МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ... Федеральное государственное автономное образовательное

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Федеральное государственное автономное образовательное
учреждение высшего профессионального образования
«СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»
Институт фундаментальной биологии и биотехнологии
Кафедра биофизики
ОТЧЕТ О НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ ПРАКТИКЕ
Определение специфичности аптамеров к структурам, составляющим
гематоэнцефалический барьер мозга мыши
(название темы практики)
Направление 011200.68 «Физика»
Магистерская программа 011200.68.01 «Биофизика» / 011200.68.07 Окружающая среда и человек: основы контроля и надзора
Магистрант БФ12-02М
Зубкова О. А
Руководитель
д. б. н., профессор Замай Т. Н.
Красноярск 2013
Определить специфичность аптамеров, полученных
в результате селекции in vivo, к структурам ГЭБ.
определить аффинность аптамеров к
клеткам головного мозга мыши методом
проточной цитометрии;
получить культуры дифференцированных
нейрональных мышиных клеток, а также
культуры нейросфер;
определить специфичность аптамеров к
клеточным
культурам
с
помощью
флуоресцентной микроскопии.
1. Определение аффинности аптамеров методом
проточной цитометрии
40
35
Аффинность аптамеров, %
30
25
мозж
мозжечок
20
жел
желудочек
кора
кора
15
10
5
0
контроль
3 раунд
5 раунд
7 раунд
8 раунд
Рисунок 1 - Анализ аффинности пулов аптамеров разных раундов селекции к клеткам желудочков,
мозжечка и коры головного мозга мышей с помощью проточной цитометрии (FC 500 (Beckman
Coulter, USA))
2. Получение культур дифференцированных нейрональных
клеток и нейросфер мыши
Б
А
В
А, Б – культуры дифференцированных нейрональных клеток;
В – культура нейросфер
Рисунок 2 – Клеточные культуры (Микроскоп инвертированный Olympus IX 51S8F-3)
3. Определение специфичности аптамеров к клеточным
культурам методом флуоресцентной микроскопии
Микроскопия в световом поле
Дифференцированные
клетки. Контроль
Дифференцированные
клетки + пул аптамеров
7 раунда
Флуоресцентная микроскопия
3. Определение специфичности аптамеров к клеточным
культурам методом флуоресцентной микроскопии
Микроскопия в световом поле
Нейросферы. Контроль
Нейросферы + пул
аптамеров 7 раунда
Флуоресцентная микроскопия
3. Определение специфичности аптамеров к клеточным
культурам методом флуоресцентной микроскопии
Микроскопия в световом поле
Форменные элементы
крови мыши + пул
аптамеров 7 раунда
Фибробласты мыши +
пул аптамеров 7
раунда
Флуоресцентная микроскопия
 определена аффинность пулов аптамеров к клеткам
коры, желудочков и мозжечка мыши методом
проточной цитометрии. Наибольшим сродством к
клеткам всех вышеперечисленных отделов мозга
мыши обладает пул аптамеров 7 раунда селекции;
 получены культуры дифференцированных клеток
нейрональной природы и культуры нейросфер
мыши;
 определена специфичность пула аптамеров 7
раунда
селекции
к
дифференцированным
нейрональным клеткам и нейросферам мыши
методом флуоресцентной микроскопии.