Быстрая диагностика пациента с подозрением на - SP-GMK

реклама
«Некоторые аспекты применения
экспресс тест-систем в диагностике
инфекционных, сердечно-сосудистых и
других заболеваний»
ООО «Меди-Линк», г. Москва
ранняя диагностика беременности
была обычным делом в
Древнем Вавилоне
700 лет до н.э.
Местная акушерка скручивала
тампон из овечьей шерсти,
пропитывала его соком
определенного растения
(название волшебной травы держали
в строгой тайне) и вводила во
влагалище пациентки на 3 дня,
попросив воздержаться от секса.
Извлеченный тампон опускали в
раствор квасцов (минеральных
солей): если жидкость краснела,
значит, в семье действительно
ожидалось пополнение.
•
В свое время появление лакмусовых бумажек стало
прорывом в технике определения кислотности:
вместо неудобных тестов достаточно обмакнуть
бумагу.
Возможно, такой же прорыв осуществит
разработка Джорджа Уайтсайдза, «бумажная
лаборатория», дешевый и простой способ
проведения аналитических реакций, требующий
для работы микроскопические количества
вещества.
Джордж Уайтсайдз
известен многочисленными
разработками
в области нанотехнологии
Принцип метода
иммунохроматографии (ИХА)

Образец (цельная кровь, сыворотка, плазма, моча, экстракт мазков или
фекалий), нанесенный на подложку, движется по мембране и доходит
до зон, где находятся специфически связывающиеся агенты (антитела
или антигены). В этих зонах происходит специфическое связывание
тестируемого белка (антигена), находящегося в образце со
специфическими антителами к нему (конкретная информация – в
инструкциях к каждому тесту).
Варианты
иммунохроматографических тестов
Существует два варианта тестов ИХА:
Тест – кассеты
Тест – полоски
Преимущества экспресс-тестов








простая процедура анализа
не требуют приборного оборудования
индивидуальное тестирование
время анализа от 5 до 15 минут
доступная цена ~ 2-3 $ за тест
визуально читаемые результаты
длительные сроки хранения при комнатной
температуре
использование для анализа не только образцов
сыворотки или плазмы, но и цельной крови, а так
же биологического материала мазков и смывов
Современный портфель
экспресс-тестов для диагностики
острых сосудистых катастроф на
догоспитальном этапе
2007 год
Поступило
27 162
больных
Умерло
1 115
(4,1%)
Выписано
26 047
всего вскрытий
1 060 человек
(95,1%)
инсульт
158 чел
(14,9%)
инфаркт
82 чел
(7,7%)
Итого:
инфаркт
+
Инсульт
78 чел
(7,4%)
332 (31,3%)
без вскрытия
55 человек
4,7%
расслоение
аорты
14 чел
(1,3%)
Маркеры некроза миокарда
Количество дней после развития ИМ
Anderson, J. L. et al. J Am Coll Cardiol 2007;50:e1-e157
Тропонин I или Тропонин Т
Недостатки тропонина T
1) Двухфазный характер выделения в кровь тропонина T предполагает наличия фазы снижения (или
как минимум фазы плато) концентрации маркера в крови при существующем остром инфаркте
миокарда.
2) Большие разбросы времени максимального повышения и снижения концентрации тропонина T в
крови до исходного значения говорят о меньшей достоверности поведения данного кардиомаркера при
развитии острого коронарного синдрома.
3) Возврат концентрации тропонина T в крови к исходному уровню на 14 день, ограничивает
применение этого маркера в диагностике реинфарктов в большей степени, чем тропонина I.
4) Повышение уровня в крови тропонина T при ХПН и возможность перекрестной реакции АТ к
этому кардиомаркеру с белками скелетных мышц.
Недостатки тропонина I
1) В плазме 90% тропонина I находится в связанном виде.
2) Нестандартизованность методов анализа тропонина I – диагноз ОИМ ставится на основании
мониторирования уровня кардиомаркера в крови. Весьма сомнительно, что мониторирование уровня в
крови тропонина I будет осуществляться различными лабораторными системами.
В отделении кардиореанимации ГКБ №50 у больных с признаками
инфаркта миокарда давностью не более 24 часа был проведен экспресстест на определение тропонина I, ACON. Все результаты были
положительны.
№
Тn I
Tn T
АсТ, Ед/л
ЛДГ, Ед/л
1
+
+
279
2270
2
+
+
30
677
3
+
+
111
718
4
+
+
169
2259
5
+
-
60
572
6
+
+
72
695
7
+
+
30
677
8
+
+
109
1257
9
+
+
70
772
10
+
+
40
1156
11
+
-
87
478
12
+
-
76
564
13
+
+
60
890
14
+
-
72
734
15
+
+
80
1020
Тропонин I или T?
Повышение уровня к 96 часам –
Исходы к 30 дню после включения
пациентов с высоким уровнем cTnI и
cTnT
100% у cTnI и cTnT
cTnT
cTnI
cTnT
cTnI
Luscher, M. S. et al. Circulation 1997;96:2578-2585
Copyright ©1997 American Heart Association
Методы определения маркеров
некроза миокарда
Качественный (ACON, США,
метод-иммунохроматографический)



cTnI (>0,5 нг/мл)
МВ-КФК (>5 нг/мл)
миоглобин (>50нг/мл)
Точка приложения:
-Догоспитальный этап: приемное отделение,СМП, поликлиника
Плюсы:
-Быстрая диагностика пациента с «болью в груди»
-Не требуется специального хранения и оборудования
-Ответ «да-нет»
-Возможно использование цельной крови/ сыворотки/ плазмы
ТРОМБОЭМБОЛИЯ ЛЕГОЧНОЙ
АРТЕРИИ (ТЭЛА)
Частота ТЭЛА у больных, умерших
в различных стационарах
А.Л. Верткин и соавт.,2007
Факторы риска














Возраст (старше 50 лет)
Длительный постельный режим или
отсутствие активности (длительный
перелет в самолете, долгое
путешествие на машине, в поезде)
прием оральных контрацептивов
или гормональной терапии
Операции
(особенно на тазовых органах)
беременность и роды
массивная травма
ожоги
рак
инсульт
инфаркт миокарда
операции на сердце
переломы бедренной кости
или шейки бедра
нарушение тромбообразования
анамнез глубоких венозных
тромбозов
Стандартные методы подтверждения
ТЭЛА, ТГВ – доступны ли они
Вентиляционноеперфузионная
сцинитиграфия
легких
Дуплексное
Допплеровское
исследование
сосудов ног
КТ-ангиография
Качественный тест для
определения Д-димера
Точка приложения:
-Приемное отделение, реанимационное отделение,
- СМП, поликлиника
Плюсы:
-Быстрая диагностика пациента с подозрением на ТГВ,
- легочную эмболию, ДВС- синдром
- Не требуется специального хранения и оборудования
- Ответ «да-нет»
- Возможно использование цельной крови
- Результаты исследования через 10 мин
В результате проведения упрощенного качественного теста для диагностики
Д-димера компании «Clearview» была выявлена 100% чувствительность в 527
случаях исследования амбулаторных пациентов с подозрением на легочную
тромбоэмболию
Анализ
Чувствительность
Упрощенный качественный
тест для диагностики Dдимера компании "Clearview"
100%
47,9%
100%
(92,5%-100%)*
(43,3%-52,6%)*
(98,4%-100%)*
100%
48,8%
100%
(92,5%-100%)*
(44,1%-53,4%)*
(98,4%-100%)*
100%
47,5%
100%
(98,2%-100%)*
(92,5%-100%)*
(42,7%-52,3%)*
Новый тест для диагностики
D-димера компании
"bioMerieux Vidax"
Набор STA Liatest D-Di
компании "Diagnostica Stago"
* = 95% Доверительный Интервал
Специфичность
приведенное
значение
Экспресс-тесты для
диагностики инфекционных
заболеваний
ВИЧ 1 & 2
Гепатит В
Гепатит С
Хламидиоз
Сифилис
Стрептококк А
Туберкулез
Хеликобактериоз
Алгоритм лабораторной диагностики
ВИЧ-инфекции
I этап – скрининговые исследования на
ИФА тест-системе с антигенами ВИЧ-1 и ВИЧ-2
Положительный результат
II этап – референтное исследование
на 2-3 ИФА тест-системах
Положительный результат
IIIэтап – экспертное исследование
методом иммуноблотинга
Дополнительные методы экспертной
диагностики ВИЧ - инфекции
окончательный результат через две недели
Метод ПЦР
Молекулярная
гибридизация
ОНКОМАРКЕРЫ
ПРОСТАТ-СПЕЦИФИЧЕСКИЙ АНТИГЕН
КАРЦИНОЭМБРИОНАЛЬНЫЙ
АНТИГЕН
АЛЬФА-ФЕТОПРОТЕИН
СКРЫТАЯ КРОВЬ В КАЛЕ
Портативный иммунофлуоресцентный
экспресс- анализатор Triage Meter Pro
Экспресс-анализатор Triage®
Meter Pro: три простых шага
1. Добавьте кровь в диагностическую
панель
2. Вставьте панель в экспресс-анализатор
Triage® Meter Pro
3. Прочитайте результаты
Пример отображения
результатов на экране дисплея
Определение маркеров
некроза миокарда
Количественный – РОС диагностика
(Triage® Cardiac Panel, производитель
БИОСАЙТ, США
Метод - иммунофлюоресцентный):

Тропонин I (0,05-30 нг/мл)

Миоглобин (5-500 нг/мл)К

Креатинкиназа-МВ (1-80 нг/мл)
Точка приложения:
Госпитальный этап
Плюсы:
Быстрая диагностика пациента с «болью в груди»
Стратификация риска пациентов с ОКС
Уменьшает время диагностики до 15 минут
Комбинация маркеров помогает установить ранний и поздний ИМ
Определение маркеров некроза миокарда в динамике
Определение Д-димера
РОС - Количественный:
Метод –иммунофлуоресцентный (антитела к к 3B6 Ддимеру)
(Triage® D-dimer test, производитель БИОСАЙТ,
США):

Коэффициент корреляции с методами ELISA
составляет 92-97%.

при подозрении на ТЭЛА, ТГВ, ДВС

Результат за 15 минут

Диапазон измерений: 100 – 5000 нг/мл

Верхняя граница нормы 400 нг/мл
Точка приложения: стационар РОС, лаборатория
Плюсы:
Быстрая диагностика пациента с подозрением на ТЭЛА, ТГВ
Клиническая эффективность сопоставима с центральной лабораторией
Возможно использование цельной крови либо плазмы, обработанной ЭДТА
Результат за 15 минут
Определение д-димера в динамике
Feied C. Pulmonary embolism. Available at: http://www.emedicine.com/emerg/topic490.htm. Accessed April 11, 2007. 2. Triage D-Dimer Test
Package Insert, Revision B, May 2005. 3. Dempfle CE, Zips S, Ergul H, Heene DL. The Fibrin Assay Comparison Trial (FACT): evaluation of 23
quantitative D-dimer assays as basis for the development of D-dimer calibrators. Thromb Haemost. 2001;85:671-678. 4. Stein PD, Hull RD, Patel
KC, et al. D-dimer for the exclusion of acute venous thrombosis and pulmonary embolism: a systematic review. Ann Intern Med. 2004;140:589602. 5. Lee-Lewandrowski E, Van Cott EM. Evaluation of the Biosite Triage quantitative whole blood D-dimer assay and comparison with the
bioMÈrieux VIDAS® D-dimer exclusion test: validation and utility for use in the central laboratory and at the point of care. Point of Care.
2005;4:133-137.
Экспресс-анализатор Триайдж Метер Про
Определение BNP
Количественный – РОС диагностика
(Triage®, производитель БИОСАЙТ, США
Метод - иммунофлюоресцентный):

Чувствительность теста - 95%
Специфичность анализа – 98% (при
концентрации 100 пг./мл.)

Достоверность отрицательного
диагностического уровня (<100 пг./мл.)
составляет 98% *
Точка приложения:
Госпитальный этап, поликлиника
Плюсы:
Быстрая диагностика СН – время измерения 15 минут
Сортировка больных с одышкой на догоспитальном этапе (диф.диагноз)
Стратификация риска острого коронарного синдрома, прогноза СН
Использование маркера систолической и
диастолической дисфункции желудочков сердца
Ведение и оценка терапии у больных с ХСН
*Maizel A., Krishnaswamy P. Et al. “Rapid mearsurement of B-Type Natriyuretic Peptide In the Emergensis Diagnosis of Heart Failure” The New Journal of Medicine, 2002,
Vol.347, 161-167
Maizel A., Koon J.,Krishnaswamy P., Kazanera N. “Utility of of B-natriyuretic Peptide is a rapid, point-of-care test for screening patients undergoing echocardiography to
determine left ventriculare disfunction”
American Heart Journal 2001, 141, 367-374
Диагностические панели
Быстрая объективная диагностика сердечной
недостаточности и стратификация риска острого
коронарного синдрома
Определения уровня в крови
В-натрийуретического пептида - маркера
систолической и диастолической дисфункции
желудочков сердца
Быстрая дифференциальная диагностика синдрома
одышки в течение небольшого промежутка времени
Комплексное определение креатинкиназы-МВ,
миоглобина, тропонина I, Внатрийуретического пептида и Д-димера
Ранняя диагностика острого инфаркта миокарда
одновременное измерение в крови уровня
маркеров
миоглобина, тропонина I, креатинкиназ-МВ
Быстрое исследование пациентов с подозрениями на
синдром диссеминированного внутрисосудистого
свертывания, тромбоэмболию легочной артерии и
тромбоз глубоких вен нижних конечностей
Одновременная диагностика инфаркта миокарда и
оценка риска сердечной недостаточности
Определение наличия в моче метаболитов ряда
наркотических средств
количественное определение содержания в
крови Д-димера
Количественное определение Тропонина I,
креатинкиназа-МВ, миоглобина, Внатрийуретического пептиада
Спектр: до 10 показателей
Преимущества анализатора
Triage Meter

Расширенное меню для проведения иммуноанализа

Мультимаркерные диагностические панели

Использование цельной крови для анализа

Результаты анализа через 15 минут

Возможность работа от батареи(портативность)

Три вида встроенного контроля

Встроенный принтер ( результаты выдаются в электронном и
печатном виде)

Полная комплектация ( в отличие от других анализаторов)

Невысокая стоимость
Верное решение для проведения быстрой диагностики
непосредственно на месте оказания медицинской
помощи !
Вопросы?
Скачать