Институтская Программа по уходу и работе с - Rus-LASA
advertisement
Rus-LASA и развитие науки о лабораторных животных в России Мурашев Аркадий Николаевич, Красильщикова Марина Сергеевна, Попов Владимир Сергеевич НП «Объединение специалистов по работе с лабораторными животными» (Rus-LASA) Использование лабораторных животных в научных исследованиях в Европе рыбы птицы кролики мыши морские свинки крысы хомяки, кошки, собаки, хорьки, свиньи, козы, овцы, коровы, обезьяны, рептилии, амфибии ЭКСТРАПОЛЯЦИЯ НА ЧЕЛОВЕКА РЕЗУЛЬТАТОВ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ 150 препаратов от 12 компаний ЖИВОТНЫЕ Не млекопитающие ПРОГНОЗИРУЕМОСТЬ (%) Не грызуны 29 43 63 Грызуны + Не грызуны 71 Грызуны Olson et al. Concordance of the Toxicity of Pharmaceuticals in Humans and in Animals Regulatory Toxicology and Pharmacology, 2000. Р. 56-67 ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ РЕЗУЛЬТАТОВ ДОКЛИНИЧЕСКИХ ИСПЫТАНИЙ стандартные животные стандартные условия их содержания стандартные методические подходы адекватность in vivo моделей 4 ЗДОРОВЫЕ ЖИВОТНЫЕ Животные SPF (Specific Pathogen Free) статуса свободны от патогенной микрофлоры Использование животных SPF статуса является одним из гарантов воспроизводимости результатов доклинических исследований ПИТОМНИК ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ ФИЛИАЛА ИБХ РАН Питомник «барьерного» типа, общая площадь 2700 кв.м. www.spf-animals.ru СТАНДАРТНЫЕ УСЛОВИЯ СОДЕРЖАНИЯ ЖИВОТНЫХ Физические Биологические Химические Социальные 7 КОРПУС БИОМЕДИЦИНСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ общая площадь 2450 кв.м 13 комнат для животных 17 лабораторных комнат контролируемые условия содержания животных: избыточное давление - 7-12 Па температура - 18-26С влажность - 30-70% световой день - 12 часов ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОРУДОВАНИЕ Клетки с индивидуальной вентиляцией ООО «Фармбиолайн» www.farmbioline.ru МЕТОДЫ СОЗДАНИЯ IN VIVO МОДЕЛЕЙ Селекция по заданному фенотипическому признаку патологического состояния Модификация генотипа, приводящая к развитию патологии (трансгенные и нокаутные животные) Фармакологическая модуляция функционального состояния организма, провоцирующая патологические изменения в нем Инструментальные воздействия на организм, вызывающие развитие патологического процесса Изменения внешних условий среды обитания, приводящие к патологии ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ЭСЕНЦИАЛЬНОЙ ГИПЕРТОНИИ У ЧЕЛОВЕКА повышенный уровень артериального давления (АД) и частоты сердечных сокращений (ЧСС) тоническая и рефлекторная кардиохронотропная регуляция: симпатический тонус повышен, чувствительность барорефлекса снижена наследуемость гипертензии: в Y хромосоме и митохондриальной ДНК обнаружены мутации фармакологическая коррекция: моксонидин снижает АД и вызывает седативное побочное действие SHR и SHR SP Линии спонтанно гипертензивных крыс SHR и SHR SP были получены путем селекции по фенотипическому признаку повышенного артериального давления 1963 г. Okamoto, Aoki - Spontaneous Hypertensive Rat (SHR) 1974 г. Okamoto et al. - Spontaneous Hypertensive Rat Stroke Prone (SHR SP) 1996 г. разведение SHR SP в Филиале ИБХ РАН РАДИОТЕЛЕМЕТРИЧЕСКАЯ РЕГИСТРАЦИЯ АРТЕРИАЛЬНОГО ДАВЛЕНИЯ имплантируемое устройство схема имплантации оборудование для сбора и хранения информации АРТЕРИАЛЬНОЕ ДАВЛЕНИЕ И ЧАСТОТА СЕРДЕЧНЫХ СОКРАЩЕНИЙ У КРЫС WKY И SHR-SP WKY n=19 телеметрия SHR-SP n=20 WKY n=22 катетерная технология SHR-SP n=25 317 294 мм рт.ст. 279 260 251 200 300 200 204 181 100 126 151 135 93 100 101 0 0 WKY SHR-SP систолическое давление WKY SHR-SP диастолическое давление WKY SHR-SP частота сердечных сокращений уд/мин 300 ТОНИЧЕСКАЯ КАРДИОХРОНОТРОПНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ У КРЫС WKY И SHR-SP уд/мин 400 WKY, n=10 SHR-SP, n=9 +474 350 \атропин +344 300 2813 3002 -433 \атенолол 250 -614 200 - P<0,05 относительно WKY РЕФЛЕКТОРНАЯ КАРДИОХРОНОТРОПНАЯ РЕГУЛЯЦИЯ У КРЫС WKY И SHR-SP WKY, n=10 уд/мин уд/мин/мм рт.ст. fнитропруссид 450 SHR-SP, n=9 2,5 чувствительность барорефлекса фенилэфринg 400 2,0 350 1,5 300 1,0 250 200 0,5 150 0,0 0 50 100 150 200 250 мм рт.ст. 300 0 100 200 мм рт.ст. 300 F1 ГИБРИДЫ ПРИ СКРЕЩИВАНИИ КРЫС WKY И SHR-SP Самка WKY Самец SHR-SP Самка SHR-SP Самец WKY 118+4 214+3 195 + 4 117+3 ХwXw xsys xsxs XwYw F1 Хwxs F1 Xwys Хwxs xsYw Самка “Ys” (n=11) Самец “Ys” (n=10) Самка “Yw” (n=10) Самец “Yw” (n=11) 143+4 182+4 155+4 168+3 Среднее артериальное давление, мм рт.ст. ЭФФЕКТЫ ХРОНИЧЕСКОГО ВВЕДЕНИЯ МОКСОНИДИНА ЗОНДОМ В ЖЕЛУДОК У КРЫС SHR-SP - контроль - моксонидин (гипотензивный препарат центрального действия) Двигательная активность, отн.ед. ЧСС, уд/мин ср. АД, мм рт.ст. 2 мг/кг/сутки 10 мг/кг/сутки 200 175 150 125 100 – P<0.05 относительно контроля 400 350 300 250 день 40 30 20 10 0 1 2 ночь 3 5 7 10 сутки 14 20 отмена 1 2 3 5 7 10 сутки 14 20 отмена ЗАКЛЮЧЕНИЕ Крысы, имеющие артериальное давление диастолическое около 150 мм рт.ст. и систолическое около 200 мм рт.ст., являются адекватной экспериментальной моделью эсенциальной артериальной гипертонии БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ! Мурашев Аркадий Николаевич murashev@fibkh.serpukhov.su www.bibc.psn.ru www.ruslasa.ru
