Экспертные исследования таблеток для похудания, содержащих

МИНИСТЕРСТВО ВНУТРЕННИХ ДЕЛ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ЭКСПЕРТНО-КРИМИНАЛИСТИЧЕСКИЙ ЦЕНТР
ЭКСПЕРТНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ТАБЛЕТОК
ДЛЯ ПОХУДАНИЯ, СОДЕРЖАЩИХ
КОНТРОЛИРУЕМЫЕ ВЕЩЕСТВА
Методические рекомендации
М о с к в а 2007
УДК 343.9
Одобрены и рекомендованы к опубликованию
Методическим и Редакционно-издательским советами ЭКЦ МВД России
Авторы: В.И. СОРОКИН, Г.В. ЛЮБЕЦКИЙ, М.А. МАКАРОВ, М.А. ДРОЗДОВ,
В.В. ГЛАДЫРЕВ, Ю.М. МОРГУНКОВА, В.П. МЕЛКОЗЕРОВ,
А.Н. СМИРНОВ
Сорокин В.И., Любецкий Г.В., Макаров М.А. и др.
Экспертные исследования таблеток для похудания, содержащих
контролируемые вещества: Методические рекомендации. – М.: ЭКЦ
МВД России, 2007. – 56 с., 61 ил., 3 табл., 3 прил., библиогр.
Приводится комплексная методика исследования таблеток для похудания, содержащих контролируемые вещества, с использованием хроматографических и спектральных методов анализа.
Для сотрудников экспертно-криминалистических подразделений МВД, ГТК,
ФСБ, ФСКН России.
© ЭКЦ МВД России, 2007
2
ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В настоящее время широкое распространение в незаконном
обороте в России получили препараты (таблетки и капсулы) для похудания, содержащие контролируемые вещества. Эти препараты
ввозятся в Россию нелегально и используются в качестве средств
для снижения веса. Их неконтролируемое употребление может привести к серьезным последствиям для организма человека.
Как правило, таблетки и капсулы для похудания, именуемые также
«тайскими таблетками», содержат в своем составе следующие вещества: амфетамин, амфепрамон, фентермин, фенфлурамин, МДМА, фенилпропаноламин, алпразолам, флунитразепам, хлордиазепоксид, диазепам, нитразепам, бисакодил, сибутрамин.
МДМА включен в Список I «Перечня наркотических средств,
психотропных веществ и их прекурсоров, подлежащих контролю в
Российской Федерации» как наркотическое средство. Амфетамин,
амфепрамон и фентермин включены в Список II в качестве наркотических средств и психотропных веществ, а фенилпропаноламин – в
Список IV прекурсоров указанного «Перечня». Кроме того, стереоизомер фенилпропаноламина – катин, согласно Списку I «Перечня»,
является психотропным веществом. Фенфлурамин, алпразолам, диазепам, хлордиазепоксид, нитразепам, сибутрамин и фенилпропаноламин включены в Список сильнодействующих веществ Постоянного комитета по контролю наркотиков. Отмечены случаи обнаружения в составе некоторых «тайских таблеток» психотропного вещества мазиндола.
Бисакодил не относится к контролируемым веществам. В состав
комплектов для похудания, кроме того, входят различные капсулы с
веществами растительного происхождения.
Для «тайских таблеток» в списках сильнодействующих веществ
имеется отдельная диспозиция: «таблетки и/или капсулы, содержащие в любой дозировке одно из перечисленных веществ: фентермин, диазепам, фенфлурамин, амфепрамон, алпразолам, фенилпропаноламин, хлордиазепоксид, в сочетании с другими лекарственными или фармакологически активными веществами (иногда именуемые обобщенным названием “Тайские таблетки”), применяемые по
курсовой программе коррекции веса».
Амфетамин и его производные (амфепрамон, фентермин, фенфлурамин, МДМА, фенилпропаноламин, сибутрамин) обладают анорексигенным действием (подавляют чувство голода и аппетит); бисакодил обладает слабительным действием; алпразолам, флунитразепам, хлордиазепоксид, нитразепам используются в качестве
3
успокаивающих средств, для нейтрализации стимулирующего действия производных амфетамина.
Амфепрамон (диэтилпропион, фепранон, α-бензоилтриэтиламин,
2-диэтиламинопропиофенон), брутто-формула С13Н19NO; М. м. = 205,30.
В виде гидрохлорида представляет собой белый кристаллический порошок, растворимый в воде, этаноле, хлороформе, практически нерастворимый в диэтиловом эфире.
CH3
O
CH3
N
CH3
Фентермин (α,α-диметилбензэтанамин, α,α-диметилфенэтиламин, α-бензилизопропиламин), брутто-формула С10Н15N; М. м. = 149,23.
Представляет собой маслянистую жидкость, слабо растворимую в
воде, растворимую в этаноле, хлороформе и эфире. В виде гидрохлорида хорошо растворимый в воде, этаноле, хлороформе и практически нерастворимый в диэтиловом эфире.
CH3
NH2
H3C
Фенфлурамин (N-этил-α-метил-3-(трифторметил)бензэтанамин, N-этил-α-метил-м-(трифторметил)фенэтиламин, фенфлурамин),
брутто-формула С12Н16F3N; М. м. = 231,26. Практически нерастворимый в воде, растворимый в хлороформе. В виде гидрохлорида
представляет собой белый кристаллический порошок, растворимый
в соотношении 1:20 в воде, 1:10 в этаноле, 1:10 в хлороформе, практически нерастворимый в диэтиловом эфире.
CH3
CH3
NH
F
F
4
F
Фенилпропаноламин (норэфедрин, 2-амино-1-фенилпропан-1-ол),
брутто-формула C9H13NO; М. м. = 151,21. В виде гидрохлорида – белокремовый порошок, растворимый в соотношении 1:2,5 в воде, 1:9 в этаноле, практически нерастворимый в хлороформе и диэтиловом эфире.
OH
NH2
CH3
Амфетамин (другие названия – фенамин, бензедрин, адипан,
«крокодил») – синтетическое наркотическое средство стимулирующего действия. Впервые был синтезирован в 1887 г. в Германии.
Употребляется внутривенно или перорально; вызывает сильную психическую зависимость.
При употреблении амфетамина наблюдаются эйфория, тахикардия, расширение зрачков; повышается кровяное давление; появляются
потливость, озноб; могут возникнуть тошнота и рвота. Может наблюдаться аномальное поведение – повышенная агрессивность, чрезмерная настороженность, возбуждение и нарушение процессов мышления. Эффективная доза амфетамина – 10 мг; время действия 2–4 ч.
В незаконном обороте амфетамин встречается в виде порошкообразного продукта белого, желтого или коричневого цвета. Кроме
того, отмечены случаи появления амфетамина в виде таблеток с различными логотипами (аналогично таблеткам экстази).
Амфетамин-основание (брутто-формула C9H13N; М. м. = 135,21) –
бесцветная подвижная жидкость, растворимая в этаноле, диэтиловом эфире, хлороформе. Встречается, как правило, в виде сульфата.
Сульфат амфетамина представляет собой белый кристаллический
порошок, растворимый в воде, в соотношении 1:515 – в этаноле и
практически нерастворимый в хлороформе и диэтиловом эфире.
NH2
CH3
МДМА (3,4-метилендиоксиметамфетамин; другие названия –
Ecstasy, XTC, Adam, ESSENCE, Е, Cardillac), брутто-формула
C11H15NO2; М. м. = 193,24. В виде основания – бесцветная маслянистая жидкость, нерастворимая в воде, растворимая в этаноле, хлороформе и диэтиловом эфире. В виде гидрохлорида – кристаллическое вещество, растворимое в воде и этаноле, немного растворимое
в хлороформе и нерастворимое в диэтиловом эфире.
5
В незаконном обороте МДМА появился в конце 70-х гг. в виде
таблеток, капсул и порошков, содержащих 50–100 мг действующего
вещества.
CH3
O
HN
O
H3C
Диазепам (7-хлоро-1,3-дигидро-1-метил-5-фенил-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он, метилдиазепинон), брутто-формула C16H13ClN2O; М. м. =
284,75. Представляет собой белое или желтое порошкообразное вещество, плохо растворимое в воде, растворимое в соотношении 1:25
в этаноле, 1:2 в хлороформе, 1:39 в диэтиловом эфире, в ацетоне.
Диазепам является транквилизатором; снимает чувство тревоги.
CH3
O
N
N
Cl
Алпразолам (8-хлор-1-метил-6-фенил-4Н-[1,2,4]триазоло[1,4]бензодиазепин, алпразолам), брутто-формула С17Н13ClN4; М. м. = 308,77.
Представляет собой белое кристаллическое вещество, практически
нерастворимое в воде, растворимое в этаноле, метаноле и легко растворимое в хлороформе.
H3C
N
N
N
Cl
6
N
Флунитразепам (5-(2-фторфенил)-1,3-дигидро-1-метил-7-нитро2Н-1,4-бензодиазепин-2-он), брутто-формула С16Н12FN3O3; М. м. = 313,28.
Представляет собой белое или желтое твердое вещество, плохо растворимое в воде, растворимое в соотношении 1:172 в этаноле, 1:3 в
хлороформе, 1:300 в диэтиловом эфире.
CH3
O
N
O
+
N
N
O
F
Хлордиазепоксид (clopoxid, methaminodiazepoxide), брутто-формула С16Н14ClN3O; М. м. = 299,76. Представляет собой желтое кристаллическое вещество, чувствительное к свету, практически нерастворимое в воде, растворимое в соотношении 1:50 в этаноле, 1:130 в
диэтиловом эфире, плохо растворимое в хлороформе.
NH
CH3
N
+
N
Cl
O
-
Нитразепам (1,3-дигидро-7-нитро-5-фенил-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он), брутто-формула С15Н11N3O3; М. м. = 281,27. Представляет
собой желтое кристаллическое вещество, практически нерастворимое в воде, растворимое в соотношении 1:120 в этаноле, 1:45 в хлороформе, 1:900 в диэтиловом эфире.
O
H
N
O
+
N
N
O
7
Бисакодил (4,4´-(2-пиридилметилен)бисфенол диацетат), брутто-формула С22Н19NO4; М. м. = 361,39. Представляет собой белое
кристаллическое вещество, плохо растворимое в воде, растворимое
в соотношении 1:100 в этаноле, 1:35 в хлороформе, 1:170 в диэтиловом эфире; плохо растворимое в метаноле и растворимое в разбавленных кислотах. По структуре бисакодил близок к фенолфталеину
и также обладает слабительным действием.
N
CH3
CH3
O
O
O
O
Сибутрамин (1-(4-хлорфенил)-N,N-диметил-α-(2-метилпропил)циклобутанметамин), брутто-формула С17H26СClN; М. м. = 279,86. Гидрохлорид сибутрамина представляет собой кристаллическое вещество, растворимое в воде.
CH3
CH3
N
Cl
H3C
CH3
Амфетамин, амфепрамон, фентермин, фенфлурамин и МДМА
обладают стимулирующим действием на организм человека, одновременно подавляя аппетит, вызывая возбуждение и повышая артериальное давление.
Диазепам, флунитразепам, нитразепам, хлордиазепоксид, алпразолам относятся к производным бензодиазепина. Они стали широко
применяться в 50–60-х гг. XX в. В настоящее время являются
наиболее часто назначаемыми лекарствами в мире и относятся к
транквилизаторам, т. е. веществам, применяемым для снятия чувства тревоги, страха и эмоциональной напряженности. Бензодиазепины обладают также снотворным и успокаивающим действием.
Таким образом, действие так называемых «тайских таблеток»
основано на подавлении аппетита. Поскольку постоянный прием
производных амфетамина вызывает возбуждение, повышение артериального давления и нервозность, для успокоения в курс лечения
8
включают производные бензодиазепина. Одновременно в курс лечения включают вещества слабительного действия, как синтетические (бисакодил, фенолфталеин), так и растительного происхождения, содержащие пиперин, турмерон и хризофановую кислоту.
Хризофановая кислота содержится в растениях рода Rhamnus
(жостер), а также близкого к нему рода Frangula (крушина). Растения принадлежат семейству Rhamnaceae (крушиновые), имеют
огромный ареал произрастания, однако наибольшее распространение приходится на тропики и субтропики. Род Rhamnus и род
Frangula особенно обильно представлены в Юго-Восточной Азии,
Австралии, Капской области Африки, Северной Америке.
Кроме того, хризофановая кислота была обнаружена в растениях рода Cassia (кассия), принадлежащих семейству Fabaceae, Leguminosae (бобовые). Эти растения в диком виде произрастают в пустынных и полупустынных районах Африки и в Южной Аравии; по
литературным данным, культивируются в Азии. Более известны в
качестве лекарственного сырья: folium Sennae – лист сенны, александрийский лист.
Кора крушины (в частности, крушины ольховидной, или ломкой –
Frangula alnus Mill.), плоды жостера (в частности, жостера слабительного, или крушины слабительной – Rhamnus catartica L.),
лист сенны (в частности, кассии остролистной – Cassia acutifolia,
кассии туполистной – Cassia obovata Hayn.) применяются в медицине в качестве слабительного средства, а лист сенны, кроме того,
входит в сборы при лечении желчного пузыря. Действие перечисленных растений в качестве слабительного средства проявляется
преимущественно в толстом кишечнике.
Турмерон содержится в растении Curcuma longa L. (куркума
длинная, турмерик, гургемей, зарчава, желтый имбирь), принадлежащем семейству Zingiberaceae (имбирные). Родиной этого растения
являются Юго-Восточная Индия и Вьетнам; по литературным данным, культивируется в Индии, Китае, Индонезии, Шри-Ланке, Японии, на Филиппинах и т. д. Растение является одним из основных
компонентов смеси «карри». Корневище куркумы обладает желчегонным действием, усиливает секрецию желудка, снижает выделение и
кислотность желудочного сока при некоторых видах язвы желудка.
Пиперин содержится в растениях рода Piper (перец), принадлежащего семейству Piperaceae (перечные). В тибетской медицине, а
также в Индии, Монголии растения рода Piper (в частности, перец
черный – Piper nigrum L., а также P. longum L., P. cubeba L.) использовали при лечении отравлений (мясом), при диарее.
9
ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Схема проведения исследования на принадлежность объекта к
контролируемым веществам включает следующие стадии:
1) внешний осмотр и отбор представительной пробы;
2) проведение исследования методами, которые требуются для
решения поставленных вопросов (в зависимости от оборудования,
имеющегося в распоряжении эксперта);
3) в случае необходимости – проведение исследования по определению количества контролируемого вещества;
4) формулирование выводов.
ПРЕДВАРИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
На стадии предварительного исследования проводят внешний
осмотр исследуемых образцов: фиксируют состояние, особенности
упаковки исследуемых объектов; выявляют такие признаки исследуемых объектов, как цвет таблеток и капсул, их форма, размеры и масса.
Отбор представительных проб для дальнейшего исследования проводят в соответствии с методикой, утвержденной протоколом Постоянного комитета по контролю наркотиков от 16 ноября 1993 г. № 26
[14].
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ КАЧЕСТВЕННЫХ
ЦВЕТНЫХ РЕАКЦИЙ
Отобранные пробы тщательно измельчают в ступке. Если таблетка содержит поверхностный слой, то его рекомендуется аккуратно удалить и в дальнейшем работать с содержимым таблетки.
Для проведения качественных цветных реакций на амфетамин,
фентермин и МДМА используют реактив Марки; для обнаружения
бензодиазепинов и амфепрамона – реактив с мета-динитробензолом.
При проведении реакции с мета-динитробензолом образец (5–
15 мг) исследуемого вещества растворяют в пробирке в 0,5 мл 1М
водного раствора щелочи (гидроксида натрия или калия), затем
нагревают в течение нескольких минут на водяной бане и после
охлаж-дения полученной смеси до комнатной температуры добавляют несколько капель 1%-го спиртового раствора метадинитробензола. Появление в течение 2–3 мин коричневофиолетового окрашивания раствора свидетельствует о возможном
наличии в исследуемом препарате амфепрамона или бензодиазепинов (диазепама, хлордиазепоксида, нитразепама, флунитразепама,
алпразолама и пр.).
10
Реакцию с реактивом Марки проводят следующим образом.
Часть измельченного вещества массой 3–10 мг помещают в фарфоровую чашку и добавляют 2–3 капли реактива Марки. Через 10–15 мин
фиксируют изменение окраски: светло-коричневое окрашивание
свидетельствует о возможном наличии амфетамина или фентермина; черно-синее – о МДМА.
Указанные реакции можно использовать для «отсеивания» иных
препаратов, не содержащих контролируемых веществ. Следует отметить, что во избежание ложных срабатываний необходимо соблюдать
последовательность действий и добавления реактивов, а стадию обнаружения бензодиазепинов проводить при комнатной температуре,
поскольку мета-динитробензол может окрашиваться со щелочью при
нагревании или при использовании спиртовой щелочи.
Необходимо соблюдать технику безопасности при работе со щелочами (применять для защиты глаз специальные очки).
При добавлении щелочи нитропроизводные, как правило, окрашиваются в желтый цвет, а при наличии в препарате фенолфталеина
(слабительного) появляется интенсивная малиновая окраска.
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
Навеску исследуемого измельченного вещества массой 15–20 мг
экстрагируют 0,1–0,5 мл метанола (хлороформа) или смеси хлороформ–этанол–25%-й раствор аммиака (2:1:0,1). Для лучшего извлечения рекомендуется дополнительно аккуратно нагреть смесь до 60–
70 С. Приготовленные экстракты охлаждают, отстаивают (центрифугируют) и наносят на стартовую линию хроматографической пластины в объеме нескольких микролитров.
Хроматографическое разделение проводят в следующих системах растворителей: этилацетат–гексан–этанол–триэтиламин (14:18:2:1) –
система № 1; хлороформ–ацетон–этанол–25%-й раствор аммиака
(20:20:3:1) – система № 2. При отсутствии триэтиламина его можно
заменить 25%-м водным раствором аммиака, сократив при этом указанный объем в 2 раза.
После окончания хроматографирования пластины сушат в течение 30 мин при комнатной температуре; затем выявляют хроматографические зоны по гашению флуоресценции при 254 нм и проявляют соответствующими реактивами1.
1
Состав и методики приготовления указанных реактивов приведены в прил. 2.
11
В качестве универсальных реактивов используют реактив
Драгендорфа или пары йода.
Для амфепрамона, МДМА, фенфлурамина, фенилпропаноламина, амфетамина, фентермина, сибутрамина используют раствор нингидрина в ацетоне либо в н-бутаноле, насыщенном водой. После
опрыскивания реактивом хроматограмму нагревают при температуре 70–80 С до проявления окрашенных зон (если для приготовления
элюента используется триэтиламин, то окрашенный фон хроматограммы может маскировать слабоинтенсивные хроматографические зоны).
Для бензодиазепинов и бисакодила используют щелочной спиртовой раствор мета-динитробензола. После опрыскивания реактивом хроматограмму высушивают при комнатной температуре.
Для хроматографирования используют пластины с немодифицированным слоем силикагеля (такие, как Sorbfil, Merck). Значения коэффициентов хроматографической подвижности (Rf) контролируемых
веществ на пластинах Sorbfil ПТСХ П-А-УФ и Merck Kieselgel 60 F254,
а также окраска зон после проявления соответствующими реактивами
приведены в табл. 1. Кроме того, в таблице приведены значения Rf для
бисакодила и сибутрамина (как наиболее часто встречающихся компонентов исследуемых препаратов), а также для кофеина и диэтилфталата, которые могут быть использованы в качестве «маркеров» (реперных точек).
В зависимости от условий анализа значения Rf, указанные в таблице, могут незначительно меняться. Кроме того, указанные в таблице цвета хроматографических зон могут отличаться своими оттенками в зависимости от концентрации веществ, освещения и чистоты используемых реактивов и элюентов.
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Метод газовой хроматографии применяют для качественного
выявления активных компонентов, а также (при необходимости) для
их количественного определения.
Газохроматографическое определение качественного состава проводят в следующих условиях:
колонка кварцевая капиллярная длиной 12–30 м и диаметром
0,20–0,32 мм с метилсиликоновой стационарной фазой (типа HP-1)
либо с метилсиликоновой фазой, содержащей 5 % фенильных групп
(типа HP-5);
температура испарителя – 280 C;
температура детектора – 290 C;
12
температура колонки меняется от 100 до 280 C со скоростью
10 C/мин;
время выдержки при конечной температуре – 10 мин;
газ-носитель – гелий (азот); детектор пламенно-ионизационный;
ввод пробы осуществляется с делением потока.
Таблица 1
Значения Rf и цвета хроматографических зон компонентов
препаратов для похудания (для систем элюентов № 1 и № 2)
Значение Rf на пластинках
Цвет зоны после обработки реактивом
Система № 2
с нингидрином
0,4
1
0,09
0,36
Отсутствует3
0,4
5
0,16
0,45
ФФиолетовокоричневый4
Бледно-желтый
0,6
7
0,34
0,65
**Отсутствует3
Желтый
0,6
7
0,47
0,73
**Отсутствует3
Серо-фиолетовый
0,6
7
0,58
0,74
**Отсутствует3
Фиолетовый
0,56
0,79
**Отсутствует3
*Розовофиолетовый4
0,5
0
0,21
0,52
**Отсутствует3
**Отсутствует3
0,7
3
0,79
0,82
**Отсутствует3
**Отсутствует3
0,7
5
0,80
0,83
Фиолетовокоричневый
Отсутствует
0,63
0,7
4
0,81
0,81
Бордовокоричневый
Бледно-желтый
Фенилпропаноламин
0,04
0,5
5
0,02
0,53
Синий 
фиолетовокоричневый
Отсутствует
Амфетамин
0,14
0,4
8
0,10
0,41
Желтый 
фиолетовокоричневый
Отсутствует
Система № 1
Система № 1
Merck
Система № 2
Sorbfil
Алпразолам
0,09
Хлордиазепоксид
0,14
Нитразепам
0,27
Флунитразепам
0,37
Диазепам
0,42
Бисакодил
0,42
Кофеин1
0,18
Диэтилфталат2
0,59
Сибутрамин
0,69
Амфепрамон
Соединение
0,6
6
с метадинитробензолом
Бледнофиолетовый
13
Фенфлурамин
0,30
Фентермин
0,22
МДМА
0,11
0,30
0,35
Фиолетовосерый
**Отсутствует3
0,3
6
0,11
0,25
Желтый 
желтокоричневый
**Отсутствует3
0,2
5
0,12
0,27
Желтый 
фиолетовокоричневый
**Отсутствует3
0,4
5
Можно использовать кофеин–бензоат натрия.
Можно использовать спирт, денатурированный диэтилфталатом.
3 Выявляется по гашению люминесценции при 254 нм.
4 Окраска появляется на хроматограмме при длительном хранении (1–2 ч и более).
1
2
При исследовании препаратов, содержащих фентермин, фенфлурамин, фенилпропаноламин, амфетамин и МДМА, несколько
миллиграммов измельченных таблеток (или содержимого капсулы)
заливают 0,4 мл 50%-го раствора трифторуксусного ангидрида в
хлороформе; полученную смесь нагревают в закрытом флаконе при
температуре 60–70 С в течение 30 мин; затем приготовленный раствор хроматографируют в указанных выше условиях.
Для выявления в анализируемых объектах перечисленных соединений можно использовать их ацетильные производные, полученные
в аналогичных условиях с использованием уксусного ангидрида.
Амфепрамон и сибутрамин не образуют производных с трифторуксусным ангидридом. Поэтому при их исследовании к нескольким
миллиграммам измельченной таблетки (или содержимого капсулы)
добавляют 1 мл дистиллированной воды, осторожно нагревают; после
охлаждения добавляют 1 мл хлороформа и 1–3 капли 25%-го водного
раствора аммиака. Полученную смесь аккуратно встряхивают, отбирают хлороформный слой и после отстаивания (центрифугирования) исследуют в указанных выше условиях. Аналогичным образом можно
исследовать фентермин, фенфлурамин, фенилпропаноламин, амфетамин и МДМА (без приготовления трифторуксусных производных).
Производные бензодиазепина экстрагируют метанолом или хлороформом, добавляют 2–3 капли триэтиламина, выдерживают смесь
при температуре 60–70 С в течение 10 мин и после охлаждения и
отстаивания (центрифугирования) исследуют в указанных выше
условиях.
Индексы удерживания исследуемых веществ и их производных
приведены в табл. 2.
14
Количественное определение объектов исследования проводят с
применением метода внутреннего стандарта. В качестве внутреннего
стандарта используют метилстеарат либо подходящий насыщенный
неразветвленный углеводород (например, докозан). Перед началом
анализа проводят калибровку хроматографа с использованием образцов внутреннего стандарта и соответствующего вещества. При его
отсутствии для определения концентрации компонентов применяют
относительные массовые коэффициенты (см. формулу 1).
Подготовку пробы для фентермина, фенфлурамина, фенилпропаноламина, амфетамина и МДМА проводят следующим образом. К
нескольким миллиграммам растертой таблетки (капсулы) соответствующего вещества добавляют 0,2 мл ангидрида трифторуксусной
кислоты и 1 мл раствора внутреннего стандарта в хлороформе с
концентрацией 1 мг/мл. Полученную смесь нагревают в закрытом
флаконе при температуре 60–70 С в течение 30 мин; после охлаждения и отстаивания (центрифугирования) исследуют методом газовой хроматографии.
Анализ проводят в указанных выше условиях (не менее трех раз
для каждой пробы). Затем по результатам параллельных анализов для
объекта определяют среднее значение массовой доли исследуемых
веществ (X, %масс.) и рассчитывают доверительный интервал (при
доверительной вероятности 0,95).
Относительные массовые коэффициенты для фентермина, фенфлурамина, фенилпропаноламина, амфетамина и МДМА к метилстеарату приведены в табл. 2.
Для проведения количественного определения указанных соединений вместо трифторуксусных производных можно использовать их ацетильные производные, полученные в аналогичных условиях с использованием уксусного ангидрида.
При исследовании производных бензодиазепина и сибутрамина количественное определение проводят следующим образом. К
нескольким миллиграммам растертой таблетки (капсулы) добавляют 1 мл раствора внутреннего стандарта в хлороформе или метаноле с концентрацией 1 мг/мл. Полученную смесь нагревают при
температуре 60–70 С в течение 30 мин; после охлаждения и отстаивания (центрифугирования) исследуют методом газовой хроматографии.
Условия хроматографического разделения аналогичны условиям,
применяемым при исследовании производных амфетамина. Един15
ственным отличием является начальная температура колонки, которая в этом случае составляет 200 С.
Анализ проводят в указанных выше условиях (не менее трех раз
для каждой пробы). Затем по результатам параллельных анализов для
объекта определяют среднее значение массовой доли исследуемых
веществ (X, %масс.) и рассчитывают доверительный интервал (при
доверительной вероятности 0,95).
Относительные массовые коэффициенты для исследуемых веществ приведены в табл. 2.
Количественное определение методом газовой хроматографии
амфепрамона и хлордиазепоксида затруднено вследствие их термической нестабильности в ходе хроматографического анализа.
Таблица 2
Индексы удерживания и относительные массовые коэффициенты
исследуемых веществ к метилстеарату
Исследуемое
вещество
Амфепрамон
Фентермин
Фенфлурамин
Фенилпропаноламин
Индекс удерживания
трифторуксусного
вещества
производного
Относительный
массовый коэффициент к метилстеарату
–
0,90 (ТФА)
1,18 (ТФА)
0,87 (ТФА)
0,73 (ТФА);
Амфетамин
1120
1276
0,88 (УА)
МДМА
1516
1727
1,18 (ТФА)
Сибутрамин
1870
–
0,93
Диазепам
2447
–
1,10
Алпразолам
2950
–
1,30
Флунитразепам
2615
–
1,32
Нитразепам
2745
–
1,69
Бисакодил
2833
–
–
Примечание: ТФА – при использовании трифторуксусного ангидрида; УА –
при использовании уксусного ангидрида.
1493
1151
1233
1313
–
1306
1425
1321
Расчет количественного содержания компонентов проводят по
формуле:
Sx · mст
Х =
К·100 %,
(1)
Sст · mп
где Sx – площадь пика соответствующего компонента;
Sст – площадь пика внутреннего стандарта;
16
mст – масса внутреннего стандарта, мг;
mп – масса исходной пробы, мг;
K – соответствующий относительный массовый коэффициент.
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ
Метод хромато-масс-спектрометрии применяют для установления качественного состава анализируемого объекта. Исследование
проводят в следующих условиях:
ионизация электронным ударом (энергия 70 эВ);
колонка кварцевая капиллярная длиной 12–30 м и диаметром
0,20–0,32 мм с метилсиликоновой стационарной фазой (типа HP-1)
либо с метилсиликоновой фазой, содержащей 5 % фенильных групп
(типа HP-5);
температура испарителя – 280 C;
температура интерфейса детектора – 280 C;
температура колонки меняется от 50 до 280 C со скоростью 10–
15 C/мин;
время выдержки при конечной температуре – 10 мин;
газ-носитель – гелий;
ввод пробы осуществляют с делением потока.
Идентификация выявленных компонентов и их производных
производится по индексам удерживания и масс-спектрам при сопоставлении с библиотечными спектрами или спектрами индивидуальных
веществ.
Подготовка пробы аналогична применяемой в газовой хроматографии. Масс-спектры исследуемых веществ и их производных приведены в прил. 1.
При необходимости метод хромато-масс-спектрометрии может
использоваться для количественного определения контролируемых
веществ после калибровки прибора по соответствующим образцам.
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ
ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Исследование методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) применяют как для качественного выявления, так
и для количественного определения контролируемых компонентов в
составе препаратов для похудания.
Исследуемые объекты, как правило, являются монокомпонентными (по количеству хроматографируемых соединений), в связи с
17
чем необходимость работы в градиентном режиме возникает крайне
редко. Исследование проводят методом обращенно-фазной ВЭЖХ, с
разделением компонентов хроматографируемых образцов на колонках, упакованных сорбентами на основе силикагелей, модифицированных химически привитыми фазами типа С18, ODS (или аналогичных им).
При проведении исследования рекомендуется использовать
хроматографические системы для ВЭЖХ («Милихром» – 4, 5, А02;
Agilent Technologies – 1050, 1100, 1200; Waters Alliance и т. п.),
укомплектованные УФ-детектором с фотодиодной матрицей либо
многоволновым УФ-спектрофотометром, обеспечивающими возможность регистрации УФ-спектров отдельных компонентов. В качестве
примеров типовых условий можно привести следующие:
а) жидкостный хроматограф «Милихром-4», оснащенный многоволновым дискретным УФ-детектором и безградиентным насосом
шприцевого типа;
колонка 2×100 мм, упакованная обращенно-фазным сорбентом
Separon SGX С-18, с размером частиц 5 мкм;
подвижная фаза – фосфатный буфер–ацетонитрил (в объемном
соотношении 50:50);
режим элюирования – изократический; скорость потока –
100 мкл/мин;
параллельное детектирование УФ-спектрофотометра на пяти длинах волн: 210, 242, 260, 284, 324 нм;
объем пробы анализируемого образца – 10 мкл;
б) жидкостный хроматограф Agilent-1100, оснащенный диодноматричным УФ-детектором, дегазатором и бинарным градиентным
насосом поршневого типа;
колонка Eclipse XDB С-18 4,6×150 мм, с размером частиц 5 мкм;
подвижная фаза – фосфатный буфер–ацетонитрил (в объемном
соотношении 50:50);
режим элюирования – изократический; скорость потока – 1 мл/мин;
параллельное детектирование УФ-спектрофотометра на пяти
длинах волн: 210, 242, 260, 284, 324 нм;
объем пробы анализируемого образца – 5 мкл;
18
в) жидкостный хроматограф Waters Alliance, оснащенный полноволновым диодно-матричным УФ-вид-детектором1, дегазатором и
бинарным градиентным насосом поршневого типа;
колонка Waters Symmetry RP-18 2,1×150 мм, с размером частиц
3,5 мкм;
подвижная фаза – фосфатный буфер–ацетонитрил (в объемном
соотношении 50:50);
режим элюирования – изократический; скорость потока – 0,2 мл/мин;
детектирование УФ-спектрофотометра на одной любой длине
волны в диапазоне длин волн 190–400 нм;
объем пробы анализируемого образца – 5 мкл.
Для приготовления фосфатного буфера в 1 л дистиллированной
воды последовательно растворяют 12,0 г 82%-й ортофосфорной кислоты, 3,0 г гидроксида калия и 3,0 г диэтиламина (все реактивы квалификации не ниже «хч»). Приготовленный буфер должен иметь рН = 3
(в случае необходимости значение рН буфера корректируют путем
добавления водного раствора гидроксида калия либо ортофосфорной
кислоты). Приготовленный буфер фильтруют через мембранный
фильтр с размером пор не более 0,5 мкм и сразу же переливают в герметично укупориваемую емкость из темного стекла. Хранят готовый
буфер в защищенном от света месте, в бытовом холодильнике.
Подвижную фазу готовят порционно, в количествах, не превышающих двух-трехдневную потребность. Для приготовления элюента фосфатный буфер и ацетонитрил смешивают в необходимом соотношении, интенсивно перемешивая полученную смесь до образования гомогенного раствора. В случае отсутствия в хроматографе
дегазатора подвижную фазу перед применением обязательно дегазируют непосредственно в рабочей емкости, помещая ее на 20 мин в
заполненную водой ультразвуковую ванну либо продувая в течение
того же времени потоком газообразного гелия с расходом 40–
50 мл/мин (дегазация с применением гелия более эффективна).
Для оценки эффективности разделения колонки в качестве модельной смеси рекомендуется смесь, включающая следующие вещества: фентермин, фенфлурамин, амфепрамон и диазепам. Смесь готовят в виде раствора в подвижной фазе. Рекомендуемые значения концентраций компонентов смеси в растворе от 0,1 до 0,5 мг/мл. Анализ
модельных смесей позволяет установить последовательность выхода компонентов на хроматограммах экспертных образцов, а также
1
УФ-вид-детектор, работающий в УФ- и видимом диапазонах спектра.
19
оценить возможное влияние присутствующих в их составе добавок
на основные параметры хроматографического разделения определяемых веществ (см. рис.).
5
10
15
мин
Хроматограмма раствора модельной смеси в подвижной фазе: фентермин
(0,28 мг/мл), амфепрамон (0,07 мг/мл.), фенфлурамин (0,18 мг/мл), диазепам
(0,33 мг/мл)
Для количественного определения контролируемых веществ в
исследуемых образцах применяют метод абсолютной градуировки.
С этой целью детектор хроматографа калибруют с использованием
градуировочных растворов определяемых веществ с точно известными значениями их концентраций.
Для приготовления градуировочных растворов точные навески
(точность взвешивания – 0,1 мг) стандартных образцов растворяют в
подвижной фазе (точность дозирования подвижной фазы – 0,1 мл) с
таким расчетом, чтобы концентрация определяемых веществ в полученных растворах составляла точно 1,0 мг/мл (здесь и далее значения концентраций веществ указаны в пересчете на основания).
Затем полученные растворы смешивают с подвижной фазой с таким
расчетом, чтобы получить градуировочные растворы каждого определяемого вещества с концентрациями 0,500, 0,250 и 0,125 мг/мл.
Приготовленные растворы хроматографируют при неизменных
условиях и по результатам проведенных анализов для каждого
определяемого вещества строят график зависимости площади его
хроматографического пика от концентрации вещества в растворе.
Для всех определяемых веществ линейная зависимость сигнала, детектируемого на длине волны 210 нм, сохраняется в диапазоне их
концентраций в анализируемых растворах от 0,0156 до 1,0 мг/мл.
20
Исследование экспертных образцов
Первая стадия анализа включает отбор пробы (в соответствии с
вышеуказанными рекомендациями по пробоотбору) и экстракцию
пробы исследуемого образца. При этом важен правильный выбор
растворителя, используемого в качестве экстрагента.
Если в исследуемом веществе отсутствуют водорастворимые
моно- и дисахариды, то в качестве экстрагента следует использовать
рекомендуемую подвижную фазу. В случае присутствия в образце
указанных компонентов в качестве экстрагента рекомендуется применять метанол (квалификации не ниже «хч»).
Точные навески предварительно измельченного и гомогенизированного вещества таблеток (или содержимого капсул) заливают
точно отмеренными объемами подвижной фазы в соотношении 1 мл
экстрагента к 1 мг исследуемого вещества (в случае ожидаемого малого содержания контролируемого вещества в объекте можно изменять данное соотношение в сторону уменьшения количества экстрагента). Взвешивание вещества таблеток или содержимого капсул
проводят с точностью 0,0001 г; измерение объемов подвижной фазы –
с точностью 0,1 мл. Рекомендуется брать по 2–3 навески вещества,
каждую из которых исследуют в 2–3 параллельных измерениях для
определения среднего значения содержания контролируемого вещества в исследуемом объекте.
Каждую навеску помещают в герметично укупориваемую стеклянную емкость и заливают соответствующим экстрагентом (подвижной фазой, приготовленной, как указано выше, либо метанолом), объем которого измеряют с точностью 0,1 мл. Экстракцию
исследуемого вещества проводят в течение 30 мин в ультразвуковой
ванне при комнатной температуре (в случае отсутствия ультразвуковой ванны можно проводить экстракцию при интенсивном перемешивании). Приготовленные экстракты фильтруют через мембранный фильтр с размером пор не более 0,5 мкм (используют специальные наборы для фильтрации проб в ВЭЖХ), а затем хроматографируют в вышеуказанных условиях.
Идентификацию хроматографических пиков определяемых компонентов на хроматограмме экстракта исследуемого образца проводят путем сравнения времен удерживания и УФ-спектров выявленных компонентов с временами удерживания и УФ-спектрами пиков
соответствующих соединений на хроматограммах свободных образцов. В качестве свободных образцов можно использовать растворы
21
хроматографически чистых контролируемых веществ (не содержащих на хроматограмме, полученной на данном жидкостном хроматографе, никаких иных пиков, кроме пика определяемого соединения) с концентрацией около 0,1 %масс., которые хроматографируют в
аналогичных условиях. Для подтверждения идентификации выявленных компонентов можно применять «метод добавок».
Концентрации контролируемых веществ в экстрактах (рекомендуется определять их в пересчете на свободные основания) устанавливают методом абсолютной градуировки. Исходя из средних значений массовой доли контролируемых веществ в экстрактах (вещества таблеток или содержимого капсул) и известного точного соотношения их навесок и объема подвижной фазы, использованного для
экстракции, определяют среднюю массу контролируемого вещества,
содержащегося в одной таблетке (капсуле) каждой разновидности.
Результаты исследования отобранных представительных проб таблеток (капсул) распространяют на все количество представленных
на исследование таблеток (капсул) соответствующего вида. Затем,
исходя из количества таблеток (капсул) каждого вида, рассчитывают общую массу содержащегося в них контролируемого вещества.
Расчет массовой доли (X, %масс.) определяемого компонента в
составе исследуемого образца проводят по формуле 2 с использованием соответствующих градуировочных графиков:
Cгр · V
·100 %,
(2)
m
где Сгр – концентрация определяемого компонента в анализируемом
экстракте, определенная по соответствующему градуировочному
графику, мг/мл;
V – объем анализируемого экстракта, приготовленного из навески исследуемого образца, мл;
m – масса навески исследуемого образца, подвергнутого экстракции, мг.
Хроматограммы растворов экспертных образцов в подвижной фазе, содержащих контролируемые вещества (фентермин, фенфлурамин,
амфепрамон, диазепам, нитразепам, амфетамин, МДМА и хлордиазепоксид), а также их ИК- и УФ-спектры представлены в прил. 1.
Х =
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ИК-СПЕКТРОСКОПИИ
Метод ИК-спектроскопии может быть применен при исследовании образцов для выявления их активных компонентов.
22
При исследовании амфепрамона, фентермина, фенфлурамина,
фенилпропаноламина, амфетамина, сибутрамина и МДМА несколько миллиграммов исследуемого вещества растворяют в 0,5–1,0 мл
дистиллированной воды. К полученному раствору прибавляют 0,5–
1,0 мл хлороформа, каплю 25%-го водного раствора аммиака, осторожно встряхивают и после отстаивания смеси аккуратно отбирают
хлороформный слой, стараясь не захватить водный. После упаривания растворителя в сушильном шкафу при температуре не выше
50 C сухой остаток перетирают с бромидом калия, прессуют в таблетку и снимают ИК-спектр в диапазоне 4000–400 см-1 с разрешением 4 см-1.
Для дополнительной идентификации можно использовать ИКспектроскопическое исследование указанных веществ в их солевой
форме. Для получения гидрохлоридов необходимо до растирания
выделенного основания с бромидом калия добавить к сухому остатку 1–2 капли концентрированной соляной кислоты, перемешать и
высушить в сушильном шкафу. Приготовленный сухой остаток соляно-кислой соли затирают с бромидом калия и исследуют по приведенной методике.
В приложении представлены ИК-спектры указанных веществ в
форме основания и для сравнения – спектры гидрохлоридов амфепрамона, фентермина, фенфлурамина, фенилпропаноламина, МДМА, а
также сульфата амфетамина, снятые на приборе Nicolet Avatar c
приставкой однократного НПВО Smart Performer.
При определении производных бензодиазепина и бисакодила
несколько миллиграммов исследуемого вещества экстрагируют хлороформом (метанолом) и центрифугируют; осветленный экстракт упаривают в сушильном шкафу и снимают спектры, как указано выше.
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ УФ-СПЕКТРОСКОПИИ
УФ-спектроскопия является простым экспрессным методом количественного определения веществ и проводится только после качественного выявления в пробе определяемого вещества одним из
идентификационных методов анализа (тонкослойной хроматографией, ИК-спектроскопией, хромато-масс-спектрометрией и др.). Метод
УФ-спектроскопии, применяемый при количественном определении
веществ, обладает следующими преимуществами:
высокая точность и воспроизводимость результатов (относительная
погрешность измерения не превышает 2–3 %отн);
23
возможность исследования водных растворов веществ;
отсутствие влияния на результаты измерения различных
нейтральных наполнителей, часто встречающихся в смеси с контролируемыми веществами (сахаров, крахмала и др.);
возможность анализировать летучие и нелетучие вещества;
экспрессность анализа;
отсутствие необходимости использования дорогостоящих и редких (малодоступных) реактивов.
Количественное определение веществ методом УФ-спектроскопии проводят в соответствии с законом светопоглощения Бугера–
Ламберта–Бера по предварительно построенному градуировочному
графику, представляющему линейную зависимость оптической плотности (А) от концентрации вещества (С). Общая схема количественного анализа, которая может быть использована для различных контролируемых веществ, такова.
Для построения градуировочного графика готовят стандартный
раствор вещества: растворяют точную навеску чистого вещества
(20–30 мг) в 25 мл растворителя. Из полученного стандартного раствора готовят (путем разбавления) не менее трех растворов с концентрацией от 0,5 до 1,5 мг/мл. Путем последующего разбавления
готовят не менее трех растворов с концентрациями от 0,01 до
0,05 мг/мл. Кроме того, в качестве стандартов можно использовать
доступные препараты или смеси определяемого вещества с известной концентрацией (например, растворы из ампул или таблетки с
известным содержанием контролируемого вещества).
На следующем этапе проводят измерение оптической плотности
приготовленных стандартных растворов, используя кварцевые кюветы с толщиной поглощающего слоя 10 мм. В качестве раствора
сравнения используют «холостой» раствор, которым, как правило,
является используемый растворитель.
Измерение оптической плотности анализируемых растворов
проводят в максимуме поглощения (табл. 3). УФ-спектры исследуемых веществ приведены в приложении. Затем строят градуировочный график зависимости оптической плотности в максимуме поглощения (А) от концентрации (X) данного вещества. При построении градуировочного графика используют либо абсолютную оптическую плотность, либо оптическую плотность относительно базовой линии, соединяющей минимумы на спектральной кривой, лежащие рядом с измеряемым максимумом оптической плотности.
24
Таблица 3
Основные параметры количественного определения
компонентов препаратов для похудания методом УФ-спектроскопии
Длина волны
в максимуме
поглощения, нм
Диапазон
концентраций,
мг/мл
Алпразолам
222
0,5–1,0
Метанол
Амфепрамон
252
0,5–1,0
Подкисленная вода1
Амфетамин
258
0,5–1,0
Подкисленная вода1
Фентермин
252
0,5–1,0
Подкисленная вода1
Нитразепам
219
0,01–0,10
Метанол
Флунитразепам
219
0,01–0,10
Метанол
Фенфлурамин
263
0,5–1,0
Подкисленная вода1
Диазепам
229
0,5–1,0
Метанол
Хлордиазепоксид
263
0,01–0,10
Метанол
Фенилпропаноламин
257
0,5–1,0
Подкисленная вода1
234 или 283
0,5–1,0
Подкисленная вода1
Вещество
МДМА
Растворитель
Бисакодил
208
0,5–1,0
Метанол
Сибутрамин
224
0,01–0,10
Подкисленная вода1
1
Готовят добавлением к дистиллированной воде нескольких капель соляной кислоты.
При определении количественного содержания исследуемого вещества, навеску анализируемого образца (m) растворяют в фиксированном объеме (V) растворителя. Затем, определив значение оптической плотности образца в максимуме поглощения (А), находят концентрацию вещества (Сгр) в растворе по градуировочному графику.
Массовую долю вещества (X) рассчитывают по формуле 2.
Количественное определение проводят в трех (или более) параллельных измерениях; по ним рассчитывают среднее значение и
доверительный интервал (при доверительной вероятности 0,95).
Описанный общий подход к количественному исследованию методом УФ-спектроскопии можно применять к препаратам, содержащим контролируемые вещества, при следующих условиях: наличие стандартных образцов контролируемого вещества и отсутствие
в препаратах иных компонентов, поглощающих в той же области
УФ-спектра. Если разница между длинами волн максимумов полос
поглощения контролируемого вещества и сопутствующего компонента составляет больше 20 нм, то наличие последнего, как правило,
не мешает количественному определению.
25
ПРИЛОЖЕНИЯ
26
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
МАСС-, ИК-, УФ-СПЕКТРЫ
И ЖИДКОСТНЫЕ ХРОМАТОГРАММЫ
КОНТРОЛИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ,
ВХОДЯЩИХ В ТАБЛЕТКИ ДЛЯ ПОХУДАНИЯ
27
A bundan c e
S c an
1120
1000000
(1 0 . 1 0 0
100
m in ):
T T _ 1 .D
(-1 1 1 5 ) (-)
950000
900000
850000
800000
750000
700000
650000
600000
550000
500000
450000
400000
350000
300000
250000
200000
150000
100000
44
72
50000
56
80
64
0
40
50
60
70
80
91
90
115
132
146
160
174
188
204
100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210
m / z -->
Рис. 1. Масс-спектр амфепрамона
Abundanc e
Sc an 575 (6.927 min): T T _2.D (-570) (-)
110000
58
100000
90000
80000
70000
60000
50000
40000
30000
20000
10000
91
42
134
65
51
77
0
40
50
60
70
80
117
103
85
90
100
m/ z-->
Рис. 2. Масс-спектр фентермина
28
128
110
120
130
140
A
b u n d a n c
e
S c
7 2
a n
7 0 4
(7 . 6 7 8
m in ) :
T
T
_ 3 . D
(-7 0 0 )
(-)
1 9 0 0 0 0
1 8 0 0 0 0
1 7 0 0 0 0
1 6 0 0 0 0
1 5 0 0 0 0
1 4 0 0 0 0
1 3 0 0 0 0
1 2 0 0 0 0
1 1 0 0 0 0
1 0 0 0 0 0
9 0 0 0 0
8 0 0 0 0
7 0 0 0 0
6 0 0 0 0
5 0 0 0 0
4 4
4 0 0 0 0
3 0 0 0 0
1 5 9
2 0 0 0 0
1 0 9
1 0 0 0 0
5 6
4 0
5 0
6 0
7 0
8 0
2 1 6
1 1 9
1 2 8 1 4 1
9 1
1 0 0
8 2
0
m /
1 6 9
2 3 0
1 8 7 2 0 0
9 0 1 0 0
1 1 0
1 2 0
1 3 0
1 4 0
1 5 0
1 6 0
1 7 0
1 8 0
1 9 0
2 0 0
2 1 0
2 2 0
2 3 0
z -->
Рис. 3. Масс-спектр фенфлурамина
Abundanc e
Sc an
856
(8 . 5 6 3
m in ): T T _ 5 . D
(-8 5 2 ) (-)
44
65000
60000
55000
50000
45000
40000
35000
30000
25000
20000
15000
77
10000
5000
105
52
91
63
117
132
207
0
40
50
60
70
80
90
1 0 01 1 01 2 01 3 01 4 01 5 01 6 01 7 01 8 01 9 02 0 02 1 0
m / z -->
Рис. 4. Масс-спектр фенилпропаноламина
A
b
u
n
d
a
n
4
0
0
0
0
0
3
8
0
0
0
0
3
6
0
0
0
0
3
4
0
0
0
0
3
2
0
0
0
0
3
0
0
0
0
0
2
8
0
0
0
0
2
6
0
0
0
0
2
4
0
0
0
0
2
2
0
0
0
0
2
0
0
0
0
0
1
8
0
0
0
0
1
6
0
0
0
0
1
4
0
0
0
0
1
2
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
8
0
0
0
0
6
0
0
0
0
4
0
0
0
0
2
0
0
0
0
c
e
S
c
a n
5 8
1
1
6
7
5
4
0
( 1
m
/
z
5
3
3
m
in
) :
T
1
7
8
6
0
. 3
T
3
_
4
. D
( - 1
1
5
6
)
( - )
5
1
2
5
0
6
0
7
9
1
9
0
4
0
0
8
0
9
0
0
5
5
1
0
01
1
1
2
0
01
2
01
1
3
01
4
4
01
7
5
1
01
6
6
1
3
01
7
7
01
8
8
01
1
9
9
3
02
0
0
- - >
Рис. 5. Масс-спектр МДМА
29
Abundance
#30378: Amphetamine
44
9000
8000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
91
18
31
0
10
20
59
51
25
30
40
50
65
74
60
70
120
103
80
90
100
110
134
120
130
140
m/z-->
Рис. 6. Масс-спектр амфетамина
Abundance
Scan 2251 (16.685 min): TT_7.D (-2243) (-)
256
65000
283
60000
55000
50000
45000
40000
35000
30000
25000
221
20000
15000
165
10000
110
5000
51 63
77 89
125
137
151
241
177 193205
268
0
40
60
80
100
120
140
160
180
200
220
240
260
280
300
m/z-->
Рис. 7. Масс-спектр диазепама
Abundance
Scan 3057 (21.378 min): TT_9.D (-3120) (-)
279
55000
50000
308
45000
204
40000
35000
30000
25000
20000
15000
77
102
10000
51
5000
115
64
90
245
177
137
163
150
190
219
232
0
40
60
80
293
331
100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320
m/z-->
Рис. 8. Масс-спектр алпразолама
30
266
Abundanc e
S c a n 2 4 5 5 (1 7 .8 7 3 min ): T T _ 8 _ 1 .D (-2 4 4 8 ) (-)
312
14000
13000
285
12000
11000
10000
9000
8000
266
7000
6000
238
5000
4000
183
3000
2000
1000
109
63
89
210
144
126
42
163
331
356
405
0
40
60
80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400
m/ z-->
Рис. 9. Масс-спектр флунитразепама
Abundance
Scan 2331 (17.151 min): TT-11.D (-2352) (-)
282
35000
30000
25000
20000
15000
10000
5000
51 63
77
91
103
0
40
60
80
100
219
247
163
124
177190 205
151
138
232
120
140
160
180
200
220
240
268
260
280
300
m/z-->
Рис. 10. Масс-спектр хлордиазепоксида
Abundanc e
# 2 2 6 7 8 1 : N it ra z e p a m
253
280
9000
8000
7000
234
206
6000
5000
4000
3000
77
51
63
1000
179
103
2000
18
89
39
151
116
139
167
194
265
222
0
20
40
60
80
100
120
140
160
180
200
220
240
260
280
m / z -->
Рис. 11. Масс-спектр нитразепама
31
Abundanc e
Sc an
2776
(1 9 . 7 4 2
m in ):
T T _ 6 .D
(-2 7 6 8 ) (-)
361
8500
8000
7500
276
7000
6500
6000
5500
5000
4500
4000
319
199
3500
3000
2500
43
2000
1500
183
1000
246
154
115
131
78
500
218
343
405
0
40
60
8 0 1 0 01 2 01 4 01 6 01 8 02 0 02 2 02 4 02 6 02 8 03 0 03 2 03 4 03 6 03 8 04 0 0
m / z -->
Рис. 12. Масс-спектр бисакодила
A b u n d a n c e
# 2 9 8 : #
S ib u t r a m in e
1 1 4
9 0 0 0
8 0 0 0
7 0 0 0
6 0 0 0
5 0 0 0
4 0 0 0
3 0 0 0
7 2
2 0 0 0
1 0 0 0
4 2
5 8
8 4
3 0
0
2 0
4 0
6 0
8 0
1 0 1
1 0 0
1 3 7
1 2 0
1 5 8
1 4 0
1 7 8
1 6 0
1 9 42 0 6
1 8 0
2 0 0
2 2 2 2 3 6 2 5 0 2 6 4 2 7 8
2 2 0
2 4 0
2 6 0
2 8 0
m /z - - >
Рис. 13. Масс-спектр сибутрамина
Abundance
Scan 835 (8.441 min): TT_2-2.D (-855) (-)
154
300000
280000
260000
240000
220000
200000
180000
160000
140000
120000
100000
80000
91
59
60000
132
40000
20000
42
0
40
114
65
51
50
77
60
70
84
80
98 105
90
100
110
126
120
120
130
143
140
150
160
160
178
170
m/z-->
Рис. 14. Масс-спектр трифторуксусного производного фентермина
32
180
Abundance
Scan 1019 (9.512 min): TT_3-1-2.D (-1013) (-)
168
2800000
2600000
2400000
2200000
2000000
1800000
1600000
1400000
1200000
1000000
140
800000
600000
400000
200000
42
70
56
92
109
124
40
60
80
100
120
186
228242
199 215
153
0
140
160
180
200
220
240
308
264278292
260
280
327
300
320
m/z-->
Рис. 15. Масс-спектр трифторуксусного производного фенфлурамина
Abundance
Scan 857 (8.569 min): TT_5-2.D (-850) (-)
140
1400000
1300000
1200000
1100000
1000000
900000
800000
700000
600000
500000
400000
300000
230
69
200000
105
100000
91
45
203
127
0
40
60
80
160175
190
324 343
216
100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
m/z-->
Рис. 16. Масс-спектр трифторуксусного производного фенилпропаноламина
Abundance
Scan 813 (8.313 min): TT-12-1.D (-806) (-)
140
900000
118
800000
700000
600000
500000
91
400000
300000
200000
69
100000
45
0
57
78
103
130
149 162
216
178
187 198
207
231
40 50 60 70 80 90 100110120130140150160170180190200210220230
m/z-->
Рис. 17. Масс-спектр трифторуксусного производного амфетамина
33
Abundance
Scan 1449 (12.016 min): TT_4-1-.D
154
800000
750000
700000
650000
600000
550000
500000
135
450000
400000
350000
300000
250000
110
200000
289
150000
100000
77
42
50000
56
89
0
40
60
80
100
176 191204
165
121
120
140
160
180
200
222
233
220
250
240
260
274
280
300
m/z-->
Рис. 18. Масс-спектр трифторуксусного производного МДМА
Рис. 19. Слева – хроматограмма экстракта капсулы, содержащей фенфлурамин,
в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1;
концентрация фенфлурамина в экстракте – 0,92 мг/мл);
справа – УФ-спектр фенфлурамина
Рис. 20. Слева – хроматограмма экстракта таблетки, содержащей фентермин, в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация фентермина в экстракте – 0,68 мг/мл); справа – УФ-спектр фентермина
34
Рис. 21. Слева – хроматограмма экстракта капсулы, содержащей амфепрамон, в
подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация фентермина в экстракте – 1,30 мг/мл); справа – УФ-спектр амфепрамона
Рис. 22. Слева – хроматограмма экстракта таблетки, содержащей диазепам, в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация диазепама в экстракте – 0,22 мг/мл); справа – УФ-спектр диазепама
Рис. 23. Слева – хроматограмма экстракта таблетки, содержащей нитразепам, в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация нитразепама в экстракте – 0,19 мг/мл); справа – УФ-спектр нитразепама
35
Рис. 24. Слева – хроматограмма экстракта таблетки, содержащей хлордиазепоксид,
в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1;
концентрация хлордиазепоксида в экстракте – 0,26 мг/мл);
справа – УФ-спектр хлордиазепоксида
Рис. 25. Слева – хроматограмма экстракта капсулы, содержащей фенилпропаноламин, в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1;
концентрация фенилпропаноламина в экстракте – 0,47 мг/мл);
справа – УФ-спектр фенилпропаноламина
Рис. 26. Слева – хроматограмма экстракта таблетки, содержащей амфетамин, в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация амфетамина в экстракте – 0,77 мг/мл); справа – УФ-спектр амфетамина
36
Рис. 27. Слева – хроматограмма экстракта пробы образца таблетки, содержащей МДМА,
в подвижной фазе (при соотношении массы навески к объему экстрагента 1:1; концентрация МДМА в экстракте – 0,63 мг/мл); справа – УФ-спектр МДМА
100
95
90
85
80
T,% 75
70
65
60
55
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1000
500
Рис. 28. ИК-спектр амфепрамона-основания
95
90
85
T,%
80
75
70
65
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 29. ИК-спектр амфепрамона гидрохлорида
37
100
95
90
T,%
85
80
75
70
65
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1000
500
Рис. 30. ИК-спектр фентермина-основания
95
90
85
T,% 80
75
70
65
60
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 31. ИК-спектр фентермина гидрохлорида
100
90
80
70
60
T,% 50
40
30
20
10
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 32. ИК-спектр фенфлурамина-основания
38
1000
400
100
95
90
85
80
T,%
75
70
65
60
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1000
500
1000
500
Рис. 33. ИК-спектр фенфлурамина гидрохлорида
100
95
90
85
T,%
80
75
70
65
60
55
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 34. ИК-спектр фенилпропаноламина-основания
100
95
90
T,% 85
80
75
70
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 35. ИК-спектр фенилпропаноламина гидрохлорида
39
90
80
70
60
T,% 50
40
30
20
10
3000
3500
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
Рис. 36. ИК-спектр амфетамина-основания
100
90
80
70
60
T,%
50
40
30
20
10
4000
300
0
3500
2500
cm-1
2000
1500
1000
400
Рис. 37. ИК-спектр амфетамина сульфата
90
85
80
75
70
T,% 65
60
55
50
40
4000
3000
2000
1500
cm-1
Рис. 38. ИК-спектр МДМА-основания
40
1000
400
90
80
70
60
T,%
50
40
30
20
10
4000
3000
2000
1500
1000
400
cm-1
Рис. 39. ИК-спектр МДМА гидрохлорида
95
90
85
80
T,%
75
70
65
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1500
1000
500
Рис. 40. ИК-спектр диазепама
85
80
75
70
T,% 65
60
55
50
45
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
Рис. 41. ИК-спектр алпразолама
41
90
85
80
75
T,% 70
65
60
55
50
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1000
500
1000
500
Рис. 42. ИК-спектр флунитразепама
95
90
85
80
75
T,%
70
65
60
55
50
45
40
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 43. ИК-спектр хлордиазепоксида
95
90
85
T,%
80
75
70
65
60
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 44. ИК-спектр нитразепама
42
100
90
80
T,%
70
60
50
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
1000
500
1500
1000
400
1000
400
Рис. 45. ИК-спектр бисакодила
100
90
80
70
60
T,% 50
40
30
20
10
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
Рис. 46. ИК-спектр сибутрамина
90
80
70
60
50
T,%
40
30
20
10
4000
3500
3000
2500
cm-1
2000
1500
Рис. 47. ИК-спектр сибутрамина гидрохлорида
43
3.00
2.5
2.0
1.5
A
1.0
0.5
0.00
200.0
250
300
350
nm
400
450
500.0
Рис. 48. УФ-спектр фентермина, 1 мг/мл водный раствор
3.00
2.5
2.0
1.5
A
1.0
0.5
0.00
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
Рис. 49. УФ-спектр фенфлурамина, 1 мг/мл водный раствор
44
350.0
2.11
1.5
1.0
A
0.5
0.0
-0.63
206.4
220
240
260
280
291.1
nm
Рис. 50. УФ-спектр фенилпропаноламина, 1 мг/мл водный раствор
2.78
2.5
2.0
1.5
A
1.0
0.5
0.04
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
350.0
Рис. 51. УФ-спектр амфепрамона, 1 мг/мл водный раствор
45
1.28
1.2
1.0
0.8
A 0.6
0.4
0.2
-0.01
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
350.0
Рис. 52. УФ-спектр диазепама, 1 мг/мл метанольный раствор
3.00
2.5
2.0
1.5
A
1.0
0.5
0.00
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
Рис. 53. УФ-спектр бисакодила, 1 мг/мл метанольный раствор
46
350.0
1.57
1.4
1.2
1.0
A 0.8
0.6
0.4
0.12
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
350.0
Рис. 54. УФ-спектр флунитразепама, 0,05 мг/мл метанольный раствор
0.92
0.8
0.6
A
0.4
0.2
0.03
200.0
220
240
260
280
nm
300
320
350.0
Рис. 55. УФ-спектр алпразолама, 1 мг/мл метанольный раствор
47
2.02
1.5
1.0
A
0.5
-0.08
214.7
240
260
280
296.0
nm
Рис. 56. УФ-спектр амфетамина, 1 мг/мл водный раствор
1.12
1.0
0.8
0.6
A
0.4
0.2
0.04
200.4
220
240
260
280
nm
Рис. 57. УФ-спектр сибутрамина, 0,1 мг/мл водный раствор
48
300.1
1.30
1.2
1.0
0.8
A 0.6
0.4
0.2
0.03
202.6
220
240
260
280
nm
300
320
340 350.8
Рис. 58. УФ-спектр нитразепама, 0,05 мг/мл метанольный раствор
0.77
0.7
0.6
0.5
A
0.4
0.3
0.2
0.06
207.6
220
240
260
280
300
320
340.6
nm
Рис. 59. УФ-спектр хлордиазепоксида, 0,05 мг/мл метанольный раствор
49
2.52
2.0
1.5
A
1.0
0.5
-0.02
208.7
220
240
260
nm
280
300
Рис. 60. УФ-спектр МДМА, 1 мг/мл водный раствор
50
320.2
ПРИЛОЖЕНИЕ 2
СОСТАВ И МЕТОДИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ
РЕАКТИВОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ
ПРИ ПРОЯВЛЕНИИ ПЛАСТИН
ДЛЯ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Реактив Драгендорфа
Раствор № 1: 0,2 г нитрата висмута растворяют в 10 мл воды и
2,5 мл уксусной кислоты.
Раствор № 2: 4 г иодида калия растворяют в 10 мл воды.
Смешивают по 10 мл растворов № 1 и № 2, затем добавляют
100 мл воды и 20 мл уксусной кислоты. Приготовленный прозрачный желто-оранжевый реактив после охлаждения используют для
проявления хроматограмм. Реактив может храниться длительное время в закрытой таре из темного стекла.
Реактив с нингидрином
5 г нингидрина растворяют в 40 мл ацетона либо н-бутанола,
предварительно насыщенного водой. Приготовленный прозрачный
светло-желтый реактив используют для проявления хроматограмм.
Для приготовления насыщенного водой н-бутанола используют
40 мл н-бутанола и 8–10 мл воды. После интенсивного встряхивания
смеси и отстаивания нижний водный слой удаляют, а бутанольный
слой используют для приготовления реактива.
Реактив может храниться длительное время в закрытой стеклянной таре.
Щелочной реактив с мета-динитробензолом
0,5 г гранул гидроксида калия (гидроксид натрия использовать
нельзя!) растворяют в 5 мл 1%-го раствора мета-динитробензола в
этиловом спирте.
Свежеприготовленный реактив имеет желто-розовую окраску
(цвет чайной розы), затем приобретает темно-коричневый цвет. Реактив хранению не подлежит и может использоваться для проявления хроматограмм лишь в течение нескольких часов после приготовления.
51
ПРИЛОЖЕНИЕ 3
ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ОПТИЧЕСКОЙ
МИКРОСКОПИИ
При необходимости микроскопическое исследование таблеток
(либо содержимого капсул) проводят следующим образом.
Вещество извлекают из капсул и осматривают невооруженным
глазом, описывают запах и цвет. Цвет определяют при дневном освещении; запах определяют на сухом веществе, при необходимости растирая частицы между пальцами. Затем вещество рассматривают под
лупой или используют стереоскопический микроскоп (небольшое
увеличение, отраженный свет); проводят выборку более крупных частиц, пригодных для изготовления срезов, или частиц, сходных по
внешнему виду, по принадлежности к тому или иному органу растения (компоненты смеси). Для разделения вещества растительного
происхождения по размерам на отдельные фракции используют набор
сит (в данном случае использовались сита с диаметром отверстий 0,25
и 0,10 мм). Каждую фракцию исследуют отдельно в поле зрения микроскопа проходящего света при общем увеличении 100× и 200×.
Чтобы получить хорошо различимые в микроскоп структуры,
частицы просветляют, окрашивают, пропитывают различными жидкостями (в сухом виде структура объектов не различима). Для просветления тканей используют раствор щелочи или хлоралгидрата.
Препарат на предметном стекле накрывают покровным стеклом.
Чтобы исключить образование пузырьков воздуха, покровное стекло
следует класть наклонно, прикоснувшись сначала одним краем к
жидкости, а затем положить полностью. Попавшие пузырьки воздуха удаляют легким постукиванием по покровному стеклу тупым
концом препаровальной иглы или слегка нагревают.
Микроскопический анализ заключается в том, чтобы в общей
картине анатомического строения различных органов и тканей растений определить (отыскать) характерные признаки, по которым
изучаемый объект можно отличить от других объектов, либо описать его компонентный состав. Например, определить, что в состав
растительного сырья входят измельченные корни, и (по возможности) – какому растению они принадлежат (в комплексе с химическим исследованием). Основой микроскопического анализа является
анатомия растений. В зависимости от морфологической принадлежности сырья (лист, стебель, корень и т. д.), измельченные части растений (в виде порошков) имеют различные анатомические картины.
52
Для измельченных семян (в порошке) наиболее характерными
являются слои кожуры семени, особенно механический и пигментный. Слои кожуры семени в порошке чаще лежат пластами; реже
встречаются в виде отдельных элементов (каменистые клетки) или
небольшими группами. Нередко в порошке встречаются сочетания
двух или трех слоев кожуры семени. Из элементов плода обычно
хорошо сохраняют свою форму клетки эпидермиса (наружного и
внутреннего – экзокарпий и эндокарпий), встречаются обрывки эндосперма с жирным маслом.
При микроскопическом исследовании измельченных корней,
корневищ, клубней наиболее важное диагностическое значение
имеют обрывки сосудов и трахеид (вторичное утолщение сосудов),
механические элементы (волокна, каменистые клетки), крахмальные
зерна (или другие запасные питательные вещества), в некоторых
объектах – млечники, секреторные вместилища или их фрагменты.
В измельченной коре характерным качеством является отсутствие элементов ксилемы, а определяющим – наличие механических
элементов, которые встречаются в виде отдельных клеток (каменистые клетки) или лежат группами или пучками (пучки волокон).
Большое значение имеют обрывки пробки (особенно если она имеет
характерный цвет), кристаллы оксалата кальция.
При микроскопическом исследовании измельченных трав (порошков трав) можно обнаружить элементы стеблей, листьев, плодов;
реже – цветков. Для элементов стеблей характерны механические волокна, эпидермис, отличающийся обычно многоугольными или прямоугольными вытянутыми по оси клетками, обрывками довольно
крупных прямых сосудов, в отличие от разветвляющихся проводящих
пучков листа, которые обычно лежат отдельными крупными кусками.
Часто в порошке листьев встречаются фрагменты листа в поперечном
сечении (иногда на таком фрагменте можно увидеть все ткани листовой пластинки: верхний эпидермис, палисадную ткань, губчатую
ткань, нижний эпидермис, мелкие проводящие пучки). Основные диагностические элементы листьев – эпидермис, волоски, железки, кристаллы. Эпидермис характеризуется определенной формой клеток и
их очертанием (извилистые, многоугольные, прямоугольные, вытянутые в одном направлении и т. д.). Эпидермис листьев имеет устьица.
Из цветков в порошке трав легко узнать пыльцу (по характерной
форме и размеру); реже – эпидермис чашечки.
53
ЛИТЕРАТУРА
1. Веселовская Н.В., Коваленко А.Е. Наркотики. – М.: «Триада-Х», 2000.
2. Гончарова Т.А. Энциклопедия лекарственных растений. – М.: Издательский дом МСП, 1997.
3. Долгова А.А., Ладыгина Е.Я. Руководство к практическим занятиям
по фармакогнозии. – Изд. 2-е. – М.: «Медицина», 1977.
4. Жизнь растений. Цветковые растения. – Т. 5. – Ч. 2. – М.: «Просвещение», 1981.
5. Машанов В.И., Покровский А.А. Пряно-ароматические растения. –
М.: «Агропромиздат», 1991.
6. Машковский М.Д. Лекарственные средства. – Изд. 14-е. – М.: «Новая
волна», 2000.
7. Методы экспресс-анализа наркотиков, являющихся предметом злоупотребления. – Нью-Йорк: ООН, 2000.
8. Муравьева Д.А. Фармакогнозия (с основами биохимии лекарственных веществ). – Изд. 2-е. – М.: «Медицина», 1981.
9. Никитин А.А., Панкова И.А. Анатомический атлас полезных и некоторых ядовитых растений. – Л.: «Наука» (Ленинградское отделение), 1982.
10. Растения тибетской медицины (опыт фармакогностического исследования) / Отв. редактор канд. биол. наук Т.П. Анцупова. – Новосибирск:
«Наука» (Сибирское отделение), 1989.
11. Рекомендуемые методы анализа производных бензодиазепина,
находящихся под международным контролем. – Нью-Йорк: ООН, 2000.
12. Сатоскар Р.С., Бандаркар С.Д. Фармакология и фармакотерапия. –
М.: «Медицина», 1986.
13. Симонов Е.А., Найденова Л.Ф., Ворнаков С.А. Наркотические средства и психотропные вещества, контролируемые на территории Российской
Федерации. – М.: «Интерлаб», 2003.
14. Сорокин В.И., Семкин Е.П., Беляев А.В. Отбор проб при исследовании наркотических средств. – М.: ЭКЦ МВД России, 1994.
15. Турова А.Д., Сапожникова Э.Н., Вьен Дыок Ли. Лекарственные
растения СССР и Вьетнама. – М.: «Медицина», 1987.
16. Харкевич Д.А. Фармакология. – М.: «Медицина», 1987.
17. Четли Эндрю. Проблемные лекарства // HAI. – 1998.
18. Clarke,s isolation and identification of drugs // The Pharmaceutical Press. –
London, 1986.
19. Drug Identification Bible, Third Edition, Denver, Colorado.
20. Schmidbauer W., Scheidt J. Handbuch der Rauschdrogen // Fischer
Taschenbuch Verlag. – 1998.
21. The Merck Index, Twelfth Edition on CD-ROM, ver. 12:1, 1996.
54
ОГЛАВЛЕНИЕ
Объекты исследования................................................................................ 3
Проведение исследования ........................................................................ 10
Предварительное исследование .......................................................... 10
Исследование методом качественных цветных реакций .............. 10
Исследование методом тонкослойной хроматографии ................. 11
Исследование методом газовой хроматографии ............................. 12
Исследование методом хромато-масс-спектрометрии .................. 16
Исследование методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии......................................................................................... 17
Исследование методом ИК-спектроскопии...................................... 22
Исследование методом УФ-спектроскопии ..................................... 23
Приложения................................................................................................... 26
Приложение 1. Масс-, ИК-, УФ-спектры и жидкостные
хроматограммы контролируемых веществ, входящих в таблетки
для похудания .................................................................................................... 27
Приложение 2. Состав и методика приготовления реактивов,
используемых при проявлении пластин для тонкослойной
хроматографии .................................................................................................. 50
Приложение 3. Исследование методом оптической микроскопии ........ 51
Литература ..................................................................................................... 53
55
План выпуска литературы ЭКЦ МВД России, 2007, поз. 9
Владимир Игоревич Сорокин
Георгий Викторович Любецкий
Михаил Александрович Макаров
Михаил Анатольевич Дроздов
Вадим Вячеславович Гладырев
Юлия Михайловна Моргункова
Владимир Петрович Мелкозеров
Александр Николаевич Смирнов
ЭКСПЕРТНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ТАБЛЕТОК ДЛЯ ПОХУДАНИЯ,
СОДЕРЖАЩИХ КОНТРОЛИРУЕМЫЕ ВЕЩЕСТВА
Методические рекомендации
Редактор М. П. Фроленко
Технический редактор К.И. Новичков
Корректоры И.Н. Сорочихина, Н.В. Кунеева
_________________________________________________________________________________________________
Подписано в печать 07.06.2007 г. Формат 60×90 1/16. Печать офсетная.
Печ. л. 3,5. Уч.-изд. л. 3,75. Тираж 650 экз. Заказ №
_________________________________________________________________________________________________
ОАО «Щербинская типография», 117623, г. Москва, ул. Типографская, д. 10
56
ГОТОВЯТСЯ К ПЕЧАТИ
Методические рекомендации: В.И. Сорокин,
Г.В. Любецкий, В.П. Мелкозеров, А.В. Лабутин,
И.В. Рамусь. Экспертное исследование дезоморфина.
В рекомендациях изложена комплексная методика исследования препаратов, содержащих дезоморфин, с использованием методов капельных
цветных реакций, тонкослойной, газовой, жидкостной хроматографии, хромато-масс-спектрометрии.
Приведен справочный материал в виде спектров и
хроматограмм.
Рекомендации предназначены для сотрудников экспертно-криминалистических подразделений
МВД, ГТК, ФСБ и ФСКН России.
57