04.08.2016 МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Пиридоксина гидрохлорид ФС Пиридоксин Взамен ГФ XII, ч.1, ФС 42-0270-07 Pyridoxini hydrochloridum 4,5-Бис(гидроксиметил)-2-метилпиридин-3-ола гидрохлорид OH HO H3C OH HCl N C8H11NO3 · HCl М.м. 205,64 Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пиридоксина гидрохлорида C8H11NO3·HCl в пересчете на сухое вещество. Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе. Подлинность. 1. ИК-спектр. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца пиридоксина гидрохлорида или рисунку (Приложение). 2. УФ-спектр. 1 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», доводят 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до 50 мл (раствор А). 1 мл раствора А доводят 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до 100 мл (раствор Б). Ультрафиолетовый спектр поглощения раствора Б в области длин волн от 250 до 350 нм должен, так же, как и спектр аналогично приготовленного раствора стандартного образца, иметь максимум в интервале от 288 до 296 нм. 1 мл раствора А доводят фосфатным буферным раствором рН 7,4 (ОФС «Буферные растворы») до 100 мл (раствор В). Ультрафиолетовый спектр поглощения раствора В в области длин волн от 220 до 350 нм должен, так же, как и спектр аналогичного раствора стандартного образца, иметь максимумы в интервалах от 248 до 256 нм и от 320 до 327 нм. 3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»). *Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей». *Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей»). рН. От 2,4 до 3,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ. Подвижная фаза (ПФ). Около 2,72 г (точная навеска) калия дигидрофосфата растворяют в 900,0 мл воды, доводят рН раствора до 3,0±0,1 фосфорной кислотой разведенной 10 % и доводят объем раствора водой до 1000,0 мл. Испытуемый раствор. Около 25,0 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 5,0 мл воды и доводят объем раствора тем же растворителем до 10,0 мл. Раствор сравнения А. 1,0 мл испытуемого раствора доводят водой до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят смесью растворителей до 10,0 мл. Раствор сравнения Б. Около 2,5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси А и около 2,5 мг (точная навеска) стандартного образца 2 примеси В растворяют в 5,0 мл воды и доводят тем же растворителем до 10,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят водой до 10,0 мл. Примечание. Примесь А: 6-метил-1,3-дигидрофуро[3,4-c]пиридин-7-ол, CAS 519620-3; примесь В: 5-гидроксиметил-2,4-диметилпиридин-3-ол, CAS 61-67-6. Хроматографические условия. Колонка 25 × 0,46 см, эндкеппированный октадецилсилил силикагель, деактивиронный по отношению к основаниям (С18), 5 мкм; Скорость потока 1,0 мл/мин; Детектор спектрофотометрический, 210 нм; Объем пробы 5 мкл; Время хроматографирования 2,5-кратное от времени удерживания основного пика. Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б. Пригодность хроматографической системы с использованием раствора сравнения Б определяется в соответствии с ОФС «Хроматография». Относительные времена удерживания соединений. Пиридоксин – 1 (около 12 мин), примесь А – около 1,7; примесь В – около 1,9. Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножается на поправочный коэффициент 1,5. Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора: - площадь пика примеси В должна быть не более 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,15 %); - площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %); - суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %). 3 Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %). Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции. Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции. Тяжелые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1. Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители». *Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота». Количественное определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции растворяют в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и титруют при интенсивном перемешивании 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,56 мг пиридоксина гидрохлорида C8H11NO3 · HCl. Хранение. В защищенном от света месте при температуре не выше 25 ºС. *Контроль по показателям качества 4 «Прозрачность раствора», «Цветность раствора» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения. 5 Приложение. ИК-спектр 6