Аденоассоциированные и аденоавтономные парвовирусы плотоядных сходства и различия Выполнила работу Студентка 11 гру 3 курса ФВМ Васева Екатерина 1 2 3 Трансплацентарный (естественный пассивный иммунитет) возникает в результате транспортировки факторов защиты (антитела, лимфоциты, цитокины и прочее) от матери к ребенку. Колостральный иммунитет - это иммунитет, формирующийся у новорожденного за счет молозивных иммуноглобулинов в течение первых 24-36 часов жизни. 4 Структура вириона делает все парвовирусы очень стабильными во внешней среде. Учитывая преимущественное выделение парвовирусов с фекалиями и мочой, а также некоторые этологические особенности плотоядных, основными путями инфицирования восприимчивых животных являются фекально-оральный и аэрозольный. Возможна передача через предметы ухода, корма, посредством человека и эктопаразитов. Широко распространены конгенитальное, пренатальное и раннее постнатальное инфицирование. 5 Быстрое и эффективное формирование гуморального иммунного ответа приводит к появлению антител против антигенов, экспрессированных на поверхности вирионов. Эти антитела опосредуют реакцию нейтрализации вируса in vivo, что способствует быстрому связыванию вируса в иммунных комплексах и выведению основной его части через выделительную систему. Антителозависимая клеточная цитокичность Комплекс антиген - антитело ЕК – естесвенные киллеры 6 Структура семейства Parvoviridae (согласно 8-му отчету Международного Комитета по Таксономии Вирусов) представлена ниже: Для семейства парвовирусов характерен широк 7 Капсидный белок capsid protein Геном – линейная оцДНК, на обоих ее концах есть самокомплементарные последовательности, формирующие шпилечные структуры. На конце 3’конце ДНК последовательность из 125 нуклеотидов образует двунитевую Т-образную шпильку – затравку для ДНК полимеразы Нуклеокапсид парвовирусов кубического типа симметрии 8 Схема репродукции парвовируса Цикл репродукции парвовирусов предусматривает: проникновение вируса в клетку и связывание с рецепторами клеток хозяина; превращение вирусного генома в дцДНК под действием клеточных ферментов; транскрипцию неструктурных регуляторных протеинов и повторяющиеся циклы репликации вирусной оцДНК; транскрипцию структурных протеинов под контролем неструктурных протеинов вируса; обособление вирусной геномной оцДНК; 9 Парвовирусы адсорбируются на клеточной мембране вследствие взаимодействия комплементарных рецепторов вируса и клеток и проникают в клетку посредством эндоцитоза. 10 Репликация транскрипция 11 Различия ПАРВОВИРУСЫ автономные парвовирусы Род Parvovirus, Род Erythrovirus, Род Densovirus, Род Iteravirus, род Brevidensovirus род Pefudensovirus аденоассоциированные/ зависимые/дефектные парвовирусы Род Dependovirus 12 АЛЕУТСКАЯ БОЛЕЗНЬ (вирусный плазмоцитоз) — контагиозная, медленно развивающаяся инфекционная болезнь, протекающая с явлениями геморрагического диатеза, анемией, кахексией на фоне плазмоклеточной пролиферации и Антигенная структура. Вирионы алеутской гипергаммаглобулинемией. семейство Parvoviridae род Parvovirus болезни содержат капсидные антигены. В организме инфицированных норок обнаружены неструктурные (невирионные) антигены. Капсидные и неструктурные антигены образуют так называемые инфекционные комплексы с иммуноглобулинами сыворотки крови. В состав таких комплексов входит и комплемент. Инфекционная активность вируса, входящего в такие комплексы, не нейтрализуется, поэтому он длительно циркулирует в организме больных животных. Антигенная вариабельность. Штаммы вируса алеутской болезни морок и хорьков в иммунобиологическом отношении неродственны. 13 Культивирование вируса. В лабораторных условиях вирус поддерживается на норках. норках. Из культур клеток для выращивания вируса использовали клетки клетки куриной почки, семенники норок, норок, почки кошки. Однако культуральный Патологоанатомические изменения. Они характеризуются генерализованным увеличением лимфоузлов, селезенки, печени, почек, кровоизлияниями в стенках желудка и кишечника. Характерны гистогические изменения во внутренних органах, проявляющиеся плазмоклеточной пролиферацией. 14 Взятие материала. От свежих трупов берут кусочки селезенки, печени, почек, лимфоузлов, лимфоузлов, головного мозга, которые транспортируют в лабораторию в термосе со льдом. льдом. От больных норок отправляют сыворотку сыворотку крови. Лабораторная диагностика. Она включает патоморфологические исследования и неспецифические методы диагностики (реакция йодной агглютинации, тимоловая проба, глютаральдегидный тест и т. д.), а также индикацию вирусных антигенов в РИФ, вирусного генома в ПЦР, вирусовыделение на норках и идентификацию выделенного вируса в РИФ, специфическую РИЭОФ и Иммунитет и серодиагностику специфическаяв РНИФ, профилактика. ИФА. Отечественных вакцин до сих пор нет. Разработана и применяется зарубежная инактивированная формолвакцина, которую вводят парентерально по 1—2 мл. Поствакцинальный иммунитет непродолжительный, но позволяет повысить резистентность животных. 15 ПАРВОВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ СОБАК (ПВИС, парвовирусный энтерит собак) — контагиозная болезнь, проявляющаяся рвотой, геморрагическим гастроэнтеритом, миокардитом, лейкопенией, дегидратацией и гибелью щенков моложе 5-месячного возраста. Поражения локализуются в тонком кишечнике и лимфоидных тканях. семейство Parvoviridae род Parvovirus 16 Антигенная вариабельность и родство. Возбудитель ПВИС по свойствам близок вирусу панлейкопении кошек и возможно является его мутантной формой. Между Между ними нет физико-химических различий, однако они отличаются по чувствительности к ним клеточных систем и по гемагглютинирующей активности. активности. Так, парвовирус собак размножается в культурах клеток собак и кошек, а и кошек, а парвовирус кошек (панлейкопении кошек) — только в культурах клеток клеток кошек. Изучением антигенного родства этих вирусов установлено наличие у них общих общих специфических антигенов. Различия в нуклеотидной последовательности их последовательности их ДНК составляют менее 1 %. Обнаружена разной степени антигенная общность всех парвовирусов — собак, кошек, собак, кошек, свиней, крыс, мышей, норок и человека. Из-за наличия такого родства такого родства для человека небезопасно заболевание животных парвовирусами. 17 Патологоанатомические изменения. Макроскопические изменения представлены геморрагическим воспалением слизистой тонкого и толстого кишечника. Внутренние органы геморрагичны. Гистологическими исследованиями выявляют некроз эпителия крипт и лимфоидной ткани в пейеровых бляшках, лимфоузлах, тимусе. В эпителиальных клетках и мышечных волокнах сердца нередко встречаются внутриядерные включения. У щенков 1—2месячного возраста наблюдают подострый фибринозный миокардит. Под электронным микроскопом в ядрах клеток сердечной мышцы выявляют парвовирус собак. 18 Лабораторная диагностика. В лабораторию направляют пробы фекалий, полученные от больных животных в первые дни болезни, и парные сыворотки крови; от погибших животных берут для исследования сердечные мышцы, тонкий кишечник (чаще тощую кишку), селезенку и головной мозг. Индикацию вируса в патологическом материале проводят экспресс-методами. Наиболее новый из них «парво-тест», изготовленный фирмой «НПО Нарвак» Второй экспресс-метод обнаружения парвовируса — ИФА. Основу ИФА составляет иммунологическая реакция взаимодействия антигена с моноклональными антителами в лунках полистиролового планшета. Вирусный геном обнаруживается также с помощью ПЦР, в РИГА с антительным диагностикумом и в РГА с формалинизированными эритроцитами свиньи. Выделение вируса возможно с использованием высокочувствительной перевиваемой культуры клеток А-72, полученной из подкожной опухоли собаки. Вирус в культуре клеток выявляют с помощью РИФ. Идентификация выделенного вируса осуществляется в РИФ, РТГА, РИГА, ИФА. Ретроспективная серологическая диагностика. Проводится чаще всего в РТГА с использованием выпускаемого для этой цели диагностического набора. Ретроспективная серологическая диагностика может быть также проведена с помощью РИГА, PH, ИФА, ВИЭФ (встречного иммуноэлектрофореза). Дифференциальная диагностика. ПВИС следует дифференцировать от алиментарного и 19 Иммунитет и специфическая профилактика. Иммунитет при ПВИС включает в себя как местный секреторный, так и гуморальный. Для заболевания характерен быстрый иммунный ответ с обнаружением антител к концу первой недели как в сыворотках крови, так и в фекалиях. Разработана и применяется в нашей стране инактивированная культуральная вакцина против парвовирусного энтерита собак. Щенков собак иммунизируют дважды с интервалом 14 дней с 60-дневного возраста. Ревакцинацию проводят в возрасте 7 мес, а собакам старше года — один раз в год. Применяют также ассоциированные лиофилизированные живые вакцины с содержанием аттенуированного штамма парвовируса собак (Мультикан-2, -4, -6, -8) и с содержанием инактивированного вируса (Мультикан-7). Щенят вакцинируют в возрасте 8—10 нед и через 21 день после первой вакцинации, а затем взрослых собак вакцинируют ежегодно. Для специфической профилактики ПВИС разработаны и успешно используются гетерологичные вакцины из вируса панлейкопении кошек как инактивированная, так и живая. Разработана субъединичная вакцина против ПВИС и синтетическая пептидная вакцина. 20 ПАНЛЕЙКОПЕНИЯ КОШЕК (ПЛК, парвовирусная инфекция кошачьих, агранулацитоз, чума кошек, кошачья лихорадка, инфекционный энтерит кошек, инфекционный ларинготрахеит кошек) — высококонтагиозная и обычно смертельно протекающая болезнь домашних кошек, клинически проявляющаяся панлейкопенией, лихорадкой, рвотой, сильной диареей и обезвоживанием организма. семейство Parvoviridae род Parvovirus 21 Антигенная структура. Не изучена. Антигенная активность. Проявляется индуцированием у кошек образования вируснейтрализующих антител и антигемагглютининов. Первые из них появляются на 3-й день день после клинического выздоровления и сохраняются несколько лет. Антигенная вариабельность. У вируса ПЛК она не установлена. В 1967 г. Джонсон и другие показали серологическую связь этого вируса с вирусами атаксии кошек и энтерита норок. норок. Гемагглютинирующая активность. У разных штаммов вируса она неодинакова. Специфическая гемагглютинация проявляется после 2 ч инкубации при 4 °С и использования 0,01 М фосфатного фосфатного буфера с pH 6,8. Культивирование вируса. Оно возможно в культуре клеток почки, селезенки, лимфоузлов и надпочечников котят. Вирус вызывает утончение и шероховатость клеточного монослоя, а также а также поражает клетки в состоянии активного митоза через 2—3 ч после клеточного деления. деления. Максимальное развитие цитопатических изменений наступает на 4—5-й день после после заражения клеточного монослоя. В клетках появляются внутриядерные эозинофильные эозинофильные включения. Титры культурального вируса равняются 100—10000 ТЦД50/0,1 мл. мл. Кроме того, вирус хорошо размножается в диплоидных клетках слизистой оболочки языка, языка, тимуса и почек кошек, львов, кошачьей фибросаркомы. Кошки и норки заболевают при различных способах заражения. У котят наблюдают типичную типичную диарейную форму панлейкопении. Животные погибают на 6—9-й день после заражения. 22 Патологоанатомические изменения. При вскрытии павших животных находят слизистогнойный экссудат на слизистой оболочке носа и глаз, острый энтерит, увеличение селезенки, набухание мезентеральных лимфоузлов и полужидкий апластический костный мозг. В костном мозге павших животных гистопатологические изменения проявляются гранулопоэзом. В клетках эпителия кишечника и в лимфоузлах обнаруживают внутриядерные эозинофильные включения. Ядерные включения в клетках линии почки кошек, инфицированных вирусом панлейкопении кошек; репликация этого ДНК-вируса происходит в ядре Ядерная иммунофлуоресценция клеток линии почки кошек, инфицированных вирусом панлейкопении кошек; отмечают отсутствие вирусного антигена в цитоплазме. Не 23 Диагностика. Для выделения вируса из трупов берут кусочки селезенки, мозга и двенадцатиперстной кишки в первые часы после смерти. Часто вирус выделяют от здоровых на вид котят или из фекалий больных животных. Лабораторная диагностика. Обнаруживают вирус с помощью ПЦР. Метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Экспресс-методом диагностики панлейкопении кошек является «парво-тест», изготовленный фирмой «НПО Нарвак». Обнаружить антиген панлейкопении кошек в фекалиях больных животных можно иммуноферментным анализом с использованием моноклональных и поликлональных антител. Время проведения анализа 2,5—3 ч. Выделение осуществляютпрофилактика. в культуре клеток. Иммунитет вируса и специфическая Переболевшие Идентифицируют его с помощью названых для обнаружения вируса, или в PH, животные приобретают стойкийметодов, иммунитет. Материнские РТГА. антитела могут некоторое время защищать котят от Ретроспективная диагностика. Диагностику титрам антител в парных сыворотках не заболевания. Если в этот период котята по контактируют с проводят, исследования не актуальными. вирусом, считая у нихэти может развиваться субклиническая иммунизирующая инфекция. Активную иммунизацию кошек проводят живым аттенуиронанным или инактивированным вирусом. В нашей стране выпускается ассоциированная инактивированная вакцина Мульнтифел-4, изготовленная из штаммов возбудителей наиболее опасных инфекционных болезней кошек. Вакцину вводят подкожно в области 24
