ПЕРЕРАБОТКА И ПУТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛРС. АНАЛИЗ ИЗМЕЛЬЧЕННОГО ЛРС ПЕРЕРАБОТКА И ПУТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ Пути использования ЛРС Сырье поступает от заготовителей: на заводы по переработке ЛРС; в аптеки, где из него готовят экстемпоральные лекарственные формы (настои, отвары); на промышленное производство: фармацевтические производства (фабрики, цеха), где из него получают галеновые и новогаленовые препараты: настойки, экстракты, сиропы, сборы химико-фармацевтические производства (заводы, цеха), где из сырья выделяют БАВ, делают на их основе препараты индивидуальных веществ и комплексные препараты На предприятиях по переработке ЛPC производят сортировку, измельчение, просеивание, купажирование, прессование, фасовку ЛРС для получения цельного, измельченного и порошкованного сырья "ангро", которое предназначено для дальнейшего использования на фармацевтических предприятиях. Сортировка заключается в устранении дефектов сырья и удаления примесей. Данные операции проводят вручную (сортировочные столы) или механизировано (грохоты, веялки-сортировки, сепараторы, ленточные транспортеры) Измельчение представляет собой процесс механического деления твердых тел на части. В результате измельчения увеличивается поверхность измельчаемых материалов, что позволяет значительно ускорить выделение БАВ из материала, химические взаимодействия, ускоряет тепловую обработку. Для измельчения растительного сырья в химико-фармацевтической промышленности используется различное оборудование, которое во многом заимствовано из других отраслей промышленности. Поскольку растительное сырьё имеет волокнистую структуру, для его измельчения применяются машины, которые работают по принципу изрезывания – это траво-, соломо-, корнерезки. В траво-, соломорезках режущими инструметами являются барабанные и дисковые ножи. Для срезывания плотных и деревянистых частей растений (корни, корневища, кора) применяются корнерезки с гильотинными ножами, для измельчения особо твёрдого сырья (корни элеутерококка) используются малогабаритные дисковые пилы. Для получения порошкованного сырья применяются измельчители различных конструкций: шаровые мельницы, дробилки. Стандартность измельчения достигается последующим просеиванием через сита с диаметром отверстий, регламентируемым НД для каждого вида сырья. Процесс купажирования лекарственного растительного сырья обеспечивает однородность лекарственного растительного сырья путем смешивания сырья мелких партий, принятых от индивидуальных сборщиков или остатков лекарственного растительного сырья крупных партий сырья. Купажный барабан Прессование ЛРС Спрессованное сырье в меньшей степени подвергается воздействию неблагоприятных факторов среды − кислорода воздуха, влаги, микроорганизмов и др. Основная цель прессования лекарственного сырья состоит в предотвращении значительных потерь действующих веществ при хранении и в придании сырью формы, удобной для транспортировки и хранения. Используются прессы. Прессование ЛРС Порошкованное сырье может использоваться для получения брикетов и резанопрессованного сырья (гранул). Такая обработка существенно повышает на только удобство фасовки и последующего использования, но и сроки хранения. В аптеки поступают брикеты листа сенны, травы зверобоя, череды, душицы и т. д. Гранулируют кукурузные рыльца, листья мать-и-мачехи, цветки бессмертника, траву хвоща, сушеницы топяной и др. Упаковка ЛРС Цель упаковки ЛРС − защита от неблагоприятных факторов при перевозке и хранении, т.е. упаковка должна обеспечить качественную и количественную сохранность сырья. Способ упаковки и вид тары регламентирован для каждого вида сырья в НД. На заводах по переработке ЛРС сырье и сборы фасуют в различные виды потребительской упаковки – пачки, пакеты, фильтр-пакеты. Эти виды продукции предназначены для безрецептурного отпуска в аптеках и самостоятельного приготовления больными настоев и отваров в домашних условиях. Лекарственное сырье и сборы "ангро" могут также поступать в аптеки для внутриаптечного изготовления по экстемпоральной рецептуре. АНАЛИЗ ИЗМЕЛЬЧЕННОГО ЛРС Согласно ГФ ХIV издания по измельченности ЛРС может быть: цельное измельченное – в зависимости от морфологической группы измельченное ЛРС, как правило, имеет размер частиц не более 7, 5 или 3 мм; порошок – это, как правило, ЛРС, измельченное до частиц размером не более 2 мм Фармакогностический анализ включает в себя комплекс методов анализа ЛРС, позволяющий определить подлинность и доброкачественность. Подлинность Доброкачественность – соответствие ЛРС – это соответствие ЛРС наименованию, под которым оно поступило на анализ. требованиям НД. Фармакогностический анализ складывается из ряда последовательно проводимых анализов: макроскопического; микроскопического; фитохимического; товароведческого. Подлинность сырья устанавливается путем макроскопического, микроскопического, качественного фитохимического анализа по качественным реакциям, хроматографическим и спектральным характеристикам и иными методами в соответствии с требованиями ФС или НД на наличие в сырье тех или иных групп соединений. Доброкачественность определяется на основе данных товароведческого и количественного фитохимического анализов и, если необходимо, путем установления биологической активности сырья. АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 1 Макроскопический анализ Общие правила проведения макроскопического анализа для установления подлинности ЛРС приведены в соответствующих ОФС («Листья», «Травы», «Кора», «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы», «Цветки», «Плоды», «Семена», «Почки»). Макроскопический анализ измельченного сырья состоит в определении внешних признаков исследуемого сырья визуально – невооруженным глазом, с помощью лупы (10×) или стереомикроскопа (8×, 16×, 24×) размеров, цвета, запаха, вкуса (для неядовитых объектов!). ФС «Корни алтея» Измельченное сырье. Кусочки корней различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Цвет белый, желтовато-белый или серовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения сладковатый с ощущением слизистости. Макроскопический анализ порошка Рассматривают невооруженным глазом, с помощью лупы (10×) или стереомикроскопа (8×, 16×, 24×). При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушенность кусочков, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая железками и др.) и т.д. Отмечают форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется), цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), измельченность (размер отверстий сита, через которое проходит смесь частиц), запах, вкус (определяют аналогично цельному и измельченному сырью). ФС «Трава душицы» Порошок. Смесь кусочков стеблей, листьев и цветков, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Цвет коричневатозеленый с фиолетовыми, белыми, коричневыми и розовыми вкраплениями. Запах ароматный, вкус водного извлечения горьковато-пряный, слегка вяжущий. Микроскопический анализ Общие правила проведения микроскопического анализа для установления подлинности ЛРС приведены в соответствующих ОФС («Листья», «Травы», «Кора», «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы», «Цветки», «Плоды», «Семена», «Почки» и «Техника микроскопического и микрохимического исследования ЛРС и ЛРП»). Подлинность сырья устанавливают по анатомо-диагностическим признакам. Листья, травы, цветки Измельченное сырье. Для изучения порошка можно использовать два способа получения микропрепаратов. На предметное стекло наносят 1-2 капли раствора хлоралгидрата и небольшое количество исследуемого порошка. Порошок берут кончиком препаровальной иглы, смоченной хлоралгидратом, тщательно размешивают, закрывают покровным стеклом и нагревают до удаления пузырьков воздуха. Затем стекло слегка придавливают ручкой препаровальной иглы, выступившую по краям жидкость удаляют полоской фильтровальной бумаги. Порошки кожистых листьев просветляют кипячением в натрия гидроксида растворе 5 %. При отсутствии хлоралгидрата на предметное стекло наносят 1-2 капли натрия гидроксида раствора 5 % и небольшое количество порошка. Порошок берут кончиком препаровальной иглы, смоченной натрия гидроксида раствором 5 %, тщательно размешивают, закрывают покровным стеклом и нагревают над пламенем горелки до просветления. После охлаждения удаляют фильтровальной бумагой натрия гидроксида раствор с одной стороны покровного стекла, добавляя с противоположной стороны пипеткой глицерина раствор 33 %. Микропрепарат порошка плодов шиповника Плоды, семена Измельченное сырье. Для микроскопического исследования получают препараты аналогично препаратам цельного сырья. Более удобно проводить анализ в давленых препаратах, для чего просветленные объекты раздавливают обратным концом препаровальной иглы или скальпелем на предметном стекле в заключающей жидкости. Порошок. Микропрепараты готовят аналогично микропрепаратам порошка листьев. При исследовании строения клеток кожуры и околоплодника в порошке из плодов и семян, содержащих крахмал или незначительное количество жирного масла, препарат готовят в растворе хлоралгидрата при легком подогреве. При необходимости порошок обезжиривают и просветляют. Кора Измельченное сырье. Соскоб коры или мелкие кусочки кипятят в течение 3-5 мин в натрия гидроксида растворе 5 %, промывают водой и готовят микропрепараты, раздавливая объект скальпелем в растворе хлоралгидрата или глицерина растворе 33 %. Порошок. Готовят несколько микропрепаратов аналогично микропрепаратам порошка листьев для выявления анатомо-диагностических признаков коры. Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы Измельченное сырье. Кусочки подземных органов кипятят в течение 3-5 мин в натрия гидроксида растворе 5 %, тщательно промывают водой и готовят микропрепараты, раздавливая кусочки в глицерина растворе 33 % или растворе хлоралгидрата. Порошок. Микропрепараты порошка готовят аналогично микропрепаратам порошка листьев. Качественный фитохимический анализ Подлинность ЛРС устанавливается путем проведения качественных реакций на наличие в сырье тех или иных групп соединений, а также по хроматографическим, спектральным характеристикам и иными методами в соответствии с требованиями НД на лекарственное растительное сырье. В зависимости от техники выполнения и характеру получаемых результатов различают следующие типы реакций: качественные реакции гистохимические реакции микрохимические реакции сублимация и микросублимация Хроматография Проводят анализ извлечений ЛРС с помощью различных хроматографических методик с использованием стандартных образцов. Чаще всего хроматографически в извлечениях определяют компоненты эфирных масл, флавоноиды, дубильные вещества, антраценпроизводные. Спектр (УФ-спектр) Анализ проводят в извлечении из ЛРС при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье. Определение измельченности Измельченность лекарственного растительного сырья – показатель качества лекарственного растительного сырья (цельного, измельченного, порошка), который характеризует количество лекарственного растительного сырья, имеющего больший или меньший размер частиц в сравнении с установленным фармакопейной статьей для соответствующего вида лекарственного растительного сырья, и выражается в процентах. Измельченность лекарственного растительного сырья определяют методом ситового анализа. Для измельченного лекарственного растительного сырья и порошка в НД приводятся допустимые значения содержания частиц большего и меньшего размера, определяемые с помощью 2 сит, размер отверстий которых указан в НД на анализируемый вид лекарственного растительного сырья. Для просеивания измельченного лекарственного растительного сырья и порошка берут 2 сита. Часть аналитической пробы сырья помещают на верхнее сито и осторожно, плавными вращательными движениями просеивают, не допуская дополнительного измельчения. Просеивание считается законченным, если количество сырья, прошедшего сквозь сито при дополнительном просеве в течение 1 мин, составляет менее 1 % сырья, оставшегося на сите. Затем отдельно взвешивают сырье, оставшееся на верхнем сите и прошедшее сквозь нижнее сито, и вычисляют процентное содержание частиц, не прошедших сквозь верхнее сито, и содержание частиц, прошедших сквозь нижнее сито, к массе аналитической навески. Взвешивание проводят с погрешностью ±0,1 г при массе аналитической навески свыше 100 г и ±0,05 г при массе аналитической навески 100 г и менее. Содержание измельченности в процентах (X) вычисляют по формуле: m1 100% , Х m2 где m1 – масса частиц, не прошедших сквозь верхнее сито (частиц, прошедших сквозь нижнее сито) в граммах; m2 – масса аналитической навески сырья в граммах. Допустимая норма содержания измельченных частиц для каждого вида лекарственного растительного сырья указана в соответствующем НД. Определение содержания примесей Содержание примесей – показатель качества лекарственного растительного сырья (цельного, измельченного, порошка), характеризующий содержание в сырье допустимых примесей, попавших в сырье в процессе его заготовки, и выражающийся в процентах. Обычно к допустимым примесям лекарственного растительного сырья относят: части сырья, изменившие окраску, присущую данному виду лекарственного растительного сырья (побуревшие, почерневшие, выцветшие и т. д.); другие части растения, не соответствующие установленному описанию сырья; органическую примесь (части других неядовитых растений); минеральную примесь (земля, песок, камешки). Содержание каждого вида примеси процентах (X) вычисляют по формуле: в m1 100% Х m2 где m1 – масса примеси в граммах; m2 – масса аналитической навески сырья в граммах. Для допустимых примесей устанавливаются следующие нормы: органическая примесь должна составлять не более 1 %; минеральная примесь – не более 1 %; части сырья, утратившие окраску, присущую данному виду сырья, не более 3 %; другие части растения, не соответствующие установленному описанию сырья, не более 2 %, если иное не указано в НД. Для определения содержания минеральной примеси в порошке ЛРС часть аналитической пробы взвешивают с погрешностью ± 0,01 г, затем помещают в стеклянный стакан вместимостью 1000 мл, прибавляют 200 мл воды. Чтобы устранить комочки из слипшихся частиц, содержимое размешивают до полного смачивания сырья, равномерно распределяя в объёме раствора. Выдерживают 3-5 мин. После оседания минеральной примеси воду со взвешенными частицами быстро (не давая разбухнуть частицам сырья) сливают с осадка. Осадок в стакане несколько раз промывают водой до полного удаления взвешенных частиц сырья. По окончании промывания в стакане должен остаться осадок минеральной примеси с минимальным количеством воды. Стакан с осадком помещают в сушильный шкаф и сушат при температуре около 100-105оС до приобретения осадком сыпучести. Высушенный осадок (минеральную примесь) охлаждают и взвешивают с погрешностью ± 0,01 г. Содержание минеральной примеси рассчитывают по формуле. m1 100% Х m2 АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 2 Аналитическую пробу № 2 используют для установления влажности ЛРС. Влажность – один из важнейших показателей доброкачественности ЛРС, влияющий как на состояние сырья, так и на содержание действующих веществ. Под влажностью понимают потерю в массе за счет гигроскопической влаги и летучих веществ, которую определяют в сырье при высушивании до постоянной массы. Влажность ЛРС (X) в процентах рассчитывают по формуле: (m m1 ) 100% , Х m где m – масса сырья до высушивания, г; m1 – масса сырья после высушивания, г. АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 3 Зола – один из основных показателей доброка- чественности ЛРС, под которым понимают несгораемый остаток минеральных веществ после сжигания навески ЛРС и последующего прокаливания остатка до постоянной массы. В ЛРС определяют два вида золы: зола общая зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте Навеску ЛРС в тигле осторожно нагревают при 100-105 °С в течение 1 ч и далее проводят сжигание с последующим прокаливанием остатка образца при температуре 550-650 °С. Содержание золы общей (X) в процентах рассчитывают по формуле m1 100% Х m2 где m1 – масса золы, г; m2 – масса сырья, г Содержание золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, (X) в процентах рассчитывают по формуле; (m1 m) 100% Х m2 где m1 – масса золы, г; m – масса золы фильтра, г (если золы последнего более 0,002 г); m2 – масса сырья, г. Содержание действующих веществ устанавливают по методикам, изложенным в ОФС ГФ XIV (экстрактивные вещества, эфирные масла, жирное масло, дубильные вещества) или частных статьях на отдельные виды сырья (алкалоиды, флавоноиды, производные антрацена, витамины и другие). АНАЛИЗ СПЕЦИАЛЬНЫХ ПРОБ Испытания на микробиологическую чистоту включают количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, а также выявление определенных видов микроорганизмов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах. Испытания проводят, применяя методы, приведенные в ОФС «Микробиологическая чистота». Микробиологическая чистота лекарственных препаратов Категория 4 Препараты Лекарственные растительные средства, состоящие из одного вида сырья (фасованная продукция) или нескольких (сборы), а также растительное сырье «ангро» А. Лекарственные растительные средства или лекарственное сырье «ангро», применяемые в виде настоев и отваров, приготовленных с использованием кипящей воды Б. Лекарственные растительные средства или растительное сырье «ангро», приготовленные без использования кипящей воды Рекомендуемые требования Общее число аэробных микроорганизмов – не более 107 в 1 г Общее число грибов – не более 105 в 1 г Escherichia coli – не более 102 в 1 г Общее число аэробных микроорганизмов – не более 107 в 1 г Общее число грибов – не более 105 в 1 г Escherichia coli – не более 102 в 1 г Энтеробактерий и других грамотрицательных бактерий – не более 103 в 1 г Отсутствие Escherichia coli в 1 г Отсутствие бактерий рода Salmonella в 10 г Радионуклиды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» Государственному контролю на радиационную безопасность подлежит лекарственное растительное сырье, выпускаемое предприятиями различных форм собственности на территории Российской Федерации и ввозимое на территорию Российской Федерации. Радиационный контроль лекарственных средств проводится в соответствии с требованиями закона «О радиационной безопасности населения» и «Правил сертификации лекарственных средств». Радиационный контроль лекарственных средств отечественного и зарубежного производства на территории Российской Федерации осуществляется уполномоченными на это органами. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» в ЛРС определяют цезий-137 и стронций-90. Пределы допустимого содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье Радионуклиды Допустимая удельная активность радионуклида Бк/кг, не более Cs - 137 400 Sr - 90 200 Определение степени зараженности сырья вредителями запасов Сырье проверяют на наличие живых и мертвых вредителей невооруженным глазом или с помощью лупы 5-10х при внешнем осмотре, а также при определении измельченности и содержания примесей. Если были обнаружены вредители, то в специальной пробе устанавливают степень заражения. Различают 3 степени заражения клещами и другими амбарными вредителями в пересчете на 1 кг ЛРС. При наличии клещей выделяют: 1 степень – до 20 клещей; 2 степень – больше 20, но они свободно передвигаются по сырью; 3 степень – больше 20, клещи образуют сплошные войлочные массы. В сырье, оставшемся на сите, определяют наличие моли, хлебного точильщика и их личинок. 1 степень – до 5 штук 2 степень – от 6 до 10 3 степень – больше 10 Анализ пробы для определения содержания остаточных пестицидов, тяжелых металлов и мышьяка Тяжелые металлы и мышьяк. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Требования настоящей ОФС распространяются на методы количественного определения тяжелых металлов: свинца, кадмия, ртути и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах. Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах проводят с использованием одного из следующих методов: атомно-абсорбционной спектрометрии; атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой; масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Результаты, полученные при определении содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье, распространяются на лекарственный растительный препарат, произведенный из данной партии лекарственного растительного сырья. Лекарственные растительные препараты подвергаются выборочному контролю на содержание тяжелых металлов и мышьяка не реже одного раза в год (одна серия каждого наименования). Предельно допустимое содержание тяжелых металлов и мышьяка в ЛРС и ЛРП Металл Свинец Кадмий Ртуть Мышьяк Предельно допустимое содержание, мг/кг 6,0 1,0 0,1 0,5 Остаточные количества пестицидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» на стадии технологического процесса. Содержание остаточных пестицидов, как правило, определяют в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах, получаемых от культивируемых лекарственных растений. Лекарственные растительные препараты получают из лекарственного растительного сырья, которое соответствует по содержанию остаточных пестицидов требованиям ОФС. Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственных растительных препаратах проводят в случае обоснованных претензий. Поставщик лекарственного растительного сырья должен предоставить протокол анализа на поставляемую партию лекарственного растительного сырья, в котором указываются использованные пестициды и содержание остаточных пестицидов. Пределы допустимого содержания остаточных пестицидов (хлорсодержащих) в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах Вещество Гексахлорциклогексан и его изомеры (в сумме) ДДТ и его метаболиты (в сумме) Алдрин Гептахлор Пределы допустимого содержания, мг/кг 0,1 0,1 Не допускается Не допускается При установлении в результате испытаний несоответствия сырья требованиям НД проводят его повторную проверку. Для повторного анализа от невскрытых транспортных упаковок отбирают выборку и т.д. Результаты повторного анализа являются окончательными.
