Общая геокриология ГАЗЫ И БИОГЕННАЯ СОСТАВЛЯЮЩАЯ МЕРЗЛЫХ ПОРОД Область вечной мерзлоты в Северном полушарии Вечная мерзлота мерзлая порода лед лед Вечная мерзлота, широко распространенная в России, состоит из мерзлых пород и льда, а ее возраст достигает нескольких миллионов лет Исследования биогенных газов: содержание метана с глубиной в мерзлых отложениях Якутии Methane content, pppm 1 1.000 1.500 2.000 Depth, m 2.500 3.000 3.500 4.000 4.500 5.000 5.500 10 100 1000 10000 100000 1000000 Исследования биогенных газов: соотношение метана и углекислого газа в мерзлых отложениях Якутии Methane Content and Carbon Dioxide Content Relationship Carbon Dioxide Content, ppmv 4000.0 3500.0 3000.0 2500.0 2000.0 1500.0 1000.0 500.0 0.0 0.0 200.0 400.0 600.0 800.0 1000.0 1200.0 M ethane Content, ppmv 1400.0 1600.0 1800.0 2000.0 Содержание метана в мерзлых отложениях Якутии по простиранию Methane content, ppmv 10000 1000 100 10 Forest Slope Alas 1 0 20 40 60 80 100 120 140 160 Distance, 180 m Содержание метана в древней мерзлоте и после частичного оттаивания на вырубке . Neleger, larch forest Neleger, cut forest Methane content, ppmv 0.0 500.0 1000.0 Methane content, ppmv 1.00 0.0 1.00 2.00 3.00 4.00 Depth, m Depth, m 2.00 3.00 4.00 5.00 5.00 500.0 1000.0 Содержание метана в древней мерзлоте и после частичного оттаивания на вырубке (2) . Yukechi, larch forest Yukechi, small depression Methane content, ppmv 0.0 500.0 1000.0 1.00 Methane content, ppmv 0.0 1.00 3.00 2.00 4.00 5.00 Depth, m Depth, m 2.00 3.00 4.00 5.00 500.0 1000.0 Содержание метана в мерзлых породах и льдах на Аляске, концентрация в ppmv 4890.5 1244.9 778.8 485.9 45023.7 122244.0 Эмиссия метана в мерзлых породах в эксперименте Days of experiment Samples/Methane content, ppmv Tomakomai Alaska Yakutsk 1 1.43 0.90 1.23 2 1.18 1.54 - 23 2.06 1.98 - 70 2.05 2.12 1.98 209 2.07 2.02 2.29*) 230 2.01 2.02 - *)148 days Рост содержания метана в эксперименте 3.000 2.000 T omakomai 1 1.500 T omakomai 2 Alaska 1 1.000 3.000 0.500 1 Methane content, ppmv Methane content, ppmv 2.500 Alaska 2 2.500 10 2.000 100 Days 1.500 Yakutsk 3 1.000 Yakutsk 4 Yakutsk 5 0.500 0.000 1 10 Days 100 Во льду есть жизнь: микроорганизмы, найденные во льду Антарктиды Заслуга выдающегося открытия в 70-х годах живых микроорганизмов, вмороженных в древний Антартический лед, принадлежит российским ученым из Института Микробиологии АН СССР (С.С.Абызов и другие) Важна техника отбора образцов, обеспечивающая чистоту Отбор образцов в подземелье Института Мерзлотоведения им.П.И.Мельникова в Якутске Споры гриба Penicillium из вечной мерзлоты Фото с помощью электронного микроскопа Микроорганизмы не только не замерзают, но и способны к росту При температуре -5°C споры гриба Penicillium после двух месяцев инкубации прорастают Микроорганизмы при отрицательной температуре не замерзают: на фото их рост при температуре -5ºC в питательной среде: слева – переохлажденной; справа – в замороженном состоянии Ледяная жила в подземном тоннеле Фокс Обнажение ледяной жилы Искусственный холодильник при -4o C 0.5 m 5m … ледяная жила прослойки Воздушные включения Форма и строение льда показывают, что жилы никогда не оттаивали, т.е. • отложения были постоянно мерзлыми • микроорганизмы были изолированы Филогенетический анализ изолятов • 103 to 106 CFU / ml of оттаявшего льда •301 штаммов было получено • 70 штаммов было охарактеризовано 16S rDNA секвенированием Gammaproteo bacteria (4 representatives ) Bacilli ( 5 representatives ) Actinobacteria ( 61 representatives ) 0.1 Новые виды? • less than 97% similarity with those in database (partial 16S rDNA sequences) No. Closest species (Accession no.) Similarity ki2-o11 Arthrobacter ramosus (AM039435) 96.5% ki2-j34 Arthrobacter woluwensis (X93353) 96.8% ki2-m9 Agrococcus jenensis (AJ717350) 95.5% ki2-j21 Agreia sp. 37-4 (AF513393) 96.7% ki2-j22 Frigoribacterium sp. GWS-SE-H243 (AY332185) 96.9% ki2-h51 Salinibacterium sp. 7320 (AM111058) 95.4% ki2-j18 Frigoribacterium aff. faeni A-1/C-an/E (AJ297441) 96.5% ki2-m15 Curtobacterium sp. B20 (AF128869) 94.6% ki2-h47 Brevibacterium sp. SK8E11 (DQ153944) 96.2% ki2-m17 Rhodococcus fascians (AJ011329) 95.7% ki2-g6 Rhodococcus sp. P27-27 (DQ060384) 95.5% ki2-l37 Luteococcus peritonei (AJ132334) 94.8% ki2-l20 Nocardioides jensenii (AF005006) 96.4% ki2-j4 Aeromicrobium sp. Gsoil 098 (AB245394) 95.9% ki2-l2 Aeromicrobium panaciterrae (AB245387) 96.7% Температурная чувствительность изолятов Strain no. Citricoccus sp. ki2-o5 Arthrobacter sp. ki2-l25 Arthrobacter sp. ki2-o18 Arthrobacter sp. ki2-l1 Arthrobacter sp. ki2-a9 Arthrobacter sp. ki2-h42 Arthrobacter sp. ki2-b47 Arthrobacter sp. ki2-c12 Arthrobacter sp. ki2-l3 Brachybacterium sp. ki2-m19 Brachybacterium sp. ki2-l13 Brachybacterium ki2-o16 Microbacterium sp. ki2-c53 Microbacterium sp. ki2-m48 Microbacterium sp. ki2-g13 Agrococcus ki2-b50 Cryobacterium ki2-o13 Frigoribacterium sp. ki2-h30 Frigoribacterium sp. ki2-o9 Salinibacterium sp. ki2-l35 Agreia sp. ki2-o4 Agreia sp. ki2-b52 Curtobacterium sp. ki2-m15 Janibacter sp. ki2-m21 Brevibacterium sp. ki2-l21 Dietzia sp. ki2-g3 Rhodococcus sp. ki2-m3 Planococcus sp. ki2-h28 Planococcus sp. ki2-b17 -5 4 15 20 27 37 (oC) Psychrotolerant Psychrophile Рост определялся по диаметру колонии на среде LB agar от 5 дней до 3 месяцев Время удвоения Arthrobacter spp 25 5 dry cell weight (g / l) • Arthrobacter sp. ki2-o18 1 2.8 0.1 9.5 0.1 39.4~49.6 0.01 0.01 3.5 0.001 0.001 0.0001 0.0001 10 20 15 (o C) 20 -5 1 2.6 0 . 30 40 0 time (h) 5 10 15 20 time (d) dry cell weight (g / l) • Arthrobacter sp. ki2-l25 1 1 3.0 2.9 0.1 9.7 0.1 36.7~41.9 0.01 0.01 3.6 0.001 0.001 0.0001 0.0001 0 10 20 30 40 time (h) 0 5 10 15 20 time (d) shaking incubation at 150 rpm-1 in LB medium Изоляты грибов и их чувствительность Strain Closest species (Accession no.) (Similarity) I2Fp75 Phaeococcomyces nigricans (AJ276065) (99.0%) I2F7 Leucosporidium antarcticum (AF44529) (100%) I2F2 I2F3 I2F10 Geomyces sp. FFI 30 (AJ608960) (99.3%) Geomyces sp. FFI 30 (AJ608960) (99.2%) Geomyces sp. FFI 30 (AJ608960) (99.8%) 1 cm -5o C 20o C 27o C (3 months) (7 days) (7 days) В поисках древнейших мерзлых отложений На фото обнажение Мамонтова гора в Якутии; возраст мерзлых пород, возможно, около 2 миллионов лет Бактерия из древней мерзлоты Выделенный штамм Bacillus; слева - окрашивание по Граму, справа – рост при температуре -5 градусов в течение 5 месяцев Способны ли они выживать в космосе? Предполагаемые остатки микроорганизмов из метеоритов MetA. Iperstenic chondrite, fallen on Feb. 3, 1882 at Mocs, Transilvania and MetC. Enstatitic olivinic chondrite, fallen in 1919 at Bur Hacaba, Somalia (kindly provided by Real Museo Mineralogico, Naples; from Giuseppe Geraci et al., Rendiconti Accademia Nazionale dei Lincei, s. 9 (Mat.) vol. 12, 51-64, 2001). Нуклеотиды ДНК (A, U, G, C) имеют ограниченное время жизни (Levy & Miller, 1998) Наиболее нестабильным оказывается цитозин со временем полураспада при температурах 0 - -10 градусов Цельсия около 300 лет. Выживает сильнейший? Вечная мерзлота – арена беспрецедентного естественного отбора. Биллионы клеток в ней не способны к передвижению, лишены пищи и пространства для размножения. После тысячелений существования в ее толщах могли выжить только клетки, обладающие механизмом поддержания их жизнеспособности в течение гигантских периодов времени. Вопросы, на которые следует ответить: 1. Действительно ли найденные микроорганизмы древние клетки: а) исключена миграция; б) не происходило оттаивания мерзлоты и загрязнения; в) клетки в мерзлоте находятся в неактивном состоянии и не растут 2. Почему бактерии из мерзлоты принадлежат к различным систематическим группам 3. Содержат ли культуры клеток из мерзлоты белки, ответственные за сохранение микроорганизмов в течение длительного времени 4. Могут ли эти специфические белки быть выделены и использованы для продления жизни других, небактериальных клеток – в частности, человеческих