1. TTAGGTGTTTGATCGGGAATGGTGGGGATTGGTTTAAGAATGTTAATTCGAATTGAGTTAGGTCGTCCTGGA 2. AGATTTTTAGGGGACGATCAGTTATACAACGTCATTGTTACGGCCCATGCTTTAGTTATAATTTTCTTTATG 3. GTTATGCCTTTAATGGTCGGGGGTTTTGGGAATTGGCTTCTTCCATTAATAATAGGTTCTGTAGATATAATT 4. TTTCCGCGACTTAACAATTTGAGATTTTGGTTTCTCCCCTCTTCATTATTTATACTGTTGAGGTCTACTTTT 5. ATTGAAAGCGGGTCCGGTACTGGATGGACTTTATATCCCCCTTTGTCTTCATATACAGGACATAGTGGCCCA 6. GCTGTTGACATATCTTTATTTTCTTTACATTTGGCAGGTGCTTCTTCTATTGGTGGATCTATTAACTTTTTA 7. ACTAGTATAAAAAATATGCCGGTGGAGGTAATGCGAGGAGAGCGGATAATGTTGTTCTTGTGGTCTATGGTG 8. GTAACAGCTGTTCTTTTATTGGTTTCTTTGCCTGTGCTGGCTGGCGGTATTACTATGTTGATTTTTGATCGT Как выделить ДНК? Что такое ДНК? • Одна из основных биологических молекул • Несёт в себе всю наследственную информацию (почти) Инструкция по сборке Зачем выделять ДНК? Зачем выделять ДНК? • Отсеквенировать геном человека и узнать его предрасположенность к заболеваниям; • Сделать тест на вирусные заболевания (но не на все); • Отсеквенировать метагеном бактерий человека и узнать к какой пище он лучше приспособлен; • Отсеквенировать всё, что можно, в научных целях. Откуда можно выделить ДНК? Для каких анализов используются нестандартные материалы: • для теста на отцовство и родство; • для теста на измену, также смотрите анализ; биологического пятна • для идентификации принадлежат ли образцы (например, спермы, крови) определенному человеку. Для этого понадобится контрольный образец человека, с которым сравнивать (мазки). Секвенирование ДНК Секвенирование биополимеров (белков и нуклеиновых кислот — ДНК и РНК) — определение их аминокислотной или нуклеотидной последовательности (от лат. sequentum — последовательность). В результате секвенирования получают формальное описание первичной структуры линейной макромолекулы в виде последовательности мономеров в текстовом виде. Размеры секвенируемых участков ДНК обычно не превышают 100 пар нуклеотидов (next-generation sequencing) и 1000 пар нуклеотидов при секвенировании по Сенгеру. Последовательность мономеров в текстовом виде TTAGGTGTTTGATCGGGAATGGTGGGGATTGGTTTAAGAATGTTAATTCGAATTGAGTTAGGTCGTCCTGGA AGATTTTTAGGGGACGATCAGTTATACAACGTCATTGTTACGGCCCATGCTTTAGTTATAATTTTCTTTATG GTTATGCCTTTAATGGTCGGGGGTTTTGGGAATTGGCTTCTTCCATTAATAATAGGTTCTGTAGATATAATT TTTCCGCGACTTAACAATTTGAGATTTTGGTTTCTCCCCTCTTCATTATTTATACTGTTGAGGTCTACTTTT ATTGAAAGCGGGTCCGGTACTGGATGGACTTTATATCCCCCTTTGTCTTCATATACAGGACATAGTGGCCCA GCTGTTGACATATCTTTATTTTCTTTACATTTGGCAGGTGCTTCTTCTATTGGTGGATCTATTAACTTTTTA ACTAGTATAAAAAATATGCCGGTGGAGGTAATGCGAGGAGAGCGGATAATGTTGTTCTTGTGGTCTATGGTG GTAACAGCTGTTCTTTTATTGGTTTCTTTGCCTGTGCTGGCTGGCGGTATTACTATGTTGATTTTTGATCGT CATT Секвенирование ДНК в лаборатории • Разрушают мембраны клеток и клеточных ядер; • Разрушают белки; • Отделяют ДНК от примеси с помощью центрифугирования; • Промывают ДНК спиртом; • При необходимости смешивают с буфером для хранения и хранят при температуре - 20°. Амплификация (лат. amplificatio — усиление, увеличение), в молекулярной биологии — процесс образования дополнительных копий участков хромосомной ДНК, как правило, содержащих определённые гены либо сегменты структурного гетерохроматина.
