МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ АМУРСКОЙ ОБЛАСТИ Государственное автономное учреждение Амурской области профессиональная образовательная организация «Амурский медицинский колледж» Методическая разработка практического занятия для самостоятельной работы студентов по теме: «Описание физических свойств мочи» ПМ.01 «Проведение лабораторных общеклинических исследований» МДК.01.01Теория и практика лабораторных общеклинических исследований специальность 31.02.03 «Лабораторная диагностика» очная форма обучения I курс Составил: Шаповаленко Н.С. к м. н., преподаватель профессионального модуля ПМ.01, высшей квалификационной категории Благовещенск, 2015 Методическая разработка для самостоятельной работы студента составлена к.м.н., преподавателем высшей квалификационной категории Шаповаленко Н.С. на основе Федерального государственного образовательного стандарта по специальности среднего профессионального образования 31.02.03 Лабораторная диагностика в соответствии с рабочей программой профессионального модуля ПМ.01 Проведение лабораторных общеклинических исследований МДК 01.01. Теория и практика лабораторных общеклинических исследований Рассмотрено на заседании ЦМК «___»___________2015г. УТВЕРЖДАЮ: Экспертный совет при информационнометодическом центре АМК «__»___________2015г. (Сидоренко М.А.) Председатель ЦМК_______________ (Маятникова Н.И.) Содержание 1. Пояснительная записка 2. I модуль: Теоретическая часть с элементами самостоятельной работы 3. II модуль: Самостоятельная работа с исследовательским этапом 4. III модуль: Контрольные вопросы и задания Пояснительная записка Данная методическая разработка предназначена для самостоятельной работы студентов на практическом занятии по теме «Описание физических свойств мочи», I курс, 2 семестр. Методическая разработка содержит модуль: теоретической части с элементами самостоятельной работы; II модуль: самостоятельной работы с исследовательским этапом; III модуль: контрольные вопросы и задания Методическая разработка практического занятия содержит учебную информацию, где дано подробное описание методов лабораторной диагностики для самостоятельной работы студентов, а так же содержит подробное описание хода работы студента на занятии. В блоке контроля знаний студенту предлагается ответить на ряд вопросов по изученному материалу, на закрепление дается работа с терминологией, что позволяет повторно переработать изученный учебный материал, что способствует формированию клинического мышления. Занятие №1. Тема: Описание физических свойств мочи Тип занятия: практическое (6ч) Цель: Изучить проведение общеклинических лабораторных исследований мочевыделительной системы Задачи: 1. Изучить основные принципы подготовки рабочего места для исследования биоматериала (мочи); 2. Ознакомиться с правилами внутреннего распорядка и техники безопасности работы в условиях КДЛ; 3. Изучить правила сбора, транспортировки, регистрации, хранения биоматериала. 4. Изучить методы определения физических свойств мочи (количество, цвет, запах, прозрачность, относительная плотность). Студент должен знать: 1. Строение и функции мочевыводящей системы. Строение почечного фильтра. Механизм образования мочи. 2. Сан.-эпид. режим и ТБ в общеклиническом отделе лаборатории. 3. Нормативные документы, регламентирующие работу КДЛ и деятельность лабораторного техника (технолога). Студент должен уметь: 1. Осуществлять подготовку рабочего места, лабораторного оборудования и посуды для проведения клинических исследований мочи с соблюдением техники безопасности и противопожарной безопасности; 2. Определять физические свойства мочи. 3. Осуществлять регистрацию результатов лабораторного исследования мочи (оформление бланков анализа). 4. Давать правильную клиническую оценку физических свойств мочи. 5. Осуществлять утилизацию мочи, дезинфекцию, предстерилизационную подготовку и стерилизацию посуды. Средства достижения поставленной цели: 1. Работа с конспектами, учебной и специальной литературой. 2. Подготовка к практическим занятиям с использованием методических рекомендаций преподавателя, выполнение и оформление практических работ. 3. Самостоятельное изучение нормативных документов, регламентирующих работу КДЛ, деятельность лабораторного техника (приложение №2). 4. Работа с информационными средствами обучения на электронных и бумажных носителях. Оборудование учебного кабинета и рабочих мест кабинета: посадочные места по количеству обучающихся; рабочее место преподавателя; специализированная мебель и оборудование. Технические средства обучения: компьютеры для оснащения рабочего места преподавателя и обучающихся; технические устройства для аудиовизуального отображения информации; аудиовизуальные средства обучения (презентация, учебный видеосюжет). Результатом освоения урока является: Формирование практических профессиональных умений и первоначального практического опыта, в том числе профессиональными (ПК) и общими (ОК) компетенциями: ПК 1.1. Готовить рабочее место для проведения лабораторных общеклинических исследований. ПК 1.2. Проводить лабораторные общеклинические исследования биологических материалов; ПК 1.3. Регистрировать результаты проведенных исследований. ПК 1.4. Проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и стерилизацию использованной лабораторной посуды, инструментария, средств защиты. ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей профессии, проявлять к ней устойчивый интерес. ОК 2. Организовывать собственную деятельность, выбирать типовые методы и способы выполнения профессиональных задач, оценивать их эффективность и качество. ОК 6. Работать в коллективе и команде, эффективно общаться с коллегами, руководством, пациентами. ОК 9. Ориентироваться в условиях смены технологий в профессиональной деятельности. ОК 13. Организовывать рабочее место с соблюдением требований охраны труда, производственной санитарии, инфекционной и противопожарной безопасности. I модуль. Теоретическая часть с элементами самостоятельной работы Задание №1. анализу мочи. Изучите и законспектируйте общие сведения по общему клиническому Лабораторное исследование любого биологического материала начинается с определения его физических свойств, в которое входит определение: количества; цвета; запаха; прозрачности; удельного веса (или относительной плотности); определение наличия примесей видимых не вооруженным глазом (слизь, хлопья, гной и т.д.). бщий анализ мочи включён в перечень обязательных исследований, которые следует проводить всем первично обратившимся больным независимо от предполагаемого диагноза Для того чтобы получить достоверные результаты исследования необходимо строго соблюдать правила сбора, транспортировки и хранения биологического материала, которые должны довести до пациента медицинская сестра, лаборант или его лечащий врач. Существует общепринятый алгоритм исследования мочи: 1. Забор материала. 2. Исследование физических свойств. 3. Исследование химических свойств. 4. Микроскопическое исследование осадка. 5. Бактериологическое исследование. О Забор материала Лабораторное исследование мочи должно производиться у всех здоровых и больных людей независимо от характера их заболевания. Для клинического анализа необходимо 100 - 200 мл первой утренней мочи, которую собирают в чистую сухую стеклянную посуду либо пластмассовые контейнеры, с закручивающейся крышкой заводского производства, предназначенные для сбора мочи. Перед забором мочи необходим туалет наружных половых органов либо взятие мочи катетером. На посуду с мочой наклеивают этикетку с указанием фамилии и инициалов больного, номера палаты и отделения, диагноза и характера исследования (общий анализ, исследование на сахар и ацетон и др). У детей грудного возраста мочу собирают в одноразовые, стерильные контейнеры из прочного полиэтилена на липкой основе, предназначенные как для девочек, так и для мальчиков. Они очень удобны в применении и не вызывают болезненных ощущений у ребенка. Задание №2. Законспектируйте общие правила подготовки проб (мочи) на различные лабораторные исследования. ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПРИ ПОДГОТОВКЕ К ИССЛЕДОВАНИЯМ МОЧИ: Сбор мочи пациент проводит самостоятельно (исключение составляют дети и тяжелобольные), как можно тщательнее соблюдая правила гигиены. Предварительный туалет наружных половых органов: у женщин - стерильным ватным тампоном, смоченным теплой мыльной водой проводится туалет наружных половых органов (обработка половых губ движением тампона спереди и вниз); высушивается чистой салфеткой, предварительно проглаженной горячим утюгом. у мужчин - проводится туалет наружного отверстия мочеиспускательного канала теплой водой с мылом, затем промывается теплой водой и высушивается чистой салфеткой, предварительно проглаженной горячим утюгом. Нельзя собирать мочу во время менструации. После проведения цистоскопии анализ мочи можно назначать не ранее, чем через 5-7 дней. Сбор суточной мочи Собрать мочу в течение 24 часов на обычном питьевом режиме (1,5-2 л в сутки): В 6-8 часов утра освободить мочевой пузырь (эту порцию мочи вылить). В течение 24 часов собрать мочу в чистый сосуд емкостью не менее 2 л. Во время сбора емкость с мочой необходимо хранить в прохладном месте (оптимально - в холодильнике на нижней полке при +4º +8° С), не допуская ее замерзания. Последнюю порцию мочи собрать точно в то же время, когда накануне был начат сбор. Измерить количество мочи, отлить 50-100 мл в Общий анализ мочи Для общего анализа используют первую утреннюю порцию мочи (предыдущее мочеиспускание должно быть не позже 2-х часов ночи). Провести туалет наружных половых органов. Мужчинам при мочеиспускании полностью оттянуть кожную складку и освободить наружное отверстие мочеиспускательного канала. Женщинам раздвинуть половые губы. Первые несколько миллилитров мочи слить в унитаз. Всю порцию утренней мочи собрать в сухой чистый контейнер при свободном мочеиспускании. Отлить 40-50 миллилитров от общего объема мочи в специальный контейнер и плотно закрыть крышкой. Нельзя брать мочу из судна, горшка. Собранную мочу сразу доставить в лабораторию. Допускается хранение мочи в холодильнике (при t +2º +4° С), но не более 1,5 часов. Анализ мочи по Нечипоренко Собрать мочу утром (сразу после сна) по методу 3-х стаканной пробы: начинать мочиться в унитаз, среднюю порцию собрать в посуду для лабораторного исследования, заканчивать - в унитаз. Вторая порция мочи должна преобладать по объему. В лабораторию доставить среднюю порцию мочи в специальном контейнере. Сообщить время сбора мочи регистратору. Допускается хранение мочи в холодильнике (при t +2° +4°), но не более 1,5 часов. чистый контейнер. Обязательно написать на контейнере объем мочи, собранной за сутки. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ПРОБЫ Анализ мочи по Зимницкому Собрать мочу в течение 24 часов на обычном питьевом режиме (1,5-2 л в сутки), учитывая выпитое количество жидкости за сутки. В 6 часов утра освободить мочевой пузырь (эту порцию мочи вылить). Через каждые 3 часа в течение суток собирать мочу в отдельные емкости, на которых указывать время сбора и номер порции. Все собранное количество мочи в 8 контейнерах доставить в лабораторию. Всего 8 порций: 1 порция - с 6-00 до 9-00 утра, 2 порция - с 9-00 до 12-00, 3 порция - с 12-00 до 15-00, 4 порция - с 15-00 до 1800, 5 порция - с 18-00 до 21-00, 6 порция - с 21-00 до 2400, 7 порция - с 24-00 до 3-00, 8 порция - с 3-00 до 6-00 часов. Проба Реберга (креатинин крови, креатинин БИОХИМИЯ МОЧИ При подготовке к биохимическому анализу мочи суточной мочи) Перед проведением пробы необходимо обратите внимание на то, какую мочу необходимо избегать физических нагрузок. собирать (разовую или суточную) для каждого вида Исключить крепкий чай, кофе, алкоголь. анализа. Моча собирается в течение суток: первая Выше указаны правила сбора суточной и утренняя порция мочи сливается в унитаз, все разовой мочи. последующие порции мочи, выделенные в течение дня, Сбор мочи на определение оксалатов ночи и утренняя порция следующего дня собираются в Материалом для исследования служит только одну емкость, которая хранится в холодильнике (t +4° разовая моча. +8° С) в течение всего времени сбора (это необходимое условие). После завершения сбора мочи содержимое емкости измерить, обязательно перемешать и сразу же отлить в специальный контейнер, который необходимо доставить в лабораторию. Объем суточной мочи сообщить процедурной медсестре. После этого берется кровь из вены для определения креатинина. ИССЛЕДОВАНИЯ МОЧИ НА ГОРМОНЫ Анализ мочи на катехоламины СБОР МОЧИ ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО Перед плановым сбором мочи для определения ИССЛЕДОВАНИЯ катехоламинов в течение 3-х дней нельзя применять Посев мочи (с определением чувствительности к препараты, содержащие раувольфию, теофиллин, антибиотикам) нитроглицерин, кофеин, этанол. Мочу собрать в стерильный контейнер. Если возможно, не принимать другие ПЕРВЫЕ 15 мл МОЧИ СЛИТЬ В УНИТАЗ. лекарственные средства, а также пищевые продукты, Последующие 3-10 мл собрать в стерильный содержащие серотонин (шоколад, сыры и другие контейнер, плотно закрутить крышку. молочные продукты, бананы). Доставить биоматериал в лабораторию в течение Не употреблять алкоголь. 1,5-2 часов после сбора. Допускается хранение Избегать физической нагрузки, стрессов, биоматериала в холодильнике при t +2 +4° С не более 3курения, болевых воздействий, которые вызывают 4 часов. физиологический подъём катехоламинов. Предварительно на дно чистой ёмкости, в которую будет собираться моча, высыпать 10 - 15 грамм, купленного в аптеке или магазине порошка лимонной кислоты. Первую порцию мочи сливают в унитаз, засекают время и собирают мочу в ёмкость с консервантом ровно в течение суток, последнее мочеиспускание в сосуд должно быть через 24 часа от засечённого времени (например, с 8.00 утра до 8.00 утра следующего дня). Возможен сбор мочи за 12, 6, 3 часа или разовая порция, лучше в дневное время. В конце периода сбора измерить общий объем мочи, выделенной за сутки, перемешать её, отлить часть в специально выданный контейнер и сразу принести на исследование. При сдаче материала обязательно отметьте время сбора и общий объём мочи. Определения ДПИД в моче Сбор мочи произвести до 10 утра. Собрать и доставить в лабораторию 1-ю или 2ю утреннюю порцию мочи. При доставке в лабораторию позже указанных сроков результаты посева мочи могут быть недостоверны. Сбор мочи необходимо проводить до начала медикаментозного лечения и не ранее 5 дней после проведенного курса лечения. Сбор мочи на определение UBC (антиген рака мочевого пузыря) Рекомендуется производить забор утренней порции мочи. Исследованию подлежит произвольная порция мочи, находившаяся в мочевом пузыре 3 часа и более. Биоматериал доставляется в лабораторию в течение 3-х часов после сбора в специальном контейнере С охранение мочи Исследования должны проводиться со свежесобранной мочой или она должна храниться в холодильнике не более 1,5 ч. При невозможности использования для анализа свежей мочи необходимо применять следующие консервирующие вещества: 1. толуол (С6Н5СН3) — наиболее подходящей консервант (2 мл на 100 мл мочи); 2. тимол (С10Н14О) — кристалл тимола на 100—150 мл мочи, может давать ложноположительную пробу на белок; 3. формалин — 1 капля на 100 мл мочи, может осаждать белки и восстанавливать реактив Бенедикта; 4. борная кислота (Н3ВО3) — 0,3 г на 120 мл мочи, возможен рост дрожжей, в осадок выпадают кристаллы мочевой кислоты Исследование физических свойств 1. Количество мочи Количество выделяемой за сутки мочи (диурез) в норме составляет в среднем 50 - 80% выпитой жидкости и колеблется от 1000 до 2000 мл. Количество доставленной мочи на общий анализ (обычно 150–200 мл) не позволяет делать какихлибо умозаключений о нарушениях суточного диуреза. Количество доставленной мочи на общий анализ влияет только на возможность определения удельного веса мочи (относительной плотности). Например, для определения удельного веса мочи при помощи урометра требуется не менее 100 мл мочи. При определении удельного веса при помощи тест-полосок можно обойтись и меньшим количеством мочи, но не менее 15 мл. Измерение производят с помощью мерной посуды по нижнему мениску (уровню жидкости). 2. Цвет мочи В норме моча имеет соломенно-жёлтый цвет. Цвет мочи в норме колеблется от светло-желтого до насыщенного желтого и обусловлен содержащимися в ней пигментами: урохромом А, урохромом Б, уроэтрином, урорезином и др. Насыщенность соломенно-жёлтого цвета мочи зависит от концентрации растворённых в ней веществ. При полиурии разведение больше, поэтому моча имеет более светлую окраску, при уменьшение диуреза приобретает насыщенно-жёлтый оттенок. Окраска меняется при приёме лекарственных препаратов (салицилаты и др.) или употреблении некоторых пищевых продуктов (свекла, черника). Патологически изменённая окраска мочи бывает при гематурии (вид мясных помоев), билирубинемии (цвет пива), при гемоглобинурии или миоглобинурии (чёрный цвет), при лейкоцитурии (молочно-белый цвет). Определяют цвет простым осмотром, после предварительного отстаивания в проходящем свете на белом фоне. Цвет мочи 1. Бесцветный Причины изменения цвета Разбавление, диабет, прием диуретиков или алкоголя 2. Молочно-белый Гнойные заболевания мочеполового тракта, хилурия 3. Оранжевый Лихорадка, повышенное потоотделение, концентрированная моча 4. Красноватый Макрогематурия, гемоглобинурия 5. Темно-желтый, иногда с зеленовато-бурым оттенком Выведение с мочой желчных пигментов при паренхиматозной или механической желтухе. При механической желтухе моча зеленовато- жёлтая, при паренхиматозной – зеленовато-бурая (цвет пива), но эти отличия не всегда бывают чёткими 6. Зеленовато- жёлтый 7. Грязно-синий или зелёный Большое содержание гноя Гниющая моча при тифе или холере; метиленовый синий 8. Тёмно-коричневый, коричневокрасный или жёлтый Сверхконцентрированная моча, острые лихорадочные состояния, билирубинурия 9. Коричневый, коричневочёрный или чёрный Кровотечение в мочевом тракте (при кислой моче); гемоглобинурия; порфирия; метгемоглобинурия Изменения цвета мочи при приеме лекарственных препаратов 1. Красный Приём амидопирина, сантонина (при щелочной реакции мочи) 2. Розовый Приём ацетилсалициловой кислоты в больших дозах 3.Коричневый Фенол, крезол, лизол, медвежьи ушки, активированный уголь 4.Темно-коричневый Салол, нафтол 3. Прозрачность мочи В норме свежевыпущенная моча совершенно прозрачна. Мутность мочи обусловлена наличием в ней большого количество клеточных образований, солей, слизи, бактерий, жира. Помутнение мочи также может указывать на микрогематурию, однако в большинстве случаев является признаком инфекции (то есть бактериурии). Обратите внимание: визуальный анализ мочи можно использовать в качестве предварительного теста на наличие инфекции мочевыводящих путей у пациентов без симптомов. В ходе проведённых исследований оказалось, что чувствительность визуальной экспертизы уриновых проб для диагностики бактериурии составляет 73%. 4. Запах мочи 3апах свежевыпущенной мочи здорового человека своеобразный, слабый ароматический, который, как считают, зависит от содержания в ней минимальных количеств летучих эфирных кислот. В норме запах мочи нерезкий, неспецифический. При разложении мочи бактериями на воздухе или внутри мочевого пузыря, например, в случае цистита, появляется аммиачный запах. В результате гниения мочи, содержащей белок, кровь или гной, например, при раке мочевого пузыря, моча приобретает запах тухлого мяса. При наличии в моче кетоновых тел моча имеет фруктовый запах, напоминающий запах гниющих яблок. 5. Реакция мочи (рH) В норме реакция мочи кислая (рН от 5,0 до 7,0). Колебания рН мочи обусловлены составом питания: мясная диета обуславливает кислую реакцию мочи, растительная - щелочную. При смешенном питании образуются главным образом кислые продукты обмена, поэтому считается, что в норме реакция мочи кислая. Хранить мочу до проведения общего анализа надо в холодном помещении и не более 1,5 часов. При длительном стоянии в тёплом помещении моча разлагается, выделяется аммиак и рН сдвигается в щелочную сторону. Щелочная реакция занижает показатели относительной плотности мочи. Кроме того, в щелочной моче быстро разрушаются лейкоциты. Щёлочная реакция мочи характерна для хронической инфекции мочевыводящих путей, а также отмечается при поносах, рвоте. Кислотность мочи увеличивается при лихорадочных состояниях, сахарном диабете, туберкулёзе почек или мочевого пузыря, почечной недостаточности. Причины, влияющие на изменения рН мочи рН мочи Кислая Щелочная Причины, комментарии Кетоз — диабет, голодание, лихорадочные состояния. Системный ацидоз. Респираторный или метаболический ацидоз вызывает повышенную кислотность мочи Системный алкалоз. Обильная рвота, избыток щелочной пиши, гапервентиляция. Почечный ацидоз Ощелачивающая терапия Хронические инфекции мочевыводящих путей 6. Удельный вес мочи (относительная плотность мочи) В норме утренняя порция мочи должна иметь удельный вес в диапазоне 1,018-1,024. Относительная плотность мочи (плотность мочи сравнивается с плотностью воды) отражает функциональную способность почек к концентрированию и разведению и может использоваться как скрининг-тест при массовых осмотрах населения. Цифры относительной плотности утренней мочи, равные или превышающие 1,018, свидетельствуют о нормальной концентрационной способности почек и исключают необходимость её исследования с помощью специальных методов. Высокие или низкие цифры удельного веса (плотности) утренней мочи обязательно требуют выяснения причин, обусловивших эти изменения. Нормальные значения удельного веса мочи Для нормально функционирующих почек характерны широкие колебания удельного веса мочи в течение суток, что связано с периодическим приемом пищи, воды и потерей жидкости организмом (потоотделение, дыхание). Почки в различных условиях могут выделять мочу с относительной плотностью от 1,001 до 1,040. У здорового взрослого человека при обычной водной нагрузке удельный вес утренней порции мочи чаще всего составляет 1,015 - 1,020; у детей он составляет 1,003 - 1,025 (у новорожденных - до 1,018, с 5 дня жизни до 2 лет - 1,002 - 1,004, в 2 - 3 года - 1,010 - 1,017, в 4 - 5 лет - 1,012 - 1,020, с 10 лет - 1,011 - 1,025). Расшифровка анализа Высокий удельный вес мочи Относительная плотность мочи зависит от молекулярной массы растворённых в ней частиц. Белок и глюкоза повышают удельный вес мочи. Например, сахарный диабет можно заподозрить только по одному общему анализу мочи при цифрах относительной плотности от 1,030 и выше на фоне полиурии. Низкий удельный вес мочи Процесс образования мочи регулируется концентрационным механизмом почек и антидиуретическим гормоном (АДГ), вырабатываемым гипофизом. В присутствие антидиуретического гормона всасывается больше воды и в результате образуется небольшое количество концентрированной мочи. Соответственно в отсутствии антидиуретического гормона всасывания воды не происходит и выделяются большие объёмы разведённой мочи. В ыделяют три основные группы причин снижения удельного веса в общем анализе мочи: 1. избыточное потребление воды 2. нейрогенный несахарный диабет 3. нефрогенный несахарный диабет 1. Избыточное потребление воды (полидипсия) вызывает снижение концентрации солей плазмы крови. Чтобы защититься, организм выделяет большие объёмы разведённой мочи. Существует заболевание под названием непроизвольная полидипсия, которому подвержены, как правило, женщины с неустойчивой психикой. Ведущие признаки непроизвольной полидипсии — полиурия и полидипсия, низкая относительная плотность в общем анализе мочи. 2. Нейрогенный несахарный диабет — недостаточная секреция адекватного количества антидиуретического гормона. Механизм болезни заключается в неспособности почек удерживать воду посредством концентрации мочи. Если больного лишить воды, что диурез почти не уменьшается и при этом развивается обезвоживание. Относительная плотность мочи может снижаться ниже 1,005. Приём этилового спирта сопровождается обратимым подавлением секреции АДГ и кратковременной полиурией. Диурез возникает через 30-60 минут после приёма 25 г алкоголя. Объём мочи зависит от количества спирта, принятого в однократной дозе. Непрерывное употребление не приводит к устойчивому мочеотделению, несмотря на существование постоянной концентрации спирта в крови. 3. Нефрогенный несахарный диабет — понижение концентрационной способности почек, несмотря на нормальное содержание антидиуретического гормона в крови. Основные причины нефрогенного несахарного диабета: Метаболические расстройства: o Синдром Конна — сочетание полиурии с артериальной гипертонией, мышечной слабостью и гипокалиемией. Относительная плотность мочи может находиться в диапазоне от 1003 до 1012). o Гиперпаратиреоз — полиурия, мышечная слабость, гиперкальциемия и нефрокальциноз, остеопороз. Относительная плотность мочи снижается до 1002. Моча из-за значительного содержания солей кальция нередко имеет белый цвет. Редкие случаи врождённого нефрогенного несахарного диабета. Относительная плотность мочи может снижаться ниже 1,005. II модуль. Самостоятельная работа с исследовательским этапом Методические установки: прочитать и законспектировать методы определения физических свойств мочи в рабочих тетрадях; затем разбиться на группы по 2-3 человека и получить у преподавателя образцы биологического материала; провести самостоятельную исследовательскую работу пользуясь методическим материалом; полученные результаты исследования оформить согласно требованиям заполнения бланков анализа. Задание №1. Определение прозрачности мочи (мутность) Посуда, оборудование и реактивы: Примечание: Нормальная свежевыпущенная моча прозрачна. Мутность может быть вызвана: солями, клеточными элементами, бактериями. - цилиндр на 10 - 15 мл. - химические пробирки. - горелка. Ход исследования: - 10% раствор уксусной кислоты, раствор щелочи (NaОН). 1.В цилиндр емкостью 10 - 15 мл наливают мочу, отстаивают и через слой мочи читают печатный текст. 2. В пробирку наливают 2-3 мл мочи, нагревают. Исчезновение помутнения указывает на наличие уратов; усиление - на наличие фосфатов. Последние растворяются после добавления 2-3 капель 10% уксусной кислоты. Исчезновение помутнения от добавления нескольких капель щелочи говорит о присутствии кристаллов мочевой кислоты. Интерпретация полученных результатов: Степень мутности обозначают следующим образом: прозрачная моча - печатный текст читается легко; слабая степень мутности - легко читается средний и крупный печатный текст; умеренная - буквы различаются нечетко; большая - буквы неразличимы. Причину помутнения определяют следующим образом. Задание №2. Определение удельного веса мочи (относительной плотности) Посуда, оборудование, реактивы Ход определения: Примечание: Задание № 3. Законспектируйте раздел: клинические основы определения удельного веса мочи Цилиндр на 50-100мл. Урометр Моча 1.Мочу наливают в цилиндр ёмкостью 50 мл, избегая образования пены, 2.Затем осторожно опускают в нее урометр так, чтобы он не касался стенок цилиндра. 3. После прекращения колебаний урометра по положению нижнего мениска на его шкале отмечают относительную плотность. 1. Температура исследуемой мочи должна быть 15±3°С. 2.При малом количестве мочи ее предварительно разводят в 2—3 раза дистиллированной водой. Полученное значение относительной плотности затем умножают на степень разведения. 3. Повышение температуры исследуемой мочи на каждые 3°С снижает ОПл на 0,001, а наличие белка до 4 г/л повышает на 0,001. 4.Однако, при значительном содержании белка рекомендуется в величину ОПл вносить следующие поправки: при содержании белка 4—7 г/л вычитать 0,001; при 8—11 г/л — 0,002; при 12-15 г/л — 0,003; при 16—20 г/л — 0,004; свыше 20г/л —0,005. Клиническое значение определения удельного веса мочи При поражении почек легкой степени наблюдается незначительное нарушение их способности к концентрации и разведению и колебания удельного веса мочи составляют от 1,004 до 1,025. Колебания удельного веса мочи ниже 1,010 указывают на нарушение функции концентрирования и это состояние характеризуют как гипостенурию. Относительная гипостенурия наблюдается при здоровых почках у детей первого года жизни. Низкий удельный вес как временное явление наблюдается при алиментарной дистрофии, после обильного питья, при уменьшении отеков и др. При различных заболеваниях гипостенурия характерна в фазе полиурии для больных острым гломерулонефритом, при остром и хроническом интерстициальном нефрите, а также при гипофизарном и ренальным несахарном диабете с нарушением реабсорбции воды в дистальных отделах нефрона и собирательных трубочках. Гипостенурия свидетельствует о поражении почек при сохранности их концентрационной функции. Удельный вес мочи резко понижается при несахарном диабете (1,001 - 1,004) в результате нарушения реабсорбции. Появление монотонного характера удельного веса мочи, соответствующее таковому первичной мочи (1,010), называется изостенурией. Изостенурия свидетельствует о крайней стадии поражения почек. Высокий удельный вес - гиперстенурия, как правило, имеет место при олигурии (острый нефрит, образование в полости экссудата, образование или нарастание отеков, понос и др.). Высокий удельный вес при полиурии характерен для сахарного диабета. Максимальная верхняя граница удельного веса мочи у здоровых людей - 1,028, у детей до 3 - 4 лет - 1,025. Более низкий максимальный удельный вес мочи является признаком нарушения концентрационной способности почек. Принято считать, что минимальная нижняя граница удельного веса мочи, составляющая 1,003 - 1,004, свидетельствует о нормальной функции разведения почек. Задание №4. Зарисуйте в рабочих тетрадях необходимое оборудование для определения удельного веса мочи (рисунок №1). Задание №5. Определение мутности мочи Стеклянные химические пробирки 2-3 мл мочи 2-3 капли 30% CH3COOH 1-2 мл эфира Для каждого исследования берут в химическую пробирку не более 2-3 мл мочи, добавляют реактив, согласно представленной таблице №1. Таблица №1. Определение причин помутнения мочи Посуда, оборудование, реактивы Ход определения: Исследуемый материал Мутная моча Примечание: Реактив, процедура Нагревание Нагревание Результат Просветление Еще большее помутнение Просветление Причина помутнения Ураты Фосфаты 2-3 капли 30% Фосфаты CH3COOH 2-3 капли 30% Шипение и просветление Карбонаты CH3COOH 1-2 капли эфира, Просветление Жир встряхнуть Если после проведенных процедур просветления не произошло, помутнение мочи объясняется присутствием большого количества бактерий, лейкоцитов, грибов и сперматозоидов. Во всех случаях необходимо микроскопическое исследование мочи. Помутнение мочи от большого количества бактерий или спор грибов требует повторного исследования после правильного сбора мочи (туалет наружных половых органов и одноразовый Задание №6. Изучите и законспектируйте инструкцию №1. «Уход за рабочим местом при исследовании мочи» пластиковый контейнер для мочи на 100-150мл с завинчивающейся крышкой, в крайнем случае – чистая, сухая стеклянная посуда). 1. Весь отработанный биологический материал выливается в специальную емкость (утилизат), заполненную дез.раствором (3% р-р хлорамина на 1 час) или слить в канализацию; 2. Дезинфекция банок от мочи, пробирки, пипетки, цилиндры – обработать дезинфицирующим раствором; 3. Мытье лабораторной посуды (цилиндры, пробирки, пипетки) обработать сначала в моющем растворе, затем промыть в проточной водопроводной воде, затем ополоснуть 2-3 раза в дистиллированной воде, разместить для просушки; 4. Пипетки моют с помощью резиновой груши; 5. Цилиндры и пробирки с помощью ерша; 6. Банки, тазики – в моющем растворе с помощью ерша и затем прополаскивают в проточной водопроводной воде несколько раз. Выкладывают для сушки; 7. Стол обрабатывают сначала ветошью смоченной в дез.растворе, а затем водой. 8. Рабочее место сдают дежурному и преподавателю. Задание №7. Запишите нормальные показатели общего анализа мочи в рабочих тетрадях Нормы общего анализа мочи Показатели Результат Количество доставленной мочи на анализ Диагностического значения не имеет Цвет мочи Различные оттенки жёлтого цвета Прозрачность мочи Прозрачная Запах мочи Нерезкий, неспецифический Реакция мочи или рН Кислая, рН меньше 7 Удельный вес (относительная плотность) мочи 1,018 и более в утренней порции Белок в моче Отсутствует Глюкоза в моче Отсутствует Кетоновые тела в моче Отсутствуют Билирубин в моче Отсутствует Уробилиноген в моче 5-10 мг/л Гемоглобин в моче Отсутствует Эритроциты в моче (микроскопия) 0-3 в поле зрения для женщин 0-1 в поле зрения для мужчин Лейкоциты в моче (микроскопия) 0–6 в поле зрения для женщин 0–3 в поле зрения для мужчин Эпителиальные клетки в моче (микроскопия) 0-10 в поле зрения Цилиндры в моче (микроскопия) Отсутствуют Соли в моче (микроскопия) Отсутствуют Бактерии в моче Отсутствуют Задание №7. Изучите и кратко законспектируйте в рабочих тетрадях приложение №2 Приложение №2. Сан-эпид режим и техника безопасности работы в общеклинических лабораториях. Клинико-диагностическая служба, структура, задачи. Клинико-диагностическая лаборатория Среди диагностических служб важное место занимает клиническая лабораторная диагностика, которая дает практическому здравоохранению около 80% объема объективной диагностической информации, необходимой для своевременной постановки диагноза и контроля за эффективностью проводимого лечения. Лабораторная служба обеспечивает повседневные запросы лечащих врачей в наиболее распространенных исследованиях (КДЛ общего типа), экстренном их выполнении в ургентной практике (экспресс-лаборатории), а также серийное производство наиболее сложных исследований (специализированные лаборатории). Клинико-диагностическая лаборатория является диагностическим подразделением лечебно-профилактического учреждения и создается на правах отделения. КДЛ, независимо от подчиненности и формы собственности, должна иметь сертификат на избранный вид деятельности. Штаты КДЛ устанавливаются в соответствии с действующими нормативными документами с учетом местных условий или рассчитываются в соответствии с объемом работы (приложение 12 к Приказу МЗ РФ №380). Оснащение КДЛ осуществляется в соответствии с профилем и уровнем лечебно-профилактического учреждения (приложение 8 к Приказу МЗ РФ №380). КДЛ размещается в специально оборудованных помещениях, полностью соответствующих требованиям правил по устройству, эксплуатации и технике безопасности. Основными задачами КДЛ являются: проведение клинических лабораторных исследований в соответствии с профилем ЛПУ (общеклинических, гематологических, иммунологических, цитологических, биохимических, микробиологических и других, имеющих высокую аналитическую и диагностическую надежность) в объеме согласно заявленной номенклатуре исследований при аккредитации КДЛ в соответствии с лицензией ЛПУ. Объем выполняемых исследований не должен быть ниже минимального объема, рекомендуемого для ЛПУ данной мощности; внедрение прогрессивных форм работы, новых методов исследований, имеющих высокую аналитическую точность и диагностическую надежность; повышение качества лабораторных исследований путем систематического проведения внутрилабораторного контроля качества лабораторных исследований и участия в программе Федеральной системы внешней оценки качества (ФСВОК); оказание консультативной помощи врачам лечебных отделений в выборе наиболее диагностически информативных лабораторных тестов и трактовке данных лабораторного обследования больных; обеспечение клинического персонала, занимающегося сбором биологического материала, детальными инструкциями о правилах взятия, хранения и транспортировки биоматериала, обеспечивающими стабильность образцов и надежность результатов. Ответственность за точное соблюдение этих правил клиническим персоналом несут руководители клинических подразделений; повышение квалификации персонала лаборатории; проведение мероприятий по охране труда персонала, соблюдение техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима в КДЛ; ведение учетно-отчетной документации в соответствии с утвержденными формами. В соответствии с указанными задачами КДЛ осуществляет: освоение и внедрение в практику методов клинической лабораторной диагностики, соответствующих профилю и уровню лечебнопрофилактического учреждения; проведение клинических лабораторных исследований и выдачу по их результатам заключений. Деятельность КДЛ регламентируется нормативными документами Минздрава России и «Положением о клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» (приложение 1 Приказа МЗ №380 от 25.12.1997 г.). Основные нормативные документы Министерства здравоохранения России, регламентирующие деятельность КДЛ: Приказ Минздрава России от 25.12.1997 №380 «О состоянии и мерах по совершенствованию лабораторного обеспечения диагностики и лечения пациентов в учреждениях здравоохранения Российской Федерации». Приказ Минздрава России от 07.02.2000 №45 «О системе мер по повышению качества клинических лабораторных исследований в учреждениях здравоохранения Российской Федерации». Приказ Минздрава России от 21.12.1993 №295 «Об утверждении положения об аккредитации клинико-диагностических лабораторий». Приказ Минздрава России от 05.06.1996 №233 «Об аккредитации клиникодиагностических лабораторий в качестве экспертных». Приказ МЗ СССР от 23.04.1985 №545 «О дальнейшем совершенствовании контроля качества клинических лабораторных исследований». Приказ МЗ СССР от 24.12.1990 №505 «О дальнейшем совершенствовании и развитии системы межлабораторного контроля качества клинических лабораторных исследований». Приказ Минздрава России от 26.01.1994 №9 «О совершенствовании работы по внешнему контролю качества клинических лабораторных исследований». Приказ МЗ и МП РФ от 03.05.1995 №117 «Об участии клинико-диагностических лабораторий лечебно-профилактических учреждений России в Федеральной системе внешней оценки качества клинических лабораторных исследований». Приказ МЗ и МП РФ от 19.02.1996 №60 «О мерах по дальнейшему совершенствованию Федеральной системы внешней оценки качества клинических лабораторных исследований». Приказ МЗ СССР от 04.10.1980 №1030 «Об утверждении форм первичной документации учреждений здравоохранения». Приказ Минздрава России от 29.04.1997 №126 «Об организации работы по охране труда в органах управления, учреждениях, организациях и на предприятиях системы Министерства здравоохранения Российской Федерации». «Правила устройства техники безопасности и производственной санитарии в клиникодиагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», 1971. «Правила устройства, техники безопасности и производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР», 1981 г. «Положение о порядке учета, хранения, обращения, отпуска и пересылки культур бактерий, вирусов, риккетсий, грибов, простейших, микоплазм, бактериальных токсинов, ядов биологического происхождения», МЗ СССР от 18.05.1979. «Правила техники безопасности при эксплуатации изделий медицинской техники в учреждениях здравоохранения», МЗ СССР, 1985 г. «Инструкция по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», утверждена 17.01.1991 г. МЗ СССР. «Инструкция по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД» №42–28/39–90 от 05.06.1990 г. «Правила по эксплуатации и технике безопасности при работе на автоклавах» от 30.03.1991 г. Санитарные правила и нормы 2.1.7.728–99. «Правила сбора, хранения и удаления отходов в лечебно-профилактических учреждениях». Основные принципы работы фельдшеров-лаборантов и лаборантов КДЛ В клинико-диагностических лабораториях специалисты со средним профессиональным образованием могут занимать должности медицинского технолога (разряды 9–12), фельдшералаборанта или медицинского лабораторного техника (разряды 8–11), лаборанта (разряды 6–10) в соответствии постановлением министерства труда и социального развития №43 от 27.08.1997 г. Медицинский технолог. На должность медицинского технолога назначается специалист, имеющий среднее медицинское образование по специальности «лабораторная диагностика» (квалификация по диплому «медицинский технолог») и сертификат специалиста. Обязанности медицинского технолога: Медицинский технолог подчиняется заведующему КДЛ, а также врачу клинической лабораторной диагностики. Выполняет лабораторные исследования по разделу, определяемому заведующим КДЛ в соответствии с квалификационными требованиями и установленными нормами нагрузки: Подготавливает для работы реактивы, химическую посуду, аппаратуру, дезинфицирующие растворы. Регистрирует поступающий в лабораторию биологический материал для исследования, в том числе с использованием персонального компьютера, проводит обработку и подготовку материала к исследованию. Проводит взятие крови из пальца. При работе с приборами соблюдает правила эксплуатации согласно нормативно-технической документации. Осваивает новое оборудование и новые методики исследований. Проводит контроль качества выполняемых исследований и обеспечивает мероприятия по повышению точности и надежности анализов. Проводит стерилизацию лабораторного инструментария. Ведет необходимую документацию (регистрация, записи в журналах, бланки результатов анализа, заявки на реактивы, учет своей работы, составление отчета и т. д.). Выполняет поручения заведующего КДЛ по материально-техническому обеспечению лаборатории. Повышает профессиональную квалификацию не реже 1 раза в 5 лет, участвует в занятиях для сотрудников со средним медицинским образованием. Соблюдает правила техники безопасности и производственной санитарии. Лабораторный техник На должность лабораторного техника назначается специалист, имеющий среднее медицинское образование по специальности «лабораторная диагностика» и квалификацию «медицинский лабораторный техник» («фельдшер-лаборант») и сертификат специалиста. В обязанности фельдшера-лаборанта входит: Выполнение лабораторных исследований в соответствии с установленными нормами нагрузки и квалификационными требованиями. Подготовка реактивов, химической посуды, аппаратуры, дезинфицирующих растворов. Регистрация поступающего в лабораторию биологического материала для исследования, в том числе с использованием компьютера, обработка материала и подготовка к исследованию. Взятие крови из пальца. Стерилизация лабораторного инструментария. Ведение необходимой документации (регистрация, записи в журналах, бланках результатов анализа). Выполнение поручений заведующего КДЛ по материально-техническому обеспечению лаборатории. Участие в занятиях для сотрудников со средним медицинским образованием. Соблюдение правил техники безопасности и производственной санитарии. Повышение профессиональной квалификации в установленном порядке. Медицинский лабораторный техник подчиняется заведующему КДЛ, а также врачу клинической лабораторной диагностики и несет ответственность за невыполнение своих обязанностей. Лаборант КДЛ На должность лаборанта клинико-диагностической лаборатории назначается специалист, имеющий среднее медицинское образование, или другие специалисты, допускаемые к работе лаборанта по действующим нормативным документам, прошедшие переподготовку по утвержденной программе и получившие сертификат лаборанта. Лаборант подчиняется заведующему КДЛ, а также врачу клинической лабораторной диагностики. Обязанности лаборанта: Выполняет лабораторные исследования по разделу, определяемому заведующим лабораторией в соответствии с квалификационными требованиями и установленными нормами нагрузки. Подготавливает для работы реактивы, химическую посуду, аппаратуру, дезинфицирующие растворы. Регистрирует поступающий в лабораторию биологический материал для исследования, проводит его обработку и подготовку к исследованию. Проводит взятие крови из пальца. При работе с приборами соблюдает правила эксплуатации согласно нормативно-технической документации. Проводит стерилизацию лабораторного инструментария в соответствии с действующими инструкциями. Ведет необходимую документацию. Повышает профессиональную квалификацию, участвует в занятиях со средним медицинским образованием. Соблюдает правила техники безопасности и производственной санитарии. Лаборант несет ответственность за невыполнение своих обязанностей. Медицинские технологи, лабораторные медицинские техники и лаборанты имеют право: Вносить предложения вышестоящим должностным лицам по вопросам улучшения организации и условий труда. Периодически в установленном порядке проходить аттестацию на присвоение квалификационной категории. Обеспечение биологической безопасности при работе в лабораториях Работы в диагностических лабораториях сопряжены с неизбежным контактом персонала с различными видами биологических материалов, что приводит к риску заражения возбудителями инфекционных заболеваний, прежде всего вирусами ВИЧ и вирусных гепатитов В и С. В этой связи во всех клинико-диагностических лабораториях должен выполняться комплекс противоэпидемических мероприятий, регламентируемый Приказами и Положениями Минздрава России. Вне зависимости от вида лаборатории и ее подчиненности непосредственная ответственность за организацию и соблюдение противоэпидемического режима возлагаются на заведующего лабораторией и главного врача ЛПУ. Все мероприятия, направленные на предупреждение биологической опасности в условиях лаборатории, можно подразделить на 3 группы: организационные меры; применение индивидуальных и коллективных защитных средств; соблюдение дезинфекционного режима. Организационные мероприятия. В каждой лаборатории выделяется ответственный за технику безопасности, который обязан проводить соответствующий инструктаж среднего и младшего медицинского персонала при приеме на работу, а в последующем — не реже одного раза в квартал. О прохождении инструктажа делается отметка в специальном журнале. Для облегчения обучения младшего персонала в лабораториях с учетом местных условий составляются памятки по мерам безопасности, которые используются при периодическом инструктаже, а также размещаются непосредственно на рабочих местах. Помещения КДЛ можно использовать только по их прямому назначению, проведение в них какихлибо других работ не разрешается. Клинико-диагностическая лаборатория должна быть обеспечена водопроводом, горячим водоснабжением, канализацией, центральным отоплением. Помещения лаборатории должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией с механическим побуждением. Вентиляция во всех помещениях должна включаться до начала работы. Независимо от наличия приточно-вытяжной вентиляции в лабораториях должны быть легко открывающиеся форточки, кроме специальных боксов бактериологической лаборатории. В помещениях для проведения исследований мочи и кала, биохимических, серологических и гормональных исследований следует устанавливать вытяжные шкафы. При размещении оборудования особое внимание уделяют аппаратам — потенциальным источникам биологического аэрозоля. По этой причине рекомендуется размещать центрифуги в отдельных помещениях, в которых не предусматривается постоянное пребывание персонала. Ядовитые средства должны храниться в отдельной комнате в сейфах под замком. Ключи должны храниться у лица, ответственного за их хранение, — у заведующего КДЛ. Индивидуальные и коллективные защитные средства. Минимальный набор средств индивидуальной защиты при работе с биологическим материалом включает медицинский халат, шапочку и резиновые перчатки. При угрозе разбрызгивания биологического материала дополнительно используют маски, очки, клеенчатый фартук. Набор спецодежды, используемый при работе с материалом, подозрительным на инфицированность возбудителями I–II групп патогенности, регламентирован санитарными правилами «Безопасность работы с микроорганизмами I–II групп патогенности», СП 1.2. 011–94. Работа в лабораториях диагностики СПИД осуществляется в соответствии с режимом работы с возбудителями III группы патогенности. Смена спецодежды в обычных КДЛ осуществляется не реже 2 раз в неделю, а при возникновении аварийных ситуаций - немедленно. В случае попадания на одежду биологического материала, перед тем как снять ее, загрязненное место обрабатывают дезинфицирующим раствором. Стирка одежды на дому категорически запрещена. Резиновые перчатки обязательны для использования при работе не только с кровью, но и с любым биологическим материалом. Необходимо избегать уколов и порезов. Все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем. В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 минут тампоном, обильно смоченным 70%-м спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3%-м раствором хлорамина, 6%-м раствором перекиси водорода. При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки, их немедленно обрабатывают струей воды, 1%-м раствором борной кислоты или вводят несколько капель нитрата серебра; нос обрабатывают 1%-м раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70%-м спиртом или 1%-м раствором перманганата калия. Запрещается пипетирование крови ртом; следует использовать автоматические пипетки, а при их отсутствии — резиновые груши. Важный этап в предупреждении внутрилабораторного заражения — грамотная транспортировка биологического материала в лабораторию. Материал должен быть помещен в надежно закрывающуюся посуду, сопроводительная документация должна прикладываться в отдельном целлофановом пакете. Для доставки материала в центральную диагностическую лабораторию из отделений больницы используют специальные металлические или пластмассовые закрывающиеся ящики. После разгрузки они обязательно обрабатываются дезинфицирующими растворами. Распаковка материала, доставленного в лабораторию, проводится в специально отведенном для этого месте. Персонал работает в перчатках, а емкости с материалом помещают на эмалированные или металлические подносы. Соблюдение дезинфекционного режима Лабораторные инструменты, иглы, капилляры, предметные стекла, пробирки, меланжеры, счетные камеры, кюветы фотоэлектроколориметра, пипетки, наконечники, резиновые груши и другая посуда после каждого использования должны подвергаться дезинфекции. Дезинфекция – это уничтожение патогенных и условно условно-патогенных микроорганизмов на всех поверхностях организма (на полу, на стенах, выключателей, жёсткой мебели, на посуде). Задачи: является предупреждение или ликвидация накопления размножения и распространение возбудителей заболеваний дезинфекция может быть очаговой и профилактическая. Профилактическая задача - для защиты людей от заражения проводится в виде текущей ежедневной влажной уборке 1 раз в день. Применяют 4 вида дезинфекций: 1) Механический - проветривание и вентиляция помещения. Стирка белья, обработка поверхности пылесосом. Протирание поверхности влажной ветошью. 2) Физический - высокотемпературной обработке используется кипячение в дистиллированной воде или в воде с добавлением питьевой соли кроме того используется паровой метод и воздушный метод (сухожаровой шкаф) эти методы надёжные, безопасные, экологически чистые. 3) Химический - мед. предметы обрабатываются с помощью в жидком, газообразном состоянии. Требования: дез.раствор должен быть налит в пластмассовые, стеклянные или эмалью покрыты без повреждения с крышками емкости, могут быть использованы специальные ёмкости внутри с решётками. Обязательно на ёмкости с растворами должны быть: название дез.раствора, срок приготовления, и срок гордости. 4) Биологический - используется редко основан на использование антагонизмом различных видов микроорганизма. При использовании бактериофагов (вирусов бактерий) уничтожаются стафилококки, брюшнотифозные бактерий. Он используется в коммунальной сфере для обеззараживания сточных вод. Использованные изделия промывают в емкости с водой. Промывные воды обеззараживают кипячением в течение 30 мин. или засыпают сухой хлорной известью в соотношении 200 г на 1 л, перемешивают и обеззараживают в течение 60 мин. Промытые изделия кипятят в закрытой емкости в воде 30 мин. или в 2%-м растворе соды в течение 15 мин. (В случае кипячения изделий в 2%-м растворе соды дальнейшая предстерилизационная очистка не проводится). Лабораторные инструменты могут быть обеззаражены погружением в дезинфицирующий раствор на 60 мин. В качестве дезинфицирующих используются следующие растворы: 3%-й раствор хлорамина; 6%-й раствор перекиси водорода 6%-й раствор перекиси водорода с 0,5%-м моющим средством; 4%й раствор формалина; 0,5%-й раствор нейтрального гипохлорита кальция; 0,5%-й сульфохлорантин. Изделия должны быть полностью погружены в раствор. При дезинфекции изделий, имеющих внутренние каналы, раствор дезинфектанта сначала прокачивают через них с помощью груши для удаления остатков биологического материала, а затем погружают в новую емкость, заполненную дезраствором. Емкости для дезрастворов должны быть четко промаркированы и иметь крышки. В маркировке емкости указывают: название дезраствора, его концентрацию, назначение и дату приготовления. Растворы дезинфектантов используются однократно. Каждая партия сухих хлорсодержащих дезинфектантов перед использованием должна подвергаться контролю на содержание активного хлора. Растворы перекиси водорода готовят ежедневно, хлорамина — на две недели, хлорной извести, НГК — на шесть дней. Замена дезраствора в рабочих емкостях проводится ежедневно. Кварцевые, стеклянные, пластмассовые кюветы измерительной аппаратуры, пластиковые пробирки аппаратуры обеззараживают погружением в 6%-й раствор перекиси водорода и промывают проточной водой. С предметных стекол с фиксированным и окрашенным мазком крови после проведения микроскопии удаляют остатки иммерсионного масла, стекла кипятят в мыльном растворе не менее 15 мин. до полного отхождения краски, затем промывают проточной водой, подсушивают на воздухе и протирают. Остатки крови, мочи, спинномозговой жидкости, пробы, содержащие разведенную сыворотку без добавления кислот, щелочей сливают в специальную тару и обеззараживают сухой хлорной известью в соотношении 1:5 в течение 1 часа. Посуду из-под мочи, кала обрабатывают дезраствором, но не стерилизуют. Для обеззараживания поверхностей рабочих столов, емкостей для транспортировки материала и т. п. проводят их двукратное обтирание ветошью, смоченной 6%-м раствором НГК, 0,5%-м раствором сульфохлорантина. Использованную ветошь сбрасывают в специально выделенную емкость с дезинфицирующим раствором, маркированную «Для дезинфекции использованной ветоши». Перчатки после окончания работы обеззараживают погружением в 3%-й раствор хлорамина или 6%й раствор перекиси водорода на 1 час. Одноразовый инструментарий и посуду утилизируют в паровом стерилизаторе (режим: температура 132 градуса; давление — 2 кгс/кв.см; время — 30 минут), после чего выбрасывают. Эффективность обеззараживания при этом контролируют по расплавлению химического теста. При работе в бактериологических лабораториях с микроорганизмами III–IV групп патогенности в дополнение к вышеизложенному соблюдается ряд правил, обусловленных присутствием заведомо инфицированного материала и чистых культур микроорганизмов. Работа с патогенными микроорганизмами возможна только после получения соответствующей лицензии в органах Госсанэпиднадзора России в соответствии с постановлением Правительства РФ от 3.04.1996 г. №390. В помещениях, предназначенных для работы с инфицированным материалом, запрещается прикасаться к исследуемому материалу руками, все манипуляции с ним, а также с культурами микроорганизмов проводятся только с помощью инструментов. Посевы следует выполнять вблизи зажженной горелки, обжигая в процессе работы края пробирок, петли и шпатели. Запрещается переливать инфицированные жидкости из сосуда в сосуд через край, оставлять на столах нефиксированные мазки. Весь инструментарий должен быть дезинфицирован обжиганием или погружен в банки с дезинфицирующим раствором непосредственно после использования. После завершения работ персонал бактериологических лабораторий обязан провести дезинфекцию рабочего стола и рук, бокса, помещения. Полы моют с применением дезинфицирующего раствора, мебель и оборудование протирают смоченной дезрастворами ветошью. Помещение бокса не реже 1 раза в неделю моют горячей водой с моющими и дезинфицирующими средствами. По окончании уборки помещения облучают бактерицидными лампами в течение 30–60 мин. Лампы устанавливают из расчета мощности 2,5 Вт/метр кубический. Влажная уборка помещений лаборатории проводится ежедневно с применением моющих и дезинфицирующих средств. Один раз в месяц в помещениях, где проводится работа с кровью, сывороткой, делают генеральную уборку с использованием 3%-го раствора хлорамина, хлорной извести и т. д. Во время генеральной уборки тщательно моют стены, оборудование, мебель, проводят очистку полов от наслоений, пятен и т. д. Генеральные уборки проводят по утвержденному графику. Предстерилизационная очистка и стерилизация После дезинфекции лабораторный инструментарий, соприкасающийся с раневой поверхностью или слизистыми оболочками обследуемого, подлежит обязательной предстерилизационной очистке и стерилизации в соответствии с ОСТ 42–21–2–85 «Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения». Предстерилизационная обработка - это удаление всех мелких частиц оставшиеся на медицинских исследований после дезинфекции. Используются средства, в состав которых входят вода перекись водорода моющее средство. Предстерилизационную очистку проводят с применением моющих растворов. Для приготовления 1 л моющего раствора отмеривают 5 г стирального порошка без биодобавок, 16 мл 33%-ого раствора перекиси водорода и 979 мл воды. Моющий раствор можно использовать в течение суток, если цвет раствора не изменился. При проведении очистки изделия замачивают при полном погружении в моющем растворе, подогретом до +50°С, на 15 минут. Каждое изделие моют в растворе при помощи ерша и ватномарлевого тампона не менее 0,5 мин., затем ополаскивают проточной водой в течение 10 мин., а затем — дистиллированной водой. Качество предстерилизационной очистки изделий оценивают на наличие крови путем постановки амидопириновой или азопирамовой пробы, на наличие остаточных количеств щелочных компонентов моющего вещества — путем фенолфталеиновой пробы. Азопирамовая проба: Приготовить: 1% изделий каждого наименования, не менее 3-5 штук; исходный раствор азопирама, приготовленный аптекой; 3% перекись водорода; марлевые салфетки; стёкла с мазками крови; журнал контроля качества проведения предстерилизационной обработки Действия: 1. Приготовить рабочий раствор азопирама: смешать равные объёмы (в пропорции 1:1) исходного раствора азопирама и 3% перекиси водорода (полученный раствор годен в течение 1-2 часов). 2. Проверить активность рабочего раствора, капнув несколько капель на стекло с мазком крови. 3. Холодные изделия (не выше 25 °С) протереть салфеткой с раствором или нанести 3-4 капли рабочего раствора пипеткой, особенно в местах соединения. 4. Экспозиция 0,5-1 минута. 5. Чтение пробы: - розово-сиреневое окрашивание говорит об остатках крови; - бурое окрашивание говорит о наличии окислителей, моющего средства, ржавчины. 6. Независимо от результатов пробы изделия промыть водой или спиртом. 7. При положительной пробе вся партия изделий подлежит повторной обработке. 8. Запись результатов в журнал. Приготовление исходного раствора: На 1 литр раствора отвешивают 100 г амидопирина и 1,0-1,5 г солянокислого анилина. Вещества смешивают в сухой посуде и заливают 95% этиловым спиртом до объема 1,0 л. Смесь тщательно перемешивают до полного растворения ингредиентов. Готовый раствор может храниться в плотно закрытом флаконе в темноте при 4 °С в холодильнике - 2 месяца; в темноте при комнатной температуре (18-23 °С) - не более 1 месяца. Умеренное пожелтение реактива в процессе хранения без выпадения осадка не снижает его рабочих характеристик. Помните: Нельзя подвергать проверке горячие инструменты, а также держать раствор на ярком свету, при повышенной температуре (возле нагревательных приборов). Пригодность рабочего раствора азопирама проверяют в случае необходимости: 2-3 капли наносят на кровяное пятно. Если не позже, чем через 1 минуту появляется фиолетовое окрашивание, переходящее затем в сиреневый цвет, реактив пригоден к употреблению (может появиться буроватое окрашивание). Если окрашивание в течение 1 минуты не появляется, реактивом пользоваться нельзя. Амидопириновая проба Оснащение: растворы для реактива: 3% р-р перекиси водорода, 30% р-р уксусной кислоты, 5% спиртовой р-р амидопирина, проверить их сроки годности. Отдельные пипетки, имеющие маркировку, мензурка с маркировкой «Реактив», лоток с ватными тампонами, лоток с сухим инструментарием для пробы, прошедшим предстерилизационную очистку. 1. Приготовить реактив, смешав в равных количествах 3% р-р перекиси водорода, 30% р-р уксусной кислоты, 5% спиртовой р-р амидопирина разными промаркированными пипетками. 2. Нанести бесцветный реактив пипеткой «для реактива» на сухие предметы, прошедшие предстерилизационную очистку, на корпус и в полость инструмента, в просвет иглы и т.д. 3. Держать предмет над ватой или салфеткой, наблюдая за цветом стекающего реактива. 4. Оценить результат. При отрицательной пробе цвет реактива не изменится; 5. Провести ополаскивание и предстерилизационную обработку использованного для пробы инструмента (при отрицательной пробе). Примечание: читать реакцию в течение двух минут. Эта проба выявляет скрытую кровь на инструментах и определяет качество обработки инструментов от крови. При положительной пробе цвет реактива изменится на сине-фиолетовый. Самоконтроль в КДЛ проводят ежедневно, контролю подвергают не менее 1% обработанных изделий одного наименования, но не менее 3–5 единиц. При положительной пробе на кровь или моющее средство всю группу контролируемых изделий подвергают повторной обработке до получения отрицательных результатов. После предстерилизационной очистки проводят стерилизацию инструментария и посуды. Стерилизация - это полное уничтожение микроорганизмов и их спор. Методы, средства и режимы стерилизации изделий медицинского назначения определены стандартом ОСТ 42–21–2–85. Используемые в лабораторной практике методы стерилизации можно подразделить на несколько групп. 1. Физические методы: – стерилизация паром; – стерилизация воздушная; – стерилизация излучением. 2. Химические методы: – стерилизация газами; – стерилизация растворами. Стерилизация паром под давлением является наиболее универсальным методом. Она реализуется с помощью специального устройства — парового стерилизатора (автоклава). Выбор режима стерилизации определяется видом материала! К работе на паровых стерилизаторах допускаются только лица, прошедшие специальное обучение и имеющие удостоверение на право работы установленного образца. Не реже чем раз в 3 года знания такого лица подлежат повторной проверке с соответствующей отметкой в удостоверении. Воздушный метод стерилизации используется в случае, если обработке подвергаются изделия или материалы, которые нельзя стерилизовать паром, например, масла, порошки, а также изделия, выполненные из коррозирующих металлов, стекла и термостойких пластиков (силиконовой резины). Для проведения обработки используют воздушные стерилизаторы — ГИСС. В ОСТ 42–21–2–85 приводятся режимы стерилизации изделий медицинского назначения с использованием сухого горячего воздуха: 1) 180°С при времени экспозиции 60 минут. 2) 160°С при времени экспозиции 150 минут. Весь цикл работы стерилизатора включает время на разогрев стерилизатора, время на стерилизацию аппарата и обычно составляет 2–4 часа в зависимости от объема стерилизационной камеры и количества стерилизуемых изделий. В воздушные стерилизаторы разрешается укладывать только чистые и сухие изделия, причем последние либо помещаются в металлические контейнеры, либо упаковываются в пакеты из крафтбумаги. Швы на бумажных пакетах заклеивают клеем, состоящим из 10%-го поливинилового спирта или 5%го крахмала. В упаковке из бумаги время хранения стерильных изделий составляет не более 3-х суток. Изделия, простерилизованные без упаковки, должны быть использованы непосредственно после стерилизации. Контроль за проведением стерилизации предусматривает стерилизации и контроль стерильности изделия. проведение контроля режимов Сотрудники ЛПУ осуществляют самоконтроль режима стерилизации с помощью химических тестов, например, термохимических индикаторов, выпускаемых НПФ «Винар», которые меняют свой цвет в зависимости от способа и режима стерилизации. Наиболее достоверно оценить эффективность работы стерилизатора позволяет бактериологический метод. В нашей стране в соответствии с «Методическими указаниями по контролю работы паровых и воздушных стерилизаторов» (МУ №16/6–5 28.2.91) в качестве биотестов используют высушенные споры Bacillus Stearothermophilus (штамм G) — для контроля воздушных стерилизаторов. Химические методы стерилизации в лабораторной практике используются крайне редко, т. к. стерилизация растворами в условиях лаборатории нетехнологична. Простерилизованное изделие необходимо отмывать от стерилизанта большими объемами стерильной воды в асептических условиях, а сроки хранения стерильных изделий, перенесенных после обработки в заранее простерилизованные емкости, невелики (не более 3 суток). Меры безопасности при аварийных ситуациях в КДЛ Персонал лаборатории должен быть обучен действиям при аварийных ситуациях, а в лаборатории всегда должно иметься все необходимое для ликвидации их последствий. При проливе или разбрызгивании биоматериалов о происшествии необходимо поставить в известность зав. КДЛ, который определяет вид и объем дезинфекционных мероприятий. Все случаи аварий в КДЛ любого профиля подлежат обязательной регистрации во внутрилабораторном журнале по технике безопасности. В случае разрушения сосудов с материалом во время центрифугирования аварийные мероприятия начинают проводить не ранее чем через 30–40 минут после осаждения биологического аэрозоля. В гнездо ротора заливают на 60 минут один из дезинфицирующих растворов, после чего переносят содержимое гнезда в сосуд с дезраствором. Затем ротор, стенки и крышки центрифуги протирают ветошью, смоченной в дезрастворе. Непосредственно на рабочих местах должны находиться аптечки, содержащие стерильные ватные и марлевые тампоны, 70%-й спирт, 1%-й раствор нитрата серебра, 1%-й раствор протаргола, 0,05%-й раствор перманганата калия, 1%-й спиртовый раствор йода, лейкопластырь. При повреждении кожи из раны выдавливают кровь, после чего обрабатывают поврежденное место сначала 70%-м спиртом, а затем йодом. III Модуль. Контрольные вопросы и задания a) Ответьте на поставленные вопросы, используя рабочую тетрадь 1. Предмет, цели и задачи, лабораторных общеклинических исследований? 2. Место лабораторных общеклинических исследований среди других биологических наук? 3. Значение лабораторных общеклинических исследований в медицине для диагностики и контроля над лечением больных? 4. Краткий исторический обзор развития клинико-диагностической лабораторной службы? 5. Ученые, внесшие вклад в развитие лабораторно-диагностической науки? 6. Основные правила проведения клинического анализа мочи? 7. Взятие, хранение и транспортировка материала для клинических исследований? Особенности правил работы в клинической лаборатории? 8. Клиническая лаборатория, место работы медицинского лабораторного техника? Особенности соблюдения правил санитарно-эпидемиологического режима при проведении утилизации отработанного материала, в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений? 9. Значение клинических анализов в общем комплексе обследования больного? 10. Документы, регламентирующие санэпидрежим в лаборатории? 11. Документы, регламентирующие ТБ в лаборатории? 12. Требования к помещению лаборатории? 13. Требования к оснащению лаборатории? 14. Хранение реактивов в лаборатории? 15. Дезинфицирующее средства, применяемые в лаборатории? 16. Понятие «утилизация»? 17. Понятие «дезинфекция»? 18. Понятие «стерилизация»? 19. Проверка качества чистоты посуды? 20. Что входит в понятие «определение физических свойств мочи»? 21. Характеристика физических показателей мочи в норме: - количество мочи; - частота мочеиспусканий; - прозрачность мочи; - запах мочи; - цвет мочи; - относительная плотность мочи. 22. Клиническое значение определения данных показателей? b) Запишите в рабочей тетради термины и дайте им обозначение, используя изученный материал № 1 2 3 Термин Гипостенурия Гиперстенурия Изостенурия Обозначение Домашнее задание: 1. Знать теоретический и практический материал. 2. Отвечать на контрольные вопросы. 3. Знать термины. 4. Подготовить лекционный материал: - история развития КДЛ; - анатомо-физиологические особенности строения мочевыделительной системы; - процесс образования мочи (понятие первичная, вторичная моча); - понятие моча и ее составные компоненты; Литература для самостоятельной подготовки: А. Я. Альтгаузен "Клиническая лабораторная диагностика", Москва., Медгиз, 1959 г. А. В. Папаян, Н. Д. Савенкова "Клиническая нефрология детского возраста", СанктПетербург, СОТИС, 1997 г. Л. В. Козловская, А. Ю. Николаев. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. Москва, Медицина, 1985 г. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е. А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования под ред. Е. А. Кост. Москва "Медицина" 1975 г.