Слободенюк В.В. ООО «Адвенсум», г. Москва Актуальность • По данным одного из недавних исследований, в 2007 г. в 31 европейской стране септические инфекции, вызванные двумя наиболее распространенными видами антибиотикоустойчивых микроорганизмов –золотистым стафилококком (MRSA) и устойчивыми штаммами кишечной палочки – стали причиной 8215 случаев избыточной смертности (соответственно 5503 и 2702) • Общее число случаев таких септических инфекций составило свыше 260 000, что повлекло за собой свыше 370 000 дополнительных дней госпитализации и экономический ущерб в масштабе 62 млн. евро* • Согласно результатам исследований различных микробиологических и медицинских центров, и прогнозам ВОЗ, уже примерно через 10-20 лет практически все существующие микроорганизмы могут приобрести резистентность к большинству антибиотиков * De Kraker MEA, Davey PG, Grundmann H., 2011, 8(10) e1001104 8 Актуальность • В настоящее время в результате тяжелых резистентных внутрибольничных бактериальных инфекций только в странах Европейского союза ежегодно умирает около 25 тыс. человек • Всемирный день здоровья 2011 г. – "Устойчивость к антибиотикам: не принять меры сегодня – нечем будет лечить завтра!" • Стратегический план действий по проблеме устойчивости к антибиотикам ЕРБ ВОЗ (2011 г.) - совершенствовать контроль инфекции и методическое руководство практикой применения антибиотиков в лечебных учреждениях Всемирный день здоровья 2011 г. ЕРБ ВОЗ. Антибиотикорезистентность Причины возникновения Неумелое использование антибактериальных препаратов (несоблюдение курса лечения, доз) Назначение эмпирической антибактериальной терапии без адекватного выявления возбудителя Трудности своевременной и точной идентификации патогенных микроорганизмов Бактериологический метод исследования Способен установить вид возбудителя и его концентрацию, что имеет важнейшее значение для диагностики заболеваний вызываемых патогенной и условнопатогенной микрофлорой Способствует выбору наиболее эффективного препарата для антибактериальной терапии, своевременному проведению мероприятий для профилактики внутрибольничных инфекций Традиционный метод диагностики в бактериологии и недостатки длительность анализа низкий уровень чувствительности и специфичности высокая вероятность ошибок Современные технологии диагностики в бактериологии Современные технологии диагностики в бактериологии Bact/ALERT 3D ALFRED и HB&L VITEK2 VITEK MS АНАЛИЗАТОРЫ - автоматическая система для бактериологического анализа - полуавтоматическая система для бактериологического анализа мочи и биологических жидкостей человека Запатентованная методика Запатентованная методика HB&L и Alfred 60 позволяет отслеживать рост бактерий в бульонах, разработанных специально для мочи и биологических жидкостей человека, начиная с момента инокуляции. Анализ, обработка и конвертация интенсивности рассеянного света в кривые роста происходит в режиме реальном времени. Математическая обработка результатов позволяет получать не только качественную оценку наличия/отсутствия микроорганизмов в пробе, но и количественную оценку исходного содержания бактерий в КОЕ/мл. Влияние прочих компонентов мочи (неделящихся), таких как эритроциты, соли, лейкоциты, мертвые клетки и бактерии, на сигнал исключается благодаря фоновому считыванию в начальный момент времени. ТЕСТЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Бактериологический скрининг мочи 3 часа, порог 30000 КОЕ/мл Тест на остаточную антимикробную активность (CE Одновременно со скринингом Скрининг биологических жидкостей человека 6 часов, порог < 50 КОЕ/мл Скрининг специализированных проб 6 часов, порог < 50 КОЕ/мл (CE Mark) (CE Mark) (только для научных исследований) Автоматическое определение мутности по МакФарланду Тест на чувствительность к антибиотикам: Mark) 3 часа Мочи Биологических жидкостей человека (CE Mark) Положительных гемокультур Изолированных колоний (CE Mark) * НЕСТЕРИЛЬНЫЕ - Бронхоальвеолярный лаваж - Трахеальный аспират - Мокрота * СТЕРИЛЬНЫЕ - СМЖ - Асцитическая жидкость - Синовиальная жидкость - Перитонеальная жидкость - Плевральная жидкость АНАЛИЗАТОРЫ Автоматические системы для определения стерильности BacT/ALERT 3D Колориметрическое считывание - при росте микроорганизмов выделяется СО2 и сенсор на дне флакона меняет цвет с темно-зеленого на желтый. СО2 + Н2О = Н2СО3 Н СО = НСО - + Н+ 2 Более 20 лет в Службе Крови •> 400 публикаций о BacT/ALERT в сфере трансфузиологии •>37 стран во всем мире используют BacT/ALERT для контроля стерильности компонентов крови •Большинство экспертов мирового уровня считают BacT/ALERT “золотым стандартом” для тестирования компонентов крови •Флаконы со средами, разработанные специально для службы крови 3 3 АНАЛИЗАТОРЫ Vitek2/ Vitek2Compact – автоматизация процесса идентификации микроорганизмов • 64 лунки с биохимическими субстратами или антибиотиками • миниатюрный размер: 90х55х4 мм • уникальный штрих-код • герметичность ID-карты AST-карты Идентификац ия около 450 видов микроорганиз мов за 2-6 часов Чувствительн ость к 18-22 антибиотикам за 7-8 часов АНАЛИЗАТОРЫ Современный метод идентификации микроорганизмов MALDI-TOF – спектрометрия Power Ionising Vacuum Negative Быстрый способ идентификации микроорганизмов Большая база имеющихся спектров Простота работы Возможность внесения своих спектров в базу данных Новые подходы в диагностике Ускоренное определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Ускоренная детекция и определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Быстрая идентификация и ускоренное определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Сочетание оптимальных возможностей 3-х подходов (ускоренная детекция, быстрая идентификация и быстрое определение чувствительности к антибактериальным препаратам) и индивидуальный подход к лечению Новые подходы в диагностике Быстрая идентификация и ускоренное определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Пример рабочего цикла ПРОБА Масс-спектрометр Рассев 18-24 часа Полная автоматизация 36 часов 2 минуты Этиологический диагноз ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ AST-карты Чувствительность к 18-22 антибиотикам за 7 часов Результаты определения чувствительности Новые подходы в диагностике Ускоренная детекция и определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Пример рабочего цикла Ранее утро Отбор положительных мономикробных проб Окрашивание по Граму 1 час Автоматически Приготовление суспензии в 0,5 МакФарланд ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ С использование персонализированной панели антибиотиков в соответствии с: Полная автоматизация Загрузка вручную - результатами окрашивания по Граму, - информации об использованных лекарствах, - терапевтическими протоколами и рекомендациями. 3 часа Референс Чувствительная Устойчивая Результаты определения чувствительности Новые подходы в диагностике Ускоренное определение чувствительности к антибактериальным препаратам и индивидуальный подход к лечению Пример рабочего цикла Усовершенствование бактериологического анализа мочи ПРОБА Моча T0 = 0 T1= 3 Ч Инокуляция в красный флакон ТЕСТ НА ОАА ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ (порог 30 000 КОЕ/мл) Инокуляция в зеленый флакон КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ (порог 30 000 КОЕ/мл) Окрашивание по Граму, биохимические тесты ПЕДИАТРИЧЕСКИЕ ПРОБЫ (порог 1000 КОЕ/мл) T2= 6 Ч ТЕСТ НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ на пробах мутностью 0,5 МакФарланд Персонализированные панели антибиотиков, в зависимости от терапевтических показателей РЕЗУЛЬТАТЫ ТЕСТА НА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ Новые подходы в диагностике Сочетание оптимальных возможностей 3-х подходов (ускоренная детекция, быстрая идентификация и быстрое определение чувствительности к антибактериальным препаратам) и индивидуальный подход к лечению Пример рабочего цикла Масс-спектрометр Отбор положительных мономикробных проб Ранее утро Окрашивание по Граму Этиологический диагноз 1 час ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АНТИБИОТИКАМ С использование персонализированной панели антибиотиков в соответствии с: Полная автоматизация Загрузка вручную - результатами окрашивания по Граму, - информации об использованных лекарствах, - терапевтическими протоколами и рекомендациями. 3 часа Референс Чувствительная Устойчивая Результаты определения чувствительности Спасибо за внимание!