагалищной части шейки матки, а может полностью или частично «уходить» в цервикальный канал. У женщин в постменопаузе зоны стыка и трансформации чаще всего располагаются в цервикальном канале. Зона трансформации наиболее «опасна» с точки зрения возможности патологических изменений, в том числе рака. Гормональная регуляция менструального цикла Менструальный цикл – период с 1-го дня менструации до 1-го дня следующей менструации. Самую первую менструацию называют менархе, а прекращение менструаций - менопаузой. Средняя продолжительность менструального цикла – 28 дней, однако только 10 – 15% циклов имеют такую длительность. Возможны колебания продолжительности цикла в диапазоне от 18 до 40 дней. От гормонального состояния женщины и фазы менструального цикла зависит строение многослойного плоского эпителия влагалища и шейки матки. В менструальном цикле различают четыре фазы: • менструальную; • пролиферативную (эстрогенную, фолликулиновую); • овуляторную; • секреторную (прогестиновую, лютеиновую). Эти фазы связаны с созреванием яйцеклетки, которое регулируется гонадотропными гормонами гипоталамо-гипофизарной системы. Для осуществления нормальной репродуктивной функции необходимо сложное взаимодействие эндокринных желез и «органов-мишеней». Менструальная фаза (фаза десквамации, отторжения эндометрия) наступает, когда оплодотворения яйцеклетки не происходит. В эту фазу поверхностный (функциональный) слой слизистой оболочки матки отторгается и вместе с кровью выделяется из половых путей (менструация). Менструальная фаза длится до 3 – 5 дней. В фазу пролиферации происходит созревание фолликула с яйцеклеткой и регенерация слизистой оболочки матки. Под влиянием эстрогенов, продуцируемых клетками созревающего фолликула, железы и строма функционального слоя эндометрия восстанавливаются. Эстрогены также стимулируют полное созревание многослойного плоского неороговевающего эпителия шейки матки. Эта фаза длится с 5-го дня от начала менструации по 14 – 15-й день. Овуляция. Примерно в середине менструального цикла (14–15-й день) под действием высокой концентрации эстрогенов резко увеличивается выработка гипофизом лютеинизирующего гормона (ЛГ). Под влиянием ЛГ и фолликулостимулирующего гармона (ФСГ) происходит овуляция – разрыв фолликула и выход яйцеклетки из яичника. Секреторная фаза – наиболее стабильная часть цикла. В отсутствие беременности она длится в среднем 14 дней и завершается с началом менструации. После овуляции ЛГ вызывает развитие желтого тела в пустом (лопнувшем) фолликуле. Желтое тело вырабатывает свой собственный гормон – прогестерон. Если в течение 2 нед. оплодотворения яйцеклетки не произошло, желтое тело претерпевает обратное развитие, превращаясь в белое тело. Прогестерон перестает вырабатываться, слизистая оболочка матки отслаивается во время менструации, и цикл повторяется. Прогестерон тормозит созревание многослойного плоского эпителия шейки матки, и, если его вырабатывается много, клетки созревают только до промежуточного слоя. В норме такое состояние эпителия характерно для периодов беременности и кормления грудью. В постменопаузе, в связи со снижением выработки половых гормонов, созревание эпителия значительно нарушено, он атрофируется. Получение материала для цитологического исследования Женщину необходимо проинформировать о значении и необходимости регулярных цитологических исследований. Для эффективной цитологической диагностики большое значение имеет получение полноценного материала, так как несоблюдение условий забора материала и неправильное приготовление препарата могут привести к ошибочному цитологическому диагнозу. Условия получения полноценного материала • У женщин репродуктивного возраста мазки необходимо брать не реже раза в год. • Желательно брать мазки не ранее чем на 5-й день менструального цикла и не позднее чем за 5 дней до предполагаемого начала менструации. • Нельзя получать мазки в течение 24 ч после полового акта, спринцевания, введения во влагалище медикаментов, свечей, кремов, в том числе кремов для выполнения ультразвукового исследования. • В направлении в лабораторию необходимо указать: - фамилию, имя, отчество, возраст; - данные о менструальном цикле (например, дату начала цикла, день цикла, постменопауза, беременность); - гинекологические клинические данные (выделения или кровотечение из половых путей, гормональная терапия и др.); - предполагаемый диагноз; - дату получения материала; - тип мазка (из экто или эндоцервикса, эндометрия). Окрашивание мазков У каждого из методов окрашивания есть свои преимущества и недостатки. Метод окрашивания по Папаниколау лучше всего подходит для гинекологических мазков, так как позволяет оценить степень зрелости цитоплазмы (от сине-зеленого цвета в незрелых клетках до розового в клетках со зрелой цитоплазмой и оранжевого в клетках с ороговением). Благодаря влажной фиксации хорошо сохраняются ядра, клеточная мембрана и структура хроматина. Окрашивание по методу Романовского (азур-эозиновой смесью) используют в разных модификациях: по Паппенгейму (Май-Грюнвальд-Гимзе), Лейшману, Романовскому-Гимзе и др. Преимущество метода в четком прокрашивании ядерной субстанции, вследствие чего хорошо просматривается структура хроматина, а также бактериальной флоры и простейших. Поскольку существует множество модификаций, в тексте атласа при описании особенностей окрашивания клеток методом Романовского названы все методы, в которых применяют азур-эозиновую смесь. Преимущество метода «гематоксилин - эозином» - в выраженном окрашивании атипичных ядер, поэтому его активно используют при скрининге. Цитологические особенности эпителиальных клеток шейки матки При взятии материала с поверхности слизистой оболочки шейки матки и цервикального канала в препарат для цитологического исследования попадают клетки с влагалищной части шейки матки (многослойный плоский неороговевающий эпителий), зоны стыка или трансформации (цилиндрический и при наличии плоскоклеточной метаплазии - метаплазированный эпителий) и собственно клетки цервикального канала (цилиндрический эпителий). Клетки плоского эпителия Мазки для цитологического исследования получают с поверхности слизистой оболочки, поэтому их клеточный состав представлен слущенными клетками. Чем лучше выражена способность эпителия к созреванию, тем более зрелые клетки попадают в мазок. При атрофических изменениях на поверхности эпителиального пласта располагаются менее зрелые клетки. Условно клетки многослойного плоского неороговевающего эпителия принято подразделять на четыре типа: поверхностные, промежуточные, парабазальные, базальные. Поверхностные клетки Характерные признаки: • размер клеток - крупный, диаметр около 50 мкм; • форма клеток - плоская, полигональная; • размер ядер - мелкий, максимальный диаметр 5-6 мкм; • форма ядер - овальная или округлая; • ядра темные, плотные (пикнотичные); • структура хроматина не просматривается. Наиболее зрелые поверхностные клетки располагаются преимущественно разрозненно, цитоплазма с нечетко выраженными складками, при окрашивании по Папаниколау - розовая или желтовато-розовая (эозинофильная), нежная, прозрачная; в части клеток определяются липидные гранулы и гранулы гликогена. Менее зрелые клетки могут располагаться пластами, нагромождаясь друг на друга. Цитоплазма нежная, прозрачная, со складками и четкими неровными контурами. Промежуточные клетки В зависимости от степени созревания промежуточные клетки могут иметь разные размеры и форму, но для всех промежуточных клеток характерно: • клетка крупная, размером около 40-50 мкм; • размер ободка цитоплазмы больше диаметра ядра; • размер ядра больше 6 мкм; • четкая мембрана ядра; • хроматин распределен равномерно (пузырьковидные ядра). Зрелые промежуточные клетки (препикнотичные) отличаются от поверхностных размером и структурой ядра. Ядра их пузырьковидные, овальные или округлые, диаметром более 6 мкм, с четкой структурой хроматина. Цитоплазма может быть эозинофильной, циа-нофильной, с характерной складчатостью. Менее зрелые промежуточные клетки округло-овальной формы, меньших размеров; ядра имеют ту же структуру, что и в зрелых клетках; цитоплазма более плотная, иногда ее края заворачиваются (нави-кулярные, ладьевидные клетки). Лактобациллы способны вызывать лизис промежуточных клеток, на поверхностные клетки этот пептический эффект распространяется редко. Парабазальные клетки Отличительные признаки парабазальных клеток: • клетки мелкого размера, диаметром 20-30 мкм; • форма округлая или овальная; • ядро относительно крупное; • диаметр ядра больше или равен ширине ободка цитоплазмы; • хроматин нежно-зернистый, распределен равномерно; • могут встречаться ядрышки. Цитоплазма при окрашивании по Папаниколау обычно цианофиль-ная, при окрашивании по методу Романовского - базофильная или светлая. Клетки не подвержены бактериальному цитолизу, однако в них могут развиться аутолитические процессы. Это приводит к дегенеративным изменениям, и в препаратах появляются клетки с пикнотичными ядрами или «голые» ядра разрушенных клеток. Базальные клетки В норме базальные клетки расположены на базальной мембране в один ряд и практически не попадают в цитологические мазки, так как покрыты несколькими слоями парабазальных клеток и не слущива-ются. Клетки могут появиться в мазках в случае гиперплазии базаль-ного эпителия (в частности, в постменопаузе). Клетки цилиндрического эпителия Клетки цилиндрического эпителия в норме располагаются небольшими группами в виде сотоподобных структур, полосок. Характерные признаки: • форма клетки вытянутая (зауженная к базальному полюсу и расширенная к апикальному); • ядро расположено эксцентрически (ближе к базальному полюсу); • округло-овальная форма ядра; • хроматин зернистый; • цитоплазма часто вакуолизирована, с признаками секреции. Могут встречаться бокаловидные клетки, цитоплазма в которых растянута слизью, иногда в клетках обнаруживают гранулы секрета. Реже находят мерцательные клетки, их апикальный (противоположный ядру) край имеет уплощение, где расположены реснички. Резервные клетки в норме, как правило, не видны, а определяются только при резервноклеточной гиперплазии и при плоскоклеточной метаплазии. Клетки метаплазированного эпителия В норме метаплазированные клетки в цитологических препаратах если и встречаются, то в небольшом количестве. Резервные клетки, незрелые и зрелые метаплазированные клетки практически неотличимы от базальных и парабазальных. Узнаваемы в препаратах так называемые клетки-паучки, характерные для созревающей плоскоклеточной метаплазии. МОЛОЧНАЯ ЖЕЛЕЗА Молочная железа – это модифицированная потовая железа. До полового созревания и у мальчиков, и у девочек она одинакова и представлена протоками со смешанными концевыми отделами, окруженными скудной соединительной тканью. У мальчиков и мужчин она остается в таком состоянии и называется не молочной, а грудной железой. У девочек во время полового созревания развивается в полноценную железу, имеющую развитые эпителиальный компонент (паренхиму) и соединительнотканный (строму). В норме молочная железа после полового созревания состоит из 15-20 радиально расположенных сегментов (долей), формирующихся вокруг млечных (выводных) протоков и сходящихся к соску. Каждая доля состоит из множества долек структурных единиц железы. Сосок выстлан многослойным плоским ороговевающим эпителием, переход млечного протока в сосок - многослойным плоским неороговевающим эпителием. Крупные млечные протоки представлены двумя рядами цилиндрического или кубического эпителия. Терминальные протоки и ацинусы выстланы однорядным цилиндрическим или кубическим эпителием. Молочную железу половозрелой небеременной женщины называют покоящейся, в отличие от железы в состоянии активного роста в период беременности. Объем и размер «покоящейся» молочной железы в основном зависят от содержания в ней жировой ткани. Полного развития молочная железа достигает во время беременности. Цитологические особенности основных клеточных элементов молочной железы При пункции различных образований молочной железы игла обычно проходит через нормальные структуры молочной железы (дольки, протоки, соединительнотканные прослойки). Поэтому в пунктатах часто встречаются элементы нормальной ткани молочной железы [эпителиальные клетки протоков и ацинусов, «голые» биполярные ядра, апокринные клетки (онкоциты), пенистые клетки, жировые клетки, фиброциты]. Кроме того, в пунктате могут присутствовать эритроциты, лимфоциты, нейтрофильные и эозинофильные гранулоциты, гистиоциты, гигантские многоядерные клетки. Фон препарата может быть представлен аморфным материалом (секрет молочной железы, некротические массы, слизь). Клетки протоков и ацинусов, их характеристика: • располагаются в виде небольших групп или в структурах: - типа пчелиных сот, в виде трубочек, в виде ацинусов (клетки из концевых отделов дольки); - шаровидных (при доброкачественных состояниях встречаются редко, ядра на поверхности шаровидной структуры распределены равномерно); - неопределенной формы; • границы клеток неровные, в группах из клеток могут не просматриваться; • ядра округлые или овальные, 8-10 мкм в диаметре; • ядерная мембрана ровная; • ядрышки мелкие или не видны; • хроматин плотный, распределен равномерно; • цитоплазма скудная, тонким ободком окружает ядро. При доброкачественных поражениях разрозненно лежащие эпителиальные клетки с сохранившейся цитоплазмой практически не встречаются; отделившись от структур, они обычно теряют цитоплазму и располагаются в виде овальных «голых» ядер (рис 7.36). Такие ядра имеют округлую или овальную формы, размер их несколько больше или меньше размера ядер сохранившихся клеток в структурах. Апокринные клетки, их характеристика: • секретирующие клетки эпителия молочной железы; • сравнительно крупные, диаметр 6-12 мкм; • располагаются разрозненно или в виде папиллярных структур; • форма клеток одинаковая, границы четкие; • ядра обычно расположены центрально, реже - эксцентрически; • базофильная цитоплазма, в которой много гранул. Пенистые клетки (молозивные тельца), их характеристика: • крупные размеры; • форма округлая или неправильная; • границы клеток чаще неровные, «кружевные»; • ядро округлое, мелкое, мембрана ядра четкая; • хроматин мелкозернистый; • цитоплазма нежная, вакуолизированная, вакуоли имеют разные размеры; • признаки фагоцитоза. ДЫХАТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА Человек в течение жизни делает 700 миллионов дыхательных движений! Органы дыхания представлены дыхательными путями: верхние дыхательные пути (носовая, ротовая полости, глотка, гортань) и бронхиальное дерево - разветвляющаяся система гибких трубок, которые подводят воздух к 500 млн альвеол, «маленьких пузырьков», диаметром 0,2 мм, где происходит газообмен с кровью. Полость рта, ротоглотка, гортань выстланы многослойным плоским неороговевающим эпителием; полость носа - цилиндрическим мерцательным эпителием. Строение бронхолегочного дерева. Крупные бронхи выстланы многорядным цилиндрическим мерцательным эпителием, по мере разветвления бронхов на более мелкие слой эпителия становится тоньше. Бронхиолы выстланы однорядным эпителием. Эпителий содержит мерцательные (с большим числом ресничек) и слизистые клетки. Кроме того, в бронхиальном дереве есть железы, дополнительно продуцирующие слизь. Благодаря биению ресничек и наличию слизи, эпителиальный «ковер» освобождается от различных веществ, попадающих в дыхательные пути. Альвеолы покрыты однорядным эпителием, в котором имеются клетки двух типов: • пневмоциты первого типа (осуществляют газообмен); • пневмоциты второго типа (продуцируют сурфактант - вещество, изменяющее поверхностное натяжение жидкостей и позволяющее легкому находиться в расправленном состоянии). В слизистой оболочке бронхолегочной системы рассеяны также нейроэндокринные клетки (клетки APUD-системы). При некоторых хронических воспалительных процессах, у курильщиков, при действии токсических веществ (профессиональные вредности) многорядный мерцательный эпителий может подвергаться плоскоклеточной метаплазии и становиться функционально несостоятельным - на месте «ковра из ресничек» образуются «проплешины». Плоскоклеточная метаплазия может быть фоном для развития рака. Получение и обработка материала для цитологического исследования Материалом для цитологического исследования при заболеваниях дыхательной системы может служить мокрота, материал, полученный при бронхоскопии - это отпечатки с биоптатов, соскобы щеткой, бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ). Мокрота - продукт патологического процесса (заболевания или повреждения) в дыхательной системе, выделяемый при кашлевом толчке или отхаркивании. К этим выделениям обычно примешаны секреты полости рта, глотки и носовая слизь. До сбора мокроты необходимо тщательно вычистить зубы, прополоскать рот и глотку водой. Свежевыделенную мокроту, полученную путем откашливания, собирают в чистую сухую широкогорлую склянку, сразу же доставляют в лабораторию. В лаборатории мокроту необходимо немедленно исследовать или хранить до приготовления препаратов для микроскопического исследования в холодильнике. Следует помнить, что через 6-8 ч при комнатной температуре клеточные элементы мокроты разрушаются. Перед микроскопическим исследованием мокроту тщательно осматривают: • оценивают количество мокроты (количество зависит от заболевания и стадии заболевания, возраста больного), значение имеет суточное количество и изменение его в динамике; • определяют цвет и прозрачность (зависят от характера: слизистая - прозрачна, слизисто-гнойная - мутная, желтоватая или зеленоватая, красные оттенки - примесь крови, черный/серый цвет - примесь угольной пыли); • определяют характер (слизистая, гнойная, слизисто-гнойная и пр.); • определяют запах (свежевыделенная слизистая мокрота запаха не имеет, при распаде тканей - приобретает гнилостный запах); • определяют слоистость (обнаруживается при выделении большого количества мокроты, содержащей компоненты с разным удельным весом); • исследуются препараты из нативной (свежей) мокроты и фиксированные и окрашенные препараты. Для приготовления информативных препаратов самым существенным моментом является отбор соответствующих частиц, содержащихся в мокроте, который осуществляется в чашке Петри. • Приготовление нативного препарата: от отобранных клочков и комочков мокроты отделяют небольшие фрагменты (с булавочную головку), помещают их на предметное стекло и покрывают покровным таким образом, чтобы препарат был не толстый, а материал не выступал за пределы покровного стекла. • Для окрашенных препаратов: отобранные фрагменты тщательно перемешивают до гомогенного состояния и равномерно распределяют по стеклу или раздавливают и растягивают между двух предметных стекол до образования равномерных тонких мазков. • Фиксация и окрашивание препаратов могут быть различными, в зависимости от цели исследования - для бактериоскопии (по Цилю-Нильсену, по Граму) или для цитологического исследования (окрашивание по Романовскому, Паппенгейму, Лейшману или гематоксилин-эозином). Препараты из материала бронхоскопии, кроме БАЛ, готовит медсестра или врач эндоскопической диагностики после бронхоскопии. БАЛ доставляют в лабораторию, где его центрифугируют и приготавливают из осадка окрашенные препараты для подсчета форменных элементов. Цитологические особенности основных клеточных элементов мокроты и материала бронхоскопии Клетки цилиндрического эпителия, их характеристика: • Среднего размера. • Вытянутой (цилиндрической) формы. • Ядро расположено эксцентрически. • Форма ядра округло-овальная. • На стороне ядра цитоплазма клетки суживается. • На противоположном ядру полюсе клетки - уплощение, на котором располагаются реснички. В клетках из мокроты реснички часто отсутствуют. • Цитоплазма светлая. Альвеолярные макрофаги, их характеристика: • Форма клеток округлая. • Клетки разного размера. • Цитоплазма обильная, голубоватая, розоватая или зеленоватая в зависимости от включений. • Могут быть гранулы и вакуоли в цитоплазме. Клетки при плоскоклеточной метаплазии, их характеристика: • Размер клеток может быть разным, чаще - средний. • Форма клеток полигональная. • Ядра округлые, расположены центрально. • Цитоплазма светло-голубая, плотная, гомогенная. ПИЩЕВАРИТЕЛЬНАЯ СИСТЕМА Пищеварительная система - трубка, объединяющая ротовую полость, глотку, пищевод, желудок, тонкий и толстый кишечник, прямую кишку. Вспомогательными органами служат зубы, язык, слюнные железы, поджелудочная железа, печень, желчный пузырь и червеобразный отросток слепой кишки (аппендикс). Желудок - расширенный участок пищеварительной трубки, миксер, в котором пища перемешивается, перетирается, обрабатывается соляной кислотой и пепсином. Внутренний слой стенки желудка имеет многочисленные складки. Слизистая оболочка полости рта и пищевода представлена многослойным плоским неороговевающим эпителием. Желудок покрыт слизеобразующим однорядным эпителием (покровно-ямочным) и содержит множество желез (кардиальные, главные или фундальные, промежуточные, пилорические), выделяющих пищеварительные ферменты, соляную кислоту и слизистый секрет. Основную массу желез желудка составляют так называемые главные или фундальные железы. Они представлены главными, обкладочными, добавочными и нейроэндокринными клетками. Кроме того, в них имеются так называемые стволовые клетки, благодаря которым происходит постоянное обновление клеток слизистой оболочки. Главные клетки - цилиндрические; продуцируют пепсиноген (предшественник пепсина). Пепсиноген под действием ионов водорода соляной кислоты превращается в пепсин, который расщепляет белки до аминокислот. Обкладочные (париетальные) клетки - крупные клетки с внутриклеточными выводными протоками. Они активно переносят из внутренней среды во внешнюю ионы водорода, за которыми следуют ионы хлора. Добавочные или слизистые клетки (мукоциты) - цилиндрические (призматические), продуцируют слизь, сходны с покровно-ямочными клетками. Нейроэндокринные клетки расположены в области дна железы, синтезируют гастрин и секретин. Эти клетки можно дифференцировать в цитологических препаратах только с помощью иммуно-цитохимических исследований или при опухолях (например, при карциноиде), когда они в препаратах располагаются полями и имеют характерное строение. Получение и обработка материала для цитологического исследования Материалом для цитологического исследования при заболеваниях желудка служит материал, полученный при гастроскопии (отпечатки с биоптатов, соскобы щеткой). Мазки делает медсестра или врач эндоскопической диагностики. Окрашивают препарат по Романовскому или гематоксилин-эозином. Цитологические особенности основных клеточных элементов в материале гастроскопии Клетки покровно-ямочного эпителия, их характеристика: • Располагаются в пластах. • Цитоплазма необильная. • Ядра округло-овальные, среднего размера. • Хроматин распределен равномерно. Клетки эпителия желез Главные: • Форма неправильная. • Ядра округлые. • В цитоплазме обильные базофильные гранулы (пепсиногена). Обкладочные: • Округлой формы. • Крупные, с обильной цитоплазмой. • Ядра округлые, расположены центрально. • Цитоплазма окрашивается в разные оттенки - от розового до серого. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ 1. Строение женской половой системы. 2. Гормональная регуляция менструального цикла 3. Условия получения полноценного материала, приготовление, фиксация мазков из женских половых органов. 4. Жидкостная цитология в гинекологии. 5. Окрашивание гинекологических мазков. 6. Строение молочной железы. 7. Получение материала для цитологического исследования молочной железы. 8. Маркировка, доставка, обработка цитологического материала образований молочных желез в цитологической лаборатории. 9. Цитологические особенности клеточных элементов молочной железы. 10. Получение и обработка материала для цитологического исследования при заболеваниях дыхательной системы. 10. Дыхательная система: цитологические особенности основных клеточных элементов мокроты и материала бронхоскопии. 11. Пищеварительная система: цитологические особенности основных клеточных элементов материала, полученного при гастроскопии.