Краткий отчет об основных результатах научно

Краткий отчет
об основных результатах научно-практической деятельности
ФГУП «ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ
ОСОБО ЧИСТЫХ БИОПРЕПАРАТОВ»
(ФГУП «ГосНИИ ОЧБ» ФМБА России)
в 2010 году
Краткое изложение результатов НИОКР, выполненных институтом
При
разработке
радиозащитных
и
антитоксических
средств
на
основе
рекомбинантных белков и синтетических пептидов (контракт № 40.001.10.0 от 17 февраля
2010 г.) получены экспериментальные данные о защитном действии рекомбинантного
интерлейкина-1 бета человека (ИЛ-1β) в моделях токсической лейкопении, вызванной
токсическими и отравляющими веществами. Механизм защитного действия ИЛ-1 при
токсической лейкопении связан со стимуляцией миелопоэза и ускорением восстановления
гранулоцитарного ростка кроветворения, что повышает устойчивость животных к
эндогенной и экзогенной инфекции и защищает от гибели.
Для организации проведения клинических испытаний препарата Бетаприм, мазь для
наружного применения 0,000005%, выпущены опытные партии препарата, подготовлен
комплект нормативной документации для получения разрешения на проведение клинических
испытаний; заключены договора с клиниками о научном сотрудничестве в области
клинических исследований мазевой формы рекомбинантного интерлейкина-1β человека.
В ходе исследований по теме: «Разработка методов неинвазивной диагностики
онкологических и инфекционных заболеваний с использованием магнитных наночастиц»
(контракт № 40.002.10.0 от 17 февраля 2010 г.) была усовершенствована технология
лабораторного синтеза магнитных наночастиц оксида железа с полисахаридным покрытием
по критерию воспроизводимости коллоидно-химических характеристик контрастирующего
препарата. Получены лабораторные образцы
гибридных магнитных композитов с
декстраном и целлюлозой в качестве опытных контрастирующих средств парентерального и
перорального применения для неинвазивной МРТ-диагностики. Отработаны методы
химической активации поверхностных групп магнитных наночастиц, и исследована
неспецифическая адсорбция модельных белков на активированных гибридных композитах.
Синтезированы конъюгаты магнитных наночастиц оксида железа с авидином и
интерфероном альфа. Изучена их биосовместимость, специфическая активность, магнитнорелаксационные свойства и контрастирующее действие при МРТ-диагностике мыши in vivo.
Показано, что синтезированные гибридные композиты магнитных наночастиц оксида железа
с декстраном, целлюлозой и конъюгат с интерфероном альфа по данным МРТ-исследования
являются кандидатными контрастирующими средствами негативного принципа действия для
МРТ-диагностики.
В целях создания противоинфекционных и противовоспалительных лекарственных
препаратов аэрозольного применения на основе рекомбинантных цитокинов (контракт №
40.006.10.6 от 25 мая 2010 г.) проведено клиническое исследование безопасности и
эффективности
аэрозольного
препарата
интерферона
альфа-2b
человеческого
рекомбинантного Интерфераль® при лечении гриппа и других ОРВИ у взрослых на базе двух
исследовательских центров
с участием 120 пациентов. Показана высокая клиническая
эффективность препарата Интерфераль®, аэрозоль для местного применения 100 000 МЕ,
при ОРВИ с быстрым прерыванием клинического симптомокомплекса и безопасность при
местном применении.
Клиническое исследование безопасности и эффективности аэрозольного препарата
рецепторного антагониста интерлейкина-1 человеческого рекомбинантного Ралейкин® при
лечении аллергического ринита у взрослых с участием 60 пациентов показало, что препарат
не вызывал значимых изменений общеклинических и лабораторных параметров пациентов и
обладал клинической эффективностью. Изучена специфическая активность жидкого
аэрозольного препарата ИЛ-1ра на модели аллергической астмы у мышей. Разработаны
проекты протоколов (с приложениями) клинических исследований безопасности и
эффективности препарата Ралейкин® при лечении бронхиальной астмы у взрослых и при
лечении внебольничной пневмонии бактериального и вирусного генеза средней тяжести и
тяжелого течения у взрослых.
Для получения разрешения на проведение клинического исследования безопасности и
эффективности аэрозольного препарата Интерфераль® при лечении рецидивирующего
респираторного папилломатоза у взрослых подготовлен комплект документации (протоколы
с приложениями) и достигнута договоренность с клиникой.
С
целью
разработки
и
проведения
клинических
испытаний
селективных
гемосорбентов для экстракорпоральной коррекции при терапии критических состояний
(контракт № 40.007.10.6 от 25 мая 2010 г.) осуществлен дизайн и химический синтез
полипептидных аналогов индолицидина и кателицидина, а также ряда
коротких
амфифильных катионных пептидов. Проведены токсикологические исследования и изучение
ЛПС-нейтрализующей активности аналогов индолицидина в модельных экспериментах in
vitro. Наработаны партии моноклональных антител к фактору некроза опухолей альфа
(ФНОα) и ИЛ-1β (всего 9 типов), исследовано их взаимодействие с антигенами. На
основании проведенного исследования отобраны 3 пептида и 2 типа антител в качестве
лигандов для гемосорбентов.
2
Синтезированы 18 типов аффинных и иммуноаффинных биоадсорбентов, на которые
были иммобилизованы 3 различных типа синтетических пептидных аналогов АМП и
моноклональные антитела к ФНОα и ИЛ-1β. Продемонстрирована эффективность
адсорбентов при удалении ЛПС, ФНОα и ИЛ-1β из модельных растворов.
Исследована биосовместимость адсорбентов при контакте с цельной кровью и
плазмой крови.
В ходе выполнения работ по проекту «Разработка ДНК-вакцины против вируса ВИЧ-1
субтипа А и мониторинг генетического разнообразия ВИЧ в г.Санкт-Петербурге» (контракт
№ 40.005.09.0 от 18 мая 2009 г.) получено официальное разрешение Росздравнадзора (№ 283
от 21 июня 2010 года) на проведение клинического исследования реактогенности,
безопасности и иммуногенности «ДНК-4», вакцины против ВИЧ-1/СПИД. Клинические
испытания 1 фазы вакцины «ДНК-4», проведенные на трех группах добровольцев (по 7
человек), показали, что препарат является безопасным при внутримышечном введении в
дозах 0,25 мл, 0,5 мл и 1,0 мл. Во всех случаях переносимость препарата была хорошей,
побочные эффекты отсутствовали.
Изучена стабильность вакцины «ДНК-4» в процессе хранения в сухом, защищенном
от света месте при температуре от 2 до 8°С. Показано, что препарат «ДНК-4», раствор для
внутримышечного введения 1,0 мг/мл, в ампуле стабилен при хранении в течение 2 лет.
Осуществлен полный цикл производственного процесса по наработке партии вакцины
«ДНК-4» для использования в качестве стандарта при определении специфической
активности. Контроль качества показал, что наработанная партия вакцины «ДНК-4»
соответствует проекту ФСП по всем анализируемым показателям. Разработан метод оценки
специфической активности кандидатной вакцины «ДНК-4».
С целью разработки реагентной базы для обеспечения клинических испытаний ДНКвакцины были получены моноклональные антитела к рекомбинантному белку gag (р17),
определены их изотипы и специфичность.
На этапе исследований, посвященном разработке нового иммуногена на основе белка
p17 ВИЧ-1 субтипа А, изучены особенности иммунного ответа на белок р17 при
интраназальном
введении,
и
проведен
поиск
схем
иммунизации,
сочетающих
парентеральное и мукозальное введение антигена, которые позволили бы индуцировать как
высокий уровень системного поствакцинального иммунитета, так и местный иммунный
ответ.
Продолжена работа по поддержанию и сопровождению когорты наркозависимых для
проведения клинических испытаний кандидатной вакцины против ВИЧ-инфекции. Изучены
текущие показатели сопровождения и заражаемости ВИЧ, гепатитами В и С, генитальным
3
герпесом и сифилисом. Текущая заражаемость ВИЧ составила 12,1 на 100 чел/лет.
Молекулярно-эпидемиологический мониторинг ВИЧ-1 в Санкт-Петербурге показал, что в
регионе по-прежнему превалирует восточно-европейский вариант субтипа А с низким
уровнем генетического разнообразия.
При разработке препаратов для
повышения неспецифической резистентности
организма к действию неблагоприятных факторов физической и биологической природы на
основе штаммов пробиотиков и бактериальных экзометаболитов (контракт № 40.003.10.0 от
17 февраля 2010 г.) изучены свойства новых пробиотических препаратов Актофлор®-С
(комплекс регуляторных экзометаболитов пробиотических бактерий) и Витафлор ®-форте
(симбиотическая культура двух штаммов Lactobacillus acidophilus и Актофлор®-С).
Показано, что Актофлор®-С и его компоненты стимулируют пролиферацию клеток
перевиваемых
клеточных
линий
Сасо-2
(карцинома
толстой
кишки)
и
Hep
G2
(гепатокарцинома). В экспериментах in vivo было установлено, что Витафлор®-форте
эффективен при лечении дисбактериоза и язвенных поражений желудочно-кишечного
тракта. При этом его фармакологическая активность превышала активность аналога
Бифидумбактерина. Препараты Актофлор®-С и Витафлор®-форте оказывают позитивное
влияние на регенерацию клеток кишечного эпителия и способствуют восстановлению
эубиоза.
Это
способствует
повышению
резистентности
организма
к
действию
неблагоприятных факторов среды физической и биологической природы.
При выполнении исследований в рамках Государственного контракта
№02.512.11.2295 от 10 марта 2009 г. с Федеральным агентством по науке и инновациям
(ФАНИ) по теме:
«Разработка гидроколлоидных повязок, содержащих антисептики и
ранозаживляющие средства, для терапии инфицированных ран и незаживающих язв во
влажной среде» подготовлен проект опытного технологического регламента (ТР 00479741003-10)
и
проведена
наработка
повязок
раневых
гидроколлоидных,
содержащих
эпидермальный фактор роста, сосудистый эндотелиальный фактор роста, фактор роста
фибробластов, супероксиддисмутазу, проурокиназу, наночастицы серебра и церия в
количестве 18 серий. Проведены технические, токсикологические, санитарно-химические и
биологические
испытания
повязок
раневых
гидроколлоидных
«Хитоскинтм-колл»,
установлена их безопасность и соответствие требованиям нормативной документации.
Медицинские (клинические) испытания повязок раневых гидроколлоидных «Хитоскинтмколл»,
проведенные
эффективность повязок
на
базе
трех
медицинских
учреждений,
показали
при терапии трофических язв нижних конечностей,
высокую
длительно
незаживающих гранулирующих ран после ожогов и механических травм. Раневые повязки
«Хитоскинтм-колл»
рекомендованы для широкого применения в клинической практике
4
лечебно-профилактических учреждений Российской Федерации, получено регистрационное
удостоверение (№ ФСР 2010/08866 от 15.09.2010 г.) на повязки раневые гидроколлоидные
«ХИТОСКИНтм-колл».
Информация о внедрении результатов НИОКР в практику
По результатам научной деятельности в 2010 году институтом подано 10 заявок на
выдачу патентов РФ на изобретение, товарный знак и полезную модель. Получено 4 патента
и 5 положительных решений о выдаче патента.
Получены регистрационные удостоверения на инновационные препараты:
Интерфераль® (интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный), лиофилизат
для приготовления раствора для инъекций (Рег. удостоверение ЛСР-007454/10 от
30.07.2010); Интерферон альфа-2b (интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный),
субстанция (Рег. удостоверение ЛСР-007704/10 от 05.08.2010); Бестим (гамма-D-глутамилтриптофан), лиофилизат для приготовления раствора для внутримышечного введения (Рег.
удостоверение Р N003335/03 от 03.08.2010); Бестим® , субстанция (Рег. удостоверение P
N003335/01 от 06.05.2010); Рексод®-ОФ (супероксиддисмутаза человека рекомбинантная)
(Рег. удостоверение ЛСР-006689/10 от 15.07.2010);
Рекомбинантный рецепторный
антагонист интерлейкина-1 человека (анакинра), субстанция (Рег. удостоверение ЛСР007452/10 от 30.07.2010.
Информация о проведенных институтом научных мероприятиях
и основных научных публикациях
В 2010 г. ведущие специалисты института
приняли участие
в работе 7
международных конференций, совещаний, семинаров и выставок и т.д., таких как,
консультационное совещание «Превенция и лечение ВИЧ/СПИД у наркопотребителей»
(США), XVIII международная конференция по изучению СПИД (Австрия), 13-й Северный
симпозиум по фильтрации (NoFS-13), Международный химический конгресс стран
Тихоокеанского бассейна Pacifichem 2010 (США), 23-е Заседание Европейской Ассоциации
ученых по изучению транспорта в желудочно-кишечном тракте (EITG 2010), Италия и др.
По результатам научной деятельности в 2010 году институтом опубликовано 64
научных статьи в ведущих отечественных и зарубежных журналах и тезиса на
международных конференциях.
Результаты участия в реализации международных проектов
5
В течение 2010г. специалисты института участвовали в выполнении международных
проектов, финансируемых Международным научно-техническим центром (МНТЦ) и
Американским фондом гражданских исследований и развития (CRDF).
Проект МНТЦ #2905 «Разработка метода очистки жидких радиоактивных отходов
на основе мицеллярно-усиленной ультрафильтрации». Соисполнителем проекта является
Научно-производственная фирма «Гелла-ТЭКО», Москва. Проект завершен 31.08.2010 г.
В ходе выполнения проекта разработан эффективный метод утилизации жидких
радиоактивных
отходов
ультрафильтрации,
(ЖРО)
разработан
с
использованием
мицеллярно-усиленной
и испытан комплекс оборудования для реализации
разработанного метода. Проведены натурные испытания разработанной установки для
утилизации ЖРО спецпрачечной одного из
российских объектов атомной энергетики.
Полученные результаты положены в основу проектирования промышленной мембранной
установки для полной переработки ЖРО спецпрачечной Ново-Воронежской АЭС.
Проект МНТЦ #3909 «2D протеомика рака желудка человека: отбор сывороточных
маркеров для диагностики и прогнозирования заболевания».
Головной исполнитель – ГУ НИИ онкологии Томского научного центра Сибирского
отделения РАМН, Соисполнитель - Институт молекулярной биологии РАН, Москва
Целью проекта является поиск онкомаркеров и разработка методов их идентификации
для ранней диагностики рака и предраковых заболеваний желудка человека в клинических
условиях, прогностика, выбор лечения и мониторинг заболевания.
ФГУП «ГосНИИ ОЧБ» ФМБА России были выполнены этапы работы, связанные с
выделением белков из генно-инженерных продуцентов, разработанных в ИМБ РАН, которые
позиционируются как кандидатные онкомаркеры, и получением специфических антител к
этим белкам.
Результаты исследований могут быть
использованы при разработке
диагностических наборов для онкодиагностики рака желудка и других аденокарцином.
Проект CRDF #RBО-11034 «Быстродействующая система для деконтаминации».
Проект
финансировался
по
Программе
содействия
западным
организациям,
поддерживающим некоммерческие научные и образовательные проекты в России. Проект
завершен в декабре 2010 г.
В результате выполнения проекта продемонстрирована
возможность использования электроактивированных растворов NaCl (ЭАР), распыляемых с
помощью
вихревого
пневматического
генератора
аэрозоля
типа
ВАГ-2,
ранее
разработанного и запатентованного в ФГУП «ГосНИИ ОЧБ» ФМБА России, для проведения
эффективной дезинфекции помещений, включая поверхности и воздушную среду.
Проведены испытания разработанного метода для дезинфекции
лабораторных
помещений и помещений спецклиники НИИ гриппа, производственных помещений
6
птицеводческого комплекса в г. Ломоносов Ленинградской области. Отмечается, что метод
прост в применении, экономичен, не оказывает отрицательного воздействия на окружающую
среду,
обеспечивает
возможность
дезинфекционной
обработки
воздушной
среды,
труднодоступных участков и укрытий. Результаты исследования представлены в нескольких
публикациях, получено 2 патента РФ и 2 патента РСТ.
7