Загрузил deevanadusha69

2018-04-14 Лекция10 Купраш

Реклама
Курс «Иммунология»
Лекция 10
Реакции гиперчувствительности.
Иммунные реакции при трансплантации.
Иммунологические методы.
Дмитрий Владимирович КУПРАШ
kuprash@gmail.com
vk.com/immunology_msu_2015
14 апреля 2018 г.
Польза и вред аллергических реакций
Аллергические реакции - важный компонент защиты:
"Гипотеза охранной системы": большинство аллергических реакций направлены на
удаление раздражающего агента (выделение жидкостей, чихание, кашель), т.е. могут
иметь непосредственный защитный эффект. Неприятные ощущения также могут
указывать на местоположение паразита и стимулировать его механическое
удаление (вычесывание, выкусывание), или стимулировать смену места
проживания.
Аллергии - побочный эффект улучшения качества жизни:
"Гигиеническая гипотеза": в цивилизованных странах уровень инфекционной
нагрузки существенно снижен. В частности, мало инфекций, вызывающих сильные
Th1 ответы, в результате Т-клеточный баланс сдвинут в сторону Th2 и продукции
антител, в частности, IgE.
"Вакцинная гипотеза": массовые вакцинации, которые специально
разрабатываются так, чтобы стимулировать продукцию антител, еще сдвигают
баланс Т-хелперов в сторону Th2.
"Экологическая гипотеза": мы контактируем с большим количеством неприродных
химических соединений и лекарств, некоторые из которых оказываются
аллергенами и при повторном воздействии "сенситизируют" иммунную систему.
Вредный "западный" стиль жизни
Полезный "сельский" стиль жизни
Lambrecht BN, Hammad H. Nat Immunol. 2017;18(:1076. doi: 10.1038/ni.3829
Lambrecht BN, Hammad H. Nat Immunol. 2017;18(:1076. doi: 10.1038/ni.3829
Реакции гиперчувствительности (аллергические реакции)
(по классификациям 1947 и 1963 г.)
Гиперчувствительность немедленного типа
I тип
II тип
III тип
IV тип
анафилактический
цитотоксический
иммунокомплексный
гиперчувствительность замедленного типа
Компонент
иммунитета
Антиген
Механизм
действия
Примеры
Растворимый
Компонент
матрикса
Клеточный
рецептор
Растворимый
Растворимый
Активация
тучных
клеток
Активация
комплемента
Антитело
влияет на
передачу
сигнала
Комплемент,
фагоциты
Активация
макрофагов
Продукция Модификация
мембранных
IgE,
белков, цитоактивация
эозинофилов токсичность
Феномен
АртюсаСахарова
Реакция
Манту
Хроническая
астма
Сенная
лихорадка,
пищевые
аллергии,
аллергия на
укусы
насекомых
Лекарственная Хроническая
анемия,
крапивница
тромбопения
Важно отличать реакции иммунологической
гиперчувствительности от псевдоаллергических
реакций
Растворимый
Мембраносвязанный
Контактный
дерматит
(урошиол),
аллергия на
тяжелые
металлы
Способы подавления аллергических реакций
Мишень терапии
Механизм
Примеры
Медиаторы действия
тучных клеток
Ингибирование самих
медиаторов или их
биосинтеза
Антигистаминовые
препараты, блокаторы
липоксигеназы (синтез
лейкотриенов)
Хронические
воспалительные
реакции
Системные
антивоспалительные
эффекты
Кортикостероиды
Th2 ответ
Индукция Treg или Th1
Иммунизация аллергеном
(специфическая
иммунотерапия) *
Связывание IgE с
тучными клетками
Блокада
взаимодействия IgE с
Fc рецепторами
Анти-IgE терапевтические
антитела
* рекомендация к иммунизации низкими дозами аллергена в последнее время дается
только детям, т.к. показано, что на взрослых она работает хуже, может привести к
появлению аллергии к новым аллергенам, а также к предрасположенности к
аллергии у детей, чьи матери получали иммунотерапию аллергенами
Правила отторжения трансплантатов. MHC-рестрикция.
Cellular and molecular immunology / A.K. Abbas, A.H. Lichtman, S.Pillai / 8th edition / 2015
Прямое и непрямое аллогенное распознавание
Cellular and molecular immunology / A.K. Abbas, A.H. Lichtman, S.Pillai / 8th edition / 2015
Активация аллореактивных Т-клеток реципиента
Cellular and molecular immunology /
A.K. Abbas, A.H. Lichtman, S.Pillai / 8th edition / 2015
Механизмы действия иммуносупрессоров
Cellular and molecular immunology /
A.K. Abbas, A.H. Lichtman, S.Pillai / 8th edition / 2015
Некоторые антитела - иммуносупрессанты
Название
Мишень
Механизм действия
Патология
Удаление В-клеток
В-лимфомы
Удаление лимфоцитов
Лейкемии
Подавление активации
Т-клеток
Подавление
пролиферации
Т-клеток
Трансплантация
органов
Болезнь Крона
Подавление
провоспалительного
действия TNF (ФНО)
Ревматоидный артрит
Подавление
провоспалительного
действия ИЛ-6
Иммунологические методы: гибридомная технология
Слияние плазматических клеток,
производящих специфические
антитела, с бессмертными
раковыми клетками, позволяет
получить культуру клеток,
производящих моноклональные
антитела к нужному антигену
Клетки гибридомы в
асцитной жидкости
Моноклональные
антитела
Nobel Prize in Physiology or Medicine 1984
Niels
Jerne
Georges
Köhler
César
Milstein
"for theories concerning the specificity in development and control of
the immune system and the discovery of the principle for production
of monoclonal antibodies".
Irani et al. Mol Immunol. 2015 Oct;67(2 Pt A):171-82. doi: 10.1016/j.molimm.2015.03.255
Рекомбинантные белки - ингибиторы ФНО
инфликсимаб
химерное антитело
адалимумаб
фаговый
дисплей
бибилиотеки
антител
человека
голимумаб
антитело человека
моноклональное антитело
мыши
этанерцепт
трансгенная мышь
с Ig-локусом человека
антитело человека
цертолизумаб
пегол
CDR2 CDR3
CDR1
FAB
фрагмент
ФНОР2
антитело человека
Г.А.Ефимов, 2014
гибридный
белок:
ФНОР2 + Fcфрагмент
моноклональное антитело
мыши
ПЭГ
Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) a.k.a. ИФА
Enzyme-Linked ImmunoSpot (ELISPOT)
Проточная цитофлуориметрия и сортировка клеток
(FACS - fluorescence-activated cell sorting)
Добавление к клеткам смеси моноклональных антител с
флуорофорами позволяет количественно "пометить"
одновременно несколько поверхностных молекул.
Специальные приемы (обычно
несовместимые с жизнеспособностью
клеток) позволяют пометить
внутриклеточные белки и цитокины
Параметры лазеров и детекторов
подбираются так, чтобы разные метки
определялись независимо.
Компьютер в режиме
реального времени
управляет электризацией
капель, содержащих
отдельные клетки, для их
сортировки по
выбранным параметрам
Иммуноглобулин-связывающие белки, блокирующие
нормальную опсонизацию бактерий
При нормальной опсонизации антитела
связывают эпитопы на поверхности
бактерий и распознаются Fc-рецепторами
фагоцитов
Белок А золотистого стафилококка связывает
антитела "задом наперед" и препятствует
взаимодействию с Fc-рецепторами.
Способность белков А и G взаимодейстовать
с широким спектром Fc-фрагментов антител
делает их ценными реагентами.
Иммунопреципитация хроматина (ChIP)
Сшивка формальдегидом (амино и имино группы в радиусе 0.2 нм)
Лизис клеток
Дробление
Оценка качества
Иммунопреципитация
Анализ степени обогащения
QRT-PCR
Очистка
ДНК
ChIP-Seq
Скачать