Roche / SYSMEX еминар пользователей C гематологических анализаторов Х-серии

Roche / SYSMEX
Cеминар пользователей
гематологических анализаторов Х-серии
3 апреля, Москва, Россия
Концепция X-класса анализаторов:
Новые клинические возможности
расширенной панели тестов
Tanja Tornow
Head of Product Management Haematology
Sysmex Europe
Концепция X-класса


XE-5000
Все анализаторы имеют одинаковые
функции, черты, технологию, реагенты и
систему флагов
Отличия заключаются только в числе
каналов, скорости и способе загрузки проб
XE-2100
XT-2000i & XT-1800i
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
XS-1000i & XS-800i
2
Линейка анализаторов Sysmex’ X-класса:
Гематология сегодня – это проточная
цитофлюориметрия
XE-5000:
 Case Manager
 76 параметров, 8 скатеррограмм, 2 гистограммы
(вкл. NRBC, расширенное меню для RET, IG, HPC,
IPF)
 Отдельный режим для анализа жидкостей тела
 Самая быстрая система в мире: 150 проб/час.
XE-2100:
 45 параметров, 7 скатерограмм, 2 гистограмм
(вкл. NRBC, расширенное меню RET, IG, HPC, IPF)
 Самая быстрая система в мире: 150 проб/час.
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
3
Линейка анализаторов Sysmex’ X-класса:
Гематология сегодня – это проточная
цитофлюориметрия
XT-2000i и XT-1800i:
 33 или 26 параметров (вкл. расширенное меню
RET, IG)
 5 или 2 скатеррограммы, 2 гистограммы
 Производительность 80 проб/час в любом
выбранном режиме в т.ч. RET
XS-1000i и XS-800i:
 24 параметра (+ IG#, IG%)
 1 скатеррограмма, 3 гистограммы
 60 проб/час.
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
4
Систематизация X- класса
XT-2000i
XS-1000i
XE-2100
+ дополнительное
программное обеспечение:
мастер-модули
XE-5000
SP-1000i
DM96
SIS
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
5
Высокие технологии –
проточная цитофлюориметрия



Уникальная технология: дифференцировка
лейкоцитов посредством определения
концентрации нуклеиновых кислот.
1999
3 различных вида информации для каждой клетки:
Содержание
ДНК/РНК
Сложность
внутренней
структуры
Размер
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
6
Дифференцировка лейкоцитов методом
проточной цитофлюориметрии:
Что особенного?


Мы получаем много информации о ядре и гранулярности
клетки, используя прямое, боковое светорассеивание
лазерного луча и импедансный метод.
Почему мы определяем содержание нуклеиновых кислот
в клетке?
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
7
Для корректной дифференцировки
требуется взгляд внутрь клетки..........
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
8
Почему нуклеиновые кислоты?
Повышенное содержание нуклеиновых кислот
в клетках крови указывает на их
метаболическую активность:
1.В ядре
Митотическая активность  увеличивается
содержание РНК/ДНК
2.В цитоплазме
Синтез белка  увеличивается
содержание РНК
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
9
Почему флюоресценция
в приборах X-класса?

Повышенное содержание нуклеиновых
кислот в клетке (ДНК или РНК)
эквивалентно повышенному
флюоресцентному сигналу.
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
10
Преимущества проточной
цитофлюориметрии

Количественное определение
активированных В-лимфоцитов (OTHER)
бысто информирует нас об иммунном
ответе в случае реактивных заболеваний
(например, вирусных инфекциях.)
Напр. Плазматические клетки
Напр. Лимфоплазмоциты
Напр. Иммуноциты
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
Клетки,
продуцирую
щие
антитела
11


Включая системные гематологические болезни
Параметр «Others» дает превосходную
корреляцию с результатами определения
активированных В-лейкоцитов, полученных путем
фенотипирования и микроскопии
Linssen J. et al., 2007: Cytometry Part B (Clinical Cytometry) 72B, 157-166
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
12
Преимущества счета параметра
“OTHER”


Детекция второй фазы иммунного ответа,
осуществляемого активированными Влимфоцитами
Оценивается число активированных Влимфоцитов, что особенно важно у
новорожденных:


предсказание результата переносимой
инфекции
выздоровление после инфекции или сепсиса
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
13
Преимущества флюоресценции

Размер клеток не имеет значения в relevant DIFF
канале.
Нет интерференции фрагментами клеток :
 Клетки, не содержащие нуклеиновые кислоты,
такие как зрелые эритроциты не окрашиваются
 НЕТ интерференции при наличии эритроцитов,
Фрагменты
устойчивых к лизису
клеток
 Неклеточные структуры, например пузырьки
воздуха не определяются


Фоновый счет всегда очень низкий
 Это особенно важно при анализе ликвора
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
14
Преимущества флюоресценции

Количественное определение незрелых
гранулоцитов (IG) как исследовательский
параметр быстро информирует о наличии
бактериальной или паразитарной
инфекции или воспалении
Промиелоцит
Миелоцит
Метамиелоцит
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
15
Расширение аналитических возможностей
с помощью дополнительных программ
для XE-2100 и XT-серии
IG Мастер:
Незрелые гранулоциты (IG# and IG%)
1.
Уменьшает потребность в мазках
2.
Точный мониторинг терапии
3.
Улучшенная детекция воспалительных
заболеваний
4.
Полезен в прогнозе сепсиса
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
16
IG Мастер – в чем отличие от стандартного
программного обеспечения?

НЕТ фиксированных границ в скатерограмме,
надежный и хорошо воспроизводимый счет IG# и
IG% с помощью гибкого алгоритма

Диагностический параметр, может передаваться в
ЛИС, мониторируется КК, распечатывается и
отображается в результатах пациента

Флаг “IG?” заменен на “IG present”

Диапазон нормальных значений может
определяться пользователем
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
17
Счет IG –
Что конкретно считается?
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
18


Корреляция счета IG на ХЕ-2100 при сравнении с
мануальной дифференцировкой промиелоцитов,
миелоцитов и метамиелоцитов 400 образцов крови
составила r = 0.78
Корреляция счета IG на XE-2100 при сравнении с
референсным методом проточной
цитофлюориметрии составила r = 0.96
Briggs C. et al., 2003: Lab Hematol 9, 117-124
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
19
Точный мониторинг терапии

Т.к. IG являются патологическими клетками, у
пациентов с неизвестным диагнозом необходимо с
помощью микроскопии мазка определить их
морфологию.

Как и при автоматической дифференцировке
лейкоцитов, НЕ нужно делать мазок для проверки
автоматического счета IG у пациентов с известным
диагнозом.

Точный мониторинг эффективности терапии у
пациентов с высоким содержанием IG, например
при химиотерапии у пациентов с AML
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
20
Синдром системного воспалительного
ответа (SIRS): c инфекцией или нет?
SIRS
Синдром системного
воспалительного ответа без
инфекции
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
21
IG при сепсисе – SIRS - гипертермия
Группа 1
Сепсис
n = 40
Группа 2
Тяжелый сепсис
n = 32
Группа 3
Экстракорпоральная циркуляция
n = 27
Группа 4
Гипертермия
n=8
Группа 5
Здоровые доноры
n = 38
Barbara Montag, Axel Nierhaus
Klinik und Poliklinik für Anästhesiologie
Direktor: Prof. Dr. med. Dr. h.c. J. Schulte am Esch
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
22
IG присутствуют у пациентов с
сепсисом
1,0
,8
,6
,4
IG_1 day 1
,2
Результат:
 Содержание IG не
увеличивается
при SIRS (ЭКК)
 При гипертермии
и SIRS значения
IG имеют
незначительное
увеличение
IG_2 day 2
IG_3 day 3
0,0
group
1
Сепсис
X-CLASS: extended parameters of clinical value
2
ECC
Tanja Tornow
23
Временной мониторинг IG у
септических пациентов
1.8
Пациенты без GM
(ликвор)
1.4
Результат:
1.0
 Уменьшение
содержания
IG является 0.6
хорошим
прогностическ
0.2
им признаком
IG у выживших
IG у умерших
1
3
5
7
9
11
13
15
17
19
Дни
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
24
Заключение

Подсчет IG является быстрым и точным
инструментом для мониторинга эффективности
различных видов терапии у пациентов с
инфекцией или лейкемией.

При SIRS присутствие IG может указывать на
инфекцию с начинающимся сепсисом

Чем раньше увеличиваются значения IG у
септических пациентов, тем меньше шансов на
выживание
Снижение значений IG является крайне важным
для выживания пациентов с сепсисом.

X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
25
Расширение аналитических возможностей
с помощью дополнительных программ
для XE-2100 и XT-2000i

Доступно только при наличии RET-канала

RET Мастер: новый параметр RET-He (Эквивалент
гемоглобина ретикулоцитов)



Для оценки гемоглобинизации ретикулоцитов
RET-He = «качество» эритропоэза
RET# и RET% = «количество» эритропоэза
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
26
Параметр RET-He
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
27
Уровни автоматической детекции
эритропоэза в RET- канале

Первый уровень: Зрелые эритроциты



Второй уровень: Ретикулоциты



Параметры: RBC / HCT / MCV / MCH / MCHC
Мониторинг: «история» концентрации гемоглобина
за последние 120 дней
Параметры: RET#, RET%, IRF
Мониторинг: активность эритропоэза путем оценки
абсолютного количества развивающихся
эритроцитов
Третий уровень: Информация о функции
эритроцитов


Параметр: RET-He
(гемоглобинизация ретикулоцитов в пг)
Мониторинг: активность эритропоэза путем оценки
содержания гемоглобина в развивающихся
эритроцитах
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
28
Информация о функции RBC в RETканале
Норма
Аномалия – анемия
RET-He
около 35 пг
RET-He
около 22 пг
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
29
Успешное лечение
функционального железодефицита
RET-He
RET-He
RET-He
21.9 пг
29.6 пг
31.3 пг
RET-He – единственный параметр, который позволяет
убедиться в эффективности терапии железодефицита
уже через 3 дня, т.к. отражает появление ретикулоцитов с
нормальным
содержанием гемоглобина.
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
30
Функциональный железодефицит

Ретикулоцитарные параметры помогают
определить железодефицит, когда
использование классических
биохимических тестов не приемлимо
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
31
Распределение Fe в организме

Всего:
4.2 г (мужчины)
3.5 г (жещины)
- только связанное с белком

Функциональное железо:
65 % Гем
5 % Миоглобин
0.2 % гем-содержащие ферменты
10 % негемовое железо
80 % от общего количества

Запасы Fe:
Ферритин, гемосидерин
20 % от общего количества
(у мужчин)

Транспортное Fe:
Трансферрин (=“Fe в дороге”)
0.1 % от общего количества
Andrews N: New Engl J Med 1998; 341: 1986; modified
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
32
5 причин железодефицита

Потребление в низком количестве:
мальнутриция (вегетарианцы, пожилые люди)

Мальнутриция:
Хронические гастриты, частичная резекция желудка,
синдром Крона, кальций, танины (в чае или кофе)

Увеличенная потребность:
беременные, новорожденные, дети

Потеря крови:
Менструации, хирургические вмешательства, роды, язва,
etc...

Функциональный железодефицит:
Потребность эритропоэза в железе превышает
способность организма освобождать Fe из запасов.
(Cavill I: Blood 1993; 82: 1377)
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
33
Биохимические тесты


Железо
Ферритин


Трансферрин


Нельзя использовать при воспалении
Насыщение трансферрина


Является очень специфическим тестом при низких
значениях. Повышенные значения не специфичны
для оценки запасов железа, т.к. могут наблюдаться в
острой фазе воспаления
Не достаточно специфичен при воспалении
Растворимый рецептор трансферрина (sTfR)
Высокоспецифичен и инертен при воспалении, но
не является чувствительным параметром


sTfR – log ферритин индекс

Индекс отражает статус железа лучше, чем все
другие параметры
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
34
Спавнение параметров при
функциональном железодефиците



Ферритин
sTfR
sTfR / log ферритин
СРБ  5 mg/L
СРБ > 5 mg/L
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
35
Thomas C+L: Clin Chem 2002; 48: 1066
Использование RET-параметров в
диагностической диаграмме “ThomasPlot”
достаточно
Доступное Fe
мало
много
запасы Fe
X-CLASS: extended parameters of clinical value
мало
Thomas C+L: Clin Chem 2002; 48: 1066
Tanja Tornow
36
Заключение





Все RBC-параметры, включая MCV, MCH,
гипохромные RBC дают нам историческую
информацию об анемии хронических заболеваний
RET%: информация о количестве вновь
образованных RBC
RET-He: информация о качестве вновь
образованных RBC
RET-He: первый параметр, который указывает на
выздоровление при железодефиците
RET-He = 28 пг может рассматриваться как
критерий решения (cut-off) при лечении анемии
хронических заболеваний
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
37
Заключение

С параметром RET-He возможен прогноз
развития анемии:




Улучшение состояния и выздоровление
Улучшение состояния без полного
выздоровления
Развитие анемии у здоровых людей
Ухудшение состояния у пациентов,
страдающих анемией
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
38
Общее заключение:
клиническое использование
расширенного меню параметров

Расширенное меню дифференцировки
лейкоцитов:
 Ранняя детекция инфекции у пациентов группы
риска – HIV, паразитарные инфекции,
мальнутриция и т.д.…
 Улучшенная детекция воспаления (IG)
 Простой и удобный мониторинг терапии – напр.
Химиотерапии или воспаления (IG)
 Прогноз сепсиса (IG, OTHER)

Расширенное меню счета эритроцитов:
 Анемия: одно из наиболее недооценных
заболеваний, широко распространенных по
всему миру.
 Мониторинг анемии хронических заболеваний
(RET-He, Delta-He)
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
39
www.sysmex-europe.com
Спасибо!
X-CLASS: extended parameters of clinical value
Tanja Tornow
40