Рынок существующих технологий Разрабатываемые технологии NGS Владислав Трошин [email protected] 8-929-509-44-89 ООО «Троицкий Инженерный Центр» Россия, 142190 г. Москва, г. Троицк, Сиреневый бульвар, д.1. www.trdc.com Рынок существующих технологий Мировой рынок NGS систем 1000 916 900 800 700 Гонконг 600 500 Сингапур 400 300 200 100 233 189174 158 95 89 80 78 53 51 40 39 33 32 29 24 23 18 17 15 15 14 14 13 12 12 11 9 9 6 6 6 6 4 4 3 3 3 3 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 1 United States China Germany United Kingdom South Korea Spain Canada France Australia Italy Netherlands Taiwan Japan Brazil Sweden India Belgium Denmark Singapore Switzerland Russia Norway South Africa Hong Kong Austria Wallis and Futuna Saudi Arabia Hungary Finland Malaysia Mexico New Zealand Chile Poland Slovenia Qatar Iceland Portugal Israel UAE Turkey Ireland Greece Philippines Estonia Kenya Uruguay Luxembourg Bulgaria Romania Vietnam Czech Republic Thailand Argentina 0 Общее число устройств превышает 2500 шт. по данным из открытых источников и 10000 тысяч штук оценочное число. Так, в Китае оценочное число NGS систем 500-700 шт. Явно большее число устройств в Японии, Израиле, скандинавских странах. Стоимость секвенирования Изменение стоимости секвенирования 1 100000000 Стоимость секвенирования падает очень быстрыми темпами: http://www.genome.gov/sequencingcosts/ 2 10000000 1. 2. 3. 1000000 100000 3 4 10000 1000 100 10 1 0.1 Стоимость секвенирования генома, $ Стоимость секвенирования Mb последовательности ДНК, $ 01.2014 07.2013 01.2013 07.2012 01.2012 04.2011 10.2010 04.2010 10.2009 04.2009 10.2008 04.2008 10.2007 04.2007 10.2006 04.2006 10.2005 04.2005 10.2004 04.2004 10.2003 09.2002 09.2001 0.01 4. Завершение проекта «Геном человека»; Выход на рынок первых NGS систем; Появление и распространение настольных NGS систем, снижение стоимости обработки данных; ? Если цена секвенирования генома упадет ещё на 2 порядка, то данная технология станет доступной практически любому человеку. Кроме научных исследований активно начинается использование NGS систем в медицине, начинает развиваться персонализированная медицина. На рынке уже представлены компании с продуктами для персональной медицины. К примеру, компании Myriad http://www.myriad.com/products/ и Cardiodx http://www.cardiodx.com , предлагающие продукты для диагностики заболеваний, связанных с генетикой. Их генетические тесты уже прошли все стадии проверки, клинические тесты и доступные на рынке. Поколения NGS систем Поколения NGS систем Базовая технология Разрешение Точность чтения Длина чтения (max) Пропускная способность Первое поколение Второе поколение и поколение Третье поколение 2,5 Четвертое поколение Прямое чтение Циклический процесс Разделение по размерам ДНК с Секвенирования последовательности добавления нуклеотидов, метками на концах молекул, синтезом, разрушением ДНК на основе детектирования сигнала, полученных методом обрыва или любым другим какого-либо промывки. Так называемый цепи или разрушения ДНК способом. физического секвенирование синтезом. эффекта Усреднение данных с множества Усреднение данных с множества Данные с одной Данные с одной копий молекул ДНК копий молекул ДНК молекулы ДНК молекулы ДНК Высокая Высокая Управляемая Управляемая 800-1000 bp 200-500 bp 1000-5000 bp >10000 Низкая Высокая Высокая в пересчете на одно основание. Низкая на запуск чтения. Секвенирование РНК Только по копии в ДНК Время одного цикла Часы. Сложная. Требуется Подготовка образцов амплификация. Стоимость чтения Анализ данных Рутинный. Данные Только последовательность. Низкая в пересчете на одно основание. Высокая на запуск чтения. Только по копии в ДНК Дни. Сложная. Требуется многократная амплификация. Сложный из-за большого количества данных и необходимости сопоставлять короткие цепи. Только последовательность. Управляемая Управляемая Управляемая Управляемая Прямое Часы. Прямое Часы. Зависит от Зависит от технологии. технологии. Сложная из-за Слажная из-за необходимость необходимости использовать новые использовать новые алгоритмы. алгоритмы. Последовательносить и Последовательносит некоторые другие ь и некоторые данные. другие данные. За основу взято: Eric E. Schadt∗, Steve Turner and Andrew Kasarskis. A window into third-generation sequencing. Human Molecular Genetics, 2010, Vol. 19, Review Issue 2. Распределение по платформам Платформа Illumina HiSeq 2000 (2500) Illumina Genome Analyser 2x ABI SOLiD Roche 454 Ion Torrent (PGM) Ion Proton Illumina MiSeq Pacbio RS Total: Число Стоимость, Стоимость всех Компания устройств USD устройств, USD 826 690000 569940000 Illumina 511 250000 127750000 ABI SOLID 329 367 480000 500000 248 50000 60 183 44 2568 150000 125000 700000 Число устройств Полная стоимость, USD 1520 720565000 329 157920000 157920000 Roche 367 183500000 183500000 Ion 308 21400000 Pacific 12400000 44 30800000 Bioscience 9000000 Всего: 2568 1114185000 22875000 Основано на открытых данных. Учитывается только стоимость устройств. Стоимость 30800000 обработки данных и сервисы не учитываются 1114185000 (реагенты, чипы и т.д.) В основном секвенаторы второго и третьего поколений. Распространение секвенаторов первого поколения ограничивает высокая стоимость устройства, единичного анализа и время работы. Большинство устройств для секвенирования имеет стоимость выше 150000 USD, требует доступа к значительным вычислительным устройствам (суперкомпьютерам, облачным сервисам), имеют высокую цену обслуживания и запуска, таким образом приобрести и использовать оптические NGS секвенаторы могут только крупные научные центры. 3000 1200000 2500 1000000 2000 800000 1500 600000 1000 400000 500 200000 0 Thousands Распределение по платформам 0 Illumina HiSeq 2000 (2500) Illumina Genome Analyser 2x ABI SOLiD Roche 454 Ion Torrent (PGM) Machines by platform Ion Proton Illumina MiSeq Pacbio RS Total: Total value, USD Общий рынок NGS систем, расходных материалов, сервисного обслуживания и т.д. составил в 2011 году 1.6 миллиарда USD. В 2013 году уже 2-2,5 миллиарда USD. Прогнозируется рост до 5-6.6 миллиардов USD к 2016 году. Только устройств второго и третьего поколения продано за все время их выпуска на рынок на сумму более 1 миллиарда USD. Например, рыночная капитализация компании Illumina (NASDAQ: ILMN) более 18.6 млрд. USD, а капитализация Pacific Bioscience (NASDAQ: PACB) более 317 млн. USD. Общая ситуация Основным лидером в области высокопроизводительных систем являются компания Illumina (второе поколение секвенаторов). В области настольных систем для анализа относительно небольших последовательностей Life Technologies (Ion PGM – второе-третье поколение) по числу установленных секвенаторов и компания IIlumina (MiSeq) от выручки от проданных устройств. Но учитывая относительно недавний выход Ion Torrent на рынок при очень активных продажах наиболее вероятно их лидерство в этом сегменте рынка. Вывод в начале 2012 года нового продукта для анализа полных геномов (Ion Proton – более производительная версия Ion PGM) по цене в 150000 USD может сместить рынок в сторону их продуктов. Происходит вывод на рынок устройств 3-го поколения. Несколько компаний разрабатывает устройства 4-го поколения. Происходит разделение рынка на два направления – секвенаторы с высокой производительностью, высокой стоимостью для научных центров (более 150000 USD) и секвенаторы с низкой производительностью (настольные системы) для отдельных лабораторий (устройства Ion Torrent PGM, Illumina MiSeq и Roche 454 GS Junior – стоимостью до 150000 USD). Разделение линеек продукции основных производителей на два направления. Производительные системы для научных центров и настольные системы для лабораторий и малых компаний. Цены устройств делятся аналогично 300-900 тыс. USD за большие системы, менее 150 тыс. USD за настольные системы. Появляются «промежуточные системы» - Next Seq 500. Устойчивый рост отрасли. Потребность в устройствах для диагностики с низкими затратами на обслуживание. Цена самого устройства влияет пока незначительно. Основная масса проданных устройств относится к верхнему ценовому диапазону. Разрабатываемые технологии Нанопоры Для секвенирования с использованием пор предлагают различные технологии. В общем виде технологии основаны на том, что при прохождении ДНК через пору регистрируется какой-либо сигнал. Это может быть ионный ток, туннельный ток, изменение ёмкости, флюоресценция и т.д. Genia Technologies, Inc. http://www.geniachip.com/ Регистрируется изменение тока при прохождении отдельных нуклеотидов через нанопоры. OxfordNanoporeTechnologies IBM https://www.nanoporetech.com Регистрируется изменение тока при прохождении цепочки ДНК через сформированное методами литографии устройство. Регистрируется изменение тока при прохождении отдельных нуклеотидов через нанопоры или прохождения цепочки ДНК через пору. Предполагается использовать различные варианты пор (биологические, изготовленные методом литографии, из графена и т.д.) Нанопоры Nabsys http://nabsys.com/ Регистрируется изменение тока при прохождении цепочки ДНК с метками через поры. Noblegen Biosciences, Inc. http://www.noblegenbio.com/Technology.html Регистрируется изменение тока при прохождении цепочки ДНК с метками через поры. Другой метод предполагает флуоресценции меток при цепочек ДНК через поры. регистрацию прохождении Нанопоры Two Pore Guys http://twoporeguys.com/ Дополнительно к регистрирующей поре добавляются ещё два слоя для фиксации цепочки ДНК. HEWLETT PACKARD US 2006/0275911 A1 ДНК протаскивают между частицами серебра в фокусе лазерного излучения для получения SERS. Электронный микроскоп ZS Genetics http://www.zsgenetics.com/ Секвенирование с помощью электронного микроскопа. Цепочки ДНК допируют атомами тяжёлых металлов. Electron Optica http://www.electronoptica.com/ Секвенирование с помощью электронного микроскопа. Цепочки ДНК допируют атомами тяжёлых металлов. Чипы GenapSys http://genapsys.com/ Секвенирование на чипах. Предположительно в основе технологии лежит изменение силы тока при присоединении новых нуклеотидов. Существует ещё около 30 компаний с различными проектами на стадии R&D. Троицкий инженерный центр ООО «Троицкий инженерный центр» - частная коммерческая организация, созданная для проведения научноисследовательских и опытно-конструкторских работ, производство и продажи наукоёмкой продукции, оказания консалтинговых и маркетинговых услуг в области высоких технологий. Мы предлагаем услуги по инженерному, маркетинговому и технологическому сопровождению разработок в области оптической спектроскопии, электроники и связанных областях. Пример задачи: создание считывающего устройства для микрофлюидных чипов. Цена коммерческих устройств около 2 млн. руб. Отечественного пока не представлено. Спасибо за внимание! Владислав Трошин [email protected] 8-929-509-44-89 ООО «Троицкий Инженерный Центр» Россия, 142190 г. Москва, г. Троицк, Сиреневый бульвар, д.1. www.trdc.com