Ultrabinafsha va ko'rinadigam sohadagi spektrofotometrya usulida dori vositalarini taxlili (1)
реклама
1 MUNDARIJA: KIRISH I.-BOB ADABIYOTLAR SHARXI 1. 1. uv spektrofotometriya usulidan foydalanish sohalari II. –BOB TAJRIBA QISM 2.1 UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullari 2.2 farmatsevtika tahlilida uv spektrofotometriyasini qo'llash XULOSA FOYDALANILGAN ADABIYOTLAR 2 Kirish Oliy ta’limning maqsadi respublikamizning ijtimoiy-iqtmsodiy va madaniy rivojini ta’minlashga, o‘zi tanlagan mutaxassislik bozor iqtisodiyoti sharoitida mustaqil ishlashga layoqatli, yuqori malakali raqobatbardosh kadrlarni tayyorlashdan iborat. Tayyorlanayotgan mutaxassislarga real iqtisodiyot tarmoqlari va sohalardagi mavjud talablarga alohida e’tibor qaratilgan holda, o‘sib kelayotgan yosh avlodga ta’lim va tarbiya berish sohasidagi moddiy-texnika bazasini yanada mustahkamlash, undan oqilona va samarali foydalanishni ta’minlash, davlat ta’lim standartlarini, o‘quv dasturlari va o‘quv uslubiy adabiyotlarini takomillashtirish ishlari kо’rib chiqildi. Ushbu kurs ishining maqsadi UV spektrofotometriya usulini farmatsevtika amaliyotida qo'llashni o'rganishdir. Kurs ishining aniq maqsadlari: Ushbu mavzu bo‘yicha adabiyotlar tahlilini o‘tkazish; Farmatsevtika amaliyotida ushbu usuldan foydalanishning asosiy yo‘nalishlarini tavsiflash; UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullarini tavsiflash; UV spektrofotometriyasi yordamida aniqlanishi mumkin bo‘lgan o‘ziga xos moddalarni tavsiflash; Ushbu qurilmaning ishlash tartibini tavsiflang; UV spektrofotometrlarning asosiy turlarini sanab bering va tavsiflang; Dorivor moddaning sifatini nazorat qilish uchta asosiy bosqichni o'z ichiga oladi: haqiqiyligini tekshirish (identifikatsiya qilish), tozaligini tekshirish (ifloslanishlarni aniqlash) va farmakologik faol komponentni miqdoriy aniqlash. Farmatsevtik tahlil rivojlanishning barcha bosqichlarida, ishlab chiqarish jarayonida, yakuniy mahsulot sifatini nazorat qilishda va bir nechta dorivor va yordamchi moddalarning aralashmasi 3 bo'lgan ko'plab dozalash shakllarida amalga oshiriladi. Ob'ektlarning bunday xilmaxilligi tufayli sezgirlik, aniqlik, takroriylik va tahlil davomiyligiga qo'yiladigan talablar har xil bo'lishi mumkin. Shuning uchun farmatsevtik tahlilda ham kimyoviy, ham fizikkimyoviy usullar qo'llaniladi, ularning afzalliklari yaxshi ma'lum. Fizik-kimyoviy usullar fundamental farmatsevtika tadqiqotlari va farmatsevtik tahlil amaliyotiga tobora ko'proq kiritilmoqda . Ular dorivor moddalarning turli guruhlarini [13], ularning standart namunalarini [1], shuningdek, planshetlar, malhamlar, in'ektsiya eritmalari, tomchilar va boshqa ko'p komponentli dorivor aralashmalarni aniqlash va miqdoriy aniqlash uchun ishlatiladi. Farmatsevtik tahlilda foydalanish uchun eng qulay fotometrik usullar - bu moddaning ma'lum bir to'lqin uzunligi diapazonida elektromagnit nurlanish bilan o'zaro ta'sirini o'rganadigan UV spektrofotometriyasi. 4 I.-BOB ADABIYOTLAR SHARXI 1.1. UV spektrofotometriya usulidan foydalanish sohalari So'nggi yillarda qayd qiluvchi asboblar yaratilishi munosabati bilan spektrofotometriyani miqdoriy va sifat tahlili va kimyoviy kinetikada qo'llash ayniqsa kengaydi. Kimyoviy reaksiyalar kinetikasini o'rganishda odatda boshlang'ich moddalar va reaksiya mahsulotlarining turli yutilishlarga ega bo'lishidan foydalaniladi. Bu vaqt o'tishi bilan ularning kontsentratsiyasidagi o'zgarishlarni kuzatish imkonini beradi. Hozirgi vaqtda tez reaksiyalar kinetikasini o'rganish uchun bir qancha maxsus texnikalar ishlab chiqilgan. Spektrofotometrlar to'xtab qolgan o'rnatish bilan birgalikda yaratilgan bo'lib, ular yarim yemirilish davri 1 dan 10~3 sekundgacha bo'lgan reaksiyalarni o'rganish imkonini beradi. [23]. UV spektrofotometriyasi dorixonada keng qo'llanilishini topdi, chunki Bu dorilarni tahlil qilishning eng oddiy va eng samarali usuli. Dori vositalarining farmatsevtik tahlilining barcha bosqichlarida (haqiqiyligini tekshirish, yaxshi sifat, miqdoriy aniqlash) foydalaniladi. Ushbu usul yordamida turli xil dozalash shakllarini sifat va miqdoriy tahlil qilish uchun ko'plab usullar ishlab chiqilgan, jumladan: geterotsiklik seriyali dorivor moddalar: (pirazol, imidazol, indol, piridin, pirimidin, piperazin, akridin, fenotiyazin hosilalari, shuningdek alkaloidlar, steroid birikmalar, antibiotiklar , vitaminlar [11, 17.25]), salitsil kislota hosilalarini aniqlash [10], oksitetratsiklin gidroxlorid [16], antipirin, amidopirin, analgin, butadion va boshqalar [11, 21]. Arilalifatik va aromatik kislotalarning hosilalari bo'lgan dorivor moddalarni miqdoriy aniqlashda ijobiy natijalarga erishildi, bundan tashqari, tetratsiklin antibiotiklari va uning hosilalari, tropan alkalinoidlarning sintetik hosilalari ( 11) ni aniqlash uchun UV spektrofotometriyasi qo'llaniladi ; tropafen, homatropin gidrobromid) va ularning gidroliz mahsulotlari [20], indol hosilalari (diazolin, dimekarbin, indopan, meksamin, serotonin adipat) [17]. UV spektrofotometriyasi asosida sulfanilamid preparatlarini tahlil qilishning 5 yagona usuli ishlab chiqildi [21], barbiturik kislota hosilalari bo'lgan dorivor moddalarni standartlashtirish usuli [22] va 1,4-benzodiazepinni aniqlash usuli takomillashtirildi. Spektrni raqamli shaklga aylantirish va uni analogli spektral egri chiziqlar bilan solishtirish orqali hosilalarni yaratish taklif qilingan [7]. UV spektrofotometriya usuli magnetitli va magnit xususiyatga ega [23,24], bromli dori moddasi tebrofen [25], oksazil [26], paratsetamol [27] va antimikrobiyal tashuvchilardan olingan dori vositalari sifatini nazorat qilish uchun istiqbolli hisoblanadi. -kuyish dori xymedon [28]. Mukopolisaxarid geparin UV mintaqasida 257 nm [29] da aniqlanadi. Farmatsevtik tahlilda ultrabinafsha nurlar va ko'rinadigan hududlarda spektrofotometriya ko'pincha ajratish usullari (nozik qatlam va boshqa turdagi xromatografiya) bilan birlashtiriladi [17,4]. Tuya [12,15] va celandine [9,13] dan olingan gomeopatik damlamalarni standartlashtirish uchun sirka kislotasida (406,410 nm) alyuminiy xlorid bilan rangli mahsulot hosil qilish asosida flavonoidlarni aniqlash usullari ishlab chiqilgan. Gidroksamik reagent bilan reaksiyaga asoslanib, pion xom ashyosi va damlamasi [15] hamda ona oʻsimlik xom ashyosi [31] tarkibida iridoidlarni (oʻsimliklardagi biologik faol moddalar) fotokolorimetrik aniqlash usuli ishlab chiqilgan. Bundan tashqari, RNK va DNK kontsentratsiyasini aniqlash uchun UV spektrofotometriyasidan foydalanilganligi haqida dalillar mavjud. RNK va DNK UV nurlarini o'zlashtiradi va shu tufayli bu moddalarning kontsentratsiyasini miqdoriy aniqlash mumkin . [28] Identifikatsiya qilish uchun spektral egri chiziqlarning tabiati va o'ziga xos yutilish ko'rsatkichlarining qiymatlari haqidagi ma'lumotlarni tizimlashtirgan dorivor moddalar spektrlari atlasidan foydalanish mumkin. 1-rasmda ko'rsatilgan benzolning UV mintaqasidagi yutilish spektrini ko'rib chiqamiz.U uchta tasmaga ega. Eng uzun to'lqin uzunligi (255 nm) past intensivlikka ega ( 200 l-mol_1 * sm -1 ), chunki bu taqiqlangan -> *-o'tish bilan bog'liq. Bu o'tish faqat tebranish energiya darajalari bilan o'zaro ta'sir qilish natijasida mumkin 6 bo'ladi. Tegishli tarmoqli aniq belgilangan tebranish tuzilishiga ega. Taxminan 200 nm mintaqada yana bir kuchliroq ( 8000 l * mol_1 * sm -1 ) tasma kuzatiladi. Uchinchi, eng qizg'in band ( 10 5 l*mol_1 * sm -1 ) ruxsat etilgan -> *-o'tishga mos keladi. 200 220 240 260 Guruch. 1. UV hududida benzolning yutilish spektri. Absorbsiya y o'qida molyar yutilish koeffitsientining logarifmi sifatida ifodalanadi. [7] 7 II. –BOB TAJRIBA QISM 2.1 UV spektrofotometriya yordamida turli moddalarni aniqlash usullari UV spektrofotometriyasi ma'lum bir tor to'lqin mintaqasidagi moddaning elektromagnit nurlanishning yutilish miqdorini o'lchashga asoslangan . Odatda, UV o'lchovlari uchun 200 dan 800 nm gacha bo'lgan taxminan monoxromatik nurlanish qo'llaniladi. [8] UV mintaqasida radiatsiya manbalari sifatida, asosan, deyteriy lampalar ishlatiladi va ko'rinadigan hududda volfram yoki (ko'proq va tez-tez) halogen lampalar ishlatiladi. [7] Yorug'likni monoxromatizatsiya qilish uchun siz eng oddiy qurilma - yorug'lik filtridan foydalanishingiz mumkin. [7] Miqdori. Yuqorida aytib o'tilganidek, ultrabinafsha spektrofotometriya dori vositalarini miqdoriy aniqlash uchun keng qo'llaniladi. Usulning sezgirligi, asosan, moddaning yutilish qobiliyati bilan belgilanadi va molyar yutilish koeffitsienti bilan ifodalanadi. Spektrofotometriya yordamida tahlil qilinadigan moddalarning chegaralangan kontsentratsiyasi odatda kislota-asos titrlash yoki gravimetrik o'lchovlarda qo'llaniladiganidan past bo'ladi. Bu holat spektrofotometriyaning oz miqdordagi moddalarni, ayniqsa turli xil dozalash shakllarini aniqlash uchun ishlatilishini tushuntiradi. Miqdoriy tahlilning asosiy sharti Buger-Lambert-Bi qonuniga rioya qilishdir Buger (1698-1758) va Lambert (1728-1777) tomonidan olib borilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, yuz nisbiy optik zichlik kyuvetaning qalinligi bilan to'g'ridan-to'g'ri proportsionaldir. Yutuvchi moddaning eritmasining optik zichligi uning molyar konsentratsiyasiga bog'liqligi Beer (1825-1863) tomonidan aniqlangan. Bu barcha bog'liqliklarni birlashtirgan qonun Lambert-Beer yoki Bouger-Lambert-Beer qonuni 8 deb ataladi. [7] Spektrofotometriya va ultrabinafsha ko'rinadigan hududga nisbatan quyidagicha yoziladi: A ( ) * b * c Bu erda: - ( ) to'lqin uzunligidagi molyar yutilish koeffitsienti (l*mol 1 1 *sm ) , b - optik yo'l uzunligi (sm), c - yutuvchi zarrachalar konsentratsiyasi (mol/l). Qonunga muvofiqligini tekshirish uchun qaramlikni chizing: yutilish - to'lqin uzunligi yoki har bir standart eritma uchun omilni hisoblang va A / c qiymati doimiy bo'lib qoladigan kontsentratsiya oralig'ini aniqlang. Bu usul yordamida molekulalar tarkibidagi ma'lum guruhlar - xromoforlar, shuningdek aromatik fragmentlar, uch yoki qo'sh bog'lar, shuningdek, quyidagi guruhlarni o'z ichiga olgan moddalarni aniqlash mumkin: azo -, nitro- va boshqalar. Spektrofotometrik miqdoriy aniqlashning ikkita tubdan farq qiladigan usullari mavjud va qo'llaniladi. (HFClar bo'yicha) Ulardan biriga ko'ra, foiz (x) dagi moddaning tarkibi oldindan hisoblangan assimilyatsiya qiymati asosida hisoblanadi, ko'pincha qiymatga asoslanadi: 1% A1cм Х А*b A0 * a Bu erda b - suyultirish - namuna, g. Tabletkalardagi kortizon asetat tarkibini HFC yordamida aniqlash bunday aniqlashga misol bo'la oladi. 9 Ushbu usulning asosiy kamchiligi hammaga ma'lum bo'lgan haqiqatdir: turli xil spektrofotometrlar (hatto bir xil modeldagi va bir xil ishlab chiqaruvchining turli xil qurilmalari) bir xil standart eritma uchun yutilish qiymatida sezilarli og'ishlar beradi. Ushbu usul quyidagi moddalarni aniqlashi mumkin: merkaptopurin, papaverin gidroxloridi, taninlar (tanin), flavonoidlar (rutin). sinov moddasining emilishini bir xil sharoitlarda aniqlangan standart namunaning emilimi bilan solishtirish orqali ta'minlanadi . Bu spektrofotometrik o'lchovlarga ta'sir qiluvchi ko'plab omillarni, masalan, to'lqin uzunligi va tirqish kengligini o'rnatishni hisobga oladi. Erituvchining yutilishi uchun kyuvetaning yutilish tuzatishlari va boshqalar. Davlat federal farmakopeyasiga ko'ra, individual moddalarni tahlil qilishda dorivor moddaning tarkibini spektrofotometrik miqdoriy aniqlash ushbu moddaning maxsus tayyorlangan standart namunasidan foydalanish bilan bog'liq bo'lishi kerak. Masalan, HFC tarkibiga kiradigan steroid moddalar. Dozalash shakllarini miqdoriy tahlil qilishda, agar maxsus ko'rsatmalar mavjud bo'lmasa, standart namuna sifatida farmakopeyaning barcha talablariga javob beradigan moddadan foydalanishga ruxsat beriladi. Hisob-kitoblar uchun, agar boshqacha ko'rsatilmagan bo'lsa, bunday standart namuna 100% sifatida olinadi. Bundan tashqari, tashqi standart usul mavjud - bu standart sifatida o'rganilayotganidan boshqa moddadan foydalaniladigan usul. Masalan, karotinoidlarni tahlil qilish uchun kaliy dixromati standart sifatida ishlatiladi. Standart namunadan foydalanganda individual moddaning miqdoriy tarkibini foizda (x) hisoblash quyidagi formula bo'yicha amalga oshiriladi: Х А1 * С0 * b * 100 A0 * a tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi qayerda ; А1 А0 - standart namuna eritmasining optik zichligi; 10 С 0 - standart namuna eritmasining konsentratsiyasi - suyultirish; a - vazn, g. Tabletning o'rtacha og'irligiga asoslangan grammdagi (x) bitta tabletkadagi moddaning tarkibi formulalar yordamida hisoblanadi: Х A1 * C 0 * b * q A0 * a Х A1 * b * q A0 * a * 100 bu erda q - planshetning o'rtacha og'irligi, g. Agar miqdoriy o'lchovlar etarlicha tez-tez bajarilsa. Standart namuna o'rniga mos keladigan standart namuna uchun olingan mos kalibrlash egri chizig'idan foydalanish mumkin. Ushbu grafik tekshirilayotgan moddaning absorbsiyasi tahlilda ishlatiladigan konsentratsiyaga mutanosib bo'lganda foydalanish mumkin . Bunday kalibrlash egri chiziqlarini tez-tez tekshirish va har safar yangi asbob va yangi reaktivlar seriyasi uchun yangidan tayyorlash kerak emas. Kalibrlash sxemasi - bu optik zichlikning konsentratsiyaga eksperimental ravishda aniqlangan grafik bog'liqligi. Ushbu grafik, agar tekshirilayotgan modda uchun absorbsiya miqdoriy aniqlashda ishlatiladigan yakuniy konsentratsiyaning 75125% oralig'idagi konsentratsiyaga mutanosib bo'lsa ishlatiladi. [9] Bu usul kabi moddalarni aniqlashi mumkin: kortizon asetat, pregnin, proksikam. 0,025 tabletkalarda kortizon asetat miqdorini aniqlash Maydalangan tabletkalarning aniq tortilgan qismidan taxminan 0,1 g maydalangan tiqinli 100 ml hajmli o‘lchov kolbasiga solinadi, 60-70 ml 95% li spirt qo‘shiladi va suv hammomida 10-15 ga aralashtirib ozgina isitiladi. daqiqa. Sovutgandan so'ng, eritmaning hajmini 95% spirt bilan belgiga keltiring, yaxshilab aralashtiring va 1 soatga qoldiring. Cho'kmani silkitmasdan, 5 ml eritmadan boshqa 100 ml hajmli o'lchov kolbasiga o'tkazing va eritmaning hajmini bir xil spirt bilan belgilang. Optik zichlik to'lqin uzunligi 238 nm bo'lgan spektrofotometr yordamida sharning 11 qalinligi 1 sm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi. Kortizon asetatning g tarkibidagi miqdori formula yordamida hisoblanadi X A * 20 * mсс 390 * m Bu erda: - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi sr - tabletkaning o'rtacha og'irligi - maydalangan tabletkalar kukuni namunasining og'irligi. - 238 nm to'lqin uzunligida kortizon asetatning sinishi ko'rsatkichi. Kortizon asetatning tarkibi bitta tabletkaning o'rtacha og'irligiga qarab 0,0220,028 g bo'lishi kerak. Pregninni miqdoriy aniqlash 1 sm qalinlikdagi shar bilan kyuvetada 241 nm to‘lqin uzunligidagi spektrofotometr yordamida moddaning 95% spirtdagi 0,001% li eritmasining optik zichligini aniqlang . Pregnin tarkibi quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi: X A * C 0 * 100 A0 * C Qayerda: A - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi; А0 - standart namuna eritmasining optik zichligi; С 0 - standart namuna eritmasining konsentratsiyasi; C - tekshiriluvchi eritmaning konsentratsiyasi. Moddadagi prignin miqdori 97 dan kam va 103% dan oshmasligi kerak. 12 0,01 g tabletkalarda piroksikamni miqdoriy aniqlash Piroksikamning UV yutilish spektri 334 nm da analitik yutilish chizig'i mavjud bo'lib, u piroksikamni miqdoriy aniqlash uchun ishlatiladi. 100 ml kolba, 10 ml iliq 95% li spirt qo‘shing, 15 daqiqa chayqatib, sovutib, 0,1 mol/l xlorid kislota eritmasi bilan hajmini belgiga moslang, aralashtiramiz va ko‘k lentali qog‘oz filtr orqali filtrlang, birinchisini tashlab yuboring. 10 ml filtrat; 3 ml filtrat 50 ml hajmli o‘lchov kolbasiga quyiladi, xlorid kislotaning 0,1 mol/l eritmasi bilan hajmi belgiga sozlanadi va aralashtiriladi. Olingan eritmaning optik zichligi, shuningdek, to'lqin uzunligi 334 nm bo'lgan spektrofotometrda to'pning qalinligi 10 mm bo'lgan kyuvetada o'lchanadi , biz etalon eritma sifatida 0,1 mol/l xlorid kislotadan foydalanamiz; Parallel ravishda piroksikam RSO eritmasining optik zichligi o'lchanadi. G dagi piroksikamning tarkibi quyidagi formula bo'yicha hisoblanadi: X 0.2 * A * m0 * mcp A0 * m Qayerda: 13 A - tekshiriluvchi eritmaning optik zichligi; А0 - standart namunadagi piroksikamasr eritmasining optik zichligi - tabletkaning o'rtacha og'irligi, g - maydalangan planshetlar kukuni namunasining og'irligi. m0 - RSO piroksikam namunasining og'irligi g. Piroksikamning tarkibi bitta tabletkaning o'rtacha og'irligiga qarab 0,009 - 0,011 g bo'lishi kerak. Tiamin gidrobromidni aniqlash Taxminan 20 mg modda 10 ml suvda R eritiladi, 1 ml sirka kislotasi R va 1,6 ml 1 M natriy gidroksid eritmasi qo'shiladi, suv hammomida 30 daqiqa davomida isitiladi. keyin salqin. Olingan probirkaga 5 ml suyultirilgan natriy gidroksid eritmasi R, 10 ml kaliy fertsianid eritmasi R, 10 ml butanol R qo'shiladi va 2 minut davomida kuchli chayqatiladi. Yuqori alkogolli sfera, ayniqsa 365 nm ultrabinafsha nurlari ostida ko'k lyuminestsentni ko'rsatadi (yutilish indeksi usuli) Piridoksin gidroxloridni aniqlash 1,0 ml S eritmasidan 0,1 M xlorid kislota eritmasi (bu A eritmasi) bilan 50,0 ml hajmga keltiriladi. 1,0 ml A eritmasi 0,1 M xlorid kislota eritmasi bilan 100,0 ml hajmgacha o'rnatiladi. 250 - 350 nm mintaqada hosil bo'lgan eritmaning ultrabinafsha nurlarini yutish spektri 288 dan 296 nm gacha bo'lgan to'lqin uzunligida maksimal bo'lishi kerak. Maksimal o'ziga xos assimilyatsiya tezligi 425 dan 445 nm gacha bo'lishi kerak A *c *b Qayerda: - molyar yutilish ko'rsatkichi - optik yo'l uzunligi, sm c - eritmadagi moddalarning litr uchun moldagi konsentratsiyasi Qiymat 1% A1cм o'ziga xos assimilyatsiya tezligini ifodalaydi 14 10 * 1% ММ 1cм A Atropin sulfatdagi apoatropin aralashmalarini aniqlash Nopoklarning ruxsat etilgan miqdori 0,5% dan oshmaydi. 10 g modda 0,01 M xlorid kislota eritmasida eritiladi va eritmaning hajmi xuddi shu erituvchi bilan 100,00 ml ga o'rnatiladi. Olingan eritmaning optik zichligi 245 nm to'lqin uzunligida o'lchanadi. Suvsiz moddaga nisbatan o'ziga xos sinishi indeksi 4,0 dan oshmasligi kerak. [3.9] A *c *b Qayerda: - molyar yutilish ko'rsatkichi - optik yo'l uzunligi, sm c - eritmadagi moddalarning litr uchun moldagi konsentratsiyasi 1% A1cм Qiymat 1% 1cм A o'ziga xos assimilyatsiya tezligini ifodalaydi 10 * ММ Zamonaviy fizik-kimyoviy usullar bir qator hollarda tajriba hayvonlarining mavjudligini talab qiladigan dorivor moddalar sifatini biologik baholashning murakkab, qimmat usullarini almashtirishga imkon berdi. Xususan, biologik suyuqliklarda boshqa antibiotiklar borligida reagent sifatida Calcone (kislotali bo'yoq) yordamida tetratsiklin antibiotiklarini to'g'ridan-to'g'ri va differentsial spektrofotometriya [2,26] va aminoglikozidli antibiotiklarni ekstraksiya-fotometrik usulda tahlil qilishda ham solishtirma natijalarga erishildi. 15,18 ]. So'nggi yillarda dorivor moddalar sifatini nazorat qilish va standartlashtirish uchun turli xil fotometrik usullardan foydalanish bo'yicha bir nechta sharhlar nashr etildi [14.17]. Boshqa fizik-kimyoviy usullar bilan bir qatorda, suvda eruvchan B vitaminlarini tahlil qilish uchun to'g'ridan-to'g'ri va differentsial spektrofotometriya 15 usullari [5] tavsiya etiladi UV va ko'rinadigan hududlarda yog'da eriydigan vitaminlarni tahlil qilish uchun, A, E, D [6] va barbiturik kislota hosilalari [30], shuningdek, hosila spektrofotometriyasi [16]. Progestin gormonlarini o'z ichiga olgan dorilar UVko'rinadigan spektrofotometriya bilan aniqlanadi [17]. 2.2 farmatsevtika tahlilida uv spektrofotometriyasini qo'llash Analitik operatsiyalarning soddaligi va ko'p hollarda yuqori sezuvchanlik tufayli usul farmatsevtika tahlilida keng qo'llanilgan. UV spektrofotometriyasi haqiqiylikni (identifikatsiyani), benignlikni aniqlashda, individual moddalarni ham, dozalash shakllarining tarkibiy qismlarini ham aniqlashda ishlatiladi; "eritish" va "dozalashning bir xilligi"testlarida sinov. Usul farmakokinetika, bioavailability, barqarorlikni o'rganish va yaroqlilik muddatini belgilash kabi dorivor moddalar va dozalash shakllarini o'rganish bosqichlarida qo'llaniladi. Dorivor moddalarning haqiqiyligini tekshirish. Farmatsevtika tahlilining ushbu bosqichi quyidagi usullarga asoslanadi: a) maksimal va minimal yutilish mintaqalarini tavsiflovchi λ max va λ min spektrida bo'lish; b) turli to'lqin uzunliklarida o'rganilayotgan eritmaning optik zichligi qiymatlarining nisbatlarini hisoblash; C) o'ziga xos ko'rsatkich (E)kattaligi bo'yicha yutilish intensivligining xarakteristikasi ; D) tahlil qilinadigan moddaning spektrini xuddi shu moddaning standart namunasi spektri bilan taqqoslash. 16 Barcha holatlarda spektrni nd – hal qiluvchi, kontsentratsiya, to'lqin uzunligi oralig'i, kyuvetaning kattaligi (qalinligi) sharoitida olish kerak. Olingan spektrdagi (a) holat uchun λ max va λ min, NDDA berilgan bir xil xususiyatlar bilan taqqoslanadi – moddalarning o'ziga xosligi bilan ikkala qiymat ham mos kelishi kerak (jadval.7). Haqiqiylikni sinash uchun qulay usul-bu assimilyatsiya miqdorlarining ikki maksimal nisbatini aniqlash. Bu asbobning o'zgaruvchan xususiyatlarining sinovga ta'sirini kamaytiradi va standart namunadan foydalanish zaruratini yo'q qiladi. Ushbu usul natriy para-aminosalitsilat natriy tahlilida qo'llaniladi Jadval 1 Farmakopeya tahlilida ba'zi dorivor moddalarni aniqlashda ishlatiladigan uv spektrlarining tavsifi № p Dorivor Konsentratsiya /p modda erituvchi ishlatiladigan xususiyat 1 2 3 4 1 Amlodipin 0,005% 1% eritmada 0,1 λ max \ . 360 ± 2nm; E \ . 113-121 besilat M HCl metanolda 2 Aminazin 0,0005% 0,01 M HCl da λ max = 254±2nm, 307±2nm 3 Anestezin 0,0005% 0,1 M NaOH λmax = 281±2нм; λmin = 238±2нм va Identifikatsiya da 17 qilish uchun 4 5 Verapamil 0,002% 0,01 M HCl da D229 = 0,61 – 0,64 gidroxloridi D278= 0,23 – 0,24 Deksametazon 0,001% 95% spirtda λmax = 240±2нм; D 240nm / D 263nm= 1,9-2,1 6 Dibazol 0,002% 95% spirtda λ max=244±2nm, 275±2nm, 281±2nm; λ min=230±2nm, 259±2nm, 279±2nm; spektr tasviri berilgan 7 λ max=253±2nm, 258±2nm, 264±2nm; Difengidramin 95% spirtda 0,05% λ min=244±2nm, 255±2nm, 263±2nm 8 Drotaverin 0,0015% 0,1 M HCl da λ min=223±2nm,262±2nm, 322±2nm gidroxloridi 9 Zopiklon λ max=241±2nm, 302±2nm, 353±2nm; 0,001% 0,1 M HCl da λmax=303±2нм; D303=0,340-0,380 10 Kofur 95% etil spirtida 2,4- λ max= 231±2nm, 265±2nm; dinitrofenilgidrazon kofurining 273 nm dan 277 nm gacha bo'lgan 0,0006% hududda yelka eritmasi 11 12 Askorbin PH 7,0 bo'lgan bufer λmax=265±2нм kislotasi eritmasida 0,001% Nikotinik 0,002% 0,1 M NaOH da λ max \ . 258±2nm, 264±2nm, 270±2nm; λ min \ . 240±2nm; kislota 240Nm dan 256nm gacha bo'lgan hududda ikkita aniqlanmagan yelka kuzatiladi 18 13 Foliy kislotasi 0,001% 0,1 M NaOH da 230 dan 380 nm gacha bo'lgan hududda GSO spektriga to'liq mos keladi 14 Nitroksolin PH 9,18 (98:2)bilan λ max=249±2nm, 341±2nm, 95% alkogol – bufer 452,5±2nm; 15 Ofloksatsin eritmasi 228nm dan 238nm gacha va 258nm aralashmasidagi dan 268nm gacha bo'lgan mintaqada 0,0005% eritma ikkita elka 0,001% 0,1 M HCl da λ max= 226±2nm, 295±2nm; λ min= 265±2nm 16 Papaverin 0,0025% 0,01 M HCl da λ max= 285±3nm, 309±2nm; λ min = 289±2nm gidroxloridi 17 Piratsetam 1% suvli eritma 230nm dan 350nm gacha bo'lgan hududda aniq yutilish maksimallariga ega emas 18 Progesteron 0,001% 95% spirtda λ max\ . 241±2nm; E \ . 518-545 1 2 3 4 19 Ranitidin 0,01% suvli eritma λ max \ . 229±2nm; 315±2nm; gidroxloridi 20 D 229nm / D 315nm \ . 1.01-1.07 Sulfa- NaOHda 0,000015% Nisbatan kislotali eritma bilan olib dimetoksin HCl da 0,000015% tashlangan preparatning gidroksidi eritmasining spektri 253±2nm, 268±2nm; λ min= 260±2nm; 19 λ max \ . Ishqoriy eritmaga tashlangan nisbatan preparatning olib kislotali eritmasining spektri λ max \ . 288±2nm ga teng 21 Tamoksifen λ max \ . 237nm, 275nm Metanolda 0,002% sitrat 22 Famotidin Fosfat tamponida 230nm dan 350nm gacha bo'lgan 0,0025% mintaqada RSO spektriga to'liq mos kelish 23 Furazolidon λ max=260±2nm, 367±2nm; DMFda 0,0015% λ min=302±2nm 24 Furatsilin λ max=260±2nm, 375±2nm; DMFda 0,0006% λ min = 306±2nm Haqiqiylikni tekshirishda ko'pincha e ni maksimal yutilish darajasida (masalan, levomitsetin, epinefrin, progesteron uchun) hisoblash yoki ma'lum bir to'lqin uzunligi diapazonidagi topilgan optik zichlik qiymatini NDDA berilgan qiymatlar bilan solishtirish tavsiya etiladi. Shunday qilib, 230 dan 250 nm gacha bo'lgan mintaqada 0,5 mg/ml konsentratsiyali fosfat bufer eritmasida (pH \ . 6,9) piridoksin gidroxlorid eritmasining yutilish spektri 254 va 324 nm da maksimal darajaga ega va bu maksimal qiymatlarda optik zichlik mos ravishda 0,18 va 0,35 ga teng. UV spektrofotometriyasidan foydalangan holda ba'zi haqiqiylik sinovlari standart dorivor moddalar namunalarini (CO) qo'llashni talab qiladi. Bunday holda, CO namunasi tayyorlanishi va bir vaqtning o'zida sinov moddasi bilan bir xil sharoitda aniqlanishi kerak. Shunday qilib, etil spirtidagi 0,0005% etinitestradiol eritmasining ultrabinafsha spektri bir xil konsentratsiyali eritma bilan bir xil to'lqin uzunliklarida 20 maksimal va minimal darajaga ega bo'lishi kerak, λ max \ . 281 nm da quruq modda uchun hisoblangan assimilyatsiya qiymatlari 3% dan oshmasligi kerak. Ushbu usul faqat bitta o'rganilayotgan birikmaning spektrini tahlil qilishdan ko'ra ishonchli natijalarni beradi. UV-spektrofotometriya yangi biologik faol moddalarni tadqiq qilishning spektral usullarining tarkibiy komplekslaridan biridir. Spektrdagi ma'lum yutilish guruhlari ushbu birikma tarkibida ma'lum funktsional guruhlar, tuzilmalar bo'laklari (xromoforlar) mavjudligini ko'rsatishi mumkin. Bu fenil radikalini o'z ichiga olgan moddalar spektrlarining o'xshashligini tushuntiradi, masalan, efedrin, difenhidramin, atropin, benzilpenitsillin. Ular uchta yutilish maksimaliga ega: 251, 257 va 263 nm (rasm.7). O'zgartirilgan aromatik radikal – adrenalin, morfin, estradiol, levomitsetin va boshqalarni o'z ichiga olgan dorivor moddalar spektrda maksimal 260 nm, kortikosteroidlar guruhidagi dorivor moddalarda konjuge enon tizimiga ega – taxminan 238 nm (rasm).8). Ba'zi dorivor moddalarda (barbiturik kislota hosilalari, sulfanilamidlar, fenollar, ba'zi purin hosilalari va boshqalar) spektrning tabiati eritmaning pH darajasiga qarab o'zgarishi mumkin (rasm. 9, 10, 11, 12, 14). Bunday holda, λ max (batoxromik siljish) o'zgaradi, yutilish kuchayadi (optik zichlik oshadi), giperxromik ta'sir kuzatiladi. Kofein kislotali xususiyatlarga ega emas, shuning uchun uning kislotali va gidroksidi muhitda bir xil to'lqin uzunligida maksimal yutilishi 272 nm (rasm. 13). Ya'ni, UV spektrofotometriyasi tekshirilayotgan moddaning o'ziga xos xususiyatlari haqida ma'lumot berishi mumkin. Uv spektrofotometriyasi yordamida kimyoviy birikmaning tuzilishi to'g'risida bir xonali xulosa chiqarish mumkin emas, chunki molekulada bir nechta xromofor borligi 21 sababli spektrni talqin qilish qiyin. Shunga qaramay, usul ba'zi guruhlarni – xromoforlarni aniqlashga va konjugatsiyaning tabiati va darajasi to'g'risida xulosa chiqarishga imkon beradi (konjugatsiya zanjirining uzayishi bilan maksimal yutilishning uzoq to'lqinli mintaqaga siljishi kuzatiladi, rasm.11). 22 23 UV spektrofotometriyasi organik birikmalarning xususiyatlarini o'rganish uchun ishlatiladi: vodorod bog'lanishini hosil qilish qobiliyati, kislotalar va asoslarning rk a ni aniqlash, dorivor moddalarning murakkab birikmalarining tarkibi va xususiyatlarini aniqlash, izomerizm. Cis va trans izomerlari bir-biridan farq qiladigan spektrlarga ega. Trans shakli odatda ko'proq yutadi va uning yutilish chizig'i uzoq to'lqinli mintaqaga siljiydi; bu haqiqat reaktsiya paytida strukturaning o'zgarishini isbotlashi mumkin. Biroq, UV spektrlari o'rganilayotgan moddaning tuzilishi haqida hech qanday ma'lumot bermaydi, chunki ular faqat xromoforlar va heteroatomlarning mavjudligini aniqlashga imkon beradi. 24 Bundan tashqari, UV spektrofotometriyasi bunday guruhlarni o'z ichiga olgan moddalarni miqdoriy tahlil qilish uchun ajoyib imkoniyat yaratadi. Benignlikni (tozalikni) tekshirishda identifikatsiyalash bilan bir xil xususiyatlar qo'llaniladi. Aralashmalar mavjud bo'lganda λ max o'zgarishi mumkin, qo'shimcha maksimallar paydo bo'ladi, yutilish intensivligi o'zgaradi. Dorivor moddalarda mavjud bo'lgan o'ziga xos aralashmalar, qoida tariqasida, o'rganilayotgan modda bilan yaqin kimyoviy tuzilishga ega. Shu sababli, dori moddasi va uning o'ziga xos aralashmasi turli to'lqin uzunliklarida so'rilgan holatlar alohida qiziqish uyg'otadi. Masalan, adrenalinning λ max (I) 278 nm da joylashgan va uning o'ziga xos nopokligi – adrenolon (II) 310 nm da maksimal yutilishga ega. Farmakopeya maqolasining talabiga binoan, tozalik sinovi uchun tayyorlangan 0,05% epinefrin eritmasida 310 nm da optik zichlik 0,1 dan oshmasligi kerak (ya'ni adrenalinda qat'iy normallashtirilgan adrenolon tarkibiga ruxsat beriladi). Miqdoriy aniqlash. Uv spektrofotometriya usuli bilan miqdoriy aniqlash printsipi quyidagicha: tahlil qilingan namunaning namunasi (modda, dozalash shakli va boshqalar) mos erituvchida eritiladi, agar kerak bo'lsa, hosil bo'lgan eritmaning suyultirilishi qo'shimcha ravishda tayyorlanadi va uning optik zichligi texnikada ko'rsatilgan to'lqin uzunligi bilan o'lchanadi. Tahlil qilinayotgan moddaning 25 kontsentratsiyasi (tarkibi) ilgari tavsiflangan usullardan biri bilan topiladi (1.2.3.4band). Tabletkalar, tabletkalar, in'ektsiya uchun quruq dorilar va faol moddasi 0,05 g yoki undan kam bo'lgan kapsulalardagi dorivor moddalar uchun zamonaviy talablarga muvofiq, dozalashning bir xilligi sinovi, ya'ni.har bir alohida dozadagi moddaning tarkibi. Bunday baholash uchun, ayniqsa mg yoki uning fraktsiyalarida faol moddalar mavjud bo'lsa (klofelin tabletkalari 0,075 va 0,15 mg faol moddalarni o'z ichiga oladi), juda sezgir usuldan foydalanish talab etiladi. Bu ko'p hollarda UV spektrofotometriyasidir. Dorivor moddalarning biologik mavjudligini o'rganish dolzarbdir. Uning o'ziga xos xususiyati "eritish" testidir (GF ΧΙ, nashr. 2, 154-sahifa). Odatda yuqori sezuvchanlik bilan ajralib turadigan UV spektrofotometriyasi bu maqsadda eng ko'p ishlatiladigan usullardan biridir (jadval.8). Quyida UV mintaqasida spektrofotometrik usul yordamida ba'zi dorivor moddalarni tahlil qilish usullari va jadvalda keltirilgan.8 farmakopeya tahlilida UV spektrofotometriya usulidan foydalanishning bir qator misollari keltirilgan. spektrofotometriya farmatsevtik dori sifati 26 Xulosa: Kurs ishining maqsadiga erishish va berilgan muammolarni hal qilish jarayonida quyidagi natijalarga erishildi: metodning qisqacha tavsifi berildi, ushbu usulning qo'llanilishi sohalari ko'rsatilgan va zamonaviy UV spektrofotometrlarining turlari ko'rsatilgan. tasvirlangan. Ushbu mavzu bo'yicha adabiyotlarni o'rganish natijasida spektrofotometriya istiqbolli tahlil usuli ekanligini ta'kidlash mumkin. 27 Foydalanilgan adabiyotlar 1. Arzamastsev A.P., Lutseva T.Yu., Sadchikova N.P. Kimyo-farmak. va. 2001 yil, 35jild, 8-bet. 47.51. 2. Arzamastsev A.P., Pechennikov V.M., Rodionova G.M. Dorivor aralashmalarning tahlili. M.: Sputnik kompaniyasi, 2000, 275 b. . Bezugliy P.O., Grudko V.O., Taran S.G. va boshqalar. X.: Zoloti storinki, 2001, 238 b. . Belikov V.G. Dorixona, 2000 yil, 49-v., 1-bet. 23.25. . Belikov V.G., Kuregyan A.G. Abstrakt. hisobot xalqaro konf. "XXI asrda farmatsiya: innovatsiyalar va an'analar". Sankt-Peterburg, 1999 yil, p. 228. . Belikov V.G., Sami A.A., Solovey N.V. Dorixona, 1995 yil, 44-son, 41.42-bet . Belikov V.G. Dorixona, 1979, 28-son, 5-bet. 52.63. . Garmash A.V. Analitik kimyoning zamonaviy usullari M.: Texnosfera, 2003, 412 b. . Ukraina davlat farmakopeyasi. H. 2001,531 b. . Denisova M.N., Cherkasova O.G., Xaritonov Yu.Ya. Dorixona, 1996 yil, 45-jild, 3bet. 22-28. . Karpenko V.A., Stepanyuk S.N. Dorixona, 1984 yil, 33-jild, 5-bet. 50-52. . Kolpakova M.V., Popov D.M. Kimyoviy-dori. zh., 1994, 28-jild, 7-bet. 24-26. . Larina M.L. Abdulina S.G., Sidullina S.A. Dorixona, 1999 yil, 48-son, 1-bet. 25. . Lutseva A.I., Maslov L.G., Seredenko V.I. Kimyoviy-dori. zh., 2001, t. 35, № 10, bet. 41.46. . Dori vositalarini tahlil qilish usullari. N.P. Maksyutina, F.E. Kogan, L.A. Korichenko va boshqalar Kiev: Sog'liqni saqlash, 1984, 222 p. . Maslov L.G., Evtushenko I.S., Lutseva A.I. Kimyoviy-dori. zh., 1998, 32-jild, 4-bet. 45.52. . Selivanchikova I.B., Lyakina M.N., Kostennikova Z.P., 2001 yil, 50-son, s. 14.16. . Saavedra F.E., Belikov V.G., Solovey N.V. Dorixona, 1976 yil, 25-jild, 1-bet. 78,79. . Tiraspolskaya S.G., Belikov V.G. Dorixona, 1975 yil, 24-jild, 1-bet. 50,52. 28 . Tentsova A.I., Senov P.L., Belikov V.G. Dorixona, 1978 yil, 27-son, 7.12-bet. . Chirkov S.V., Chekrishkina L.A. Dorixona, 2001 yil, 50-v., 6-bet. 27.28. . Xoxlov V.Yu., Selemenev V.F., Xoxlova O.N. va boshqalar. zh., 1999, 33-jild, № 8. p. 47.48. . Fomicheva E.A., Lyakina M.N., Kostennikova Z.P. Dorixona, 2001 yil, 50-v., 5-bet. 13.15. . Fedoseeva L.V., Popov D.M. Dorixona, 1997 yil, 46-v., 4-bet. 18.20. 25. <http://analusis.edpsciences.org/index.php?option=article&access=standard&Itemid= 129&url=/articles/analusis/pdf/2000/10/dupuit.pdf> . <http://www.beckmancoulter.com/products/instrument/analytical/uvvis/du800_inst_d cr.asp> . http://www.chemnet.ru . http://www.chemport.ru . http://www.eurasianjournals.org/ . <http://www.powerhousemuseum.com/collection/database/?irn=348797> . <http://www.powerhousemuseum.com/collection/database/?irn=348797> . http://www.vestnik.vsu.ru . http://en.wikipedia.org . <http://www.xumuk.ru/encyklopedia/2/4164.html> 29