ЗАДАНИЕ №7 Студент получил задание изучить морфологию бактерий в окрашенном мазке. Для этого он поместил препарат на предметный столик микроскопа, центрировал объектив с увеличением 40. Осветил поле зрения, нашёл изображение, установил чёткость микрометрическим винтом и на основании просмотра ряда полей зрения сделал вывод о том, что очень трудно рассмотреть микроорганизмы в препарате. Задание 1.Почему студенту не удалось детально рассмотреть форму микроорганизмов в препарате? Ответ 1.Потому что он использовал объектив микроскопа с увеличением 40, «сухой» системы микроскопа, который используется для изучения крупных биологических и гистологических объектов. Задание 2.Какие рекомендации можно дать студенту, выполняющему данное задание? Ответ 2.При изучении микроорганизмов необходимо использовать главным образом иммерсионный, или погружной объектив с небольшим фокусным расстоянием и более высокой разрешающей способностью. Задание 3.С какой целью изучается морфология бактерий? Ответ 3.Морфология бактерий изучается с целью определения принадлежности их к одной из четырёх форм: коккам, палочковидным, извитым, нитевидным формам. Кроме того, изучение морфологии, наряду с другими признаками, проводится с целью определения видовой принадлежности выделенных чистых культур микроорганизмов. ЗАДАНИЕ №11 Используя иммерсионную систему светового микроскопа, врач изучал мазки, приготовленные из гноя уретры больного П. В препарате обнаружены розового цвета диплококки бобовидной формы, обращенные вогнутыми поверхностями один к другому, расположенные внутри лейкоцитов. Он поставил диагноз «острая гонорея». Задание 1.На основании изучения каких свойств микроорганизмов врач диагностировал заболевание больного П.? Ответ 1.Диагноз поставлен на основании изучения морфологических, тинкториальных (особенности окраски) свойств и внутрилейкоцитарного расположения гонококков (незавершенный фагоцитоз). Задание 2.Как называется метод диагностики инфекционного заболевания, если видовая принадлежность бактерий определяется при просмотре окрашенных мазков, приготовленных из исследуемого материала? Ответ 2.Бактериоскопическое исследование. ЗАДАНИЕ №9 Изучая формы бактерий, Вы для микроскопии окрашенных мазков воспользовались иммерсионной системой светового микроскопа. Задание 1.По каким признакам можно определить иммерсионный объектив микроскопа? Ответ 1.Иммерсионные объективы имеют у нижнего края ободок: белый – водная иммерсия, черный – масляная иммерсия. У объективов «сухих» систем ободка нет. Задание 2.Почему при изучении морфологии бактерий необходимо пользоваться иммерсионной системой микроскопа? Ответ 2.При микроскопии с использованием иммерсионного объектива его погружают в масло (кедровое, персиковое и др.), показатель преломления которого близок к показателю преломления стекла. В этом случае пучок света, вышедший за пределы предметного стекла, не рассеивается, и лучи, не меняя своего направления, попадают в объектив. Картина строения объектива становится тем более достоверной, чем больше отклоненных лучей попадали в объектив микроскопа. Кроме того, иммерсионный объектив имеет более высокую разрешающую способность. Задание 3.Какие правила необходимо соблюдать при изучении препаратов с помощью иммерсионной системы микроскопа? Ответ 3.- центрировать иммерсионный объектив; - нанести каплю масла на препарат и укрепить препарат на предметном столике; - установить препарат на предметный столик; - опустить объектив до погружения фронтальной линзы иммерсионного объектива в масло; - осветить поле зрения плоским зеркалом; - найти изображение вращением макрометрического винта (на себя), глядя в окуляр микроскопа; - установить чёткость изображения вращения микрометрического винта на пол-оборота в одну и другую сторону Задание 40 При посеве испражнений переболевшего брюшным тифом на среду Эндо, и последующей инкубации в термостате получили рост колоний, имеющих различную окраску и размеры. Одни колонии были красного цвета,крупные,другие- бесцевтные,мелкие. Задания 1. Одного ли вида микроорганизмы находились в исследуемом материале ? 2. К какой группе сред ( по назначению) относится указания выше среда ? 3. Назовите еще ряд питательных сред, применяемых для этих целей. Эталоны ответов 1. Учитывая, что на среде появились колонии,различные как по цвету, так и по размерам,можно прийти к заключению, что в испражнениях были два различных вида микробов. 2. К дифференциально-диагностическим средам. 3. Плоскирева. Левина, висмут-сульфит агар, среды Гисса. Задание 42 У женщины после родов озноб, высокая температура,боли в левой молочной железе,ухудшилось общее самочувствие (гнойный мастит). Был сделан радиальный разрез. Из Гноя выделен стафилококк и определена чувствительность его к антибиотикам. Диаметр зон задержки роста для: пенициллина- 8 мм стрептомицида-8 мм оксалиццина-18 мм ампициллина- 25 мм гентамицина- 22мм тетрациклина- 10 мм Данный ответ получен из баклаборатории на 4-е сутки.В течение этих четырех дней больная получала пенициллин. Задания 1. Нужна ли коррекция антибиотикотерапии 2. Какой бы вы выбрали антибиотик для лечения больной и почему? Эталоны ответов 1.Да, нужна, так как выделенный от больной штамм стафилококка устойчив к пенициллину (d<10 мм). 2. Ампициллин. Вокруг диска,пропитанного этим антибиотиком, наибольшая зона задержки роста микробов, следовательно, этот препарат наиболее активен в отношении выделенных стафилококков. Можно назначить и комбинацию ( ампициллин + гентамицин),эти антибиотики с бактерицидным типом действия, поэтому можно рассчитывать их синергизм при их применении. Задания 45 У ребенка в возрасте 1 года с проявлениями рахита возникло воспаление легких. При бактериологическом исследовании мокроты выделили культуру сальмонелл мышиного тифа и определили чувствительность к антибиотикам: МИК: пенициллина – 128 мкг/мл, ампициллина – 128 мкг/мл, стрептомицина – 128 мкг/мл, тетрациклина – 128 мкг/мл, олеандомицина – 128 мкг/мл, левомицетина - 64 мкг/мл, гентамицина – 1 мкг/мл, мономицина -128 мкг/мл, канамицина – 128 мкг/мл. Задания 1. Каким методом определялась чувствительность выделенной культуры к антибиотикам и каковы этапы исследования? 2. Какой антибиотик целесообразно применить для лечения больного ребенка и почему? 3. Что должно быть отмечено при характеристике выделенного штамма? Эталоны ответов 1.1. Методом серийных разведений, так как ответ дан в мкг/мл. 1.2. Готовятся серийные разведения антибиотика (128 мкг/мл,64, 32 и т.д.), а затем к этим разведениям добавляют выделенную чистую культуру в концентрации 105-106 микробных клеток в 1 мл. Через 24 часаучет. 1.3. Наименьшая концентрация антибиотика, при которой еще нет видимого роста микробов, - минимальная ингибирующая концентрация. 2. Гентамицин, так как по результатам опыта только к этому препарату чувствительны сальмонеллы мышиного тифа. 3. У этого штамма множественная устойчивость к антибиотикам. Задание 48 Больному, который. поступил в отделение с жалобами на высокую температуру, кашель, колющие боли в боку, тяжелое общее состояние, был поставлен диагноз «нижнедолевая пневмония», и врач назначил пенициллин. После первой внутримышечной инъекции пенициллина у больного отмечалось падение кровяного давления, частый пульс, потеря сознания, холодный липкий пот (анафилактический шок). Благодаря введению норадреналина, преднизолона, хлорида кальция, димедрола состояние больного улучшилось. ЗАДАНИЯ 1.Какая была допущена ошибка фельдшером при введении данного антибиотика? 2.Чем можно объяснить возникновение анафилактического шока? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Надо было перед введением препарата поставить пробу на чувствительность к нему. 2.Состоянием повышенной чувствительности в ответ на введение пенициллина. Задание 32 В мазках, окрашенных по Граму, обнаружены фиолетового цвета палочки, располагающиеся цепочками, и такого же цвета шаровидные микроорганизмы, располагающиеся скоплениями, напоминающими гроздья винограда. Задания 1. Назовите эти микроорганизмы с учетом формы и расположения? 2. Каковы тинкториальные свойства названных микроорганизмов? 3. Какие красители были использованы и каковы этапы окраски по этому способу? Эталоны ответов 1. Стрептобациллы и стафилококки. 2. Это грамположительные микроорганизмы. 3. Генциан фиолетовый или метиловый фиолетовый,фуксин. Окраска по Граму состоит из четырех этапов: 1) на фиксированные мазок наливают водный раствор метилового фиолетового на 1-2 мин.( при окраске по методу Синева мазок покрывают полоской фильтровальной бумаги, заранее пропитанной раствором генцианового фиолетового и высушенной; на бумагу наносят 2-3 капли дист.воды), затем раствор сливают; 2) обрабатывают мазок раствором Люголя 1 мин. И, не промывая его водой, сливают раствор; 3) обесцвечивают мазок 95▫ спиртом в течении 0.5-1 мин., покачивая стекло до исчезновения серо-фиолетовых струек красителя, промывают препарат водой; 4) наливают на мазок фуксии Пфейффера, через 1-2 мин. Краситель сливают, препарат промывают водой, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют иммерсионной системой. Задание 59 В одном из районов Боливии отмечалась массовая гибель грызунов. В это же время среди жителей данной местности возникло заболевание, которое характеризовалась быстрым повышением температуры до 39-40С, сопровождающаяся ознобом, головокружением и тяжелым общим состоянием. В последующем отмечались потеря сознания, бред, кровоизлияние под кожу. У больных были увеличены либо паховые, либо подмышечные железы до величины голубиного яйца, болезненные, плотно спаянные с кожей. Все больные были госпитализированы. Из пункта бубонов специализированной лаборатории выделен возбудитель чумы. ЗАДАНИЯ 1.Как называется форма распространения инфекции, которая в короткий промежуток времени охватывает целые страны и континенты? 2.Как называются заболевания, если источником инфекции являются больные животные, как в данном случае? 3.Как выделить возбудитель из организма животных, выловленных в очагах инфекции, и как выяснить причину их гибели? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Эпидемия 2.Такие инфекции называются зоонозными. 3.Выловленных в очаге больных животных необходимо забить, провести микроскопическое исследование окрашенных мазков, приготовленных из крови и органов. Кроме того, посеять кровь из сердца и суспензию органов на питательные среды. Выделить чистую культуру и провести её идентификацию по морфологическим, культуральным, биохимическим и антигенным свойствам. Трупы вскрытых животных сжечь или обезвредить в автоклаве. Задание 35 Приготовленные углеводные среды простерилизовали один раз текучим паром. Через некоторое время в средах был отмечен рост микроорганизмов. Задания 1. Правильно ли выбран способ стерилизации? 2. Правильно ли проведена стерилизация? 3. С чем связана неэффективность проведенной стерилизации? Ваши предложения? Эталоны ответов 1. Правильно 2. Нет 3. С тем, что при однократном воздействии текучим паром погибают только вегетативные формы микроорганизмов, а споры сохраняются. Полная стерилизация этим способом достигается лишь при трехкратном воздействии текучим паром в течении трех дней по одному часу. Это дробная стерилизация. Питательные среды в промежутках между прогревание текучим паром находятся при комнатной температуре. После окончания дробной стерилизации питательные среды помещаются в термостат из нескольких дней при температуре 37. Использовать эти среды можно в случае отсутствия на них признаков роста бактерий. Задание 50 В хирургическом отделении участились случаи нагноения послеоперационных ран. При проведении микробиологического исследования причиной этих осложнений оказалось распространение в хирургическом отделении госпитальной инфекции. Так, у больного А. из отделяемого послеоперационной раны был высеян патогенный стафилококк, фаготип ЗА ЗС 55 71. У операционной сестры З. из зева также высеян патогенный стафилококк, фаготип 79. У хирурга П.— патогенный стафилококк, фаготип 80, у младшей медсестры Н. послеоперационной палаты — также патогенный стафилококк, фаготип ЗА ЗС 5571: ЗАДАНИЯ 1.Кто из обследованных лиц является носителем патогенной флоры (патогенных стафилококков)? 2. Кто из обследованных лиц послужил источником послеоперационных осложнений у больных? 3.Какие меры необходимо срочно принять для прекращения распространения данной внутрибольничной инфекции? ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1.Носителями патогенных стафилококков являются операционная сестра 3., хирург П., младшая медсестра Н. 2. Младшая медсестра послеоперационной палаты, так как культура стафилококка, выделенная от нее и от больных, имела одинаковый фаготип. 3.Санирование бактерионосителей; младшую медсестру временно перевести на работу в другое отделение. Провести дезинфекцию в хирургическом отделении; строго соблюдать масочный режим; провести в отделении облучение воздуха бактерицидными лампами. ЗАДАНИЕ № 94 Врач инфекционного отделения для лечения ботулизма назначил больному Н. интенсивную ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. Анафилактический шок. 2. Гиперчувствительности немедленного типа. 3. Не проверила наличие состояния сенсибилизации к лошадиному белку, не поставила внутрикожную пробу с разведенной нормальной лошадиной сывороткой. Семья С.госпитализирована в инфекционное отделение с симптомами затрудненного глотания, афонией, понижением слуха, расстройством аккомодации, двоением в глазах, нарушением дыхания. Заболевание закончилось летальным исходом. При изучении причины возникновения интоксикации у человека этой семьи в бактериологической лаборатории проведены исследования остатков рыбных консервов, которые употреблялись пострадавшими в пищу. 1.О каком возбудителе пищевой интоксикации можно думать в данном случае? В данном случае учитывая анамнез и клинические данные можно думать об интоксикации вызванной клостридиями ботулизма. 2. Какие методы диагностики могут быть использованы при исследовании оставшихся продуктов? Остатки пищевых продуктов можно исследовать в реакции нейтрализации с целью обнаружения в них батулических токсинов или для выделения чистой культуры палочек ботулизма использовать бактериологический метод. 4. Как могли быть инфицированным рыбные консервы ,которые употребляла в пищу семья погибших? У рыбы в кишечнике часто вегетируют клостридии ботулизма и в данном случае стерилизация рыбных консервов была некачественной ЗАДАНИЕ № 151 При микроскопии препарата, приготовленного из мокроты больного Н., у которого были кашель, боли в груди, очень высокая лихорадка (температура 40°С), повышенное отделение жидкой, пенистой, с примесью крови мокроты, обнаружены мелки с капсулой нежной грамотрицательные палочки, концы которых окрашены интенсивно. В посеве мокроты на МПА были обнаружены на следующий день колонии R-типа, напоминающие «смятый кружевной платочек». ЗАДАНИЯ 1) Можно ли на основании полученных данных поставить предварительный диагноз «чума»? 2) Следует ли применять в этом случае срочные противоэпидемические мероприятия, если в это же время в данной местности началась эпидемия среди грызунов и их массовая гибель? 3) Какие этапы исследования необходимо проделать для определения видовой принадлежности выделенных бактерий? 4) Как можно выделить культуры иерсиний чумы, если материал загрязнен посторонней микрофлорой. ЭТАЛОНЫ ОТВЕТОВ 1. В данном случае можно сказать, что в препарате обнаружены иерсинии. 2. Да, обязательно, так как заражение чумой чаще всего возникает от грызунов. 3. С этой целью необходимо выделить чистую культуру из патологического материала, взятого от больного и погибших грызунов и провести ее идентификацию. Культуры иерсиний выделяют на простых питательных средах. Выделенные культуры идентифицируют и дифференцируют от других родственных видов, в частности, от псевдотуберкулезных микроорганизмов, на основании комплекса признаков с учетом морфологии клеток и структуры колоний. Основными дифференциально-диагностическими критериями между иерсиниями чумы и псевдотуберкулеза считаются: подвижность культур, рост на голодно-кислом агаре, лизис специфическими фагами, ферментация рамнозы, агглютинация противочумной сывороткой, патогенность для лабораторных животных. Для возбудителя чумы характерны следующие признаки: отсутствие подвижности и роста на голодно кислом агаре, лизис чумным бактериофагом, отсутствие ферментации рамнозы, агглютинация противочумной сывороткой, разведенной до титра. Штаммы неренний чумы убивают морских свинок и крыс с характерными изменениями. 4. Выделение чистой культуры чумного микроба затруднено в посевах, загрязненных посторонней микрофлорой. Особенно трудно выделять культуру от больных, леченных комплексом соответствующих антибиотических и сульфаниламидных препаратов. В этом случае исследуют одновременно несколько проб, взятых от одного больного, и материал, как правило, засевают на элективные питательные среды Туманского. Ленской, Коробковой или на агар с 1% гемолизированной крови. Колонии иерсиний чумы, обнаруженные среди посторонней бактериальной флоры, необходимо снять петлей и рассеять на агар, содержащий кровь и генциан-фиолетовый также заразить ими лабораторные животных. ‘У пострадавшего в дорожно-транспортном происшествии было повреждено бедро. Рана бедра глубокая, с попавшими в нее обрывками одежды и частицами почвы. Спустя 2 часа после травмы проведена первичная хирургическая обработка раны и наложены швы. Через два дня состояние больного резко ухудшилось, бедро резко увеличилось в объеме, кожа бледная, блестящая, мышечная ткань(после снятия швов) имеет вид вареного мяса, отделяемое раны зловонное, пенистое, при пальпации кожи вокруг раны ощущается крепитация. 1. Какое заболевание можно заподозрить у этого больного? Клиническая картина заболевания у этого больного свидетельствует об осложнении газовой гангрены. 2. Какие микроорганизмы могли вызвать данное заболевание? Клостридии: Cl.perfringens,Cl.novyi,Cl.septicum,Cl.histolyticum,Cl.sordellii,Cl.fall ax. 3. Какие лабораторные исследования можно провести для подтверждения диагноза? Бактериологическое и биологическое исследования. Материал окрашивают по Граму, микроскопируют, обращая внимание на наличие грубых грамположительных споровых палочек или отдельных спор,а затем сеют на казеиновый или мясные жидкие и плотные среды(кровяной агар, среда Вильсона-Блера). Посевы культивируют в анаэростате, а столбики со средой -в термостате при температуре 37°С. Из посевов готовят препараты, окрашивают их по Граму, учитывают характер роста на жидких питательных средах и пересевают материал на плотные среды. Фильтраты культур или центрифугаты проверяют на наличие токсина в опытах на мышах или морских свинках и используют для проведения реакции нейтрализации с диагностическими сыворотками. Характер роста на плотных питательных средах учитывают на 3-й день. Иглой отпирают колонии и засевают столбиком в полужидкий агар, содержащий 0.5% глюкозы. Определяют морфологию выделенных бактерий, их подвижность, способность сбраживать углеводы, изменять цвет лакмусного молока, разжижать желатин, свёрнутую сыворотку или яичный белок. Кроме того исследуют токсигенность выделенных бактерий на лабораторных животных и методом люминесцентной микроскопии. Для этого колонию эмульгируют на предметном стекле в капле акридинового оранжевого, покрывают покровным стеклом и изучают в иммерсионной системе люминесцентного микроскопа. Наличие только зелёных палочек указывает на присутствие токсигенных особей. Красные или зелёные с красными фрагментами палочки свидетельствуют о слабой токсигенности бактерий или ее отсутствии. 4. Какие специфические лечебные препараты необходимо назначить больному в данном случае? Обязательное оказание квалифицированной хирургической помощи. Ранее введение поливалентной антитоксической очищенной и концентрированной сыворотки"Диаферм-3" по 50.000МЕ. Лечение только одной сывороткой в ряде случаев не даёт нужного эффекта, потому необходимо комплексное применение антитоксической сыворотки, антибиотиков и гипербарической оксигенации. ЗАДАНИЕ №206 В вирусологическом отделении бактериологической лаборатории проводят выделение вирусов из материалов, взятых у больных. Вам необходимо подобрать тестсистемы для выделения вирусов из присылаемых в лабораторию материалов. 1.Какие тест-системы используют при выделении вирусов из материалов, взятых у больных? Выделение вирусов от больных проводят на клеточных культурах, куриных эмбрионах и экспериментальных животных. 2.Какая из тест-систем наиболее широко используется во всех диагностических лабораториях? Наиболее часто и наиболее широко для выделения вирусов используют клеточные культуры. 3.Назовите разновидности наиболее широко используемой тестсистемы? Первичные, диплоидные и перевиваемые культуры клеток. ЗАДАНИЕ №210 В населенном пункте Н. зарегистрирован эпидемический подъем заболеваний, клинически диагностируемый ка ОРВИ. Для уточнения этиологии заболеваний было решено провести ряд исследований. 1.Что может служить исследуемым материалом для решения поставленной задачи? Материалом для исследования служат мазки со слизистой и смывы из носоглотки, при поражении легких – мокрота и промывные воды бронхов; в случае высыпаний на слизистой и коже – содержимое элементов сыпи; парные сыворотки; кровь. 2.Как должен обрабатываться материал для выделения вирусов? Исследуемый материал, находящийся в жидкой фазе, должен быть обработан смесью антибиотиков, которые действуют на грамположительную и грамотрицательную бактериальную флору, а также на грибки. 3.Какие вирусы могли вызвать заболевания, клинически диагностируемые как ОРВИ? ОРВИ могли вызвать из ДНК-содержащих вирусов: аденовирусы, вирусы герпеса 1-го и 2-го типа, вирус ветряной оспы и и опоясывающего лишая. Из РНК-содержащих вирусов: вирусы парагриппа, болезни Ньюкастла, респираторносинтициальный вирус, вирус паротита и кори:коронавирусы, реовирусы, риновирусы, вирусы Коксауи и ЕСНО. 4.Какие методы лабораторной диагностики целесообразно использовать дял решения вопроса об этиологии ОРВИ? 4.1.Эксперсс-методы: иммунофлюорисцентный, иммуноферментный, риноцитоскопию. 4.2.Вирусологический метод – для выделения и идентификации возбудителей. 4.3.Серологический метод – для обнаружения 4-х кратного нарастания титра антител к одному из вирусов. Вопрос 129 В инфекционное отделение поступил больной 17лет с предварительным диагнозом дизентерия, он жалуется на общую слабость головокружение снижения аппетита тошноту рвоту чувства жести под ложечкой, частый и жидкий стул, температура 36,6 градусов. в баклаборатори, направлены на исследование рвотные массы и испражнения. при бактериологическом исследованием фекалий, шигелл обнаружить не удалось. на среди эндо после посева рвотных масс выросли плоско-выпуклые блестящие красного цвета с металлическим блеском, которые агглютинировались на стекле с поливалентной ок-сывороткой. 1. О каком еще заболевании можно подуматьпосле проведения этого этапа диагностики? Ответ: энтеропатогенные кишечные палочки. 2. Какие этапы лабораторной диагностики необходимо выполнить еще для установления этиологии данного заболевания? Ответ: 5-10 колоний , агглютинирующие на стеклеполивалентной ОК- сывороткой, отсевают на скошенный агар. Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд Гисса, для изученя ферментативнх свойств можно использовать систему индикаторых бумажек и агглютинируют типовыми ОК-сыворотками, при выделении подвижных штаммовиспользуют еще и Нсыворотки. Штаммы, агглютинировавшиеся какой-либо типовой ОКсывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. Сыворотку разводят до титра О- и К-антител, указанных на этикетке ампулы. В один ряд пробирок добавляют живую, во второй ряд – убитую прогреванием выделенную чистую культуру эшерихий . 3. Напишите ответ из баклаборатории в инфекционное отделение. Ответ: В инфекционное отделение больной С., 17 лет, из испражнений и рвотных масс выделены энтеропатогенные палочки. Вопрос 127 В детскую консультацию на прием к врачу педиатру родители принесли четырех месячного сережу, который находится на искусственном вскармливании. два дня назад у сережи поднялась температура до тридцати восьми градусов, он стал беспокойно спать, часто плачет, появляется частый жидкий стул с неприятным запахом, дважды была рвота. для исследования кал ребенка направлен в баклабораторию. врач поставил диагноз колиэнтерит и назначил ребенку соответствующее лечение. в бак лаборатории испражнения посеяли на среду эндо и через двадцать четыре часа получили сплошной рост колоний красного цвета с металлическим блеском, среди которых было много похожих колоний, но цвет бледно-розовый. колонии, плоско-выпуклые с ровными краями средних размеров. 1. Предложите схему бактериологического исследования испражнения у этого ребенка Ответ: Исследовать необходимо не менее 10 колоний Для исследования отбирают колонии как с металлическим блеском, так и бледно-розовые. Предварительное испытание отобранных колоний в реакции агглютинации с помощью 1 и 2 поливалентных ОК-сывороток, после чего на скошенный агарпересевают колонии, агглютинировавшие в сыворотке. Выделенные чистые культуры микроскопируют, изучают подвижность, засевают в короткий пестрый ряд гисса и агглютинируют типовыми ок-сыворотками в соответствии с наставлением по применению на этикетке для каждой серии. ШТаммы агглютинировавшиеся какой-либо типовой оксывороткой на стекле, испытывают в линейной реакции агглютинации в двух рядах пробирок. сыворотку разводят до титра о- и к- антител, указанных на этикетке ампулы.В качестве антигена в один ряд пробирок вносят взвесь живых бактерий, в другой ряд пробирок вносят гретые бактерии. Результаты линейной реакции агглютинации учитывают после двадцати часов инкубации при температуре тридцать семь градусов, оценку результатов проводят: невооруженным глазом - с живыми бактериями, учитывая крупно-хлопчатой результат , в агглютиноскопе - с гретыми бактериями, учитывая мелкозернистый агглютинат. 2. Дапйте характеристику выделенной культуре, в случае если это энтеропатогенныеэшерихии. Ответ: Грамотрицательные, средних размеров. в мазках располагаются хаотично, одиночно, на плотных средах образуют колонии круглой формы, сочные блестящие плоско-выпуклые средних размеров на дифференпиальных средах окрашиваются в цвет краски более или менее интенсивно. ферментируют с образованием кислоты глюкозу, лактозу, манит, некоторые штаммы могут ферментировать лактозу в более поздние сроки. в отношении других углеводов эшерихии ведут себя различно, образуя множество биохимических вариантов. энтеро-патогенные эшерихи дают положительную аггдютинацию с поливалентными ок-сыворотками и с какой-либо типовой. Задание 140 В бактериологической лаборатории проводились исследования по диагностике брюшного тифа от 3 больных, поступивших в инфекционное отделение с предварительным диагнозом «брюшной тиф. Сроки заболевания – 7-9 дней. На исследование была отправлена гемокультура от больных. При посеве гемокультуры на среде Эндо выросли мелкие, бесцветные, с гладкими краями колонии. У культур изучены морфологические, культуральные и биохимические свойства, предварительно доказана их принадлежность к s. typhi. Задания 1.На какой среде выделялась чистая культура этих возбудителей (состав среды)? 2.Какие изменения можно увидеть в указанной вами среде, если вырастут s. typhi? 3.Укажите все признаки выделенных микроорганизмов, которые позволили предварительно от нести их к s. typhi 4.Какими исследованиями нужно дополнить идентификацию для окончательной диагностики заболевания? Эталоны ответов : 1.1.Трехсахарная среда олькеницкого. 1.2.В состав среды входит в качестве основы мпа, куда добавляют глюкозу, лактозу. сахарозу, соль мора, гипосульфит, мочевина, водный раствор фенолового красного. 2. Сальмонеллы брюшного тифа ферментируют глюкозу с образованием кислоты (пожелтение столбика агара), не расщепляют лактозу (окраска скошенной части агара не изменяется) и сероводород (почернение среды на границе столбика агара и скошенной поверхности ). 3.1. Грамотрицательные, средних размеров, хаотично расположенные в препарате палочки с закругленными краями. спор, капсул не образуют, выражена подвижность. 3.2.В коротком ряду Гисса ферментируют глюкозу, маннит, мальтозу с образованием кислоты, не расщепляют мочевину в среде олькеницкого, выделяют сероводород. 4.1. Нужно провести серологическую идентификацию выделенных культур с использованием поливалентной сальмонеллезной сыворотки гр. ABCDE и адсорбированных монорецепторных о- и нсальмонеллезных сывороток. (9, 12, vi; d). 4.2.Провести фаготипирование выделенных культур с помощью набора типовых брюшнотифозных viбактериофагов. 4.3.Изучить чувствительность к антибиотикам Задание 171 Больной К ветфельдшер обратился к врачу с жалобами на потливость волнообразную лихорадку головную и мышечные боли боли в суставах. При клиническом обследовании поставлен диагноз “бруцеллез?”. Больному назначены дополнительные лабораторные исследования для подтверждения или исключения предварительного диагноза Вопрос: Какие методы лабораторной диагностики можно использовать в обычных микробиологических лабораториях для уточнения диагноза? Ответ: Серологические реакции и аллергические пробы Вопрос: Перечислите серологические реакции которые можно применить для диагностики Ответ: Реакция Райта Хеддлсона опсонофагоцитарная проба РСК РНГА Вопрос: С какого дня заболевания ставится реакция Райта Ответ: В начале второй недели заболевания Вопрос: Что берется в качестве диагностикума в реакции Райта? Ответ: Взвесь убитых бруцелл окрашенных генциановым фиолетовым Вопрос: По каким критериям вы оцениваете положительную реакцию Райта? Ответ: Положительная- при разведении сыворотки больного 1:200; сомнительная- 1:50 Вопрос: У кого реакция Райта может быть положительной? Ответ: У больных и привитых Вопрос: Как отличить по реакции Райта больных от привитых? Ответ: Необходимо повторно поставить реакцию Райта с целью выявления нарастания титра антител которое свидетельствует о заболевании. При прививочных реакциях отсутствует нарастание титра антител в исследуемом сыворотке Задание № 186 Больной обратился с жалобами на появление двух язв на головке полового члена, которые появились 12 дней назад. За три недели до заболевания имел случайную половую связь с малознакомой женщиной. Микроскопическое исследование нативного мазка, приготовленного из отделяемого язвы, позволило обнаружить подвижные, спиралевидной формы бактерии, которые совершали поступательные, вращательные, сгибательные движения. Число оборотов спирали возбудителя – от 8 до 12. Завитки равномерны, вверху закруглены, расстояния между ними одинаковые , по направлению к концам уменьшаются. Задания 1. Какой микроорганизм обнаружен специалистом при исследовании препарата? 2. Какие основные морфологические признаки позволили его опознать? 3. Какой метод микроскопии использовался в этом случае? Эталоны ответов 1. В данном случае в препарате обнаружены бледные трепонемы. Клиническая картина, анамнез, типичная морфологическая картина возбудителя позволяют поставить диагноз «сифилис» 2. Извитая форма возбудителя, равномерность завитков и типичные ЗАДАЧА 215 Среди учащихся 1-3 классов средней школы населенного пункта Н. Появились случаи клинически протекающие как вирусный гепатит. Клиническая картина характеризовалась острым началом заболевания, короткими преджелтушным диспептическим периодом, появлением желтушности склер, слизистых оболочек и кожных покровов Улучшение самочувствия совпало с наступлением желтушного периода. При эпидемиологическом обследовании очагов инфекции было установлено, что за 15-45 дней до появления признаков болезни все заболевшие дети пили воду из источника, вода которого не обезораживалась. Каких либо медицинских манипуляций связанных с повреждение кожных покровов в последние годы заболевшим не проводилось Вопросы 1 о какой форме вирусного отрастила можно думать у заболевших детей учитывая данные эпидемиологического обследования? 2. Какую специфическую профилактику необходимо провести детям которы контактировали с заболевшими учащимися? 3. Какие обследования необходимо провести для уточнения диагноза? Ответы 1 у заболевших можно заподозрить гепатит А 2 для профилактики контактным ввести иммуноглобулин, полученный из смеси донорских сывороток крови взрослых людей 3 для уточнения диагноза используют иммунологические методы как для выявления антигена вируса так и антител относящихся к IgM, lgG А) иммунноферментные реакции Б)радиоиммуный метод на твердофазной основе В) РНГА Г)иммунную электронную микроскопию Задание 157 В лаборатории по диагностике особо опасных инфекций из испражнений больного Н.,который госпитализирован в инфекционное отделение с диагнозом «острый гастроэнтерит», выделена чистая культура бактерий, представляющая собой грамотрицательные, слегка изогнутые палочки, подвижные, ферментирующие сахарозу и маннозу с образованием кислоты, агглютинирующиеся Охолерной сывороткой. Задания 1.На каких средах выделена эта чистая культура от больного Н.? 2.Определите вид выделенного возбудителя на основании этих признаков. 3.Дополните указанные исследования тестами,необходимыми для окончательной идентификации выделенной культуры. Эталоны ответов 1. На щелочной 1% пептонной воде,щелочном МПА,TCBS,лактозо-сахарозной среде. 2. Холерный вибрион. 3. Необходимо определить хемовар,биовар и серовар выделенного возбудителя. 3.1. Определить хемовар по изучению биохимических свойств в углеводном ряду, состоящем из маннозы,сахарозы и арабинозы. 3.2. Изучить способность гемолизировать эритроциты барана и чувствительность к полимиксину. 3.3. Проверить фаголизабельность фагами С и ЭльТор 2. 3.4. Определить серовар в реакции агглютинации с типовыми сыворотками Инаба, Огава. 3.5. Для идентификации можно использовать и ряд дополнительных тестов: оксидазный тест,тест окисления ферментации,тест"тяжа", реакцию гемагглютинации куриных эритроцитов,гексаминовый тест.
