Моделирование острого воспаления Руководитель: А.А. Андреев-Андриевский Докладчики: Водопетова Мария Николаенко Марк Воспаление – защитная реакция организма на действие повреждающих агентов различной природы, в реализации которой задействованы пораженная ткань и снабжающие ее сосуды 2 Дексаметазон Кетопрофен 3 Цель работы: оценить роль производных каскада арахидоновой кислоты в процессах воспаления на модели каррагинаниндуцированного отека лапы у мышей. Задачи: 1. Воспроизвести модель каррагнинан-индуцированного отека лапы у мышей 2. Освоить различные методы введения веществ мышам: подкожно, внутрибрюшинно, внутрижелудочно 3. Оценить значение производных каскада арахидоновой кислоты в процессах воспаления с использованием блокаторов циклооксигеназ (кетопрофен) и фосфолипазы А2 (дексаметазон). 4 Методика Дексаметазон (n=15) Кетопрофен (n=14) Физраствор (n=15) Способ введения Подкожно в/б в/ж Доза, мг/кг 20 50 Объем введения, мл/кг 10 10 Индукция воспаления проводилась субплантарным введением 50 мкл 2% раствора каррагинана. В качестве контроля во вторую лапу субпланатрно вводился физраствор. 10 Измерение объема лапы проводилось методом гидростатического взвешивания. 5 Схема эксперимента Взвешивание, маркировка и разделение на группы животных Измерение объема лапы Введение веществ Индукция воспаления Эвтаназия 6 Каррагинан индуцирует воспаление. На 4 ч и дексаметазон, и кетопрофен уменьшают отек Two-way ANOVA, апостериорный тест Тьюки *Изменение - р=0,0119,объема *** - р=0,0001 лап (мл) в группах с введением кетопрофена (n=14), дексаметазона (n=15) и физраствора (n=15) при индукции воспаления каррагинаном или введении физраствора. Данные представлены в виде среднего и стандартной ошибки среднего. Фактор F (DFn, DFd) P Взаимодействие фактора времени и группы F (25, 492) = 7,912 P<0,0001 Время F (5, 492) = 42,89 P<0,0001 Группа F (5, 492) = 65,72 P<0,0001 7 При нормировании объема опытной лапы на объем контрольной выявлены еще более значимые различия на 4-ый час Изменение объема лапы, доля 0.20 Физраствор Кетопрофен, 50 мг/кг Дексаметазон, 20 мг/кг *** **** 0.15 0.10 0.05 0.00 -1 0 1 2 Время от индукции, ч 3 4 Two-way ANOVA, апостериорный тест Тьюки *** - р=0,0009, **** - р<0,0001 Изменение объема лап (доли) в группах с введением кетопрофена, дексаметазона и физраствора при индукции воспаления каррагинаном или введении физраствора. Данные представлены в виде среднего и стандартной ошибки среднего. Фактор F (DFn, DFd) P Взаимодействие фактора времени и группы F (25, 492) = 13,40 P<0,0001 Время F (5, 492) = 71,02 P<0,0001 Группа F (5, 492) = 97,96 P<0,0001 8 При сравнении суммарного эффекта препаратов не были обнаружены значимые различия по сравнению с контролем Two-way ANOVA, тест Сидака ns - p>0,05 Суммарные эффекты вводимых препаратов относительно контрольной группы с введением физраствора. Данные представлены в виде среднего и стандартной ошибки среднего Фактор F (DFn, DFd) P Взаимодействие фактора воспаления и группы F (2, 41) = 0,5486 P=0,5820 Воспаление F (1, 41) = 133,2 P<0,0001 Группа F (2, 41) = 0,4505 P=0,6404 9 Вклад механизма, связанного с синтезом простагландинов, в развитие отека составляет 17% Различие в % объема воспаленных лап в группах с КТ и ДМ, объем воспаленной лапы в группе ФР принят за 0%. Данные представлены в виде среднего и стандартной ошибки среднего 10 Выводы 1. Мы воспроизвели модель каррагинан-индуцированного отека лапы у мышей 2. Мы познакомились с методами подкожного, внутрибрюшинного и внутрижелудочного введения веществ. 3. С использованием блокаторов циклооксигеназ (кетопрофен) и фосфолипазы А2 (дексаметазон) оценили вклад простагландинов в развитие отека при каррагинаниндуцированном воспалении – он составляет примерно 17%. 11