РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ «УТВЕРЖДАЮ»: Проректор по учебной работе _________________________/Л.М. Волосникова/ «_____» _____________ 2011 г. ФИЗИОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ (ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ) Учебно-методическое пособие для студентов 3 курса, обучающихся по направлению подготовки 020400.62 специальность Биология форма обучения – очная Авторы работы ________________________________________________ / Н.В. Турбасова, А.Б. Загайнова / «26» августа 2011 г. Рассмотрено на заседании кафедры анатомии и физиологии человека и животных протокол № 1 от 29 августа 2011 г. Соответствует требованиям к содержанию, структуре и оформлению «РЕКОМЕНДОВАНО К ЭЛЕКТРОННОМУ ИЗДАНИЮ»: Объем 59 стр. Зав. кафедрой ________________/В.С. Соловьев/ «29» августа 2011 г. Рассмотрено на заседании УМК института математики, естественных наук и информационных технологий департамента биологии протокол № 1 от 24 сентября 2011 г. Соответствует ГОС ВПО и учебному плану образовательной программы. «СОГЛАСОВАНО»: Председатель УМК ______________________/О.В. Фролова/ «24» сентября 2011 г. «СОГЛАСОВАНО»: Зав. методическим отделом УМУ_____________/С.А. Федорова/ «______»_____________2011 г. РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования ТЮМЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ Институт математики, естественных наук и информационных технологий Департамент биологии кафедра анатомии и физиологии человека и животных Н.В. Турбасова, А.Б. Загайнова ФИЗИОЛОГИЯ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ (ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ) Учебно-методическое пособие для студентов 3 курса, обучающихся по направлению подготовки 020400.62 специальность Биология форма обучения - очная Тюменский государственный университет 2011 Турбасова Н.В., Загайнова А.Б. Физиология человека и животных (Физиология системы крови). Учебно-методическое пособие для студентов 3 курса, обучающихся по направлению подготовки 020400.62 специальность Биология; форма обучения – очная. Тюмень, 2011, 59 стр. Учебно-методическое пособие составлено в соответствии с требованиями Государственного образовательного стандарта высшего профессионального образования для студентов, обучающихся по специальности «Биология». Настоящие методические указания разработаны в соответствии с программой преподавания курса физиология человека и животных в департаменте биологии университета и предусматривают овладение основными практическими навыками по исследованию системы крови человека. Контрольные вопросы способствуют закреплению знаний и повышают эффективность самостоятельной работы студентов. Учебно-методическое пособие опубликовано на сайте ТюмГУ: Физиология человека и животных (Физиология системы крови). [электронный ресурс] / Режим доступа http://www.umk.utmn.ru. свободный. Рекомендовано к изданию кафедрой анатомии и физиологии человека и животных. Утверждено проректором по учебной работе Тюменского государственного университета. ОТВЕТСТВЕННЫЙ РЕДАКТОР: Соловьев Владимир Сергеевич, д.м.н., профессор, заведующий кафедрой анатомии и физиологии человека и животных © Тюменский государственный университет, 2011 © Турбасова Н.В., 2011 © Загайнова А.Б., 2011 ВВЕДЕНИЕ Учение о крови и ее регуляции, свойствах ее составных частей и их физиологическом назначении в норме и при патологии называется гематологией. Представление о крови, как системе создал наш соотечественник Г.Ф. .Ланг (1939 г.) В эту систему он включил 4 части: 1) периферическую кровь, циркулирующую по сосудам; 2) органы кроветворения (красный костный мозг, лимфатические узлы, тимус); 3) органы кроверазрушения (селезенку, печень); 4) регулирующий нейрогуморальный аппарат. Кровь и лимфа составляют внутреннюю среду организма и выполняют многообразные и жизненноважные физиологические функции. Прежде всего, кровь осуществляет обмен веществ между клетками организма и внешней средой, выполняя метаболическую функцию. Кровь доставляет к органам и тканям необходимые для их жизнедеятельности питательные вещества (белки, жиры и углеводы) и уносит к органам выделения продукты распада, которые непрерывно образуются в процессе функционирования органов. Содержащийся в эритроцитах дыхательный пигмент гемоглобин выполняет функцию переноса кислорода от легких к тканям и органам. Углекислота, образующаяся в клетках в процессе их жизнедеятельности, связывается жидкой частью крови - плазмой - и выводится в выдыхаемый воздух. В этом заключается дыхательная функция крови. Кровь, как и нервная система, связывает весьма удаленные друг от друга органы. Наряду с нервной регуляцией их деятельности имеет место и гуморальная, которая осуществляется с помощью системы крови. Последняя, в свою очередь, регулируется нервной системой. Гормоны, выделяемые железами внутренней секреции, попадают в кровь и разносятся ею по всему организму, вызывая изменение различных функций внутренних органов. В этом состоит регулирующая функция крови. Одним из условий нормальной деятельности организма является постоянство внутренней среды. Обладая способностью сохранять относительное постоянство своего состава и свойства (объем, кислотность, осмотическое давление, температура, количество форменных элементов и пр.), кровь выполняет функцию стабилизации внутренней среды -гомеостаза. Кровь принимает участие в процессах регуляции температуры организма. Наконец, одной из важных функций крови является защитная. Кровь обладает свойствами, которые ведут как к нейтрализации, так и к ликвидации возбудителей заболевания, попавших в организм. Это свойство лежит в основе учения об иммунитете. Защитная функция проявляется также в способности некоторых лейкоцитов к фагоцитозу - захвату и перевариванию посторонних частиц (например, бактерий) и остатков разрушенных клеток. Кровь, как саморегулирующаяся система, обладает специфическим свойством, препятствующим ее вытеканию из кровяного русла, - свертыванием. Лабораторная работа № 1 Определение содержания эритроцитов в периферической крови (пробирочный метод) Принцип метода. Подсчет эритроцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Реактивы, оборудование. 0,9% раствор хлорида натрия, счетная камера Горяева, микроскоп. Подсчет эритроцитов производится при помощи счетных камер. В клинике чаще всего применяется счетная камера Горяева (рис. 1), которая имеет вид толстого предметного стекла, на верхней поверхности которого сделаны три поперечные плоскости, разделенные между собой углублениями. Средняя плоскость ниже обоих крайних на 0,1 мм. Камера Горяева имеет на средней плоскости поперечный желобок. По обе стороны желобка находятся квадратные сетки. Сетка камеры Горяева состоит из 225 больших квадратов, часть которых разделена на маленькие квадраты. Больших квадратов, разделенных на маленькие, в сетке 25. В большом квадрате имеется 16 маленьких квадратов. Сторона маленького квадрата равна 1/20 мм, площадь -1/400 мм, высота камеры (расстояние от сетки до покровного стекла) -1/10 мм, объем пространства над этим квадратом - 1/4000 мм . Прежде чем приступить к подсчету эритроцитов, необходимо рассмотреть счетную камеру под микроскопом при малом и большом увеличении. Кровь для подсчета разводится 0,9% раствором хлористого натрия в 200 раз. а Рис. 1. Счетная камера Горяева: а – вид сверху, б – вид сбоку, в – сетка Горяева. Ход работы: 1. В сухую чистую пробирку при помощи пипетки наливают 4 мл раствора 0,9% хлорида натрия. Промывают капилляр для забора крови в растворе цитрата натрия. 2. В боковую поверхность (так как там капиллярная сеть гуще) подушечки концевой фаланги среднего или безымянного пальца левой руки, предварительно обработанную спиртом, стерильным скарификатором сделать укол на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Левую руку поместить на стол (держать на весу не рекомендуется). Первую каплю крови убирают сухим ватным тампоном, так как в ней может быть примесь тканевой жидкости и лимфы. Следующие капли крови должны выступать сами без надавливания. 3. Получив крупную не растекающуюся каплю, правой рукой осторожно поднести к ней капилляр (промытый цитратом натрия), набирают кровь до метки 0,02 мл. Содержимое капилляра вносят в пробирку с растворов 0,9% хлорида натрия и осторожно перемешивают. Кровь в этом случае будет разбавлена в 200 раз. 4. Камеру покрывают покровным стеклом, хорошо его притирают, до образования Ньютоновых колец, (радужные полоски), ибо только при этих условиях будут соблюдены необходимые высота (0,1 мм) и, тем самым, объем камеры. Каплю разведенной крови при помощи капилляра или стёклянной палочки наносят на среднюю площадку счетной камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля сама втягивается под покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, насухо вытереть марлей и заполнить снова. После заполнения камеру оставляют на 1 мин в покое для оседания форменных элементов. Заполненную камеру помещают под микроскоп и, если форменные элементы расположены равномерно (что является показателем хорошего перемешивания крови), приступают к подсчету. Считать эритроциты лучше при малом увеличении микроскопа (объектив х 8, окуляр х 10 или х 15). Подсчет следует производить при затемненном поле зрения (прикрытой диафрагме или несколько опущенном конденсоре). 5. Для получения удовлетворительных результатов подсчитывают эритроциты в 80 малых квадратах, что соответствует 5 большим квадратам счетной сетки, расположенных по диагонали. Во избежание двукратного подсчета эритроцитов, лежащих на границах между малыми квадратами, следует считать относящимися к данному квадрату только те эритроциты, которые находятся на левой и верхней его границах или соответственно на правой и нижней границах квадрата (рис. 2). 6. Подсчитав количество эритроцитов в 80 малых квадратах счетной сетки, рассчитывают среднее содержание эритроцитов в 1 мкл крови. Расчет производят, исходя из разведения крови (200), числа сосчитанных квадратов (80) и объема одного малого квадрата (1/4000 мкл), по следующей формуле: Х = а × 4000 × 200 80 где X - число эритроцитов в 1 мкл крови, а - число сосчитанных эритроцитов в 80 малых квадратах. При подсчете 80 малых квадратов и при разведении крови в 200 раз можно практически не пользоваться каждый раз приведенной формулой, а просто к подсчитанному количеству эритроцитов прибавить четыре нуля, т.е. умножить на 10 000. Результаты работы и их оформление. Запишите, сколько эритроцитов содержится в 1 мкл исследованной крови. Сравните полученные данные с нормой. Сделайте выводы. Рис. 2. Общий вид эритроцитов в счетной камере Горяева под микроскопом. Лабораторная работа № 2 Определение количества гемоглобина в крови колориметрическим методом (по Сали) Дыхательным пигментом многих животных является гемоглобин (Hb), который содержится у теплокровных позвоночных в красных кровяных тельцах, составляя до 90% сухого веса последних. Важнейшая физиологическая роль гемоглобина - перенос кислорода. Гемоглобин относится к группе сложных белков, его молекула состоит из белковой части (глобин) и небелковой части - простатической группы (гем). Молекула гемоглобина включает четыре полипептидные цепи, с каждой из них нековалентно связана особая пигментная группа - гем. Молекула гема содержит один атом Fe2+ . Структура гема у всех животных практически одинакова. Особенности гемоглобина животных разных видов определяются структурой глобина. Гемоглобин теплокровных имеет молекулярную массу 64 000 - 68 000, через оболочку эритроцитов не проникает. В скелетных мышцах и миокарде содержится мышечный гемоглобин (миоглобин), он связывает до 14% общего кислорода в организме. Это его свойство играет важную роль в снабжении работающих мышц кислородом. В норме гемоглобин содержится в виде трех физиологических соединений: 1.Оксигемоглобин (НbО2) - это соединение по цвету отличается от Нb (оксигемоглобин имеет ярко-красную окраску), поэтому артериальная кровь ярко-алого цвета. 2. Восстановленный - дезоксигемоглобин, отдавший кислород (О2) или нормальный Нb. Он имеет более темный цвет (темно-красный) и находится в венозной крови. 3. Карбгемоглобин (НbСО2) - соединение гемоглобина с углекислым газом (СО2) - находится в венозной крови. Транспортирует углекислый газ из тканей к легким. Гемоглобин может образовывать и патологические соединения: 1. Карбоксигемоглобин (НbСО) - соединение гемоглобина с угарным газом (СО). Он не способен присоединять кислород, что опасно для жизни. 0,1% в воздухе СО ведет к превращению 80% гемоглобина в карбоксигемоглобин. Слабое отравление СО - обратимый процесс. 2. Метгемоглобин (MetHb) - является окисленным соединением гемоглобина, в котором под влиянием сильных окислителей (КМпО4, анилин, бертолетовая соль, фенацитин и т.д.) железо гемма из двухвалентного превращается в трехвалентное. При накоплении в крови больших количеств метгемоглобина транспорт О2 к тканям нарушается и может наступить смерть. Принцип метода. При смешивании крови с соляной кислотой гемоглобин превращается в солянокислый гематин. При этом красноватый цвет жидкости переходит в коричневый (бурый). Раствор постепенно разводят водой до цвета стандарта, соответствующего известной концентрации гемоглобина (16,67 г%). Реактивы и оборудование. Гемометр Сали (рис. 3), 0,1 н HCl, дистиллированная вода, спирт, вата, капилляр для взятия крови, тонкая стеклянная палочка, пипетка для дистиллированной воды. Ход работы: Гемометр Сали состоит из двух запаянных боковых пробирок (рис. 3, а), наполненных стандартным раствором солянокислого гематина (Нb + HCI) (в 100 г раствора содержится 16,67 г гемоглобина). Средняя пробирка прокалибрована. На ней нанесены две шкалы (рис. 3, б). Одна шкала показывает количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови, т.е. грамм-проценты гемоглобина (г%); вторая шкала показывает так называемые единицы гемометра, или содержание гемоглобина в процентах по отношению к норме. Цифра 100 на градуированной пробирке гемометра соответствует 16,67 г гемоглобина в 100 мл цельной крови и условно принимается за 100% гемоглобина в крови человека. В градуированную пробирку наливают раствор децинормальной соляной кислоты до нижней контрольной круговой метки. Затем в пробирку с помощью капилляра вносят 0,02 мл крови (осторожно, не вызывая образования пены), полученной из мякоти пальца руки. Смесь крови с соляной кислотой тщательно перемешивают посредством легких ударов по нижнему концу пробирки. Красный цвет гемолизированной крови в результате образования солянокислого гематина переходит в коричневый. Наблюдают за изменением цвета крови в течение 5 минут (это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин). По истечению этого времени жидкость осторожно разбавляют дистиллированной водой (осторожно по каплям) до тех пор, пока интенсивность ее окраски не совпадет с интенсивностью окраски стандартного раствора. Цифра, стоящая на уровне полученного раствора, показывает количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови, т.е. концентрацию гемоглобина в грамм-процентах (г%). Конечный результат выражается в г/л для чего полученную величину умножают на 10. Примерные параметры: Нb в крови у новорожденного - 13,6 -19,6%; у трехмесячного - 9,5 -12,5%; у ребенка в возрасте 1 года -11,0 -13,0%; у ребенка в возрасте 10 лет -11,5 -14,8%; у взрослого мужчины -13,5 -18,0%; у взрослой женщины -11,5 -16,4%; у пожилых мужчин (65-85 лет) среднее -1 3,63%; у пожилых женщин (65-85 лет) среднее -13,11%. Результаты работы и их оформление. Запишите, каково содержание гемоглобина в исследуемой, крови. Сравните полученную цифру с нормой. Рис. 3. Гемометр Сали и капилляр (пояснение в тексте) Лабораторная работа № 3 Расчет цветного показателя крови и среднего содержания гемоглобина в одном эритроците (ССГЭ) При некоторых соотношение между заболеваниях крови человека содержанием гемоглобина и нарушается количеством эритроцитов, насыщенность эритроцитов гемоглобином изменяется. Для того чтобы судить, нормально ли насыщен гемоглобином каждый эритроцит, используют условную величину - цветной показатель крови. Абсолютное содержание гемоглобина в одном эритроците отражает показатель ССГЭ. Цветной показатель и ССГЭ вычисляют по следующим формулам: Цвпок = содержание гемоглобина в грамм / литр или 2 х две первые цифры числа эритроцитов Цвпок = 3 х содержание гемоглобина в грамм-процентах ; две первые цифры числа эритроцитов ССГЭ = содержание гемоглобина в грамм-процентах х 10 (пг); число эритроцитов в миллионах (в 1 мкл) Для расчета величины цветного показателя крови и ССГЭ необходимо использовать цифры, полученные в предшествующих работах: процентное содержание гемоглобина в крови и количество эритроцитов в 1 мкл крови. Для экономии времени удобно пользоваться номограммой Ф.Ф. Диковского (рис. 4), позволяющей просто и быстро вычислить среднее coдержание гемоглобина в эритроците и цветной показатель. В этой номограмме на левой шкале (Э) нанесены количества эритроцитов, на средней (Г) - количества гемоглобина в грамм-процентах, а на правой среднее содержание гемоглобина в одном эритроците в пикограммах (СГЭ) и значения цветового показателя (ЦПК). Ход работы; Для отсчетов прозрачную линейку с нанесенной посередине продольной чертой накладывают на номограмму так, чтобы черта ее совместилась с заданными значениями на шкалах Э и Г. Тогда точка пересечения черты линейки с осью шкалы СГЭ даст искомый результат, отсчитываемый по штрихам нанесенным справа от оси шкалы, а по штрихам, нанесенным слева, определяют цветовой показатель. Рис. 4. Номограмма для вычисления содержания гемоглобина в эритроцитах. Примечание: Э – количество эритроцитов в 1 мкл крови; Г – содержание гемоглобина в грамм-процентах; ЦПК – цветовой показатель; СГЭ – среднее содержание гемоглобина в одном эритроците в пикограммах. Номограмма позволяет производить вычисления и в тех случаях, когда полученные количества эритроцитов выходят за пределы градуировки шкалы Э. Пример: при острой гемолитической анемии оказалось эритроцитов 600 000, гемоглобина 2 г%. На шкале значения 0,6 млн нет. В этом случае цифру 0,6 нужно умножить на какую-нибудь цифру, но так, чтобы в результате получить цифру, имеющуюся на шкале, например на 2. Тогда число эритроцитов будет 1,2 млн. Одновременно нужно умножить на ту же цифру и количество гемоглобина (2x2 = 4 г%). Теперь, применяя изложенную выше методику вычисления, получим по номограмме, что содержание гемоглобина в одном эритроците равно 33,3 пг, а цветовой показатель равен 1,0. В тех случаях, когда количество эритроцитов превышает 8 000 000, нужно число эритроцитов и содержание гемоглобина делить на одно и то же число. Результаты работы и их оформление. Дайте оценку цветового показателя и ССГЭ по сравнению с нормой. Сравните цветовой показатель и ССГЭ, которые были рассчитаны по формулам, с цветовым показателем и ССГЭ, вычисленными по номограмме. Лабораторная работа № 4 Определение общего объема эритроцитов (гематокрита) Гематокритная величина, или показатель гематокрита, дает представление о соотношении между объемами плазмы и форменных элементов крови (главным образом эритроцитов), полученном после центрифугирования крови. Гематокритной величиной принято выражать объем эритроцитов в % по отношению к объему плазмы в %. Принцип метода. Центрифугирование крови определенное время при постоянном числе оборотов центрифуги (8 000 об/мин) с последующим определением результата по специальной шкале. Реактивы и оборудование. Антикоагулянт: гепарин - 5 000 Ед/мл разводят дистиллированной водой в соотношении 1:5, микроцентрифуга МЦГ - 8, капиллярные трубки (в комплекте с центрифугой). Можно использовать капилляры для определения С реактивного белка. Ход работы: Предварительно обработанный антикоагулянтом и высушенный капилляр заполняют кровью из пальца на 7/8 длины. Укупоривают капилляр с одного конца специальной пастой (можно пластилином). Помещают в ротор центрифуги так, чтобы укупоренные концы упирались в резиновую прокладку, и центрифугируют 5 мин при 8 000 об/мин. По отсчетной шкале, приложенной к центрифуге МЦГ - 8, определяют гематокритную величину. Результаты работы и их оформление. Результаты необходимо выразить процентным соотношением плазмы и форменных элементов. В выводе следует сравнить полученные данные с нормальным соотношением объемов плазмы и форменных элементов (55% : 45%). Примерные нормативы: Гематокрит у новорожденного - 44 - 62%; у трехмесячного - 32-44%; у ребенка в возрасте 1 года - 36 - 44%; у ребенка в возрасте 10 лет - 37 - 44%; у взрослого мужчины - 40 - 54%; у взрослой женщины - 36 - 47%. Лабораторная работа № 5 Определение содержания лейкоцитов в периферической крови (пробирочный метод) Лейкоциты - клетки крови, отличающиеся характерной структурой, сложным внутриклеточным метаболизмом и наличием ядра. Лейкоциты - высокоспециализированные клетки, обладающие различными защитными функциями. Благодаря фагоцитарной активности, участию в клеточном и гуморальном иммунитете, обмене гистамина, гепарина, реализуются антимикробные, антитоксические, антителообразующие и другие важнейшие компоненты иммунологических реакций. Лейкоциты делят на две большие группы: 1. Гранулоциты (содержат в цитоплазме специфическую зернистость). 2. Агранулоциты (в их цитоплазме нет зернистости или количество ее незначительно). К гранулоцитам относятся: нейтрофильные, базофильные, эозинофилные лейкоциты. К агранулоцитам - моноциты и лимфоциты. Количество различных лейкоцитов внешних в крови факторов: меняется под сезонных, влиянием климатических, метеорологических, периодов солнечной активности, а также при разных физиологических состояниях организма (возрастные изменения, беременность, фазы менструального цикла и пр.) и разнообразной патологии. Существуют следующие виды перераспределительных физиологических лейкоцитозов: 1. Пищеварительный - возникает после еды. 2. Миогенный - после физической нагрузки. 3. Эмоциональный. 4. При болевых воздействиях. Реактивные или истинные лейкоцитозы развиваются при воспалительных процессах и инфекционных заболеваниях. Эти виды лейкоцитозов обусловлены усилением продукции лейкоцитов органами кроветворения. Принцип метода. Подсчет лейкоцитов под микроскопом в определенном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Реактивы и оборудование. 3-5% уксусная кислота, подкрашенная метиленовой синью (для окраски ядер лейкоцитов), микроскоп, камера Горяева. Ход работы: Разводят исследуемую кровь в 20 раз, для этого в сухую пробирку наливают 0,4 мл 3-5% уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью (уксусная кислота разрушает эритроциты, ядра лейкоцитов окрашиваются метиленовой синью). Набирают из пальца капилляром 0,02 мл крови (методика забора крови см. лабораторную работу № 1). Затем выдувают кровь из капилляра на дно пробирки, тщательно перемешивают повторно набирая и выдувая смесь крови с уксусной кислотой). Подготавливают счетную камеру Горяева к работе (см. лабораторную работу № 1) и заполняют ее разведенной кровью, предварительно встряхивают содержимое пробирки. Каплю разведенной крови при помощи капилляра или стеклянной палочки наносят на среднюю площадку счетной камеры у края покровного стекла. Капиллярными силами капля втягивается под покровное стекло и заполняет камеру. Излишек раствора крови стекает в желобок. Если на сетку попал воздух или на боковых площадках оказался излишек раствора, камеру следует промыть дистиллированной водой, просушить на воздухе и заполнить снова. После заполнения камеру оставляют на 1 мин в покое для оседания форменных элементов. Заполненную камеру помещают под микроскоп и приступают к подсчету. Считать лейкоциты лучше при малом увеличении микроскопа (объектив х 8, окуляр х 10 или х 15). Подсчет следует производить при затемненном поле зрения (прикрытой диафрагме или несколько опущенном конденсоре). Для получения удовлетворительных результатов подсчитывают лейкоциты в 25 больших квадратах, что соответствует 400 малым квадратам счетной сетки. Во избежание двукратного подсчета лейкоцитов, лежащих на границе между малыми квадратами, следует считать относящимися к данному квадрату только те лейкоциты, которые находятся на левой и верхней его границах или соответственно на правой и, нижней границах квадрата. Подсчитав количество лейкоцитов в 25 больших квадратах счетной сетки, рассчитывают среднее содержание эритроцитов в 1 мкл крови. Расчет производят, исходя из разведения крови (20), числа сосчитанных квадратов (25) и объема одного большого квадрата (1/250 мкл), по следующей формуле: Х = а х 250 х 20 100 где X - число лейкоцитов в 1 мкл крови, а - число сосчитанных эритроцитов в 25 больших квадратах. Практически количество сосчитанных лейкоцитов умножают на 50. Результаты работы и их оформление. Запишите, сколько лейкоцитов содержится в 1 мкл исследованной крови. Сравните полученные данные с нормой. Сделайте выводы. Лабораторная работа № 6 Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ) Если свежевыпущенную и предохраненную от свертывания кровь оставить в сосуде на некоторое время, то уже через несколько минут можно заметить образование наверху полоски прозрачной жидкости. Это происходит благодаря оседанию эритроцитов, в результате чего кровь разделяется на две фракции: плазму и форменные элементы крови. Оседание эритроцитов происходит потому, что их удельный вес больше, чем удельный вес плазмы. Кроме того, при оседании эритроцитов наблюдается их объединение в монетные столбики, а затем и в более крупные агрегаты. Скорость оседания эритроцитов зависит от соотношения белкового состава глобулинов плазмы, и главным альбуминов образом (в от норме альбуминоглобулиновый коэффициент А/Г = 1,5-2,3). Незначительное изменение этого соотношения вызывает уменьшение или увеличение скорости оседания эритроцитов. Увеличения количества глобулинов ускоряет оседание эритроцитов, что часто наблюдается при различных патологических процессах. Увеличение количества альбуминовой фракции способствует нарастанию устойчивости эритроцитов ибо альбумины несут достаточно высокий заряд отрицательной полярности и в норме не разряжают эритроцитов, Эритроциты заряжены отрицательно, и поэтому они отталкиваясь друг от друга не склеиваются, Однако при адсорбции различного вида частиц на поверхности эритроцитов, например, белка, клетки теряют свой заряд, что делает возможным их склеивание с другими эритроцитами. Эритроциты оседают в плазме крови, физико-химические свойства которой играют при этом огромную роль в динамике оседания. Вязкость плазмы, ее коллоидно-белковый и ионный состав, взаимодействуя с оседающими эритроцитами, обуславливают сам процесс оседания. Изменяя искусственно белковый или ионный состав плазмы, уменьшая или увеличивая ее вязкость, можно легко получить различные значения скорости оседания, в полном и точном расчетном соответствии с химическим составом и физическим состоянием плазмы. У здорового человека адсорбция незначительна и скорость оседания эритроцитов мала: за 1 час они оседают на 2-10 мм у женщин и 2-12 мм у мужчин. При патологических состояниях, а также при беременности, СОЭ резко увеличивается. Принцип метода. При стоянии стабилизированной крови эритроциты оседают с различной скоростью в зависимости от изменения химических и физических свойств крови. Скорость оседания выражается в миллиметрах за 1 час. Реактивы и оборудование. Аппарат Панченкова, скарификатор, часовое стекло, 5% раствор цитрата натрия, вата, часы. Ход работы: Для определения СОЭ пользуются прибором Панченкова, который состоит из нескольких стеклянных, специально проградуированных капилляров, помещенных в штатив. Капилляры закрепляются в строго вертикальном положении между пружиной с резиновой прокладкой и верхней упорной планкой. Капилляры градуированы в миллиметрах. Метка 0 стоит на расстоянии 100 мм от нижнего конца. На капилляре есть еще две метки: «К» (кровь) и «Р» (реактив) - на уровне 50 мм. Капилляр Панченкова хорошо прополощите 5% раствором цитрата натрия, наберите этот раствор до метки Р и выдуйте на часовое стекло. В этот же капилляр до метки К наберите кровь. По мере того как кровь будет подниматься в капилляр, менять его положение до горизонтального и несколько ниже. Следить за тем, чтобы в капилляр не попали пузырьки воздуха. Выдуйте кровь на часовое стекло с цитратом натрия, перемешайте смесь, набирая и выдувая ее. Повторите это несколько раз а затем наберите смесь точно до метки К. Для набирания смеси держите капилляр почти горизонтально, а кончик его приставьте к смеси, находящейся, на часовом стекле. Капилляр перевести в вертикальное положение, предварительно зажав верхнее отверстие указательным пальцем, упереть узкий конец капилляра в резиновую прокладку прибора Панченкова и закрепить капилляр между прокладкой и верхней перекладиной в строго вертикальном положении. Через 1 час определить скорость оседания эритроцитов, измерив высоту верхнего жидкого слоя плазмы. Индекс оседания эритроцитов отмечают при фракционном исследовании за 2 часа. Он представляет собой отношение величины оседания эритроцитов за первые 30 минут исследования к величине за последующие 1,5 часа. Величина индекса прямо пропорциональна величине СОЭ. При осложнениях или неполном разрешении воспалительного процесса индекс остается высоким. Результаты работы и их оформление. Напишите, чему равна СОЭ в мм за 1 час. Сравните полученные результаты с нормой. Сделайте вывод. Лабораторная работа № 7 Определение группы крови Видовые различия крови распространяются как на форменные элементы, так и на химический состав плазмы Введение крови животного одного вида в кровяное русло животного другого вида приводит к нарушению физиологических функций организма и образованию антител (антитоксинов, преципитинов, цитолизинов, бактериолизинов, гемолизинов и др.). Наиболее важной группой антител являются агглютинины, которые вырабатываются на введение в кровь чужеродных кровяных элементов - агглютиногенов. Агглютинины вызывают склеивание эритроцитов чужой крови (реакция гемоагглютинации), а преципитины их осаждают (реакция преципитации). Агглютинины, как и другие антитела обладают специфичностью, т.е. способны содержащие склеивать только соответствующий определенные агглютиноген. эритроциты, Внутривидовые биологические различия крови легли в основу учения о группах крови, исследование которых необходимо учитывать в практике переливания крови и акушерстве. Существует два рода агглютининов - и , которые содержатся в плазме крови, и два рода агглютиногенов - А и В, которые содержатся в эритроцитах. В зависимости от наличия в крови тех или других веществ различают 4 группы крови. Группа крови сохраняется у человека в течение всей жизни. Классифицируются группы по номенклатуре АВО на О, А, В, АВ или по Янскому - I, II, III, IV (табл.1). Таблица 1 Классификация групп крови по номенклатуре АВО Наименование Агглютинины Агглютиногены группы в сыворотке в эритроцитах О(I) нет А(II) А В(III) В AB(IV) нет АВ Человек, у которого берут кровь для переливания, называется донором, а получатель крови - реципиентам, При смешивании крови донора и реципиента агглютинация наступает в том случае, если встречаются одноименные агглютинины и агглютиногены - А и , В и . При переливании реципиента и крови учитываются эритроцитов донора. свойства Методы сыворотки определения совместимости крови различных групп подразделяют на прямые и обратные. При прямой пробе эритроциты донора смешивают на стекле со свежей сывороткой реципиента при 37 0 С. Таким образом, определяется в сыворотке реципиента наличие антител к эритроцитам донора. При обратной пробе эритроциты реципиента помещают в сыворотку донора при 37 0С для выявления в крови донора антител к эритроцитам реципиента. Антигены А и В в крови группы О отсутствуют, поэтому любой объем этих эритроцитов можно без опасения переливать реципиентам других групп. Но в плазме крови группы О содержатся агглютинины к антигенам А и В, и ее можно вводить лишь в ограниченном объеме, при переливании больших количеств наступает агглютинация. При определении группы крови применяют готовые стандартные сыворотки I, II, III и IV групп. Принцип метода. Группы крови определяют по свойствам эритроцитов к агглютинации, которые устанавливаются с помощью стандартных сывороток, содержащих известные агглютинины. Реактивы и оборудование. Стандартные сыворотки I, II, III и IV, четыре пипетки, стеклянные палочки, предметные стекла, скарификаторы, вата, физиологический раствор. Ход работы: На предметное стекло палочкой нанести по каплям сыворотки I, II, Ill и IV групп, содержащих соответственно агглютинины: I - , ; II - ; III и IV - нет. Затем, получив каплю крови из пальца, первой стеклянной палочкой переносят небольшое количество ее в каплю сыворотки первой группы, вторым - чистым - концом этой же палочки такое же количе- ство крови переносят в сыворотку второй группы. При помощи второй стеклянной палочки третью каплю исследуемой крови переносят в сыворотку третьей группы. Каждый раз кровь тщательно размешивают в капле сыворотки, пока смесь не станет равномерно розового цвета. Реакция агглютинации наступает через 1-5 минут. При наличии агглютинации капля становится прозрачной, а эритроциты склеиваются в виде комочков. Группа крови устанавливается в зависимости от наличия или отсутствия реакции агглютинации. Для лучшего выявления наличия или отсутствия агглютинации можно добавить в пробу каплю физиологического раствора. 1. Если агглютинации свидетельствует об нет отсутствии во всех четырех агглютиногенов в каплях, это эритроцитах исследуемой крови и, следовательно, она принадлежит к I (О) группе. 2. Если агглютинация произошла с сыворотками I и III групп, содержащими соответственно агглютинины , и , то эритроциты исследуемой крови содержат агглютиногены А и эта кровь принадлежит ко II (А) группе. 3. Если агглютинация произошла с сыворотками I и II групп, содержащими агглютинины , и , то эритроциты исследованной крови содержат агглютиноген В и она принадлежит к III (В) группе 4. Если агглютинация произошла с сыворотками I, II, III групп, содержащими соответственно агглютинины , , и , то эритроциты исследуемой крови содержат как агглютиноген А, так и агглютиноген В. Следовательно, исследуемая кровь принадлежит к IV (АВ) группе. Группу крови испытуемого определяют по таблице 2, в которой знак плюс (+) означает агглютинацию, а знак минус (-) - отсутствие агглютинации. Таблица 2 Реакция эритроцитов испытуемого с сыворотками Агглютиногены Агглютинины в сыворотке в эритроцитах (I) (II) (III) 0 (IV) О (I) А (II) В (III) АВ (IV) Результаты работы и их оформление. Запишите, к какой группе крови принадлежит исследуемая кровь. Определите. 1) реципиентам с какими группами крови можно переливать исследуемую кровь, 2) кровь какой группы можно переливать Вам. Лабораторная работа № 8 Определение резус-фактора В эритроцитах 85% людей помимо агглюгиногенов А и В содержится особый антиген - резус-фактор, открытый в 1940 году Карлом Ландштейнером и Робертом Винтером. Такая кровь называется резус-положительной. У 15% людей нет резус-фактора (резус-отрицательная кровь) и сыворотка крови не содержит соответствующих резус-фактору готовых агглютининов. Однако они могут образовываться при определенных условиях, например, после того как субъекту резус-положительную совместимой, но с резус-отрицательной кровь. При кровью последующем резус-положительной крови, перельют переливании у ранее иммунизированного реципиента может наступить гемотрансфузионный шок в результате реакции между резус-положительными эритроцитами и образовавшимися ранее анти-резус агглютининами. Принцип метода. Определение резус-принадлежности крови основано на реакции эритроцитами, агглютинации, содержащими резус которая антигены, происходит и между антителами к анти-резус Д резус-фактору сыворотки. Реактивы и оборудование. Стандартная сыворотка, предметные стекла, стеклянные палочки, физиологический раствор, скарификаторы, вата. Ход работы: На предметное стекло стеклянной палочкой наносят каплю стандартной анти-резус Д сыворотки. В каплю сыворотки добавляют каплю крови (размер капли крови должен быть вдвое меньше, чем капля сыворотки). Стеклянной палочкой перемешивают каплю крови с каплей сыворотки, образуя общую каплю. Для лучшего выявления наличия или отсутствия агглютинации можно добавить в пробу каплю физиологического раствора. Если исследуемая кровь резус-положительная, то в пробе со стандартной анти-резус сывороткой будет агглютинация эритроцитов. Если кровь резус-отрицательная, агглютинация отсутствует. Результаты работы и их оформление. На Основе результата эксперимента сделайте вывод о том, является ли данная кровь резус-положительной или резус отрицательной- Объясните значение резус-фактора для переливания крови. Лабораторная работа № 9 Определение скорости свертывания крови Кровь, выпущенная из кровеносного русла, обладает способностью свертываться. Свертывание крови - это биологический ферментативный процесс, играющий защитную роль и направленный на сохранение жизни организма. При нарушении целостности кровеносного сосуда образуется сгусток - тромб, который закупоривает сосуд, прекращая кровотечение и не допуская значительной потери крови. Kровь, выпущенная в пробирку, образует кровяной сгусток, вокруг которого находится прозрачная жидкость - кровяная сыворотка. Сыворотка в отличие от плазмы не содержит белка фибрина. Сгусток крови это тесно переплетенные нити фибрина, между которыми «застревают» форменные элементы крови. В реакции свертывания крови участвует ряд веществ, часть из них содержится в плазме, а часть - в форменных элементах крови (рис. 5). Белок фибрин растворен в плазме в неактивном состоянии (фибриноген) и активируется только при действии на него фермента тромбина. Последний тоже находится в плазме в неактивном состоянии (протромбин) и переходит в активный фермент - тромбин - при действии тромбопластина, который содержится в тромбоцитах, лейкоцитах, в стенках кровеносных сосудов и в мышечной ткани: Протромбин активируется при обязательном участии ионов Са2+. Если кровь, только что выпущенную из сосуда, взбивать специальной палочкой, то происходит разрушение тромбоцитов и из них освобождается тромбопластин. Он переводит протромбин в тромбин и активирует фибриноген. Последний переходит в нерастворимое состояние, образуя тонкие белесоватые нити, которые извлекаются из крови при перемешивании. Этот процесс называется дефибринированием крови. При высокой температуре скорость свертывания крови увеличивается, при низкой замедляется. Цитрат или оксалат натрия (лимоннокислый или щавелевокислый натрий) способны присоединять ионы Са2+, что предотвращает свертывание крови. Это свойство цитрата натрия используется при консервировании крови. К веществам биологического крови, происхождения, относятся гирудин предотвращающим свертывание (вырабатывается у пиявок), гепарин (вырабатывается в печени), змеиный яд и др. Введение в кровь веществ, содержащих ионы Са2+, экстрактов тканей, желатины и др. ускоряют свертывание крови. Плазма Форменные элементы Тромбоциты Лейкоциты Эритроциты Са2+ Тромбопластин Протромбин Тромбин Фибриноген Фибрин Тромб Рис. 6. Схема свертывания крови. Принцип метода. Основан на определении времени образования сгустка крови. Реактивы стекла, и часовое оборудование. стекло, Скарификаторы, стеклянные палочки, фильтровальная бумага, вазелин или масло, вата. предметные секундомер, Ход работы: Скорость кровотечения измеряется временем от начала появления крови из сосуда до образования сгустка. 1. Каплю крови из пальца поместить на предметное стекло. Через каждые 10 секунд наклонять стекло под углом 30/, Момент, когда капля при наклоне стекла не будет менять свою форму, соответствует началу свертывания крови (способ Ли-Уайта). 2. Каплю крови поместить на обезжиренное и подогретое на ладони часовое стекло и осторожно, каждые 0,5 минуты помешивать стеклянной палочкой. Первая нить фибрина на палочке свидетельствует о начале свертывания крови (способ Моравица). Чтобы избежать охлаждения стекла, а тем самым и крови, не ставьте его на стеклянную или металлическую поверхность. Выявите влияние температуры на время свертывания крови. Для этого повторите определение при более низкой и более высокой температуре, поставив предварительно одно часовое стекло в водяную баню с холодной, а другое - с теплой водой. 3. Отметить время прокола пальца. Затем через каждые 10 секунд прикасаться к выпуклой поверхности капли крови фильтровальной бумагой. Отпечаток капли на бумаге с каждым прикосновением становится все меньше. Скорость свертывания отмечается временем от появления первой капли до прекращения появления следов крови на бумаге (способ Дюна). Фильтровальную бумагу с фиксированными каплями вклеить в тетрадь. 4. На покрытое парафином часовое стекло помещают каплю вазелинового масла. Из пальца капилляром, предварительно смоченным изнутри вазелиновым маслом, берут каплю крови и помещают ее в каплю вазелинового масла на стекле. Каждые 2 мин кровь снова набирают в капилляр, выдувая ее обратно на часовое стекло. С момента свертывания взять кровь в капилляр становится невозможно. Замечают время от момента взятия крови до начала свертывания. В норме у человека при температуре воздуха 15-20 °С оно равно 8-12 мин (способ Мас и Магро). Результаты работы и их оформление. Записать, сколько времени прошло с момента взятия крови до ее свертывания, определенное каждым из описанных способов. Сопоставить время свертывания крови, определенное каждым из описанных способов. Сравнить полученные цифры с нормой. Сделать вывод, как влияет температура на время свертывания крови. Сделать общие выводы. Лабораторная работа № 10 Осмотическая резистентность эритроцитов (макроскопический метод Лимбека и Рибьера) Концентрация электролитов в плазме человека составляет около 0,9%. Эритроциты обладают избирательно проницаемой мембраной, которая пропускает воду, сахар, анионы и малопроницаема для катионов. Осмотическое давление (Р) внутри эритроцитов обусловлено электролитами, главным образом NaCI. Р плазмы и Р эритроцитов взаимно уравновешены, их величина поддерживается постоянной и равняется 7,8 атм (Батуев, 1998). Растворы солей, Р которых равно Р внутри эритроцитов, называются изотоническими. В них эритроциты сохраняют свою форму и величину. Таков, например, физиологический раствор натрия хлорида 0,9%. Растворы, Р которых больше Р внутри клетки, называются гипертоническими. В них часть воды из эритроцитов выходит наружу, и последние сжимаются. Растворы с Р меньшим, чем в эритроцитах, называются гипотоническими. Эритроциты, помещенные в них разрушаются, и их содержимое - гемоглобин - выходит в раствор, т.е. происходит осмотический гемолиз. В слабо гипотонических растворах эритроциты набухают. В растворах с большей степенью гипотонии разрушению подвергаются не все эритроциты - частичный гемолиз. В сильно гипотонических растворах эритроциты полностью разрушаются - наступает полный гемолиз (лаковая кровь). Устойчивость эритроцитов к гипотонии носит название осмотической резистентности. Концентрация раствора NaCI, при которой начинается гемолиз, характеризует Концентрация минимальную раствора резистентность NaCI, вызывающая эритроцитов. полный гемолиз, соответствует максимальной резистентности эритроцитов. Принцип метода. Визуальное определение уровня минимальной осмотической резистентности, т.е. первых, едва уловимых следов гемолиза эритроцитов, по легкому порозовению или по легчайшей желтизне раствора, и уровня максимальной осмотической резистентности или полного гемолиза эритроцитов по интенсивно красной окраске, прозрачности раствора и отсутствию осадка в нем. Реактивы и оборудование. Стеклянные баночки, пробирки, пипетки, градуированные в сотых долях миллиметра, отдельно для воды и для 1% NaCI, капилляры Сали, штативы для пробирок, карандаш по стеклу, 1% раствор NaCI, дистиллированная вода. Ход работы: Для исследования приготовить растворы NaCI различной концентрации. Взять восемь пробирок и пронумеровать их карандашом по стеклу. В каждую пробирку налить дистиллированную воду и 1% раствор NaCI (см. табл. 3). Вода и раствор соли наливаются из стеклянных баночек. Причем сначала следует во все пробирки налить воду, а затем раствор соли. Пробирки с раствором NaCI разместить в штативе по убывающей концентрации. В каждую пробирку с помощью капилляра Сали прибавить по 0,02 мл крови (свежей или дефибринированной). Осторожным встряхиванием пробирки достигают равномерности взвеси и затем пробирки по номерам расставляют в штативе при комнатной температуре (15-25 °С) на 1 час (при наличии центрифуги отцентрифугировать растворы в течении 5 минут при 2300 об/мин.). Частичный гемолиз (минимальная осмотическая резистентность) характеризуется окрашиванием неразрушенных эритроцитов. раствора Полный и появлением гемолиз осадка (максимальная осмотическая резистентность) определяется по интенсивности алой окраски и отсутствию осадка. Бесцветный раствор и большое количество осадка свидетельствуют об отсутствии гемолиза. В норме минимальная осмотическая резистентность по макроскопическому методу у взрослых колеблется между 0,48 и 0,46% хлорида натрия, максимальная - между 0,34 и 0,32%. У грудных детей максимальная резистентность составляет от 0,36 до 0,40%. минимальная - от 0,48 до 0,52% хлорида натрия; у более старших детей, максимальная - от 0,36 до 0,40%, минимальная - от 0,44 до 0,48% хлорида натрия. Результаты работы и их оформление. Определить, при какой концентрации раствора NaCI наступает каждое состояний, соответственно установить границы эритроцитов и (максимальную и минимальную из указанных устойчивости резистентность). Результаты проведенных наблюдений оформить в виде таблицы 4. Таблица 3 Номер 1% раствор Дистиллированная Полученная пробирки NaCl, мл вода, мл концентрация, % 1 4,5 0,5 0,9 2 4,0 1,0 0,8 3 3,5 1,5 0,7 4 3,0 2,0 0,6 5 2,5 2,5 0,5 6 2,0 3,0 0,4 7 1,5 3,5 0,3 8 1,0 4,0 0,2 Таблица 4 Концентра- Окраска Осадок ция раствора, полу- эритроцитов % ченного раствора 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 Заключение Границы устойчивости Гемограмма мужчин и женщин Показатели Гемоглобин, г% Эритроциты, 1012/л Цветовой показатель, у.е. Ретикулоциты, %0 СОЭ, мм/ч Тромбоциты, 109/л Лейкоциты,. 109/л Пол М Ж М Ж М Ж М Ж М Ж М ж М Ж Палочкоядерные, % Сегментоядерные, % Эозинофилы, % Базофилы, % Лимфоциты, % Моноциты, % Мm 14,70,03 13,10,03 4,70,01 4,70,01 0,930,001 0,900,001 4,00,1 5,40,1 4,00,1 7,00,1 228,0±1,9 236,0±1,4 6,4±0,02 6,2± 0,04 2,5±0,04 59,5±0,2 2,65±0.04 0,5±0,01 28,0±0,1 7,0±0.1 Интерпретация анализов крови и мочи. Клиническое значение анализов (по Козинец Г.И., 1997). Контрольные вопросы к лабораторным занятиям по теме «Физиология системы крови» 1. Понятие о системе крови. Основные функции крови. 2. Кровь как внутренняя среда организма. Количество, состав, объем, гематокрит крови. З.Гомеостаз. Понятие о жестких и пластичных физиологических константах. Основные механизмы внутренней среды организма. поддержания постоянства 4.Физико-химические свойства крови - вязкость, осмос, осмотическая резистентность эритроцитов. б.Онкотическое давление. Коллоидная стабильность, Дзета-потенциал -мера устойчивости коллоидного раствора. Суспензионные свойства кро» ви. Удельный вес. 6.Состав и свойства плазмы крови. Содержание электролитов, микроэлементов. Белки плазмы крови - основные фракции. Фуивдии белков плазмы. Органические вещества, азотсодержащие (небелковый азот), глюкоза и другие вещества плазмы. Сыворотка крови. 7,Строение и функции эритроцитов. Химический состав. Значение метгемоглобинредуктазы и 2,3 - ДФГ в регуляции сродства гемоглобине к кислороду 8.Гемоглобин, его свойства и соединения. Гемолиз. Анемии. 9.Эритропоэз. Регуляция эритропоэза. Эритропоэтин. 10.Группы крови. Система АВО. Резус-фактор, его значение. Гемолитическая болезнь новорожденных. 11 Виды лейкоцитов и их функции. Лейкоцитоз, лейкоцитопения. Лейко-цитарнгя формула. Сдвиг влево. Гранулоцитопоэз. Регуляция грануло-цитопоэза. 12.Тромбоциты и их функции. 13.Гемостаз. Фазы гемостаза: иредфаза (сосудисто-тромбоцитарный гемостаз), коагуляция и послефаза (ретракция сгустка). Факторы свертывания крови (плазменные, факторы клеток и тканей). 14.Противосвертывающая система крови. 15.Специфические и неспецифические защитные механизмы крови: гуморальные и клеточные факторы иммунитета. Мсноцито- и лимфоцито-поэз. Регуляция моноцито- и лимфоцитопоэза. 16 Воспаление как защитная реакций организма. 17.Клеточный и гуморальный иммунитет. Т- и В * лимфоциты. Плазматические клетки. Иммунный ответ немедленного и замедленного типа. "18.Реакция оседания эритроцитов. 19.Буферные системы крови. Щелочной резерв крови. 20 Понятие о физиологической «норме». 21.Регуляция системы крови. Влияние окружающих факторов (температуры и атмосферного давления и др.) на систему крови. 22 Лимфа. Лимфатическая система. Контрольные вопросы к коллоквиуму по теме «Физиология системы крови» 1.Назовите составные части системы крови. 2.Перечислите морфологические и биохимические компоненты циркулирующей и депонированной крови. В чем их основное отличие? 3. В чем состоят следующие важнейшие функции крови: -дыхательная; -транспортная; - креаторная; - защитная; - гомеостатическая; - выделительная функция крови. 4.Какие главные органические вещества входят в состав плазмы крови? 5.Какие главные катионы и анионы входят в состав плазмы крови? 6.Каков рН крови, что называется алкалозом и ацидозом? 7.Какие вещества относятся к буферным системам крови? 8.Какую роль играют легкие в нормализации рН крови? 9.Какую роль играют почки в нормализации рН крови? 10. 11 Что называется .Какова роль щелочным осмотического 12, Какова роль онкотического давления крови? резервом давления крови? крови? 13.Как устроен эритроцит, в чем состоят важнейшие огличия этой клетки от других? 14. Как устроена молекула гемоглобина? 15.Назовите виды гемоглобинов животных и человека, а также соединения НЬ, встречающиеся в крови? 16. Как подсчитать количество эритроцитов в 1 мкл крови? 17.Как определить содержание гемоглобина в крови? 18.Как вычислить цветной показатель крови и другие индексы эритроцитов? 19.Кькме последствия имеет насыщение крови СО? 20.Каковы последствия высокого содержания метгемоглобина в крови? 21.Что называется гемолизом и как выглядит гемолизированная кровь? 22.Каковмеханизм осмотического гемолиза? 23.Как определить осмотическую резистентность эритроцитов и от чего она зависит? 24.Что такое кислородная емкость крови, чему она равна и чем обеспечивается? 25.Как называется увеличение и уменьшение количества эритроцитов й объеме крови, и каковы причины, приводящие к изменениям количества эритроцитов? 26.При помощикаких физиологических механизмов осуществляется поддержание постоянного количества форменных элементов крови? Что такое эритропоэтини гДе он производится в организме человека? 27. Назовите органы кроветворения и кроверазрушенйй. 28.Как зависят свойства эритроцитов от физико-химических качеств окружающей их Среды (плазмы, капилляров, тканевой ЖИДКОСТИ)? 29.Как зависит насыщение крови кислородом от физико-химических свойств внешней и внутренней Среды организма? зо.Нарисуйте схему, демонстрирующую механизмы газообмена в легких и тканях. • 31. Что такой кривая диссоциации гемоглобина? 32. Кислотно-щелочной гомеостаз и роль крови в обеспечении этой константы животного организма? ЗЗ.Функциональная система поддержания постоянного количества форменных элементов крови. 34.Как определить скорость оседания эритроцитов и от чего она зависит? Зб.Опишитеэритропоэз и факторы, его стимулирующие. Зб.Какова природа факторов Касла, в чем состоит их роль в процессе эритропоэза? 37.Как подсчитать количество эритроцитов в крови? 38.Как определить лейкоцитарную формулу? 39.Назовите состав лейкоцитарной формулы. Каково значение «сдвигов влево»? 40.Приведите примеры лейкоцитозов и лейкопений. 41.Каковы виды лейкоцитозов, возникающих у человека в разных условиях? 42Перечислите основные функции лейкоцитов. 43.В чем заключается важнейшее функциональное значение нейтрофи-лов? 44,БазофильНые, и эозинофильные гранулоциты, их значение? 45 Назовите этапы фагоцитоза. В чем принципиальное различие макрофагов и микрофагов? 46. Каковы физиологические колебания количества лейкоцитов в объеме крови? 47.Лимфоциты, роль Т- и В-зависимых лимфоцитов в обеспечении специфического иммунитета. 48. 49. Где производятся и разрушаются лейкоциты? Как регулируется содержание лейкоцитов в крови? Возможны ли сдвиги в количестве одних форм клеток без изменения содержания ' других? 50.йнтегратйвная роль активной мезенхимы в приспособительных реакциях организма. 51.Опишите лейкопоэз и факторы его регулирующие. за 52.Агглютинотены и агглютинины крови человека у представителей О, А, В, АВ групп. 53 Что такое резус-фактор и каково его значение в практике переливания крови и акушерстве? 54.Как определить группу крови? 55.Как определить наличие резус-фактора? 56.Как сочетается кровь доноров всех групп, с кровью реципиентов Всех групп? 57.Реципиентам, каких групп, может быть перелитакройь доноров групп I, II, III, IV? 58.Какое правило надо знать, выявляя возможность переливания крови? 59,Действительно ли правило, принятое для оценки возможности переливания крови, при массивном переливаний? 60.Какие осложнения развиваются при переливании несовместимой группы крови? 61.Тромбоциты и их функциональная роль. 62.Какие факторы составляют свертывающую систему крови? 63,Назовите фазы свертывания крови. 64.Что такое тканевые и плазменные фактбры свертывание крови? 65.Как влияют на свертывание крови физические, химические и биологические факторы? 66. Какие факторы относятся к противосвёртывающим? 67 Функциональное значение гепарина. ".68.Опишите фазы Процесса свертывания крови. 69.Как ускорить, замедлить или предотвратить свертывание крови? 70.Как определить время свертывания крови? 71.Как определить время кровотечения? 72.0пишите фибринолиз и его механизм? 73.Сколько крови содержится в организме человека? ЛИТЕРАТУРА Основная 1. Нормальная физиология. / Под ред. А В. Коробкова. М. 1980 2 Общий курс физиологии человека и животных. В 2-х т / Под ред. А.Д. Ноэдрачева. М., 1991. 3.Основы физиологии человека .В 2-х т. / Под редБ.И. Ткаченко, С.-Петербург,, 4.Основы физиологии. / Под ред. Г И Косицкого. М., 1984 5.Физиология человека и животных. В 2-х т./ Под ред А Б Ь <ан М 1984 6.Физиология человека. / Под ред. Г И. Косицкого. М,, 1985 7.Физисогия человека. / Под ред Е Б Бабского. М., 1972. Дополнительная 1. Атлас по нормальной физиологии. / Под ред. НА Агаджаняна М 1Э86 2, Батуев АС, Никитина И П., Журавлев В.Л., Соколова Н.Н. Малый практикум по физиологии человека и животных. С-Петербург, 1998 С. 11-35 3 Козинец Г. И. Интерпритация анализов крови и мочи. Клиническое значение анализов. С-Пб., 1997. 127 с. 4 Г/^СТие!,0о^0'фИЗИ0Л0™И(п00ТДельн-*'мсистемам). / Под ред. А.С.Батуева. М., 1974, 83, 86 г.г. И т.д. 5. Словарь физиологических терминов. / Под ред О Г Газенко М 1987 Физиология человека. / Под ред. Р.Ф Шмидта, П.Г. Костюка. М., 1985.
