Применение пептидных биорегуляторовдля

Применение
пептидных биорегуляторов
для профилактики и коррекции
нарушений функций организма
Профессор, д.м.н. Г.А. Рыжак
Санкт-Петербургский институт биорегуляции
и геронтологии СЗО РАМН
Санкт-Петербургский институт
биорегуляции и геронтологии
СЗО РАМН
Основан в 1992 году
на базе лаборатории биорегуляторов
Военно-медицинской академии
Основные направления деятельности Института:
 Изучение свойств и механизмов действия пептидных
биорегуляторов
 Изучение влияния пептидных биорегуляторов на механизмы
старения
 Разработка и внедрение в медицинскую практику новых
пептидных биорегуляторов для профилактики
преждевременного старения и развития возрастной патологии
Биорегулирующая терапия
основана на патогенетическом применении
пептидных биорегуляторов при различных
заболеваниях, патологических состояниях и
старении организма
ПЕПТИДНЫЕ
БИОРЕГУЛЯТОРЫ
ЦИТОГЕНЫ
(лекарства)
синтетические
пептиды
ЦИТОМЕДИНЫ
(лекарства)
низкомолекулярные
пептиды
ЦИТОГЕНЫ
(парафармацевтики)
синтетические
пептиды
Цитогены – короткие пептиды
(парафармацевтики)
Наименование препарата
КАРДИОГЕН® (Ala-Glu-Asp-Arg) – биорегулятор сердца
ПАНКРАГЕН® (Lys-Glu-Asp-Trp) – биорегулятор
поджелудочной железы
Коррекция функций
Сердечно-сосудистой
системы
Углеводного обмена
БРОНХОГЕН® (Ala-Asp-Glu-Leu) – биорегулятор бронхов
Дыхательной системы
ТЕСТАГЕН® (Lys-Glu-Asp-Gly) – биорегулятор семенников
ВЕЗИЛЮТ® (Glu-Asp) – биорегулятор мочевого пузыря
Мочеполовой системы
НОРМОФТАЛ® (Lys-Glu) – биорегулятор сетчатки глаза
Зрения
Экспериментальное изучение
тканеспецифических свойств пептидов
a
b
Эксплантаты сердечной мышцы в органотипической культуре крыс. 3-й
день культивирования
a – контроль, b – добавление кардиогена (1 нг/мл). x70
Пролифератив ная актив ность кардиогена
80
60
Square index
PCNA
40
%
20
0
-20
-40
-60
p53
Экспериментальное изучение
тканеспецифических свойств пептидов
a
b
Эксплантаты слизистой оболочки бронхов в органотипической
культуре крыс. 3-й день культивирования
a – контроль, b – добавление бронхогена (1 нг/мл). x70
%
Пролиферативная активность бронхогена
60
50
40
30
20
10
0
-10
-20
-30
-40
-50
Square
index
PCNA
p53
Экспериментальное изучение
тканеспецифических свойств пептидов
a
b
Эксплантаты поджелудочной железы в органотипической культуре крыс.
3-й день культивирования
a – контроль, b – добавление панкрагена (1 нг/мл). x70
Пролиферативная активность панкрагена
80
60
Square
index
PCNA
%
40
20
0
-20
-40
-60
p53
Влияние пептидов на синтез белка в
кардиомиоцитах крыс разного возраста
Молодые крысы
Контроль
Кардиоген
Старые крысы
Контрольный
пептид
* - P<0.05 по сравнению с контролем
Индукционное влияние пептидов на
дифференцировку полипотентных тканей
эктодермы ранней гаструлы Xenopus Laevis
Пептид
Кол-во
культур в
опыте
Атипичный
эпидермис,
%
Эпидермис,
%
Сомиты,
%
Нервная
ткань,
%
Контроль
40
100
-
-
-
Нормофтал
40
100
15
-
32
Панкраген
40
100
45
38
-
Бронхоген
40
100
36
14
-
Влияние пептидов на Н2O2люминолзависимую хемилюминесценцию
в плазме крови крыс при гипоксии
Группа животных
Показатель
(импульсов/100 секунд x 103)
Интактные крысы
84,7 ± 21,1
Контроль (гипоксия)
164,3 ± 47,40*
Нормофтал + гипоксия
101,7 ± 19,48 ^
Кардиоген + гипоксия
80,0 ± 11,27 ^
Панкраген + гипоксия
88,3 ± 13,18 ^
* - p<0,05 по сравнению с показателем у интактных крыс;
^ - p<0,05 по сравнению с показателем в контроле.
Влияние пептидных биорегуляторов на
антиоксидантную систему крови при возрастной
патологии
Общая антиоксидантная
активность
Антирадикальняа активность
(мкмоль/л)
(усл. ед./мл)

90
1000
80
800
70
*
60
600
50
40

400
30
*
200
20
10
0
Норма
До
После
лечения лечения
* - P<0,05 по сравнению с показателем в норме
 - P<0,05 по сравнению с показателем до лечения
0
Норма
До
После
лечения
лечения
Влияние панкрагена на активность
пищеварительных ферментов
Фермент
Сахараза
Мальтаза
Группа крыс
Двенадцатипер
стная кишка
Тощая кишка
Подзвдошная
кишка
контроль
10,8±2,5
14,0±1,9
8,3±2,5
опыт
13,2±4,1
11,2±2,0
9,9±3,6
контроль
108,9±19,8
109,1±19,7
88,5±8,4
опыт
106,9±15,4
128,3±14,3
77,5±4,8
Щелочная
фосфатаза
контроль
20,8±1,6
7,4±1,5
2,4±0,5
опыт
18,1±2,5
9,7±1,1
2,5±0,9
Аминопептидаза
М
контроль
6,3±1,8
7,9±1,2
10,2±1,4
опыт
6,7±1,4
8,6±1,4
12,2±2,4
64,7±8,6
125,2±14,4
136,2±16,3
69,3±7,1
124,7±8,5
156,1±8,5
Глицил-Lконтроль
лейциндипептида
опыт
за
Изучение безопасности цитогенов
• Общетоксическое действие (острая и хроническая
токсичность)
• Иммунотоксические свойства (ГЗТ к ЭБ и ТНБС)
• Канцерогенные свойства (спонтанный канцерогенез)
• Аллергизирующее действие (феномен Артюса-Сахарова,
ГЗТ, пассивная гемагглютинация)
• Мутагенные свойства (учет аберраций хромосом, генные
мутации)
• Эмбриотоксичность, тератогенность (в культурах до- и
постимплантационных зародышей мышей)
• Местно-раздражающее действие
Кардиоген®
Экспериментальное изучение
• Влияние кардиогена на течение экспериментального
инфаркта миокарда при перевязке коронарной артерии у крыс
• Протекторное действие кардиогена при экспериментальной
токсикохимической миокардиопатии при отравлении
тетраметилтиурамдисульфидом
• Влияние кардиогена на течение и исход хлоркальциевой
аритмии у крыс
• Влияние кардиогена на состояние изолированного сердца
при перфузии и ишемии
• Влияние кардиогена на течение адреналиновой дистрофии
миокарда у крыс
Кардиоген®
Влияние кардиогена на течение экспериментального инфаркта
миокарда при перевязке коронарной артерии у крыс
Показатель
Размер зоны некроза,
% от массы желудочка
Смертность
Содержание в
сыворотке крови:
-глюкозы, ммоль/л
-ЛДГ, нмоль/с.л
-КФК, нмоль/л
Содержание
гликогена в миокарде,
г/кг ткани
Контроль
Кардиоген
6ч
24 ч
6ч
24 ч
44,1±1,7
56,2±1,4
38,1±1,8*
49,6±1,6*
7
2
2
1
4,55±0,23
311±11
1326±64
3,9±0,15
252±19
1073±24
3,12±0,09
309±16
961±52*
3,01±0,11
201±15*
923±38
0,36±0,07
0,38±0,06
1,05±0,12*
1,18±0,12*
*р<0,05 по сравнению с контролем
Кардиоген®
Протекторное действие кардиогена при экспериментальной
токсикохимической миокардиопатии при отравлении
тетраметилтиурамдисульфидом
Показатель
Контроль
Кардиоген
ТМТД
ТМТД
+кардиоген
Объем ядер
кардиомиоцитов мкм3
336,2±5,4
386,2±2,1*
276,3±15,9*
365,4±13,8
Объем стромы,
см3/см3
0,143±0,03
0,159±0,05
0,218±0,01*
0,180±0,02**
Объем паренхимы,
см3/см3
0,81±0,03
0,82±0,04
0,76±0,02*
0,83±0,02**
Ядерноцитоплазматическое
соотношение
0,29±0,02
0,40±0,04*
0,16±0,02*
0,28±0,03**
*р<0,01 по сравнению с контролем;
**р<0,01 по сравнению с показателем у животных без применения кардиогена
Кардиоген®
Влияние кардиогена на течение и исход
хлоркальциевой аритмии у крыс
Препарат
Контроль
(CaCl2)
Кардиоген:
-0,05 мкг/кг
-0,2 мкг/кг
-0,5 мкг/кг
-1,0 мкг/кг
Кол-во погибших
крыс после 1-го
введения CaCl2,
абс./%
Частота
восстановления
синусового
ритма после 1-го
введения CaCl2,
%
Частота развития
фибрилляции
желудочков, %
Максимально
переносимая
доза CaCl2, мг/кг
7 (70)
20,0
60,0
220
5 (50)
3 (30)
4 (40)
6 (60)
27,0
49,0*
39,5*
16,3
60,3
35,2*
39,1*
43,6
220
440
440
220
*р<0,01 по сравнению с контролем
Кардиоген®
Фармакологическое действие
• Регулирует процессы метаболизма в сердечной мышце
• Снижает активность креатинфосфокиназы,
лактатдегидрогеназы и аспартатмиотрансферазы
• Оказывает стимулирующее действие на миокард в условиях
развивающейся гипоксии
• Уменьшает степень развития гипертрофии левого желудочка
Кардиоген®
Клиническое изучение
• ИБС (стенокардия напряжения 1-2 ФК) – n=72
• ИБС + ГБ + ожирение – n=60







Результаты исследования:
Улучшение общего состояния
Увеличение индекса максимального потребления кислорода
Повышение толерантности к физическим нагрузкам
Улучшение гемодинамических показателей
Усиление задержки белка в организме
Уменьшение отеков
Стабилизация АД
Кардиоген®
Рекомендации к применению
Рекомендуется к применению у взрослых при заболеваниях,
связанных с ослаблением функциональной активности
кардиомиоцитов:
•
•
•
•
- в постинфарктном периоде;
- при гипертрофии миокарда;
- при миокардиодистрофии различного генеза;
- при возрастном снижении резервных возможностей
миокарда.
Бронхоген®
Экспериментальное изучение
• Влияние бронхогена на функциональное состояние
альвеолярных макрофагов в инфекционной модели острого
воспаления в результате бактериального повреждения легких у
крыс
• Влияние бронхогена на протекание хронического
фиброзирующего воспалительного процесса – блеомицинового
фиброза легких у крыс
• Влияние бронхогена на состояние легких крыс при сублетальном
гипероксическом повреждении
Бронхоген®
Влияние бронхогена на состояние легких крыс при
сублетальном гипероксическом повреждении
Группа
животных
Масса тела,
г
Масса сердца
Масса легких
г
мг/г массы
тела
г
мг/г массы
тела
Интактные
232±4
0,79±0,01
3,4±0,4
2,00±0,05
8,6±0,5
Контроль
190±7*
0,87±0,02
4,6±0,5*
2,43±0,07*
12,8±0,9*
Бронхоген
228±6^
0,80±0,02
3,5±0,6^
2,14±0,06^
9,4±0,8^
*р<0,05 по сравнению с показателем у интактных животных;
^р<0,05 по сравнению с показателем у животных без применения бронхогена (контроль)
Бронхоген®
Фармакологическое действие
• Регулирует процессы метаболизма в легких
• Снижает тоническую активность гладкой мускулатуры трахеи
• Уменьшает сосудистую проницаемость микроциркуляторного
русла при отеке легких
• Активизирует местные механизмы антибактериальной
защиты легких
• Стимулирует функцию альвеолярных макрофагов
• Тормозит воспалительные реакции и процессы
фиброзирования легочной ткани
• Способствует регенерации альвеолярного и бронхиального
эпителия
Бронхоген®
Клиническое изучение
• Хронический бронхит с астматическим компонентом, фаза
ремиссии - n=85
• «Бронхит курильщика» - n=68
Результаты исследования:
 Улучшение самочувствия (снижение частоты приступов
кашля, удушья, уменьшение количества отделяемой мокроты)
 Уменьшение количества микроскопических структур
мокроты: лейкоцитов, эпителиальных клеток, спиралей
Куршмана (снижение воспалительных и бронхоспастических
проявлений)
 Улучшение показателей бронхиальной проходимости
Бронхоген®
Рекомендации к применению
• при острых и хронических воспалительных заболеваниях
органов дыхания инфекционного и неинфекционного генеза,
сопровождающихся нарушениями микроциркуляции и
обструктивными нарушениями вентиляции легких;
• при «бронхите курильщиков»;
• при снижении резервных возможностей дыхательной
системы при старении.
Панкраген®
Экспериментальное изучение
•
•
•
•
Влияние панкрагена на содержание инсулина и глюкозы в крови в
экспериментальной модели аллоксанового диабета у крыс
Влияние панкрагена на показатели углеводно-жирового обмена в
экспериментальной модели стрептозотоцинового диабета у крыс
Влияние панкрагена на морфологическую структуру поджелудочной
железы в экспериментальной модели стрептозотоцинового диабета
у крыс
Влияние панкрагена на состояние сосудов сетчатки глаза в
экспериментальной модели стрептозотоцинового диабета у крыс
Панкраген®
Влияние панкрагена на содержание инсулина и глюкозы в
крови в экспериментальной модели аллоксанового диабета
у крыс
Группа
крыс
Контроль
Панкраген
Показатель,
ед. изм.
Исходный
уровень
20 сутки
после
аллоксана
1 сутки
после
панкрагена
18 сутки
после
панкрагена
Инсулин,
МкМЕ/мл
24,3±2,1
0,8±0,25
0
0
Глюкоза,
мг/%
78,6±4,2
272,1±9,8
275,7±9,7
277,9±11,1
Инсулин,
МкМЕ/мл
23,8±2,8
3,1±1,1*
3,6±0,7*
4,3±0,5*
Глюкоза,
мг/%
83,9±3,4
252,2±7,9
193,3±6,7*
205,6±8,4*
Панкраген®
Влияние панкрагена на показатели углеводно-жирового
обмена в экспериментальной модели стрептозотоцинового
диабета у крыс
Показатель
Контроль
Стрептозотоцин
Стрептозотоцин
+Панкраген
Белок общий,
мг/дл
52,7±1,31
64,6±2,05*
58,2±2,39^
Триглицериды,
г/л
0,85±0,13
5,66±1,84*
1,16±0,26^
Холестерин,
моль/л
1,18±0,069
1,41±0,077*
1,25±0,053^
Глюкоза, ммоль/л
5,15±0,207
9,12±0,342*
6,03±0,239*^
*р<0,05 по сравнению с показателем у интактных животных (контроль);
^р<0,05 по сравнению с показателем у животных без применения панкрагена
Панкраген®
Влияние панкрагена на морфологическую структуру
поджелудочной железы в экспериментальной модели
стрептозотоцинового диабета у крыс
Средняя площадь экспрессии инсулина
Средняя площадь экспрессии PCNA
**
*
*
*
*
**
9,78±0,43
2,42±0,78
6,43±0,35
1,92±0,55
5,53±0,52
** статистически достоверно отностительно группы 1, (р<0,05)
* статистически достоверно отностительно группы 2, (р<0,05)
1
2
3
4
5,59±1,41
2,80±0,64
1,73±0,64
** статистически достоверно отностительно группы 1, (р<0,05)
* статистически достоверно отностительно группы 2, (р<0,05)
1
2
3
4
Панкраген®
Влияние панкрагена на состояние сосудов сетчатки глаза в
экспериментальной модели стрептозотоцинового диабета у
крыс
Ослабление экспрессии CD 31 в
сетчатке глаза крысы.
Стрептозотоцин. х400
Усиление экспрессии CD 31 в сетчатке
глаза крысы. Панкраген. х400.
Панкраген®
Влияние панкрагена на состояние сосудов сетчатки глаза в
экспериментальной модели стрептозотоцинового диабета
у крыс
Группа крыс
Площадь
экспрессии CD31,
%
Диаметр сосудов сетчатки глаза крыс,
мкм
Правый глаз
Левый глпз
Контроль
23,15±3,65
7,67±1,58
8,25±3,11
Стрептозотоцин
13,51±1,64*
17,1±2,84*
14,1±2,02*
Стрептозотоцин
+ Панкраген
21,27±3,33^
8,7±2,21^
9,0±2,0^
*р<0,05 по сравнению с показателем у интактных животных (контроль);
^р<0,05 по сравнению с показателем у животных без применения панкрагена
Панкраген®
Фармакологическое действие
• Регулирует процессы метаболизма в тканях поджелудочной
железы
• Нормализует синтез белка в клетках поджелудочной железы
• Способствует восстановлению функции клеток
поджелудочной железы
• Повышает чувствительность тканей к инсулину
• Нормализует содержание глюкозы в крови
Панкраген®
Клиническое изучение
Сахарный диабет 2 типа - n=112
Результаты исследования





На фоне приема глибенкламида существенное снижение концентрации
глюкозы в плазме крови натощак, уровня постпрандиальной гликемии,
концентрации глюкозы при пероральном ГТТ, концентрации глюкозы в
суточной моче.
Достигнутый сахароснижающий эффект у 60 % больных сохранялся в
течение 2-х недель после отмены Панкрагена.
Эффективность совместного применения Панкрагена и глибенкламида
существенно превосходит эффективность монотерапии глибенкламидом.
Отчетливый сахароснижающий эффект у пожилых больных с
гиперинсулинемией и высокой исходной резистентностью к инсулину.
Под влиянием Панкрагена уменьшается резистентность тканей к
инсулину.
Уменьшается концентрация триглицеридов в сыворотке крови.
Панкраген®
Клиническое изучение
Хронический панкреатит (фаза ремиссии) – n=54
Результаты исследования
 Уменьшение диспептических симптомов, повышение аппетита
 Увеличение активности панкреатических ферментов (трипсин, αамилаза)
 Благоприятная динамика гемоцитограммы (содержание
гемоглобина, эритроцитов)
 Нормализация показателей белкового (общий белок), минерального
(ионы калия, кальция) и липидного (холестерин, триглицериды, βлипопротеиды) обмена
Панкраген®
Рекомендации к применению
• Сахарный диабет 2 типа, повышенная толерантность к
глюкозе
• Хронический панкреатит
• Нарушение пищеварения
• Профилактика действия токсических факторов на
поджелудочную железу
• Снижение резервных возможностей пищеварительной
системы при старении
Тестаген®
Экспериментальное изучение
• Влияние тестагена на функциональную активность
семенников крыс в модели радиационного старения
• Влияние тестагена на соотношение половых и тиреотропных
гормонов в модели гипофизэктомированных птиц
Тестаген®
Влияние тестагена на функциональную активность
семенников крыс в модели радиационного старения
Группа крыс
Форма клеток
Сутки после облучения; количество клеток, %
1
30
90
Сперматогонии
87
82
84
Сперматозоиды
82
80
77
Сперматогонии
85
0
0
Сперматозоиды
74
0
0
Тестаген
+ облучение
Сперматогонии
87
28
42
Сперматозоиды
76
32
42
Облучение
+ Тестаген
Сперматогонии
86
15
32
Сперматозоиды
74
12
34
Контроль
Облучение
Тестаген®
Фармакологическое действие
• Регулирует процессы метаболизма в клетках семенников
• Повышает функциональную активность и усиливает
подвижность сперматозоидов
• Нормализует сперматогенез
• Регулирует уровень тестостерона в крови
Тестаген®
Клиническое изучение
• Климактерический синдром у мужчин – n=74
• Мужское бесплодие (комплексное лечение) – n=32






Результаты исследования
Нормализация уровня тестостерона в крови
Нормализация соотношения половых гормонов в крови
Увеличение количества сперматозоидов и их подвижности
Повышение функциональной активности сперматозоидов
Уменьшение патологических форм сперматозоидов
Снижение количества лейкоцитов в эякуляте
Тестаген®
Рекомендации к применению
•
•
•
•
Комплексное восстановление функций половой системы у мужчин
после перенесенных заболеваний различного генеза, воздействия
различных токсических факторов, ионизирующего излучения
Мужское бесплодие
Негативные проявления мужского климактерического периода,
связанные с нарушением секреции тестостерона
Поддержание функций половой системы на оптимальном уровне
у мужчин пожилого и старческого возраста
Везилют®
Влияние Везилюта на гладкомышечные клетки
детрузора мочевого пузыря крыс
г/см2
250
*
*
200
*
*
150
100
50
0
мкг/мл
Контроль (р-р
Кребса)
8
* - р<0,05 по сравнению с контролем
16
32
Везилют®
Фармакологическое действие
•
•
•
Нормализует процессы метаболизма в клетках мочевого пузыря
Стимулирует мышечный тонус детрузора или сфинктера
Нормализует гиперрефлекторность мочевого пузыря
Везилют®
Клиническое изучение
• Нарушение мочеиспускания при хроническом
простатите – n=42
• Синдром нарушения мочеиспускания при аденоме
предстательной железы – n=36





Результаты исследования
Нормализация мочеиспускания
Отсутствие необходимости ночного мочеиспускания
Отсутствие странгурии (затрудненное мочеиспускание)
Усиление струи мочи
Улучшение качества жизни мужчин пожилого и старческого
возраста
Везилют®
Клиническое изучение
• Нарушение мочеиспускания при
климактерическом синдроме у женщин – n=44
Результаты исследования
 Нормализация мочеиспускания
 Отсутствие необходимости ночного мочеиспускания
 Улучшение качества жизни женщин пожилого и старческого
возраста
Применение пептидных геропротекторов
• Для профилактики нарушения функций различных органов и
систем
– по 1 капсуле 2 раза в день во время еды в течение 30 дней
• Для коррекции нарушения функций различных органов и
систем с целью повышения эффективности комплексного
лечения заболеваний
– по 2 капсулы 2-3 раза в день во время еды в течение 30 дней
Комплексное применение
пептидных биорегуляторов
Коррекция нарушения основных функций организма
Кардиоген – нормализация функций миокарда
Бронхоген – нормализация функций бронхов
Панкраген – нормализация углеводного обмена
Тестаген – нормализация функций мужской половой
системы
 Везилют – нормализация функции мочевого пузыря
 Нормофтал – нормализация функции зрения




 Повторять курс 2 раза в год
Заключение
 Многолетние клинические исследования пептидных
биорегуляторов на основе различных пептидов
свидетельствуют о высокой эффективности их применения
для быстрого восстановления функционального состояния
органов и систем и профилактики развития возрастной
патологии и ускоренного старения
 Результаты внедрения в медицинскую практику
разработанных на основе пептидных биорегуляторов
лекарственных препаратов, парафармацевтиков, лечебнопрофилактических средств стоматологической и
косметической линий свидетельствуют о широких
перспективах применениях пептидов в различных продуктах
Благодарю за внимание!