Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вятская государственная сельскохозяйственная академия» На правах рукописи КИРИЛЛОВЫХ АННА СЕРГЕЕВНА ВЛИЯНИЕ КОРМОВЫХ ДОБАВОК «ПРОВИТОЛ»® И «МИКС-ОЙЛ»® НА ПОДЖЕЛУДОЧНУЮ ЖЕЛЕЗУ СВИНЕЙ ПРИ ГАСТРОЭНТЕРИТЕ 06.02.01 - Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель кандидат ветеринарных наук, доцент, С.Д. Андреева Саранск 2018 2 Оглавление ВВЕДЕНИЕ.................................................................................................................. 5 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.......................................................................................... 12 1.1 Краткая характеристика биологических особенностей желудочно- кишечного тракта свиней ......................................................................................... 12 1.2 Этиология и патогенез гастроэнтерита у свиней............................................. 15 1.3 Клинико-патоморфологические изменения при гастроэнтерите................... 21 1.3.1 Клиническая картина, морфологические и биохимические показатели крови при гастроэнтерите......................................................................................... 21 1.3.2 Патоморфологические изменения в органах пищеварения при гастроэнтерите........................................................................................................... 25 1.4. Лечение гастроэнтерита у свиней..................................................................... 28 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ............................................... 34 2.1 Схема и условия проведения опыта .................................................................. 34 2.2 Морфологические и биохимические методы исследования крови ............... 37 2.3 Патоморфологические и гистологические методы исследования органов и тканей ......................................................................................................................... 38 2.4 Гистохимические, иммуногистохимичекие, ультрамикроскопические и морфометрические методы исследования.............................................................. 38 2.5. Экономико-математические методы................................................................ 40 3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .................................................................. 42 3.1. Клинико-патоморфологические исследования клинически здоровых поросят-отъёмышей и с выраженной картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте ...................................................................................................................... 42 3.1.1. Общий клинический статус поросят-отъёмышей........................................ 42 3.1.2. Морфологические и биохимические показатели крови поросят- отъемышей ................................................................................................................. 44 3.1.3. Патоморфологические изменения в органах поросят-отъемышей............ 48 3 3.1.4. Гистологическая характеристика поджелудочной железы и гастродуоденальной системы клинически здоровых поросят-отъёмышей и с выраженной картиной гастроэнтерита ................................................................... 56 3.1.4.2. Гистологическая характеристика поджелудочной железы и гастродуоденальной системы поросят при гастроэнтерите. Морфометрические показатели поджелудочной железы на световом уровне...................................... 59 3.1.5. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы поросят-отъёмышей ........................................................ 62 3.1.5.1. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы клинически здоровых поросят-отъёмышей .................. 62 3.1.5.2. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы поросят-отъёмышей при гастроэнтерите...................... 66 3.2 Клинико-патоморфологические исследования свиней в 85-100 суточном возрасте. ..................................................................................................................... 69 3.2.1. Общий клинический статус свиней в 85-100 суточном возрасте. ............. 69 3.2.2. Морфологические и биохимические показатели крови свиней в 85-100 суточном возрасте. .................................................................................................... 71 3.2.3. Патоморфологические изменения в органах свиней в 85-100 суточном возрасте ...................................................................................................................... 74 3.2.4. Гистологические гастродуоденальной изменения системе свиней в поджелудочной в 85-100 суточном железе и возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы свиней на световом уровне ......................................................................................................................... 80 3.2.5. Ультрамикроскопические изменения поджелудочной железы свиней в 85100 суточном возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы ..................................................................................................................................... 85 3.3 Клинико-патоморфологические исследования свиней в 180-210 суточном возрасте ...................................................................................................................... 95 3.3.1. Общий клинический статус свиней в 180-210 суточном возрасте ............ 95 4 3.3.2. Морфологические и биохимические показатели крови свиней в 180-210 суточном возрасте ..................................................................................................... 97 3.3.3. Патоморфологические изменения в органах свиней в 180-210 суточном возрасте .................................................................................................................... 100 3.2.4. Гистологические гастродуоденальной системы изменения свиней поджелудочной в 180-210 железе суточном и возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы свиней на световом уровне ....................................................................................................................... 101 3.2.5. Ультрамикроскопические и морфометрические изменения поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте ........................... 105 3.4 Иммуногистохимичекие исследования поджелудочной железы клинически здоровых свиней и с выраженной картиной гастроэнтерита на разных этапах эксперимента ........................................................................................................... 115 3.5 Зоотехнические показатели свиней................................................................. 120 3.6 Экономическая и терапевтическая эффективность выбранных методов лечения ..................................................................................................................... 121 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ..................................... 127 ЗАКЛЮЧЕНИЕ ....................................................................................................... 145 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.................................................................... 149 Список литературы ................................................................................................. 151 ПРИЛОЖЕНИЯ....................................................................................................... 178 5 ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы Свиноводство в современном мире идет путём не повышения численности животных, а за счет увеличения производства свинины, что возможно благодаря успехам в племенной работе, высоким уровнем воспроизводства, применением гибридизации, интенсивным откормом (Михайлова О.А., 2018). Интенсификация свиноводства в большей степени зависит от качественного молодняка свиней, их продуктивного потенциала, которые влияют в дальнейшем, интенсивность роста и привесы, и в целом, на экономическую эффективность производства свинины. (Мошкутело И.И., Александров П.В., Северин В.П. и др., 2011). Заболевания органов желудочно-кишечного тракта животных составляют по данным статистики до 70% от всей патологии внутренних органов. Как следствие этого, в настоящий момент стоит актуальная задача по поиску максимально эффективных, оправданных с экономической точки зрения малотоксичных препаратов для терапии животных (Аликин Ю.С., 2005; Бессарабов Б.Ф., 1996; Бондаренко В.М.,1998; Денисенко В.Н., 1998). За последние годы наблюдается увеличение числа желудочно-кишечных болезней молодняка, обусловленных условно патогенными микроорганизмами (Левченко В.И., 2005; Бовкун Г.Ф., Трошин В.Г., Малик Н.С., 2005). Особенно остро этот проблема стоит в свиноводческих хозяйствах. Согласно данным немецких ученых, в первую неделю жизни падеж поросят с синдромом диареи составляет 15-70% (Бочкарева В.В., 2018). В настоящее время одной из важных и недостаточно изученных проблем в ветеринарной медицине является панкреатит у свиней. Данная патология широко описана в медицине, а в ветеринарии этот вопрос очень узко изучен. Отечественные и зарубежные ученые (Учасов Д.С., 2011; Бессарабова Е.В., 2011; Иванова И.Е с соавт, 2010; Панин А.Н., 2010; Черненок Ю.Н., 2009; 6 Попов Р.М, 2009; Улитько В.Е., 2007; Канбеков Р.Г., 2003; Тараканов Б.В., 1998) изучали патологию поджелудочной железы у сельскохозяйственных животных. Ими были описаны этиология, факторы, усугубляющие течение патологии поджелудочной железы, патогенез и клиническое проявление болезни. М.В Буданцев (2011) отмечал, что у свиней в возрасте 6-10 месяцев, поступающих на убой из разных регионов страны, патология поджелудочной железы выявляется у 0,71% поголовья. Чаще всего в поджелудочной железе обнаруживают признаки диффузного панкреатита (42,03 %), абсцедирующего панкреатита (16,56 %), калькулезного панкреатита (13,38 %), значительно реже кисты, опухоли и дистрофию паренхимы (5,73-7,64 %). При этом свиньи отличаются пониженной упитанностью, а во внутренних органах таких животных можно отметить признаки развития дистрофических процессов (Пашин М.А., 2011). Известно, что при заболеваниях изменяются многие физико-биологические свойства мяса, понижается его пищевая ценность, а также ухудшаются микробиологические показатели мясного сырья. Сохранение молодняка имеет приоритетное значение в развитии свиноводства, так как заболеваемость поросят в отдельных крупных специализированных хозяйствах стала увеличиваться пропорционально интенсификации отрасли. Применение различных антибиотиков не привело к успеху, а, наоборот, ослабило роль антибактериальной терапии ввиду появления резистентных штаммов бактерий (Пашин М.А., 2011; Абрамов С.С., 1990). Несмотря на успехи в медицине, обычные лекарственные средства имеют нежелательные побочные эффекты, малоэффективны и дорогостоящие (Сковородин Е.Н., 2015). В последнее время растет процент использования пребиотико- пробиотических препаратов для коррекции функциональных нарушений панкреобилиарной системы и заболеваний желудочно-кишечного тракта свиней. Использование в рационах различных по составу пробиотиков и 7 пребиотиков позволяет также повысить приросты живой массы свиней до 40% (Жаров А.В., Холод В.М., 1987; Богер М.М., 1984; Doherty M.L.; Healy M.M., 1998; Lamb C.B., 1995). По мнению T.D. Leser, J.Z. Amenuvor, T.K. Jensen, R.H. Lindecrona, M. Boye, K. Moller (2002) более выраженный эффект применения пробиотиков отмечался у поросят-отъемышей, чем у подросших или взрослых особей. У поросят микрофлора в кишечнике неустойчива во время первой недели после отъема и в течение двух-трех недель после отъема, кишечные микробы развивают ферментативный потенциал, достигая определенного уровня стабильности. Таким образом, добавки с пробиотиками усиливают состав микрофлоры во время периода отъема (2002) Механизмы действия пробиотических препаратов похожи, основной их принцип: конкуренция с патогенными бактериями за питательные вещества, за места связывания с эпителием в пищеварительном тракте; продукция веществ, которые ингибируют патогенные бактерии в кишечнике; стимуляция иммунной системы; стимуляция пищеварения (Cho J.H., Zhao P.Y., Kim I.H., 2011). К настоящему времени собрано много данных о положительном влиянии биопрепаратов в животноводстве и птицеводстве на продуктивность и нормализацию обменных процессов. Такими представителями являются кормовые добавки «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. Натуральный заменитель кормовых антибиотиков «Микс-Ойл»® - это кормовая добавка для повышения сохранности молодняка и увеличения продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы. Смесь натуральных эфирных масел в составе кормовой добавки обладает антимикробной активностью, антиоксидантным действием и противоспалительным эффектом. Препарат улучшает микрофлору кишечника, препятствует попаданию инфекции в желудочно-кишечный тракт, помогает животным снимать стрессовое состояние, вызванное сменой рациона и сердечно-сосудистыми заболеваниями. Кормовая добавка благотворно влияет на воспроизводительную функцию свиноматок, помогает восстановлению организма свиноматок после 8 опороса. Использование препарата, позволяет снизить или даже полностью исключить использование антибиотиков. Эфирные масла, входящие в состав кормовой добавки, препятствуют возникновению респираторных заболеваний (Лаптев Г.Ю., Большаков В.Н., Солдатова В.В., 2012). «Провитол»® – это многофункциональная кормовая добавка, которая может применяться для оптимизации пищеварения повышения иммунитета, увеличения продуктивности и повышения сохранности молодняка и нормализации микрофлоры в кишечнике свиней. Он помогает животным переживать стрессы, благотворно влияет на воспроизводительную функцию свиноматок. Применение кормовой добавки увеличивает выживаемость поросят во всех возрастных группах (Большаков В., Новикова Н., Солдатова В.В, 2013) Цель и задачи исследования. Цель — клинико-морфологическая оценка влияния кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® на поджелудочную железу свиней при гастроэнтерите. Были поставлены следующие задачи: 1. Изучить морфологические изменения крови клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите на фоне применения кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® 2. Изучить биохимические изменения крови клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите на фоне применения кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® 3. Изучить гистологическую структуру поджелудочной железы на световом уровне, дать морфометрическую оценку у клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием препаратов «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. 4. Изучить гистологическую ультрамикроскопическом структуру уровне, дать поджелудочной морфометрическую железы оценку на у 9 клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. 5. Провести иммуногистохимические исследования поджелудочной железы у клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. 6. Дать анализ экономической эффективности применения кормовых добавок. Научная новизна. Впервые изучено влияние кормовых добавок «Микс-Ойл»® и «Провитол»® на поджелудочную железу свиней при гастроэнтеритах; определены клинические и биохимические показатели крови свиней разных возрастов (45-60 суточный возраст, 85-100 суточный возраст, 180-210 суточный возраст) при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. Проведены гистологические исследования и дана комплексная морфометрическая оценка поджелудочной железы на световом и ультрамикроскопическом уровнях клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. Проведены иммуногистохимические исследования поджелудочной железы у клинически здоровых свиней, при гастроэнтерите и гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. Определен экономический эффект применения кормовых добавок Провитол»® и «Микс-Ойл»®. Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные комплексные экспериментальные данные о динамике клинических и биохимических показателей крови, а также клиникоморфологических изменениях поджелудочной железы расширяют представления о течении гастроэнтерита у поросят-отъемышей и влияния его на поджелудочную железу в динамике возрастного аспекта. Полученные данные могут быть использованы в терапевтической практике ветеринарных врачей, в учебном процессе в качестве материала для лекционных и практических занятий на ветеринарных и биологических факультетах высших и 10 средних учебных заведений. Особую практическую ценность имеет экспериментально доказанное влияние кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® на коррекцию состояний поджелудочной железы при гастроэнтеритах. Гистоморфологических изменения в поджелудочной железе расширяют рамки познания о фармакологических и терапевтических свойствах применяемых кормовых добавок и их влияние на поджелудочную железу при гастроэнтеритах неинфекционного характера. Основные положения, выносимые на защиту: 1. Кормовые добавки «Провитол»® и «Микс-Ойл»® нормализуют показатели гемоглобина, эритроцитов, гематокритного числа к 85-100 суточному возрасту, показатели АСТ, АЛТ, щелочной фосфатазы, α -амилазы крови свиней к 180-210 суточному возрасту. 2. Кормовые нормализовать добавки «Провитол»® сосудистую реакцию и «Микс-Ойл»® и позволяют структурно-функциональную организацию поджелудочной железы при гастроэнтерите свиней к 85-100 суточному возрасту. 3. Использование кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® положительно влияет на ультраструктурную организацию, что проявляется к 85-100 суточному возрасту свиней появлением двуядерных ациноцитов, ациноинсулярных клеток. 4. Применение кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® сокращает производственные экономические расходы и повышает экономическую эффективность ветеринарных мероприятий на рубль затрат. Апробация работы. Материалы и данные, полученные в ходе экспериментальных исследований, внедрены и используются в учебном процессе (при чтении лекций и проведении исследовательской лабораторно-практических работе ФГОУ сельскохозяйственной академии» ВО занятий) «Вятской и научно- государственной 11 Настоящая работа выполнена самостоятельно и является составной частью комплексной программы морфологии и исследований фармакологии ФГОУ кафедры ВО диагностики, «Вятской терапии, государственной сельскохозяйственной академии». Публикации результатов опубликовано 20 исследований. По результатам исследований работ, 4 из которых опубликованы в изданиях, рецензируемых ВАК РФ. Объем и структура работы. Диссертация изложена на 184 страницах и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, библиографию и приложения. Работа иллюстрирована 17 таблицами и 41 рисунками. Список использованной литературы включает 258 источников, из которых 77 зарубежных изданий. 12 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Краткая характеристика биологических особенностей желудочнокишечного тракта свиней Свиноводство – это наиболее скороспелая отрасль животноводства (Минаков И.А., Сабетова Л.А., Куликов Н.И., 2003; Водяницкая С.Н., 1989; Авроров А.А., 1984). Свиньи отличаются многоплодием (за один опорос от свиноматки можно получить до 12 поросят), ранним вступлением в половую зрелость (в 180-210 дней). Продолжительность супоросности составляет 112120 дней, при двух опоросах в год одна свиноматка может дать до 24 поросят. Убойный выход мяса свиней один из самых высоких - 70-85%. При интенсивном откорме подсвинков и реализации их в 8-9-месячном возрасте живой массой 110 кг от одной свиноматки в год можно получить 2 тонны мяса (Анохин Б.М.,1991). Согласно статистическим данным за последние 10 лет распространенность заболеваний пищеварительного тракта увеличилась в два раза (Анохина Г.А., 2007). Пищеварительный аппарат свиньи позволяет ей питаться самыми разнообразными кормами: зерновыми, травяной мукой, отходами мукомольной и маслобойной промышленности (Негреева А.Н., Бабушкин В.А., Сорокина И.А., 2008; Макарцев Н. Г., 2007; Кавардаков В.Я., 2006; Александров С. Н., Прокопенко Е. В., 2004; Кабанов В.Д., 2001; Шарабрин И.Г., 1976). Пищеварение начинается в ротовой полости свиньи, где после пережевывания и обильного смачивания слюной корм подвергается ферментации слюной, главным образом птиалином, переводящим крахмал в моносахара, которые используется организмом. Желудок свиньи по строению является переходной формой от простого к сложному. Размер его вариабелен, так, у подсвинка в 7-8 месячном возрасте на откорме, желудок имеет объем около 7-8 литров (Акаевский А.И., 2003). В желудке пища подвергается воздействию желудочного сока и ферментов, выделяемых железами различных зон слизистой желудка. Зона 13 дивертикула и кардиальная зона выделяют щелочной сок, содержащий диастазы. Фундальная зона вырабатывает соляную кислоту, пепсин, и слабо действующую липазу. Пилорус выделяет нейтральный сок с небольшим содержанием пепсина и большое количество слизи. Кормовые массы, попадая в желудок, испытывают воздействие птиалина и желудочных ферментов (Кабанов В.Д., 2001). По данным, количество слюны, секретируемое у свиней, составляет 10-15 литров в сутки, и зависит от частоты кормления, консистенции и состава корма. Хорошо измельченная и смоченная слюной порция корма проглатывается, попадая в желудок (Кабанов В.Д., 2001). В постнатальный период у поросят наблюдается недостаточная активность желудочного пищеварения, так как в этот период железы желудка поросят слабо выделяют соляную кислоту. В этом случае ферменты поджелудочной железы компенсирует эту недостаточность. С возрастом желудочный сок вырабатывается активнее, в частности, увеличивается выделение соляной кислоты, а протеолитическая активность желудочного сока снижается (Хохрин С.Н., 2004). Для новорожденных в период ранней постнатальной жизни, когда организм не имеет достаточно сформированных систем адаптации, возрастает восприимчивость организма к действию различных факторов внешней среды (Дроздова Л.И., 2018). В исследованиях академика А.В. Квасницкого (2004) доказано, что корм при поступлении в желудок располагается послойно и даже при кормлении жидкими кормами полностью не смешивается. Желудочный сок, пропитывая пищевые массы, соответственно производит расщепление их протеина, что было показано А.В. Квасницким при анализе трех порций пищевых масс желудка свиньи на содержание в них протеина. В нижней части пищевых масс содержалось 8,4 % протеина, в средней – 9,75 %, в верхней – 12,23 %. Жиры в тонком отделе кишечника перевариваются под действием желчи, кишечного сока и ферментов поджелудочной железы. Жиры расщепляются на 14 более простые вещества: глицерин и жирные кислоты, которые, в свою очередь, вступают в реакцию с желчными кислотами, образуя водорастворимые соединения (Базанова Н.У., 1980). Есть данные, что ферментация поджелудочной железы происходит непрерывно. Наиболее высокой пищеварительной активностью он обладает у поросят в возрасте до 20 суток. С возрастом протеолитическая активность сока снижается, здесь существует обратная зависимость с переваривающей силой желудочного сока (Кухаренко Н.С., 1998). Переваривающая активность липазы, как и протеолитического фермента значительно уменьшается с возрастом свиней. Так у поросят-сосунов она характеризуется величиной 80 единиц, а на группе доращивания – 40-50 единиц переваривающей силы (Пашин М.А.,2011) Свиньи одинаково хорошо усваивают корма как растительного, так и животного происхождения, но при этом лучшей усвояемостью обладают корма, для расщепления которых не требуется посредничества микрофлоры (Кавардаков В.Я., 2006) В условиях промышленного свиноводства чаще всего у свиней преобладают концентратные рационы. В хозяйствах, производящих свинину на своих кормах, кроме концентратов свиньям скармливают кормовую и сахарную свеклу, летом – зеленую подкормку, а зимой – комбинированный силос, при откорме свиньям добавляют пищевые отходы и отходы пищевой и молочной промышленности (Александров С.Н., Прокопенко Е. В., 2004). Таким образом, свиньи являются максимально выгодным источником получения полноценного мяса, при этом затраты кормов на прирост живой массы у свиней значительно меньше, чем у других сельскохозяйственных животных. По данным А.Н. Негреева, В.А. Бабушкина(2008) убойный выход у свиней составляет 70-80%, крупного рогатого скота – 50-60%, овец – 45-50%, а стоимость туш, полученных от свиней, составляет 96-97%, от крупного рогатого скота – 90% общей предубойной стоимости животного. 15 1.2 Этиология и патогенез гастроэнтерита у свиней Гастроэнтерит характеризующееся поросят глубокими (Gastroenterititis)— поражениями это заболевание, слизистых оболочек, подслизистого, мышечного, а иногда и серозного слоев желудка и кишечника, расстройствами пищеварения и нарушением других функций организма животных (Бахтин А.Г., 1967). К предрасполагающим факторам относятся снижение кислотности желудочного сока, физические перегрузки, витаминноминеральная недостаточность, действие лекарственных препаратов. По мнению А.М. Колесова (1974) основной и наиболее частой причиной возникновения гастроэнтеритов неонотального является периода слабое жизни. развитие Это молодняка проявляется не еще только в период высокой заболеваемостью диспепсией в подсосный период, также расстройством пищеварения в последующем развитии, низкими среднесуточными приростами. На этом фоне любые, даже незначительные, погрешности в кормлении животных ведут к патологии (Бабушкин В.А., 2008) Часто источником возникновения гастроэнтерита является скармливание недоброкачественных кормов и воды, загрязненных токсичными веществами, грибками. Гастроэнтериты часто развиваются у молодняка после диспепсии при нерациональном лечении или прекращении лечения раньше времени. Следует отметить, что свиньи очень чувствительны к температуре задаваемых кормов, при этом кормление горячими кормами (50-60°С) ведет к нарушению деятельности органов пищеварения. Микрофлора желудочно-кишечного тракта повышает свои патогенные свойства в большинстве случаев при ослаблении иммунитета организма, при нарушении ветеринарно-санитарных условий содержания (Яковенко Э.П., 2009). Свиньи часто заболевают гастроэнтеритом при отъёме от свиноматок, резкой смене рациона, отсутствии и недоброкачественном состоянии воды. Воспаление желудочно-кишечного тракта возникает при поедании кормов с механическими примесями (песок, земля, куски дерева, стекло, бумага и др.). Также причиной заболеваемости поросят может служить аутоинтоксикация 16 супоросных свиноматок. При кормлении свиней рационом с большим количеством растительных белков и отсутствием углеводов, при ограниченной подвижности животных, происходит неполное расщепление белков корма в пищеварительном канале, в результате чего недоокисленные продукты накапливаются в организме, вызывая интоксикацию (Ефимов А.А., 1977). Возникает нарушение кислотно-щелочного баланса, с последующим развитием ацидоза, кетоза и прочих заболеваний. У свиноматок снижается барьерная функция кишечника и печени, при этом нарушаются обменные процессы в организме: углеводный, жировой и белковый, работа центральной нервной системы и других систем организма (Никольский В.В., 1989). Нарушается функция всасывания веществ через слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта, в результате чего токсичные вещества попадают в кровеносное русло, а затем в молоко и желудочно-кишечный тракт поросят (Зубец Н.А., 1978). В свиноводстве появлению гастроэнтерита способствует дача кормов с недостатком витаминов, лизина, лецитина, кальция, фосфора; выпойка холодной или загрязненной воды (Ганиева С.Р., Токарев И.Н., 2014). При недостатке аскорбиновой кислоты отмечается угнетение секреторной и моторной функций желудочно-кишечного тракта, нарушаются ферментативные процессы в кишечнике и повышается порозность сосудистой стенки, в дальнейшем развиваются атрофические и дегенеративные изменения в клетках, особенно в ядрах эпителия слизистой оболочки тонкого отдела кишечника, уменьшается количество гликогена в мышцах и печени, что потом может вызвать снижение концентрации глюкозы в крови и уменьшить синтез антител на 90% (Петрянкин Ф.П., 2012; Гнатюк С.И., 1998). У поросят заболевания часто проявляется на фоне дефицита железа в организме, что приводит к развитию анемий (Бахтин А.Г, 1967). В глубоких участках либеркюновых желез слизистой оболочки кишечника находится камбиальний слой, где происходит рост эпителиальных клеток, смещающихся на вершины ворсинок и замещающих омертвевшие клетки. Полное обновление 17 эпителиальных клеток кишечника происходит за 1,5 суток. При недостатке железа замещение дистрофические эпителиальных процессы в клеток слизистой замедляется оболочке, и возникают сопровождающиеся снижением ее барьерной функции (Воронов А.Н., 1989). Предрасполагающим фактором гастроэнтеритов являются несоблюдение режима микроклимата, (повышение ветеринарно-санитарного относительной влажности воздуха состояния до 87-90%, помещений снижение температуры помещения ниже 19°С, превышение уровня концентрации аммиака и сероводорода до 20 мг/л) (Никольский В. В.; Божко В. И., 1989) Вторичные этиологические факторы гастроэнтеритов у свиней - это условно-патогенная микрофлора, такая как: кишечная палочка, протей, аэрогенная бактерии и другие. При гастроэнтеритах изменяются условия внутренней среды, влияющие на развитие микрофлоры и ее свойства. При этом нарушается пристеночное клеточное пищеварение, в зоне щетинкового обрамления отсутствует доступ микробов к расщепленным питательным веществам, как следствие всего этого происходит стремительное размножение гнилостных микроорганизмов, которые продуцируют токсичные продукты, что ведет к нарушению обмена и, как следствие, снижается резистентность организма (Бучко О.М.,2015) По мнению ряда авторов Н.И. Цвилиховського, В.А. Грищенко, В.А. Бондаря (2000), при нарушении пищеварения уменьшается количество молочнокислых бактерий и увеличивается количество кишечной палочки, протея, а также кокковой, спорообразующей и гнилостной микрофлоры. Следует отметить, что некоторые микробы, заселяющие пищеварительный канал свиней, синтезируют полезные для организма вещества (инозит, биотин, рибофлавин, никотин, пиридоксин, пантотеновую и фолиевую кислоты.). По наблюдениям ученых, гастроэнтериты чаще всего регистрируют в зимне-весенний период. Это обусловлено нарушениями параметров микроклимата, плохим кормлением, снижением естественной резистентности животных (Гнатюк С.,1998; Петрянкин Ф.П., 2012). 18 Также гастроэнтериты регистрируют в критические периоды жизни поросят. В это время у молодняка довольно часто нарушается функция органов пищеварения, а в результате нехватки в рационах микроэлементов, витаминов, белков изменяется обмен веществ. Сравнивая особенности иммунной реактивности в постнатальном онтогенезе молодняка, можно выделить три критических периода, проявляющихся иммунным дефицитом (Тельцов Л.П., 1990, 1991, 1996, 1997). Первый отмечается у новорожденных животных, у которых до приема молозива почти отсутствуют иммуноглобулины и мало лейкоцитов. Он развивается при запоздалом приеме или поступлении физиологически неполноценного молозива. При этом у молодняка нарушается формирование местной и системной защиты и возникают массовые желудочно-кишечные заболевания, гипопластическая анемия, связанные с развитием дисбактериоза, нарушением образования витаминов группы В, С, фолиевой кислоты, усвоения железа, кобальта, меди (Тельцов Л.П., 1998, 2000,). Второй возрастной иммунодефицит отмечается у поросят в 5-14 дневном возрасте постнатального периода развития. Принято считать, что в этот период для поросенка считается наиболее критическим, поскольку большинство антител, полученных с молозивом, расходуется, а активное продуцирование собственных иммунных факторов остается невысоким. В это время на фоне снижения иммунной реактивности при нарушениях в кормлении и содержании легко возникают желудочно-кишечные болезни (Тельцов Л.П., 2001) Третий критический период, сопровождающийся развитием иммунного дефицита, обусловлен резким переходом молодняка с молочного на другой тип кормления, что ведет к нарушению пищеварения и возрастанию нагрузки кормовых антигенов на местную защиту, вследствие чего в пристеночной слизи кишечника снижается количество иммуноглобулина А и полезная микрофлора гибнет (Тельцов Л.П., 2003). У животных наблюдается расстройство пищеварения, развивается кормовая аллергия, на фоне которой возникают гастроэнтериты и 19 колиэнтеротоксемия (Карпуть И.М., 1993; Растунова Г.А., Щербакова Э.Г., Круглова И.С., 1981) Технологические особенности отъема и передачи поросят для доращивания с интенсивными и разнообразными стрессовыми воздействиями, а также последующее их содержание и кормление, накладывают отпечаток на характер и интенсивность желудочно-кишечных заболеваний (Плященко С.И., Сидоров В.Т., 1983; Чумаченко В.В., Чумаченко В.Е., 1991; Буянов А.А., 1993). По течению гастроэнтериты делят на острые и хронические, по этиологии - на первичные и вторичные. Первичные возникают по указанным выше причинам, а вторичные - при различных инфекционных заболеваниях, инвазионных в заболеваниях, заболеваниях полости рта, изменении зубов, при переходе воспалительного процесса из желудка на кишечник, заболеваниях печени и поджелудочной железы, нарушении обмена веществ. По характеру поражения гастроэнтериты делятся на катаральные, геморрагические, фибринозные (крупозные и дифтеритические), флегмонозные и смешанные (Ефимов А.А., 1977). По данным А.Г. Бахтина (1967), при механическом, химическом и термическом воздействиях на рецепторы желудка и тонкого отдела кишечника, меняется их секреторная функция и, в зависимости от степени раздражения нервных окончаний, секреция желез желудка и кишечника тормозится или усиливается, при этом возникает воспаление слизистой оболочки. Патогенез гастроэнтерита сложный, неодинаковый при различных формах заболевания. Под действием одной или нескольких указанных причин происходит развитие болезни на фоне ослабленной резистентности организма и усиления жизнедеятельности в пищеварительном тракте условно-патогенной микрофлоры. При этом нарушается возбудимость нервно-мышечного аппарата желудка и кишечника, выражающиеся резким усилением перистальтики на почве воздействия различных этиологических факторов, что сопровождается расстройством гемодинамики пищеварительного аппарата и развитием 20 воспалительных процессов в стенке желудка и кишечника (Ефимов А.А., Полушин Г.В., Ляху В.А., 1977). При значительном проявлении воспаления усиливается секреция слизи в полость кишечника, ослабевает его переваривающая способность, образуются продукты неполного распада, которые являются обычно токсическими для организма, создаются благоприятные условия для активизации условнопатогенной микрофлоры, ухудшающей течение болезни. Наиболее тяжело протекают фибринозный, сопровождающиеся геморрагический воспалительными и язвенный процессами и гастроэнтерит, значительной выраженностью общей реакции организма. Наступающий спазм пилоруса, усиление или даже расслабление стенок желудка обостряют желудочные боли. Раздражение слизистой оболочки желудка возбуждает рвотный центр, что нередко вызывает отрыжку и рвоту (Данилевская Н.В., 2003) Развитие патологического процесса в желудке и тонком отделе кишечника ведет за собой нарушение функции печени и поджелудочной железы, что влияет на моторику желудочно-кишечного тракта (Ахмятзянов Ф.Х.,1966). Снижается удобоваримость кормов, замедляется всасывание питательных веществ, и как следствие, развиваются гнилостные и бродильные процессы, создающие благоприятные условия для размножения микрофлоры и в дальнейшем интоксикации организма. Продукты метаболизма и микробные токсины всасываются в организм через поврежденные слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта, проходят нарушенный печеночный барьер и вызывают поражение центральной нервной системы, а также сердца и почек. Снижается секреция желчи и панкреатических ферментов. Токсичные вещества, всасываясь в кровь, действуют возбуждающе на нервные окончания, усиливая перистальтику и ускоряя движение кормовых масс, в результате чего замедляется всасывание питательных веществ и развивается профузная диарея (Воронов А.Н., 1989). А.В. Коробов (1978) определил время прохождения кормовых масс по желудочно-кишечному тракту у больных и здоровых животных, и пришел к 21 выводу, что у больных животных прохождение кормовых масс по времени в два раза дольше, чем у здоровых животных. Исходя из всего вышеперечисленного, можно сделать вывод, что основными патогенетическими факторами гастроэнтерита поросят является воспаление, токсикоз, водно-минеральный дисбаланс, иммуносупрессия, повреждение слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, патология секреции ферментов, нарушения лимфо- и кровообращения, стресс и прочее (Сороколетова В.М., 2005; Урбан В.П., 1981). 1.3 Клинико-патоморфологические изменения при гастроэнтерите 1.3.1 Клиническая картина, морфологические и биохимические показатели крови при гастроэнтерите Клинические признаки гастроэнтерита зависят от силы и продолжительности действия этиологических факторов (Гнатюк С.И., 1998). Заболевания поросят чаще возникает в отдельных гнездах, принимая в дальнейшем массовый характер. Более тяжелое течение заболевания с высокой летальностью наблюдается чаще в хозяйствах с нарушением зоогигиенических правил выращивания поросят. Больные животные становятся вялыми, апатичными, аппетит снижается или вовсе отсутствует, кожа приобретает сероватый цвет, щетина взъерошенная, матовая. Слизистые оболочки глаз, носа, рта становятся анемичными, иногда с иктеричным оттенком, отмечается извращение аппетита (Воронов А.В., 1989). Н.Н. Андросик и С.С. Липницкий (1982) отмечают, что один из основных признаков гастроэнтерита поросят - стойкий профузный понос. Перистальтика усилена, дефекация частая. Кал жидкий, зловонный, содержит слизь и продукты воспаления - фибрин, слизистые сгустки, частицы омертвевших тканей и другое. При геморрагическом гастроэнтерите в кале обнаруживают кровь, которая окрашивает его в темно-красный цвет; при крупозном - плотные сгустки фибрина; при дифтеритическом - кровяные сгустки, крошковатые массы фибрина; при гнойном и флегмонозном - гной, слизь, кровь, частицы 22 омертвевших тканей. Реакция фекалий вначале кислая, затем становится щелочной. Температура тела в разгар заболевания, по данным В.М. Данилевского (1983), в пределах нормы (38-40°С) или повышена на 0,5 - 1,0°С. У поросят в начале болезни отмечается обильная саливация, изо рта выделяется пена, наблюдаться позывы к рвоте. У большинства животных в первые часы развития гастроэнтерита М.А. Пашин (2011) отмечал рвотные движения или рвоту, которые в последующем прекращались. В рвотных массах обнаруживался слизисто-геморрагический экссудат, иногда желчь. Больные поросята плохо передвигаются, больше лежат, отмечается полидипсия, иногда рвота. При пальпации живот болезненный. Поросята быстро худеют, их среднесуточный прирост снижается на 43% по сравнению со здоровыми животными. При клиническом исследовании отмечается сухость и складчатость кожи. Бока западают, брюхо подтянутое, дефекация становится болезненной. Аппетит при этом снижается, поросята становятся более заторможенными. Изменяется цвет слизистых оболочек в сторону анемичного. Учащается пульс - 160-180 сокращений за 1 минуту, тоны сердца глухие, сердечный толчок ослаблен, иногда отмечается расстройство сердечного ритма с явлениями экстрасистолии. Дыхание частое - до 60 за 1 минуту, поверхностное, затрудненное. Отмечается конъюнктивит, конечности и уши холодные, иногда наблюдается дрожь всего тела, парезы задних конечностей, потеря тактильной чувствительности, западание глазных яблок (Локес П.И., 1992; Косенко М.И., 2000). В большинстве случаев каловые массы размягчены, разовое их выделение уменьшено, но дефекация ускорена. В каловых массах обнаруживается слизь и непереваренные частицы корма. Перистальтические шумы при поражении желудка ослаблены, а кишечника, напротив, усилены, при этом животные часто тужатся, выделяют лишь небольшие порции жидкого кала и слизи. Нарастает симптоматика обезвоживания, в результате чего у них западают глаза, нарушается тургор кожи, щетина становится матовой, жесткой, сухой и 23 взъерошенной. Как отмечал В.М. Данилевский (1983) и И.М. Кapпуть с соавторами (1989, 1990, 1997), при течении гастроэнтерита на 2-3 день болезни резко ухудшается общее состояние больных поросят, они быстро худеют, могут появляться фибриллярные подергивания мускулатуры. С развитием интоксикации депрессия может нарастать до коматозного состояния (Анохин Б.М., Данилевский В.М., Замарин Л.Г.,1991). Появляются симптомы поражения нервной системы: дрожание конечностей, частичная потеря ориентации, парез глотки, приступы тонических судорог. У некоторых животных наблюдается развитие экзематозных поражений: красные высыпания выступают у поросят главным образом в области промежности и на брюшной стенке. В дальнейшем, пораженные экземой места покрываются сплошными струпьями, которые держатся длительное время (20-30 суток) (Бахтин А.Г., 1967). При нарушении пищеварения уменьшается количество молочнокислых бактерий и увеличивается количество бактерий группы кишечной палочки, протея, а также кокковой, спорообразующих и других микроорганизмов (Косенко М.И., 2000). У больных животных прогрессивно снижается количество гликогена, в нервной системе нарушаются обменные процессы. Поражаются эпителиальные клетки печени, ухудшается обмен углеводов, белков и липидов, уменьшаются показатели содержания глюкозы, протромбинового индекса, уровня стеркобилина в кале. В тонком кишечнике атрофируется щетинковая кайма, снижается активность щелочной фосфатазы и содержание аденозинтрифосфорной кислоты на поверхности эпителиальных клеток. Накапливаются различные метаболиты-кислоты (уксусная, молочная, масляная), газы (углекислота, азот, водород, метан, сероводород), конечные продукты белкового обмена (индол, скатол, аммиак, сероводород). Расстройство секреции и всасывания приводит к нарушению водного, электролитного и белкового равновесия (Ефимов А.А., 1977; Данилявичюс Э.И, 1997). 24 При желудочно-кишечных расстройствах с признаками диареи у поросят разных возрастов происходят глубокие изменения со стороны гематологических показателей крови (Киричко Б.П., 2008). В результате длительного и изнурительного поноса у поросят нарастают признаки обезвоживания организма и сгущение плазмы крови. Однако при подсчете эритроцитов и лейкоцитов наблюдается их значительное снижение, соответственно 3,0 млн./мл и 6 тыс./мл, что объясняется действием токсинов, продуцируемых желудочно-кишечной микрофлорой и продуктами воспаления. Также наблюдается снижение количества гемоглобина - до 68,8 ±5,1 г / л. При анализе лейкограммы больных животных больше всего подвержены изменениям нейтрофилы и лимфоциты. При этом характер этих изменений зависит от тяжести течения болезни. Так, у больных наблюдается увеличение количества сегментоядерных нейтрофилов и уменьшение количества лимфоцитов. Установлено, что количество моноцитов и базофилов не изменяется, по сравнению со здоровыми животными (Дегтярева И.И., 2004). По данным В.В. Никольского (1989) гематологические показатели в зависимости от течения заболевания характеризуется снижением количества эритроцитов, нейтрофильным лейкоцитозом, снижением содержания гемоглобина, резервной щелочности и сахара. Если заболевание возникло на фоне дефицита железа и кобальта в организме или авитаминозов, то содержание гемоглобина и эритроцитов резко снижается. У больных животных в лейкограмме отмечали снижение количества эозинофилов, а также появление миелоцитов и регенеративный сдвиг ядра влево (Мантатова Н.В., Танхаев С.Р., 2018). При гастроэнтерите ярко выражен дефицит тиамина, показатель которого резко снижается и находится в крови в пределах 0,01-0,018 мг%. Как следствие, нарушается синтез высокоэнергетических фосфорных соединений. Содержание аскорбиновой кислоты уменьшается в 3-4 раза (до 0,6 мг%), что способствует снижению фагоцитарной активности лейкоцитов до 18,0. У некоторых животных наблюдается недостаток рибофлавина, который проявляется 25 повышенной фоточувствительностью, анемичностью кожного покрова. Количество рибофлавина в крови снижается до 0,07 мг%. В плазме крови у больных поросят снижено содержание калия и натрия - в среднем до 14,3мг% и 342 мг% соответственно. Резервная щелочность снижается до 340 мг%, задерживается СОЭ в 2-2,5 раз, количество сахара в среднем составляет 64 мг%. Наблюдается уменьшение лизосомально-катионных белков гранулоцитов, характеризующееся снижением лизосомально-катионного теста и является показателем тяжести и длительности болезни (Щербакова Э.Г., 2004). Эритропоэз при желудочно-кишечной патологии идет по нормобластичному типу с торможением фазы созревания полихроматофильных клеток и особенно оксифильных эритробластов. В лейкобластическом ряде миелограмм в зависимости от тяжести заболевания отмечаются сдвиг нейтрофилов вправо и уменьшение количества эозинофильных клеток (Панин А.Н.,1993). 1.3.2 Патоморфологические изменения в органах пищеварения при гастроэнтерите Для первой стадии гастроэнтерита характерны сосудистые расстройства в большинстве тканей внутренних органов, особенно фундальной части желудка, тонкого отдела кишечника, печени, поджелудочной железе. Происходит резкая гиперемия и стаз в мелких кровеносных сосудах и капиллярах, их эндотелий набухает и десквамируется, аргарофильные фильтрующие мембраны лизируются. Наблюдаются диапедезные кровоизлияния и периваскулярные отеки. Все эти изменения свидетельствуют о значительной порозности сосудистых стенок под влиянием токсических продуктов, поступающих в кровь из желудочно-кишечного тракта (Кудряшов А.А., 2005) При патологоанатомической диагностике основные изменения отмечаются в желудочно-кишечном тракте. Слизистая оболочка желудка серого или серо-бурого цвета (бледно окрашена), утолщена и уплотнена, с поверхности складчатая, шероховатая, с углублениями. Она покрыта слоем 26 густой, вязкой, плохо смываемой водой, слизью серо-белого цвета.Гистологически сосудистая реакция усилена, отмечается воспалительная гиперемия, эмиграция лейкоцитов, диапедезные кровоизлияния и периваскулярные отеки (Пальцев М.А., 2001) Железистая ткань гастродуоденальной системы чаще атрофирована (атрофический катар), реже наблюдается одновременная гиперплазия соединительной и эпителиальной тканей, включая подслизистый слой (гипертрофический катар) (Жуков В. М. 2006). По данным А.И. Струкова (2010) и В.В. Серова (2010) при атрофическом катаре наблюдаться дистрофия и некроз клеток железистого эпителия в слизистом слое. Сохранившиеся железы располагаются группами, протоки желез расширены, отдельные виды клеток в железах плохо дифференцируются. В связи с мукоидизацией желёз секреция пепсина и хлористоводородной кислоты нарушается. Слизистая оболочка желудка инфильтрирована лимфоцитами, плазматическими клетками, единичными нейтрофилами. К этим изменениям присоединяется перестройка эпителия, причем метаплазии подвергается как поверхностный, так и железистый эпителий (Струков А. И., Серов В. В., 2010). При хроническом процессе в толще слизистой оболочки (между железами желудка, в подслизистом слое) отмечается разрастание грубоволокнистой соединительной ткани, бедной клеточными элементами. В основном она представлена коллагеновыми волокнами, небольшим количеством фибробластов, гистиоцитов и плазматических клеток. Рост соединительной ткани идёт из подслизистого слоя. В мышечном слое отмечается гипертрофия мышечных пучков, иногда разрастание межмышечной соединительной ткани. В серозной оболочке изменений нет (Боль К.Г.,1938). Печень чаще не увеличена, может иметь дряблую консистенцию, быть морщинистой, бледно-желтого, глинистого или бурого цвета, с точечными геморрагиями. Желчный пузырь переполнен вязкой желтовато-зеленой желчью, либо полупустой (Кухаренко Н.С., 1995). 27 При микроскопии печени выявляется преобладание клеточной инфильтрации и белковой дистрофии гепатоцитов, балочная структура нарушена, сосуды гиперемированы (Реутова Е.А., 2005). Макроскопически в начальных фазах на 1 - 3-и сутки гастроэнтерита, поджелудочная железа может быть незначительно увеличена в объёме, несколько уплотнена, рисунок ткани на разрезе сглажен, дольковая структура строения стёрта. Иногда наблюдается прогрессирующая некротизация тканей с дальнейшим склерозированием, постепенный распад лейкоцитов и смена клеточного состава воспалительного инфильтрата гистиоцитарными лимфоплазмоклеточными элементами (Струков А. И., Серов В. В., 2010). Отмечается пролиферация мелких протоков, которая практически никогда не завершается регенерацией ацинусов поджелудочной железы. Исходом может стать диффузно-очаговый фиброз, а также липоматоз железистой ткани. Крупные очаги некроза этой локализации нередко подвергаются диффузному расплавлению и секвестрации с образованием абсцесса (внутриорганного, сальниковой сумки) или ложной кисты. В кишечнике отмечается картина острого или хронического катара. Слизистая оболочка покрыта трудносмываемым, густым, тягучим, полупрозрачным слизистым отделяемым, иногда с мутными хлопьями или тяжами (слущенный эпителий, лейкоциты и т.д.); несколько разрыхлена, набухшая, отёчная, пятнисто или полосчато гиперемирована, по складкам усеяна кровоизлияниями. Реже на слизистой кишечника видны эрозии. В лёгких случаях гиперемия отсутствует, а набухание и обильное отделение слизи наоборот выражены (Жаров А.В., 2013). Гистологическое исследование показывает расширение границ слизистой, утолщение ворсинок, с частичной или полной десквамацией эпителия на концах последних. Отсутствуют клетки эпителия и в верхних отделах крипт, видны лишь концы. В соединительной ткани слизистой и ворсинок - сосуды расширены и переполнены кровью. Границы лимфоидных узелков в слизистой 28 утолщены, их герминативные центры размножения расширены и бледны Кухаренко Н.С., 1995). На поверхности слизистой и между ворсинками находится катаральный экссудат, который содержит слущенные, распавшиеся клетки покровного эпителия, лежащие по одной или группами; серозный экссудат с примесью слизи (имеет зернистый или нитчатый вид); единичные полиморфноядерные лейкоциты, лимфоциты, эритроциты и другие клетки воспалительной реакции. Сохранившийся эпителиальный покров в состоянии слизистой дистрофии, определяемой по большому количеству бокаловидных клеток. Дистрофическим и некротическим изменениям подвергается также эпителий верхних отделов крипт, в глубине крипты сохраняются без изменений или со слабовыраженной зернистой и жировой дистрофией. Соединительная ткань слизистой и ворсинок инфильтрирована серозным экссудатом, лейкоцитами и лимфоцитами. При отёке подслизистой её границы расширены, сосуды гиперемированы, в окружности сосудов кровоизлияния или пролифераты из лимфоидных и гистиоцитарных клеток (Жаков В.С., 1992). 1.4. Лечение гастроэнтерита у свиней Лечение поросят, больных гастроэнтеритом, проводят с учетом принципов активности, физиологичности, комплексности и курсовой терапии, индивидуального подхода и экономической целесообразности (Пивовар Л.М., 1990). При появлении заболевания устраняют предполагаемые или выявленные этиологические факторы. Больных выделяют в отдельную группу, обеспечивают им хорошие условия содержания и проводят курс лечения, исходя из этиологии, степени поражения желудочно-кишечного тракта, процента поражения. В промышленных комплексах при заболевании более 20 % животных проводят общие мероприятия, касающиеся кормления и эпизоотологической ситуации. 29 Сразу после установления диагноза назначают голодный или полуголодный режим со свободным доступом к воде (Карпуть И.М. с соавт., 1989).В зависимости от показаний в комплексное лечение включают этиотропную, патогенетическую, симптоматическую терапию и устранение дисбактериоза кишечника и сопутствующей дегидратации. В качестве вяжущих средств по данным В.М. Данилевского (1983), целесообразно применять за 20-30 минут до кормления отвар дубовой коры (15: 20) - 10-15 мл; настой ольховых шишек - соплодий (1: 20) - 15-20 мл; отвар корней шиповника (1: 10) - 25-30 мл; отвар корней (1: 50) или настой травы щавеля конского (1: 20) - 20-25 мл; отвары корневища или корней кровохлебки лекарственной, корневища горца змеиного, корневища лапчатки прямостоячей (1: 20) - 15-20 мл: отвар плодов черемухи (1: 10) - 20-25 мл; настой зверобоя продырявленного (1: 20) мл; отвар корневища толстолистого (1: 10) - 10-15 мл. С целью очищения кишечника применяют слабительные средства (минеральные соли, масла, очистительные клизмы), затем задают обволакивающие препараты. В качестве обволакивающих рекомендуется применять 2-3 раза в день за 20-30 минут до кормления свежеприготовленный отвар семян льна (1: 30) в теплом виде 20-25 мл; отвар и настой цветков и листьев мальвы лесной (1: 20) - 20-25 мл; настой листьев мать-и-мачехи (1: 40) 20-25 мл; отвар корней алтея лекарственного (1: 20) - 20-30 мл (Клименко В.В., 2002; Сидоров А.М., 2001; Шахов А.Г., 1998). Одновременно применяют противобродильные средства и препараты угнетающие гнилостные процессы в желудочно-кишечном тракте. В числе этих средств основное значение имеют антибиотики и сульфаниламиды. Применяя антибиотики, необходимо учитывать чувствительность к ним микрофлоры кишечника больных животных в данном хозяйстве (Ковалев В.Ф., Волко И.Б., Виолин Б.В., 1988). Леляк А.И. (2003) рекомендует применять антибиотики последних поколений синтетической природы. Можно применять внутрь 3 раза в день на 1 кг живой массы следующий вещества: синтомицина - 0,02 г, тетрациклин, 30 биомицин - по 0,015 г, биоветин - 0,06 г, левомицетин - 0,02 г, колимицин 0,015г, полимиксин - 4 мг, террамицин - 0,015 г, пропомицин - 10-15 мл на прием. Из сульфаниламидов рекомендуется норсульфазол, сульфазол, фталазол, сульфантрол по 0,02 г 3 раза в день (Ковалев В.Ф., Волков И.Б, Виолин Б.В., 1988). С целью устранения дисбактериоза и подавления кишечной микрофлоры И.М. Карпуть (1989) также рекомендует применять нитрофурановые препараты (фуразолидон 3-4 мг/кг не более 5-6 дней подряд). Более эффективно их комплексное применение с препаратами других групп: МОФ (метронидозол + фуразолидон), белиз-2, бактерин-SL, нифулин, фураклин, трибрисен, тримеразин, метаветрим, фураксин, лаутецин и др. (Волков И.Б, 1988). По мнению А.Л. Засыпкина (2016) включение в рацион свиней кормовых добавок, содержащих в составе витамины группы В, предотвращает окислительный процесс при различных стрессах; оказывает на организм животных комплексное общеукрепляющее и антистрессовое действие; повышает усвояемость комбикорма. В.А. Телепнев (1980) отмечает выраженный терапевтический эффект при гастроэнтеритах поросят после применения витамина U в дозе 5 мг/кг массы. В лечении заболевания необходимо применение всего комплекса неспецифических иммуностимулирующих препаратов (Корнева Е.А., Мекоян В.А.; 1982; Кассич А.Ю. 1990; Карпуть И.М., 1993). Для этих целей применяется: гамма-глобулин или цитрированная кровь внутримышечно, гидролизин Л-130 (Андросик Н.Н., Липницкий С.С., 1982), пептидные биорегуляторы (полученные из тимуса, костного мозга и синтетические) (Медуницин Н.В., Литвинов Р.И., Мороз А.М., 1980; Алвердиев Г.Р., 1992; Лютинский С.И., 1992., Ершов Ф.И, Малиновская В.В., 1996), небольшие дозы ультрафиолетового облучения, ультрозвуко - и магнитотерапия (Карпуть И.М., Пивовар Л.М. и др., 1990), витамины А, Е, С (Карпуть И.М., 1993). В последние годы все большее значение в качестве альтернативы антибиотиков приобретают пробиотические и пребиотические препараты, 31 применение которых в свиноводстве является принципом решения проблемы получения высококачественной продукции (Gibson et all., 1999; Bouhnik et all., 2004). Особенно это важно для поросят-отъемышей, у которых пищеварительный тракт еще только развивается (Андреева А.В., Баишева Г.И., 2012; Черненок Ю.Н., 2009; Ohashi Y., 2009; Leser T.D., 2002). Применение пробиотиков в комбикормах и рационах для свиней способствует улучшению использования питательных веществ корма и повышению микрофлору, продуктивности, секреторную и они оказывают ферментативную влияние на активность кишечную желудочно- кишечного тракта животных и в целом активизируют его функциональную активность (Походня Г. С., 2016; Алексеев И.А., 2014; Войтенко О.С., 2014; Манжурина О.А., 2015; Мошкутело И.И., 2015; Некрасов Р.В., 2015; Шамилова Т.А., 2013; Castagliuolo, Riegler M.F.,. Valenick L, LaMont J.T., Pothoulakis C., 1999). Пробиотические препараты оказывают заметное стимулирующее влияние на иммунологический статус, способствуют нормализации биохимических показателей сыворотки крови животных, восстановлению кальциево- фосфорного соотношения, снижению активности щелочной фосфатазы (Малик Н.И. и др., 2001; G. Rychen et al., 1993; Chen Y.J., Min B.J., Cho J.H., Kwon O.S., Son K.S., Kim I.H., Kim S.J., 2006; Cho J.H., Zhao P.Y., Kim I.H., 2011). Научно-технический прогресс в животноводстве приводит к появлению новых или разновидностей ветеринарных пробиотиков и пребиотиков. Они эффективно подавляет патогенную и условно патогенную микрофлору кишечника у свиней, способствует высокой скорости роста, формирует и стабилизирует нормальную здоровую микрофлору пищеварительного тракта у свиней и поросят (Miller and Wolin, 1981; Veilleux and Rowland, 1981; Edwards et al., 1985; Gibson et al., 1988; MacFarlane et al., 1989; Molly et al., 1993; Veenstra et al., 1993). По мнению ряда авторов, процесс гистологического созревания всех слоёв пищеварительного канала происходит быстрее и эффективнее у свиней, 32 которым с кормом давали пробиотические препараты. (Babinska et al., 2005; Bai et al., 2013; Dalloul et al., 2003; Deng et al., 2012; Lee et al., 2010; Levkut et al., 2012; Pirarat et al., 2011; Roselli et al., 2009; Scharek et al., 2007; Hou C., 2014). Пробиотико-пребиотические препараты нормализуют обмен веществ, производят биологически активные вещества - витамины, аминокислоты и молочную кислоту, профилактируют желудочно – кишечную патологию поросят и свиней (Quilodran-Vega S.R., 2016; Wang A.N., 2013; Giang H.H., 2011; Verdenelli M.C., 2009; Walker W.A., 2009; Estienne M.J., 2005; Marteau, 2001; Jensen B.B., 1998). Одно из таких средств — кормовая добавка «Провитол»®, разработанный специалистами компании «БИОТРОФ» (регистрационный номер ПВР-27.11/02755). Она обладает антибактериальным, ферментативным и пробиотическим действием. Входящие в состав «Провитола» эфирные масла, экстракты растений и комплекс живых бактерий подавляют развитие патогенов и тем самым нормализуют микрофлору желудочно-кишечного тракта (В. Большаков, Н. Новикова, В. Солдатова, 2013). Натуральный заменитель кормовых антибиотиков «Микс-Ойл» ® (регистрационный номер ПВР-2-9.11/02745) - это кормовая добавка для повышения сохранности молодняка и увеличения продуктивности сельскохозяйственных животных и птицы. Смесь натуральных эфирных масел в составе кормовой добавки обладает антимикробной активностью, антиоксидантным действием и противовоспалительным эффектом. «Микс-Ойл» подавляет развитие патогенной микрофлоры в желудочнокишечном тракте животных и птицы; способствует нормализации процессов пищеварения, повышению перевариваемости и усвояемости питательных веществ рациона; способствует повышению продуктивности и восстановлению здоровья у животных. Использование препарата позволяет снизить или даже полностью исключить применение антибиотиков. Препарат улучшает микрофлору кишечника, препятствует попаданию инфекции в желудочно-кишечный тракт, 33 помогает животным снимать стрессовое состояние, вызванное сменой рациона и сердечно-сосудистыми заболеваниями (Лаптев В.Н., Большаков Г.Ю., Солдатова В.В., 2012). 34 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 2.1 Схема и условия проведения опыта Исследования проводили в период с 2012 года по 2015 год на базе СПК «Красное знамя», Куменского района, Кировская область. Объектом исследования были свиньи крупной белой породы от момента отъема до конца периода откорма. Кормление поросят-сосунов, до 27 суточного возраста, производилось готовыми престартерными комбикормами, затем, вплоть до отъёма, СК-3 (готовый стартерный комбикорм № 3) второго периода. Перевод с одного вида корма на другой осуществлялся плавно, в течение 3 – 5 суток. Приучение поросят к комбикорму начиналось с 5 суточного возраста в станки размещались тарелки и в них задавалось небольшое количество комбикорма, который менялся в течение дня, по мере загрязнения или увлажнения, но не менее 4 раз в сутки. Поение животных осуществлялось при помощи сосковых поилок, температура воды для поения была не менее 18°С. Доступ к воде не ограничивался. Поросята-отъемыши размещались в секторах. Заполнение сектора производилось поголовьем в возрасте 45-60 дней, средним весом одного животного 9-11 кг, в течение 3 недель. Период содержания на доращивании составлял 65 – 80 суток, количество животных в клетке 24-25. Поросятам, в зависимости от возраста, скармливалось три вида сухого корма. В сектора корм поступал при помощи шайбового транспортёра. В течение 3 дней шла смесь СК-3 и СК-4 (1:1), затем, использовался СК-4, и далее до конца цикла СК-5. Поение поросят производилось также из автоматических сосковых поилок, температура воды не менее 18°С. Кормление свиней на откорме осуществлялось жидким кормом СК-6, с учётом фактической поедаемости (влажность корма не более 75-76 %, кислотность не более 50Т, температура подаваемой смеси 42-45°С). В течение первых 3 суток после приемки животным раздавались сухие корма, вручную, для приучения к кормушке, формированию логова и профилактики стресса при переводе на жидкое кормление. Затем, в течение 35 недели, 2 раза в день в кормушки подавался жидкий корм в сочетании с сухим комбикормом. До 30 суток содержания на откорме свиней кормили дважды в день, а с 31 дня – 3 раза в день. Объектом исследования послужили поросята-отъемыши в возрасте 45-60 дней и живой массой 10-12 кг. Были сформированы 4 группы по принципу групп-аналогов среди поросят-отъемышей по 15 животных. Первую группу составили клинически здоровые животные; вторую - животные с явной клинической картиной гастроэнтерита (на фоне стандартных схем лечения хозяйства); третья и четвертая - животные с явной клинической картиной гастроэнтерита и применением на фоне течения болезни кормовых добавок «Провитол» (3 группа) и «Микс-Ойл» (4 группа). Расчет доз кормовых добавок проводился исходя из средней нормы скармливания на голову. Добавки замешивались ручным способом с комбикормом непосредственно перед скармливанием. Корректировка доз кормовых добавок проводилась трехкратно исходя из изменения средней нормы скармливания (Таблица 1). После окончания откорма (180-210суток) животных, средним весом 111122 кг, производили убой и проводился отбор материала для дальнейших исследований (Рис. 1). Таблица 1- Показатели расхода комбикормов и дозы кормовых добавок Провитол® и Микс-Ойл® в ходе опыта Возраст поросят, суток 45-60 55-70 65-80 Вид комбикорма Количество комбикорма, кг/сут на голову Количество комбикорма на 15 голов,кг/cут СК-4* СК-5* СК-5* 0,75 1,05 1,45 11,25 15,75 21,75 *СК-стартерный комбикорм Доза «Провитол»®,г внутрь с кормом на 15 голов в сутки 11,25 15,75 21,75 Доза «МиксОйл»®,г внутрь с кормом на 15 голов в сутки 1,13 1,58 2,18 36 Рисунок 1- Схема проведения опыта Группы животных Схема лечения, коррекции заболевания 1 группа Клинически здоровые животные n=15 Не проводилось 2 группа Животные с клинической картиной гастроэнтерита n=15 Лечение по схеме хозяйства (Амоксициллин 150 - 1 мл на 10 кг живой массы, внутримышечно; Тетравит 1 мл на 10 кг живой массы, внутримышечно) 3 группа Животные с клинической картиной гастроэнтерита n=15 4 группа Животные с клинической картиной гастроэнтерита n=15 Лечение по схеме хозяйства+ «Провитол»® (внутрь, с кормом, 1000г. на 1 тонну комбикорма, один раз в день в течении 28 дней) Лечение по схеме хозяйства + «МиксОйл»® (внутрь, с кормом, 100г. на 1 тонну комбикорма, один раз в день в течении 28 дней) Определение клинического статуса опытных животных: термометрия; определение частоты пульса и дыхания. Сроки: регулярно при отборе биоматериала для исследований; по мере необходимости. Морфология и биохимия крови: СОЭ, общий белок, глюкоза, щелочная фосфатаза, АЛТ, АСТ, билирубин (общий, прямой, непрямой), а-амилаза, щелочная фосфатаза. Сроки: при постановке на опыт (45-60 суточный возраст), в середине опыта (90-105 суточный возраст), в конце опыта (180-210 суточный возраст) Методы исследования, сроки отбора биоматериала Отбор ткани поджелудочной железы, желудка, тонкого отдела кишечника для гистологического, электронномикроскопического, иммуногистохимеческого и морфометрического исследований. Сроки: при постановке на опыт (45-60 суточный возраст), в середине опыта (90-105 суточный возраст), в конце опыта (180210 суточный возраст) Определение некоторых зоотехнических показателей: стати тела животного, масса тела, среднесуточные привесы при постановке на опыт (45-60 суточный возраст), в середине опыта (90-105 суточный возраст), в конце опыта (180-210 суточный возраст) 37 2.2 Морфологические и биохимические методы исследования крови Отбор проб крови для клинических и биохимических исследований осуществляли из яремной вены при постановке на опыт в возрасте 45-60 суточном возрасте, в 85-100 суточном возрасте, при убое животных в возрасте 180-210 суток - критические периоды согласно классификации по Л.П. Тельцову (Тельцов Л.П., 2003) В крови определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, мазки крови окрашивали по Романовскому, с последующим выведением лейкограммы. Количество гемоглобина определяли по методу Сали, СОЭ по методу Панченкова. Биохимические показатели определяли с помощью фотоэлектроколориметра КФК 3-01 и готовых биохимических наборов Vital. Общий и прямой белок сыворотки крови определяли методом МаллояЭвелина; щелочную фосфатазу — оптимизированным кинетическим методом (АМП-буфер, n-нитрофенилфосфат); α-амилазу - унифицированным методом по Каравею; глюкозу — энзиматическим колориметрическим методом. Концентрацию общего и прямого билирубина определяли унифицированным методом Ендрассика-Грофа; активность аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) унифицированным методом РайтманаФренкеля; определяли коэффициент ДеРитиса (отношение АЛТ к АСТ) (1972). Исследования проводили в Кировском научно-исследовательском институте переливания крови Минздрава РФ. Статистическую математическую обработку полученных цифровых данных проводили методом, описанным Г. Ф. Лакиным (1973, 1980). Достоверность различий сравниваемых величин определяли по t-критерию Стьюдента и F-критерию Фишера. Вычисляли среднюю арифметическую арифметической(m), (М), достоверность статистическую разницы ошибку между средней средними арифметическими двух вариационных рядов по критерию достоверности (Р), таблице Стьюдента-Фишера. Высказывания, имеющие вероятность ошибки р≤0,05. называли значимыми; высказывания с вероятностью ошибки р≤0,01 - 38 очень значимыми, а высказывания с вероятностью ошибки р≤0,001 максимально значимыми. Разницу между двумя величинами считали достоверной при уровне вероятности Р=0,05 (Р<0,05). Математическую обработку данных осуществляли с помощью программы Microsoft®Excel 2007. 2.3 Патоморфологические и гистологические методы исследования органов и тканей Перед проведением опыта (45-60 суточный возраст), в середине опыта (85-100 суточный возраст), после окончания опыта (180-210 дней), производили убой животных, и проводился отбор материала для дальнейших исследований. Вскрытие животных осуществлялось в специализированном убойном пункте СПК «Красное знамя», Куменского района, Кировской области. Проводилось детальное посистемное патологоанатомическое исследование, на каждое животное заведен протокол вскрытия. Для установления микроскопических изменений был отобран биологический материал для дальнейшего гистологического исследования (поджелудочная железа, печень, желудок, двенадцатиперстная кишка, толстая кишка, почки, селезенка, легкие). Исследуемые кусочки ткани размером 1см3 фиксировали в 10% нейтральном забуференном (pH 7,0) растворе формалина. 2.4 Гистохимические, иммуногистохимичекие, ультрамикроскопические и морфометрические методы исследования Полученный материал для световой микроскопии после освобождения от фиксатора заключали в специальные промаркированные гистологические кассеты для дальнейшей проводки с использованием гистопроцессора закрытого типа SakuraTissue-Tek® VIP™ 5 Jr (Япония) и модульной системой заливки парафином SakuraTissue-Tek® TEC®, лаборатории патоморфологии крови Кировского научно-исследовательского института гематологии и переливания крови. После изготовления парафиновых блоков готовили гистологические срезы толщиной 4-5 мкм при помощи ротационного микротома, в дальнейшем депарафинизировали и окрашивали гематоксилином и эозином по общепринятым методикам, а также пикрофуксином по Ван- 39 Гизону. Далее исследовали с использованием бинокулярного микроскопа XS90. Иммуногистохимическое исследование проводили на серийных парафиновых срезах толщиной 5 мкм, помещенных на адгезивные стекла, покрытые полилизином (“Menzel-Glaser”, Германия). Для освобождения антигенов после фиксации формалином использовали тепловую демаскировку антигенов в микроволновой печи “Sumsung” при мощности 800 Вт в течение 10 минут в цитратном буфере при рН 6,0. Срезы поджелудочной железы были окрашены с использованием иммунной метки на антитела против фактора VIIIсвязного антигена и антигена, ассоциированного с пролиферацией MIB-1; CD3 (CD3poly, PS1, РСЗ/188А,CD3-12) - пан-Т-клеточный антиген и миелопероксидазу. В качестве растворителя антител использовали раствор ANTIBODY DILUENT (Dako Cytomation). Для адекватного представления структуры ткани срезы дополнительно окрашивались гематоксилином Майера в течение 3 минут. Дегидратация и заключение в бальзам осуществлялись в соответствии с распространенными подходами. Для электронно-микроскопического исследования обработанные стандартным способом: кусочки ткани органов фиксировали в 2,5%-ном забуференном глутаральдегиде, затем заключали в ЭПОН-812 по общепринятой методике. Полутонкие и ультратонкие срезы окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца, полутонкие-толуидиновым синим. Ультраструктуру 1011(Япония). тканей изучали Приготовление фотографирование срезов в блоков, электронном нарезка, осуществлялась в микроскопе окраска, Центре JEM- просмотр и коллективного пользования электронной микроскопией Института биологии внутренних вод им. И.Д. Папанина при Российской Академии наук (пос. Борок, Некоузский район, Ярославская область, http://ibiw.ru). Для морфометрической оценки функционального состояния панкреатических островков использовали программное обеспечение анализа 40 изображений ImageScopeColor математическую обработку М (LEIСA, полученных Gmbx). цифровых Статистическую данных проводили методом, описанным Г. Ф. Лакиным (1973, 1980). Достоверность различий сравниваемых величин определяли по t-критерию Стьюдента и F-критерию Фишера. Математическую обработку данных осуществляли с помощью программы Microsoft®Excel 2007, ®Word 2007. 2.5. Экономико-математические методы Экономическую эффективность рассчитывали по методике, предложенной И.Н. Никитиным (2007). Методика определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий основана на сопоставлении между собой показателей предотвращенного ущерба с затратами на проведенные мероприятий. Применены следующие показатели: 1. Коэффициенты для выявления предотвращенного ущерба от болезней 2. Общий экономический ущерб от болезней животных до проведения лечения: убытки от падежа, вынужденного забоя животных, потери продукции из-за болезней животных и снижения их продуктивности, затраты на проведение ветеринарных мероприятий. 3. Предотвращенный ущерб. 4. Денежные затраты на лечение. 5. Показатели экономической эффективности ветеринарных мероприятий, уровень их рентабельности (или окупаемости затрат). 1. Ущерб от потери продукции за время болезни: Упп=(Вз-Вб)хМзхТхЦ где Упп— ущерб от потери продукции за время болезни, руб.; Вз среднесуточный прирост здоровых животных по хозяйству, г; Вб - среднесуточный прирост Т больных животных в хозяйстве, г; - продолжительность заболевания (дней); Ц — средняя цена реализации 1 кг продукции, руб. 41 2. Предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными отражает, насколько сокращаются потери продукции от снижения заболеваемости или частоты болезни при применении препаратов. Пп= УпхКл предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными где Пп— предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными, руб.; Кл—коэффициент излечившихся животных, Уп— ущерб от недополучения продукции. Предотвращенный ущерб в результате лечения: При проведении производственных опытов по определению эффективности лечебных препаратов определяется ущерб от потери продукции за время болезни или опыта по формуле Пу = МлхКлхЖхЦ-У, где Мл - число животных, подверженных лечению; Кл — коэффициент летальности; Ж - средняя масса одного животного; Ц - цена единицы продукции (руб.); У - фактический экономический ущерб (руб.) 3. Экономический эффект в ходе ветеринарных мероприятий Эв = Пу-Зв, Где Пу - предотвращенный ущерб в результате лечения; Зв - затраты на ветеринарные мероприятия. 4. Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 р. затрат: Эр = Эв : Зв, где Эв - экономический эффект (руб.); Зв - затраты на ветеринарные мероприятия и оплату трудаработников (руб.) 42 3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1. Клинико-патоморфологические исследования клинически здоровых поросят-отъёмышей и с выраженной картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте 3.1.1. Общий клинический статус поросят-отъёмышей При оценке клинического статуса у животных первой группы группы: общее состояние бодрое, температура тела 38,50±0,04°С. Положение тела естественное, телосложение нормальное, упитанность хорошая, конституция нежная, темперамент живой. Поросята активные. Состояние волосяного покрова: щетина гладкая, жесткая. Кожа эластичная. Отеки, ранения, язвы отсутствуют; верхний слой эпидермиса носового зеркальца потрескавшийся. Степень развития подкожной клетчатки слабая. Слизистые оболочки (конъюнктива, слизистые пятачка, рта, влагалища) анемичны, сухие, умеренно напряжены, кровоизлияний, ранений, наложений нет. При исследовании общего клинического статуса у животных с клинической картиной гастроэнтерита отмечалась диарея, рвота, характерное урчание в животе. Щетина была матовая, жесткая. При пальпации живота обнаруживалась болезненность в эпигастральной зоне, обычно сопровождается сильным урчанием. У поросят отмечался частый жидкий стул, зловонный, водянистый, с зеленью и хлопьями, иногда с примесями крови и слизи. По сравнению с контрольной группой клинически здоровых животных, поросята их этих групп слабо реагировали на прием пищи и были менее упитанными. Как видно из таблицы 2, у животных с клиническими признаками гастроэнтерита отмечалось повышение температуры, пульса, дыхания. Повышение этих показателей связано с прогрессирующией диареей, которая провоцирует обезвоживание организма и ведет к сгущению крови. При повышенной вязкости крови снижается скорость кровотока, что стимулирует повышение артериального давления и повышение частоты сердечных сокращений, и, в свою очередь, повышение частоты дыхательных актов. 43 Таблица 2- Показатели температуры, пульса, дыхания у поросят отъёмышей в возрасте 45-60 дней, M±m, n=60 Группа Показатели 0 температура, С пульс, уд.в мин дыхание, дых.дв. в мин 1группа, n=15 38,50±0,04 98,00±0,30 22,00±0,48 2 группа, n=15 39,80±0,06* 132,00±0,58* 36,00±0,82* 3 группа, n=15 39,5±0,05* 122,00±0,44* 32,00±0,76* 4 группа, n=15 39,7±0,03** 128,00±0,52* 30,00±0,63* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® У клинически здоровых животных в 45-60 суточном возрасте температура находилась в переделах физиологической нормы. При общем клиническом исследовании отклонений не выявлено. В результате проведенных исследований, было выявлено, что у животных с клиническими признаками гастроэнтерита в возрасте 45-60 суток отмечалось повышение температуры, пульса, дыхания. Повышение этих показателей было связано с прогрессирующией диареей, которая провоцирует обезвоживание организма и ведет к сгущению крови. Влияние коры больших полушарий мозга выражалось прежде всего в регуляции деятельности подкорковых теплорегулирующих центров, поэтому при нарастающем обезвоживаении это приводило к повышению температуры. У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа- 22,00±0,48 дых. дв. в мин.; 2 группа36,00±0,82* дых. дв. в мин.; 3 группа- 32,00±0,76* дых. дв. в мин.; 4 группа- 30,00±0,63* дых. дв. в мин.) и показателей пульса (1 группа98,00±0,30 уд. в мин.; 2 группа- 132,00±0,58* уд. в мин.; 3 группа- 122,00±0,44* уд. в мин.; 4 группа- 128,00±0,52* уд. в мин.;), что по большей части было связано со стрессами животных при манипуляциях исследовании животных. 44 3.1.2. Морфологические и биохимические показатели крови поросятотъемышей Для полной оценки клинического статуса животных проводилась морфологическая и биохимическая оценка показателей крови поросят отъемышей всех групп. При оценке общего клинического анализа крови исследуемых поросят (в возрасте 45-60 дней), было отмечено, что у животных, относящихся ко второй, третьей, четвертой группам, наблюдалось повышение уровня эритроцитов, по сравнению с поросятами первой группы на 53,3-60%. Такое повышение могло быть связано с дегидратацией в организме животных, как следствие рвоты, диареи, токсикоза (основные признаки проявления гастроэнтерита) (Таблица 3). У животных с признаками гастроэнтерита также было отмечено повышение уровня гемоглобина по отношению к первой группе на 23,6-29,1% на фоне эритроцитоза. Как следствие этого, повышалось значение гематокрита у больных животных на 22,2-37,6% по сравнению с клинически здоровыми животными первой группы. Показатель СОЭ у 2, 3, 4 групп с гастроэнтеритом увеличен на 65,4138.3% по отношению к группе клинически здоровых животных, как и общий уровень лейкоцитов на 12,5-35,8%, что доказывает наличие воспалительного процесса, сопровождающегося интоксикацией (Рис. 2). Также отмечалось увеличение показателя количества тромбоцитов на 52,6-53,3% по сравнению со здоровыми животными, что могло быть опосредованно нарастающим воспалительным процессом желудочно- кишечного тракта и поражением гепатопанкреатобилиарной системы. Лейкоцитоз (увеличение на 12,5-35,8% в сравнении с первой группой), по всей видимости, был связан со стрессом и физической нагрузкой при перегруппировке. Увеличение количества лимфоцитов у клинически больных на 55,8-68,1% в сравнении со здоровыми животными был связан с гастроэнтеритом, поражением панкреатобилиарной системы. 45 Таблица 3 – Морфологические показатели крови поросят в возрасте 45-60 суток, М±m, n=60 Показатели крови, единицы изменения Референ тные значения (И.М. Карпуть ) Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа Эритроциты,1012/л 4,3-6,7 4,5±0,02 7,1±0,12 7,3±0,2 6,9±0,13* Гемоглобин, г/л 85-115 93±3,2 115±6,5* 120±6,7 117±4,9* СОЭ, мм/час 1,0-9,0 8,1±0,08 19,3±1,05 23,5±2,03* 13,4±0,96 Гематокритное число, % 35-43 36,4±2,37 44,5±1,64 48,2±3,85 50,1±1,96 Тромбоциты,109 г/л 180-300 200,4±35,3 250,8±18,5 230,2±45,6* 210,2±27,9* Лейкоциты,109 г/л 10,2-21,2 17,3±1,03 23,5±0,94 19,5±1,45 21,2±1,23 Базофилы, % 0,0-1,0 1,1±0,02 0,7±0,06 1,3±0,45 2,4±0,61 Эозинофилы, % 0,0-6,0 5,3±0,15 4,4±0,34* 5,7±0,12 4,1±0,09 Юные, % 0,0-5,0 0,2±0,18 0,4±0,31* 0,3±0,11** 0,5±0,22 Палочкоядерные, % 3,0-7,0 4,7±1,03 6,1±0,78** 6,3±0,99 6,9±0,63 Сегментноядерные, % 28,0-45,0 39,2±2,79 48,2±5,82* 44,5±2,74** 46,1±6,32* Лимфоциты, % 40,0-70,0 45,1±5,24 73,5±2,47 75,8±3,45 70,3±4,28* Моноциты, % 2,0-6,0 4,4±1,02 6,7±0,64 6,4±1,03* 6,2±0,98* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® При оценке биохимических показателей крови подопытных животных в возрасте 45-60 суток отмечалось увеличение концентрации общего белка на 15,46-16,08%у больных гастроэнтеритом животных, при этом уровень глюкозы был выше, чем у здоровых животных на 22,97-25,09%, не выходя за физиологические нормы. 46 Рисунок 2 - Клетки периферической крови 45-60 суточных клинически здоровых поросят. Окраска по методу Романовского—Гимза. х 100 Сегментоядерный нейтрофил (1) Повышенный уровень общего белка сыворотки крови (гиперпротеинемия), был скорее связан с воспалением желудочно-кишечного тракта и потерей жидкости из-за рвоты и диареи (Таблица 4). Количество общего билирубина возрастало на 96,88-103,38% по сравнению со клинически здоровыми животными, в основном за счет увеличения прямого билирубина на 149,39-191,46%. Повышение уровня билирубина плазмы крови свидетельствовало о начале функциональных нарушений печени и наличию гемолитических процессов в организме на фоне острого воспаления желудка и кишечника. Уровень аланинаминотрансферазы (АЛТ) увеличился 1,5-1,6 раз, а уровень АСТ в 1,9-2,1 раза по сравнению с клинически здоровыми животными. Повышение (аланинаминотрансфераза аспартатаминотрансферазаи активности содержится в обеих в цитоплазме, аминотрансфераз цитоплазме и в клеток, а митохондриях) свидетельствовало о поражении клеток печени. Увеличение щелочной фосфатазы (ЩФ) по сравнению со здоровыми животными на 29,6-48,72 %, по всей видимости, свидетельствовало о 47 Таблица 4 – Биохимические показатели крови подопытных поросят в возрасте 45-60 дней, M±m, n=60 Показатели крови, единицы изменения Глюкоза, ммоль/л Общий белок, г/л Билирубин общий, мкмоль/л Билирубин прямой, мкмоль/л Билируби не прямой, мкмоль/л АЛТ, ед./л АСТ, ед./л Коэффицие нт ДеРитиса Щелочная фосфатаза, ед/л α-амилаза, ед./л Физиоло гические значения (И.М. Карпуть) Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 3,5-6,4 4,44±0,18 5,46±0,22* 5,59±0,23* 5,5±0,21** 65-85 71,77±2,87 82,87±3,31 82,81±3,48 83,31±3,17 0-6,8 3,85±0,15 7,58±0,03** 7,79±0,33 7,83±0,30* 0,9-3,4 1,64±0,07 4,78±0,22* 4,22±0,19** 4,09±0,18* 0,0-3,4 2,20±0,10 2,79±0,13** 3,57±0,16* 3,73±0,17* 7–15 8-25 1,3-1,4 21,22±0,50* 24,22±0,57 0,88±0,06 34,78±1,57* 47,21±1,89* 0,74±0,03* 35,22±0,75** 49,34±2,07* 0,71±0,05* 33,09±1,49* 51,65±1,96 0,64±0,47* 140-200 194,41±7,77 289,12±8,56* 271,37±8,39* 251,95±6,57* * 320-1140 897,87±35,91 2098,56±83,94* 1897,98±79,71* 1981,98±75,3 1* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® дисфункции печени и желчных путей, сопровождающихся холестазом. Повышение уровня α-амилазы в 2,1-2,3 раза у клинически больных животных демонстрировал переходе воспаления со стороны желудочно-кишечного тракта на поджелудочную железу и начале ее функциональных нарушений, то есть, начале развития острого панкреатита. 48 3.1.3. Патоморфологические изменения в органах поросят-отъемышей. Для выявления патологоанатомической картины, перед постановкой животных на опыт, был проведен диагностический убой и вскрытие поросят отъёмышей с выраженной клинической картиной гастроэнтерита и поросят, клинически здоровых по результатам общего обследования, по трое животных из каждой вышеперечисленной группы. У группы поросят отъёмышей, клинически здоровой по результатам исследования, при наружном осмотре телосложение пропорциональное, грудная клетка симметрична, окоченение не выражено. Ротовая полость закрыта, язык в ротовой полости, целостность зубов не нарушена. Кожа эластичная, серо-розового цвета, щетина жесткая, несколько сухая. Кожа вокруг носовых отверстий не загрязнена, истечения из носовой полости отсутствуют. Глаза открыты. Глазные яблоки не запавшие, истечения отсутствуют, роговица не помутневшая. Анус закрыт, кожа вокруг него незначительно загрязнена. Видимые слизистые оболочки: носовой полости, ротовой полости, конъюнктива глаза серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, умеренно влажные, без наложений. Слизистая преддверья влагалища серорозового с желтоватым оттенком цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная, без наложений. Подкожная клетчатка: слабо выражена, кровеносные сосуды умеренно наполнены кровью. Лимфатические узлы: околоушные, заглоточные, поверхностные шейные, предлопаточные, мезентериальные и лимфоузлы коленной складки серого цвета, слегка уменьшены в объеме, границы слоев слабо выражены, консистенция плотная. Жевательные мышцы, мышцы задних конечностей слабо развиты, умеренно плотной консистенции, на разрезе умеренно влажные, серо-розового цвета, рисунок мышечных волокон хорошо выражен, поверхность разреза влажная. Нарушение целостности костей и связок не обнаружено, конфигурация не изменена 49 При внутреннем осмотре брюшной полости расположение органов анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Брюшина серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Язык умеренно плотной консистенции, мышца языка розового цвета, на разрезе умеренно влажная, рисунок мышечных волокон хорошо выражен. Пищевод: слизистая оболочка серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Проходимость сохранена. Слизистая оболочка желудка серо-розового цвета, сосуды незначительно переполнены кровью, гладкая, блестящая, без наложений, не утолщена, у одного животного было обнаружено несколько складок слизистой оболочки, которые легко расправлялись при растяжении. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника серо-розового цвета, гладкая, блестящая, нее утолщена. Содержимое кишечника кашицеобразное, со специфическим запахом, серо-желтого цвета. Поджелудочная железа: дольчатая, упругая, светло-серого цвета с красноватым оттенком (Рис. 3). Рисунок 3 – Макропрепарат поджелудочной железы клинически здоровых поросят 45-60 суточного возраста 50 Толстый отдел кишечника: на всем протяжении серозная и слизистая оболочки серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, серо-розового цвета. Печень не увеличена в объеме, умеренно плотной консистенции, окрашена в коричневый цвет. На разрезе рисунок долек не выражен. Кровенаполнение печени слабое. Селезенка не увеличена в объёме, удлиненной формы, с поверхности и на разрезе серо-малинового цвета, рисунок трабекул слабо выражен, соскоб пульпы умеренный. Правая почка бобовидной формы размером 3x2x1 см, капсула снимается легко, с поверхности гладкая, блестящая, упругой консистенции, краснокоричневого цвета, граница коркового и мозгового слоев хорошо выражена, серо-красного цвета, левая почка овойдной формы, размером 3x2,5x1 см, капсула снимается легко, с поверхности гладкая, блестящая, упругой консистенции, красно-коричневого цвета, граница коркового и мозгового слоев хорошо выражена, серо-красного цвета. Мочевой пузырь умеренно наполнен мочой жёлто-соломенного цвета, слизистая оболочка серого цвета, складчатая. Положение органов грудной полости анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Костальная плевра серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Легкие: не спавшиеся, мягкой консистенции, пестро окрашены: участки красного цвета чередуются с участками серо-розового цвета. Под плеврой и в паренхиме легкого имеются диффузно расположенные пузырьки воздуха. В периферических участках верхушечной и сердечной долей имеются увеличенные в объёме очаги бледно-розового цвета, пушистой консистенции. На разрезе легкие розового цвета (кроме вышеуказанных участков), с поверхности разреза выделяется жидкость красного цвета в умеренном количестве (Рис. 4). 51 Рисунок 4 – Макропрепарат легких клинически здоровых поросят 45-60 суточного возраста Перикард тонкий, кровенаполненными гладкий, сосудами, блестящий, прозрачный свободноподвижный. с умеренно Эпикард гладкий, блестящий. Сердечная мышца темно-серого цвета, дрябловатой консистенции. Толщина стенки правого желудочка 0,4 см, левого — 1,1 см, соотношение составляет 1:3. В полостях правого отдела сердца содержатся рыхлые сгустки крови темно-красного цвета, легко извлекающиеся, гладкие, блестящие, влажные. Эндокард гладкий, блестящий; клапаны сердца эластичные, серобелого света, гладкие, блестящие Целостность и эластичность сухожильных струн и клапанов не нарушена. Легочная артерия: в полости сгусток крови, красного цвета, эластичный, легко отделяющийся от стенок. Интима гладкая, блестящая, желтоватого цвета. Полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Аорта: интима гладкая, блестящая, утолщена, бледно желтоватого цвета, плотная; полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Таким образом, основные патологоанатомические изменения у клинически здоровых поросят развивались в легких, что по большей части было связано с методом диагностического убоя животных. 52 У группы поросят отъёмышей, с выраженной картиной гастроэнтерита, при наружном осмотре выявлено: телосложение пропорциональное, грудная клетка симметрична, окоченение не выражено. Ротовая полость закрыта, язык в ротовой полости, целостность зубов не нарушена. Кожа малоэластичная, серобелого цвета, щетина жесткая, сухая, матовая. Кожа вокруг носовых отверстий не загрязнена, истечения из носовой полости отсутствуют. Глаза открыты. Глазные яблоки не запавшие, истечения отсутствуют, роговица не помутневшая. Анус закрыт, кожа вокруг него незначительно загрязнена полужидкими кашицеобразными массами. Видимые слизистые оболочки: носовой полости, ротовой полости, конъюнктива глаза серо-розового цвета, гладкие, блестящие, гладкие, не утолщены, умеренно влажные, без наложений. Слизистая преддверья влагалища серо-розового с желтоватым оттенком цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная, без наложений. Подкожная клетчатка: слабо выражена, кровеносные сосуды слабо наполнены кровью. Лимфатические узлы: околоушные, заглоточные, поверхностные шейные, предлопаточные, мезентериальные и лимфоузлы коленной складки серого цвета, слегка уменьшены в объеме, границы слоев слабо выражены, консистенция плотная. Жевательные мышцы, мышцы задних конечностей слабо развиты, умеренно плотной консистенции, на разрезе умеренно влажные, серо-розового цвета, рисунок мышечных волокон хорошо выражен, поверхность разреза влажная. Нарушение целостности костей и связок не обнаружено, конфигурация не изменена При внутреннем осмотре брюшной полости расположение органов анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Брюшина серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Язык умеренно плотной консистенции, мышца языка розового цвета, на разрезе умеренно влажная, рисунок мышечных волокон хорошо выражен. 53 Пищевод: слизистая оболочка серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Проходимость сохранена. Слизистая оболочка желудка серо-розового цвета, сосуды незначительно переполнены кровью, матовая, утолщена, собрана в небольшое количество складок, легко расправляющихся. Слизистая покрыта густой, тягучей, прозрачной слизью, легко смывающейся при промывании. Отдельно на слизистой отмечаются точечные кровоизлияния (Рис. 5). Серозная оболочка тонкого отдела кишечника серо-розового цвета, матовая, тусклая, истончена. Слизистая оболочка серо-розового цвета, гладкая, матовая, сильно истончена, покрыта небольшим количеством тягучей прозрачной слизи, хорошо смывающейся. Содержимое кишечника Рисунок 5 – Макропрепарат желудка поросят 45-60 суточного возраста при установленной клинической картине неспецифического гастроэнтерита. Острый катаральный гастрит. Слизистая покрыта густой, тягучей, прозрачной слизью кашицеобразное со зловонным запахом, серо-белого цвета, видны отдельные фрагменты кормовых масс с примесями слизи. 54 Поджелудочная железа: дольчатая, упругая, светло-серого цвета с красноватым оттенком, несколько отечная (Рис. 6). Рисунок 6 – Макропрепарат поджелудочной железы поросят 45-60 суточного возраста при установленной клинической картине неспецифического гастроэнтерита Толстый отдел кишечника - на всем протяжении серозная и слизистая оболочки серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, серо-розового цвета. Печень не увеличена в объеме, умеренно плотной консистенции, окрашена в малиново-коричневый цвет. На разрезе рисунок долек не выражен. Кровенаполнение печени слабое. Селезенка не увеличена в объёме, удлиненной формы, с поверхности и на разрезе серо-малинового цвета, рисунок трабекул слабо выражен, соскоб пульпы умеренный. Правая почка бобовидной формы размером 2,5x2x1 см, капсула снимается легко, с поверхности гладкая, блестящая, упругой консистенции, красно-коричневого цвета, граница коркового и мозгового слоев хорошо выражена, серо-красного цвета, левая почка овойдной формы, размером 2,5x2x1 см, капсула снимается легко, с поверхности гладкая, блестящая, 55 упругой консистенции, красно-коричневого цвета, граница коркового и мозгового слоев хорошо выражена, серо-красного цвета. Мочевой пузырь умеренно наполнен мочой жёлто-соломенного цвета, слизистая оболочка серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Положение органов грудной полости анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует, костальная плевра серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Легкие: не спавшиеся, пестро окрашены: участки красного цвета чередуются с участками серо-розового цвета. Под плеврой и в паренхиме легкого имеются периферических диффузно участках расположенные верхушечной и пузырьки сердечной воздуха. долей В имеются увеличенные в объёме очаги бледно-розового цвета, пушистой консистенции. На разрезе легкие розового цвета (кроме вышеуказанных участков), с поверхности разреза выделяется жидкость красного цвета в умеренном количестве. Перикард тонкий, гладкий, блестящий, прозрачный с умеренно кровенаполненными сосудами, свободно подвижный. Эпикард гладкий, блестящий. Миокард темно-серого цвета, дрябловатой консистенции. Толщина стенки правого желудочка 0,4 см, левого — 1,2 см, соотношение составляет 1:3. Эндокард гладкий, блестящий; клапаны сердца эластичные, серо-белого света, гладкие, блестящие Целостность и эластичность сухожильных струн и клапанов не нарушена. Интима легочной артерии гладкая, блестящая, желтоватого цвета. Полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Интима аорты гладкая, блестящая, утолщена, бледно желтоватого цвета, плотная; полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Таким образом, для клинически здоровых поросят основные патологоанатомические изменения развивались в легких (острая альвеолярная эмфизема и отек легких), что по большей части было связано с методом диагностического убоя животных. Для поросят с клинической картиной 56 гастроэнтерита были характерны следующие патологоанатомические диагнозы: острый катаральный гастрит и энтерит, очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких, атрофия околоушных, заглоточных, поверхностных шейных, предлопаточных, мезентериальных лимфоузлов и лимфоузлов коленной складки. 3.1.4. Гистологическая характеристика поджелудочной железы и гастродуоденальной системы клинически здоровых поросят-отъёмышей и с выраженной картиной гастроэнтерита 3.1.4.1. Гистологическая характеристика поджелудочной железы и гастродуоденальной системы клинически здоровых поросят-отъёмышей. Морфометрические показатели поджелудочной железы на световом уровне При гистологическом исследовании на световом уровне в 45-60 суточном возрасте у поросят-отъёмышей установлено, что поджелудочная железа представлена двумя типами клеток - ацинарными и островковыми. Две основные экзокринные функции поджелудочной железы — продукция пищеварительных ферментов и секреция бикарбоната. Эндокринная функция данного органа обусловлена входящими в состав железы островками Лангерганса, которые продуцируют ряд важных гормонов углеводного обмена (Рис. 7). У клинически здоровых поросят-отъемышей при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии. Стенки капилляров были расширены и источены, их просвет был заполнен скоплением эритроцитарных масс (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). В отдельных сосудах отмечалось разделение крови на плазму и форменные элементы, плазмостазы. Строма была в состоянии незначительного отека. Экзокринная паренхима без визуальных изменений, отдельные ацинарные клетки в состоянии отека. Инсулярные островки Лангерганса были средней величины (диаметр 84,29±0,74 мкм), без визуальных патологических изменений, в умеренном 57 Рисунок 7 - Структурная организация поджелудочной железы 45-60 суточных клинически здоровых свиней. Окраска гематоксилином и эозином. х 400. Стенки капилляров расширены (1), их просвет заполнен скоплением эритроцитарных масс (2), 3 - экзокринная паренхима в состоянии отека количестве на площади изученных срезов. Отдельные протоки поджелудочной железы были в состоянии нерезкого спазма, стенки протоков не изменены. Содержимое просветов протоков бледно-розовое, гомогенное, умеренной плотности. У клинически здоровых поросят-отъемышей при световой микроскопии стенка желудка представлена слизистой, подслизистой основы, мышечной и серозной оболочками (Рис. 8). Слизистая оболочка была покрыта однослойным цилиндрическим эпителием. Слизь находится на всей поверхности слизистой оболочки. Рельеф слизистой оболочки неровный, образует складки и ямки. Собственно пластинка слизистой оболочки была довольно толстая, усеяна железами, разделенными прослойками рыхлой соединительной ткани. Мышечная пластинка слизистой оболочки была хорошо развита. Фундальные железы образованы однослойным эпителием, несколько удлиненной формы, с округлым ядром, лежали ближе к базальному полюсу. Подслизистая основа хорошо развита, она была представлена рыхлой соединительной тканью с большим количеством кровеносных и лимфатических сосудов. В рыхлой 58 Рисунок 8 – Стенка желудка 45-60 суточных клинически здоровых свиней. Окраска гематоксилином и эозином. х 400. 1 - слизистая оболочка, 2 подслизистая оболочка, 3 – мышечная оболочка соединительной ткани слизистой оболочки и подслизистой основы отмечались скопления лимфоцитов. Мышечная оболочка была образована гладкими мышечными волокнами, без визуальных изменений. Серозная оболочка представлена рыхлой соединительной тканью и однослойным плоским эпителием. Слизистая оболочка двенадцатиперстной кишки у клинически здоровых поросят отъемышей была представлена тремя слоями: эпителием, собственно пластинкой и мышечной пластинкой. Эпителий, выстилающий просвет кишок, однослойный цилиндрический без визуальных изменений, представлен каемчатыми и бокаловидными клетками. Собственная пластинка слизистой оболочки была образована рыхлой волокнистой соединительной и ретикулярной тканями с большим количеством разнообразных клеток, в ней отмечалось большое количество кровеносных и лимфатических сосудов. В собственной пластинке отмечалось большое количество лимфоцитов и лимфатических фолликулов. 59 Мышечная пластинка слизистой оболочки была без изменений, представлена гладкой мышечной тканью, образующей два слоя: кольцевой и продольный. Серозная - состояла из рыхлой соединительной ткани и мезотелия, без изменений. У клинически здоровых поросят-отъемышей 45-60 суточного возраста при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Ацинарные и островковые клетки были без визуальных изменений. Стенка желудка и двенадцатиперстной кишки была без патоморфологических изменений. 3.1.4.2. Гистологическая характеристика поджелудочной железы и гастродуоденальной системы поросят при гастроэнтерите. Морфометрические показатели поджелудочной железы на световом уровне У поросят-отъемышей с клинической картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии и кровоизлияния (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Соединительнотканная капсула островков хорошо выделялась, наблюдался ее незначительный отек. Эритроциты обнаруживались между ацинусами. Часть ациноцитов, находящиеся в фокусе кровоизлияния, были сильно сдавлены и отодвинуты друг от друга скоплениями эритроцитов. В некоторых участках, за пределами кровеносного русла, эритроциты подвергались гемолизу, при этом они окрашивались более бледно и представляли собой бледно-розовую гомогенную массу. Это говорило о том, что кровоизлияние произошло до смерти животного. Наличие в зоне кровоизлияния всех составных частей крови, а также разрыв ацинусов на отдельные ациноциты и раздвигание их скоплениями крови на небольшие расстояния друг от друга - все это подтверждало, что кровоизлияние произошло вследствие разрыва сосуда. Ациноциты экзокринной части были в состоянии незначительного отека, в единичных ядрах ацинозных клетках наблюдались процессы кариопикноза, кариорексиса и кариолизиса (диаметр ядер ацинарных клеток 3,19±0,07* мкм). 60 Эндокринная часть была визуально без изменений. Островки разбросаны по всей железе и имели округлую или овальную форму (диаметр островка 84,29±0,74 мкм), с большим количеством крупных ядер, по-разному реагирующих на окраску. Отдельные протоки поджелудочной железы были в состоянии нерезкого спазма, без изменений стенок протоков; содержимое просветов протоков было бледно-розовое, гомогенное, умеренной плотности (Рис. 9). Рисунок 9 - Структурная организация поджелудочной железы 45-60 суточных свиней с клинической картиной неспецифического гастроэнтерита. Окраска гематоксилином-эозином. х 400. Стенки капилляров расширены и источены (1), их просвет заполнен скоплением эритроцитарных масс (2), 3 экзокринная паренхима в состоянии отека, в ядрах процессы кариопикноза, кариорексиса и кариолизиса (4) Гистологическая структура желудка у поросят с клинической картиной гастроэнтерита отличалась яркой сосудистой реакцией и преобладанием экссудативных процессов. Отмечалась воспалительная гиперемия с выпотом серозной жидкости в периваскулярное пространство и очаговая эмиграция лейкоцитов. Слизистая дистрофия, некроз и десквамация, покровного эпителия слизистой оболочки. Железистая ткань находилась в состоянии гиперсекреции. Железы располагались группами, протоки желез расширены, отдельные виды 61 клеток в железах плохо дифференцируются. В связи с мукоидизацией желёз секреция пепсина и хлористоводородной кислоты нарушалась (Рис. 10). Рисунок 10 – Стенка тонкого отдела кишечника. Острый катаральный энтерит 45-60 суточных свиней с клинической картиной неспецифического гастроэнтерита. Окраска гематоксилином-эозином. х 400. 1 - слизистая оболочка, 2 - подслизистая основа, 3 – мышечная оболочка,4 – разрушенные ворсинки, 5 – крипты Слизистая оболочка была инфильтрирована лимфоцитами, плазматическими клетками, единичными нейтрофилами. В толще слизистой оболочки (между железами желудка, в подслизистом слое) отмечался отек. В мышечном слое – гипертрофия мышечных пучков. В серозной оболочке изменений не обнаруживалось. Границы слизистой двенадцатиперстной кишки поросят отъёмышей были расширены, ворсинки утолщены, на их концах эпителиальный покров частично или полностью разрушен. Отсутствовали клетки эпителия и в верхних отделах крипт, виднелись лишь концы последних. В соединительной ткани слизистой и ворсинок - сосуды расширены и переполнены кровью. Границы лимфоидных узелков в слизистой утолщены, их зародышевые центры размножения были расширены и бледны. 62 На поверхности слизистой и между ворсинками находились слущенные, распавшиеся клетки покровного эпителия, лежащие по одной или группами; серозный экссудат имел зернистый или нитчатый вид. Отмечалось скопление единичных полиморфоядерных лейкоцитов, лимфоцитов, эритроцитов. Сохранившийся эпителиальный покров был в состоянии слизистой дистрофии, отмечалось большое количество бокаловидных клеток. Дистрофическим и некротическим изменениям подвергался также эпителий верхних отделов крипт, в глубине крипты сохраняются без изменений или со слабовыраженной зернистой и жировой дистрофией. Соединительная ткань слизистой и ворсинок инфильтрирована серозным экссудатом, лейкоцитами и лимфоцитами. В участках с выраженным отёком подслизистой, границы ее были расширены, сосуды гиперемированы, в окружности сосудов выявлялись кровоизлияния и пролифераты из лимфоидных и гистиоцитарных клеток. У поросят-отъемышей с клинической картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии и кровоизлияния (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Помимо этого, ациноциты экзокринной части были в состоянии незначительного отека, в единичных ядрах ацинозных клетках наблюдались процессы кариопикноза, кариорексиса и кариолизиса (диаметр ядер ацинарных клеток 3,19±0,07* мкм). Эндокринная часть при этом была без изменений. В стенке желудка признаки острого катарального гастрита, двенадцатиперстной кишки – острый катаральный дуоденит. 3.1.5. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы поросят-отъёмышей 3.1.5.1. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы клинически здоровых поросят-отъёмышей При электронномикроскопическом исследовании было выявлено, что ациноциты экзокринной части клинически здоровых поросят-отъемышей 45-60 суточного возраста имели пирамидальную или полигональную форму (диаметр 63 ацинуса 61,20±1,83* мкм, высота ацинарных клеток 11,07±0,21* мкм). Митохондрии ацинарных клеток в основном обнаруживались в базальной части мембраны. Секреторные гранулы разной величины, содержали зимоген, заполняющий цитоплазму: зрелые гранулы зимогена имели вид плотных округлых телец, наряду с ними встречались презимогеновые и незрелые гранулы. Стенка ацинусов была образована панкреацитами, проток с широким просветом и большим количеством микроворсинок. Экзокринная и эндокринная части были отделены друг от друга тонкими прослойками соединительной ткани, несколько утолщенной и разволокненной, находящейся в состоянии незначительного отека (Рис. 11). Внутрисекреторная часть поджелудочной железы представлена панкреатическими островками. Основными цитотипами панкреатических островков свиней являются А-, В-, Д-, PP- клетки (Рис. 12). Критериями идентификации типов клеток панкреатических островков послужили форма и строение секреторных клеток. Также внимание уделялось форме ядра, расположению, строению, цитоплазматических органелл и секреторных гранул Островки овоидной формы - диаметр панкреатического островка 84,29±2,11* мкм, по периметру равномерно расположены капилляры. Отчетливо видна широкопластинчатая ЭПС во всех типах островков. Преобладали крупные ядра неровной эллипсоидной формы. Митохондрии располагались преимущественно в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. Среднее количество клеток в островках 54,26±1,36*. 64 Рисунок 11 – Структурная организация поджелудочной железы клинически здоровых свиней в 45-60 суточном возрасте. х 4000. 1 апикальные части панкреатических клеток с гранулами секрета; 2 – светлые вакуоли; 3- просвет концевого отдела; 4 – ядра ациноцитов с ядрышком(а), ядерными порами(б), кариолеммой (в) и кариоплазмой (г); 5 эндоплазматическая сеть в базальной части панкреатических клеток; 6 аппарат Гольджи; 7 - митохондрии; 8 – просвет кровеносного сосуда; 9 – ядро эндотелиальной клетки Рисунок 12 – Основные цитотипы панкреатических островков поджелудочной железы клинически здоровых свиней в 45-60 суточном возрасте. х 10000. 1 - клетка А –типа; 2 - клетка В-типа; 3 – Д – клетка; 4 РР-клетка 65 Характерным для типа А-клеток является плотное прилегание элементарной мембраны гранул к электронно-плотной сердцевине, также равномерное распределение хроматина в ядре. В В-клетках больше эргастоплазмы, секреторные гранулы менее плотные и окружены светлыми промежутками. Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 45-60 суточном возрасте преимущественно диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. В А-клетках типа были крупные ядра неровной эллипсоидной формы (21,63±0,43* мкм²). В кариолемме располагались глыбки гетерохроматина в конденсированной форме. Митохондрии располагались в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая ЭПС. Инкреторные гранулы Аклеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр 0,385±0,018* мкм, при этом общая площадь гранул была 16,48±0,33** мкм ². Площадь клетки в среднем составляла цитоплазматического 105,67±3,81*мкм². отношения Малое (0,32±0,015*), значение говорило о ядерновысокой дифференцировке клеток и способности активно функционировать. Также у клинически здоровых поросят были обнаружены клетки В-типа. Эти клетки чаще встречались в перикапиллярной зоне, на перифеии островка. Общий вид клеток говорил о незрелости клеток. Они имели более темные небольшие округлые ядра, хроматин был в конденсированной форме. Средняя площадь ядра В-клетки значительно меньше (13,45±0,79* мкм ²), чем у Аклеток (21,63±0,43* мкм²). Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,200±0,09*мкм, по сравнению с гранулами А-клеток более мелкие, имеют светлый поясок. Относительная доля гранул также была значительно ниже у В-клеток 5,40±0,25*%, относительно А-клеток (15,60±0,73*%). Что также подтверждало некую незрелость В-клеток. На границе эндокринной и экзокринной части были обнаружены РРклетки. Ядра клеток были овальной формы с неровными контурами 66 кариолеммы (средняя площадь ядер 19,46±0,72* мкм²). Клетки полигональной формы, секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, представлены мелкозернистым материалом, диаметр гранул составил 0,103±0,005* мкм. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем в А клетках, доля гранул составила 9,60±0,45*%. В панкреатических островках редко встречались Д-клетки. Они имели крупное ядро овальной формы с равномерно распределенным хроматином, средняя площадь ядра составила 40,58±1,51* мкм². Клетки выглядели более просветленными по сравнению с другими клетками, это было связано с более низкой электронной плотностью секреторных гранул, они крупные (диаметр 0,411±0,027 мкм) и концентрируются около ядра. Доля гранул составила 22,70±0,55**% от площади цитоплазмы, что в большей степени было за счет большего размера секреторных гранул, нежели их количества. Таким образом, у клинически здоровых поросят-отъемышей 45-60 суточного возраста при ультрамикроскопическом уровне превалировали процессы застойной гиперемии. Ацинарные и островковые клетки были без визуальных изменений. В эндокринной паренхиме поджелудочной железы свиней были обнаружены все цитотипы клеток панкреатических островков, а именно А-, В-, Д-, PP- клетки. 3.1.5.2. Ультрамикроскопическая и морфометрическая характеристика поджелудочной железы поросят-отъёмышей при гастроэнтерите При исследовании поджелудочной железы поросят-отъёмышей при гастроэнтерите ациноциты экзокринной части имели пирамидальную и полигональную форму. Гранулы секрета были сконцентрированы у апикального полюса ацинарных клеток. Отдельно были найдены светлые вакуоли, образовавшихся, по всей видимости, в результате выхода из гранул секрета, который выступал во вставочный проток и закупоривал его, что затрудняло отток секрета по протоку, приводило к его застою (Рис. 13). Ядра ациноцитов довольно крупные, наблюдаются их структурные изменения. Гетерохроматин сконцентрирован по периферии ядер. В 67 Рисунок 13 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 45-60 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах. × 4000. 1 - апикальные части панкреатических клеток с гранулами секрета; 2 – светлые вакуоли; 3- просвет концевого отдела с секретом гранул; 4 – ядра ациноцитов; 5 - эндоплазматическая сеть в базальной части панкреатических клеток кариолемме были отчетливо видны ядерные поры. Активированные в ткани железы панкреатические ферменты проникали в интерстициальную ткань, повышая порозность сосудистой стенки и образуются отеки и геморрагии (Рис. 14). Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 45-60 суточном возрасте при гастроэнтерите также преимущественно диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. В А-клетках типа были также, как и у клинически здоровых свиней крупные ядра неровной эллипсоидной формы (47,51±2,12 мкм²). Митохондрии располагались в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая ЭПС. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр был незначительно ниже, чем у клинически здоровых свиней 0,329±0,021* мкм, при этом общая площадь гранул была значительно больше 46,86±0,95* мкм ². Высокое значение ядерно- 68 Рисунок 14– Структурная организация поджелудочной железы свиней в 45-60 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах. ×8000. ациноциты; 2 –секреторные гранулы; 3- светлые вакуоли; 4 – эндоплазматическая сеть; 5 - вставочный проток с секретом; 6 – центроацинозные клетки; 7 – просвет венулы со скоплением эритроцитов (8); 9 – ядро эндотелиальной клетки цитоплазматического отношения - 1,53±0,073*, могло говорить о большом количестве стареющих клеток и быть индикатором воспалительных процессов. У поросят 45-60 суточного возраста клетки В-типа чаще встречались в перикапиллярной зоне, на периферии островка. Они имели более темные небольшие округлые ядра (площадь ядра 14,17±0,25** мкм ²), хроматин был в конденсированной форме. Средняя площадь ядра В-клетки практически не отличалась (14,17±0,25** мкм²) от площади ядер клинически здоровых свиней (13,45±0,79*мкм²). Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,211±0,010* мкм. Относительная доля гранул также была значительно ниже у В-клеток при гастроэнтерите - 16,98±0,95%, относительно В-клеток клинически здоровых животных (5,40±0,25*%). Общий вид клеток и структурная организация говорила об их незрелости. Д-клетки имели крупное ядро овальной формы с равномерно распределенным хроматином, средняя площадь ядра составила 35,66±1,33* нм². 69 Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,522±0,025* мкм), локализуются в парануклеарном пространстве. Доля гранул составила 17,6±0,85 % от площади клетки. Ядерно-цитоплазматическое отношение 0,72±0,031 говорит о функциональности и зрелости клетки. В незначительном количестве по периферии островка были обнаружены РР-клетки. Ядра клеток были мелкие, овойдной формы (средняя площадь ядер 9,73±0,84* мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,131±0,006* мкм. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем во всех других типах островковых клеток, доля гранул составила 9,10±0,45*%. У поросят-отъемышей с клинической картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте превалировали процессы застойной гиперемии и кровоизлияния (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Помимо этого, ациноциты экзокринной части были в состоянии незначительного отека, в единичных ядрах ацинозных клетках наблюдались процессы кариопикноза, кариорексиса и кариолизиса (диаметр ядер ацинарных клеток 3,19±0,07* мкм). Эндокринная часть при этом была без изменений. Особенностью на данном этапе является незрелость В-клеток - площадь ядра В-клетки значительно 13,45±0,79* мкм², секреторные гранулы мелкие, разреженные, их диаметр составил 0,220±0,010* мкм, относительная доля гранул крайне мала для должного функционирования - 5,40±0,25*%. Значение ядерно-цитоплазматического отношения 0,211±0,01 крайне мало и говорит о слабой дифференцировке клетки Активированные в ткани железы панкреатические ферменты проникали в интерстициальную ткань, повышая порозность сосудистой стенки, образуя отеки и геморрагии. 3.2 Клинико-патоморфологические исследования свиней в 85-100 суточном возрасте. 3.2.1. Общий клинический статус свиней в 85-100 суточном возрасте. При исследовании общего клинического статуса у животных первой группы: общее состояние бодрое, температура тела 39,0±0,04°С (Таблица 5). Положение тела естественное, телосложение нормальное, упитанность 70 хорошая, темперамент живой. Свиньи активные. Состояние волосяного покрова: щетина гладкая, жесткая. Кожа эластичная. Отеки, ранения, язвы отсутствуют; верхний слой эпидермиса носового зеркальца потрескавшийся. Степень развития подкожной клетчатки хорошо развитая. Таблица 5 - Показатели температуры, пульса, дыхания у поросят отъёмышей в возрасте 85-100 дней, M±m, n=60 Группа Показатели 0 температура, С пульс, уд.в мин дыхание, дых.дв. в мин 1 группа, n=15 39,0±0,04 100,00±0,30 22,00±0,52 2 группа, n=15 39,4±0,06* 112,00±0,58* 28,00±0,74* 3 группа, n=15 39,1±0,05* 114,00±0,44* 26,00±0,58* 4 группа, n=15 39,0±0,03** 110,00±0,52* 24,00±0,56* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® Слизистые оболочки (конъюнктива, слизистые пятачка, рта, влагалища) анемичны, сухие, умеренно напряжены, кровоизлияний, ранений, наложений нет. При исследовании животных 2 группы с клинической картиной гастроэнтерита отмечалась характерное урчание в животе, некоторые животные принимали сгорбившуюся позу. Щетина была матовая, жесткая. При пальпации живота обнаруживалась болезненность в эпигастральной зоне. У 33% свиней отмечался жидкий стул с примесями слизи. По сравнению с контрольной группой клинически здоровых животных, свиньи из этой группы слабо реагировали на прием пищи и были менее упитанными. У животных 3 и 4 групп общее состояние бодрое, температура тела 39,1±0,05°С и 39,0±0,03°С, соответственно. Положение тела естественное, телосложение нормальное, темперамент живой. Свиньи более активные по сравнению с 2 группой. Состояние волосяного покрова: щетина матовая, жесткая, кожа эластичная. 71 У животных 2, 3 и 4 групп отмечалось повышение температуры, пульса, дыхания по сравнению с первой группой свиней. Таким образом, при исследовании общего клинического статуса к 85-100 суточному возрасту животные второй группы заметно отличались. Снижение упитанности, помимо нарушения усвояемости на фоне диареи, также могло быть связано с липолизом в жировой ткани под влиянием гипоталамогипофизарно-надпочечниковой системы из-за повышенной теплопродукции при лихорадке. В третьей и четвертой группах, отсутствовали клинические проявления гастроэнтерита, несмотря на их наличие в возрасте 45-60 суток. У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа- 22,00±0,52дых. дв. в мин.; 2 группа- 28,00±0,74* дых. дв. в мин.; 3 группа- 26,00±0,58* дых. дв. в мин.; 4 группа- 24,00±0,56* дых. дв. в мин.) и показателей пульса (1 группа100,00±0,30 уд. в мин.; 2 группа- 112,00±0,58*уд. в мин.; 3 группа114,00±0,44*уд. в мин.; 4 группа- 110,00±0,52*уд. в мин.), что по большей части было связано с манипуляциями при исследовании животных. 3.2.2. Морфологические и биохимические показатели крови свиней в 85100 суточном возрасте. При оценке клинического анализа крови поросят 85-100-дневного возраста, отмечалось снижение среднего количества эритроцитов во всех группах до пределов нормы (таблица 5). Во второй группе отмечалось снижение уровня гемоглобина (81±1,2 г%), уменьшение количества эритроцитов (4,2±0,67 1012/л) и гематокритного числа (34,3 ±3,14%), при этом увеличивалась СОЭ, что говорит о нарастающих явлениях анемии на фоне гастроэнтерита. Значение гемоглобина, гематокрита, СОЭ в пределах нормы у 3 и 4 групп. Среднее количество тромбоцитов во второй группе животных незначительно снижено – 175,5 г/л (на фоне применения лекарственных 72 Таблица 5 – Морфологические показатели крови поросят (возраст 85-100 суток), М±m. Показатели крови, единицы изменения Референтные значения (И.М. Карпуть) Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа Эритроциты, 1012/л 4,3-6,7 4,7±0,32 4,2±0,67** 5,9±0,15 5,7±0,09 Гемоглобин, г/л 85-115 89±6,4 81±1,2* 87±0,7** 107±2,1 СОЭ, мм/час 1,0-9,0 8,2±0,75 9,4±1,03 8,4±0,48** 8,6±0,37* Гематокритное 35-43 38,7±2,34 34,3 44,0±3,85* 45,6±1,95 число, % ±3,14* Тромбоциты,109г/л 180-300 220,4±16,34 175,5±8,35 200,2±7,85* 200,7±23,5* Лейкоциты, 109 г/л 10,2-21,2 25,7±1,25 40,4±2,38 39,6±0,98 38,5±1,46* Базофилы,% 0,0-1,0 0,3±0,08 0,1±0,02* 1,0±0,03 0,4±0,25** Эозинофилы,% 0,0-6,0 3,1±0,35 4,1±0,75* 4,3±1,00* 4,7±1,01 Юные,% 0,0-5,0 0,0±0,0 2,1±0,04 0,8±0,03 0,7±0,35 Палочкоядерные,% 3,0-7,0 4,3±0,94 5,2±0,47 4,9±0,88 3,7±0,48 Сегментноядерные,% 28,0-45,0 29,3±2,08 38,5±4,56* 35,5±3,78* 40,1±6,05 Лимфоциты,% 40,0-70,0 60,9±2,05 44,3±4,26 49,6±3,15** 47,6±3,05* Моноциты,% 2,0-6,0 2,1±0,96 2,7±0,25** 3,9±0,44 2,8±0,09* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® средств, таких как антибиотики). Выраженный лейкоцитоз во всех группах (повышение на 21,2-89,1% по сравнению с верхней границей физиологической нормы) был связан, по всей видимости, с ревакцинацией против классической чумы свиней. При оценке биохимических показателей в 85-100 дневном возрасте отмечалась положительная динамика снижения уровня глюкозы на 3,5 % у клинически больных животных, в третьей группе на 9,84% (при применении «Провитола») и четвертой на 9,82% (при применении «Микс-Ойла»). 73 Показатель общего белка в первой группе отличался постоянством, у животных с явной клинической картиной гастроэнтерита незначительно снижался на 2,1% (Таблица 6). Таблица 6 - Биохимические показатели крови подопытных свиней в возрасте 85-100 суток, в середине опыта, M±m, n=60 Показатели крови, единицы изменения Референтн ые значения (И.М. Карпуть) Глюкоза, ммоль/л Общий белок, г/л Билирубин общий, мкмоль/л Билирубин прямой, мкмоль/л Билирубин непрямой, мкмоль/л АЛТ, ед./л АСТ, ед./л КоэффициентДе Ритиса Щелочная фосфатаза, ед/л α-Амилаза, ед/л Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 3,5 – 6,4 4,28±0,19 5,27±0,26 5,04±0,25 4,96±0,23** 65 – 85 71,54±3,21 81,21±4,06 80,04±4,01* 80,29±3,77* 0-6,8 3,08±0,14 7,74±0,39 6,84±0,34* 6,96±0,33* 0,9 – 3,4 1,32±0,06 5,03±0,23 3,78±0,17* 3,93±0,18* 0,0-3,4 1,76±0,08 2,71±0,12* 3,06±0,14 3,03±0,14 7 – 15 8-25 1,3-1,4 18,12±59 20,87±0,62 1,15±0,05 35,03±1,58 46,33±2,32 1,32±0,06* 23,78±1,07* 31,3±1,57* 1,31±0,06* 24,93±1,12 29,12±1,37** 1,16±0,05** 140 – 200 183,87±8,27 827,9±37,25 213,3±10,66 * 1254,6±62,7 3* 219,82±10,33 320-1140 244,12±12,2 0 2044,52±10 2,2 1127,72±53,00 * Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® Билирубиновый показатель снижался во всех группах, но максимальное снижение было во 3 группе при применении «Провитола» на 12,2% по сравнению с предыдущим периодом. Напротив, снижение показателя АЛТ отмечалось в большей мере в группе с применением «Микс-Ойл» на 43,6%. Уровень ЩФ во второй группе незначительно снижался (244,12 ед/л), при этом более быстрая динамика снижения отмечалась в третьей группе (на 21,4%). 74 Таким образом, в 85-100-дневном возрасте свиней в первой группе (со стандартным лечением хозяйства) наблюдалось снижение уровня гемоглобина (81±1,2* г%), эритроцитов (4,2±0,67**1012/л) и гематокритного числа (34,3 ±3,14*%), лейкоцитоз (1 группа - 25,7±1,25 109 г/л; 2 группа - 40,4±2,38 109 г/л; 3 группа - 39,6±0,98 109 г/л; 4 группа - 38,5±1,46* 109 г/л), при этом уровень СОЭ (9,4±1,03 мм/час) оставался по-прежнему повышенным, в отличие от опытных групп с применением кормовых добавок «Провитол» и «Микс-Ойл». При оценке биохимических показателей в 85-100 дневном возрасте отмечалась положительная динамика снижения уровня глюкозы (на 3,5 % у клинически больных животных, в третьей группе на 9,84% (при применении «Провитола») и четвертой на 9,82% (при применении «Микс-Ойла»), незначительно снижался уровень щелочной фосфатазы во второй группе (244,12 ед/л), при этом более быстрая динамика снижения отмечалась в третьей группе (на 21,4%) относительно первой группы. 3.2.3. Патоморфологические изменения в органах свиней в 85-100 суточном возрасте У группы свиней в 85-100 суточном возрасте, клинически здоровой по результатам исследования, при наружном осмотре телосложение пропорциональное, грудная клетка симметрична. Ротовая полость закрыта, язык в ротовой полости, целостность зубов не нарушена. Кожа эластичная, серо-розового цвета, щетина жесткая. Кожа вокруг носовых отверстий слабо загрязнена, истечения из носовой полости отсутствуют. Глаза открыты, глазные яблоки не запавшие, истечения отсутствуют, роговица не помутневшая. Анус закрыт, кожа вокруг него незначительно загрязнена. Видимые слизистые оболочки: носовой полости, ротовой полости и конъюнктива глазного яблока серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, умеренно влажные, без наложений. Подкожная клетчатка хорошо выражена, кровеносные сосуды умеренно наполнены кровью. Лимфатические узлы: околоушные, заглоточные, поверхностные шейные, предлопаточные, мезентериальные и лимфоузлы коленной складки серого 75 цвета, слегка уменьшены в объеме, границы слоев слабо выражены, консистенция плотная. Жевательные мышцы, мышцы задних конечностей слабо развиты, умеренно плотной консистенции, на разрезе умеренно влажные, серо-розового цвета, рисунок мышечных волокон хорошо выражен, поверхность разреза влажная. Нарушение целостности костей и связок не обнаружено, конфигурация не изменена. При внутреннем осмотре брюшной полости расположение органов анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Брюшина серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Язык умеренно плотной консистенции, мышца языка розового цвета, на разрезе умеренно влажная, рисунок мышечных волокон хорошо выражен. Пищевод: слизистая оболочка серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Проходимость сохранена. Слизистая оболочка желудка серо-розового цвета, сосуды незначительно переполнены кровью, гладкая, блестящая, без наложений, не утолщена, у одного животного было обнаружено несколько складок слизистой оболочки, которые легко расправлялись при растяжении. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Содержимое кишечника кашицеобразное, со специфическим запахом, серо-желтого цвета. Поджелудочная железа: дольчатая, упругая, светло-серого цвета с красноватым оттенком. Толстый отдел кишечника: на всем протяжении серозная и слизистая оболочки серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, серо-розового цвета. Печень не увеличена в объеме, умеренно плотной консистенции, окрашена в коричневый цвет. На разрезе рисунок долек не выражен. Кровенаполнение печени слабое. 76 Селезенка не увеличена в объёме, удлиненной формы, с поверхности и на разрезе серо-малинового цвета, рисунок трабекул слабо выражен, соскоб пульпы умеренный. Почки бобовидной формы, капсула снимается легко, с поверхности гладкие, блестящие, упругой консистенции, красно-коричневого цвета, граница коркового и мозгового слоев хорошо выражена. Мочевой пузырь умеренно наполнен мочой жёлто-соломенного цвета, слизистая оболочка серого цвета, складчатая. Положение органов грудной полости анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Костальная плевра серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Легкие: не спавшиеся, мягкой консистенции, пестро окрашены: участки красного цвета чередуются с участками серо-розового цвета. Под плеврой и в паренхиме легкого имеются диффузно расположенные пузырьки воздуха. В периферических участках верхушечной и сердечной долей имеются увеличенные в объёме очаги бледно-розового цвета, пушистой консистенции. На разрезе легкие розового цвета (кроме вышеуказанных участков), с поверхности разреза выделяется жидкость красного цвета в умеренном количестве. Перикард тонкий, гладкий, блестящий, прозрачный с умеренно кровенаполненными сосудами, свободноподвижный. Эпикард гладкий, блестящий. Сердечная мышца темно-серого цвета, дрябловатой консистенции. Соотношение стенок правого и левого желудочков составляет 1:3. В полостях правого отдела сердца содержатся рыхлые сгустки крови темно-красного цвета, легко извлекающиеся, гладкие, блестящие, влажные. Эндокард гладкий, блестящий; клапаны сердца эластичные, серо-белого света, гладкие, блестящие Целостность и эластичность сухожильных струн и клапанов не нарушена. Легочная артерия: в полости сгусток крови, красного цвета, эластичный, легко отделяющийся от стенок. Интима гладкая, блестящая, желтоватого цвета. Полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. 77 Аорта: интима гладкая, блестящая, утолщена, бледно желтоватого цвета, плотная; полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Таким образом, основные патологоанатомические изменения у клинически здоровых поросят развивались в легких (очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких), что по большей части было связано с методом диагностического убоя животных. У одного животного было отмечено развитие острого гастрита. У второй группы свиней, с выраженной картиной гастроэнтерита в 85-100 суточном возрасте, при наружном осмотре выявлено: телосложение пропорциональное, грудная клетка симметрична, окоченение не выражено. Ротовая полость закрыта, язык в ротовой полости, целостность зубов не нарушена. Кожа малоэластичная, серо-белого цвета, щетина жесткая, сухая, матовая. Кожа вокруг носовых отверстий не загрязнена, истечения из носовой полости отсутствуют. Глаза открыты; глазные яблоки не запавшие, истечения отсутствуют, роговица не помутневшая. Анус закрыт, кожа вокруг него незначительно загрязнена полужидкими кашицеобразными массами. Видимые слизистые оболочки: носовой полости, ротовой полости, конъюнктива глаза серо-розового цвета, гладкие, блестящие, гладкие, не утолщены, умеренно влажные, без наложений. Подкожная клетчатка: слабо выражена, кровеносные сосуды слабо наполнены кровью. Лимфатические узлы: околоушные, заглоточные, поверхностные шейные, предлопаточные, мезентериальные и лимфоузлы коленной складки серого цвета, слегка уменьшены в объеме, границы слоев слабо выражены, консистенция плотная. Жевательные мышцы, мышцы задних конечностей слабо развиты, умеренно плотной консистенции, на разрезе умеренно влажные, серо-розового цвета, рисунок мышечных волокон хорошо выражен, поверхность разреза влажная. Нарушение целостности конфигурация не изменена костей и связок не обнаружено, 78 При внутреннем осмотре брюшной полости расположение органов анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует. Брюшина серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Язык умеренно плотной консистенции, мышца языка розового цвета, на разрезе умеренно влажная, рисунок мышечных волокон хорошо выражен. Пищевод: слизистая оболочка серо-розового цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Проходимость сохранена. Слизистая оболочка серого или серо-бурого цвета, утолщена и уплотнена, с поверхности складчатая, шероховатая, с углублениями. Покрыта слоем густой вязкой, плохо смываемой водой слизи серо-белого цвета. Слизистая оболочка покрыта трудно смываемым, густым, тягучим, полупрозрачным слизистым отделяемым; мутновата, несколько разрыхлена, набухшая, отёчная, утолщена и уплотнена. Поджелудочная железа: дольчатая, упругая, светло-серого цвета с красноватым оттенком, несколько отечная. Толстый отдел кишечника - на всем протяжении серозная и слизистая оболочки серо-розового цвета, гладкие, блестящие, не утолщены, серо-розового цвета. Печень не увеличена в объеме, умеренно плотной консистенции, окрашена в малиново-коричневый цвет. На разрезе рисунок долек не выражен. Кровенаполнение печени слабое. Селезенка не увеличена в объёме, удлиненной формы, с поверхности и на разрезе серо-малинового цвета, рисунок трабекул слабо выражен, соскоб пульпы умеренный. Почки увеличены в объёме, размягчены, дряблой консистенции, с поверхности и на разрезе пёстро окрашена: очажки темно–красного цвета чередуются с участками светло-красного, серо-жёлтого и жёлтого цвета, фиброзная капсула снимается легко. С поверхности и на разрезе в корковом слое на месте поражённых клубочков заметны точки тёмно-красного цвета. Границы между слоями хорошо выражены, поверхность разреза влажная. 79 Мочевой пузырь умеренно наполнен мочой жёлто-соломенного цвета, слизистая оболочка серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена. Положение органов грудной полости анатомически правильное, постороннее содержимое отсутствует, костальная плевра серого цвета, гладкая, блестящая, не утолщена, умеренно влажная. Легкие: не спавшиеся, пестро окрашены: участки красного цвета чередуются с участками серо-розового цвета, темно-красного с синюшным оттенком. Под плеврой и в паренхиме легкого имеются диффузно расположенные пузырьки воздуха. В периферических участках верхушечной и сердечной долей имеются увеличенные в объёме очаги бледно-розового цвета, пушистой консистенции. На разрезе легкие розового цвета (кроме вышеуказанных участков), с поверхности разреза выделяется жидкость красного цвета в умеренном количестве. Темно-красные участки легкого с синеватым оттенком глубоко плавают в воде Перикард тонкий, гладкий, блестящий, прозрачный с умеренно кровенаполненными сосудами, свободно подвижный. Эпикард гладкий, блестящий. Миокард темно-серого цвета, дрябловатой консистенции. Эндокард гладкий, блестящий; клапаны сердца эластичные, серо-белого света, гладкие, блестящие Целостность и эластичность сухожильных струн и клапанов не нарушена. Интима легочной артерии гладкая, блестящая, желтоватого цвета. Полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Интима аорты гладкая, блестящая, утолщена, бледно желтоватого цвета, плотная; полулунные клапаны не утолщены, полупрозрачные, эластичные. Для свиней с клинической картиной гастроэнтерита (2 группа) были характерны следующие патологоанатомические диагнозы: хронический катаральный гастрит и энтерит; очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких; острый серозный гломерулонефрит. У третьей (на фоне применения кормовой добавки «Провитол»®) и четвертой (на фоне применения кормовой добавки «Микс-Ойл»®) групп опытных животных патоморфологическая картина была схожей, основные 80 изменения локализовались в легких и гастродуоденальной системе: хронический катаральный гастрит и энтерит; очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких. Таким образом, у клинически здоровых свиней 85-100 суточного возраста, основные изменения локализовались в легких- очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких. У второй, третьей и четвертой группы свиней изменения локализовались в легких и гастродуоденальной системе: хронический катаральный гастрит и энтерит; очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких. 3.2.4. Гистологические изменения в поджелудочной железе и гастродуоденальной системе свиней в 85-100 суточном возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы свиней на световом уровне К 85-100 суточному возрасту у первой группы животных отмечалось ослабление сосудистой реакции, что проявлялось нормализацией диаметра кровеносных сосудов (10,5±0,28 мкм). Строма была не утолщена (толщина соединительнотканной перегородки 3,20±0,12 мкм). Ацинарные клетки без изменений, островки Лангерганса средней величины, клеток умеренное количество на площади изученных срезов (52,45±1,31). Стенки протоков были не изменены. Состояние кровенаполнения сосудов паренхимы умеренное. Сосудистые стенки без изменений (Рис. 15). У второй группы свиней к 85-100 суточному возрасту капсула утолщена (5,10±0,14 мкм). Отмечались очаги некроза железистой ткани, что проявлялось кариопикнозом и кариорексисом, а также плазмолизисом, о чем говорило уменьшение площади ацинарных клеток (85,12±1,27 мкм2) и площади их цитоплазмы (53,76±1,29 мкм2), уменьшение количества ядер ациноцитов (5,73±0,14) и их диаметра (3,16±0,08 мкм). 81 Рисунок 15 - Структурная организация поджелудочной железы 85-100 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита. х 100 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами (ациноциты отечны с некротическими изменениями в цитоплазме и ядрах); 2 – островки Лангерганса в состоянии отека; 3 – просвет кровеносного сосуда. Окраска гематоксилиномэозином. Панкреатические островки были уменьшены из-за сдавливания отекшей соединительнотканной капсулой (диаметр панкреатического островка 70,26±1,76 мкм, площадь островка 5128,36±128,21 мкм 2) (Рис. 16,17). Стенки протоков были утолщены за счет перидуктулярного отека, в просвете протоков обнаруживался слущённый эпителий. Состояние кровенаполнения было умеренное, неравномерное (площадь капилляров 65,00±2,07 мкм2, диаметр капилляра 9,11±0,25 мкм), за счет сосудистого спазма и разрастания соединительной ткани. Отмечались морфологические нарушения реологических свойств крови - эритростазы и диапедезные геморрагии. Сосудистые стенки были утолщены за счёт склероза, встречались участки плазматического пропитывания. У третьей и четвертой групп свиней к 85-100 суточному возрасту отмечались сходные гистологические изменения. Отличительной особенностью являлось появление двуядерных ацинарных клеток (количество ядер в ацинусе 82 Рисунок 16 - Структурная организация поджелудочной железы 85-100 суточных клинически здоровых свиней. х 100. 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами; 2 – островки Лангерганса; 3 – просвет кровеносного сосуда. Окраска гематоксилином и эозином Рисунок 17 - Структурная организация поджелудочной железы 85-100 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита. х 100 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами (ациноциты отечны с некротическими изменениями в цитоплазме и ядрах); 2 – островки Лангерганса в состоянии отека; 3 – просвет кровеносного сосуда; 4 - увеличенное количество коллагеновых волокон между секреторными отделами ацинусов, островками Лангерганса, периваскулярном пространстве. Окраска по ВанГизону 83 поджелудочной железы свиней третьей группы - 7,36±0,19, четвертой группы 8,15±0,23, площадь ядер ацинарных клеток третьей группы - 30,37±0,76* мкм2, четвертой группы - 34,61±0,86). Инсулярный аппарат имел клетки средней величины, с незначительным отёком стромы (Рис. 18). Рисунок 18 - Структурная организация поджелудочной железы 85-100 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита на фоне применения препарата «Провитол». х 100 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами; 2 – островок Лангерганса; 3 – коллагеновые волокна в умеренном количестве. Окраска по Ван-Гизону Среднее количество островковых клеток у третьей группы - 54,46±1,36*, практически не отличалось от четвертой группы, где количество клеток составило - 54,26±1,66*. При этом диаметр панкреатического островка был незначительно выше у четвертой группы (82,36±2,06*мкм), чем у третьей (78,92±1,97*мкм), и значительно больше, чем во второй группе (70,26±1,76 мкм). Гистологическая структура желудка у свиней с гастроэнтеритом (2 группа) отличалась ослаблением сосудистой реакции. Отмечалась слизистая дистрофия, некроз и десквамация покровного эпителия слизистой оболочки по сравнению с острым процессом усилены. Преобладала атрофия, дистрофия и некроз клеток железистого эпителия в слизистом слое. Сохранившиеся железы 84 располагались группами, протоки желез расширены, отдельные виды клеток в железах плохо дифференцировались. Слизистая оболочка была инфильтрирована лимфоцитами, плазматическими клетками, единичными нейтрофилами. К этим изменениям присоединялась перестройка эпителия, причем метаплазии подвергался как поверхностный, так и железистый эпителий (Рис.19). 1 2 3 Рисунок 19 – Стенка желудка 85-100 суточных свиней с гастроэнтеритом (2 группа). Нижние слои слизистой оболочки: в верхней части рисунка глубокие слои слизистой оболочки - трёхслойная мышечная пластинка (1). Подслизистая основа состоит из рыхлой неоформленной соединительной ткани, богатой жировыми клетками (2). Мышечная оболочка образована гладкой мышечной тканью (продольной или косо-направленной) (3). В толще слизистой оболочки (между железами желудка, в подслизистом слое) отмечалось разрастание грубоволокнистой соединительной ткани, бедной клеточными элементами. В основном она была представлена коллагеновыми волокнами, небольшим количеством фибробластов, гистиоцитов и плазматических клеток. Рост соединительной ткани шел из подслизистого слоя. В мышечном слое – гипертрофия мышечных пучков, в серозной оболочке изменений нет. 85 Гистологическая структура желудка у свиней 3 и 4 групп была сходной: отличалась ослаблением сосудистой реакции и преобладанием пролиферативных процессов. Слизистая дистрофия, некроз и десквамация покровного эпителия слизистой оболочки по сравнению с острым процессом ослабевали. Сохранившиеся железы располагались группами, протоки желез расширены, отдельные виды клеток в железах плохо дифференцировались. Слизистая оболочка была инфильтрирована незначительным количеством лимфоцитов, единичными нейтрофилами. В подслизистом слое отмечались волокна грубоволокнистой соединительной ткани, бедной клеточными элементами. В мышечном слое и в серозной оболочке изменений нет. Таким образом, применение кормовых добавок «Провитол»® и «МиксОйл»® позволяло нормализовать сосудистую реакцию к 85-100 суточному возрасту, снизить застойные явления в экзокринной паренхиме органа, усилить репаративные процессы ацинарной паренхимы, о чем свидетельствуют появившиеся двуядерные ациноциты у третьей группы животных. У второй группы свиней к 85-100 суточному возрасту превалировали некротические процессы. Панкреатические островки были уменьшены из-за сдавливания отекшей соединительнотканной капсулой. 3.2.5. Ультрамикроскопические изменения поджелудочной железы свиней в 85-100 суточном возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы К 85-100 суточному возрасту при электронномикроскопическом исследовании ациноциты экзокринной части клинически здоровых свиней были пирамидальной или полигональной формы, диаметр ацинуса 65,31±1,95* мкм и высота ацинарных клеток 11,25±0,22 мкм увеличивается по сравнению с клинически здоровыми поросятами 45-60 суточного возраста. Площадь ядер ацинарных клеток незначительно увеличивается с 32,10±0,80** мкм2 до 36,72±0,91* мкм2, при этом уменьшается значение ядерно-цитоплазматического отношения с 0,641±0,016* до 0,635±0,015*. Возрастает среднее количество ядер в ацинусах с 7,25±0,18* до 8,97±0,22*. Митохондрии ацинарных клеток 86 рассредоточены в клетке. Секреторные гранулы разной величины, содержали зимоген, заполняющий цитоплазму: зрелые гранулы зимогена имели вид плотных округлых телец, наряду с ними встречались презимогеновые и незрелые гранулы. Стенка ацинусов была образована панкреацитами, проток с широким просветом и большим количеством микроворсинок. Экзокринная и эндокринная части были отделены друг от друга тонкими прослойками соединительной ткани, несколько утолщенной и разволокненной, находящейся в состоянии незначительного отека. Островки округлой, овоидной формы - диаметр панкреатического островка незначительно увеличивается с 84,29±2,11* мкм до 87,25±2,18** мкм, по периметру и в центре равномерно расположены капилляры. Среднее количество клеток в панкреатических островках 52,45±1,31*. Отчетливо просматривается широкопластинчатая ЭПС во всех типах островков. Преобладали крупные ядра неровной эллипсоидной формы. Митохондрии локализовались преимущественно в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 85-100 суточном возрасте диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. В А-клетках типа были крупные ядра неровной эллипсоидной формы (32,65±0,98*мкм²). Митохондрии располагались преимущественно в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр незначительно увеличился до 0,421±0,027 мкм, в сравнении с 45-60 суточным возрастом, при этом увеличилась общая площадь гранул до 37,36±1,96 мкм ² и относительная их доля в клетке (24,60±0,91*). Элементарная мембрана гранул А-клеток плотно прилегала к электронно-плотной сердцевине. Площадь клетки значительно увеличилась с 105,67±3,81*нм² до 151,90±5,62 нм². Значение ядерно-цитоплазматического отношения - 0,39±0,01, говорило о высокой дифференцировки клеток и способности активно функционировать (Рис. 20). 87 6 Рисунок 20 – Структурная организация поджелудочной железы клинически здоровых свиней в 85-100 суточном возрасте. ×4000. 1 –ядра А - клеток; 2 – темные ядра В – клеток с секреторными гранулами со светлым пояском (3); 4 - широкопластинчатая эндоплазматическая сеть; 6 -аппарат Гольджи; 7 – митохондрии Клетки В-типа чаще встречались в перикапиллярной зоне, группами, скоплениями клеток в центральной зоне и незначительно на периферии островка. Клетки в сравнении с 45-60 суточными поросятами выглядели более дифференцированными и зрелыми. Они имели более темные небольшие округлые ядра, хроматин был в конденсированной форме. Средняя площадь ядра В-клетки значительно увеличилась с 13,45±0,79* мкм² до 49,98±2,65 мкм². Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,220±0,010* мкм, относительная доля гранул увеличилась с 5,40±0,25*% до 15,6±0,85%. Значение ядерно-цитоплазматического отношения увеличивается с 0,211±0,01 до 0,89±0,04. В панкреатических островках встречались одиночные Д-клетки на границе экзокринной и эндокринной паренхимы. Они имели крупное ядро овальной формы с равномерно распределенным хроматином, средняя площадь ядра составила 42,75±3,33 мкм ². Клетки выглядели более светлыми по сравнению с другими клетками, это было связано с более низкой электронной 88 плотностью секреторных гранул, они крупные (диаметр 0,512±0,033 мкм). Доля гранул составила 22,50±1,25% от площади цитоплазмы. РР-клетки локализовались на границе эндокринной и экзокринной части. Ядра клеток были округлой формы, темные (средняя площадь ядер 14,37±0,85*мкм²). Клетки полигональной формы, секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, представлены мелкозернистым материалом, диаметр гранул увеличился с 0,103±0,005* мкм до 0,160±0,008*. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем в других типах панкреатических клеток, доля гранул составила 8,20±0,38*%. При исследовании поджелудочной железы свиней второй группы с неифекционным гастроэнтеритом ациноциты экзокринной части имели пирамидальную, полигональную форму (Рис. 21). Рисунок 21 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 85-100 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтерита. ×4000. 1 - апикальные части панкреатических клеток с гранулами секрета; 2 – светлые вакуоли; 3- просвет концевого отдела с секретом гранул; 4 – ядра ациноцитов с некротическими изменениями; 5 - эндоплазматическая сеть в базальной части панкреатических клеток;6 - митохондрии; 7 – просвет венулы со скоплением эритроцитов (8); 9 – ядро эндотелиальной клетки Ядра ациноцитов довольно вариабельны по размеру (площадь ядер ацинарных клеток 31,35±0,78 мкм2) наблюдались их некротические изменения, 89 разрывы цитоплазмы, разрежение хроматина, что могло говорить о гипоксии клетки. В кариолемме были отчетливо видны ядерные поры. При этом снижалось среднее количество ядер в ацинусе с 6,45±0,16 до 5,73±0,14. Встречались митохондрии с просветлением матрикса и изменением форм, что могло говорить о нарастающей интоксикации и снижении обмена веществ. Гранулы зимогена становились мелкими, они локализовались в базальной части ациноцитов. Эти изменения характеризовали снижение секреторной активности части ациноцитов экзокринной паренхимы. Отдельно были обнаружены светлые вакуоли, образовавшихся, по всей видимости, в результате выхода из гранул секрета. Отдельно встречалось явление набухания и фрагментации эндоплазматической сети. Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 85-100 суточном возрасте при гастроэнтерите также преимущественно диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. В А-клетках типа были также, как и у клинически здоровых свиней крупные ядра неровной эллипсоидной формы (41,14±0,75**мкм²). Митохондрии локализовались диффузно, имели умеренную электронную плотность, встречались митохондрии с просветлением матрикса, что могло быть признаком интоксикации клеток и нарушения обмена веществ. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть, участками встречалась ее набухание, фрагментация. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр был незначительно ниже (0,311±0,020 мкм), чем у клинически здоровых свиней (0,421±0,027 мкм), при этом общая площадь гранул была также ниже 32,00±1,67 мкм ², но выше относительная доля гранул 29,2±1,32*%. Это говорило об асинхронизации и снижении инкреторной функции. Высокое значение ядерно-цитоплазматического отношения - 1,12±0,010**, могло свидетельствовать о большом количестве стареющих клеток или быть индикатором воспалительных процессов. 90 У свиней 85-100 суточного возраста клетки В-типа локализовались группами, преимущественно в центре островка. Они имели более светлые (по сравнению с В-клетками других групп) небольшие округлые ядра (площадь ядра 20,41±0,32** мкм ²), хроматин был несколько разрежен. Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,201±0,009* мкм, относительная доля гранул также была значительно ниже у В-клеток при гастроэнтерите - 11,60±0,54*%, относительно В-клеток клинически здоровых животных (15,6±0,85 %). Д-клетки имели крупное ядро овальной формы с равномерно распределенным хроматином, средняя площадь ядра составила 38,57±0,94* нм². Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,400±0,017* мкм), локализовались в парануклеарном пространстве. Доля гранул составила значительно ниже (14,90±0,75*%), чем у клинически здоровых животных (22,50±1,25). Ядерноцитоплазматическое отношение 0,43±0,020 говорило о функциональности и зрелости клетки. В незначительном количестве по периферии островка были обнаружены одиночные РР-клетки. Ядра клеток были мелкие, округлые формы (средняя площадь ядер 15,89±0,58* мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,121±0,006* мкм. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем во всех других типах островковых клеток, доля гранул составила 12,60±0,59*%. При исследовании поджелудочной железы свиней при гастроэнтерите под влиянием кормовых добавок «Провитол»® ациноциты экзокринной части имели пирамидальную и полигональную форму. Гранулы секрета более крупные, по сравнению со 2 группой, были сконцентрированы у апикального полюса ацинарных клеток. Отдельно были найдены светлые вакуоли. Ядра ациноцитов довольно крупные, гетерохроматин сконцентрирован по периферии ядер. Встречались двуядерные клетки, что говорило о повышении функциональной активности клеток. Количество ядер в ацинусе было 91 значительно больше(7,15±0,18), чем у свиней с клинической картиной гастроэнтерита в 85-100 суточном возрасте (5,73±0,14) (Рис. 22). Рисунок 22 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 85-100 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах на фоне применения кормовой добавки «Провитол»®. ×4000. 1 – Ядро А - клетки; 2 – Ядро В – клетки с секреторными гранулами со светлым пояском (3); 4 - Ядро Д – клетки; светлые вакуоли; 5 – эндоплазматическая сеть; 6 -аппарат Гольджи; 7 – митохондрии Локализация А-клеток была преимущественно диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. Ядра светлые, округлые (37,59±1,33*мкм²). Митохондрии располагались в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр был незначительно ниже (0,250±0,016 мкм), чем у клинически здоровых свиней (0,421±0,027 мкм) и с клинической картиной гастроэнтерита (0,311±0,020 мкм), также меньше была общая площадь гранул (25,06±1,25* мкм ²) и относительная доля гранул (21,50±0,98*%). Снижение значения ядерно-цитоплазматического отношения - 0,69±0,033*, могло говорить о нормализации уровня метаболизма клетки, выявить проявление внутриклеточных компенсаторных реакций. 92 Клетки В-типа имели темные округлые ядра (площадь ядра 35,76±1,23* мкм ²), значительно крупнее, чем у 2 группы свиней (20,41±0,0,32** мкм ²). При этом средняя площадь ядра В-клетки была меньше (20,41±0,0,32**мкм ²), чем площади ядер клинически здоровых свиней (49,98±2,65 мкм ²). Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,230±0,011* мкм. Относительная доля секреторных гранул В-клеток была ниже (13,90±0,65*%), чем у 2 группы свиней - 16,98±0,95%, относительно Вклеток клинически здоровых животных (11,60±0,54*%). Д-клетки имели крупное ядро (площадь ядра 45,82±1,69 мкм2) овальной формы с равномерно распределенным хроматином. Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,420±0,027 мкм), локализуются в парануклеарном пространстве, доля гранул составила 18,20±0,85 % от площади клетки. Ядерноцитоплазматическое отношение практически не изменилось - 0,76±0,039, что демонстрировало высокую функциональность и зрелость клетки. Ядра РР-клеток были небольшие, овоидной формы (средняя площадь ядер 12,43±0,47 мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,147±0,007** мкм, а общая площадь гранул 8,53±0,17** мкм2. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем во всех других типах островковых клеток, доля гранул составила 11,40±0,53*%. При морфологическом исследовании поджелудочной железы свиней при гастроэнтерите под влиянием кормовой добавки «Микс-Ойл»® ациноциты экзокринной части имели пирамидальную и полигональную форму. Гранулы секрета крупные, были сконцентрированы у апикального полюса ацинарных клеток. Ядра ациноцитов крупные (3,32±0,08 мкм2), в отличии от ядер ациноцитов 2 группы свиней (3,16±0,08 мкм2). Количество ядер в ацинусе было значительно больше(7,36±0,19), чем у свиней с клинической картиной гастроэнтерита в 85-100 суточном возрасте (5,73±0,14). А-клетки локализовались диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках. Ядра светлые, округлые (37,04±0,97**мкм²). 93 Митохондрии располагались в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток сконцентрированы парануклеарно, их диаметр был больше (0,310±0,015*мкм), чем у 3 группы (0,250±0,016), но меньше, чем у клинически здоровых свиней (0,421±0,027 мкм) и с клинической картиной гастроэнтерита (0,311±0,020 мкм). При этом, общая площадь гранул (34,41±1,72* мкм ²) была выше, чем во второй (32,00±1,67 мкм2) и третьей (25,06±1,25* мкм2) группах свиней. Клетки В-типа имели темные округлые ядра - площадь ядра 29,40±1,08* мкм², значительно крупнее чем у 2 группы свиней - 20,41±0,32** мкм ², однако, меньше чем при применении кормовой добавки «Провитол»® (35,76±1,23*мкм2) Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, зрелые, их диаметр был меньше, чем в других группах свиней и составил 0,198±0,009* мкм. При этом относительная доля секреторных гранул В-клеток была также ниже (11,20±0,52*%), чем в остальных группах свиней. Д-клетки имели крупное ядро - площадь ядра 52,91±1,95* мкм2, овальной формы с равномерно распределенным хроматином. Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,440±0,021* мкм), крупнее, чем во второй (0,400±0,017* мкм) и третьей (0,420±0,027 мкм) группах; локализовались в парануклеарном пространстве. Доля гранул также была выше, чем в других группах и составила 19,10±0,89*% от площади клетки. Ядерно-цитоплазматическое отношение в четвертой группе (0,79±0,037*), практически не отличалось от 3 группы 0,76±0,039, что демонстрировало высокую функциональность и зрелость клетки. Ядра РР-клеток были небольшие, округлые (средняя площадь ядер 10,86±0,40* мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,133±0,009 мкм, меньше чем в третьей группе(0,147±0,007*), однако, общая площадь гранул в четвертой группе (15,90±0,74 мкм2) была больше, чем в третьей (8,53±0,17** мкм2). У четвертой группы свиней также были обнаружены ацино–инсулярные клетки. Они 94 представляли собой участки поджелудочной железы, состоящие из множества протоков с высоким уровнем пролиферативной активности и большим количеством митохондрий. Это переходная зона, она может быть трансформирована как в панкреатические островки, так и в ациноциты. Ацино– инсулярные клетки содержали единичные эндокринные гранулы и гранулы зимогена (Рис. 23). Рисунок 23 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 85-100 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах на фоне применения кормовой добавки «Провитол»®. ×8000 1 – ядро ацино-инсулярной клетки с ядрышком (а), ядерными порами(б), кариолеммой (в) и кариоплазмой (г); 2 – зимогеновые гранулы; 3- эндокринные гранул со светлым пояском; 4 - эндоплазматическая сеть Таким образом, на ультраструктурном уровне, применение кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® позволяло нормализовать сосудистую реакцию к 85-100 суточному возрасту, снизить застойные явления в паренхимы, о чем свидетельствуют появившиеся двуядерные ациноциты у трэкзокринной паренхиме органа, усилить репаративные процессы ацинарной пареетьей группы животных. У второй группы свиней к 85-100 суточному возрасту помимо утолщения капсулы (5,10±0,14 мкм), отмечались очаги некроза железистой ткани, что проявлялось кариопикнозом и кариорексисом, а также плазмолизисом, о чем говорило уменьшение площади ацинарных клеток 95 (85,12±1,27 мкм2) и площади их цитоплазмы (53,76±1,29 мкм2) и уменьшение количества ядер ациноцитов (5,73±0,14) и их диаметра (3,16±0,08 мкм). Панкреатические островки были уменьшены из-за сдавливания отекшей соединительнотканной капсулой (диаметр панкреатического островка 70,26±1,76 мкм. Клетки В-типа, в сравнении с клетками 45-60 суточных поросят, выглядели более дифференцированными и зрелыми. У третьей группы с применением кормовой добавки «Провитол»® встречались двуядерные клетки, что говорило о повышении функциональной активности клеток. У четвертой группы свиней были дифференцированы ацино-инсулярные клетки. 3.3 Клинико-патоморфологические исследования свиней в 180-210 суточном возрасте 3.3.1. Общий клинический статус свиней в 180-210 суточном возрасте При исследовании общего клинического статуса у животных первой группы: общее состояние бодрое, температура тела 39,5±0,04°С. Положение тела естественное, телосложение нормальное, упитанность хорошая, темперамент живой. Свиньи активные. Состояние волосяного покрова: щетина гладкая, жесткая. Кожа эластичная. Отеки, ранения, язвы отсутствуют; верхний слой эпидермиса носового зеркальца потрескавшийся. Степень развития подкожной клетчатки хорошо развитая. Слизистые оболочки (конъюнктива, слизистые пятачка, рта, влагалища) анемичны, сухие, умеренно напряжены, кровоизлияний, ранений, наложений нет. При исследовании животных второй группы с клинической картиной гастроэнтерита отмечалось угнетенное поведение, некоторые животные принимали сгорбившуюся позу. Щетина была матовая, жесткая. При пальпации живота обнаруживалась болезненность в эпигастральной зоне. У свиней отмечался периодический жидкий стул с примесями слизи. Свиньи из этой группы слабо реагировали на прием пищи и были менее упитанными. 96 У животных третьей и четвертой групп общее состояние бодрое, температура тела в пределах физиологических норм 39,7±0,05°С и 39,2±0,03°С, соответственно. Положение тела естественное, телосложение нормальное. Свиньи более активные по сравнению с второй группой, однако, свиньи четвертой группы отличались лучшим аппетитом и темпераментом. Состояние волосяного покрова: щетина матовая, жесткая. Кожа эластичная (Таблица 7). Таблица 7 - Показатели температуры, пульса, дыхания у свиней в возрасте 180-210 дней, M±m, n=48 Группа Показатели 0 температура, С пульс, уд.в мин дыхание, дых.дв. в мин 1группа, n=12 39,5±0,04 104,00±0,25 18,00±0,48 2 группа, n=12 39,5±0,06* 120,00±0,44* 26,00±0,82* 3 группа, n=12 39,7±0,05* 118,00±0,38* 24,00±0,76* 4 группа, n=12 39,2±0,03** 108,00±0,35* 22,00±0,83* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® Таким образом, в 180-210 суточном возрасте у первой группы свиней значительных отклонений в клиническом статусе не было выявлено. У животных второй группы при клиническом исследовании сохранялись: клиническая картина гастроэнтерита. У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа18,00±0,48 дых.дв. в мин.; 2 группа- 26,00±0,82* дых.дв. в мин; 3 группа24,00±0,76 дых.дв. в мин.; 4 группа- 22,00±0,83 дых.дв. в мин) и показателей пульса (1 группа- 104,00±0,25 уд.в мин.; 2 группа- 120,00±0,44*уд.в мин.; 3 группа- 118,00±0,38*уд.в мин.; 4 группа- 108,00±0,35*уд.в мин.;), что по большей части было связано с манипуляциями при исследовании животных. 97 3.3.2. Морфологические и биохимические показатели крови свиней в 180210 суточном возрасте При оценке гемограммы крови свиней в конце опыта (в возрасте 180-200 дней), среднее количество эритроцитов -значительно ниже во второй исследуемой группе (4,1±0,56, 1012/л), чем в третьей (5,7±0,08, 1012/л) и четвертой (5,3±0,23, 1012/л) группах, где на фоне схем лечения хозяйства применялись кормовые добавки «Провитол»® и «Микс-Ойл»®. (Таблица 8). Таблица 8 – Морфологические показатели крови 180-210 суточных поросят, М±m Показатели крови, единицы изменения Эритроциты, 1012/л Гемоглобин, г/л Референтн ые значения (И.М. Карпуть) 4,3-6,7 85-115 Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 5,1±0,04 4,1±0,56 5,7±0,08 5,3±0,23** 107±6,5 80±1,8 97±7,8* 100±7,1** СОЭ, мм/час 1,0-9,0 8,3±0,56 11,5±0,34 10,4±1,02* 9,8±0,95** Гематокритное число, % 35-43 35,7±1,05 31,2±4,03* 40,4±2,75 39,3±1,96* Тромбоциты,109 г/л 180-300 215,4±24,34 278,8±15,65* 320,8±21,44 308,4±20,36 Лейкоциты, 109 г/л 10,2-21,2 15,5±1,02 21,5±1,32 20,1±0,96** 20,7±1,03** Базофилы,% 0,0-1,0 0,2±0,02 0,7±0,08 0,8±0,04 0,5±0,36* Эозинофилы,% 0,0-6,0 0,0±0,0 1,2±0,04 1,7±0,16 1,1±0,20 Юные,% 0,0-5,0 0,8±0,65 0,8±0,48** 0,1±0,23 1,1±0,15 Палочкоядерны е,% 3,0-7,0 4,3±0,86 6,9±0,06 2,8±0,15* 3,3±1,02** Сегментноядерн ые,% 28,0-45,0 29,1±4,26 43,2±2,75 35,7±5,32** 39,2±2,18* Лимфоциты,% 40,0-70,0 62,4±7,32 70,1±4,18* 76,7±2,03 79,1±8,16 Моноциты,% 2,0-6,0 3,2±1,03 2,1±0,65* 3,2±0,94** 2,7±0,45* Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа –клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 98 Пониженное количество эритроцитов и содержание СОЭ (11,5±0,34, мм/час) во второй группе, могло говорить о наличии хронических воспалительных процессов в организме, в том числе со стороны желудочнокишечного тракта на фоне интоксикации. Об этих процессах свидетельствовало повышение уровня тромбоцитов и базофилов. Лейкопения во второй группе, могла указывать на хроническую интоксикацию, которая была связана с функциональной недостаточностью таких внутренних органов, как печень и поджелудочная железа. Показатели общего клинического анализа крови свиней в группах с использованием кормовых добавок «Провитол» и «Микс-Ойл» находятся в пределах нормы. В конце опыта, в 180-210 дневном возрасте свиней явно проявлялась картина хронических воспалительных процессов протекающих в организме свиней 2 группы (животные с гастроэнтеритом) (Таблица 9). Высокий уровень глюкозы и общего белка плазмы крови, отклонение в большую сторону показателей билирубина, повышенный уровень щелочной фосфатазы (на 52% по сравнению с клинически здоровыми животными) и превышающий практически в 2,5 раза показатель альфа-амилазы – все это свидетельствовало о патологии желудочно-кишечного тракта и пристеночных желез, и как следствие нарушение нормального всасывания питательных веществ и функционального расстройства. Таким образом, в 180-210 суточном возрасте показатели крови второй группы указывают на наличие хронических воспалительных процессов в организме (эритропения - 4,1±0,56 1012/л,; снижение гемоглобина - 8,0±0,18 г% повышение СОЭ - 11,5±0,34 мм/час), в то время как средние значения показателей общего анализа крови животных (в группах с применением кормовых добавок «Провитола»® и «Микс-Ойла»®) – в пределах физиологической нормы. К 180-210 дневному возрасту свиней проявлялись характерные признаки хронических воспалительных процессов у животных с клинической картиной 99 Таблица 9 - Биохимические показатели крови подопытных свиней в возрасте 180-210 суток, в конце опыта, M±m, n=48 Показатели крови, единицы изменения Референтые значения (И.М. Карпуть) Группы 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа Глюкоза, ммоль/л 3,5 – 6,4 4,34±0,20 5,38±0,25 5,00±0,24* 4,99±0,23** Общий белок, г/л 65– 85 70,94±3,33 80,47±3,78 79,54±3,73* 79,41±3,73* 0-6,8 3,31±0,16 7,48±0,35 6,52±0,31* 6,68±0,31* Билирубин прямой, мкмоль/л 0,9 – 3,4 1,21±0,05 4,67±0,21 3,69±0,17* 3,97±0,17* Билирубин непрямой, мкмоль/л 0,0-3,4 2,10±0,09 2,80±0,13* 2,83±0,13 2,71±0,11* АЛТ, ед./л 7–15 17,21±0,55 44,67±1,56 24,69±1,02** 27,97±1,08* АСТ, ед./л 8-25 19,65±0,69 48,11±2,26 29,09±0,94* 31,04±0,99* 1,3-1,4 1,14±0,05 1,07±0,06* 1,17±0,04** 1,11±0,04* 140 – 200 174,65±8,2 0 265,98±12, 50 203,76±9,57* 201,01±9,44 * 788,34±37, 05 2155,99±10 1,33 943,87±44,36 ** 976.98±45,7 6** Билирубивын общий, мкмоль/л Коэффициент ДеРитиса Щелочная фосфатаза, ед/л α-Амилаза, ед/л 320-1140 Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»® гастроэнтерита (вторая группа): пропорционально высокий уровень глюкозы (5,38±0,25 ммоль/л) и общего белка плазмы крови (80,47±3,78 г/л), крови (80,47±3,78 г/л), относительно первой группы, повышенный уровень щелочной фосфатазы (на 52% по сравнению с первой группой животных) и превышающий практически в 2,5 раза показатель α -амилазы. 100 3.3.3. Патоморфологические изменения в органах свиней в 180-210 суточном возрасте У клинически здоровой группы свиней в 180-210 суточном возрасте, были выявлены следующие диагнозы: очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких (у 10 животных); у двух животных было отмечен острый катаральный гастрит и энтерит и у двух свиней острый серозный гломерулонефрит. У второй группы свиней, с выраженной картиной гастроэнтерита в 180210 суточном возрасте, были характерны следующие патологоанатомические диагнозы: хронический катаральный гастрит и энтерит (у всех 12 животных); очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких (у 12 животных); острый серозный гломерулонефрит (у 11 животных), очаговая зернисто-жировая дистрофия печени (у 10 животных), У третьей (на фоне применения кормовой добавки «Провитол»®) группы опытных животных патоморфологическая картина характеризовалась следующими патологоанатомическими диагнозами: хронический катаральный гастрит и энтерит (у 6 животных); очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких (у 12 животных); острый серозный гломерулонефрит (у 12 животных); очаговая зернисто-жировая дистрофия печени (у 9 животных). У четвертой (на фоне применения кормовой добавки «Микс-Ойл»®) группы опытных животных патоморфологическая картина характеризовалась следующими патологоанатомическими диагнозами: хронический катаральный гастрит и энтерит (у 9 животных); очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких (у 12 животных); острый серозный гломерулонефрит (у 3 животных); очаговая зернисто-жировая дистрофия печени (у 3 животных). Таким образом, у животных третьей и четвертой групп (на фоне применения кормовых добавок) хронический катаральный гастрит и энтерит наблюдался 50% в третьей группе и у 75% животных в четвертой, в то время как у второй группы хронический катаральный гастрит и энтерит наблюдался у 100% животных. 101 3.2.4. Гистологические изменения поджелудочной железе и гастродуоденальной системы свиней в 180-210 суточном возрасте. Морфометрические показатели поджелудочной железы свиней на световом уровне К 180-210 суточному возрасту у клинически здоровых свиней отмечалась умеренная сосудистая реакции (диаметр кровеносных сосудов - 9,40±0,28*мкм), строма была не утолщена (толщина трабекулы 3,30±0,09*мкм). Ацинарные клетки без видимых изменений, островки Лангерганса средней величины (площадь островка 5837,81±145,95 мкм2), клеток умеренное количество на площади изученных срезов (48,16±1,20*). Стенки протоков были не изменены. Состояние кровенаполнения сосудов паренхимы умеренное. У второй группы свиней капсула была утолщена, с явлениями склероза (4,70±0,13) (Рис. 24). Рисунок 24- Отек эндокринной паренхимы (1) поджелудочной железы свиней 180-210 суточного возраста с клинической картиной гастроэнтерита (2 группа) и экзокринная паренхима (2) с явлениями липоматоза (3) и очаговым некрозом (4). Окраска гематоксилином и эозином. × 400 Экзокринная паренхима с явлениями некроза и липоматоза (площадь цитоплазмы ацинарных клеток - 58,17±1,22 мкм2, количество ядер в ацинусе уменьшено - 5,17±0,14). Исследуя препарат в разных участках, обнаруживались 102 мелкие капли жира в виде скоплений, либо группами по несколько клеток, сдавливая при этом рядом расположенные капилляры. Эти капли могли возникать при прогрессировании процесса разрушения клеток железы с последующим освобождениям липаз, которые активизируются трипсином и желчными кислотами. Липазы эмульгировали жиры и могли вызывать жировой некроз поджелудочной железы (жир расцепляется на глицерин и жирные кислоты, которые с кальцием образуют мыла, а с тирозином - кристаллы, что обусловливает появление пятен жирового некроза). Наблюдался процесс разрастания междольковых септ соединительной ткани с наличием фибробластов и моноцитов (Рис. 25). Рисунок 25 - Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита. Окраска гематоксилином и эозином х 100 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами с признакми дистрофии и некроза; 2 – островки Лангерганса; 3 – просвет кровеносного сосуда со скоплением эритроцитов; 4 - капли жира в виде скоплений Островки Лангерганса были мелкие (5124,40±128,11 мкм 2), с отёком стромы, клетки небольшие в умеренном количестве (43,37±1,08) на площади изученных срезов. Отмечались разрастания соединительной ткани; стенки протоков были утолщены за счет наличия перидуктулярного склероза. 103 Состояние кровенаполнения сосудов умеренное (диаметр капилляров 10,56±0,29 мкм). Сосудистые стенки были утолщены за счёт склероза. У свиней 3 и 4 групп к 180-210 суточному возрасту строма поджелудочной железы в состоянии незначительного отека. Экзокринная паренхима без визуальных изменений, отдельные ацинарные клетки крупные (площадь цитоплазмы ацинарных клеток у животных 3 группы - 66,91±1,40 мкм2, 4 группы - 62,07±1,39 мкм2), хорошо дифференцированные в ацинусе. Инсулярные островки Лангерганса средней величины (3 группа диаметр 84,27±2,11мкм, 4 группа диаметр 86,94±2,17), без визуальных патологических изменений, в умеренном количестве (3 группа-49,61±1,24, 4 группа 47,45±1,19) на площади изученных срезов (Рис.26). Рисунок 26 - Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита на фоне применения препарата «Провитол»®. 1 – экзокринная паренхима представлена ацинусами; 2 – островки Лангерганса; 3 – просвет кровеносного сосуда. Окраска гематоксилином и эозином. х 100 Отдельные протоки поджелудочной железы в состоянии нерезкого спазма, стенки протоков не изменены. Содержимое просветов протоков бледнорозовое, гомогенное, умеренной плотности. Гистологическая структура желудка у свиней с картиной гастроэнтерита (2 группа) отличалась превалированием атрофии, некроза и десквамации 104 покровного эпителия слизистой оболочки. Железистый эпителий был подвергнут атрофии. Слизистая оболочка была инфильтрирована лимфоцитами, плазматическими клетками, нейтрофилами. Метаплазии подвергался как поверхностный, так и железистый эпителий. В толще слизистой оболочки разрастание грубоволокнистой соединительной тканью, бедной клеточными элементами. В мышечном слое – гипертрофия мышечных пучков, в серозной оболочке изменений нет. В тонком отделе кишечника отслеживается неравномерная толщина ворсинок и появление булавовидных утолщений дистальных отделов, вакуолизирована. при Строма этом ворсинок цитоплазма энтероцитов инфильтрирована ворсинок лимфоцитами и эозинофилами. В толще слизистой оболочки - разрастание грубоволокнистой соединительной тканью, бедной клеточными элементами. Гистологическая структура желудка у свиней 3 и 4 групп была сходной: Слизистая дистрофия покровного эпителия слизистой оболочки по сравнению. Железы располагались группами, протоки желез расширены, отдельные виды клеток в железах плохо дифференцировались. Слизистая оболочка была инфильтрирована незначительным количеством лимфоцитов. В подслизистом слое отмечались коллагеновые волокна. В мышечном слое и в серозной оболочке изменений нет. Таким образом, к 180-210 суточному возрасту у клинически здоровых свиней отмечалась умеренная сосудистая реакции, строма была не утолщена, ациноциты и островки Лангерганса без визуальных изменений. У свиней второй группы с признаками гастроэнтерита нарастают склеротические процессы и липоматоз экзокринной паренхимы, с сохранением некротических процессов клетках. У поросят третьей и четвертой группы, получавших «Провитол»® и «Микс-Ойл»®, к180-210 суточному возрасту строма поджелудочной железы в состоянии незначительного отека, экзокринная паренхима без визуальных изменений. 105 3.2.5. Ультрамикроскопические и морфометрические изменения поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте При электронно-микроскопическом исследовании эндокринной части поджелудочной железы клинически здоровых свиней 180-210 суточного возраста было установлено, что ациноциты экзокринной части клинически здоровых свиней были пирамидальной или полигональной формы, диаметр ацинуса 68,10±2,04* мкм и высота ацинарных клеток 11,31±0,18**мкм увеличивается по сравнению с клинически здоровыми поросятами 85-100 суточного возраста. Площадь ядер ацинарных клеток незначительно уменьшается с 36,72±0,91* мкм2 до 36,08±0,91* мкм2, при этом уменьшается значение ядерно-цитоплазматического отношения с 0,635±0,015* до 0,581±0,014*. Незначительно снижается среднее количество ядер в ацинусах с 8,97±0,22*до 8,15±0,23*. Митохондрии ацинарных клеток рассредоточены в клетке, при этом они зрелые, хорошо выражены крипты. Стенка каждой митохондрии образована двумя мембранами, которые различаются по составу ферментов и по строению: наружная митохондриальная мембрана гладкая, не имеет складок или выступов, внутренняя митохондриальная мембрана имеет складки, направленные внутрь митохондрии – кристы. Кристы видны в виде трубочек со светлым содержимым,их обилие говорило о активности митохондрий. Матрикс митохондрий электронноплотный, заполняет внутреннюю митохондриальную камеру и имеет мелкозернистое строение (Рис. 27). Секреторные гранулы разной величины, на разных стадиях созревания. Проток с широким просветом и большим количеством микроворсинок. Экзокринная и эндокринная части были отделены друг от друга прослойками соединительной ткани, несколько разволокненной, находящейся в состоянии незначительного отека. Островки овоидной расположенными по периферии капиллярами. формы с равномерно 106 Рисунок 27 – Структурная организация митохондрии ациноцита поджелудочной железы клинически здоровых свиней в 180-210 суточном возрасте × 25000. 1 – наружная митохондриальная мембрана; 2- внутренняя митохондриальная мембрана; 3 митохондриальные кристы; 4 – матрикс митохондрий К 180-210 суточному возрасту при электронномикроскопическом исследовании островки округлой формы - диаметр панкреатического островка увеличивается с 87,25±2,18**мкм до 89,26±2,23* мкм, по периметру и в центре равномерно расположены капилляры. Среднее количество клеток в панкреатических островках уменьшалось с 52,45±1,31*(85-100 суточный возраст) до 48,16±1,20*. Отчетливо просматривается широкопластинчатая ЭПС во всех типах островков. Преобладали крупные ядра неровной эллипсоидной формы. Митохондрии локализовались преимущественно в парануклеарной части и имели умеренную электронную плотность. Локализация А-клеток у свиней в 180-2100 суточном возрасте диффузно, в виде отдельных клеток по периферии островка. В А-клетках типа были крупные ядра неровной эллипсоидной формы (40,69±1,52*). Митохондрии располагались преимущественно в парануклеарной части, клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр уменьшился с 0,421±0,027 мкм до 0,387±0,018*мкм, в сравнении с 85-100 107 суточным возрастом, при этом значительно уменьшилась площадь гранул с 37,36±1,96 мкм² до 21,82±1,09*мкм² и относительная их доля в клетке (с 24,60±0,91*% до 15,40±0,72*%). Инкреторные гранулы А-клеток были равномерно распределены в цитоплазме, элементарная мембрана ядра гранул тесно прилегала к электронно-плотной сердцевине, что является характерным для А-клеток. Отмечался также небольшой отек стромы. Значение ядерноцитоплазматического отношения - 0,51±0,024, говорило о высокой функциональности клеток. Также были обнаружены клетки В-типа. Эти клетки обнаруживались в центральной зоне островка, крупными скоплениями клеток в перикапиллярной зоне. Эти клетки имели округлое ядро (площадь ядра 45,94±1,78 мкм2). Ядра Вклеток более темные – хроматин в конденсированной форме, более мелкие, нежели ядра А-клеток. Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, по сравнению с гранулами А-клеток более мелкие, имели светлый поясок, их диаметр увеличился, по сравнению со свиньями 85-100 суточного возраста с 0,220±0,010* мкм до 0,267±0,013* мкм, относительная доля гранул уменьшилась с 15,6±0,85% до 12,40±0,58. Общий вид гранул говорил об их зрелости и функциональности. Значение ядерно- цитоплазматического отношения незначительно уменьшается с 0,89±0,04 до 0,83±0,039. На границе экзокринной и эндокринной паренхимы встречались одиночные Д-клетки с крупным ядром (площадь ядра 40,01±1,22* мкм ²) овальной формы с равномерно распределенным хроматином. Секреторные гранулы Д-клеток выглядели более светлыми по сравнению с другими клетками из-за более низкой электронной плотности, они крупные - диаметр 0,460±0,030 мкм, доля гранул составляет 21,50±0,98*% от площади цитоплазмы. РР-клетки локализовались на границе эндокринной и экзокринной части одиночно. Ядра клеток были округлой формы, темные, не крупные - средняя площадь ядер 10,45±0,32 мкм². Диаметр гранул уменьшился с 0,160±0,008* мкм 108 до 0,142±0,007*. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем в других типах панкреатических клеток, доля гранул составила 12,50±0,57%. Значение ядерно-цитоплазматического отношения было крайне мало 0,16±0,008* из-за крайне малого ядра и обширной цитоплазмы с органеллами. При исследовании поджелудочной железы свиней с неифекционным гастроэнтеритом ациноциты экзокринной части имели пирамидальную, полигональную форму. Ядра ациноцитов небольшие - площадь ядер ацинарных клеток 29,78±0,78 мкм2, отмечались их структурные изменения: некроз, разрывы цитоплазмы, разрежение хроматина, что могло говорить о гипоксии клетки (Рис. 28). Рисунок 28 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах ×4000. 1 ациноциты; 2 –ядра ациноцитов с ядрышком(а), ядерными порами(б), кариолеммой (в) и кариоплазмой (г); 3 – секреторные гранулы; 4- светлые вакуоли; 5 –вставочный проток с секретом; 6 – просвет кровеносного сосуда В ядрах обнаруживались разной величины пузырьки (вакуолизация ядер). При этом снижалось среднее количество ядер в ацинусе с 5,73±0,14 до 5,17±0,14. Встречались митохондрии с просветлением матрикса и изменением форм, что могло говорить о нарастающей интоксикации и снижении обмена 109 веществ. Гранулы зимогена были мелкими, они локализовались в базальной части ациноцитов (Рис. 29). В кариолемме были отчетливо видны ядерные поры. Отдельно были обнаружены светлые вакуоли, образовавшихся, по всей видимости, в результате выхода из гранул секрета. Эндоплазматической сеть была в состоянии отека и фрагментации. Исследуя препарат в разных участках обнаруживались мелкие капли жира в виде скоплений, либо группами по несколько клеток, сдавливая при этом рядом расположенные капилляры. Локализация А-клеток у свиней в 180-210 суточном возрасте при гастроэнтерите также преимущественно по периферии, в виде отдельных Рисунок 29 - Структурная организация поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах ×8000. 1 апикальные части панкреатических клеток с гранулами секрета; 2 – светлые вакуоли; 3- просвет концевого отдела с секретом гранул; 4 – ядра ациноцитов с некротическими изменениями; 5 - эндоплазматическая сеть; 6 - митохондрии; 7 – центроацинозная клетка клеток. В А-клетках типа были также, как и у клинически здоровых свиней крупные ядра неровной эллипсоидной формы (30,27±1,12*мкм²). Митохондрии локализовались диффузно, имели умеренную электронную плотность, встречались митохондрии с просветлением матрикса, что могло 110 быть признаком интоксикации клеток и нарушения обмена веществ. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть, участками встречалась ее набухание, фрагментация. Инкреторные гранулы Аклеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр был незначительно ниже (0,325±0,015* мкм), чем у клинически здоровых свиней (0,387±0,018*мкм), при этом общая площадь гранул была выше (22,23±0,44**мкм ²), что говорило о преобладании незрелых инкреторных гранул, асинхронизации и снижении инкреторной функции. У свиней 180-210 суточного возраста клетки В-типа локализовались группами, преимущественно в центре островка. Они имели темные, мелкие, округлые ядра (площадь ядра 19,46±0,72 мкм ²), хроматин был в конденсированной форме, в отдельных ядрах отмечались дистрофические и некротические изменения. распределены по Секреторные цитоплазме, гранулы локализовались были неравномерно преимущественно в парануклеарной зоне, их диаметр составил 0,212±0,014 мкм, относительная доля гранул также была значительно ниже у В-клеток при гастроэнтерите 9,20±0,43%, относительно В-клеток клинически здоровых животных 12,40±0,58%. Д-клетки имели крупное ядро овальной формы с равномерно распределенным хроматином, средняя площадь ядра составила 43,68±1,61* нм². Секреторные гранулы крупные - диаметр 0,301±0,014* мкм, однако, значительно меньше, чем у клинически здоровых животных - 0,460±0,030 мкм, локализуются преимущественно в парануклеарном пространстве. Доля гранул при этом также ниже (16,80±0,79*%), чем у здоровых животных (21,50±0,98*%). В незначительном количестве по периферии островка были обнаружены одиночные РР-клетки. Ядра клеток были мелкие, округлые формы (средняя площадь ядер 11,33±0,41*мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, очень мелкие, диаметр гранул составил 0,112±0,005* мкм. 111 Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем во всех других типах островковых клеток, доля гранул составила 11,00±0,51*%. При исследовании поджелудочной железы свиней при гастроэнтерите под влиянием кормовой добавки «Провитол»® ациноциты экзокринной части имели пирамидальную и полигональную форму. Ядра ациноцитов довольно крупные, гетерохроматин сконцентрирован по периферии ядер. Количество ядер в ацинусе было больше(6,54±0,16), чем у свиней с клинической картиной гастроэнтерита (2 группа) - 5,17±0,14 (Рис. 30). Локализация А-клеток была преимущественно по периферии, в виде отдельных клеток по периферии. Ядра А-клеток светлые, округлые (38,24±1,31 мкм²). Митохондрии располагались в парануклеарной части и имели Рисунок 30 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах на фоне применения препарата «Провитол»® ×8000. 1 - апикальные части панкреатических клеток с гранулами секрета; 2 – светлые вакуоли; 3- просвет концевого отдела с секретом гранул; 4 – ядра ациноцитов с ядрышками(а), ядерными порами(б), кариолеммой (в) и кариоплазмой (г); 5 эндоплазматическая сеть в базальной части панкреатических клеток; 6 -аппарат Гольджи; 7 - митохондрии; 8 – центроацинозная клетка 112 умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток равномерно были распределены в цитоплазме, их диаметр был незначительно ниже (0,370±0,024 мкм), чем у клинически здоровых свиней (0,387±0,018* мкм), однако выше, чем у животных с клинической картиной гастроэнтерита (0,325±0,015* мкм) и свиней с применением «Микс-Ойла»® гастроэнтерита (0,330±0,016* мкм). Общая площадь гранул (21,48±0,43** мкм ²) и относительная доля гранул (16,80±0,79* %) не имели выраженных отличий от других групп. Клетки В-типа имели темные округлые ядра (площадь ядра 27,84±1,03* мкм²), значительно крупнее, чем у 2 группы свиней (19,46±0,72 мкм ²). Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,237±0,011* мкм. Относительная доля секреторных гранул В-клеток была выше (11,30±0,53 %), чем у 2 группы свиней - 9,20±0,43 %, ниже относительно В-клеток клинически здоровых животных (12,40±0,58 %). Д-клетки имели крупное ядро (площадь ядра 50,41±1,85* мкм2) овальной формы с равномерно распределенным хроматином. Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,440±0,029 мкм), локализовалась в парануклеарном пространстве, доля гранул составила 19,20±0,90* % от площади клетки. Ядерно-цитоплазматическое отношение практически не изменилось - 0,89±0,042*, что демонстрировало высокую функциональность и зрелость клетки. Ядра РР-клеток были небольшие, овойдной формы (средняя площадь ядер 11,55±0,45* мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,117±0,006* мкм, а общая площадь гранул 10,85±0,87 мкм2. Количество секреторных гранул было значительно меньше, чем во всех других типах островковых клеток, доля гранул составила 13,60±0,93 %. 113 При исследовании поджелудочной железы свиней при гастроэнтерите с применением кормовой добавки «Микс-Ойл»® ациноциты экзокринной части имели пирамидальную и полигональную форму. Гранулы секрета крупные, были сконцентрированы у апикального полюса ацинарных клеток. Ядра ациноцитов крупные (3,27±0,09 мкм2), в отличии от ядер ациноцитов второй группы свиней (3,08±0,07 мкм2). Количество ядер в ацинусе было значительно больше(6,54±0,16), чем у свиней с клинической картиной гастроэнтерита в 180210 суточном возрасте (5,17±0,14). А-клетки локализовались по периферии, в виде отдельных клеток в панкреатических островках по периферии. Ядра светлые, округлые (32,80±1,12* мкм²). Митохондрии располагались в перинуклеарной части и имели умеренную электронную плотность. В клетках отчетливо была видна широкопластинчатая эндоплазматическая сеть. Инкреторные гранулы А-клеток сконцентрированы перинуклеарно, их диаметр был меньше (0,330±0,016* мкм), чем у третьей группы (0,370±0,024 мкм), клинически здоровых свиней (0,387±0,018* мкм), но больше, чем с клинической картиной гастроэнтерита (0,325±0,015* мкм). При этом, общая площадь гранул (23,08±0,46** мкм ²) была выше, чем во второй (22,23±0,44** мкм2) и третьей (21,48±0,43** мкм2) группах свиней. Клетки В-типа имели темные округлые ядра - площадь ядра 28,34±1,03** мкм², значительно крупнее чем у второй группы свиней - 19,46±0,72 мкм и третьей группы (27,84±1,03*мкм2) Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, зрелые, их диаметр был меньше, чем в третьей группе (0,237±0,011* мкм) и составил 0,217±0,010* мкм. При этом также была мала относительная доля секреторных гранул В-клеток - 9,5810±0,45% (Рис. 31). 114 Рисунок 31 – Структурная организация поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте с клинической картиной гастроэнтеритах на фоне применения препарата «Микс-Ойл»® ×10000. 1 – ядро В-клетки с ядрышком(а), ядерными порами(б), кариолеммой (в) и кариоплазмой (г); 2 – секреторные гранулы В – клетки со светлым пояском; 3 - эндоплазматическая сеть; 4 аппарат Гольджи; 5 - митохондрии; 6 – просвет кровеносного сосуда; 7 – ядро эндотелиальной клетки Д-клетки имели крупное ядро - площадь ядра 63,02±2,58 мкм2, овальной формы с равномерно распределенным хроматином. Секреторные гранулы крупные (диаметр 0,424±0,08 мкм), крупнее, чем во второй (0,301±0,014* мкм) группе. Доля гранул также была ниже, чем в других группах и составила 16,10±0,75*% от площади клетки. Ядерно-цитоплазматическое отношение в четвертой группе (1,14±0,054*), демонстрировало низкую функциональность и старость клетки. Ядра РР-клеток были небольшие, округлые (средняя площадь ядер 13,32±0,54* мкм²). Секреторные гранулы, заполняющие цитоплазму, мелкие, диаметр гранул составил 0,120±0,006* мкм, больше чем во второй (0,112±0,005* мкм) и третьей группе(0,117±0,006*мкм), однако, общая площадь гранул в четвертой группе (9,24±0,88 мкм2) была меньше, чем в третьей группе(10,85±0,87 мкм2). Таким образом, к 180-210 суточному возрасту у клинически здоровых свиней отмечалась умеренная сосудистая реакции, строма была не утолщена, 115 ациноциты и островки Лангерганса без визуальных изменений. У свиней второй группы с признаками гастроэнтерита нарастают склеротические процессы и липоматоз экзокринной паренхимы, с сохранением некротических процессов клетках, при этом наблюдаются отечные и структурные нарушения уже и в эндокринной части, в частности, В-клетках. У поросят третьей и четвертой группы, получавших «Провитол»® и «Микс-Ойл»®, к180-210 суточному возрасту строма поджелудочной железы в состоянии незначительного отека, экзокринная паренхима без визуальных изменений, и в отличии от второй группы, изменения в эндокринной части не были выражены. 3.4 Иммуногистохимичекие исследования поджелудочной железы клинически здоровых свиней и с выраженной картиной гастроэнтерита на разных этапах эксперимента Для оценки проводилось функционального состояния иммуногистохимическое поджелудочной окрашивание на железы, CD-3, миелопероксидазу, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). В организме животных Т-лимфоциты (CD3) отвечают за реакции клеточного иммунитета, осуществляют иммунологический надзор за антигенным. Доминирующим типом интратуморальных лимфоцитов являются зрелые Т-клетки (CD3+). Маркер CD3 позволяет идентифицировать популяцию зрелых покоящихся Т-клеток и провести количественную оценку. Этот антиген специфичен для всей линии T-клеток; обычно он присутствует на поверхности зрелых тимоцитов, а также незрелых и активированных T-лимфоцитов периферической крови, как индуцирующей, так и супрессорной/ цитотоксической популяции. При исследовании 45-60 суточных поросят клинически здоровых и с клинической картиной гастроэнтерита не наблюдалось содержания CD-3 лимфоцитов в поджелудочной железе. У клинически здоровых животных это было связно с отсутствием воспалительной реакции в тканях железы, а в группах с гастроэнтеритом могло означать снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов и недостаточности 116 клеточного иммунитета. Данные согласуются с показателями лимфоцитов периферической крови у разных возрастных групп свиней (Рис. 32). Рисунок 32 - Показатели лимфоцитов,% периферической крови у разных возрастных групп свиней К 85-100 суточному возрасту во всех группах отсутствовала реакция на CD-3 лимфоциты, в третьей и четвертой группе это было связано с отсутствием воспалительных процессов в поджелудочной железе, что доказано патоморфологическими и гистологическими исследованиями, а во второй группе могло говорить об ослаблении защитных сил организма и развитии гипоиммунного состояния или иммунодефицита. К 180-210 суточному возрасту во всех группах отсутствовала реакция на CD-3 лимфоциты, в первой, третьей и четвертой группе это было связано с отсутствием воспалительных процессов в поджелудочной железе, что доказано патоморфологическими и гистологическими исследованиями, а во второй группе превалировали хронические процессы склерозирования и липоматоза железы (Рис. 33, 34.) 117 1 2 1 1 Рисунок 33 - Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суточных клинически здоровых свиней. Окраска на CD3. х 100. 1- эндокринная часть представлена островками; 2 – экзокринная паренхима – ацинусами Т-лимфоцитов. На всех этапах эксперимента, у всех возрастных групп не наблюдалось содержания CD-3 лимфоцитов в поджелудочной железе. Однако отсутствие клеток могло свидетельствовать не только об отсутствии воспалительной реакции, но и могло означать снижение абсолютного количества Т-лимфоцитов и недостаточности клеточного иммунитета. Таким образом характеризовалась недостаточность клеточно-эффекторного звена иммунитета. Миелопероксидаза это фермент лизосом нейтрофилов, она относится к гемсодержащим белкам. Миелопероксидаза образует гипохлорит-анион, который обладает неифекционным бактерицидным действием и при многих воспалительных заболеваниях, в том числе панкреатит, нейтрофильная миелопероксидаза способна вызвать повреждение ткани. У всех групп опытных животных, отсутствовала специфическая реакция на миелопероксидазу. При исследовании 45-60 суточных поросят клинически здоровых и с клинической картиной гастроэнтерита не наблюдалось содержания миелопероксидазы в поджелудочной железе. У клинически здоровых животных это было связно с 118 1 1 2 1 Рисунок 34- Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суочных свиней с клинической картиной гастроэнтерита при применении препарата «Провитол». Окраска на CD3. х 100. 1- эндокринная часть представлена островками; 2 – экзокринная паренхима - ацинусами отсутствием воспалительной реакции в тканях железы, а в группах с гастроэнтеритом могло означать недостаточность клеточного иммунитета. К 85-100 суточному возрасту во всех группах отсутствовала реакция на миелопероксидазу, в третьей и четвертой группе это было связано с затуханием воспалительных процессов в поджелудочной железе, что доказано патоморфологическими и гистологическими исследованиями, а во второй группе могло говорить о развитии гипоиммунного состояния или иммунодефицита. К 180-210 суточному возрасту во всех группах отсутствовала реакция на миелопероксидазу, в первой, третьей и четвертой группе это было связано с отсутствием воспалительных процессов в поджелудочной железе, что доказано патоморфологическими и гистологическими исследованиями, а во второй группе превалировали хронические процессы склерозирования и липоматоза. Отсутствовала также реакция на фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) (Рис. 35, 36). 119 Рисунок 35 - Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита с применением препарата «Провитол». Окраска на фактор роста эндотелия сосудов (VEGF). х 100 Рисунок 36- Структурная организация поджелудочной железы 180-210 суточных свиней с клинической картиной гастроэнтерита с применением препарата «Микс-Ойл». Окраска на фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) х 100 VEGF - это сигнальный белок, который вырабатывается клетками для стимуляции образование эмбриональной сосудистой системы и роста новых 120 сосудов. Уникальность этого белка заключается в том, что в отличие от всех других факторов роста, он митогенен только по отношению к эндотелиальным клеткам. Эти белки отвечают за восстановление оксигенации клеток и тканей, тем самым повышаются обменные процессы. 3.5 Зоотехнические показатели свиней Для комплексной оценки примененных методов коррекции состояний поджелудочной железы свиней при гастроэнтерите с хозяйственной точки зрения, была проведена зоотехническая оценка статей свиней на всех этапах эксперимента. Для достоверности опыта в начале эксперимента были подобраны животные по принципу групп аналогов с средней массой от 19,27±1,28** кг до 19,50±1,31, показатели длины туловища обхвата груди за лопатками и высота в холке также не имела значимых различий (таблица 10). Однако, уже на втором этапе эксперимента, когда животные достигли 85100 суточного возраста, обозначилось явное отставание свиней второй, третьей и четвертой по всем показателям, причем более выраженное во второй группе (живая масса 31,84±2,91* кг, длина туловища 65,80±5,24*см, высота в холке 34,22±0,20), где лечение проводилось по схеме хозяйства на фоне гастроэнтерита. Еще более выраженные различия обозначились к 180-210 суточному возрасту свиней. Свиньи с клинической картиной гастроэнтерита на фоне лечения хозяйства (2 группа) значительно отставали в живой массе (живая масса на 17,5% ниже массы контрольной группы), и незначительно в остальных показателях. При этом несмотря на наличие клинической картины гастроэнтерита в 3 и 4 группах при постановке на опыт, к 180-210 суточному возрасту в данных группах отставание в живой массе было незначительным: живая масса 81,21±5,88*кг в 3 группе (на фоне применения кормовой добавки «Провитол») и 83,23±5,38 кг в 4 группе (на фоне применения кормовой добавки «Микс-Ойл»). 121 Таким образом, животные второй группы в 85-100 суточном возрасте отставали по экстерьерным и зоотехническим показателям. Таблица 10 – Показатели статьей тела свиней возрастов, M±m, n=60 Возраст опытных животных Исследуемая группа Живая масса, кг Длина туловища, см 45-60 суток 1 группа 2группа 3 группа 4 группа 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 19,42±1,18 19,27±1,28** 19,35±1,05* 19,50±1,31 33,39±2,71 31,84±2,91* 32,72±2,61* 32,37±2,89* 82,94±6,20 68,43±4,23** 81,21±5,88* 83,23±5,38 52,80±5,64 51,33±3,96** 52,93±5,34 54,07±6,09 68,60±6,08 65,80±5,24* 69,33±4,36 67,47±4,57 90,87±5,64 89,60±5,95 89,73±5,03* 93,07±4,84** 85-100 суток 180-210 суток Обхват груди за лопатками, см 67,47±3,34 67,20±3,19 67,07±3,07** 66,00±3,03** 77,07±2,43 76,47±3,28 75,87±3,95* 75,60±3,61 105,27±4,27 96,93±3,66 104,27±3,43** 103,93±4,74 Высота в холке, см 29,11±0,13 28,74±0,12 29,54±0,13* 30,11±0,1*4 35,17±0,18 34,22±0,20 37,25±0,15* 36,75±0,17* 48,5±0,23 47,91±0,22* 48,01±0,20** 49,15±0,25 Примечание: *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. Животные третьей и четвертой группы также отставали от показателей первой группы, но эти значения были существенно ниже, чем во второй группе В 180-210 суточном возрасте, несмотря на наличие клинической картины гастроэнтерита в 3 и 4 группах при постановке на опыт, в данных группах отставание в живой массе было незначительным. 3.6 Экономическая и терапевтическая эффективность выбранных методов лечения Экономическую эффективность рассчитывали по методике, предложенной И.Н. Никитиным (2007). Методика определения экономической эффективности от ветеринарных показателей мероприятий основана предотвращенного ущерба на сопоставлении с затратами на между собой проведенные мероприятий. 1. Коэффициенты для выявления предотвращенного ущерба от болезней 122 2. Общий экономический ущерб от болезней животных до проведения лечения: убытки от падежа, вынужденного забоя животных, потери продукции из-за болезней животных и снижения их продуктивности, затраты на проведение ветеринарных мероприятий. 3. Предотвращенный ущерб. 4. Денежные затраты на лечение. 5. Показатели экономической эффективности ветеринарных мероприятий, уровень их рентабельности (или окупаемости затрат). 1. Ущерб от потери продукции за время болезни: Болезни сельскохозяйственных животных обусловливают различные виды экономического ущерба: снижение продуктивности и ценности животных, снижение качества продукции, недополученние продукции Упп=(Вз-Вб)хМзхТхЦ, где Упп— ущерб от потери продукции за время болезни, руб.; Вз - среднесуточный прирост здоровых животных по хозяйству, г; Вб - среднесуточный прирост больных животных в хозяйстве, г; Т - продолжительность заболевания (дней); Ц — средняя цена реализации 1 кг продукции, руб. (таблица 11). Таблица 11 – Ущерб от потери продукции за время болезни Группы животных Вз, г Вб, г Мз, гол Т, дней Ц, руб. Упп, руб. 2 группа 0,43 0,32 15 12 143,13 2833,974 3 группа 0,43 0,32 15 10 143,13 2361,645 4 группа 0,43 0,32 15 9 143,13 2125,481 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 2. Предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными отражает, насколько сокращаются потери продукции от снижения заболеваемости или частоты болезни при применении препаратов (таблица 12). Пп= УпхКл 123 предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными, где Пп— предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными, руб.; Кл—коэффициент излечившихся животных, Уп— ущерб от недополучения продукции. Таблица 12 – Предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными Опытные группы животных Уп Кл Пп 2 группа 2833,974 0,2 566,7948 3 группа 2361,645 0,2 472,329 4 группа 2125,481 0,2 425,0962 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. Предотвращенный ущерб в результате лечения: При проведении производственных опытов по определению эффективности лечебных препаратов определяется ущерб от потери продукции за время болезни или опыта по формуле Пу = МлхКлхЖхЦ-У, где Мл - число животных, подверженных лечению; Кл — коэффициент летальности; Ж - средняя масса одного животного; Ц - цена единицы продукции (руб.); У - фактический экономический ущерб (руб.) (таблица 13). Таблица 13 –Предотвращенный ущерб в результате лечения Опытные группы животных Мл, гол Кл Ж, кг Ц, руб У, руб Пу, руб 2 группа 15 0,20 68,40 143,13 2833,97 26536,30 3 группа 15 0,20 81,20 143,13 2361,65 32504,82 4 группа 15 0,20 83,20 143,13 2125,48 33599,77 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 3. мероприятий Эв = Пу-Зв, Экономический эффект в ходе ветеринарных 124 Где Пу - предотвращенный ущерб в результате лечения; Зв - затраты на ветеринарные мероприятия(таблица 14). Таблица 14 – Экономический эффект в ходе ветеринарных мероприятий Опытные группы животных Пу, руб Зв, руб Эв, руб 2 группа 26536,30 1481,39 25054,91 3 группа 32504,82 1607,46 30897,36 4 группа 33599,77 1546,92 32052,85 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 4. Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат: Эр = Эв : Зв, где Эв - экономический эффект (руб.); Зв - затраты на ветеринарные мероприятия и оплату трудаработников (руб.) (таблица 15). Таблица 15 – Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат Опытные группы животных 2 группа 3 группа 4 группа Эв, руб 25314,70 31814,62 32888,37 Зв, руб 1481,39 1607,46 1546,92 Эр, на 1 руб. 14,16 15,55 16,66 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. Определение затрат труда на ветеринарные мероприятия и оплату работников. Вычисляется по формуле: Зв= Мз+ От+ Осс+ Опс+ Омс, где Зв– общие затраты труда на ветеринарные мероприятия и оплату работников; Стоимость препарата «Провитол»® (1 кг) - 285 руб, «Микс-Ойл»® (1 кг) - 1500 руб. (таблица 16). 125 Таблица 16 - Показатели расхода комбикормов и кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® в ходе опыта. Возраст поросят, суток Количество дней применения препаратов Вид комби корма Количество комбикорма , кг/сут на голову Количество комбикорма на 15 голов,кг/cут Доза «Провитола» ®, г внутрь с кормом на 15 голов в сутки Доза «МиксОйла»®, г внутрь с кормом на 15 голов в сутки 45-60 - СК-4 0,75 11,25 11,25 1,13 55-70 10 СК-5 1,05 15,75 15,75 1,58 65-80 10 СК-5 1,45 21,75 21,75 2,18 73-88 8 - - - - - Итого за 28 суток опыта - - 91,00 1365,00 444,00 44,40 Мз1= =126,54 руб. - стоимость израсходованного препарата «Провитол»® (Мз1); Мз2= =66,00 руб. - стоимость израсходованного препарата «Микс- Ойл»® (Мз2): Стоимость израсходованных препаратов по схеме лечения хозяйства (Мз3), Амоксициллин 150 (Amoxycillin 150) 12 дней через день по 1,5 мл на голову, флакон 100 мл - 487 руб.; Тетравит по 1,5 мл на голову двукратно с интервалом в 7 дней, флакон 100 мл-125 руб. Мз2= =713,70 руб На проведение ветеринарных мероприятий - 7 часов рабочего времени. Ветеринарный врач оклад 20 000 руб., за рабочий день 20 000руб./25,6 = 781,3 руб., за час 781,3/9=86,81 руб., соответственно за весь период 86,81×7=607,67 руб. (От). Отчисления в фонд социального страхования (Осс) 607,67 – 2,9%=17,6 руб.; в пенсионный фонд (Опс) 607,67–20,6%=125,16 руб. Медицинское страхование (Омс) 607,67–2,6%=15,79 руб. Зв (схема лечения 126,16+15,79=1607,46 хозяйства руб.; Зв Провитол®)=713,70+126,54+607,67+17,6+ (схема лечения хозяйства + Микс- 126 Ойл®)=713,70+66,00+607,67+17,6+ 126,16+15,79=1546,92 руб. Зв (схема лечения хозяйства)=713,70+607,67+17,6+ 126,16+15,79=1481,39руб. Таким образом, наглядно видно, что при применении кормовых добавок Провитол® и Микс-Ойл® возрастает экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат на 9,8% и 17,6% соответственно (Таблица 17). Таблица 17 - Экономические показатели эффективности применения кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® на фоне гастроэнтерита у свиней. Показатели Количество опытных животных, свиней 2 группа 15 3 группа 15 4 группа 15 12 10 9 0,2 0,2 0,2 Затраты на ветеринарные мероприятия, руб. 1481,39 1607,46 1546,92 Ущерб от потери продукции за время болезни, 2833,97 2361,64 2125,48 Предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными, руб. Предотвращенный ущерб в результате лечения, руб 566,79 472,32 425,09 26536,30 32504,82 33599,77 25054,91 30897,36 32052,85 14,15 15,55 16,66 Средняя продолжительность болезни, дней Коэффициент летальности Экономический эффект в ходе ветеринарных мероприятий, руб Экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 р. затрат 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. Несмотря на то, что стоимость затрат на ветеринарные мероприятия выше при использовании кормовых добавок, нежели лечение по стандартным схемам 127 предприятия (применение антибиотика и витаминотерапия), значительно снижается средняя продолжительность болезни животных на 16,6% (Провитол®) и 25%( Микс-Ойл®). Снижение показателя предотвращенного ущерба от потери продукции переболевшими животными наглядно демонстрирует сокращение потерь продукции из-за снижения заболеваемости свиней при применении кормовых добавок Провитол® (472,32 руб.) и МиксОйл® (425,09 руб.). Таким образом, применение кормовых добавок Провитол® и Микс-Ойл® сокращает ряд производственных экономических расходов и повышает эффективность ветеринарных мероприятий. 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ По официальной статистике желудочно-кишечные болезни поросят в подавляющем большинстве случаев относятся к незаразной патологии. По данным формы №2-вет ФГУ «Центр ветеринарии» Департамента ветеринарии МСХ РФ в последние годы незаразными болезнями переболевает 48,5 -52,3% свиней, из них желудочно-кишечными болезнями 16,8 - 48,0% ко всем заболеваниям. Из общего количества павших животных на болезни органов пищеварения приходится 48,6 - 48,7%. Наиболее высокий падеж поросят происходит от желудочно-кишечных болезней, который составляет 51,1 - 52,5% от всего павшего молодняка. Заболеваемость поросят в возрастном аспекте составляет: от 1 до 10 дней - 40,6 - 46,5%; от 10 до 30 дней - 28,5 - 29,1%; старше 30 дней - 25,0 -29,9% (ко всем заболевшим); падеж соответственно 42,9 - 43,6%; 30,9 - 31,4%; 25,5 25,7% (ко всем павшим). На большинстве промышленных комплексов желудочно-кишечные болезни поросят регистрируются на протяжении всего технологического цикла. При этом уровень заболеваемости имеет широкий диапазон. В структуре общей заболеваемости желудочно-кишечные болезни у поросят-сосунов составляют 60,3 - 98,9%; у животных на доращивании 13,6 - 26,7% и на откорме 12,2 47,2%. 128 Падеж поросят-сосунов от желудочно-кишечных болезней из общего числа павших животных колеблется от 35,0 до 86,7%; поросят на доращивании от 17,6 до 51,1% и на откорме от 12,4 до 67,6%. Сохранение молодняка имеет приоритетное значение в развитии свиноводства, так как заболеваемость поросят в отдельных крупных специализированных хозяйствах стала увеличиваться пропорционально интенсификации отрасли. Применение различных антибиотиков не привело к успеху, а, наоборот, ослабило роль антибактериальной терапии ввиду появления резистентных штаммов бактерий (Пашин М.А., 2011; Абрамов С.С., 1990). В последние годы все большее значение в качестве альтернативы антибиотиков приобретают пробиотические и пребиотические препараты, применение которых в свиноводстве является принципом решения проблемы получения высококачественной продукции (Gibson et all., 1999; Bouhnik et all., 2004). Сейчас перед ветеринарными специалистами лежит задача поиска кормовых добавок с минимальным негативным влиянием на организм животных, при этом максимально эффективных и выгодных, что вдвойне актуально для промышленных свиноводческих комплексов. К настоящему времени собрано много данных о положительном влиянии биопрепаратов в животноводстве и птицеводстве на продуктивность и нормализацию обменных процессов. Основные процессы переваривания корма происходят у свиней в кишечнике. В полость кишечника изливаются желчь, поджелудочный и кишечный соки, резко меняющие рН химуса и обеспечивающие гидролиз пищевых веществ при участии протеолитических, амилолитических и липолитических ферментов. Главной особенностью развития пищеварительной системы поросят, обладающих высокой скоростью роста, является повышенная активность ферментов в их пищеварительных железах, особенно поджелудочной железе, что связано напрямую с типом кормления. Поэтому любые нарушения в ее работе, напрямую окажут влияние на работу всего 129 желудочно-кишечного тракта, и организма в целом. В связи с этим, было проведено комплексное исследование влияния кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® на поджелудочную железу свиней при гастроэнтерите в разных возрастных периодах. В ходе проведенных исследований выявлено, что у клинически здоровых животных в 45-60 суточном возрасте температура находилась в переделах физиологической нормы. При общем клиническом исследовании отклонений не выявлено. У животных с клиническими признаками гастроэнтерита в возрасте 45-60 суток отмечалось повышение температуры, пульса, дыхания. Повышение этих показателей было связано с прогрессирующией диареей, которая провоцирует обезвоживание организма и ведет к сгущению крови. При повышении вязкости крови снижалась скорость кровотока, что провоцировало повышение артериального давления и повышение частоты сердечных сокращений, и, как следствие, повышение частоты дыхательных актов. Эксикоз на фоне диареи сопровождался также избыточным выведением из него натрия и других осмотически активных веществ, их концентрация в межклеточной жидкости снижалась. Клиническая картина у поросят с клинической картиной гастроэнтерита, согласно Н.С. Кухаренко, Я.А. Тумашову, H.H. Храповой (1998), выражалась в угнетении, сопровождаясь поносом, иногда профузным, с примесью крови и зловонным запахом, извращением аппетита (поедание капа и т.д.), обезвоживанием организма и снижением массы тела. В дальнейшем при дисбалансе и преобладании потери воды над солями, при прогрессирующем водном голодании развивался гиперосмотический, или вододефицитный, тип обезвоживания, характеризующийся выраженной гипогидратацией или дегидратацией клеток. Нарушение физико-химических констант внутренней среды приводило к раздражению рецепторного аппарата на периферии - в тканях, и в области центральных нервных образований. Влияние коры больших полушарий мозга выражалось прежде всего в регуляции деятельности подкорковых 130 теплорегулирующих центров, поэтому при нарастающем обезвоживании это приводило к повышению температуры. Перестройка уровня функционирования подкорковых нервных образований сопровождалась вовлечением в реакцию ряда эндокринных желез, при интегральном ответе аппарата терморегуляции стимулируются релизинг-факторы (КРФ, ТРФ, ГРФ), управляющие гормональной активностью гипофиза. У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа- 22,00±0,48 дых. дв. в мин.; 2 группа36,00±0,82* дых. дв. в мин.; 3 группа- 32,00±0,76* дых. дв. в мин.; 4 группа- 30,00±0,63* дых. дв. в мин.) и показателей пульса (1 группа98,00±0,30 уд. в мин.; 2 группа- 132,00±0,58* уд. в мин.; 3 группа- 122,00±0,44* уд. в мин.; 4 группа- 128,00±0,52* уд. в мин.), что по большей части было связано со стрессами животных при манипуляциях исследовании животных. По мнению Реутовой Е.А., Дроздовой Л.И. (2018) при исследовании влияния препарата «Вестин» на кишечник поросят, отметили лучшее становление и развитие у поросят структур кишечника, ответственных за всасывание, что подтверждалось более высокими морфометрическими показателями. В ходе анализа полученных данных было установлено, что кормовые добавки «Провитол» и «Микс-Ойл» положительно влияют на гематологические показатели крови организма свиней при нарушении работы желудочнокишечного тракта, о чем говорит изменение показателей крови на разных этапах эксперимента. В возрасте 45-60 суток свиней во второй, третьей и четвертой группах наблюдались эритроцитоз (повышение уровня эритроцитов, по сравнению с поросятами первой группы на 53,3-60%), увеличение СОЭ на 65,4-138.3% по отношению к группе клинически здоровых животных, как и общий уровень лейкоцитов на 12,5-35,8%, что было связано со стрессом при переводе в цех отъёма, с нарастающей симптоматикой гастроэнтерита (обезвоживание организма вследствие профузной диареи и нарушение пристеночного пищеварения) и интоксикацией. Увеличение количества 131 тромбоцитов на 52,6-53,3% по сравнению со здоровыми животными, что могло быть опосредованно нарастающим воспалительным процессом желудочнокишечного тракта, поражением гепатопанкреатобилиарной системы и дефицитом железа в организме (железодефицитная анемия). Увеличение показателя количества лейкоцитов на 12,5-35,8% в сравнении с первой группой, по всей видимости, был связан со стрессом и физической нагрузкой при перегруппировке животных. Увеличение количества лейкоцитов у клинически больных на 55,8-68,1% в сравнении со здоровыми животными был связан с неифекционным гастроэнтеритом и поражением панкреатобилиарной системы. Аникиенко И.В., Ильина О.П., Карелина Л.Н., Силкин И.И. (2018) отмечали повышение содержания аспартатаминотрансферазы (АСТ) и аланинаминотрансферазы (АЛТ) в крови поросят, коэффициент де Ритиса на верхней границе нормы, повышение количества щелочной фосфатазы, что согласуется с нашими результатами. По данным В.В. Никольского (1989) гематологические показатели в зависимости от течения заболевания характеризуется снижением количества эритроцитов, нейтрофильным лейкоцитозом, снижением содержания гемоглобина, резервной щелочности и сахара. Если заболевание возникло на фоне дефицита железа и кобальта в организме или авитаминозов, то содержание гемоглобина и эритроцитов резко снижается. У больных животных в лейкограмме отмечали снижение количества эозинофилов, а также появление миелоцитов и регенеративный сдвиг ядра влево (Мантатова Н.В., Танхаев С.Р., 2018). По данным М.А. Пашина (2011) при гематологическом исследовании у поросят выявлялось снижение количества эритроцитов на 19,1% (р<0,05), увеличение гемоглобина на 17,9%(р<0,01) что привело к гиперхромной анемии. По результаты биохимического анализа крови животных в возрасте 45-60 дней отмечалось увеличение концентрации общего белка на 15,46-16,08% у больных гастроэнтеритом животных, при этом уровень глюкозы был выше, чем у здоровых животных на 22,97-25,09%. Уровень аланинаминотрансферазы 132 (АЛТ) увеличился 1,5-1,6 раз, а уровень АСТ в 1,9-2,1 раза по сравнению с клинически здоровыми аминотрансфераз животными. свидетельствовало о Повышение поражении активности клеток печени обеих при гастроэнтерите и о нарастании воспалительного процесса с вовлечением панкреобилиарной системы. Увеличение щелочной фосфатазы (ЩФ) по сравнению со здоровыми животными на 29,6-48,72 %, по всей видимости, свидетельствовало о дисфункции печени и желчных путей, сопровождающихся холестазом, также имеются данные о физиологическом повышении данного показателя у поросят. Повышение уровня α-амилазы в 2,1-2,3 раза у клинически больных животных демонстрировало переход воспаления со стороны желудочно-кишечного тракта на поджелудочную железу и начале ее функциональных нарушений, то есть, начало развития острого панкреатита. По данным М.А, Пашина (2011) резкое увеличение количества АЛТ по сравнению со здоровыми животными в 9 раз (р≤0,05), и ACT в 4 раза (р≤0,05) указывает на нарушение целостности цитоплазматической мембраны гепатоцитов. Об этом также свидетельствует снижение коэффициента Де Ритиса у больных животных до 0,6±0,03. Реутова Е.А., Черноморец С.А., Стрижкова М. (2005), М.А. Пашин (2011) указывают на резкий скачок щелочной фосфатазы у животных с клинической картиной гастроэнтерита практически в 2 раза и более, отмечается значительное повышение содержания общего билирубина, АЛТ, ACT, что полностью согласуется с данными нашей работы. По данным М.А. Пашина (2011) в исследовании биохимических показателей крови наблюдалось увеличение общего белка крови на 26,2% на фоне обезвоживания организма и сгущения крови, а также усиления синтеза белков острой фазы воспаления. Для клинически здоровых поросят основные патологоанатомические изменения развивались в легких (острая альвеолярная эмфизема и отек легких), что по большей части было связано с методом диагностического убоя животных. Для поросят с клинической картиной гастроэнтерита были 133 характерны следующие патологоанатомические диагнозы: острый катаральный гастрит и энтерит, очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких, атрофия околоушных, заглоточных, поверхностных шейных, предлопаточных, мезентериальных лимфоузлов и лимфоузлов коленной складки. Наши данные согласуются с данными гастроэнтерите поросят Сороколетовой отмечала В.М. (2005), патологоанатомические которая при изменения в фундальной части желудка и тонком кишечнике. У клинически здоровых поросят-отъемышей 45-60 суточного возраста при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Ацинарные и островковые клетки были без визуальных изменений. Стенка желудка и двенадцатиперстной кишки была без патоморфологических изменений. У клинически здоровых поросят-отъемышей 45-60 суточного возраста при ультрамикроскопическом уровне превалировали процессы застойной гиперемии (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Ацинарные и островковые клетки были без визуальных изменений. В эндокринной паренхиме поджелудочной железы свиней были обнаружены все цитотипы клеток панкреатических островков, а именно А-, В-, Д-, PP- клетки. Эти данные полностью согласуются с рядом авторов - В. Ф. Иванова с соавт., 1974; Ю. К. Елецкий, 1978; Н. И. Расулев, С. Л. Гохберг, 1982; В. В. Яглов, Г. А. Ломоносова, 1985; Л. Г. Никонова, 2011; A. Dom, 1973; R. H. Melmed, 1972, C. Javier et al., 1984; J. Musser, 1985, Синицина М.А. (2001), Савищев А.В.(2011), Молдавская А.А.(2011). У поросят-отъемышей с клинической картиной гастроэнтерита в 45-60 суточном возрасте при гистологическом исследовании превалировали процессы застойной гиперемии и кровоизлияния (диаметр капилляров 11,3±0,13 мкм). Помимо этого, ациноциты экзокринной части были в состоянии незначительного отека, в единичных ядрах ацинозных клетках наблюдались процессы кариопикноза, кариорексиса и кариолизиса (диаметр ядер ацинарных клеток 3,19±0,07* мкм). Эндокринная часть при этом была без изменений. 134 Особенностью на данном этапе является незрелость В-клеток - площадь ядра Вклетки значительно 13,45±0,79* мкм², секреторные гранулы мелкие, разреженные, их диаметр составил 0,220±0,010* мкм, относительная доля гранул крайне мала для должного функционирования - 5,40±0,25*%. Значение ядерно-цитоплазматического отношения 0,211±0,01 крайне мало и говорит о слабой дифференцировке клетки Активированные в ткани железы панкреатические ферменты проникали в интерстициальную ткань, повышая порозность сосудистой стенки и образуются отеки и геморрагии. При анализе стромально-паренхимального соотношение компонентов поджелудочной железы у клинически здоровых поросят-отъёмышей 45-60 суточного возраста и поросят с клинической картиной гастроэнтерита соотношение ацинарной и эндокринной паренхимы пропорционально у обеих групп, доля площади кровеносных сосудов у больных поросят значительно больше чем у здоровых (2,67±0,13) и составила 4,71±0,11**%, что было связано с превалирующими процессами застойной гиперемии и кровоизлияния (Рис. 37). Клинически здоровые свиньи Свиньи с клинической картиной гастроэнтерита Рисунок 37 - Стромально-паренхимальное соотношение компонентов поджелудочной железы у поросят-отъёмышей 45-60 суточного возраста, % Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 45-60 суточном возрасте преимущественно диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках; клетки В-типа чаще встречались в перикапиллярной зоне, на 135 периферии островка; Д-клетки и РР-клетки локализовались одиночно, на границе эндокринной и экзокринной части. Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 85-100 суточном возрасте диффузно, в виде отдельных клеток в панкреатических островках; клетки В-типа чаще встречались в перикапиллярной зоне, группами, скоплениями клеток в центральной зоне и незначительно на периферии островка; Д-клетки и РР-клетки локализовались одиночно, на границе эндокринной и экзокринной части. Локализация А-клеток у поросят отъёмышей в 180-210 суточном возрасте преимущественно по периферии, в виде отдельных клеток; клетки В-типа локализовались группами, преимущественно в центре островка; Д-клетки и РР-клетки локализовались одиночно, на границе эндокринной и экзокринной части (рисунок 38). Рисунок 38- Локализация эндокриноцитов различных типов на разных этапах опыта При исследовании общего клинического статуса к 85-100 суточному возрасту животные второй группы заметно отличались выраженными клиническими признаками гастроэнтерита: характерное урчание в животе, сгорбившаяся поза. матовая, жесткая щетина, болезненность в эпигастральной 136 зоне при пальпации, жидкий стул с примесями слизи. Снижение упитанности, помимо нарушения усвояемости на фоне диареи, также могло быть связано с липолизом в жировой ткани под влиянием гипоталамо-гипофизарно- надпочечниковой системы из-за повышенной теплопродукции при лихорадке. В третьей и четвертой группах, отсутствовали клинические проявления гастроэнтерита, несмотря на их наличие в возрасте 45-60 суток. Эти данные согласуются с Н.Н. Храповой (2000), которая в своих исследованиях больных гастроэнтеритом поросят уже на 5-6 день после лечения «Интестивитом» отмечала снижение улучшение клинического статуса животных. В работе М.А. Пашин (2011) также отмечал переход болезни в хроническое течение и улучшение общего состояния поросят при даче пробиотической добавки. При этом присутствовали характерные изменения в желудочно-кишечном тракте свиней (хронический катаральный гастрит и энтерит), что доказано результатами патологоанатомического вскрытия. У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа- 22,00±0,52дых. дв. в мин.; 2 группа- 28,00±0,74* дых. дв. в мин.; 3 группа- 26,00±0,58* дых. дв. в мин.; 4 группа- 24,00±0,56* дых. дв. в мин.) и показателей пульса (1 группа- 100,00±0,30 уд. в мин.; 2 группа112,00±0,58*уд. в мин.; 3 группа- 114,00±0,44*уд. в мин.; 4 группа110,00±0,52*уд. в мин.), что по большей части было связано с манипуляциями при исследовании животных. Животные второй группы отставали по экстерьерным и зоотехническим показателям (живая масса 31,84±2,91* кг, длина туловища 65,80±5,24*см, высота в холке 34,22±0,20). Животные третьей (живая масса 32,72±2,61кг, длина туловища 69,33±4,36см, высота в холке 37,25±0,15*) и четвертой (живая масса 32,37±2,89*кг, длина туловища 67,47±4,57*см, высота в холке 36,75±0,17*) группы также отставали от показателей первой (живая масса 33,39±2,71 кг, длина туловища 68,60±6,08 см, высота в холке 35,17±0,18) группы, но эти значения были существенно ниже. 137 В 85-100-дневном возрасте свиней во второй группе (со стандартным лечением хозяйства) наблюдалось снижение уровня гемоглобина (8,1±0,12* г%), эритроцитов (4,2±0,67**1012/л) и гематокритного числа (34,3 ±3,14*%), при этом уровень СОЭ (9,4±1,03 мм/час) оставался по-прежнему повышенным, в отличие групп с применением кормовых добавок «Провитол»® и «МиксОйл»®. Лейкоцитоз во всех группах свиней, по всей вероятности, был связан со второй вакцинацией против классической чумы свиней (1 группа - 25,7±1,25 109 г/л; 2 группа - 40,4±2,38 109 г/л; 3 группа - 39,6±0,98 109 г/л; 4 группа 38,5±1,46* 109 г/л) (Рис. 39). Показатели лейкоцитов,109 г/л Рисунок 39 - Показатели лейкоцитов,109 г/л на у разных возрастных групп свиней По мнению Учасова Д.С. (2013), назначение пробиотика «Интестевита» оказывает благоприятное влияние на метаболизм и общую резистентность организма свиней, проявляющуюся увеличением содержания в крови эритроцитов, гемоглобина, общего белка, альбуминов, у-глобулинов, что согласуется с данными наших исследований, где в третьей и четвертой группах с применением пробиотических препаратов отмечалось повышение содержания в крови эритроцитов (3 группа-5,9±0,15 1012/л, 4 группа-5,7±0,09 1012/л), гемоглобина (3 группа-8,7±0,07** г%, 4 группа-10,7±0,21 г%) При оценке биохимических показателей в 85-100 дневном возрасте 138 отмечалась положительная динамика снижения уровня глюкозы (на 3,5 % у клинически больных животных, в третьей группе на 9,84% (при применении «Провитола»®) и четвертой на 9,82% (при применении «Микс-Ойла»®), незначительно снижался уровень щелочной фосфатазы во второй группе (244,12 ед/л), при этом более быстрая динамика снижения отмечалась в третьей группе (на 21,4%) относительно первой группы. Согласно И. М. Карпуть (1986), при применении пробиотических кормовых добавок происходят восстановительные процессы в печени и поджелудочной железе, на что указывает снижение количества щелочной фосфатазы, α-амилазы, нормализация коэффициента Де Ритиса (АСТ/АЛТ) в сыворотке крови, а также снижение количества билирубиновых фракций и глюкозы до физиологических пределов. К. В. Смирнова (1990), утверждала, что изменение функционального состояния поджелудочной железы ведет к снижению активности панкреатических ферментов в полости тонкого отдела кишечника. Поступление в полость желудочно-кишечного тракта свиней ферментов низкой активности не обеспечивает должный гидролиз белков, углеводов и липидов. У клинически здоровых свиней 85-100 суточного возраста, основные макроскопические патологоанатомические изменения локализовались в легкихочаговая альвеолярная эмфизема и отек легких. У второй, третьей и четвертой группы свиней изменения локализовались в легких и гастродуоденальной системе: хронический катаральный гастрит и энтерит; очаговая альвеолярная эмфизема и отек легких. Применение фитобиотических кормовых добавок «Провитол»® и «МиксОйл»® позволяло нормализовать сосудистую реакцию к 85-100 суточному возрасту, снизить застойные явления в экзокринной паренхиме органа, усилить репаративные процессы ацинарной паренхимы, о чем свидетельствуют появившиеся двуядерные ациноциты у третьей группы животных. Некоторые исследователи считают, что образование двуядерных клеток, при регенерации представляет резерв полиплоидизации, что с биологической точки зрения 139 является эквивалентом клеточного размножения. У второй группы свиней к 85100 суточному возрасту помимо утолщения капсулы (5,10±0,14 мкм), отмечались очаги некроза железистой ткани, что проявлялось кариопикнозом и кариорексисом, а также плазмолизисом, о чем говорило уменьшение площади ацинарных клеток (85,12±1,27 мкм2), площади их цитоплазмы (53,76±1,29 мкм2) и уменьшение количества ядер ациноцитов (5,73±0,14) и их диаметра (3,16±0,08 мкм). Панкреатические островки были уменьшены из-за сдавливания отекшей соединительной тканью (диаметр панкреатического островка 70,26±1,76 мкм). Наши данные согласуются с исследованиями П.А. Самотесовой, Н.С. Горбуновой (2002), которые пришли к выводу, что нормализация кишечного пищеварения приводит к структурно-функциональному восстановлению поджелудочной железы. При анализе стромально-паренхимального соотношения компонентов поджелудочной железы основные изменения отмечаются у поросят с клинической картиной гастроэнтерита: увеличивается общее количество соединительной ткани - 32,68±1,17*%, по отношению к первой (23,49±0,84*%), третьей (25,50±0,74*%) и четвертой (28,02±1,98) группам, что было связано с процессами отека стромы органа; уменьшалась площадь кровеносных сосудов во второй группе - 3,02±0,15%, по отношению к первой (3,85±,18* %), третьей (3,49±0,17%) и четвертой (3,77±0,16*) группам соответственно, что было связано со спазмом сосудистого русла; доля экзокринной паренхимы при этом уменьшалась (57,99±2,08* %), в связи с отеком стромы и сдавливанием ее паренхимы (Рис. 39). Клетки В-типа, в сравнении с 45-60 суточными поросятами, выглядели более дифференцированными и зрелыми. Они имели более темные небольшие округлые ядра, хроматин был в конденсированной форме. Средняя площадь ядра В-клетки значительно увеличилась с 13,45±0,79* мкм² до 49,98±2,65 мкм². Секреторные гранулы были равномерно распределены по цитоплазме, их диаметр составил 0,220±0,010* мкм, относительная доля гранул увеличилась с 140 5,40±0,25*% до 15,6±0,85%. Значение ядерно-цитоплазматического отношения увеличивается с 0,211±0,01 до 0,89±0,04. Рисунок 40 - Стромально-паренхимальное соотношение компонентов поджелудочной железы у поросят-отъёмышей 85-100 суточного возраста, % У третьей группы с примененим препарата «Провитол»® встречались двуядерные клетки, что говорило о повышении функциональной активности клеток. Количество ядер в ацинусе было значительно больше (7,15±0,18), чем у свиней с клинической картиной гастроэнтерита в 85-100 суточном возрасте (5,73±0,14) У четвертой группы свиней были дифференцированы ацино–инсулярные клетки. Они представляли собой участки поджелудочной железы, состоящие из множества протоков с высоким уровнем пролиферативной активности и большим количеством митохондрий. Это переходная зона, она может быть трансформирована как в панкреатические островки, так и в ациноциты. Ацино– инсулярные клетки содержали единичные эндокринные гранулы и гранулы 141 зимогена. Клетки данного типа также были обнаружены в исследованиях В.В. Яглова, Н.В. Ягловой (2012), О.В. Дилековой (2017). По мнению О.В. Дилековой (2017), у домашних животных источником физиологической регенерации всех типов эндокриноцитов являются эпителиоциты протокового дерева железы. Источником неогенеза А-клеток и В-клеток являются репрограмированные ацино-островковые клетки. В 180-210 суточном возрасте у первой группы свиней значительных отклонений в клиническом статусе не было выявлено. У животных второй группы при клиническом исследовании сохранялись: урчание в животе, периодический жидкий кал, матовость щетины. Свиньи с клинической картиной гастроэнтерита на фоне лечения хозяйства (2 группа) значительно отставали в живой массе (живая масса на 17,5% ниже массы контрольной группы), и незначительно в остальных показателях. При этом несмотря на наличие клинической картины гастроэнтерита в 3 и 4 группах при постановке на опыт, к 180-210 суточному возрасту в данных группах отставание в живой массе было незначительным: живая масса 81,21±5,88*кг в 3 группе (на фоне применения «Провитол»®) и 83,23±5,38 кг в 4 группе (на фоне применения «Микс-Ойл»®). У всех исследуемых групп было выявлено превышение показателей частоты дыхательных движений в минуту (1 группа- 18,00±0,48 дых.дв. в мин.; 2 группа- 26,00±0,82* дых.дв. в мин; 3 группа- 24,00±0,76 дых.дв. в мин.; 4 группа- 22,00±0,83 дых.дв. в мин) и показателей пульса (1 группа- 104,00±0,25 уд.в мин.; 2 группа- 120,00±0,44*уд.в мин.; 3 группа118,00±0,38*уд.в мин.; 4 группа- 108,00±0,35*уд.в мин.;), что по большей части было связано с манипуляциями при исследовании животных. В 180-210 суточном возрасте показатели крови второй группы указывают на наличие хронических воспалительных процессов в организме (эритропения 4,1±0,56 1012/л.; снижение гемоглобина - 8,0±0,18 г% повышение СОЭ 11,5±0,34 мм/час), в то время как средние значения показателей общего анализа крови животных (в группах с применением кормовых добавок «Провитола»® и «Микс-Ойла»®) – в пределах физиологической нормы. Применение кормовых 142 добавок «Провитола»® и «Микс-Ойла»® помогает снять дигестивные проявления, купирует диспептические симптомы, уменьшает метериоризм кишечника, оптимизирует гематологические показатели. Это способствует повышению функциональной активности желудочно-кишечного тракта, увеличению продуктивности и качества животноводческой продукции. К 180-210 дневному возрасту свиней проявлялись характерные признаки хронических воспалительных процессов у животных с клинической картиной гастроэнтерита (вторая группа): пропорционально высокий уровень глюкозы (5,38±0,25 ммоль/л) и общего белка плазмы крови (80,47±3,78 г/л), относительно первой группы, повышенный уровень щелочной фосфатазы (на 52% по сравнению с первой группой животных) и превышающий практически в 2,5 раза показатель α -амилазы – все это свидетельствовало о патологии желудочно-кишечного тракта и поджелудочной железы, и как следствие нарушение нормального всасывания питательных веществ, структурнофункционального расстройства поджелудочной железы. По данным М.А. Пашина (2011) в исследовании биохимических показателей крови наблюдалось увеличение общего белка крови на 26,2% на фоне обезвоживания организма и сгущения крови, а также усиления синтеза белков острой фазы воспаления. Согласно И. М. Карпуть (1986), при применении пробиотических препаратов происходят восстановительные процессы в печени и поджелудочной железе, на что указывает снижение количества щелочной фосфатазы, α-амилазы, нормализация коэффициента Де Ритиса (АСТ/АЛТ) в сыворотке крови, а также снижение количества билирубиновых фракций и глюкозы до физиологических пределов. К 180-210 суточному возрасту у клинически здоровых свиней отмечалась умеренная сосудистая реакции (диаметр кровеносных сосудов - 9,40±0,28*мкм), строма была не утолщена (толщина трабекулы 3,30±0,09*мкм). Ацинарные клетки и островки Лангерганса без визуальных изменений, островки средней величины (площадь островка 5837,81±145,95 мкм2), клеток умеренное количество на площади изученных срезов (48,16±1,20*). У свиней 143 второй группы с признаками гастроэнтерита нарастают склеротические процессы экзокринной паренхимы, при этом наблюдаются отечные и структурные нарушения эндокринной части, в частности, В-клетках, по всей видимости, из-за их топографической близости к кровеносному руслу. Экзокринная паренхима с явлениями некроза и липоматоза (площадь цитоплазмы ацинарных клеток - 58,17±1,22 мкм2, количество ядер в ацинусе уменьшено - 5,17±0,14). Склерозирование и липоматоз стромы экзокринной паренхимы и параваскулярного пространства, является разрешением воспалительного процесса экзокринной паренхимы. У поросят третьей и четвертой группы, получавших «Провитол»® и «Микс-Ойл»®, к180-210 суточному возрасту строма поджелудочной железы в состоянии незначительного отека, экзокринная паренхима без визуальных изменений, и в отличии от второй группы, изменения в эндокринной части не были выражены. Отдельные ацинарные клетки крупные, хорошо дифференцированные; инсулярные островки Лангерганса средней величины. Согласно Дилековой О.В. (2016), у всеядных животных, свиньи, в частности, в поджелудочной высокопротеиновом рационе, железе, к в связи функциональной типом зрелости питания и организма происходит разрастание и замещение стромы железы белой жировой тканью. При анализе соотношения компонентов поджелудочной железы основные изменения у поросят второй группы: увеличивается общее количество соединительной ткани - 32,12±1,15*%, по отношению к первой (26,62±0,95*%), третьей (28,52±1,78%) и четвертой (26,45±0,85) группам, что было связано с процессами склерозирования органа; уменьшалась площадь эндокринной паренхимы во второй группе - 4,62±0,16*%, по отношению к первой (5,45±0,14**%), третьей (5,04±0,18*%) и четвертой (5,21±0,19%) группам (Рис. 41). 144 Рисунок 41- Стромально-паренхимальное соотношение компонентов поджелудочной железы у поросят-отъёмышей 180-210 суточного возраста, % По мнению Попова Р.М. с соавт., (2009), Гамко Л.Н., Черненок Ю.Н. (2009), Никулина В.Н., Мустафина Р. З. (2014) пробиотические препараты положительно влияют на процессы пищеварения и повышают усвоение питательных и биологически активных веществ рационов, тем самым улучшаются откормочные свойства свиней. Проанализировав данные экономических показателей эффективности применения кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® на фоне гастроэнтерита у свиней, наглядно видно, что при применении кормовых добавок Провитол® и Микс-Ойл® возрастает экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат на 9,8% и 17,6% соответственно. Несмотря на то, что стоимость затрат на ветеринарные мероприятия выше при использовании кормовых добавок, нежели лечение по стандартным схемам предприятия (применение антибиотика и витаминотерапия), значительно снижается средняя продолжительность болезни животных на 16,6% («Провитол»®) и 25% («Микс-Ойл»®). Этот показатель напрямую влияет на 145 показатели ущерба от потери продукции за время болезни и предотвращенный ущерб от потери продукции переболевшими животными. Снижение показателя предотвращенного ущерба от потери продукции переболевшими животными наглядно демонстрирует сокращение потерь продукции из-за снижения заболеваемости свиней при применении кормовых добавок Провитол® (472,32 руб.) и Микс-Ойл® (425,09 руб.). Предотвращенный ущерб в результате лечения по схеме хозяйства (вторая группа) составляет 26536,30 руб., что на 22,49% меньше, чем в третьей группе (Провитол®) и на 26,62% меньше, чем в четвертой группе (Микс-Ойл®). Таким образом, применение кормовых добавок Провитол® и Микс-Ойл® сокращает ряд производственных экономических расходов и повышает эффективность ветеринарных мероприятий. По данным Алексеевой Л.С.(2001) использование пробиотика "ПробиолЛ" позволило получить большую прибыль, по сравнению с контрольной группой свиней. Гамко Л.Н. (2015) считал, что включение в рационы свиней минеральных, пробиотических и комплексных добавок дает наибольший продуктивный и экономический эффект. Курятова Е.В. (2006) доказала, что в группах свиней, где применяли пробиотик «Интестевит» экономический эффект был выше на 23,4 - 25,9%, чем в группах животных, которым не применяли. Наши данные также согласуются и с исследования Бедного С.М. (2009) который доказал, что при выращивании молодняка свиней в условиях ферм малой и средней мощности, эффективность использования препарата «Целллобактерина» будет составлять от 720 до 740 руб. То есть экономически оправдано. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. 45-60 При оценке общего клинического анализа крови исследуемых поросят в суточном возрасте при гастроэнтерите наблюдался вторичный относительный гемоконцентрационный эритроцитоз, отмечалось повышение 146 ;lзначения гематокрита и тромбоцитов, а также увеличение показателя СОЭ и лейкоцитоз. В 85-100 суточном возрасте свиней отмечалось снижение среднего количества эритроцитов во всех группах до пределов нормы, снижение уровня гемоглобина, эритроцитов, гематокритного числа, лейкоцитоз во всех группах, при этом уровень СОЭ оставался по-прежнему повышенным, в отличие от опытных групп с применением кормовых добавок «Провитол» ® и «Микс-Ойл» ®. В возрасте 180-200 суток, среднее количество эритроцитов у свиней было ниже во второй исследуемой группе, чем в третьей и четвертой группах. Во второй группе отмечался эритроцитоз и повышенное содержание СОЭ. Показатели общего клинического анализа крови свиней в группах с использованием кормовых добавок «Провитол» ® и «Микс-Ойл» ® находились в пределах физиологической нормы. 2. Биохимическим исследованием выявлено у поросят в 45-60 суточном возрасте при гастроэнтерите увеличение концентрации общего белка, уровня глюкозы, общего билирубина на 96,88-103,38% по сравнению со клинически здоровыми животными, в основном за счет увеличения прямого билирубина. Уровень аланинаминотрансферазы (АЛТ) увеличился в 1,5-1,6 раз, уровень АСТ в 1,9-2,1 раза, щелочная фосфатаза на 29,6-48,72 %, α-амилазы в 2,1-2,3 раза. В возрасте 85-100 суток отмечалась положительная динамика снижения уровня глюкозы (на 3,5 % у клинически больных животных, в третьей группе на 9,84% (при применении «Провитола»®) и четвертой на 9,82% (при применении «Микс-Ойла®»), незначительно снижался уровень щелочной фосфатазы, при этом более быстрая динамика снижения отмечалась в третьей группе (на 21,4%) относительно первой группы. У свиней в возрасте 180-200 суток во второй группе при высоком уровне глюкозы и общего белка плазмы крови, наблюдалось отклонение в большую сторону показателей билирубина, повышения уровня щелочной фосфатазы (на 52% по сравнению с клинически здоровыми животными) и превышения практически в 2,5 раза показателя αамилазы (2044,52±102,2 ед/л). 147 3. Применение кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® способствовало интенсификации и регенераторной активности паренхимы поджелудочной железы свиней к 85-100 суточному возрасту. Во второй группе животных был выражен спазм сосудистого русла, превалировали некротические изменения в экзокринной паренхиме; в группах с применением кормовых добавок происходила нормализация микроциркуляторного русла, а изменения экзокринной паренхимы были слабовыражены. К 180-210 суточному возрасту у свиней второй группы нарастали склеротические процессы экзокринной паренхимы, отмечались очаги липоматоза как разрешение воспалительного процесса экзокринной паренхимы. У 3 и 4 группы свиней к 180-210 суточному возрасту строма органа в состоянии незначительного отека, экзокринная и эндокринная паренхима без визуальных изменений. 4. В третьей группе к 85-100 суточному возрасту свиней в экзокринной паренхиме отмечалось появление двуядерных ацинарных клеток как показателя регенераторного потенциала клетки, а в четвертой - ациноинсулярных клеток. Во второй группе животных в поджелудочной железе, преобладали некротические процессы в ациноцитах, проявлялись процессы секреторной асинхронизации, то есть развивалась экзокринная недостаточность. Нарушения структуры клеток эндокринной части второй группы не было выявлено в этом периоде, но отставал рост общего количества клеток, то есть проявлялась морфологическая незрелость. К 180-210 суточному возрасту свиней второй группы наблюдались отечные и структурные нарушения эндокринной части в В-клетках. Эндокринная паренхима поджелудочной железы групп животных с применением кормовых добавок была более развита: большее количество клеток в панкреатических островках – 3 группа - 49,61±1,24*, 4 группа - 47,45±1,19**, большая площадь панкреатических островков - 3 группа - 5682,06±145,05* мкм 2, 4 группа 5706,67±142,67 мкм 2, чем во второй группе - 5124,40±128,11** мкм 2. Экзокринная паренхима второй группы свиней с явлениями некроза, липоматоза и склероза. У свиней третьей и четвертой группы, получавших 148 кормовые добавки «Провитол»® и «Микс-Ойл»®, к 180-210 суточному возрасту строма поджелудочной железы в состоянии незначительного отека, экзокринная и эндокринная паренхимы без визуальных изменений. 5. Иммуногистохимическое исследование всех групп 45-60 суточных поросят не показало содержания «+» CD-3 лимфоцитов в поджелудочной железе свиней. У клинически здоровых животных это было связно с отсутствием воспалительной реакции в тканях железы. в группах с гастроэнтеритом могло означать снижение абсолютного количества Тлимфоцитов и недостаточности клеточного иммунитета. К 85-100 в третьей и четвертой группе не выявлены маркеры, в связи с отсутствием воспалительных процессов в поджелудочной железе, а во второй группе отрицательная реакция наблюдалась из-за иммунодефицита. При исследовании поджелудочной железы свиней не выявлено содержания миелопероксидазы в поджелудочной железе. У клинически здоровых животных это было связано с отсутствием воспалительной реакции в тканях железы, а в группах с гастроэнтеритом морфологически подтверждалось лимфоцитопенией. К 180-210 суточному возрасту свиней из-за хронических процессов склерозирования и липоматоза не выявлено положительно реагирующих клеток, в третьей и четвертой группе в связи с разрешением воспалительных процессов в поджелудочной железе к последнему периоду опыта иммуногистохимическая реакция была отрицательной. 6. При применении кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® возрастает экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат на 9,8% и 17,6% соответственно, значительно укорачивается средняя продолжительность болезни животных на 16,6% («Провитол»®) и 25% («Микс-Ойл»®). Снижается показатель предотвращенного ущерба от потери продукции переболевшими животными, сокращаются потери продукции из-за снижения заболеваемости свиней при применении кормовых добавок Провитол® (472,32 руб.) и Микс-Ойл® (425,09 руб.). Предотвращенный ущерб при лечении по схеме хозяйства (вторая группа) составляет 26536,30 руб., что 149 на 22,49% меньше, чем в третьей группе (Провитол®) и на 26,62% меньше, чем в четвертой группе (Микс-Ойл®). Таким образом, применение кормовых добавок Провитол® экономических и Микс-Ойл® расходов и сокращает повышает ряд производственных эффективность ветеринарных мероприятий, особенно в четвертой группе, где применялась кормовая добавка «Микс-Ойл»®. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 1. Оптимальной дозой препаратов в кормлении свиней и поросят на выращивании в кормосмеси орально: «Провитол»® 1 кг на тонну комбикорма, «Микс-Ойл»®-80-120 г на тонну комбикорма. 2. Рациональным временем для применения кормовых добавок выбран третий критический период согласно классификации Л.П. Тельцова, обусловленный резким переходом молодняка с молочного на концентратный тип кормления, что ведет к нарушению пищеварения, вследствие чего в пристеночной слизи кишечника снижается количество иммуноглобулина А и полезная микрофлора гибнет. Согласно изученной литературе наиболее приемлемым периодом скармливания кормовых добавок является 28 дней. 3. При применении кормовых добавок «Провитол»® и «Микс-Ойл»® возрастает экономическая эффективность ветеринарных мероприятий на 1 рубль затрат на 9,8% и 17,6% соответственно, снижается средняя продолжительность болезни животных на 16,6% (Провитол®) и 25% (МиксОйл®). 4. Применение оптимизирует кормовых добавок гематологические «Провитол»® показатели, и «Микс-Ойл»® нормализует работу панкреатобилиарной системы, что способствует повышению функциональной активности желудочно-кишечного тракта. Использование препаратов позволяет уменьшить сроки использования антибиотиков за счет сокращения средней продолжительности болезни животных. 150 5. Кормовые добавки «Провитол»® и «Микс-Ойл»® улучшают микрофлору кишечника, препятствуют попаданию инфекции в желудочно-кишечный тракт, помогают животным снимать стрессовое состояние, вызванное сменой рациона (Лаптев Г.Ю., Большаков В.Н., Солдатова В.В., 2012). 151 Список литературы 1. Абрамов, С.С. Профилактика незаразных болезней молодняка/ С.С. Абрамов, И.Г Арестов, И.М. Карпуть.- М., 1990. - С. 24-56. 2. Абрикосов А.И. Патологическая анатомия болезней органов пищеварения // Многотомное руководство по патологической анатомии/ Под ред. А.И. Струкова. М., 1957. - Т. 4. - 437 с. 3. Авроров, А.А. Патологоанатомическая диагностика болезней свиней / А.А. Авроров, А.В. Акулов, Л.Г. Бурба; под ред. В. П. Шишкова и др. — М.: Колос, 1984. —335 с. 4. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1990. -378 с. 5. Агеев А.К. Гистохимия щелочной и кислой фосфатаз человека в норме и патологии. -Л.: Медицина, 1969. -143 с. 6. Акаевский А. И., Климов А.Ф.- Анатомия домашних животных- 7-е изд. - М.: Лань, 2007 г. 7. Александров С. Н., Прокопенко Е. В. Справочник по кормлению свиней. Москва, Донецк. АСТ Столкер, 2004. 8. Алексеев И.А. Опыт выращивания поросят с применением пробиотика “Споробактерин” / И.А. Алексеев, Г.Н. Мартынов, А.С. Тобоев // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. – 2014. – Т. 220 (4). – С. 20 - 23 9. Алексеева Л.С. Янтарная кислота - основное действующее вещество новых метаболических препаратов / Л.С. Алексеева, А.В. Петров, Т.П. Саватеева, А.Л. Коваленко, С. М. Голубев, М.Г. Романцов // Врач 2001, № 12, С. 29. 10. Аликин Ю.С. Перспективы разработки и применения препаратов нового поколения БАВ в качестве лечебных и профилактических средств при болезнях молодняка / Ю.С. Аликин, В.И. Масычева // Матер. Сибир. межд. вет. конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины».- Новосибирск, 2005.- С.3238. 152 11. Аликин, Ю.С. Перспективы разработки и применения препаратов нового поколения БАВ в качестве лечебных и профилактических средств при болезнях молодняка / Ю.С. Аликин, В.И. Масычева // Матер. Сибир. межд. вет. конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины».- Новосибирск, 2005.- С.3238. 12. Анализ хозяйственной деятельности предприятия: Учеб.пособие/ Под общ. ред. Л. Л. Ермолович. - Мн.: Интерпрессервис; Экоперспектива, 2001. 576 с. 13. Андреева А.В., Баишева Г.И. Профилактика желудочно-кишечных заболеваний поросят применением пробиотиков // Иммунодиагностика и иммунопрофилактика хронических заболеваний. – Оренбург, 2012. – С. 33–37. 14. Андреева А.В., Баишева Г.И., Бозова Т.Б. Коррекция микробиоценоза кишечника поросят при отъемном стрессе // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. – Казань, 2012. – Т. 211. – С. 16–20. 15. Аникиенко И.В. Влияние пробиотического препарата “Ветоспорин-с” на биохимические показатели крови и рост поросят-отъемышей/ Аникиенко И.В., Ильина О.П., Карелина Л.Н., Силкин И.И. // ВЕСТНИК ИРГСХА/- 2018. - № 85. - С. 124-134. 16. Анохин Б.М. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных / Б.М. Анохин, В.М. Данилевский, Л.Г. Замарин и др.; под ред. В.М. Данилевского. - М.: Агропрбмиздат, 1991. - С. 253-25. 17. Анохина, Г.А. Современные методы коррекции недостаточности внешнесекреторной функции поджелудочной железы/ Г. А. Анохина// Здоровье Украины. - 2007.-№11-12.- С. 55. 18. Бабушкин В.А., Негреева А.Н., Чивилева А.Г. Эффективность разведения свиней разных генотипов при определенных хозяйственных условиях: научное издание.- Мичуринск: Изд-во МичГАУ, 2008. – 106 с. 19. Бахтин А.Г. Желудочно-кишечные болезни свиней. - М.: Колос, 1967.- С.28-59. 153 20. Беллвуд Б. Лабораторные процедуры. Техника проведения тестов и анализов. Цветовой атлас / БрианаБеллвуд, Мелисса Андрасик-Каттон// Пер. с англ. Е.Поляковой. – М.: «Аквариум Принт», 2016. – С. 35-56. 21. Белобородова Э.И., Далингер Л.М. Патофизиология печени. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. С. 386–424. 22. Бессарабов Б.Ф. Влияние пробиотиков на рост и сохранность цыплят/Б.Ф. Бессарабов, А. Крыканов, И. Мельникова // Птицеводство. -1996. -№1.-С.25. 23. Бовкун Г.Ф., Трошин В., Малик Н., Тугалик Е. Дисбактериозы молодняка — проблема актуальная // Птицеводство. — 2005. — № 6. — С. 25-27. 24. Болезни свиней / под ред. В.И. Левченко, В.П. Заярнюк, И.В. Панченко. — Киев: Белая церковь, 2005. — 168 с. 25. Боль, К.Г. Основы патологической анатомии домашних млекопитающих и птиц / К.Г. Боль.- М.: Сельхозгиз, 1938.- С.372-395. 26. Большаков В., Новикова Н., Солдатова В. Фитопробиотик Провитол для поросят-сосунов. // Животноводство России. – 2013. – Специальный выпуск по свиноводству. – С. 53. 27. Большаков В., Новикова Н., Солдатова В. ФитопробиотикПровитол для поросят-сосунов. // Животноводство России. – 2013. – Специальный выпуск по свиноводству. – С. 53. 28. Бондаренко, В.М. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта / В.М.Бондаренко, Б.В. Боев, Воробьев А.А. // Рос.журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 1998. - №1. - С. 66-70. 29. Бочкарева, В.В. Современные подходы к специфической профилактике и лечению неонатальной диареи поросят // -Ветеринария. -2018. - №2.- с. 14-17 30. Буданцев М.В. Ветеринарно-санитарная оценка продуктов убоя свиней при панкреатите / Буданцев М.В., Серегин И.Г. //Сборник статей III Международной научно-практической конференции преподавателей, молодых ученых, аспирантов, студентов, посвященной 50-летию образования аграрного факультета РУДН – М.: РУДН, 2011. – С. 304-305. 154 31. Буданцев М.В. Ветеринарно-санитарная характеристика мяса свиней при патологии поджелудочной железы / Буданцев М.В., Серегин И.Г. // Материалы международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционных болезней молодняка и других возрастных групп сельскохозяйственных животных, рыб, пчел», посвященной 50-летию со дня основания лаборатории лейкозологии, лаборатории ихтиопатологии и отдела охраны полезной энтомофауны. – М.: ВНИИЭВ, 2011. – С. 299-301. 32. Буданцев М.В. Ветеринарно-санитарная характеристика мяса свиней при патологии поджелудочной железы / Буданцев М.В., Серегин И.Г. // Мясная индустрия. – М.: июль 2011. – С. 46-48. 33. Буданцев М.В. Ветеринарно-санитарная характеристика продуктов убоя свиней при патологии поджелудочной железы / Буданцев М.В., Серегин И.Г. // Материалы 8-й Международной научной конференции студентов и молодых учёных «Живые системы и безопасность населения». – М.: МГУПБ, 2010. – С. 205 -206. 34. Буянов А.А. и др. Иммунодефициты у животных при промышленной технологии // Мат. всерос. науч. - метод.конф. по пат. анатомии с. - х. жив-х. Воронеж, 1993. - с.6 35. Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных. / Е.А. Васильева. - М.: Россельхозиздат, 1982. – 254 с. 36. Васильева, Э.Переспективы развития свиноводства в России. /Э. Васильева, Н. Ситникова. //Свиноводство. – 2000. - №4. - С. 2-3. 37. Влияние продолжительности скармливания кормовой добавки «ГидроЛактиВ» поросятам на откорме на их рост / Г. С. Походня // Инновации в АПК: проблемы и перспективы: теоретический и научно-практический журнал. - 2016. - N 4. - С. 151-158. 38. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных/ под ред. И. Г. Шарабрина.- 5-е изд., испр. и доп.- М.: Колос, 1976.-с. 27. 155 39. Водяницкая С. Н. Иммуномодулирующий эффект галавета и его влияние на физиологическое состояние поросят: автореф. дис... канд. биол.наук/ С. Н. Водяницкая.- Белгород , 2009.- 24 с. 28. Воронов, А.Н. Острые желудочнокишечные заболевания поросят: автореф. докт. дис/А.Н. Воронов.- Л.,- 1989.16 с. 40. Войтенко О.С. Биопрепараты и их влияние на убойные качества молодняка свиней / О.С. Войтенко, Л.Г. Войтенко // Свиноводство. – 2014. №2. – С. 24 – 25 41. вок// Инновационные технологии в сельском хозяйстве, ветеринарии пищевой промышленности: материалы 82-й Международной науч.-практ. конференции: сб. науч. тр. – 2017. – С. 85-94 42. Воронов А.Н. Острый желудочно-кишечные заболевания поросят / / Эпизоотология, лечение и профилактика / Автореферат докт. Диссертацию ЛВЫ .- 1989 .- 16 с. 43. Воронов, А.Н. Острые желудочно-кишечные заболевания поросят: автореф. докт. дис/А.Н. Воронов. - Л.,- 1989.- 16 с. 44. Гамко Л.Н. Пробиотики в кормлении свиней / Л.Н. Гамко, И.И. Сидоров, Т.Л. Талызина / / Кормление сельскохозяйственных животных и корм опроизводство, 2012. - № 11. - С. 37-39. 45. Гамко Л.Н. Пробиотики на смену антибиотикам: монография /Л.Н . Гамко, И.И. Сидоров, Т.Л. Талызина, Ю.Н. Черненок. - Брянск, 2015. - 136 с. 46. Гамко Л.Н. Цеолито-сывороточная добавка для свиней на откорме / Л.Н. Гамко, В.Е. Подольников, Т.Л. Талызина, Е.А. Ефименко / / Зоотехния. - 2001. № 8. - С. 13-15. 47. Гамко, Л.Н. Влияние пробиотиков на продуктивность свиноматок и сохранность поросят / Л.Н. Гамко, Ю.Н. Черненок // Зоотехния. – 2008. – № 6. – С. 24 - 25. 48. Гамко, Л.Н. Влияние пробиотиков Ситексфлор № 1 и Ситексфлор № 5 на переваримость основных питательных веществ корма и продуктивность 156 молодняка свиней/ Л.Н. Гамко, Ю.Н. Черненок// Зоотехния. – 2009. – № 10.– С. 26 – 28. 49. Гамко, Л.Н. Пробиотические препараты Ситексфлор № 1 и Ситексфлор № 5 в кормлении свиней / Л.Н. Гамко, Ю.Н. Черненок// Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство.– 2010. – № 5.– С. 23 – 29. 50. Ганиева, С.Р. Эффективность использования пробиотической кормовой добавки «Споровит» в рационах поросят на доращивании / С.Р. Ганиева, И.Н. Токарев // - Известия оренбургского государственного аграрного университета. - 2014.-№5.- с. 146-148 51. Гастроэнтерология: справочник /под ред. В.Т. Ивашкина, СИ. Рапопорта. - М.: Русский врач, 1998. - С.23-50. 52. Гнатюк, С. Роль витаминно-минеральных премиксов в профилактике болезней свиней/ С.Гнатюк // Ветеринарная медицина Украины. - 1998. - №8. С. 40-41. 53. Данилевская, Н.В. Справочник ветеринарного терапевта/ Н.В. Данилевская, А.В. Коробов, С.В.Старченков, Г.Г Щербаков; под ред. А.В. Коробова, Г.Г. Щербакова. - 3-е изд., стер.- СПбг. Лань, 2003. -С. 123-149. 54. Данилевский В.М. Справочник по ветеринарной терапии. - М: Колос, 1983. - 192 с. 55. Данилявичюс Э., Матусявичюс А Исследование основных кишечных ферментов - щелочной фосфатазы и энтерокиназы в кале поросят при экспериментальном эзофагостомозе / / пищеварения и обмен веществ у свиней. - М.: Колос-1997. - С.337. 56. Дегтярева И.И. Клиническая гастроэнтерология. Руководство для врачей / И.И. Дегтярева. - М.: Медицинское информационное агенство, 2004. -С. 104. 57. Дементьева Т.А. Динамика активности α-амилазы в крови свиней // Успехи современного естествознания. – 2004. – № 1. – с. 65-66 157 58. Денисенко В.Н. Методы диагностики заболеваний печени у животных: метод, указания/ В.Н. Денисенко. – М:. МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, 1995. -16 с. 59. Дроздова Л.И. Морфологические изменения в печени поросят при применении препарата "Вестин" в системе "мать-плод" //Реутова Е.А., Дроздова Л.И. / В сборнике: Актуальные вопросы патологии, морфологии и терапии животных материалы 19-й Международной научно-методической конференции по патологической анатомии животных. 2018. С. 73-77. 60. Дунина, И. Состояние свиноводства в хозяйствах Российской Федерации /И. Дунина, В. Гарай, А. Новиков, Е. Суслина, А. Кочетков // Свиноводство. 2005, № 4. - С.3-5. 61. Елисеев В.Г. Атлас микроскопического и ультрамикроскопического строения клеток, тканей и органов. — М.: Медицина. — 1970. 62. Ефимов А.А., Полушин Г.В., Ляху В.А. Профилактика диспепсии в новорожденных поросят//Важнейшие исследования по изучению заболеваемости с / х животных. Сб. науч. тр. МВА. -М, 1977. - С.41-43. 63. Ефимов А.А., Полушин Г.В., Ляху В.А. Профилактика диспепсиы в новорожденных поросят / / Важнейшие исследования по изучению заболеваемости с/х животных. Сб. науч. тр. МВА. -М, 1977. - С.41-43. 64. Жаков В.С. Вскрытие животных и патологанатомические диагнозы болезней/М.С. Жаков, В.С. Прудников, И.А. Анисим и др.-М.: Ураджай, 1992. 136.: с ил. - 88с. 65. Засыпкин, А.Л. Использование витаминной добавки ветвитал при выращивании молодняка свиней // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. - М., 2016. - С. 280-283. 66. Засыпкин, А.Л. Продуктивные качества свиней при применении добавки Ветвитал В / А. Л. Засыпкин // Кормление сельскохозяйственных животных и кормопроизводство. - 2018. - N 4. - С. 21-28. 158 67. Зубец Н.А. Гастроэнтериты новорожденых поросят. - М.: Россельхозиздат. - 1978. - 112 с. 68. использовании отечественных белково-витаминно-минеральных доба- 69. Кабанов В.Д. Свиноводство. – М.: Колос, 2001. - 8-12 с 70. Кабанов В.Д. Свиноводство. – М.: Колос, 2001. - 8-12 с. 71. Кавардаков В.Я. и др. Кормление свиней. Ростов-на-Дону: Феникс, 2006. 72. Карпуть И.М., Ковзов В.В., Бабина М.П., Прощенко В.М. Экологически безопасный способ коррекции иммунной недостаточности у телят и поросят // Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии животных: Материалы международного координационного совещания, г. Воронеж, 19-23 мая 1997 г. - Воронеж, 1997. - С.320-321. 73. Карпуть И.М., Пивовар Л.М. Иммунные дефициты, иммунокорректоры и антимикробные препараты при заболеваниях молодняка // Профилактика и меры борьбы с болезнями молодняка сельскохозяйственных животных: Тез.докл. респ. Науч. - произв. конф., г. Витебск. - Мн.: Ураджай, 1990. - С.5859. 74. Карпуть И.М., Порохов Ф.Ф., Абрамов С.С. и др. Незаразные болезни молодняка. - Мн.: Ураджай, 1989. - 240 с. 75. Квасницкий, A.B. О повышении плодовитости свиней. // Вестник животноводства. 1948. - №1. - С. 5-9. 76. Клименко В.В. Применение пробиотиков в ветеринарии // Материалы III- IVМеждунар. науч. семинаров. – М., 2002. – С. 32-34. 77. Колесов A.M. Крашенинников П.Н., Тарасов Н.И. Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. - М.; Колос. 1974 .- С.526-529. 78. Кононенко С.И. Особенности обмена веществ у молодняка свиней при 79. Коржевский Д.Э. Применение методов теплового демаскирования антигенов на парафиновыхсрезах головного мозга крысы // Морфология. – 2005.– Т. 127. - № 2. – С. 76-77 159 80. Кормление свиней/ В.Я.Кавардаков, А.И. Браннико, А.Ф. Кайдалов. - Ростов-на-Дону: Феникс, 2006.- 511 с.; 21 см. – (Серия «Высшее образование»). – Библиогр.: с. 506-507 81. Кормовая добавка «ГидроЛактиВ» в рационах поросят / Г. С. Походня [и др.] // Инновации в АПК: проблемы и перспективы: теоретический и научнопрактический журнал. - 2016. - N 4. - С. 159-165. 82. Коробов A.B. Организация, технология, ветеринарная санитария и лечебно-профилактическая работа в крупных комплексах по производству свинины: Лекция. - М., Моск.вет.акад. им. К.И.Скрябина. -1978.-С.31. 83. КоробовA.B. Локализация выработки кишечных ферментов и их изменения в пищеварительной системе у свиней // Современные проблемы ветеринарной науки и практики: Сб. науч. трудов/ Моск.вет.акад. им. К.И.Скрябина. -1973.-Т.69.-С.101-103. 84. КоробовA.B. Показатели энтерокиназы и щелочной фосфатазы в тонком и толстом отделах кишечника у поросят с хронической фистулой // Вопросы ветеринарной науки и практики: Сб. науч.трудов/ Моск.вет.акад. им.К.И.Скрябина. -1977.-С.97-98. 85. Косенко М., Ривак Г. Биологическая эффективность Провита в кормлении свиней // Ветеринарная медицина Украины. - 2000. - № 2. - С. 12-13. 86. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора/ И.Б. Куваева. – М., 1976. – 248 с. 87. Куприянов В.В., Караганов Я.Л., Козлов В.И. Микроциркуляторное русло. -М.: Медицина, 1975. 88. Курятова Е.В. Гистоморфология двенадцатиперстной кишки поросят при гастроэнтерите // Вестн. КрасГАУ. – 2015. – № 12. – С. 236–241. 89. Курятова, Е.В. Коррекция дисбактериозов поросят пробиотическим препаратом «Интестевит» / Е.В. Курятова // Болезни животных Дальнего Востока: сб. науч. тр. ДальГАУ. - Благовещенск: Изд-во ДальГАУ, 2005. С.109-113; 2006. - С.107-111. 160 90. Кухаренко Н.С., Тумашов Я.А., Храпова H.H. Нормализация морфофункциональных отклонений в желудочно-кишечном тракте поросят, больных гастроэнтеритом //Студенческие исследования производству: Сб.науч.тр./ДальГАУ.-Благовещенск,1998.-С. 11-15. 91. Кухаренко Н.С., ТумашовЯ.А., Храпова H.H. Нормализация морфофункциональных отклонений в желудочно-кишечном тракте поросят, больных гастроэнтеритом //Студенческие исследования производству: Сб.науч.тр./ДальГАУ.-Благовещенск,1998.-С. 11-15. 92. Лаптев Г.Ю., Большаков В.Н., Солдатова В.В. Кормовая добавка «Микс- Ойл» в кормлении свиней. // Сельскохозяйственные Вести. – 2012. -№1. –С.24. 93. Лаптев Г.Ю., Большаков В.Н., Солдатова В.В. Кормовая добавка «Микс- Ойл» в кормлении свиней. // Сельскохозяйственные Вести. – 2012. -№1. –С.24. 94. Лебедев А.А., Дуборезов В.М., Лаптев Г.Ю., Солдатова В.В. Фитопробиотик Провитол в кормлении дойных коров. // Сельскохозяйственные Вести. – 2012. -№2. –С.26. 95. Леляк А. Пробиотики и функциональное питание // Современные технологии восстановительной медицины: материалы VIМеждунар. конф. – М., 2001. – С. 21-23. 96. Локес П.И. Эффективность диоксидина при желудочно-кишечных расстройствах поросят незаразной этиологии //. Сб. науч. тр. Пермский СХИ. 1992.-Вып. 63.-С 116-117. 97. Макарцев Н. Г. Кормление сельскохозяйственных животных. Калуга. Издательство Н. Ф. Бочкарёвой, 2007. 98. Манжурина О.А. Живые термостабильные дрожжи “Актисаф” / О.А. Манжурина // Свиноводство. – 2015. - №1. – C. 34 – 36 99. Манжурина О.А. Живые термостабильные дрожжи “Актисаф” / О.А. Манжурина // Свиноводство. – 2015. - №1. – C. 34 – 36 100. Мантатова, Н.В. Гематологическая картина при язвенной болезни желудка у поросят / Н.В. Мантатова, С.Р. Танхаев // - Вестник алтайского государственного аграрного университета. -2018. - №2.- с. 136-141 161 101. Медведева М.А. Клиническая ветеринарная лабораторная диагностика. Справочник для ветеринарных врачей. – М.: «Аквариум Принт», 2013. – С.1059. 102. Механизмы действия пробиотических препаратов на организм, перспективы использования в свиноводстве / И.В. Аникиенко, О.П. Ильина, Л.Н. Карелина, И.И. Силкин // Вестник ИРГСХА. – 2018. - №84. – С.126 –135. 103. Мешков В.М., Кислинская Л.Г., Дьяконова М.А. Из опыта применения пробиотика термоспорина поросятам-сосунам // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2012. № 2 (34). С. 85–86. 104. Михайлова, О.А. Тенденции развития мирового свиноводства // -Вестник аграрной науки. -2018. - №1.- с. 36-45 105. Мошкутело И.И. Пробиотик нового поколения “Амилоцин” в системе функционального питания поросят / И.И. Мошкутело, Д.Ф. Рындина, С.Н. Гунько // Свиноводство – 2015. - №7. – C. 33 - 35 106. Негреева А. Н., Бабушкин В. А., Сорокина И. А. и др. Производство и переработка свинины. Москва.: Колос, 2008. 107. Некрасов Р.В. Лактоамиловорин-СП в рационах поросят на доращивании / Р.В. Некрасов // Свиноводство. – 2015. - № 4. – C. 39 – 40 108. Никольский В.В., Божко В.И., Бортничук В.А., Колесник В.Д., Шевчук Б.Ф. Болезни молодняка свиней. - К.: Урожай, 1989. - С. 35-36. 109. Никулин, В. Н. Состояние обмена минеральных веществ у молодняка КРС при включении в рацион пробиотика / В. Н. Никулин, Р. З. Мустафин // Из- 309 вестия Оренбургского государственного аграрного университета. – 2014. – № 1. – ч. 2. – С. 164 – 166. 110. Общая патологическая анатомия: учеб.пособие / Н. С Кухаренко, Е.В. Курятова .- Благовещенск.: ДальГАУ, 1995.- 64 с. 111. Пальцев М.А. Патологическая анатомия. В 2-х т. Т. 2, ч. I: учеб.для вузов/ М.А. Пальцев - М.: Медицина, 2001. - С. 622-727. 162 112. Панин А.Н. Пробиотические препараты в ветеринарии / А.Н. Панин, Н.И. Малик, Е.В. Малик//Ветинформ. – 1993 - №2 – С. 9-10 113. Пашин М.А. Коррекция панкреобиллиарной системы поросят при гастроэнтерите препаратами «Малавит» и «Ветом» раздельно и в сочетании: Дис... канд. биол. наук: 06.02.01. — Благовещенск, 2011. — 121 с. 114. Петрянкин Ф. П. Кормление и иммунитет животных / Ф. П. Петрянкин // Ефективнетваринництво. - 2012. -№ 1(57). - С. 20-23. 115. Пивовар Л.М. Свести до минимума // Свиноводство. - 1990. - № 4. - с.29 116. Пирс Э.B. Гистохимия, практическая и прикладная. -М.: Издво иностранной литературы, 1972. 117. Попов, В. Продуктивные и воспроизводительные качества свиноматок при использовании в их рационах ферментативного пробиотика Целлобактерин / В. По- пов, Н. Чепелев, В. Ульянов // Свиноводство. – 2009. – № 2. – С. 18 - 19. 118. Пробиотический препарат ПКД в системе выращивания поросят /Мошкутело И.И., Александров П.В., Северин В.П. и др.// - Зоотехния. - 2011. № 7.- С. 10—12. 119. Промышленное содержание свиней / С.Н. Александров, Е.В. Прокопенко. - М.: АСТ Сталкер, 2004. -с.192 120. Реутова Е.А., Дроздова Л.И Морфологическое состояние тонкого кишечника поросят при введении иммунокорректора "вестин" в системе "матьплод" // Вестник красноярского государственного аграрного университета.2018. - № 1. - С. 50-55. 121. Реутова Е.А., диетотерапии при С.А.Черноморец, Черноморец хронических М. С.А., Стрижкова заболеваниях Стрижкова // печени М. / Использование Е.А. Реутова, Матер.Сибир.межд.вет.конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». -Новосибирск, 2005. - С. 35. 122. Риган Дж.В. Атлас ветеринарной гематологии / Пер. с англ. Евг.Махиянова // РиганДж.В., Сандерс Г.Т., Деникола Б.Д. – М.: ООО «Аквариум принт», 2014. – С.24-47. 163 123. Савицкая Г. В. Анализ хозяйственной деятельности предприятия, 7-е изд., испр. - Мн.: Новое знание, 2002. - 704 с. 124. Савицкая Г. В. Теория анализа хозяйственной деятельности. - М.: ИнфраМ, 2007. 125. Савицкая Г. В. Экономический анализ: Учеб. - 10-е изд., испр. - М.: Новое знание, 2004. - 640 с. 126. Сеитов М.С. Клинический статус овец эдильбаевской породы при неспецифическом гастроэнтерите/ Биктеев М.М., Днекешев А.К., Сеитов М.С., Ненашев И.В. // Ғылым және бiлiм. 2018. № 1 (50). С. 94-98. 127. Сидоров А.М., Субботин В.В. Основы профилактики желудочно- кишечных заболеваний новорожденных животных // Ветеринария. – 1998. – №1.– С. 37. 128. Сидоров А.М., Субботин В.В. Основы профилактики желудочнокишечных заболеваний новорожденных животных // Ветеринария. – 1998. – №1.– С. 37. 129. Система морфометрического анализа изображения МАКС1000 в медикобиологических исследованиях/Кочетков А.Г., Силин Е.В., Савельев В.Е. и др.//Нижегород. мед.журнал. -1999. -№1. -С. 54-57. 130. Скамай Л. Г., Трубочкина М. И. Экономический анализ деятельности предприятия. - М.: Инфра-М, 2007. 131. Сковородин Е.Н. Гепатозащитные свойства нового препарата диронакс при экспериментальном гепатите/Кильметова И.Р., Сковородин Е.Н., Дударев А.А. //Вестник Башкирского государственного аграрного университета. 2015. № 2 (34). С. 47-50. 132. Сороколетова, В.М. Влияние лечебных средств на секреторную функцию желудка поросят / В.М. Сороколетова//Матер. Сибир. межд. вет. конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - Новосибирск, 2005. - С.3439. 133. Сороколетова, В.М. Диагностика острого катарального гастро­энтерита у поросят-отъмышей и диетическое кормление в его профилактике / В.М. 164 Сороколетова // Матер. Сибир. межд. вет. конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - Новосибирск, 2005. - С. 56-59. 134. Сороколетова, гастроэнтерита В.М. Применение поросят-отъемышей/ комплексной В.М. Сороколетова схемы // терапии Тез. докл. юбил.регион, науч.-практ. конф. «Проблемы АПК в условиях рыночной экономики». - Новосибирск, 1996. - С. 136-137. 135. Сороколетова, В.М. Профилактика и лечение острого катарального гастроэнтерита у поросят-отъемышей/ В.М. Сороколетова // Тез.докл. конф. «Проблемы реализации продовольственной программы Сибирского региона в новых условиях хозяйствования». - Новосибирск, 1989. - С.112-113. 136. Стацевич, Л.Н. Диагностическое значение некоторых показателей сыворотки крови при патологии печени у животных/ Л.Н. Стацевич, E.A. Реутова // Матер. Сибир. межд. вет. конгресса «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - Новосибирск, 2005. - С.36. 137. Стручков, В.И. Актуальные вопросы дифференциальной диагностики заболеваний органов пищеварительного тракта и их сочетаний /В.И Стручков, Э.В Луцевич, И.Н Белов, Е.А. Карелина/Сочетанные поражения органов пищеварения: сб. науч. тр. — М., 1984. - С.62-66. 138. Суючбакиев Т. М. Физиологические особенности питания свиней// Материалы V Международной студенческой электронной научной конференции «Студенческий научный форум» 139. Тараканов Е.И. Функциональная морфология поджелудочной железы//Архив анат. -1954. -№ 3. -С. 41-46. 140. Тельцов Л.П. Выращивание животных в онтогенезе для получения наивысшей генетической продуктивности // Современные проблемы и достижения аграрной науки в животноводстве и растениеводстве / Сб. ст. Барнаул, 2003. Ч.4. - С. 206-211. 141. Тельцов Л.П. закономерности органогенеза млекопитающих и наследственность // Актуальные пробл. С.-х. производства / Матер.межрегион. н-практ. конф., посвященной 70-летию ЧГСХА. - Чебоксары, 2001. - С. 358-364. 165 142. Тельцов Л.П. Закономерности органогенеза позвоночных животных // Оптимизация кормления с.-х. животных / Межвуз. сб. науч. тр. - Саранск, 1993. - С. 60-65. 143. Тельцов Л.П. Закономерности развития и смены функций органов млекопитающих в онтогенезе // ХХ Огаревские чтения: Докл. науч. конф. Саранск, 1991. - С. 106-107. 144. Тельцов Л.П. Закономерности развития органов млекопитающих в онтогенезе // Zmogausontogeneseirpatalogijossalygomis. - Kaunas, 1990. - С. 104105. 145. Тельцов Л.П. Органогенез млекопитающих (закономерности развития, периодизация, критические фазы) // Матер. Всероссийской н.-пед. конф. паталогоанатомов ветеринарной медицины: Сб. науч. тр. - Омск, 2000. - С. 226228. 146. Тельцов Л.П. Пути управления онтогенезом сельскохозяйственных животных // Ветеринарная и биол. наука с/х производству / матер. Всерос. н-пр. конференции. - Н.Новгород, 1997. - С 73-76. 147. Тельцов Л.П. Столяров В.А., Шигин М.Е. Наследственность и этапности развития в онтогенезе // Естественно-технические исследования; теория, методы, практика /Межвуз. сб. науч. тр. - Саранск, 2000. - С. 122-124. 148. Тельцов Л.П. Управление онтогенезом сельскохозяйственных животных // Актуальные проблемы патологии животных и человека / Матер.н-пр. конф. Барнаул, 1996. - С. 138-140. 149. Тельцов Л.П. Этапность развития органов человека и животных и наследственность в онтогенезе // Матер. Междунар. конф. Естествознание на рубеже столетий». - М.: Дагомыс, 2001. Т.2. - С. 135-140. 150. Тельцов Л.П., Ильин П.А., Шашанов И.Р. Периодизация развития и практика выращивания крупного рогатого скота // Возрастная и экологич. морфология ж-х в условиях интенсивного животноводства / Сб. науч.тр. Ульяновск, 1987. - С. 77-79. 166 151. Тельцов Л.П., Кокорев В.А., Шашанов И.Р. Периодизация развития свиней в эмбриогенезе // Морфологический статус млекопитающих и птиц / 3-я науч. конф. морфологов. - Симферополь, 1995. - С. 10-11. 152. Тельцов Л.П., Музыка Л.Л., Столяров В.А. Органогенез позвоночных животных // Российские морфол. ведомости. М.,1995. № 2. - С. 77-82. 153. Тельцов Л.П., Соловьева Л.П. Наследственность и этапность развития органов человека и животных в онтогенезе // Российские морфологические ведомости. - М., 2001. № 1-2. - С. 153-155. 154. Тельцов Л.П., Столяров В.А., Шагиахметов Ю.С. Критерии определения критических фаз развития органов в онтогенезе // Матер. IV съезда Российскихморфол. / Российские морф.ведомости. - М., 1999. № 1-2. - С. 147148. 155. Тельцов Л.П., Чикирин Н.П. Практическая ветеринария и критические фазы развития животных // Матер.науч.-произв. конф., посвящ. 190-летию высшего ветеринарного образования в России. - Санкт-Петербург, 1998. Т.2 - С. 96-98. 156. Тельцов Л.П., Шашанов И.Р. Управление онтогенезом сельскохозяйственных животных // ХIV Огаревские чтения: Докл. науч. конф. Саранск: Изд-во Мордов. ун-та. - Саранск, 1995. - С. 191-192. 157. Тельцов Л.П., Шашанов И.Р., Кирилина Н.Е. Критические фазы развития животных и наследственность // Естественно-технические исследования: теория, методы, практика. Межвуз. сб. науч. тр. - Саранск,2000. - С. 124-126. 158. Тельцов Л.П., Шашанов И.Р., Шагиахметов Ю.С. и др. Закономерности развития органов млекопитающих // Докл. ХI съезда АГЭ. - Смоленск, 1992. С. 141-142. 159. Тельцов, Л.П. Концепция выращивания животных и увеличения продукции животноводства в 2-3раза / Тельцов Л.П. // Современные наукоемкие технологии. Сельскохозяйственные науки. – 2004. - №2. – С.2732 167 160. Урбан, В.П. Теоретические и практические задачи сохранения молодняка в животноводческих комплексах/ В.П Урбан // Вестник с/х науки. -1981. -№12.С91-100. 161. Учасов, Д.С. Влияние пробиотика «Проваген» и его комбинаций с хотынецкими природными цеолитами и фумаровой кислотой на морфобиохимический состав крови и продуктивность свиноматок / Д.С. Учасов, Н.И. Ярован, О.Б. Сеин // Вестник Орёл ГАУ. – 2012. – № 4. – С. 84 – 86. 162. Учасов, Д.С. Иммуно-биохимический статус и продуктивность поросят сосунов и отъёмышей при использовании пробиотика «Проваген» /Д.С. Учасов, Н.И. Ярован, О.Б. Сеин, Д.С. Ашихмин // Вестник Орёл ГАУ, 2011. – № 6 . – С. 49 – 51. 163. Учасов, Д.С. Пробиотики и пребиотики в промышленном свиноводстве и птицеводстве: монография /Д.С. Учасов, В.С. Буяров, Н.И. Ярован, И.В. Червонова, О.Б. Сеин // Орёл: изд-во Орёл ГАУ, 2014. – 164 с 164. Учасов, Д.С. Эффективность применения пробиотика «Проваген» при технологическом стрессе у свиней / Д.С. Учасов, Н.И. Ярован, О.Б. Сеин // Вестник Орёл ГАУ. – 2013. – № 1. – С. 129 – 131. 165. Хохрин, С.Н. Кормление сельскохозяйственных животных /С.Н. Хохрин. - М.: Колос, 2004. – 692 с. 166. Храпова H.H. Состояние органов пищеварения поросят при витаминноминеральной недостаточности: Науч.тр./ДальГАУ. -Благовещенск, 1997. -Вып.-11.-С.83-84. 167. Храпова H.H., Кухаренко Н.С. Особенности проявления желудочнокишечной патологии в условиях витаминно-минеральной недостаточности //Общеуниверситетская тематическая науч.конф., ДальГАУ.-Благовещенск, 1996.-С.18. 168. Черненок, Ю.Н. Особенности обмена веществ и продуктивность у свиноматок, и их потомства при скармливании пробиотиков: автореф. дис. ... канд. биол. наук. – Боровск, 2009. – 24 с. 168 169. Чечеткина, Е.О. Влияние минерального комплекса на основе аспарагиновой кислоты на морфометрические показатели желудка подсвинков / Е.О. Чечеткина, И.В. Зирук, В.В. Салаутин // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. – 2012. – №4. – С. 13 – 14. 170. Чечеткина, Е.О. Гематологические показатели крови подсвинков при добавлении в рацион минерального комплекса / Е.О. Чечеткина, И.В. Зирук, В.В. Салаутин // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. – 2012. – №2. – С. 8 – 10. 171. Чечеткина, Е.О. Морфология тонкого отдела кишечника подсвинков при добавлении в рацион минерального комплекса / Е.О. Чечеткина // Vedaatechnologic: krokdoBudoucnosti – 2013: materialyIXMezinarodnivedeckopractickaconference – Dil 24. Zemedelstvi. Zverolekarstvi. – Praha. – 2013. – Dil 24. – S. 92 – 94. Материалы Международной IX научно-практической конференции. – Прага. – 2013. – Том. 24. – С. 92 – 94. 172. Чечеткина, Е.О. Некоторые гематологические показатели крови подсвинков при добавлении в рацион микроэлементарного комплекса / Е.О. Чечеткина, И.В. Зирук, В.В. Салаутин // Актуальные проблемы и перспективы развития агропромышленного комплекса. Актуальные проблемы ветеринарной медицины: материалы Международной научно-методической конференции / ФГБОУ ВПО «Ивановская ГСХА им. акад. Д.К. Беляева» – Иваново, 2012. – Том 2. – С. 49 – 52. 173. Шамилова Т.А. Влияние пробиотика на микрофлору и гистоморфологию кишечника поросят при смешанном микотоксикозе / Т.А. Шамилова, Н.М. Шамилов // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. – 2013. – Т. 215. – С. 355 – 358 174. Шахбазова, О. Связь биохимических показателей крови с продуктивностью /О. Шахбазова. //Свиноводство. - 1995, №1. – С.23-34 175. Шахов А.Г. Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях // Ветеринарная патология. – 2003. – №2. – С. 6-7 169 176. Шейко, И.П. Свиноводство /И.П. Шейко, В.С. Смирнов. //Мн.: Новое знание. -2005. - 384 с.: ил. 177. Щербакова Э.Г. К механизмам действия пробиотиков, пребиотиков и их сочетаний //Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы: Сб. мат. междунар. конф. – М., 2004. – С.14-15 178. Экономика сельского хозяйства/И.А. Минаков, Л.А. Сабетова, Н.И. Куликов и др.; Под ред. И.А. Минакова. -- М.: КолосС, 2003. - с. 311 179. Эффективность использования в рационах свиней кормовой добавки глаукарин / Е. М. Ермолова // Известия Оренбургского государственного аграрного университета теоретический и научно-практический журнал. - 2017. N 1. - С. 147-150. 180. Эффективность кормовой добавки "АльгаВет" и её роль в инновационном развитии свиноводства / В. А. Лукьянов [и др.] // Достижения науки и техники АПК: теоретический и научно-практический журнал. - 2017. - N 2. - С. 48-51. 181. Яглов В.В., Яглова Н.В. Актуальные проблемы биологии ациноостровковых клеток поджелудочной железы. Вестник Российской академии медицинских наук, 2010, 7: 28-35. 182. Adrian Reuben. Ito becomes a star/ Reuben Adrian // Hepatology,- 2002,- Vol. 35.- Issue 2.- P. 503-504. 183. Assy, N. Liver regeneration: methods for monitoring and their applications/N. Assy, G.Y. Minuk. //J Hepatol.-1997.- P. 945-952. 184. Babinska, I., Rotkiewicz, T., Otrocka-Domagala, I., 2005. The effect of Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. administration on the morphology of the gastrointestinal tract, liver and pancreas in piglets. Pol. J. Vet. Sci. 8, 29–35. 185. Bai, S.P., Wu, A.M., Ding, X.M., Lei, Y., Bai, J., Zhang, K.Y., Chio, J.S., 2013. Effects of probiotic-supplemented diets on growth performance and intestinal immune characteristics of doi:10.3382/ps.2012- 02813. broiler chickens. Poult. Sci. 92, 663–670. 170 186. Banks, P.A. Pancreatitis / P.A. Banks.-London.- 1979. - P. 231. 114 187. Binnebosel M., Klinge U., Rosch R. et al. Morphology, quality, and composition in mature human peritoneal adhesions // Langenbecks Arch Surg. – 2008.– V. 393, N 1. – P. 393-401. 188. Bonner-Weir S, Taneja M, Weir GC, Tatarkiewicz K, Song KH, Sharma A et al. In vitro cultivation of human islets from expanded ductal tissue. PNAS 2000 97 7999 – 8004. 189. Bouhnik, Y., Raskine, L., Simoneau, G., Vicaut, E., Neaut, C., Flourie, B., Brouns, F., Bornet, F.R., 2004. The capacity of nondigestible carbohydrates to stimulate fecal bifidobacteria in healthy humans: a double-blind, randomized, placebo-controlled, parallel-group, dose-response relation study. Am. J. Clin. Nutr. 80, 1658-1664. 190. Cannon ,D.C. Proteins. In: Henry, R.J., Cannon D.C, Winkelman J.W., Eds. Clinical chemistry: Principles and techniques/ D.C. Cannon , I. Olitzky, J.A. Inkpen// London.- 1974.- P. 405-502. 191. Chen Y.J. Effects of dietary Enterococcus faecium SF68 on growth performance, nutrient digestibility, blood characteristics and faecal noxious gas content in finishing pigs / Y.J. Chen, B.J. Min, J.H. Cho, O.S. Kwon, K.S. Son, I.H. Kim, S.J. Kim // Asian Aust. J. Anim. Sci., 2006, vol. 19, pp. 406 - 411. 192. Cho J.H. Probiotics as a Dietary Additive for Pigs: A Review / J.H. Cho, P.Y. Zhao, I.H. Kim // J. of Animal and Veterinary Advances, 2011, vol. 10 (16), pp. 2127 - 2134. 193. Cho J.H. Probiotics as a Dietary Additive for Pigs: A Review / J.H. Cho, P.Y. Zhao, I.H. Kim // J. of Animal and Veterinary Advances, 2011, vol. 10 (16), pp. 2127 - 2134. 194. Columbano, A. Liver regeneration versus direct hyperplasia/A. Columbano, H Shinozuka// Hepatol.- 1997.- P.34-37. 195. De Ritis, F. Serum transaminase activities in liver disease / F. De Ritis, M. Coltorti, G. Guisti/ZLancet.-1972. - Vol.1. - P. 685. 171 196. Deng, W., Dong, X.F., Tong, J.M., Zhang, Q., 2012. The probiotic Bacillus licheniformis ameliorates heat stress-induced impairment of egg production, gut morphology, and intestinal mucosal immunity in laying hens. Poult. Sci. 91, 575– 582. doi:10.3382/ps.2010-01293 197. Dohms, J. Aspekte der Darmgesundheit und Chancen fur den Einsatz vonProbiotika : Lohmann Inform. / Lohmann Animal Health GmbH Co. KG/ J.Dohms, //Cuxhaven.- 2004. - P. 27-30. 198. Edwards, C.A., Duerden, B.I., Read, N.W., 1985. Metabolism of mixed human colonic bacteria in a continuous culture mimicking the human faecal contents. Gastroenterology 88, 1903-1909. 199. Edwards, R.A., Puente, J.L., 1998. Fimbrial expression in enteric bacteria: A critical step in intestinal pathogenesis. Trends Microbiol. 6, 282-287. 200. Estienne M.J. Effects of Antibiotics and Probiotics on Suckling Pig and Weaned Pig Performance / M.J. Estienne, T.G. Hartsock, A.F. Harper // Intern J Appl Res Vet Med., 2005, vol. 3, №4, pp. 303 - 308. 201. Fausto N. Liver regeneration and repair: hepatocytes, progenitor cells, and stem cells/N. Fausto // Hepatology.-2004.- Vol.39.- P.1477-1487. 202. Fausto, N. Liver regeneration/ N. Fausto, K.J. Riehle //Hepatology.- 2006.Vol.43.-P. 45-53. 203. Feldman, M. Gastroenterology / M. Feldman, C.C. Barnett.-1985. - Vol. 88.№5.-P. 1205-1208. 204. Forston, W.C. Marced elevation of sereem transaminase activity associated with extrahepatic biliaritract disease / W.C. Forston, F.J. Todesco, E.C. Starnes // Clin Gastroenterol. -1985. - Vol.7.- P.502. 205. Giang H.H. Effects of Suplementation of Probiotics on the Performance, Nutrient Digestibility and Faecal Microflora in Growing-finishing Pigs / H.H. Giang, T.Q. Viet, B. Ogle, J.E. Lindberg // Asian-Aust. J. Anim. Sci., 2011, vol. 24, №5, pp. 655 – 661 206. Gibson, G.R., Cummings, J.H., MacFarlane, G.T., 1988. Use of a three-stage continuous culture system to study the effect of mucin on dissimilatorysulphate 172 reduction and methanogenesis by mixed populations of human gut bacteria. Appl. Environ Microbiol. 31, 359-375. 207. Gibson, G.R., Rastall, R.A., Roberfroid, M.B., 1999. Prebiotics. In Colonic Microbiota, Nutrition and Health ed. Gibson, G.R. and Roberfroid, M.B. pp. 101-124. Doordrecht: Kluwer Academic Press. 208. Gibson, G.R., Roberfroid, M.B., 1995. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J. Nutr. 125, 1401-1412. 209. Grinevich, V.B. Correction of intestinal dysbiosis as factor of overco-ming insulin resistance/ V.B. Grinevich //Military Medical Academy, St. Peters-burg.2008.- P.29. 210. Herrick S.E. Human peritoneal adhesions are highly cellular, innervated, and vascularized // J. Pathol.– 2000. – Vol. 192(1). – P. 67 - 72. 211. Hou C. Complete genome sequence of Lactobacillus reuteri I5007, a probiotic strain isolated from healthy piglet / C. Hou, Q. Wang, X. Zeng, F. Yang, J. Zhang, H. Liu et all. // J Biotechnol., 2014, vol. 179, pp. 63 – 64. 212. Itkin-Ansari P, Demeterco C, Bossie S, De La Tour DD, Beattie GM, Movassat J et al. PDX-1 and cell – cell contact act in synergy to promote delta-cell development in a human pancreatic endocrine precursor cell line. Molecular Endocrinology 2000 14 814 – 822. 213. Jensen B.B. The impact of feed additives on the microbial ecology of the gut in young pigs / B.B. Jensen // J. Anim. Feed Sci., 1998, vol. 7, pp. 45 - 64. 214. John, P. Iredale (2001) Hepatic Stellate Cell Behavior During Resolu-tion of Liver Injury: Seminars in Liver Disease/ P. John . -21(3):427-436 PMID 11586470. 215. Langman, M.J.S. Gastric and duodenal ulcer and their associated diseases / M.J.S. Langman, A.R. Cooke //Lancet. -1996. -Vol. l.-P. 680-683. 216. Lee, K.W., Lee, S.H., Lillehoj, H.S., Li, G.X., Jang, S.I., Babu, U.S., Park, M.S., Kim, D.K., Lillehoj, E.P., Neumann, A.P., Rehberger, T.G., Siragusa, G.R., 2010. Effects of direct-fed microbials on growth performance, gut morphometry, and immune characteristics doi:10.3382/ps.2009- 00418 in broiler chickens. Poult. Sci. 89, 203–216. 173 217. Leser T.D. Culture-independent analysis of gut bacteria: the pig gastrointestinal tract microbiota revisited / T.D. Leser, J.Z. Amenuvor, T.K. Jensen, R.H. Lindecrona, M. Boye, K. Moller // Appl Environ Microbiol., 2002, vol. 68(2), pp. 673 – 690. 218. Leser T.D. Culture-independent analysis of gut bacteria: the pig gastrointestinal tract microbiota revisited / T.D. Leser, J.Z. Amenuvor, T.K. Jensen, R.H. Lindecrona, M. Boye, K. Moller // Appl Environ Microbiol., 2002, vol. 68(2), pp. 673 – 690. 219. Levkut, M., Revajová, V., Lauková, A., Ševčíková, Z., Spišáková, V., Faixová, Z., Levkutová, M., Strompfová, V., Pistl, J., Levkut, M., 2012. Leukocytic responses and intestinal mucin dynamics of broilers protected with Enterococcus faecium EF55 and challenged with Salmonella Enteritidis. Res. Vet. Sci. 93, 195–201. doi:10.1016/j.rvsc.2011.06.021 220. MacFarlane, G.T., Hay, S., Gibson, G.R., 1989. Influence of mucin on glycosidase, protease and arylamidase activities of human gut bacteria grown in a 3stage continuous culture system. J. Appl. Bacteriol. 66, 407-417. 221. Macfarlane, G.T., Steed, H., Macfarlane, S., 2008. Bacterial metabolism and health-related effects of galacto-oligosaccharides and other prebiotics. J. Appl. Microbiol. 104, 305-344. 222. MacSween, R.N.M. Parthology of the liver / R.N.M. MacSween, P.P. Anthoni, J.J. Schenen//Edinbourgh.-1979. - P.256-257. 223. Marteau, P., 2001. Safety aspects of probiotic products. Scand. J. Nutr. 45, 2224. 224. Marteau, P., Shanahan, F., 2003. Basic aspects and pharmacology of probiotics: An overview of pharmacokinetics, mechanisms of action and side effects. Best Pract. Res. Cl. Ga. 17, 725-740. 225. Miller, T.L., Wolin, M.J., 1981. Fermentation by the human large intestine microbial community in an in vitro semi-continuous culture system. Appl. EnvironMicrobiol 42, 400-407. 174 226. Molly, K., Van de Woestyne, M., Verstraete, W., 1993. Development of a 5step multi-chamber reactor as a simulation of the human intestinal microbial ecosystem. Appl. Microbiol. Biotechnol. 39, 254-258. 227. Ohashi Y. Health-beneficial effects of probiotics: Its mode of action / Y. Ohashi, K. Ushida // Animal Science Journal, 2009, vol. 80, pp. 361 – 371. 228. Palgi J, StumpfE &Otonkoski T. Transcription factor expression and hormone production in pancreatic AR42J cells. Molecular and Cellular Endocrinology 2000 165 41 – 49. 229. Pirarat, N., Pinpimai, K., Endo, M., Katagiri, T., Ponpornpisit, A., Chansue, N., Maita, M., 2011. Modulation of intestinal morphology and immunity in nile tilapia (Oreochromis niloticus) by Lactobacillus rhamnosus GG. Res. Vet. Sci. 91, e92–e97. doi:10.1016/j.rvsc.2011.02.014. 230. Quilodran-Vega S.R. Isolation of lactic acid bacteria from swine milk and characterization of potential probiotic strains with antagonistic effects against swineassociated gastrointestinal pathogens / S.R. Quilodran-Vega, J. Villena, J. Valdebenito, M.J. Salas, C. Parra, A. Ruiz, H. Kitazawa, A. Garciaf // Canadian Journal of Microbiology, 2016, vol. 62(6), pp. 514 - 524. 231. Qureshi, W. Zollinger-Ellison Syndrome: A Clinical Overview. Medscape Gastroenterology/ W.Qureshi.- 2000; 2: 2: 6430-6431. 115 232. Roselli, M., Finamore, A., Nuccitelli, S., Carnevali, P., Brigidi, P., Vitali, B., Nobili, F., Rami, R., Garaguso, I., Mengheri, E., 2009. Prevention of TNBS-induced colitis by different Lactobacillus and Bifidobacterium strains is associated with an expansion of gammadeltaT and regulatory T cells of intestinal intraepithelial lymphocytes. Inflamm. Bowel Dis. 15, 1526–1536. doi:10.1002/ibd.20961. 233. Sato, Т. Amer. J. Gastroenterol./ T. Sato, M.Immamura, J. Sasaki -1985.- Vol. 80.3.-P.163-169. 234. Scharek, L., Altherr, B.J., Tölke, C., Schmidt, M.F.G., 2007. Influence of the probiotic Bacillus cereus var. toyoi on the intestinal immunity of piglets. Vet. Immunol. Immunopathol. 120, 136–147. doi:10.1016/j.vetimm.2007.07.015 175 235. Schulz S, Pauli SU, Schulz S, Handel M, Dietzmann K, Firsching Ret al. Immunohistochemical determination of five somatostatin receptors in meningioma reveals frequent overexpression of somatostatin receptor subtype sst2A. Clinical Cancer Research 2000 6 1865 – 1874. 236. Senthilkumar M.P. Peritoneal adhesions: pathogenesis, assessment and effects // Trop.Gastroenterol. – 2006. – Vol. 27(1). - P.11 – 18. 237. Sherman, K.E. Alanine aminotransferase in clinical practice: a review / K.E. Sherman // Arch intern. Med. -1991. - Vol.151.- P. 260. 238. Silverman, L.S. Methods for determination of proteins in serum and plasma. In: Tietz Textbook of Clinical Chemistry/ L.S Silverman, R.H. Christenson// Eds. Philadelphia.- 1994.- P. 695-704. 239. Simone Renner, Christiane Fehlings, Nadja Herbach, Andreas Hofmann, Dagmar C. Von Waldthausen, Barbara Keler, Karin Ulrichs, Irina Chodnevskaja, Vasiliy Moskalenko, Werner Amselgruber, Burkhard Göke, Alexander Pfeifer, Rüdiger Wanke, Eckhard Wolf. Glucose intolerance and reduced proliferation of pancreatic β-cells in transgenic pigs with impaired GIP function. Diabetes, 2010 240. Smiricky-Tjardes, M.R., Grieshop, C.M., Flickinger, E.A., Bauer, L.L., Fahey, G.C., 2003. Dietary galactooligosaccharides affect ileal and total-tract nutrient digestability, ileal and fecal bacterial concentrations, and ileal fermentative characteristics of growing pigs. J. Anim. Sci. 81, 2535-2545. 241. Smith, H.W., 1965. The development of the flora of the alimentary tract in young animals. J. Pathol. Bacteriol. 90, 495-513. 242. Smith, H.W., Jones, J.E.T., 1963. Observation on the alimentary tract and its bacterial flora in healthy and diseased pigs. J. Pathol. Bacteriol. 86, 387-412. 243. Spring, P., Wenk, C., Dawson, K.A., Newman, K.E., 2000. The effect of dietary mannanoligosaccharides on cecal parameters and the concentrations of enteric bacteria in the ceca of Salmonella-challenged broiler chicks. Poult. Sci. 79, 205-211. 244. Stanciu, A. New data about ITO cells/ A Stanciu, С Cotutiu, C.Amalinei //Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 107(2):235-9. PMID 12638266. 176 245. Strompfová, V., Laukova, A., Ouwehand, A.C., 2004. Selection of enterococci for potential canine probiotic additives. Vet. Microbiol. 100, 107-114. 246. Tannock, G.W., 1990. The micro ecology of lactobacilli inhabiting the gastrointestinal tract, In: Marshall, K.C. (Ed.), Advances in Microbial Ecology, vol. 11. PlenumPress, NewYork, pp. 147-171. 247. Trivedi N, Hollister-Lock J, Lopez-Avalos MD, O’Neil JJ, Keegan M, BonnerWeir S et al. Increase in beta-cell mass in transplanted porcine neonatal pancreatic cell clusters is due to proliferation of beta-cells and differentiation of duct cells. Endocrinology 2001 142 2115 – 2122 248. Tyrberg B, Ustinov J, Otonkoski T &Andersson A. Stimulated endocrine cell proliferation and differentiation in transplanted human pancreatic islets: effects of the ob gene and compensatory growth of the implantation organ. Diabetes 2001 50 301 – 307. 249. Veenstra, J., Minekus, M., Marteau, P., Havenaar, R., 1993. New Type Gastrointestinal, A Tool to Test Physiological Aspects of Foods. Int. FoodIngredients. 3, 28. 250. Veilleux, B., Rowland, I.R., Simulation of the rat intestinal ecosystem using a two-stage continuous culture system. J. Gen. Microbiol. 1981. 123, 103-115. 251. Verdenelli M.C. Probiotic properties of Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus paracasei isolated from human faeces / M.C. Verdenelli, F. Ghelfi, S. Silvi, C. Orpianesi, C. Cecchini, A. Cresci // Eur. J. Nutr., 2009, vol. 48, pp. 355 363. 252. Walker W.A. Mechanisms of Action of Probiotics / W.A. Walker // Clinical Infectious Diseases, 2008, vol. 46, pp. 87 – 91. 253. Wang A.N. Dietary supplementation with Lactobacillus fermentum I5007 improves the anti-oxidative activity of weanling piglets challenged with diquat / A.N. Wang, C.J. Cai, X.F. Zeng, F.R. Zhang, G.L. Zhang, P.A. Thacker, J.J. Wang, S.Y. Qiao // J. Appl. Microbiol., 2013, vol. 114, pp. 1582 – 1591 177 254. Wang A.N. Influence of Lactobacillus fermentum I5007 on the intestinal and systemic immune responses of healthy and E. coli challenged piglets / A. Wang, H. Yu, X. Gao, X. Li, S. Qiao // Antonie Van Leeuwenhoek, 2009, vol. 96, pp. 89 – 98 255. Wege, E. Regeneration in pig livers by compensatory hyperplasia induces high levels of telomerase activity/ E. Wege // Comparative Hepatology.-2007.- P.67-71. 256. Williams D.A. The pancreas/D.A. Williams. In Strombeck's Veterinary Gastroenterology, 2nd ed.// Philadelphia. - 1996. - P.381-410. 257. Yan F. Soluble proteins produced by probiotic bacteria regulate intestinal epithelial cell survival and growth / F. Yan, H. Cao, T.L. Cover, R. Whitehead, M.K. Washington, D.B. Polk // Gastroenterology, 2007, vol. 132(2), pp. 562 – 575. 258. Zabala A. Anti-proliferative effect of two lactic acid bacteria strains of human origin on the growth of a myeloma cell line / A. Zabala, M.R. Martin, A.I. Haza, L. Fernandez, J.M. Rodriguez, P. Morales // Lett. Appl. Microbiol., 2001, vol. 32, pp. 287 - 292. 178 ПРИЛОЖЕНИЯ Приложение А - Морфометрические показатели экзокринной паренхимы поджелудочной железы свиней на разных этапах эксперимента Группа животных Диаметр ацинуса, мкм Высота ацинарных клеток, мкм Площадь ацинарных клеток, мкм 2 Площадь цитоплазмы ацинарных клеток, мкм Количеств о ядер в ацинусе 2 Диаметр ядер ацинарных клеток, мкм Площадь ядер ацинарных клеток, мкм2 Средний диаметр зимогеновы х гранул, мкм Ядерноцитоплазмат ическое отношение 45-60 суточные животные 1 группа 61,20±1,83* 11,07±0,21* 82,48±1,23* 50,37±1,05* 7,25±0,18* 3,19±0,07* 32,10±0,80** 2,3,4 групп ы 69,40±2,08* 11,76±0,23 104,85±1,57 63,01±1,32 6,45±0,16 3,65±0,09* 41,83±1,04 0,585±0,013 * 0,501±0,011 * 0,621±0,029 0,641±0,016* 0,662±0,011* * 85-100 суточные животные 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 65,31±1,95 11,25±0,22 94,36±1,41* 57,63±1,21 8,97±0,22* 3,42±0,08* 36,72±0,91* 64,74±1,94 10,88±0,21* 85,12±1,27 53,76±1,29* 5,73±0,14 3,16±0,08 31,35±0,78 61,85±1,85* 11,04±0,22* 90,25±1,35 59,87±1,25 7,15±0,18 3,11±0,07* 30,37±0,76* 63,25±1,89* 10,98±0,23 91,22±1,36* 56,60±1,18* 7,36±0,19 3,32±0,08 34,61±0,86 68,10±2,04* 11,31±0,18* * 98,11±1,47* 62,02±1,30** 8,15±0,23* 3,39±0,08* 36,08±0,91* 64,65±1,93 10,53±0,21* 87,96±1,31* 58,17±1,22 5,17±0,14 3,08±0,07 29,78±0,78 0,420±0,011 * 0,520±0,028 3 0,501±0,008 * 0,635±0,015* 0,581±0,014 0,502±0,012* 0,611±0,015 180-210 суточные животные 1 группа 2 группа 0,586±0,012 * 0,411±0,012 * 0,547±0,011 * 0,522±0,020 0,581±0,014* 0,512±0,012 62,88±1,88 11,25±0,25 99,27±1,48* 66,91±1,40* 6,54±0,16 3,21±0,08 32,35±0,81 0,483±0,012 3 группа 64,36±1,93* 11,13±0,23 95,65±1,43* 62,07±1,39* 7,06±0,17 3,27±0,09 33,57±0,92 0,540±0,013 4 группа *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 179 Приложение Б - Морфометрические показатели эндокринной паренхимы поджелудочной железы свиней на разных этапах эксперимента Возраст свиней Группа животных Диаметр панкреатического островка, мкм S островка, мкм 2 Количество клеток 45-60 суток 1 группа 84,29±2,11* 5642,24±141,06* 54,26±1,36* 2,3,4 группы 88,16±2,20** 5869,89±146,75* 42,12±1,05 85-100суток 1 группа 87,25±2,18* 6078,85±151,97 52,45±1,31* 2 группа 70,26±1,76 5128,36±128,21* 39,69±0,99* 3 группа 78,92±1,97* 5485,14±137,13 54,46±1,36* 4 группа 82,36±2,06* 5589,25±139,73* 54,26±1,66* 180-210 суток 1 группа 89,26±2,23* 5837,81±145,95 48,16±1,20* 2 группа 75,89±1,90 5124,40±128,11** 43,37±1,08 3 группа 84,27±2,11* 5682,06±145,05* 49,61±1,24* 4 группа 86,94±2,17 5706,67±142,67 47,45±1,19** *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 180 Приложение В - Морфометрические показатели сосудистого русла поджелудочной железы свиней на разных этапах эксперимента Возраст свиней 45-60 суток Группа животных Площадь капилляра, мкм2 Диаметр капилляра, мкм Толщина трабекулы, мкм 1 группа 100,23±2,71* 11,3±0,31* 3,9±0,11* 2,3,4 группы 136,77±3,69* 13,2±0,36* 5,10±0,14 85-100 суток 1 группа 86,54±2,34* 10,5±0,28* 3,20±0,12 2 группа 65,00±2,07 9,11±0,25 5,10±0,14* 3 группа 93,26±2,58* 10,90±0,29* 4,30±0,15* 4 группа 98,47±2,66 11,2±0,35 4,70±0,14 180-210 суток 1 группа 69,36±2,7** 9,40±0,28* 3,30±0,09* 2 группа 87,53±2,36* 10,56±0,29* 4,70±0,13 3 группа 89,87±2,43* 10,70±0,32* 3,90±0,11* 4 группа 81,67±2,21 10,20±0,27* 3,90±0,11* *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 181 Приложение Г - Морфометрические показатели эндокринной паренхимы поджелудочной железы свиней в 45-60 суточном возрасте Группа животны х Тип панкр еатиче ских клеток Площадь клетки, мкм² Диаметр ядра, мкм Площадь ядра, мкм² Общая площадь гранул, мкм² 1 группа А-кл 105,67±3,81* 5,25±0,17* 21,63±0,43* 16,48±0,33** В-кл 81,35±2,00** 4,14±0,15 13,45±0,79* Д-кл 114,90±4,25* 7,19±0,24* PP-кл 79,50±2,94 А-кл 2,3,4 группы Диаметр гранулы, мкм Относитель ная доля гранул, % Ядерноцитоплазмат ическое отношение 67,54±1,35 0,385±0,018 * 15,60±0,73* 0,32±0,015* 4,39±0,12* 63,50±3,04* 0,200±0,09* 5,40±0,25* 0,211±0,017 * 40,58±1,51* 26,08±0,52** 48,23±0,96** 0,411±0,027 22,70±0,55* * 0,84±0,044* 4,98±0,12** 19,46±0,72* 7,63±0,15** 52,39±2,67 0,103±0,005 * 9,60±0,45* 0,37±0,025 125,32±4,61* 7,78±0,28 47,51±2,12 46,86±0,95* 30,93±0,61** 0,329±0,021 37,40±0,52* * 1,53±0,073* В-кл 79,30±2,93 4,25±0,15 14,17±0,25** 13,46±0,67* 51,65±2,47* 16,98±0,95 0,27±0,011* Д-кл 102,90±3,79* 6,74±0,13** 35,66±1,33* 18,11±0,99 49,12±0,97** 17,6±0,85 0,72±0,031 PP-кл 64,60±2,39 2,18±0,07* 9,73±0,84* 5,87±0,11** 54,99±2,61* 9,10±0,45* 0,06±0,003* Площадь цитоплазмы, мкм² 0,211±0,010 * 0,522±0,025 * 0,131±0,006 * *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 182 Приложение Д - Морфометрические показатели эндокринной паренхимы поджелудочной железы свиней в 85-100 суточном возрасте Группа животны х 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа Тип панкр еатиче ских клеток А-кл Площадь цитоплазмы, мкм² Диаметр гранулы, мкм Относитель ная доля гранул, % Ядерноцитоплазмат ическое отношение Площадь клетки, мкм² Диаметр ядра, мкм Площадь ядра, мкм² Общая площадь гранул, мкм² 151,90±5,62 6,45±0,21* В-кл Д-кл 125,30±4,63 139,87±5,17 7,98±0,29 7,38±0,24* 32,65±0,98* 49,98±2,65 42,75±3,33 37,36±1,96 19,54±0,97* 31,47±1,54* 81,87±3,93* 55,76±2,67 65,64±3,17* 0,421±0,027 0,220±0,010* 0,512±0,033 24,60±0,91* 15,6±0,85 22,50±1,25 0,39±0,019 0,89±0,042* 0,65±0,031* PP-кл А-кл 69,30±2,56 109,60±4,05 4,28±0,15* 7,24±0,24 14,37±0,85* 5,68±0,14** 49,23±0,78** 0,160±0,008* 8,20±0,38* 41,14±0,75** 32,00±1,67 36,44±0,72** 0,311±0,020 29,2±1,32* В-кл 101,30±3,73 5,10±0,18 20,41±0,32** 11,75±0,65 69,13±3,37 0,201±0,009* 11,60±0,54* 0,29±0,014* 1,12±0,010* * 0,29±0,014* Д-кл 150,60±5,75 7,01±0,24* 38,57±0,94* 22,43±1,22* 89,58±4,36* 0,400±0,017* 14,90±0,75* 0,43±0,020 PP-кл А-кл В-кл Д-кл PP-кл А-кл В-кл Д-кл PP-кл 80,10±2,96 116,60±4,31 140,61±5,20 129,11±4,77 74,90±2,77 124,70±1,31* 135,50±2,15** 147,60±5,46 75,20±2,73* 4,50±0,16 6,92±0,14** 6,75±0,17* 7,64±0,09** 3,98±0,14 6,87±0,25 6,12±0,21* 8,21±0,29* 3,72±0,13 15,89±0,58* 37,59±1,33 35,76±1,23* 45,82±1,69 12,43±0,47 37,04±0,97** 29,40±1,08* 52,91±1,95* 10,86±0,40* 10,09±0,20** 25,06±1,25* 19,54±0,97* 23,49±1,24 8,53±0,17** 34,41±1,72 15,17±0,75* 28,19±0,56** 11,95±0,57* 54,11±2,63 53,94±1,07** 85,29±4,09* 59,78±1,19** 53,92±3,11 53,23±2,55* 90,92±4,34* 66,49±1,33** 52,38±2,64 0,121±0,006* 0,250±0,016 0,230±0,011* 0,420±0,027 0,147±0,007* 0,310±0,015* 0,198±0,009* 0,440±0,021* 0,133±0,009 12,60±0,59* 21,50±0,98* 13,90±0,65* 18,20±0,85 11,40±0,53* 27,60±1,29 11,20±0,52* 19,10±0,89* 15,90±0,74 0,29±0,014* 0,69±0,033* 0,41±0,020* 0,76±0,039 0,23±0,011* 0,69±0,033 0,32±0,015* 0,79±0,037* 0,20±0,010* *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 183 Приложение Е - Морфометрические показатели эндокринной паренхимы поджелудочной железы свиней в 180-210 суточном возрасте Группа животны х Тип панкр еатиче ских клеток Площадь клетки, мкм² Диаметр ядра, мкм Площадь ядра, мкм² Общая площадь гранул, мкм² Площадь цитоплазмы, мкм² Диаметр гранулы, мкм Относитель ная доля гранул, % Ядерноцитоплазмат ическое отношение 1 группа А-кл 141,70±3,96* 7,20±0,25* 40,69±1,52* 21,82±1,09* 79,18±3,82* 0,387±0,018* 15,40±0,72* 0,51±0,024 В-кл Д-кл PP-кл А-кл В-кл Д-кл PP-кл А-кл В-кл Д-кл PP-кл А-кл В-кл Д-кл 114,91±3,58* 128,31±4,74 82,50±3,05 112,3±3,11** 98,70±3,65 134,70±4,15* 74,65±2,77 127,90±4,73* 121,90±4,21* 132,40±4,85 79,80±2,88* 134,20±2,78** 100,6±3,72 140,60±4,63* 7,65±0,27* 7,14±0,24* 3,65±0,13 6,21±0,21* 4,98±0,18 7,46±0,20* 3,80±0,14 6,98±0,22* 5,96±0,09** 8,02±0,28 3,84±0,14 6,47±0,21* 6,01±0,17* 8,96±0,32 45,94±1,78 40,01±1,22* 10,45±0,32* 30,27±1,12* 19,46±0,72 43,68±1,61* 11,33±0,41* 38,24±1,31 27,84±1,03* 50,41±1,85* 11,55±0,45* 32,80±1,12* 28,34±1,03** 63,02±2,58 14,24±0,71* 27,58±0,55** 10,31±0,54* 22,23±0,44** 9,08±0,94 22,62±0,45** 8,21±0,58 21,48±0,43** 13,77±0,78 25,42±1,07* 10,85±0,87 23,08±0,46** 9,63±0,55 22,63±0,45** 54,71±1,09** 60,69±1,2,52* 61,72±2,96* 59,79±2,98 70,15±3,36* 68,38±3,81 55,10±1,10** 68,16±4,01 80,24±4,22 56,48±3,12 57,37±1,14** 78,25±1,56** 62,60±3,05* 54,94±1,09** 0,267±0,013* 0,460±0,030 0,142±0,007* 0,325±0,015* 0,212±0,014 0,301±0,014* 0,112±0,005* 0,370±0,024 0,237±0,011* 0,440±0,029 0,117±0,006* 0,330±0,016* 0,217±0,010* 0,424±0,08 12,40±0,58 21,50±0,98* 12,50±0,57 19,80±0,93* 9,20±0,43 16,80±0,79* 11,00±0,51* 16,80±0,79* 11,300±0,53 19,20±0,90* 13,60±0,93 17,20±0,80* 9,5810±0,45 16,10±0,75* 0,83±0,039 0,65±0,031* 0,16±0,008* 0,50±0,025 0,27±0,013* 0,63±0,030* 0,20±0,010 0,56±0,029 0,34±0,016* 0,89±0,042* 0,20±0,009 0,41±0,020* 0,45±0,021* 1,14±0,054* PP-кл 76,98±2,82 4,12±0,14* 13,32±0,54* 9,24±0,88 54,40±2,61* 0,120±0,006* 12,01±0,24* 0,24±0,012 2 группа 3 группа 4 группа *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®. 184 Приложение З - Стромально-паренхимальное соотношение компонентов поджелудочной железы свиней на разных этапах эксперимента Возраст 45-60 суток 90-105 суток 180-210 суток Группа животных Эндокринная паренхима, % Клинически здоровые животные 5,66±0,18* Ацинарная паренхима, % 64,9±2,33* Общее количество соединительной ткани, % 26,75±0,96* Площадь кровеносных сосудов, % 2,67±0,13 Животные с картиной гастроэнтерита 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 1 группа 2 группа 3 группа 4 группа 5,45±0,17* 66,08±2,37* 23,76±0,85* 4,71±0,11** 5,54±0,21 6,31±0,22* 5,78±0,20 5,84±0,21* 5,45±0,14** 4,62±0,16* 5,04±0,18* 5,21±0,19 67,12±2,41* 57,99±2,08* 65,23±2,39 62,37±2,21* 64,30±2,39* 60,15±2,97 62,98±2,01* 64,96±2,11* 23,49±0,84* 32,68±1,17* 25,50±0,74** 28,02±1,98 26,62±0,95* 32,12±1,15* 28,52±1,78 26,45±0,85 3,85±0,18* 3,02±0,15 3,49±0,17 3,77±0,16* 3,63±0,09** 3,11±0,15* 3,46±0,19 3,38±0,16* *р<0,05;**р<0,01, в сравнении с 1 группой 1 группа – клинически здоровые животные, 2 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства; 3 - группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Провитол»®; 4 – группа с клинической картиной гастроэнтерита на фоне стандартных схем лечения хозяйства + «Микс-Ойл»®.
