ТРАНСЛЯЦИЯ ПЛАН ЛЕКЦИИ 1) Определение понятия и общие особенности процесса 2) Компоненты трансляции 3) Этапы трансляции 4) Особенности процесса у про- и эукариот ТРАНСЛЯЦИЯ Трансляция • Синтез белка по матрице мРНК, осуществляемый на рибосомах • Необходим перевод с языка нуклеиновых кислот на язык белков. • «Словарь» перевода – генетический код. Компоненты трансляции 1. иРНК или мРНК (матрица) 2. Рибосома 3. т-РНК с аминокислотой Рибосома tonylam2011.wix.com http://blogs.scientificamerican.com Впервые описаны Дж Паладе в 1950-х Дж Паладе (1912-2008 ) Нобелевская премия по физиолигии и медицине 1974 г Синтез рибосом у эукариот Ультрацентрифугирование Теодор Сведберг (1884-1971) изобрел ультрацентрифугу www.pha.jhu.edu Коэффициент седиментации выражают в единицах Сведберга (S) СОСТАВ ПРО- И ЭУКАРИОТИЧЕСКИХ РИБОСОМ www.mun.ca Функции р-РНК в рибосоме каталитическая узнавание сайта начала трансляции на мРНК •2009 г. В. Рамакришнан, Т. Стейц и А. Йонат получают нобелевскую премию по химии за исследование структуры и функций рибосомы Транспортная РНК bio.fizteh.ru Транспортная РНК 1965 г. Р. Холли определяет первичную структуру аланиновой тРНК и предполагает варианты вторичных структур Роберт Холли (1922-1993 гг) Нобелевская премия по физиологии и медицине 1968 г. соместно с Х. Кораной и М. Ниренбергом Транспортная РНК. Первичная и вторичная структура. -5'-фосфат. -акцепторный стебель 7 пн формируется за счет спаривания 5'- и 3'-концевых нуклеотидов ( (на 3'-конце неспаренные CCA для прикрепления аминокислоты). -D-петля стабилизирована 4 п.н. и содержит дигидроуридин. -Антикодоновая петля стабилизирована 5 п.н. и содержит антикодон. -T-петля стабилизирована 5 п.н. и содержит ТΨС последовательность, где Ψ - псевдоуридин. -В нескольких положения основания модифицированы метилированием . -Первое основание антикодона часто модифицировано и представляет собой инозин, псевдоуридин или лизидин. Tретичная структура транспортных РНК L-образная пространственная структура, опознаваемая А- и Р- сайтами рибосом Структура фенилаланиновой тРНК дрожжей Shi, H., Moore, P.B. (2000) RNA 6: 1091-1105 Сколько разных т-РНК в клетке? 20 классов изоакцепторных тРНК (одинаковая третичная структура) 64-3=61 должно быть по первичной структуре Иногда меньше, т.к. имеется неточное спаривание по третьему нуклеотиду РЕКОГНИЦИЯ -подготовительный этап трансляции узнавание тРНК своей аминокислоты при помощи фермента аминоацил-тРНКсинтетазы. Кодаза АРСаза аминоацил-тРНКсинтетаза http://www.bio.davidson.edu Сборка инициирующего комплекса Малая субъединица формилметиониновая аминоацил-тРНК мРНК факторы инициации трансляции Присоединение большой субъединицы, гидролиз ГТФ, диссоциация факторов инициации Элонгация Элонгация 1) Аминоацил-тРНК попадает в А сайт рибосомы. 2) Рибосома катализирует перенос пептида, связанного с тРНК в Р-сайте и образование пептидной связи с находящимся в А сайте аминокислотным остатком. 3) Происходит транслокация — перемещение рибосомы по мРНК на один триплет. В результате пептидил-тРНК оказывается опять в Р-сайте, а «пустая» тРНК из P-сайта переходит в Е-сайт. Терминация трансляции 1) В А-участк попадает кодон терминации (UAG, UAA или UGA). 2) Завершенный полипептид остается ковалентно связанным с тРНК. 3) Происходит гидролиз связи между тРНК и полипептидом и полипептид освобождается из рибосомы. 4) Рибосома диссоциирует на субчастицы. 5) Малая субчастица может оставаться в ассоциации с мРНК и скользить вдоль нее, находя следующий кодон инициации (реинициация следующей кодирующей последовательности в полицистронных мРНК). http://commons.wikimedia.org Разобщенность транскрипции и трансляции у эукариот © 2010 Nature Education Сопряженность транскрипции и трансляции у прокариот http://www.piercenet.com Посттрансляционная модификация химическая модификация белка - последний этап синтеза Известно более 200 вариантов посттрансляционной модификации белков эффекты ПМ - продолжительность жизни белков, ферментативную активность, взаимодействие с другими белками Частичный гидролиз, гликозилирование (половина всех белков человека), фосфорилирование, алкилирование, убиквитирование, тирозинирование и т.д. http://www.piercenet.com Литература