Лабораторная диагностика заболеваний бронхо

Нагноительные заболевания
легких.
Кафедра факультетской
терапии
Дыхательная система.
Верхнии дыхательные пути
 Носовая полость
 Носоглотка
 Гортань
 Трахея
Наружный отдел носовых ходов выстлан
многослойным плоским ороговевающим
эпителием, который сменяется в преддверии
на многослойный плоский неороговевающий, а
затем в дыхательной области носа –
многорядным цилиндрическим реснитчатым
эпителием с бокаловидными клетками
(слизистая полости носа).
Ротовая полость и глотка ( верхний отдел
гортани, надгортанник) покрыт многослойным
плоским неороговевающим эпителием.
 Собственно гортань, трахея и бронхи выстланы многорядным
цилиндрическим реснитчатым эпителием.
 В нем различают 4 типа клеток: мерцательные, вставочные,
слизистые и базально-зернистые (эндокринные) клетки.
 Собственная пластинка слизистой оболочки образует плотную
базальную мембрану под которой располагаются эластические
волокна, между которым можно обнаружить лимфоциты и
отдельные лимфатические фолликулы
Особенности строения стенок дыхательной
системы
Верхние
дыхательные пути :
• Многорядный
мерцательный
эпителий
Дыхательная система.
Нижние дыхательные пути
 Бронхи (главные, долевые,
сегментарные)
 Бронхиолы (претерминальные,
терминальные, респираторные)
 альвеолы
Бронхиолы (их диметр менее 1 мм) выстланы
однорядным цилиндрическим мерцательным
эпителием, практически не содержащем
слизистых клеток. Они располагаются внутри
ткани легкого и вокруг них формируются
ДОЛЬКИ легкого, отделенные друг от друга
тонкими фиброзными перегородками (септами).
По мере дальнейшего ветвления формируются
респираторные бронхиолы, преходящие в
альвеолярные ходы и оканчивающиеся
альвеолярными мешочками и альвеолами – что
представляет собой структурную единицу
легкого –АЦИНУС.
Особенности строения стенок
дыхательной системы
Нижние дыхательные пути :
мелкие бронхи и
бронхиолы
 Однорядный
мерцательный эпителий
 Бокаловидные клетки
 Нейроэндокринные клетки
АПУД системы
Мерцательный цилиндрический
эпителий
Бокаловидные клетки
Собственная пластинка слизистой
Содержит большое количество лимфоидных фолликулов
В них вырабатываются иммуноглобулины IgA, IgM, IgG, IgE
при соединении с секреторным компанентом (гликопротеин вырабатывают эпителиальные клетки) образуются
секреторные иммуноглобулины IgA, IgM, IgG, IgE слизистой
дыхательной системы
Иммунные комплексы
 Они формируются в зоне избытка АГ, откладываются в базальной
мембране легочных сосудов
 Патогенность иммунного комплекса определяет его размер -
наиболее опасны ИК средних размеров
11-19S
 Образование иммунных комплексов - нормальный физиологический
процесс, направленный на удаление из организма любых
чужеродных АГ: бактериальных, вирусных, опухолевых,
лекарственны
 Иммунные комплексы элиминируются альвеолярными макрофагами
В легких с ними связывают развитие диссеминированных процессов :
 экзогенный аллергический альвеолит
 фиброзирующий альвеолит,
 поражение легких при коллагенозе, особенно СКВ, легочном
гранулематозе
 При микоплазменной, вирусной, хламидийной пневмонии
вырабатываются секреторные иммуноглобулины, которые, в
основном, концентрируются в базальной мембране, входя в состав
иммунных комплексов
Строение альвеолы
 Респираторная
бронхиола
 15 – 20 альвеол
Альвеолы – это ячейки (небольшие свободные пространства), отделенные
друг от друга межальвеолярными стенками.
Межальвеолярные стенки – это переплетение капилляров, эластические
коллагеновые и ретикулярные волокна , препятствующие перерастяжению
стенки, базальная мембрана на которой располагаются эпителиальные
клетки ткани легкого – пневмоциты 1 и 2 типов.
Альвеолярный эпителий
 Пневмоциты I типа -
плоские клетки,
многочисленны,
обеспечивают диффузию
газов через свою
цитоплазму
 При цитологическом
исследовании пневмоциты,
как правило, не видны
Альвеолярный эпителий
Пневмоциты I I типа секреторные клетки,
продуцирующие
дипальмитоилфосфатидилхолин –
легочный сурфактант.
Малочисленны
При цитологическом исследовании
пневмоциты, как правило, не видны
Легочный сурфактант
 Является сложной смесью поверхностно активных
фосфолипидов, сцепленных с белком
 В виде тонкой пленки распределяется по всей поверхности
альвеол
 Вызывает уменьшение межмолекулярных сил, действующих
между молекулами воды и тканевой жидкости
 Обеспечивает раздувание альвеолы
Клиническое значение сурфактанта
 Наличие достаточного количества сурфактанта обеспечивает для
новорожденного возможность первого вдоха - воздух впервые
попадает в альвеолы, которые во внутриутробном периоде были
заполнены жидкостью
 Альвеолярный протеиноз -сурфактант заполняет все альвеолы.
В мокроте видим «глыбы» серого цвета, которые дают
положительную ШИК-реакцию розового цвета (гликоген).
Лечение : БАЛ, промывания.
Нельзя назначать антибактериальные препараты и кортикостероиды
Альвеолярные макрофаги
 На поверхности
межальвеолярных стенок и в
просвете альвеол
обнаруживаются альвеолярные
макрофаги, которые мигрируют
туда из кровеносного русла
через эпителиальную выстилку
(моноциты периферической
крови специализируются в
тканях в макрофаги).
 Имеют костно-мозговое
происхождение
 Срок жизни - 5-6 суток
Альвеолярные макрофаги бывают
двух видов
1. Биосинтезирующий
макрофаг
2. Фагоцитирующий
макрофаг
Альвеолярные макрофаги
 Антигенраспознающая функция с помощью имеющихся в составе
клеточной мембраны HLA-D и DR
детерминант обеспечивают
распознавание всех АГ, попадающих
в легкие, в качестве“своего” или
“чужого”
 Антигенпрезентирующая функция
- после захвата АГ и образования
фагосомы, переваривания АГ,
альвеолярные макрофаги
презентируют АГ на своей
поверхности вместе с HLA-D и DRдетерминантами
Альвеолярные макрофаги
 Регуляторная функция- АМ




вырабатывают цитонокины, с их
помощью они регулируют действия
нейтрофилов, эозинофилов и
тучных клеток
Регулируют рост и миграцию
фибробластов
Секреторная функция секретируют фермент коллагеназу расщепляет коллаген
Секретируют фермент эластазу расщепляет эластин
Секретируют фермент
фибронектин - вызывает
разрушение легочной ткани
В норме процессы синтеза и
расщепления в соединительной
ткани сбалансированы
При патологии они могут
сдвигаться в ту или иную
сторону
Альвеолярные макрофаги
 Фагоцитоз- АМ заглатывают

продукты распада нейтрофилов, внутри
фагосомы на них действуют
лизосомальные ферменты кислая
фосфотаза, эстераза, пероксидаза и др.
Альвеолярные макрофаги
в качестве фагоцитов действуют на:
 вирусы (герпес, цитомегаловирус)
 простейшие(трихомонады, амебы)
 внутриклеточные бактерии (хламидии,
микоплазмы, микобактерии)
Биосинтезирующие альвеолярные
макрофаги
Секреция - функция АМ
При туберкулезе
макрофаги накапливают в
цитоплазме различные
ферменты (монокины), т.О.
Из них образуются
эпителиоидные клетки,
которые секретируют эти
ферменты
При туберкулезе из
макрофагов образуются
гигантские клетки
Пирогова-Ланганса,
которые входят в состав
туберкулезного бугорка
Бронхоальвеолярный лаваж
 Цитологические исследования при
бронхо-легочной патологии включают
исследование бронхоальвеолярного
лаважа (БАЛ)
 БАЛ получают при введении через
бронхоскоп подогретый до 37°
физраствор
Бронхоальвеолярный лаваж.
Методы исследования
 Исследование нативного препарата.
 Подсчет цитограммы БАЛ
Каплю БАЛ помещают в камеру Горяева или
Фукс-Розенталя, покрывают покровным стеклом,
исследуют в затемненном поле при увеличении
х200 и/или х400 для подсчета числа клеток
(подсчет цитограммы БАЛ)
 Цитологическое исследование
окрашенных препаратов
Окраска по Романовскому-Гимза или по
Паппенгейму х100 и х1000.
Бронхоальвеолярный лаваж
При подозрении на туберкулез делают подсчет макрофагальной
формулы - процентное соотношение разных типов макрофагов макрофаги активные (мелкие, с большим содержанием кислой
фосфатазы) : макрофаги неактивные
 макрофаги
активные
(мелкие, с
большим
содержанием
кислой
фосфатазы)
Бронхоальвеолярный лаваж
Макрофаги
неактивны
е
Бронхоальвеолярный лаваж
В составе лаважной жидкости у здорового
человека
 Лимфоциты составляют 11%, из них
В-лимфоциты - 17%
Т-лимфоциты - 47%
NK-клетки - 34%
 Среди Т-лимфоцитов соотношение Т-хелперов и
цитотоксических Т-лимфоцитов в норме
составляет 2 : 1
 При различных патологических состояниях в
легких значительно изменяется как общее число
лимфоцитов, так и их состав по субпопуляциям
Бронхоальвеолярный лаваж
 У курильщиков число
лимфоцитов в лаважной
жидкости значительно
снижается и составляет около
6%
 На фоне снижения количества
лимфоцитов у курильщиков
развиваются хронические
персистирующие вирусные
(герпес, цитомегаловирусная
инфекция) и бактериальные
инфекции (хламидии,
микоплазмы)
 В макрофагах курильщиков
наблюдаются «серо-синие»
тельца
Герпетическая инфекция
 При
цитологическо
м исследовании
БАЛ и мокроты
можно
обнаружить
гигантские
многоядерные
клетки
Цитомегаловирусная инфекция
 При
цитологическо
м исследовании
БАЛ и мокроты
при ЦМВ
обнаруживают
гигантские
клетки типа
«птичий глаз»
Хламидийная инфекция
 При
цитологическом
исследовании БАЛ и
мокроты можно
обнаружить
характерные
цитоплазматически
е включения
(тельца Провачека Хальберштедтера)
Грибковая инфекция
 В БАЛ и мокроте
видны элементы
гриба
(блатоспоры и
псевдомицелий).
При обнаружении
почкующихся
форм можно
думать об
активности
процесса
Экзогенно-аллергический альвеолит
 Развивается как реакция на любой
алерген
 Чаще - на споры аспергилиуса
 Может переходить в бронхиальную астму
 При исследовании БАЛ :
светлые макрофаги, лимфоциты,
эозинофилы, тучные клетки
Идиопатический фиброзирующий
альвеолит
Этиология - возбудитель неизвестен
Патогенез -иммунокомплексная болезнь
Бронхоальвеолярный
лаваж :
светлые макрофаги,
много нейтрофилов
(фагоцитируют
иммунные
комплексы)
Выделение мокроты всегда является
патологическим признаком
 Мокрота состоит из секрета слизистой
оболочки дыхательных путей с большей
или меньшей примесью клеточных
элементов
 К этим выделениям может быть при
мешан секрет полости рта, носа ли глотки
 Мокрота также может содержать элементы
экссудата из плевральной полости,
полости перикарда, пищевода
Сбор мокроты и ее хранение
 Мокроту собирают в чистую сухую
стеклянную или пластиковую посуду
 Условия сбора мокроты зависят от целей
ее исследования
 До момента исследования мокроту
необходимо хранить в холодильнике
Посев мокроты на флору и чувствительность к
антибиотикам (Приказ МЗ СССР № 535 от 22.04.1985 г. )
Правила взятия биоматериала
 До еды
 после полоскания зева и полости рта
теплой водой или раствором соды (1
чайная ложка на стакан воды)
 Отхаркиваемую мокроту (лучше
утреннюю порцию) собирают в
стерильный контейнер с крышкой
 Если мокрота отделяется плохо,
накануне пациенту назначают
отхаркивающие средства или ингаляцию
Правила сбора мокроты для
клинического исследования
 До еды
 после полоскания зева и полости рта
теплой водой или раствором соды (1
чайная ложка на стакан воды)
 Отхаркиваемую мокроту (лучше утреннюю
порцию) собирают в стерильный
контейнер с крышкой
 Если мокрота отделяется плохо, накануне
пациенту назначают отхаркивающие
средства или ингаляцию
Цитологическое исследование
мокроты
Преимущества
• Дешевый метод
• Легко повторяемый
Условия сбора мокроты
•«глубокий» кашель
• до еды, до чистки зубов
• три дня подряд
• холодильник
В правильно собранной мокроте
должны быть
альвеолярные макрофаги
Недостатки
• Выявляемость рака < 70%
Неправильно собранная мокрота
• содержит только клетки верхних
дыхательных путей и слюну
Исследование мокроты в КДЛ состоит
из 3-х этапов
 Макроскопическое исследование
 Микроскопическое исследование
 Бактериоскопия
Макроскопическое исследование
Включает оценку
 Количества мокроты - зависит от заболевания и стадии
заболевания, возраста больного- имеет значение только
суточное количество мокроты
 Цвет и прозрачность ( зависят от характера – слизистая –
прозрачна, слизисто-гнойная – мутная, желтоватая или
зеленоватая, красные оттенки – примесь крови, черный/серый –
примесь угольной пыли)
 Характера мокроты - слизистая, гнойно-слизистая, слизистогнойная, гнойная, кровянистая, серозная
 Запах (свежевыделенная слизистая мокрота запаха не имеет, при
распаде тканей – приобретает гнилостный запах)
 Слоистость (обнаруживается при выделении большого количества
мокроты, содержащей компоненты с разным удельным весом)
Характер мокроты
 Слизистая мокрота – выделяется при раздражении слизистой
поверхности дыхательных путей – почти бесцветна, вязкая,
содержит мало клеточных компонентов.
 Слизисто-гнойная и гнойно-слизистая – при большинстве
заболеваний бронхов и легочной паренхимы в результате
присоединения бактериальной инфекции – мутная, вязкая, часто
неоднородная (в слизи гнойные комочки или слоистость)
 Гнойная – выделяется при вскрытии в полость бронха эмпиемы,
абсцесса
 Кровянистая
- кровавая – кровотечение легочное или кровотечение из смежных
органов с прорывом в легкое
- слизисто-кровянистая – чаще при натужном затяжном кашле при
заболеваниях верхних дыхательных путей
- слизисто-гнойно-кровянистая – при туберкулезе, новообразованиях,
хронических воспалительных заболеваниях легких (ХОБЛ), БЭБ
- серозная – пенистая, жидкая, клейкая, но не вязкая.
Полупрозрачная, бесцветная, желтоватая или красноватая от
примеси крови. Характерна для отека легкого.
Правила приготовления нативных
препаратов
 Из транспортного контейнера мокроту
помещают в чашку Петри и
просматривают на белом и черном
фоне для определения характера
мокроты
 Для исследования отбирают кусочки
слизи, гноя и все, что по цвету и
консистенции отличается от общего
фона
 При неправильном приготовлении
препарата могут в него попадать
кусочки пищи
Микроскопия мокроты
 Нативный препарат.
Исследуют не менее 2-х препаратов.
Увеличение х100 и х400
 Окрашенный препарат. Окраска
Романовского-Гимза или Паппенгейма,
увеличение х1000
Исследуют не менее 2-х препаратов.
Клеточные элементы
Нейтрофильные
лейкоциты
 Сохранившиеся
(в слизи)
 В состоянии распада
- детрит
 Встречаются при
бактериальных
инфекциях
Клеточные элементы
Эозинофильные
лейкоциты
 Сохранившиеся
(в слизи)
 В состоянии
распада - детрит
 Встречаются
при
аллергических
состояниях и
гельминтозах
Личинки гельминтов
 Аскариды
 Кишечной
угрицы
 Анкилостомид
 Шистосом
Филяриевидная личинки
стронгилиды
Неклеточные элементы
Яйца
гельминтов
 легочной
двуустки
БЛАГОДАРЮ
ЗА ВНИМАНИЕ!