Элементы организованного осадка мочи Кафедра клинической лабораторной диагностики РМАПО Правила сбора и исследования мочи. • В лабораторию доставляется утренняя порция мочи, собранная в чистую, сухую посуду после тщательного туалета. • В лаборатории производится описание физических свойств, проводится химическое исследование с применением «сухой химии» (качественный - полуколичественный анализ) с последующим уточнением сомнительных и патологических результатов унифицированными методами. • Для проведения микроскопического исследования моча тщательно размешивается, наливается в коническую пробирку и центрифугируется при 1500 об/мин в течение 10-15 минут. • Надосадочная моча сливается, осадок тщательно перемешивается пипеткой. Капля осадка наносится на предметное стекло, покрывается покровным и микроскопируется сначала на малом увеличении (ок.10х, об. 8х-10х), а затем на большом (ок.10х, об.40х) На малом увеличении • Производится обзорный просмотр препарата с приблизительной оценкой характера и количества обнаруженных элементов. На большом увеличении • Производится определение морфологии обнаруженных элементов осадка и количество их в поле зрения Элементы осадка мочи делят на организованные и неорганизованные (кристаллы) Организованный осадок мочи включает в себя • Лейкоциты (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты/макрофаги) • Эритроциты • Эпителиальные клетки (плоского эпителия многослойного ороговевающего и неороговевающего, переходного, почечного) • Цилиндры белкового происхождения (гиалиновые, зернистые, восковидные) • Цилиндры клеточного происхождения (эпителиальные, лейкоцитарные, эритроцитарные) • Цилиндры, состоящие из продуктов распада клеток почечного эпителия (грубозернистые и жировые, гиалиново-капельные) и продуктов распада эритроцитов (пигментных) • Слизь • Клетки злокачественных новообразований мочевыводящих путей, почек и прорастающих в мочевыводящие пути злокачественных новообразований окружающих органов. Многослойный плоский ороговевающий эпителий • Выстилающему наружные половые органы. • Представляет собой бесцветные, полигональной формы, с мелкими центрально расположенными ядрами разрозненно лежащие клетки и пласты клеток, часто с наложением бактерий. • Диагностического значения не имеет. Плоский эпителий Ув.400х Плоский эпителий Ув.400х Многослойный плоский неороговевающий эпителий • Выстилает нижнюю треть уретры и влагалище. • Представляет собой бесцветные, округлой формы клетки с центрально расположенным ядром на фоне гомогенной бесструктурной цитоплазмы. Плоский эпителий Ув.400х Переходный эпителий • Многослойный эпителий, выстилающий лоханки, мочеточники, мочевой пузырь проксимальный отдел уретры. • Характеризуется полиморфизмом величины и формы, окраской цитоплазмы мочевыми пигментами, грубо зернистой белковой, жировой или вакуольной дистрофией. Для клеток верхних слоев характерна многоядерность (2-4 ядра). • В норме не обнаруживается. Переходный эпителий, ув.400х Переходный эпителий, Ув.400х Почечный эпителий. • Относится к однослойному эпителию и подразделяется на цилиндрический, выстилающий проксимальный и дистальный отделы нефрона и восходящее колено петли Генле и кубический, выстилающий нисходящее колено петли Генле и собирательные трубки. • В нативном препарате характеризуется неправильной округлой формой, наличием зернистой белковой или жировой дистрофии цитоплазмы, окрашен более или менее интенсивно мочевыми пигментами. • В состоянии белковой дистрофии имеет размер немногим больше лейкоцита. • При жировой дистрофии размер клеток увеличивается в 2-4 раза. • В норме не обнаруживается. Практически неизмененный почечный эпителий, ув.400х Почечный эпителий, ув. 400х, ув.1000х Группа клеток почечного эпителия в состоянии жировой дистрофии Ув.400х Почечный эпителий в состоянии жировой дистрофии. Ув.400х и 1000х Эритроциты. • В норме при исследовании утренней порции мочи не обнаруживаются. При исследовании по Нечипоренко до 1000 в 1 мл мочи. • Эритроцитурия может иметь постренальное и ренальное происхождение. • При постренальной эритроцитурии (кровотечении из мочевыводящих путей) - эритроциты неизмененные, гемоглобинизированные. Изменяют свою морфологию и лишаются гемоглобина in vitro под воздействием физико-химических свойств мочи. • При острой ренальной гематурии (ОГН) – выделяются эритроциты неизмененные, при хронической ренальной гематурии –эритроциты изменяют свою морфологию in vivo, в результате прохождения через пораженный почечный фильтр. Гемоглобинизированные эритроциты при постренальной гематурии, ув.400х Измененные почечные эритроциты на гиалиновом цилиндре, ув.400х Измененные почечные эритроциты, ув.1000х Аморфные кристаллы гемосидерина в нативном препарате. Ув.400х Положительная реакция на берлинскую лазурь. Кристалл гематоидина, ув. 400х и 1000х Лейкоциты. • В норме в утренней порции мочи составляют 0-1-3 в п/зр. При исследовании по Нечипоренко – до 2000 в 1 мл мочи. • Представлены обычно нейтрофилами, при аллергическом компоненте появляются эозинофилы, при хроническом гломерулонефрите, туберкулезе – лимфоцитами. • Морфология нейтрофилов в нативном препарате зависит от физико-химических свойств мочи. • Дифференциация лейкоцитов (лейкоцитарная формула) проводится в окрашенном азур-эозином препарате. Нейтрофилы, ув. 250х Нейтрофилы в щелочной моче, ув. 400х Нейтрофилы и эозинофилы. Ув. 400х Эозинофил, Ув.1000х Цилиндры. • В норме в осадке мочи не обнаруживаются. При исследовании по Нечипоренко – до 20 гиалиновых цилиндров в 1 мл мочи (1 на 5 камер Горяева). • Цилиндры образуются в дистальном отделе нефрона из: - белка профильтровавшегося через почечный фильтр и коагулировавшего в канальцах и собирательных трубках - клеток почечного эпителия и продуктов их распада - эритроцитов и гемоглобина - лейкоцитов и лейкоцитарного детрита Белковые цилиндры • Преимущественно гиалиновые, могут быть с наложением эритроцитов, лейкоцитов, почечного эпителия, кристаллов, аморфных зернистых масс (продуктов распада клеток), при этом белковая основа цилиндра всегда видна. • Если перечисленные клеточные элементы, зернистые массы или кристаллы плотно покрывают белковую основу, такие цилиндры относят к клеточным (эпителиальным, лейкоцитарным, эритроцитарным), зернистым, пигментным или кристаллическим (ложным). Гиалиновый цилиндр с наложением зернистых масс Ув. 400х Гиалиновый цилиндр с наложением почечного эпителия, ув.1000х Цилиндрурия. Ув. 200х Широкий восковидный цилиндр Ув.400х Зернистый цилиндр, ув.400х Застойные зернистые цилиндры Ув. 400х Пласт почечного эпителия в виде цилиндра. Ув.400х Почечный эпителий. Окраска азур-эозином, ув. 1000х Скопление эпителиальных цилиндров, ув.400х Почечный эпителий на поверхности гиалинового цилиндра. Окраска азурэозином, ув.1000х Короткий жировой цилиндр Ув.400х Короткий жировой цилиндр и клетка почечного эпителия в состоянии жировой дистрофии. Ув.400х Эритроцитарный цилиндр, ув.400х Эритроцитарный цилиндр Ув. 1000х Короткие цилиндры состоящие из лейкоцитарного детрита), ув.400х МЕТОД А.З.НЕЧИПОРЕНКО Унифицирован Пр. № 1175 МЗ СССР (количество лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров в 1мл мочи) 1. центрифугируют 10 мл мочи 2. пипеткой отсасывают надосадочную мочу, оставляют 1 мл мочи с осадком и аккуратно перемешивают пипеткой. 3. каплей осадка заполняют камеру Горяева 4. считают во всей камере ( в 1мкл) количество лейкоцитов, эритроцитов и цилиндров. Расчет проводят по формуле: N x 1000 V , где x – количество клеточных в 1 мкл мочи 1000 – количество мкл в 1 мл мочи V - количество мочи, взятое для центрифугирования НОРМА: эритроциты – до 1000/мл мочи лейкоциты - до 2000/ мл мочи цилиндры - до 20/мл мочи • При использовании слайд-планшетов для подсчет форменных элементов в моче по Нечипоренко необходимо использовать следующую формулу: N x 1000 V где, x – количество форменных элементов в 9 лунках, общий объем которых = 0,1 мкл, 1000 – количество мкл в 1 мл мочи 10 – коэффициент пересчета на объем камеры Горяева V – количество мочи, взятое для центрифугирования Цилиндроиды. • Тяжи слизи и муцина, бесцветные, лентовидной формы, напоминающие гиалиновые цилиндры. • Могут быть большой длины (на несколько полей зрения), большие колебания ширины, продольная исчерченность по ходу цилиндроида, один из концов может быть заостренным и извитым • Не растворяются в щелочи Цилиндроид на фоне слизи Ув.400х Цилиндроид на фоне слизи Ув.400х Суправитальная окраска осадка мочи (по Штейнгеймеру). • Для облегчения дифференциации элементов организованного осадка мочи используется суправитальные красители. • Суправитальный краситель RESTAIN Urin, состоящий из 2 реактивов, хорошо прокрашивает ядра и цитоплазму лейкоцитов и эпителия – ядра окрашены в синий цвет, цитоплазма – в разные оттенки розового. Цилиндры гиалиновые окрашиваются в голубой цвет, восковидные – в разные оттенки красного цвета. У зернистых цилиндров видна зернистая структура, окрашиваются в темно синий цвет. Эритроциты окрашиваются в розовый цвет, кристаллы оксалатов (овоидные) – в голубой. Двуядерная клетка переходного эпителия. Ув.400х Клетки плоского эпителия. Ув. 400х Нейтрофилы. ув.400х Клетки почечного эпителия. Ув.400х Нейтрофилы. ув.1000х Клетки почечного эпителия. Ув. 1000х Короткий гиалиновый цилиндр. Ув.1000х Длинный гиалиновый цилиндр. Ув.400х Терминальный восковидный цилиндр и зернистые цилиндры. Ув.400х Восковидный цилиндр, гиалиновые цилиндры и слизь. Ув.400х Фрагмент зернистого цилиндра, клетка плоского эпителия, восковидный цилиндр с наложением дисморфных эритроцитов. Ув.400х. Мицелий и споры гриба. Ув. 400х Кристаллы оксалатов, лежащие на слизи. Ув.400х БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ!