ИЗУЧЕНИЕ ВРЕМЕННОЙ ДИНАМИКИ ЭКСПРЕССИИ РАННИХ ГЕНОВ C‐FOS И ZIF/268 В МОЗГЕ ЛАБОРАТОРНЫХ МЫШЕЙ ПРИ ВЫРАБОТКЕ УСЛОВНОГО РЕФЛЕКСА ЗАМИРАНИЯ Сухоруков Григорий Шарф Леа Руководители: Иванова А.А. Ивашкина О.И. НИИ Нормальной физиологии им. П.К.Анохина, РАМН Временная динамика индукции и спада уровня мРНК и белка с-fos и zif/268 в клетках первичной зрительной коры крыс (Zangenehpour, Chaudhuri, 2002) Увеличение уровня мРНК с-fos и zif/268 в гиппокампе крыс после одной сессии обучения в пространственной версии водного лабиринта Морриса (Guzowski et al., 2001) Экспрессия белка zif/268 в дорзальном гиппокампе крыс после обучения условнорефлекторному замиранию на звуковой стимул (Lonergan et al., 2010) Нейроанатомический субстрат условно-рефлекторного замирания: Кора Контекст (УС) Таламус СА1 Гиппокамп Зубчатая фасция Миндалина Гипоталамус Боль (БС) Цель работы: Исследование временной динамики экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа мыши после однократного сеанса обучения в модели условно-рефлекторного замирания Задачи исследования: 1) Провести количественный анализ экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в нейронах гиппокампа через разные временные интервалы после сеанса обучения условно-рефлекторному замиранию 2) Охарактеризовать динамику изменения уровня экспрессии генов транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268 в течение 1 суток после обучения 3) Определить минимальный временной интервал после воздействия, за который уровень экспрессии каждого из исследованных генов достигает максимального значения Методика: Иммуногистохимическое выявление белковых продуктов ранних генов cfos и zif/268 Выработка условного рефлекса замирания: 2 мин обследование камеры 2с ЭКР (1 мА) 30 с СА1 Зубчатая фасция ПК 0 0,25 0,5 ПК = пассивный контроль (отсутствие обучения) 1 1,5 2 3 4 6 24 t, часы (время до извлечения мозга) Результаты: экспрессия Zif/268 в поле СА1 гиппокампа # n=3 n=5 n=3 n=3 # - p=0,09; критерий Манна-Уитни n=3 n=5 n=4 n=5 n=5 n=3 n=3 Результаты: экспрессия Zif/268 в зубчатой фасции гиппокампа n=3 n=5 n=3 n=3 n=3 n=5 n=4 n=5 n=5 n=3 n=3 Результаты: экспрессия c-Fos в поле СА1 гиппокампа * * n=3 n=7 n=4 n=4 n=4 * - p<0,05; критерий Манна-Уитни n=5 n=3 n=4 n=3 n=4 n=3 Результаты: экспрессия c-Fos в зубчатой фасции гиппокампа * n=7 n=4 n=4 n=4 * - p<0,05; критерий Манна-Уитни n=5 n=3 n=4 n=3 n=4 n=3 n=3 Выводы: Выявлены отличия во временной динамике экспрессии транскрипционных факторов с-Fos и Zif/268: экспрессия Zif/268 раньше достигает максимального уровня, чем экспрессия с-Fos Характер временной динамики экспрессии обоих ранних генов различается в двух исследованных зонах гиппокампа: в поле СА1 повышенный уровень экспрессии сохраняется в течение длительного времени; при этом в зубчатой фасции гиппокампа происходит быстрое кратковременное увеличение интенсивности экспрессии, и затем - ее быстрое снижение Иммуногистохимия