БЕЗБОРОДОВ Павел Николаевич КОРРЕКЦИЯ ОБЩЕГО АДАПТАЦИОННОГО СИНДРОМА У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ С ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ
реклама
На правах рукописи БЕЗБОРОДОВ Павел Николаевич КОРРЕКЦИЯ ОБЩЕГО АДАПТАЦИОННОГО СИНДРОМА У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ С ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ДИСПЕПСИЕЙ БИОНОРМАЛИЗАТОРОМ ИЗ ПЛАЦЕНТЫ 03.00.13 – физиология; 16.00.01 – диагностика болезней и терапия животных АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Белгород 2006 2 Работа выполнена в ФГОУ ВПО Белгородская Государственная сельскохозяйственная академия Научные руководители: доктор ветеринарных наук, профессор Концевенко Валентин Васильевич доктор биологических наук, профессор, заслуженный ветеринарный врач РФ Сеин Олег Борисович Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Семенютин Владимир Владимирович; доктор ветеринарных наук, профессор Кузнецов Николай Иванович Ведущая организация: ФГОУ ВПО «Орловский государственный аграрный университет» Защита состоится «_______»_______________2006 г. в «______» часов на заседании диссертационного совета Д 220. 004. 01 в ФГОУ ВПО «Белгородская государственная сельскохозяйственная академия» по адресу: 308503, п. Майский Белгородского района Белгородской области, ул. Вавилова, 24. С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Белгородской государственной сельскохозяйственной академии. Автореферат разослан «____»______________2006 г. Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук, доцент Ю.Н.Литвинов 3 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Актуальность темы. Среди внутренних незаразных болезней сельскохозяйственных животных особое место занимают заболевания, связанные с нарушениями обмена веществ, иммунного статуса и адаптации животных к современным технологиям промышленного животноводства. К ним относят и диспепсии молодняка, которые возникают в условиях резко увеличивающихся физиологических нагрузок на животных, в том числе при нарушении технологии их содержания. Выявление общих закономерностей возникновения и протекания этого процесса у новорожденных животных, равно как создание и внедрение на основе полученных данных методов и средств профилактики и лечения больных животных, составляет на нынешнем этапе весьма актуальную проблему животноводства (Аликаев В.А., 1935; Тарасов И.И., 1968; Урбан В.П., 1974; Шишков В.П., 1974; Анохин Б.М., 1979-1989; Митюшин В.В., 1974-1989; Костромитинов Н.М., 1987; Карпуть И.М., 1989; Щербаков Г.Г., 1990; Николаев В.И., 1990; Кондакова И.А., 1999; Игнатьев Р.Р., 1999; Булыгина М.В., 2000 и др.). Цель и задачи исследований. Целью работы является определение адаптационно-метаболических изменений в организме новорожденных телят с функциональной диспепсией, при использовании в качестве лечебно- профилактического средства бионормализатора из плаценты. Для достижения цели был поставлен на разрешение комплекс нижеследующих задач: - определить динамику содержания стероидных гормонов в крови коров-матерей, а также уровень кортизола и тироксина у полученных от них новорожденных телят, после лечебно-профилактического применения биоглобина; - исследовать биохимические показатели крови новорожденных телят, характеризующие их защитно-приспособительные механизмы после применения биоглобина с терапевтической целью; 4 - изучить биохимические показатели функционального состояния иммунной системы организма коров-матерей при профилактической обработке биоглобином; - исследовать гистоструктурные изменения в иммунокомпетентных органах новорожденных телят после лечения биоглобином и определить гистоморфофункциональное состояние тканей хориона у коров-матерей при профилактической обработке биоглобином; - разработать способ применения биоглобина для профилактики возникновения и лечении новорожденных телят с клиническими признаками функциональной диспепсии; Научная новизна работы. Впервые изучены адаптационно- метаболические изменения в организме новорожденных телят с функциональной диспепсией, протекающие под воздействием бионормализатора из плаценты человека – биоглобина. Определены дозировки и способ применения биоглобина с профилактической и лечебной целью (Патенты РФ на изобретение № 2150949 и № 2269351). Дано комплексное научное и практическое обоснование к применению биоглобина в ветеринарной практике для профилактики и лечения новорожденных телят с клиническим проявлением функциональной диспепсии. Теоретическая и практическая значимость. Результаты проведенных исследований значительно расширяют и дополняют имеющиеся представления о механизмах биохимической адаптации и возможностях регулирования при помощи бионормализатора из плаценты защитно-приспособительных реакций организма новорожденных телят с диспепсией при проведении лечебнопрофилактических мероприятий в хозяйствах. Предложенный производству способ применения биоглобина в качестве превентивной терапии может способствовать предупреждению перехода функциональной диспепсии в токсическую, а стимулирующие свойства препарата обусловливают повышение уровня метаболизма организмом больных телят и восстанавливают нарушенный гомеостаз. 5 Положения выносимые на защиту. - Биоглобин активизирует формирование защитных функций организма новорожденных телят при функциональной диспепсии за счет повышения уровня гуморальных факторов неспецифического иммунитета. - Биоглобин оказывает гормонокорригирующее действие при лечении телят с функциональной формой диспепсии. - Биоглобин оптимизирует показатели биохимического состава крови новорожденных телят при проведении лечебно-профилактических мероприятий. - Гистоструктурные изменения в иммунокомпетентных органах телят с функциональной диспепсией после лечения и плацентарных тканях коровматерей после профилактической обработки биоглобином, подтверждают иммуномодулирующее и бионормализующее свойства препарата. Апробация работы. Материалы диссертационной работы были представлены на IV международной научно-производственной конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения». – БелГСХА, Белгород. – 2000 г.; II международной научно-практической конференции «Научно-технический прогресс в животноводстве России – ресурсосберегающие технологии производства безопасной продукции животноводства», п. Дубровицы, ВГНИИ животноводства, 2003; международной практической конференции КГАВМ посвященной 100-летию профессора Павловского Е.Н., - Казань. -2004; международной научно-практической конференции «Роль и значение метода искусственного осеменения сельскохозяйственных животных в прогрессе животноводства ΧΧ и ΧΧI веков», п. Дубровицы, ВГНИИ животноводства, 2004; ΧVI международной межвузовской научнопрактической конференции «Новые фармакологическое средства в ветеринарии», Санкт-Петербург, 2004 г.; VIII международной научно-практической конференции «Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения», - БелГСХА, - Белгород, 2004 г. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 16 работ. 6 Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 162 страницах печатного текста. Список литературы включает 200 отечественных и 79 иностранных источников. Работа иллюстрирована 16 таблицами и 53 рисунками. 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ Научно-производственные опыты и основные исследования на новорожденных телятах и коровах-матерях проведены в учхозе БелГСХА «Центральное», ОПХ «Белгородское» и АОЗТ «Красная Нива» Белгородского района. Формирование опытных групп животных осуществляли на основе клинического осмотра новорожденных, а также данных физиологического состояния коров при беременности и родах. В сравниваемых группах подбирали парыаналоги животных по породной принадлежности, возрасту, живой массе и др. Учитывая то, что диспепсии у новорожденных телят имеют различное происхождение и разный характер патологического процесса, подбор животных и направление исследований было проведено исходя из классификации их деления на три вида: органического происхождения; функционального (рефлекторно-стрессового) характера и казеиново-безоарную болезнь. В качестве средства профилактики и лечения больных телят с диспепсией функционального характера использовали бионормализатор из плаценты человека – биоглобин, который получают путем специальной химической обработки кислородными соединениями хлора измельченных и подвергнутых денатурации и суспендированию тканей плаценты (Патент РФ № 2036651, 1995). Согласно заключения по результатам исследований на токсичность и безвредность (ВНИИХТЛС от 06.05.1987 ТУ 10.07.1363. 19467999-93 Главветупр., 1993), препарат нетоксичен и обладает высокой биодоступностью. Основные лабораторные исследования эффективности применения биоглобина проведены на кафедре диагностики болезней, терапии, акушерства и хирургии ФГОУ ВПО БелГСХА, в Белгородской областной ветеринарной лаборатории, вирусологической лаборатории Центра Госсанэпиднадзора Белгородской области, гистологической лаборатории Белгородского областного он- 7 кологического диспансера, кафедре цитологии, гистологии и эмбриологии МГАВМиБ, а также Украинском НИИ фармакотерапии эндокринных заболеваний. Опыты по выявлению механизма действия, лечебно-профилактической эффективности и взаимосвязи показателей иммунологической реактивности, гормонального баланса и метаболических изменений в крови новорожденных телят и коров-матерей отражены на схеме (рис. 1). Всего в опытах было использовано 149 новорожденных телят и 47 коров. 1. Исследования содержания гормонов в крови новорожденных телят. а) В первой серии опытов по определению терапевтической эффективности биоглобина было подобрано четыре группы новорожденных телят (n = 3) с клиническими признаками функциональной диспепсии (на 2-е сутки после рождения), которых лечили по следующим схемам: 1-я группа – биоглобин 10 мл/гол/сут (100 мг) подкожно в течение 10 суток; 2-я группа – фармазин-50, 5 (250 мг) мл/гол/сут в/мышечно, в течение 4-х суток (фармазин – макролидовый антибиотик базово применяемый для лечения животных при диспепсии); 3-я группа – биоглобин + фармазин-50 в вышеуказанных дозах; 4-я группа – контроль (больные телята без обработки). б) Во второй серии опытов (при выявлении профилактической эффективности применения биоглобина) количественное определение в крови телят гормонов кортизола и тироксина осуществляли методом твердофазного иммуноферментного анализа. В опыты было подобрано четыре группы телят (n =4), которые были получены от коров-матерей обработанных (не обработанных) с профилактической целью биоглобином, за 10 суток до отела в дозе 10 мл/гол/сут в/мышечно. Сыворотку крови исследовали: на 2-е и 10-у сутки у следующих животных: 1-я группа – телята без диспепсии от коров обработанных биоглобином; 2-я группа – телята с диспепсией от коров обработанных биоглобином; 3-я группа (контроль 1) – телята без диспепсии (клинически здоровые) от интактных коров; 4-я группа (контроль 2) – телята с диспепсией от интактных коров. 8 БИОНОРМАЛИЗУЮЩЕЕ ВЛИЯНИЕ БИОГЛОБИНА Выявление механизма действия бионормализатора из плаценты при разработке способов профилактики и лечения новорожденных телят с функциональной диспепсией Биоглобин Определение бионормализующего влияния на организм коров-матерей при профилактике диспепсии Определение бионормализующего влияния при лечении телят с диспепсией Опытные группы Биоглобин Фармазин-50 Обработка коров-матерей за 10 суток перед родами Биоглобин + фармазин-50 Контроль (больные и клинически здоровые телята) Обработка телят на 2-е сутки после рождения Изучаемые показатели Гормональные изменения в крови Биохимические показатели крови Гистоструктурные изменения в тканях плаценты в иммунокомпетентных органах Лечебно-профилактическая эффективность применения иоглоина Рис. 1. Схема опытов 9 в) В третьей серии опытов при исследовании иммуноферментным методом взаимосвязи уровня стероидных гормонов у коров-матерей и полученных от них телят, проводили определение содержания гормонов эстрадиола, прогестерона и кортизола в сыворотке крови коров-матерей, обработанных биоглобином (n =4) за 10 суток до отела. Кровь для исследований брали у коров из яремной вены, первый раз перед началом обработки биоглобином и второй раз на 2-е сутки после отела. При этом учитывали наличие диспепсии у телят полученных от таких коров-матерей. 2. Определение иммунобиохимических показателей в крови животных. Изучение механизма действия биоглобина и возникающих при этом изменений в функции органов телят и коров-матерей, проводили общепринятыми методами по показателям крови, отражающих уровень адаптационнокомпенсаторных процессов в организме. а) В первой серии опытов при определении терапевтической эффективности применения биоглобина, в крови телят с диспепсией исследовали содержание общего белка, иммуноглобулинов, альбуминов, глобулинов, глюкозы, триацилглицеролов, щелочной фосфатазы (ЩФ), аланинаминотрансферазы (АлАТ), аспартатаминотрансферазы (АсАТ), лизоцимной и фагоцитарной активности нейтрофилов. Для этого были подобраны четыре группы (n =3) новорожденных телят. Животным 1-й группы, на 2-е сутки после появления клинических признаков функциональной диспепсии, с лечебной целью вводили 10 мл/гол/сут биоглобин подкожно, в течение 10 суток. Телятам 2-й группы, с наличием диспепсии, на 2-е сутки инъецировали фармазин-50 5 мл/гол/сут в/мышечно, в течение 4-х суток. Животные 3-й группы (с наличием диспепсии), обработке препаратами не подвергались. Телята 4-й группы – клинически здоровые (контроль) животные. б) Во второй серии опытов были проведены исследования крови у новорожденных телят, полученных от коров-матерей, обработанных биоглобином за 10 суток перед отелом в дозе 20 мл/гол/сут подкожно, в течение 10 суток. В 10 крови исследовали содержание иммуноглобулинов, альбуминов и глобулиновых фракций. Новорожденные телята по наличию диспепсии были распределены на четыре группы (n = 4): 1-я – телята от коров обработанных биоглобином без диспепсии; 2-я – телята от коров обработанных биоглобином с диспепсией; 3-я – телята от коров без обработки, без диспепсии; 4-я – телята от коров без обработки, с диспепсией. Взятие крови осуществляли из яремной вены животных на 2-е и 10-е сутки после рождения. в) В третьей серии опытов изучали содержание белков и белковых фракций, отражающих иммунологическую напряженность организма коров-матерей (n = 4) после обработки биоглобином за 10 дней перед отелом в дозе 20 мл/гол/сут подкожно, в течение 10 суток. В крови исследовали: иммуноглобулины, общий белок, альбумины и глобулины ά, β, γ. Кровь брали из яремной вены животных, первый раз до начала обработки биоглобином, второй раз на 2е сутки после отела. В 1-ю группу были отобраны коровы после обработки биоглобином у которых родились телята без диспепсии, во 2-ю коровы – телята с диспепсией. В 3-ю группу вошли коровы без обработки биоглобином и родившиеся от них телята без диспепсии (клинически здоровые), а в 4-ю группу – коровы без обработки биоглобином, а родившиеся телята от них с наличием диспепсии. 3. Для определения гистоструктурных изменений в органах и тканях животных были сформированы: а) четыре группы новорожденных телят (n = 3), у которых производили отбор (путем убоя или после падежа) иммунокомпетентных органов на 10-е сутки после рождения. 1–я группа – новорожденные телята, у которых после обработки биоглобином в дозе 10 мл/гол/сут подкожно, в течение 10 суток наступало полное выздоровление; 2-я группа – телята после обработки фармазином-50 в дозе 5 мл/гол/сут в/мышечно, в течение 4-х суток; 3-я группа – клинически здоровые телята не подвергнутые лечению (контроль 1); 4-я группа – больные диспепсией телята не подвергнутые лечению (контроль 2). Для проведения гистологических исследований у телят были отобраны об- 11 разцы тимуса, селезенки, печени, лимфоузлов консервацию, приготовление и окраску которых производили согласно методикам классической гистотехники. Микроскопическое исследование и фотодокументирование полученных гистосрезов проводили с помощью микроскопа «Биолам» и микрофотонасадки МФН-11 по общепринятым методикам. б) три группы коров (n = 3), у которых после отела производили отбор и определение гистоструктурных изменений в тканях хориона. 1-я группа коров – ткани хориона от животных, подвергнутых обработке биоглобином в дозе 20 мл/гол/сут подкожно, в течение 10 суток перед родами, у которых родились телята не заболевшие диспепсией; 2-я группа – ткани хориона от коров, не подвергнутых обработке биоглобином, а родившиеся телята заболели диспепсией (контроль); 3-я группа – ткани хориона от коров также не обрабатываемых биоглобином и родившиеся телята не заболели диспепсией (контроль). Отобранные для приготовления гистосрезов участки хориона (межкотиледоновая ткань, сосуды, ворсинки котиледона) консервировали и оценивали согласно методам классической гистотехники. 4. Выявление лечебно-профилактической эффективности применения биоглобина. Для выявления лечебной эффективности от применения биоглобина было сформировано 4 группы (n = 25) новорожденных телят. На 2-е сутки после рождения 1-й и 2-й группам животных вводили соответственно: биоглобин в дозе 10 мл/гол/сут подкожно в течение 10 суток и фармазин-50 в дозе 5,0 мл/гол/сут в/мышечно в течение 4-х суток. 3-я группа (контроль) – телята больные диспепсией, обработке не подвергались. 4-я группа (контроль) - клинически здоровые телята, которые также обработке не подвергались. После проведенного курса лечения учитывали количество выздоровевших телят (по отсутствию диареи), а также среднесуточный прирост (г) массы животных. Эффективность профилактической обработки коров-матерей с целью предупреждения возникновения диспепсии у новорожденных телят определяли на 27 коровах, которым за 10 суток до родов вводили биоглобин в дозе 20 мл/гол/сут подкожно в течение 10 суток. В качестве контроля были подобраны 20 коров (2-я 12 группа), которым препараты не вводили. Учет состояния здоровья новорожденных телят проводили согласно вышеотмеченным показателям. 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Общее действие биоглобина При подкожном введении биоглобина в дозах 10, 20, 30 мл/гол каких-либо изменений на месте инъекции не выявлено. Признаки воспалительной реакции отсутствовали. Температура тела, частота дыхания и пульса оставались стабильными. 3.2. Изменения гормональных показателей крови у подопытных телят а) Результаты первой серии опытов. Показатели гормональных изменений в крови новорожденных телят с функциональной диспепсией после применения различных вариантов лечения представлены в таблице 1 и 2. Таблица 1. Динамика кортизола в крови новорожденных телят при различных вариантах лечения Группа (n = 3) 1-я опытная 2-я опытная 3-я оптыная Вводимые препараты биоглобин животные) ± ± ± 34,80 14,00 7,88 33,07 117,67 9,63 ± ± ± 15,12 67,20 4,12 28,00 120,67 39,50 ± ± ± 20,00 10,8 24,4 221,67 40,00 8,17 ± ± ± 39,20 5,60 5,00 фармазин-50 Биоглобин + фармазин-50 Контрольная (больные Уровень кортизола, нмоль/л Исходный Через Через 5 сут (на 2-е сут) 10 сут 85,00 25,83 17,10 _ _________ достоверно при р < 0,05 13 Таблица 2. Динамика тироксина в крови новорожденных телят при различных вариантах лечения Группа (n = 3) 1-я опытная 2-я опытная 3-я оптыная Вводимые препараты биоглобин фармазин-50 Биоглобин + фармазин-50 Контрольная (больные животные) _ Уровень тироксина, нмоль/л Исходный Через Через 5 сут (на 2-е сут) 10 сут 186,67 120,67 121,33 ± ± ± 4,00 5,60 12,00 198,00 157,00 147,00 ± ± ± 20,40 32,00 10,80 200,33 150,67 108,00 ± ± ± 17,60 13,60 5,60 217,33 110,33 117,33 ± ± ± 39,20 4,40 8,00 Полученные нами данные по содержанию гормонов кортизола и тироксина в крови новорожденных телят после курса лечения биоглобином показали, что первоначально высокий уровень содержания кортизола в крови (85,0 нмоль/л) снижается к 10-м суткам в 4,9 раза (17,1 нмоль/л). Аналогичную картину содержания в крови кортизола можно было наблюдать и в группе новорожденных телят, где лечение осуществляли фармазином-50. Снижение гормона к 10-м суткам от первоначального уровня составило в 3,4 раза. Наибольшее снижение отмечено в контрольной группе больных телят, где концентрация кортизола достоверно снизилась за исследуемый период в 27,1 раза. Вместе с тем, в группе, где применяли комплексное лечение биоглобином и фармазином, через 10 суток количество кортизола достоверно увеличилось на 41%. 14 Следует отметить, что только в группах телят, где применяли фармазин и фармазин с биоглобином, отмечено значительное увеличение содержания кортизола через 5 суток после начала лечения. У телят 2-й и 3-й опытных групп, отмеченный на 5-е сутки подъем уровня кортизола в крови, оказывает кратковременное положительное влияние на организм новорожденных телят в связи с флогостатическим эффектом при котором тормозится и прекращается развитие воспалительного процесса. Кортизол также стимулирует секрецию моноцитами липокортина – полипептида предотвращающего «избыточную» воспалительную реакцию (Дейл М.М. и др., 1998). Результаты исследований показали, что у новорожденных телят с клиническими признаками функциональной диспепсии применение биоглобина способствовало достоверному снижению через 10 суток концентрации тирокисна в крови на 35,2% от показателя до обработки. При лечении фармазином-50 это снижение составило 25,8%. После совместной обработки телят биоглобином и фармазином уровень тироксина снизился уже на 46,1%. У телят контрольной группы снижение также составило 46,1%. Минимальный показатель соотношения между собой уровня катаболических гормонов в крови к 10-м суткам свидетельствует о достаточно выраженном бионормализующем влиянии биоглобина на активизацию адаптационнокомпенсаторных реакций в организме больных телят. Содержание гормонов кортизола и тироксина в крови новорожденных телят после профилактической обработки биоглобином коров-матерей имело в основном малозначительные изменения показателей к 10-м суткам наблюдений. Содержание стероидных гормонов в крови коров-матерей, обработанных биоглобином, имели характер изменений соответствующий становлению наиболее оптимальных физиологических параметров компенсаторно- приспособительных механизмов организма у телят не заболевших диспепсией на протяжении исследуемого периода времени. 15 Проведенные исследования показали, что обработка биоглобином коровматерей за 10 суток до родов способствует изменению уровня стероидных гормонов в крови животных в направлении сохранения эндокринно-иммунного гомеостаза у новорожденных телят и наиболее физиологическому протеканию адаптационно-метаболических реакций в ранний постнатальный период. Исследования показателей энергетического обмена новорожденных телят свидетельствуют об одинаковой тенденции изменения значений глюкозы и триацилглицеролов с наличием выраженного пика изменений на 7-е сутки после рождения. Так наиболее равномерно выраженное повышение количества глюкозы и триацилглицеролов можно наблюдать в группе, где вводили биоглобин. Подъем этих показателей к 10-м суткам составил соответственно 36,5 и 32,1%. Изменения уровня глюкозы и триацилглицеролов в группе, где применяли с лечебной целью фармазин, наоборот наметилась тенденция снижения триацилглицеролов по сравнению с исходным значением на 26,9%, а содержание глюкозы к 10-м суткам не изменилось. У телят с диспепсией контрольной группы картина достоверного изменения этих показателей носила скачкообразный характер – тенденция снижения к 7-м суткам от первоначального уровня на 34,6% и затем к 10-м суткам подъем на 86,4%. То же изменение отмечено и у триацилглицеролов. На 7-е сутки снижение составило 23,7%, а к 10-м суткам отмечен подъем на 50,0%. Содержание триацилглицеролов у здоровых телят контрольной группы характеризовалось повышением уровня к 10-м суткам на 38,1% от первоначального, а концентрация глюкозы не имела изменений за наблюдаемый период. Таким образом, повышение уровня липидных компонентов следует связывать с активизацией биосинтеза триацилглицеролов в жировой ткани из глюкозы (Hood R.L., 1972). В проведенных исследованиях повышение уровней триацилглицеролов у телят, обработанных биоглобином и у здоровых животных контрольной группы, очевидно связано с увеличением содержания кортизола после родов у их коров-матерей. Повышение уровня стрессовых гормонов мобилизует энергети- 16 ческие ресурсы и регулирует реакции адаптации к изменениям условий существования. Результаты проведенных нами исследований позволили установить, что повышение уровня ЩФ к 10-м суткам является результатом адаптационной гиперферментемии и наблюдается в группах (2-я и 3-я группы) новорожденных телят с наличием функциональной диспепсии (Тютюнник В.Л., 2003). У здоровых телят контрольной группы после рождения отмечалось достоверное уменьшение активности ЩФ. В сравнении с контролем, наиболее лучшими были результаты ферментемии у телят после обработки биоглобином, где снижение от первоначального состояния к 10-м суткам было в 1,3 раза (в контроле – 3,4 раза). Достоверное увеличение (в 2,3 раза) ЩФ у телят после обработки фармазином и тенденция увеличения (в 10 раз) у больных диспепсией телят (контрольная группа), свидетельствует о напряжении эндокринно-иммунных механизмов становления адаптационно-метаболического гомеостаза. Активность АсАТ в крови новорожденных телят после обработки биоглобином имела тенденцию уменьшения к 10-м суткам после начала лечения. Такая же закономерность отмечена у телят после лечения фармазином. Но в контрольных группах животных, наоборот установлено повышение уровня АсАТ по сравнению с исходным состоянием – на 26,1% у больных и на 32,2% у здоровых телят. Активность АлАТ у телят после лечения биоглобином и у здоровых животных (контрольная группа), была одинаковой по направленности. Снижение составило к 10-м суткам соответственно в 2 и 1,2 раза. На фоне относительной диспротеинемии повышение активности АлАТ у интактных телят с диспепсией и телят после лечения фармазином можно рассматривать как усиление аланинглюкозного пути с «выбросом» из клеток глюкозы за счет ее дефосфорилирования постепенной, как отмечено ранее у телят этих групп, активностью ЩФ. То есть как синдром метаболического блока по отношению к глюкозе и активацию путей компенсаторного синтеза по отноше- 17 нию к белкам. Аналогично можно отметить, что усиление липолиза у телят этих групп возможно за счет ферментемии по АсАТ, что в свою очередь предполагает участие липидных компонентов в цитолизе в силу их детергентных свойств (Рослый И.Н. и др., 2002). Изменения белковой картины крови у новорожденных телят после лечения биоглобином к 10-м суткам характеризовались тенденцией увеличения иммуноглобулинов, чего не наблюдалось в группах телят после обработки фармазином и у здоровых животных. Тенденция снижения содержания общего белка после лечения телят биоглобином и фармазином свидетельствует о противовоспалительном эффекте препаратов, так как согласно данным литературы (Меньшиков В.В., 1987), при наличии воспалительного процесса в тканях органов отмечается гиперпротеинемия. Изучение влияния различных вариантов лечения новорожденных телят с функциональной диспепсией показали, что у животных к 10-м суткам после введения биоглобина достоверно повышается лизоцимная активность сыворотки крови (в 11,5 раз от исходного значения). Та же картина увеличения лизоцимной активности отмечена у здоровых телят (3-я группа – контроль) полученных от интактных коров-матерей и у животных с наличием диспепсии (4-я группа), полученных от аналогичных коров-матерей. Увеличение составило соответственно в 29,5 (р < 0,01) и 27,7 раз. У телят, где в качестве базового лечения применяли фармазин, отмечено наоборот достоверное незначительное снижение лизоцимной активности (на 7,5%) к 10-м суткам наблюдения после начала обработки. Исследования фагоцитарной активности нейтрофилов в крови при лечении телят с функциональной диспепсией показали, что к 10-м суткам показатель активности изменялся крайне незначительно от первоначального состояния. Уменьшение в 1-4-й группах соответственно составило: 4,6; 6,9; 3,9 и 22,3%. Гистоструктурные изменения в периферических органах иммунной системы новорожденных телят показали, что после курса лечения биоглобином в дозе 10 мл/гол/сут в/мышечно в течение 10 суток, в основном происходит стиму- 18 ляция механизмов гуморальной защиты организма. В лимфоузлах обнаруживаются фолликулы с хорошо выраженными центрами размножения, большое количество лимфоцитов, иммунобластов и макрофагов. В тимусе имеются активные макрофаги, много тимусных телец разной генерации. Селезенка представлена наличием селезеночных телец с реактивными центрами, среди которых присутствуют макрофагальные и митотически активные пролифирирующие β-лимфобласты, лимфоциты и макрофаги. О стимулирующем действии биоглобина на элементы иммунной защиты свидетельствуют обширные диффузные скопления лимфоидной ткани в слизистой оболочке 12-перстной кишки и сычуга подопытных телят. Лечебная эффективность применяемых препаратов при функциональной диспепсии новорожденных телят показала, что наиболее лучшие показатели отмечены в 1-й группе, где применяли биоглобин. Выздоровление отмечено у 100,0% пролеченных телят. После лечения фармазином к 10-м суткам выздоровело только 60,0% животных. В контрольной группе от больных телят самопроизвольное выздоровление отмечено только у 20,0% животных. Наилучший среднесуточный прирост живой массы (485,8 г) отмечен также у телят, которых лечили биоглобином, при этом он был больше на 6,0% прироста массы за исследуемый период у здоровых телят. Применение биоглобина с профилактической целью на коровах-матерях за 10 суток перед родами показало, что заболели диспепсией функционального характера в течение 10 суток после рождения 26% телят, а полученные от интактных коров-матерей телята имели диспепсию у 40% животных. Среднесуточный прирост живой массы телят как у здоровых, так и у больных функциональной диспепсией телят, полученных от коровматерей после обработки биоглобином, был больше соответственно на 5,5 и 10,5% аналогичного прироста у телят, полученных от интактных коровматерей. ВЫВОДЫ 1. Бионормализатор из плаценты человека – биоглобин обладает выраженной эндокринно-иммунной активностью по сохранению динамического гомео- 19 стаза организма при проявлении общего адаптационного синдрома у новорожденных телят с функциональной диспепсией. 2. Эндокринно-иммунная взаимосвязь у телят после воздействия биоглобина обеспечивается на клеточном, системном и межсистемном уровнях. 3. Гормонокорригирующее действие биоглобина при лечении новорожденных телят с функциональной диспепсией проявляется снижением к 10-м суткам после рождения уровня кортизола в 4,9 раза и тироксина на 35,1% (р < 0,01). 4. Иммуностимулирующее действие биоглобина по обеспечению адаптационно-метаболического гомеостаза к 10-м суткам после лечения новорожденных телят с функциональной диспепсией характеризуется: а) достоверным повышением количества лизоцима через 10 сут в 11,5 раз; б) тенденцией увеличения к 10-м суткам суммарных иммуноглобулинов на 32,9%, альбуминов – 14,9% и α-глобулинов – 12,7%; в) снижением содержания в крови общего белка на 12,5%, γ-глобулинов – 22,9% и неизменным уровнем β-глобулинов; г) повышением белкового коэффициента на 20,6%. 5. При профилактике возникновения диспепсии путем обработки биоглобином коров-матерей, иммунобиохимические показатели крови новорожденных телят на 10-е сутки после рождения составили: а) телята от коров обработанных биоглобином, без диспепсии – увеличением иммуноглобулинов на 27,6% и γ-глобулинов на 10,2%; тенденцией снижения альбуминов на 3,1%, α-глобулинов – 11,2% и неизменным содержанием β-глобулинов; б) телята от коров обработанных биоглобином, с диспепсией - увеличением количества α-глобулинов на 10,8%, γ-глобулинов – 10,9%. Снижением уровня альбуминов на 5,9% (р < 0,05) и неизменным содержанием суммарных иммуноглобулинов и β-глобулинов; 20 6. При профилактике возникновения диспепсии, иммунобиохимические показатели крови коров-матерей после курса обработки биоглобином в предродовой период характеризовались: а) коровы обработанные биоглобином (телята без диспепсии) – тенденцией увеличения α-глобулинов на 15,8% и β-глобулинов на 16,3%, снижением количества иммуноглобулинов на 10,2%, альбуминов – 3,6% и γ-глобулинов – 7,8%; б) коровы обработанные биоглобином (телята с диспепсией) – тенденцией увеличения иммуноглобулинов на 10,2%, α-глобулинов – 27,4% и β-глобулинов – 29,5%, снижения альбуминов на 12,9% и γ-глобулинов – 6,8%; 7. Уровень ферментативной активности крови телят после лечения биоглобином к 10-м суткам обуславливался тенденцией снижения ЩФ на 24,9%, АсАТ – 17,7% и АлАТ в 2 раза, против увеличения уровня ЩФ в 10 раз, АсАТ – на 26,1% и АлАТ – 61,4% у интактных телят с диспепсией (контроль), и изменением ЩФ (снижение в 3,4 раза, р < 0,01) и АлАТ (снижение на 17,0%) у интактных здоровых телят (контроль). 8. Показатели углеводно-липидного обмена после лечения у телят с функциональной диспепсией, имели к 10-м суткам следующую направленность изменений: а) лечение биоглобином – тенденция увеличения содержания глюкозы на 36,5, а триацилглицеролов на 17,4%; б) лечение фармазином – неизменное содержание глюкозы (р < 0,05) и снижение триацилглицеролов на 26,9% (р < 0,05); 9. Общие гистоструктурные изменения в иммунокомпетентных органах телят после лечения биоглобином отражают его иммуномодулирующие свойства: лимфоузлы – хорошо развитая паракортикальная зона с малыми лимфоцитами, иммунобластами и макрофагами; тимус – наличие макрофагов и иммунодефицитное состояние начальной стадии; селезенка – активизация βзависимых зон белой пульпы и наличие пульпарных тяжей с бластными эле- 21 ментами и макрофагами в красной пульпе; печень – балочное расположение гепатоцитов и отсутствие ядер с признаками полиплоидии. 10. Применение биоглобина в дозе 10 мл/гол/сут подкожно в течение 10 суток с лечебной целью новорожденным телятам имеющим диспепсию функционального характера, способствовало выздоровлению 100% животных с среднесуточным приростом живой массы 485,8 г, что на 15,5% больше группы, где лечение проводили фармазином и на 33,9% больше прироста массы интактных больных телят. Профилактическая эффективность возникновения диспепсии путем применения биоглобина коровам-матерям в дозе 20 мл/гол/сут подкожно в течение 10 суток составила 74% здоровых телят при среднесуточном приросте живой массы за 10 суток после рождения – 424,4 г, что на 32,1% больше, чем у больных с функциональной диспепсией телят полученных от интактных коров. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ Бионормализатор из плаценты – биоглобин рекомендуется к применению: а) с лечебной целью новорожденным телятам при диспепсии функционального характера в дозе 10 мл (100 мг)/гол/сут подкожно в течение 10 суток самостоятельно или в комплексе с фармазином-50 в дозе 5 мл (250 мг)/гол/сут в/мышечно в течение 4-х суток; б) с профилактической целью путем введения коровам-матерям в дозе 20 мл/гол/сут подкожно в течение 10 суток перед родами. Список опубликованных работ по теме диссертации 1. Безбородов П.Н. Динамика кортизола и тироксина в крови новорожденных телят при диспепсии после введения биоглобина и фармазина-50 / П.Н. Безбородов с соавт. //Материалы международной научно-практической конференции МГАВМиБ. – Москва. – 1999. – С. 114. 2. Безбородов П.Н. Профилактика и лечение заболеваний новорожденных телят в системе акушерско-гинекологической диспансеризации / П.Н. Безбородов, Г.И. Горшков, Н.В. Безбородов //Методические рекомендации. БелГСХА. – Белгород. – 1999. – 29 с. 22 3. Безбородов П.Н. Способ лечения новорожденных телят при диспепсии / П.Н. Безбородов, Г.И. Горшков, Н.В. Безбородов, О.М. Жовнерчук //Патент РФ № 2150949. – 2000. 4. Безбородов П.Н. Гистологическая картина печени при лечении телят с диспепсией / П.Н. Безбородов, Н.А. Мусиенко, О.М. Жовнерчук, Н.В. Безбородов, Г.Г. Шитов //Тезисы докладов IV международной научно-производственной конференции. – БелГСХА. – Белгород. – 2000. – С. 114. 5. Безбородов П.Н. Применение бионормализаторов из плаценты в ветеринарной практике / П.Н. Безбородов, Г.Г. Шитов, Н.В. Безбородов //Материалы II международной науч.практ. конф. ВНИИЖ. – Дубровицы. – 2003. – С. 30-33. 6. Безбородов П.Н. Коррекция биоглобином защитно-приспособительной реакции у новорожденных телят с функциональной диспепсией / П.Н. Безбородов //Материалы ΧVI межд. межвуз. научно-практ. конф. – СПбГАВМ. – С.Петербург. – 2004. – С. 76. 7. Безбородов П.Н. Биохимический статус крови новорожденных телят после обработки коров-матерей препаратом биоглобин / П.Н. Безбородов //Материалы межд. науч. практ. конференции: «Роль и значение метода искусственного осеменения сельскохозяйственных животных ΧΧ и ΧΧI веков». – Дубровицы: ВНИИЖ. - 2004. – С. 223-225. 8. Безбородов П.Н. Гуморальные показатели естественной резистентности коров в родовой и послеродовой периоды после обработки биоглобином / П.Н. Безбородов, М.Ю. Пальчиков // «Роль и значение метода искусственного осеменения сельскохозяйственных животных в прогрессе животноводства ΧΧ и ΧΧI веков». – Дубровицы: ВНИИЖ. - 2004. – С. 245-247. 9. Безбородов П.Н. Биохимические показатели крови при активизации биоглобином защитно-приспособительных реакций в организме новорожденных телят / П.Н. Безбородов //Ученые записки КГАВМ им. Н.Э.Баумана. – Казань. – 2004. – С. 40-47. 10. Безбородов П.Н. Иммунобиологические основы и практические рекомендации по сохранности новорожденных телят при диспепсии / П.Н. Безбородов //Методические рекомендации. БелГСХА. – Белгород. – 2004. – 39 с. 11. БезбородовП.Н. Гистологические изменения в селезенке новорожденных телят, больных диспепсией после обработки биоглобином /П.Н.Безбородов, Н.А.Мусиенко //Материалы межд. научн.-практ. конференции. – БелГСХА. – Белгород. – 2004. – С. 49-50. 12. Безбородов П.Н. Оценка бионормализующего влияния биоглобина по микроскопическим изменениям в тимусе новорожденных телят /П.Н.Безбородов, Н.А.Мусиенко //Материалы межд. науч.-практ. конференции. – БелГСХА. – Белгород. – 2004. – С. 50-51. 23 13. Безбородов П.Н. Влияние биоглобина на гистоструктуру брызжеечных лимфоузлов у новорожденных телят с функциональной диспепсией /П.Н.Безбородов, Н.А.Мусиенко //Материалы межд. науч.-практ. конференции. – БелГСХА. – Белгород. – 2004. – С. 51-52. 14. Безбородов П.Н. Особенности проявления факторов естественной резистентности при лечении телят с функциональной формой диспепсии / П.Н. Безбородов //Материалы ΧVII межд. межвуз. научно-практ. конф. – СПбГАВМ. – С.Петербург. – 2005. – С. 8. 15. Безбородов П.Н. Гистоструктурные изменения в хорионе коров после обработок бионормализатором из плаценты /П.Н.Безбородов, В.В.Яглов //Материалы XVII межд. межвуз. научно-практ. конф. – СПбГАВМ. – С.Петербург. – 2005. – С. 54. 16. Безбородов П.Н. Способ предупреждения функциональной диспепсии и физиологического иммунодефицита у телят //Патент РФ № 2269351. – 2006.