Ultrabinafsha va ko'rinadigam sohadagi spektrofotometrya usulida dori vositalarini taxlili (1)

1
MUNDARIJA:
KIRISH
I.-BOB ADABIYOTLAR SHARXI
1. 1. uv spektrofotometriya usulidan foydalanish sohalari
II. –BOB TAJRIBA QISM
2.1 UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullari
2.2 farmatsevtika tahlilida uv spektrofotometriyasini qo'llash
XULOSA
FOYDALANILGAN ADABIYOTLAR
2
Kirish
Oliy ta’limning maqsadi respublikamizning ijtimoiy-iqtmsodiy va madaniy
rivojini ta’minlashga, o‘zi tanlagan mutaxassislik bozor iqtisodiyoti sharoitida mustaqil
ishlashga layoqatli, yuqori malakali raqobatbardosh kadrlarni tayyorlashdan iborat.
Tayyorlanayotgan mutaxassislarga real iqtisodiyot tarmoqlari va sohalardagi mavjud
talablarga alohida e’tibor qaratilgan holda, o‘sib kelayotgan yosh avlodga ta’lim va
tarbiya berish sohasidagi moddiy-texnika bazasini yanada mustahkamlash, undan
oqilona va samarali foydalanishni ta’minlash, davlat ta’lim standartlarini, o‘quv
dasturlari va o‘quv uslubiy adabiyotlarini takomillashtirish ishlari kо’rib chiqildi.
Ushbu kurs ishining maqsadi UV spektrofotometriya usulini farmatsevtika
amaliyotida qo'llashni o'rganishdir.
Kurs ishining aniq maqsadlari:
Ushbu mavzu bo‘yicha adabiyotlar tahlilini o‘tkazish;

Farmatsevtika amaliyotida ushbu usuldan foydalanishning asosiy
yo‘nalishlarini tavsiflash;

UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullarini
tavsiflash;

UV spektrofotometriyasi yordamida aniqlanishi mumkin bo‘lgan o‘ziga
xos moddalarni tavsiflash;

Ushbu qurilmaning ishlash tartibini tavsiflang;

UV spektrofotometrlarning asosiy turlarini sanab bering va tavsiflang;
Dorivor moddaning sifatini nazorat qilish uchta asosiy bosqichni o'z ichiga oladi:
haqiqiyligini tekshirish (identifikatsiya qilish), tozaligini tekshirish (ifloslanishlarni
aniqlash) va farmakologik faol komponentni miqdoriy aniqlash. Farmatsevtik tahlil
rivojlanishning barcha bosqichlarida, ishlab chiqarish jarayonida, yakuniy mahsulot
sifatini nazorat qilishda va bir nechta dorivor va yordamchi moddalarning aralashmasi
3
bo'lgan ko'plab dozalash shakllarida amalga oshiriladi. Ob'ektlarning bunday xilmaxilligi tufayli sezgirlik, aniqlik, takroriylik va tahlil davomiyligiga qo'yiladigan talablar
har xil bo'lishi mumkin. Shuning uchun farmatsevtik tahlilda ham kimyoviy, ham fizikkimyoviy usullar qo'llaniladi, ularning afzalliklari yaxshi ma'lum. Fizik-kimyoviy
usullar fundamental farmatsevtika tadqiqotlari va farmatsevtik tahlil amaliyotiga tobora
ko'proq kiritilmoqda . Ular dorivor moddalarning turli guruhlarini [13], ularning
standart namunalarini [1], shuningdek, planshetlar, malhamlar, in'ektsiya eritmalari,
tomchilar va boshqa ko'p komponentli dorivor aralashmalarni aniqlash va miqdoriy
aniqlash uchun ishlatiladi. Farmatsevtik tahlilda foydalanish uchun eng qulay
fotometrik usullar - bu moddaning ma'lum bir to'lqin uzunligi diapazonida
elektromagnit nurlanish bilan o'zaro ta'sirini o'rganadigan UV spektrofotometriyasi.
4
I.-BOB ADABIYOTLAR SHARXI
1.1. UV spektrofotometriya usulidan foydalanish sohalari
So'nggi yillarda qayd qiluvchi asboblar yaratilishi munosabati bilan
spektrofotometriyani miqdoriy va sifat tahlili va kimyoviy kinetikada qo'llash ayniqsa
kengaydi. Kimyoviy reaksiyalar kinetikasini o'rganishda odatda boshlang'ich moddalar
va reaksiya mahsulotlarining turli yutilishlarga ega bo'lishidan foydalaniladi. Bu vaqt
o'tishi bilan ularning kontsentratsiyasidagi o'zgarishlarni kuzatish imkonini beradi.
Hozirgi vaqtda tez reaksiyalar kinetikasini o'rganish uchun bir qancha maxsus
texnikalar ishlab chiqilgan. Spektrofotometrlar to'xtab qolgan o'rnatish bilan birgalikda
yaratilgan bo'lib, ular yarim yemirilish davri 1 dan 10~3 sekundgacha bo'lgan
reaksiyalarni o'rganish imkonini beradi. [23]. UV spektrofotometriyasi dorixonada
keng qo'llanilishini topdi, chunki Bu dorilarni tahlil qilishning eng oddiy va eng
samarali usuli. Dori vositalarining farmatsevtik tahlilining barcha bosqichlarida
(haqiqiyligini tekshirish, yaxshi sifat, miqdoriy aniqlash) foydalaniladi. Ushbu usul
yordamida turli xil dozalash shakllarini sifat va miqdoriy tahlil qilish uchun ko'plab
usullar ishlab chiqilgan, jumladan: geterotsiklik seriyali dorivor moddalar: (pirazol,
imidazol, indol, piridin, pirimidin, piperazin, akridin, fenotiyazin hosilalari, shuningdek
alkaloidlar, steroid birikmalar, antibiotiklar , vitaminlar [11, 17.25]), salitsil kislota
hosilalarini aniqlash [10], oksitetratsiklin gidroxlorid [16], antipirin, amidopirin,
analgin, butadion va boshqalar [11, 21]. Arilalifatik va aromatik kislotalarning
hosilalari bo'lgan dorivor moddalarni miqdoriy aniqlashda ijobiy natijalarga erishildi,
bundan tashqari, tetratsiklin antibiotiklari va uning hosilalari, tropan alkalinoidlarning
sintetik hosilalari ( 11) ni aniqlash uchun UV spektrofotometriyasi qo'llaniladi ;
tropafen, homatropin gidrobromid) va ularning gidroliz mahsulotlari [20], indol
hosilalari (diazolin, dimekarbin, indopan, meksamin, serotonin adipat) [17].
UV spektrofotometriyasi asosida sulfanilamid preparatlarini tahlil qilishning
5
yagona usuli ishlab chiqildi [21], barbiturik kislota hosilalari bo'lgan dorivor
moddalarni standartlashtirish usuli [22] va 1,4-benzodiazepinni aniqlash usuli
takomillashtirildi. Spektrni raqamli shaklga aylantirish va uni analogli spektral egri
chiziqlar bilan solishtirish orqali hosilalarni yaratish taklif qilingan [7].
UV spektrofotometriya usuli magnetitli va magnit xususiyatga ega [23,24],
bromli dori moddasi tebrofen [25], oksazil [26], paratsetamol [27] va antimikrobiyal
tashuvchilardan olingan dori vositalari sifatini nazorat qilish uchun istiqbolli
hisoblanadi. -kuyish dori xymedon [28]. Mukopolisaxarid geparin UV mintaqasida 257
nm [29] da aniqlanadi. Farmatsevtik tahlilda ultrabinafsha nurlar va ko'rinadigan
hududlarda spektrofotometriya ko'pincha ajratish usullari (nozik qatlam va boshqa
turdagi xromatografiya) bilan birlashtiriladi [17,4]. Tuya [12,15] va celandine [9,13]
dan olingan gomeopatik damlamalarni standartlashtirish uchun sirka kislotasida
(406,410 nm) alyuminiy xlorid bilan rangli mahsulot hosil qilish asosida flavonoidlarni
aniqlash usullari ishlab chiqilgan. Gidroksamik reagent bilan reaksiyaga asoslanib, pion
xom ashyosi va damlamasi [15] hamda ona oʻsimlik xom ashyosi [31] tarkibida
iridoidlarni (oʻsimliklardagi biologik faol moddalar) fotokolorimetrik aniqlash usuli
ishlab chiqilgan.
Bundan tashqari, RNK va DNK kontsentratsiyasini aniqlash uchun UV
spektrofotometriyasidan foydalanilganligi haqida dalillar mavjud. RNK va DNK UV
nurlarini o'zlashtiradi va shu tufayli bu moddalarning kontsentratsiyasini miqdoriy
aniqlash mumkin . [28]
Identifikatsiya qilish uchun spektral egri chiziqlarning tabiati va o'ziga xos
yutilish ko'rsatkichlarining qiymatlari haqidagi ma'lumotlarni tizimlashtirgan dorivor
moddalar spektrlari atlasidan foydalanish mumkin.
1-rasmda ko'rsatilgan benzolning UV mintaqasidagi yutilish spektrini ko'rib
chiqamiz.U uchta tasmaga ega. Eng uzun to'lqin uzunligi (255 nm) past intensivlikka
ega (   200 l-mol_1 * sm -1 ), chunki bu taqiqlangan  ->  *-o'tish bilan bog'liq. Bu
o'tish faqat tebranish energiya darajalari bilan o'zaro ta'sir qilish natijasida mumkin
6
bo'ladi. Tegishli tarmoqli aniq belgilangan tebranish tuzilishiga ega. Taxminan 200 nm
mintaqada yana bir kuchliroq (   8000 l * mol_1 * sm -1 ) tasma kuzatiladi. Uchinchi,
eng qizg'in band (   10 5 l*mol_1 * sm -1 ) ruxsat etilgan  ->  *-o'tishga mos keladi.
200 220 240 260
Guruch. 1. UV hududida benzolning yutilish spektri.
Absorbsiya y o'qida molyar yutilish koeffitsientining logarifmi sifatida
ifodalanadi. [7]
7
II. –BOB TAJRIBA QISM
2.1 UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullari
UV spektrofotometriyasi ma'lum bir tor to'lqin mintaqasidagi moddaning
elektromagnit nurlanishning yutilish miqdorini o'lchashga asoslangan . Odatda, UV
o'lchovlari uchun 200 dan 800 nm gacha bo'lgan taxminan monoxromatik nurlanish
qo'llaniladi. [8]
UV mintaqasida radiatsiya manbalari sifatida, asosan, deyteriy lampalar
ishlatiladi va ko'rinadigan hududda volfram yoki (ko'proq va tez-tez) halogen lampalar
ishlatiladi. [7]
Yorug'likni monoxromatizatsiya qilish uchun siz eng oddiy qurilma - yorug'lik
filtridan foydalanishingiz mumkin. [7]
Miqdori. Yuqorida aytib o'tilganidek, ultrabinafsha spektrofotometriya dori
vositalarini miqdoriy aniqlash uchun keng qo'llaniladi. Usulning sezgirligi, asosan,
moddaning yutilish qobiliyati bilan belgilanadi va molyar yutilish koeffitsienti bilan
ifodalanadi.
Spektrofotometriya
yordamida
tahlil
qilinadigan
moddalarning
chegaralangan kontsentratsiyasi odatda kislota-asos titrlash yoki gravimetrik
o'lchovlarda qo'llaniladiganidan past bo'ladi. Bu holat spektrofotometriyaning oz
miqdordagi moddalarni, ayniqsa turli xil dozalash shakllarini aniqlash uchun
ishlatilishini tushuntiradi.
Miqdoriy tahlilning asosiy sharti Buger-Lambert-Bi qonuniga rioya qilishdir
Buger (1698-1758) va Lambert (1728-1777) tomonidan olib borilgan tadqiqotlar shuni
ko'rsatdiki, yuz nisbiy optik zichlik kyuvetaning qalinligi bilan to'g'ridan-to'g'ri
proportsionaldir. Yutuvchi moddaning eritmasining optik zichligi uning molyar
konsentratsiyasiga bog'liqligi Beer (1825-1863) tomonidan aniqlangan. Bu barcha
bog'liqliklarni birlashtirgan qonun Lambert-Beer yoki Bouger-Lambert-Beer qonuni
8
deb ataladi. [7] Spektrofotometriya va ultrabinafsha ko'rinadigan hududga nisbatan
quyidagicha yoziladi:
A   ( ) * b * c
Bu erda: -  (  ) to'lqin uzunligidagi  molyar yutilish koeffitsienti (l*mol
1
1
*sm )
,
b - optik yo'l uzunligi (sm),
c - yutuvchi zarrachalar konsentratsiyasi (mol/l).
Qonunga muvofiqligini tekshirish uchun qaramlikni chizing: yutilish - to'lqin
uzunligi yoki har bir standart eritma uchun omilni hisoblang va A / c qiymati doimiy
bo'lib qoladigan kontsentratsiya oralig'ini aniqlang.
Bu usul yordamida molekulalar tarkibidagi ma'lum guruhlar - xromoforlar,
shuningdek aromatik fragmentlar, uch yoki qo'sh bog'lar, shuningdek, quyidagi
guruhlarni o'z ichiga olgan moddalarni aniqlash mumkin: azo -, nitro- va boshqalar.
Spektrofotometrik miqdoriy aniqlashning ikkita tubdan farq qiladigan usullari
mavjud va qo'llaniladi. (HFClar bo'yicha) Ulardan biriga ko'ra, foiz (x) dagi moddaning
tarkibi oldindan hisoblangan assimilyatsiya qiymati asosida hisoblanadi, ko'pincha
qiymatga asoslanadi:
1%
A1cм
Х 
А*b
A0 * a
Bu erda b - suyultirish - namuna, g.
Tabletkalardagi kortizon asetat tarkibini HFC yordamida aniqlash bunday
aniqlashga misol bo'la oladi.
9
Ushbu usulning asosiy kamchiligi hammaga ma'lum bo'lgan haqiqatdir: turli xil
spektrofotometrlar (hatto bir xil modeldagi va bir xil ishlab chiqaruvchining turli xil
qurilmalari) bir xil standart eritma uchun yutilish qiymatida sezilarli og'ishlar beradi.
Ushbu usul quyidagi moddalarni aniqlashi mumkin: merkaptopurin, papaverin
gidroxloridi, taninlar (tanin), flavonoidlar (rutin).
sinov moddasining emilishini bir xil sharoitlarda aniqlangan standart
namunaning emilimi bilan solishtirish orqali ta'minlanadi . Bu spektrofotometrik
o'lchovlarga ta'sir qiluvchi ko'plab omillarni, masalan, to'lqin uzunligi va tirqish
kengligini o'rnatishni hisobga oladi. Erituvchining yutilishi uchun kyuvetaning yutilish
tuzatishlari va boshqalar.
Davlat federal farmakopeyasiga ko'ra, individual moddalarni tahlil qilishda
dorivor moddaning tarkibini spektrofotometrik miqdoriy aniqlash ushbu moddaning
maxsus tayyorlangan standart namunasidan foydalanish bilan bog'liq bo'lishi kerak.
Masalan, HFC tarkibiga kiradigan steroid moddalar. Dozalash shakllarini miqdoriy
tahlil qilishda, agar maxsus ko'rsatmalar mavjud bo'lmasa, standart namuna sifatida
farmakopeyaning barcha talablariga javob beradigan moddadan foydalanishga ruxsat
beriladi. Hisob-kitoblar uchun, agar boshqacha ko'rsatilmagan bo'lsa, bunday standart
namuna 100% sifatida olinadi. Bundan tashqari, tashqi standart usul mavjud - bu
standart sifatida o'rganilayotganidan boshqa moddadan foydalaniladigan usul. Masalan,
karotinoidlarni tahlil qilish uchun kaliy dixromati standart sifatida ishlatiladi.
Standart namunadan foydalanganda individual moddaning miqdoriy tarkibini
foizda (x) hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi:
Х
А1 * С0 * b * 100
A0 * a
tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi qayerda ; А1
А0
- standart namuna eritmasining optik zichligi;
10
С 0 - standart namuna eritmasining konsentratsiyasi - suyultirish;
a - vazn, g.
Tabletning o'rtacha og'irligiga asoslangan grammdagi (x) bitta tabletkadagi
moddaning tarkibi formulalar yordamida hisoblanadi:
Х
A1 * C 0 * b * q
A0 * a
Х 
A1 * b * q
A0 * a * 100
bu erda q - planshetning o'rtacha og'irligi, g.
Agar miqdoriy o'lchovlar etarlicha tez-tez bajarilsa. Standart namuna o'rniga mos
keladigan standart namuna uchun olingan mos kalibrlash egri chizig'idan foydalanish
mumkin. Ushbu grafik tekshirilayotgan moddaning absorbsiyasi tahlilda ishlatiladigan
konsentratsiyaga mutanosib bo'lganda foydalanish mumkin . Bunday kalibrlash egri
chiziqlarini tez-tez tekshirish va har safar yangi asbob va yangi reaktivlar seriyasi uchun
yangidan tayyorlash kerak emas.
Kalibrlash sxemasi - bu optik zichlikning konsentratsiyaga eksperimental
ravishda aniqlangan grafik bog'liqligi. Ushbu grafik, agar tekshirilayotgan modda
uchun absorbsiya miqdoriy aniqlashda ishlatiladigan yakuniy konsentratsiyaning 75125% oralig'idagi konsentratsiyaga mutanosib bo'lsa ishlatiladi. [9]
Bu usul kabi moddalarni aniqlashi mumkin: kortizon asetat, pregnin, proksikam.
0,025 tabletkalarda kortizon asetat miqdorini aniqlash
Maydalangan tabletkalarning aniq tortilgan qismidan taxminan 0,1 g
maydalangan tiqinli 100 ml hajmli o‘lchov kolbasiga solinadi, 60-70 ml 95% li spirt
qo‘shiladi va suv hammomida 10-15 ga aralashtirib ozgina isitiladi. daqiqa.
Sovutgandan so'ng, eritmaning hajmini 95% spirt bilan belgiga keltiring, yaxshilab
aralashtiring va 1 soatga qoldiring. Cho'kmani silkitmasdan, 5 ml eritmadan boshqa 100
ml hajmli o'lchov kolbasiga o'tkazing va eritmaning hajmini bir xil spirt bilan belgilang.
Optik zichlik to'lqin uzunligi 238 nm bo'lgan spektrofotometr yordamida sharning
11
qalinligi 1 sm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi.
Kortizon asetatning g tarkibidagi miqdori formula yordamida hisoblanadi
X
A * 20 * mсс
390 * m
Bu erda: - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi sr - tabletkaning o'rtacha
og'irligi - maydalangan tabletkalar kukuni namunasining og'irligi.
- 238 nm to'lqin uzunligida kortizon asetatning sinishi ko'rsatkichi.
Kortizon asetatning tarkibi bitta tabletkaning o'rtacha og'irligiga qarab 0,0220,028 g bo'lishi kerak.
Pregninni miqdoriy aniqlash
1 sm qalinlikdagi shar bilan kyuvetada 241 nm to‘lqin uzunligidagi
spektrofotometr yordamida moddaning 95% spirtdagi 0,001% li eritmasining optik
zichligini aniqlang .
Pregnin tarkibi quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi:
X
A * C 0 * 100
A0 * C
Qayerda:
A - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi;
А0 - standart namuna eritmasining optik zichligi;
С 0 - standart namuna eritmasining konsentratsiyasi;
C - tekshiriluvchi eritmaning konsentratsiyasi.
Moddadagi prignin miqdori 97 dan kam va 103% dan oshmasligi kerak.
12
0,01 g tabletkalarda piroksikamni miqdoriy aniqlash
Piroksikamning UV yutilish spektri
334 nm da analitik yutilish chizig'i mavjud bo'lib, u piroksikamni miqdoriy
aniqlash uchun ishlatiladi.
100 ml kolba, 10 ml iliq 95% li spirt qo‘shing, 15 daqiqa chayqatib, sovutib, 0,1
mol/l xlorid kislota eritmasi bilan hajmini belgiga moslang, aralashtiramiz va ko‘k
lentali qog‘oz filtr orqali filtrlang, birinchisini tashlab yuboring. 10 ml filtrat; 3 ml filtrat
50 ml hajmli o‘lchov kolbasiga quyiladi, xlorid kislotaning 0,1 mol/l eritmasi bilan
hajmi belgiga sozlanadi va aralashtiriladi. Olingan eritmaning optik zichligi,
shuningdek, to'lqin uzunligi 334 nm bo'lgan spektrofotometrda to'pning qalinligi 10
mm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi , biz etalon eritma sifatida 0,1 mol/l xlorid kislotadan
foydalanamiz; Parallel ravishda piroksikam RSO eritmasining optik zichligi o'lchanadi.
G dagi piroksikamning tarkibi quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi:
X  0.2 *
A * m0 * mcp
A0 * m
Qayerda:
13
A - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi;
А0 - standart namunadagi piroksikamasr eritmasining optik zichligi - tabletkaning
o'rtacha og'irligi, g - maydalangan planshetlar kukuni namunasining og'irligi.
m0 - RSO piroksikam namunasining og'irligi g.
Piroksikamning tarkibi bitta tabletkaning o'rtacha og'irligiga qarab 0,009 - 0,011
g bo'lishi kerak.
Tiamin gidrobromidni aniqlash
Taxminan 20 mg modda 10 ml suvda R eritiladi, 1 ml sirka kislotasi R va 1,6 ml
1 M natriy gidroksid eritmasi qo'shiladi, suv hammomida 30 daqiqa davomida isitiladi.
keyin salqin. Olingan probirkaga 5 ml suyultirilgan natriy gidroksid eritmasi R, 10 ml
kaliy fertsianid eritmasi R, 10 ml butanol R qo'shiladi va 2 minut davomida kuchli
chayqatiladi. Yuqori alkogolli sfera, ayniqsa 365 nm ultrabinafsha nurlari ostida ko'k
lyuminestsentni ko'rsatadi (yutilish indeksi usuli)
Piridoksin gidroxloridni aniqlash
1,0 ml S eritmasidan 0,1 M xlorid kislota eritmasi (bu A eritmasi) bilan 50,0 ml
hajmga keltiriladi. 1,0 ml A eritmasi 0,1 M xlorid kislota eritmasi bilan 100,0 ml
hajmgacha o'rnatiladi. 250 - 350 nm mintaqada hosil bo'lgan eritmaning ultrabinafsha
nurlarini yutish spektri 288 dan 296 nm gacha bo'lgan to'lqin uzunligida maksimal
bo'lishi kerak. Maksimal o'ziga xos assimilyatsiya tezligi 425 dan 445 nm gacha bo'lishi
kerak
A   *c *b
Qayerda:
- molyar yutilish ko'rsatkichi - optik yo'l uzunligi, sm
c - eritmadagi moddalarning litr uchun moldagi konsentratsiyasi
Qiymat
1%
A1cм
o'ziga xos assimilyatsiya tezligini ifodalaydi
14
10 * 
1% 
ММ
1cм
A
Atropin sulfatdagi apoatropin aralashmalarini aniqlash
Nopoklarning ruxsat etilgan miqdori 0,5% dan oshmaydi.
10 g modda 0,01 M xlorid kislota eritmasida eritiladi va eritmaning hajmi xuddi
shu erituvchi bilan 100,00 ml ga o'rnatiladi. Olingan eritmaning optik zichligi 245 nm
to'lqin uzunligida o'lchanadi. Suvsiz moddaga nisbatan o'ziga xos sinishi indeksi 4,0
dan oshmasligi kerak. [3.9]
A   *c *b
Qayerda:
- molyar yutilish ko'rsatkichi - optik yo'l uzunligi, sm
c - eritmadagi moddalarning litr uchun moldagi konsentratsiyasi
1%
A1cм
Qiymat
1% 
1cм
A
o'ziga xos assimilyatsiya tezligini ifodalaydi
10 * 
ММ
Zamonaviy fizik-kimyoviy usullar bir qator hollarda tajriba hayvonlarining
mavjudligini talab qiladigan dorivor moddalar sifatini biologik baholashning
murakkab, qimmat usullarini almashtirishga imkon berdi. Xususan, biologik
suyuqliklarda boshqa antibiotiklar borligida reagent sifatida Calcone (kislotali bo'yoq)
yordamida
tetratsiklin
antibiotiklarini
to'g'ridan-to'g'ri
va
differentsial
spektrofotometriya [2,26] va aminoglikozidli antibiotiklarni ekstraksiya-fotometrik
usulda tahlil qilishda ham solishtirma natijalarga erishildi. 15,18 ].
So'nggi yillarda dorivor moddalar sifatini nazorat qilish va standartlashtirish
uchun turli xil fotometrik usullardan foydalanish bo'yicha bir nechta sharhlar nashr
etildi [14.17]. Boshqa fizik-kimyoviy usullar bilan bir qatorda, suvda eruvchan B
vitaminlarini tahlil qilish uchun to'g'ridan-to'g'ri va differentsial spektrofotometriya
15
usullari [5] tavsiya etiladi UV va ko'rinadigan hududlarda yog'da eriydigan vitaminlarni
tahlil qilish uchun, A, E, D [6] va barbiturik kislota hosilalari [30], shuningdek, hosila
spektrofotometriyasi [16]. Progestin gormonlarini o'z ichiga olgan dorilar UVko'rinadigan spektrofotometriya bilan aniqlanadi [17].
2.2 farmatsevtika tahlilida uv spektrofotometriyasini qo'llash
Analitik operatsiyalarning soddaligi va ko'p hollarda yuqori sezuvchanlik tufayli
usul farmatsevtika tahlilida keng qo'llanilgan.
UV spektrofotometriyasi haqiqiylikni (identifikatsiyani), benignlikni aniqlashda,
individual moddalarni ham, dozalash shakllarining tarkibiy qismlarini ham aniqlashda
ishlatiladi; "eritish" va "dozalashning bir xilligi"testlarida sinov.
Usul farmakokinetika, bioavailability, barqarorlikni o'rganish va yaroqlilik
muddatini belgilash kabi dorivor moddalar va dozalash shakllarini o'rganish
bosqichlarida qo'llaniladi.
Dorivor moddalarning haqiqiyligini tekshirish. Farmatsevtika tahlilining ushbu
bosqichi quyidagi usullarga asoslanadi:
a) maksimal va minimal yutilish mintaqalarini tavsiflovchi λ max va λ min spektrida
bo'lish;
b) turli to'lqin uzunliklarida o'rganilayotgan eritmaning optik zichligi
qiymatlarining nisbatlarini hisoblash;
C) o'ziga xos ko'rsatkich (E)kattaligi bo'yicha yutilish intensivligining
xarakteristikasi ;
D) tahlil qilinadigan moddaning spektrini xuddi shu moddaning standart namunasi
spektri bilan taqqoslash.
16
Barcha holatlarda spektrni nd – hal qiluvchi, kontsentratsiya, to'lqin uzunligi
oralig'i, kyuvetaning kattaligi (qalinligi) sharoitida olish kerak.
Olingan spektrdagi (a) holat uchun λ max va λ min, NDDA berilgan bir xil
xususiyatlar bilan taqqoslanadi – moddalarning o'ziga xosligi bilan ikkala qiymat ham
mos kelishi kerak (jadval.7).
Haqiqiylikni sinash uchun qulay usul-bu assimilyatsiya miqdorlarining ikki
maksimal nisbatini aniqlash. Bu asbobning o'zgaruvchan xususiyatlarining sinovga
ta'sirini kamaytiradi va standart namunadan foydalanish zaruratini yo'q qiladi. Ushbu
usul natriy para-aminosalitsilat natriy tahlilida qo'llaniladi
Jadval 1
Farmakopeya tahlilida ba'zi dorivor moddalarni aniqlashda ishlatiladigan uv
spektrlarining tavsifi
№ p Dorivor
Konsentratsiya
/p
modda
erituvchi
ishlatiladigan xususiyat
1
2
3
4
1
Amlodipin
0,005% 1% eritmada 0,1 λ max \ . 360 ± 2nm; E \ . 113-121
besilat
M HCl metanolda
2
Aminazin
0,0005% 0,01 M HCl da λ max = 254±2nm, 307±2nm
3
Anestezin
0,0005% 0,1 M NaOH λmax = 281±2нм; λmin = 238±2нм
va Identifikatsiya
da
17
qilish
uchun
4
5
Verapamil
0,002% 0,01 M HCl da
D229 = 0,61 – 0,64
gidroxloridi
D278= 0,23 – 0,24
Deksametazon 0,001% 95% spirtda
λmax = 240±2нм;
D 240nm / D 263nm= 1,9-2,1
6
Dibazol
0,002% 95% spirtda
λ max=244±2nm, 275±2nm, 281±2nm;
λ min=230±2nm, 259±2nm, 279±2nm;
spektr tasviri berilgan
7
λ max=253±2nm, 258±2nm, 264±2nm;
Difengidramin 95% spirtda 0,05%
λ min=244±2nm, 255±2nm, 263±2nm
8
Drotaverin
0,0015% 0,1 M HCl da
λ min=223±2nm,262±2nm, 322±2nm
gidroxloridi
9
Zopiklon
λ max=241±2nm, 302±2nm, 353±2nm;
0,001% 0,1 M HCl da
λmax=303±2нм;
D303=0,340-0,380
10
Kofur
95% etil spirtida 2,4- λ max= 231±2nm, 265±2nm;
dinitrofenilgidrazon
kofurining
273 nm dan 277 nm gacha bo'lgan
0,0006% hududda yelka
eritmasi
11
12
Askorbin
PH 7,0 bo'lgan bufer λmax=265±2нм
kislotasi
eritmasida 0,001%
Nikotinik
0,002% 0,1 M NaOH da λ max \
.
258±2nm,
264±2nm,
270±2nm; λ min \ . 240±2nm;
kislota
240Nm dan 256nm gacha bo'lgan
hududda ikkita aniqlanmagan yelka
kuzatiladi
18
13
Foliy kislotasi 0,001% 0,1 M NaOH da 230 dan 380 nm gacha bo'lgan
hududda GSO spektriga to'liq mos
keladi
14
Nitroksolin
PH
9,18
(98:2)bilan λ max=249±2nm, 341±2nm,
95% alkogol – bufer 452,5±2nm;
15
Ofloksatsin
eritmasi
228nm dan 238nm gacha va 258nm
aralashmasidagi
dan 268nm gacha bo'lgan mintaqada
0,0005% eritma
ikkita elka
0,001% 0,1 M HCl da
λ max= 226±2nm, 295±2nm;
λ min= 265±2nm
16
Papaverin
0,0025% 0,01 M HCl da λ max= 285±3nm, 309±2nm;
λ min = 289±2nm
gidroxloridi
17
Piratsetam
1% suvli eritma
230nm dan 350nm gacha bo'lgan
hududda aniq yutilish maksimallariga
ega emas
18
Progesteron
0,001% 95% spirtda
λ max\ . 241±2nm; E \ . 518-545
1
2
3
4
19
Ranitidin
0,01% suvli eritma
λ max \ . 229±2nm; 315±2nm;
gidroxloridi
20
D 229nm / D 315nm \ . 1.01-1.07
Sulfa-
NaOHda 0,000015%
Nisbatan kislotali eritma bilan olib
dimetoksin
HCl da 0,000015%
tashlangan preparatning gidroksidi
eritmasining
spektri
253±2nm, 268±2nm;
λ min= 260±2nm;
19
λ max \
.
Ishqoriy
eritmaga
tashlangan
nisbatan
preparatning
olib
kislotali
eritmasining spektri λ max \ . 288±2nm
ga teng
21
Tamoksifen
λ max \ . 237nm, 275nm
Metanolda 0,002%
sitrat
22
Famotidin
Fosfat
tamponida 230nm dan 350nm gacha bo'lgan
0,0025%
mintaqada RSO spektriga to'liq mos
kelish
23
Furazolidon
λ max=260±2nm, 367±2nm;
DMFda 0,0015%
λ min=302±2nm
24
Furatsilin
λ max=260±2nm, 375±2nm;
DMFda 0,0006%
λ min = 306±2nm
Haqiqiylikni tekshirishda ko'pincha e ni maksimal yutilish darajasida (masalan,
levomitsetin, epinefrin, progesteron uchun) hisoblash yoki ma'lum bir to'lqin uzunligi
diapazonidagi topilgan optik zichlik qiymatini NDDA berilgan qiymatlar bilan
solishtirish tavsiya etiladi. Shunday qilib, 230 dan 250 nm gacha bo'lgan mintaqada 0,5
mg/ml konsentratsiyali fosfat bufer eritmasida (pH \ . 6,9) piridoksin gidroxlorid
eritmasining yutilish spektri 254 va 324 nm da maksimal darajaga ega va bu maksimal
qiymatlarda optik zichlik mos ravishda 0,18 va 0,35 ga teng.
UV spektrofotometriyasidan foydalangan holda ba'zi haqiqiylik sinovlari standart
dorivor moddalar namunalarini (CO) qo'llashni talab qiladi. Bunday holda, CO
namunasi tayyorlanishi va bir vaqtning o'zida sinov moddasi bilan bir xil sharoitda
aniqlanishi kerak. Shunday qilib, etil spirtidagi 0,0005% etinitestradiol eritmasining
ultrabinafsha spektri bir xil konsentratsiyali eritma bilan bir xil to'lqin uzunliklarida
20
maksimal va minimal darajaga ega bo'lishi kerak, λ max \ . 281 nm da quruq modda
uchun hisoblangan assimilyatsiya qiymatlari 3% dan oshmasligi kerak. Ushbu usul
faqat bitta o'rganilayotgan birikmaning spektrini tahlil qilishdan ko'ra ishonchli
natijalarni beradi.
UV-spektrofotometriya yangi biologik faol moddalarni tadqiq qilishning spektral
usullarining tarkibiy komplekslaridan biridir. Spektrdagi ma'lum yutilish guruhlari
ushbu birikma tarkibida ma'lum funktsional guruhlar, tuzilmalar bo'laklari
(xromoforlar) mavjudligini ko'rsatishi mumkin. Bu fenil radikalini o'z ichiga olgan
moddalar spektrlarining o'xshashligini tushuntiradi, masalan, efedrin, difenhidramin,
atropin, benzilpenitsillin. Ular uchta yutilish maksimaliga ega: 251, 257 va 263 nm
(rasm.7).
O'zgartirilgan aromatik radikal – adrenalin, morfin, estradiol, levomitsetin va
boshqalarni o'z ichiga olgan dorivor moddalar spektrda maksimal 260 nm,
kortikosteroidlar guruhidagi dorivor moddalarda konjuge enon tizimiga ega – taxminan
238 nm (rasm).8).
Ba'zi dorivor moddalarda (barbiturik kislota hosilalari, sulfanilamidlar, fenollar,
ba'zi purin hosilalari va boshqalar) spektrning tabiati eritmaning pH darajasiga qarab
o'zgarishi mumkin (rasm. 9, 10, 11, 12, 14). Bunday holda, λ max (batoxromik siljish)
o'zgaradi,
yutilish
kuchayadi
(optik
zichlik
oshadi),
giperxromik
ta'sir
kuzatiladi. Kofein kislotali xususiyatlarga ega emas, shuning uchun uning kislotali va
gidroksidi muhitda bir xil to'lqin uzunligida maksimal yutilishi 272 nm
(rasm. 13). Ya'ni, UV spektrofotometriyasi tekshirilayotgan moddaning o'ziga xos
xususiyatlari haqida ma'lumot berishi mumkin.
Uv spektrofotometriyasi yordamida kimyoviy birikmaning tuzilishi to'g'risida bir
xonali xulosa chiqarish mumkin emas, chunki molekulada bir nechta xromofor borligi
21
sababli spektrni talqin qilish qiyin. Shunga qaramay, usul ba'zi guruhlarni –
xromoforlarni aniqlashga va konjugatsiyaning tabiati va darajasi to'g'risida xulosa
chiqarishga imkon beradi (konjugatsiya zanjirining uzayishi bilan maksimal
yutilishning uzoq to'lqinli mintaqaga siljishi kuzatiladi, rasm.11).
22
23
UV spektrofotometriyasi organik birikmalarning xususiyatlarini o'rganish uchun
ishlatiladi: vodorod bog'lanishini hosil qilish qobiliyati, kislotalar va asoslarning rk a ni
aniqlash, dorivor moddalarning murakkab birikmalarining tarkibi va xususiyatlarini
aniqlash, izomerizm.
Cis va trans izomerlari bir-biridan farq qiladigan spektrlarga ega. Trans shakli
odatda ko'proq yutadi va uning yutilish chizig'i uzoq to'lqinli mintaqaga siljiydi; bu
haqiqat reaktsiya paytida strukturaning o'zgarishini isbotlashi mumkin.
Biroq, UV spektrlari o'rganilayotgan moddaning tuzilishi haqida hech qanday
ma'lumot bermaydi, chunki ular faqat xromoforlar va heteroatomlarning mavjudligini
aniqlashga imkon beradi.
24
Bundan tashqari, UV spektrofotometriyasi bunday guruhlarni o'z ichiga olgan
moddalarni miqdoriy tahlil qilish uchun ajoyib imkoniyat yaratadi.
Benignlikni (tozalikni) tekshirishda identifikatsiyalash bilan bir xil xususiyatlar
qo'llaniladi. Aralashmalar mavjud bo'lganda λ max o'zgarishi mumkin, qo'shimcha
maksimallar paydo bo'ladi, yutilish intensivligi o'zgaradi.
Dorivor moddalarda mavjud bo'lgan o'ziga xos aralashmalar, qoida tariqasida,
o'rganilayotgan modda bilan yaqin kimyoviy tuzilishga ega. Shu sababli, dori moddasi
va uning o'ziga xos aralashmasi turli to'lqin uzunliklarida so'rilgan holatlar alohida
qiziqish uyg'otadi.
Masalan, adrenalinning λ max (I) 278 nm da joylashgan va uning o'ziga xos
nopokligi – adrenolon (II) 310 nm da maksimal yutilishga ega.
Farmakopeya maqolasining talabiga binoan, tozalik sinovi uchun tayyorlangan
0,05% epinefrin eritmasida 310 nm da optik zichlik 0,1 dan oshmasligi kerak (ya'ni
adrenalinda qat'iy normallashtirilgan adrenolon tarkibiga ruxsat beriladi).
Miqdoriy aniqlash. Uv spektrofotometriya usuli bilan miqdoriy aniqlash printsipi
quyidagicha: tahlil qilingan namunaning namunasi (modda, dozalash shakli va
boshqalar) mos erituvchida eritiladi, agar kerak bo'lsa, hosil bo'lgan eritmaning
suyultirilishi qo'shimcha ravishda tayyorlanadi va uning optik zichligi texnikada
ko'rsatilgan to'lqin uzunligi bilan o'lchanadi. Tahlil qilinayotgan moddaning
25
kontsentratsiyasi (tarkibi) ilgari tavsiflangan usullardan biri bilan topiladi (1.2.3.4band).
Tabletkalar, tabletkalar, in'ektsiya uchun quruq dorilar va faol moddasi 0,05 g yoki
undan kam bo'lgan kapsulalardagi dorivor moddalar uchun zamonaviy talablarga
muvofiq, dozalashning bir xilligi sinovi, ya'ni.har bir alohida dozadagi moddaning
tarkibi. Bunday baholash uchun, ayniqsa mg yoki uning fraktsiyalarida faol moddalar
mavjud bo'lsa (klofelin tabletkalari 0,075 va 0,15 mg faol moddalarni o'z ichiga oladi),
juda
sezgir
usuldan
foydalanish
talab
etiladi. Bu
ko'p
hollarda
UV
spektrofotometriyasidir.
Dorivor moddalarning biologik mavjudligini o'rganish dolzarbdir. Uning o'ziga
xos xususiyati "eritish" testidir (GF ΧΙ, nashr. 2, 154-sahifa). Odatda yuqori
sezuvchanlik bilan ajralib turadigan UV spektrofotometriyasi bu maqsadda eng ko'p
ishlatiladigan usullardan biridir (jadval.8).
Quyida UV mintaqasida spektrofotometrik usul yordamida ba'zi dorivor
moddalarni tahlil qilish usullari va jadvalda keltirilgan.8 farmakopeya tahlilida UV
spektrofotometriya usulidan foydalanishning bir qator misollari keltirilgan.
spektrofotometriya farmatsevtik dori sifati
26
Xulosa:
Kurs ishining maqsadiga erishish va berilgan muammolarni hal qilish jarayonida
quyidagi natijalarga erishildi: metodning qisqacha tavsifi berildi, ushbu usulning
qo'llanilishi sohalari ko'rsatilgan va zamonaviy UV spektrofotometrlarining turlari
ko'rsatilgan. tasvirlangan. Ushbu mavzu bo'yicha adabiyotlarni o'rganish natijasida
spektrofotometriya istiqbolli tahlil usuli ekanligini ta'kidlash mumkin.
27
Foydalanilgan adabiyotlar
1. Arzamastsev A.P., Lutseva T.Yu., Sadchikova N.P. Kimyo-farmak. va. 2001 yil, 35jild, 8-bet. 47.51.
2. Arzamastsev A.P., Pechennikov V.M., Rodionova G.M. Dorivor aralashmalarning
tahlili. M.: Sputnik kompaniyasi, 2000, 275 b.
. Bezugliy P.O., Grudko V.O., Taran S.G. va boshqalar. X.: Zoloti storinki, 2001, 238
b.
. Belikov V.G. Dorixona, 2000 yil, 49-v., 1-bet. 23.25.
. Belikov V.G., Kuregyan A.G. Abstrakt. hisobot xalqaro konf. "XXI asrda farmatsiya:
innovatsiyalar va an'analar". Sankt-Peterburg, 1999 yil, p. 228.
. Belikov V.G., Sami A.A., Solovey N.V. Dorixona, 1995 yil, 44-son, 41.42-bet
. Belikov V.G. Dorixona, 1979, 28-son, 5-bet. 52.63.
. Garmash A.V. Analitik kimyoning zamonaviy usullari M.: Texnosfera, 2003, 412 b.
. Ukraina davlat farmakopeyasi. H. 2001,531 b.
. Denisova M.N., Cherkasova O.G., Xaritonov Yu.Ya. Dorixona, 1996 yil, 45-jild, 3bet. 22-28.
. Karpenko V.A., Stepanyuk S.N. Dorixona, 1984 yil, 33-jild, 5-bet. 50-52.
. Kolpakova M.V., Popov D.M. Kimyoviy-dori. zh., 1994, 28-jild, 7-bet. 24-26.
. Larina M.L. Abdulina S.G., Sidullina S.A. Dorixona, 1999 yil, 48-son, 1-bet. 25.
. Lutseva A.I., Maslov L.G., Seredenko V.I. Kimyoviy-dori. zh., 2001, t. 35, № 10, bet.
41.46.
. Dori vositalarini tahlil qilish usullari. N.P. Maksyutina, F.E. Kogan, L.A. Korichenko
va boshqalar Kiev: Sog'liqni saqlash, 1984, 222 p.
. Maslov L.G., Evtushenko I.S., Lutseva A.I. Kimyoviy-dori. zh., 1998, 32-jild, 4-bet.
45.52.
. Selivanchikova I.B., Lyakina M.N., Kostennikova Z.P., 2001 yil, 50-son, s. 14.16.
. Saavedra F.E., Belikov V.G., Solovey N.V. Dorixona, 1976 yil, 25-jild, 1-bet. 78,79.
. Tiraspolskaya S.G., Belikov V.G. Dorixona, 1975 yil, 24-jild, 1-bet. 50,52.
28
. Tentsova A.I., Senov P.L., Belikov V.G. Dorixona, 1978 yil, 27-son, 7.12-bet.
. Chirkov S.V., Chekrishkina L.A. Dorixona, 2001 yil, 50-v., 6-bet. 27.28.
. Xoxlov V.Yu., Selemenev V.F., Xoxlova O.N. va boshqalar. zh., 1999, 33-jild, № 8.
p. 47.48.
. Fomicheva E.A., Lyakina M.N., Kostennikova Z.P. Dorixona, 2001 yil, 50-v., 5-bet.
13.15.
. Fedoseeva L.V., Popov D.M. Dorixona, 1997 yil, 46-v., 4-bet. 18.20.
25.
<http://analusis.edpsciences.org/index.php?option=article&access=standard&Itemid=
129&url=/articles/analusis/pdf/2000/10/dupuit.pdf>
.
<http://www.beckmancoulter.com/products/instrument/analytical/uvvis/du800_inst_d
cr.asp>
. http://www.chemnet.ru
. http://www.chemport.ru
. http://www.eurasianjournals.org/
. <http://www.powerhousemuseum.com/collection/database/?irn=348797>
. <http://www.powerhousemuseum.com/collection/database/?irn=348797>
. http://www.vestnik.vsu.ru
. http://en.wikipedia.org
. <http://www.xumuk.ru/encyklopedia/2/4164.html>
29