n=39

Ставропольский государственный университет
Кафедра физико-химических основ медицины и
клинической лабораторной диагностики
Изменение состояния тромбоцитов
новорожденных в зависимости от наличия
мутации в гене гликопротеина IIb/IIIa у
матерей
доктор мед. наук, профессор Бондарь Т.П.
кандидат. мед. наук Муратова А.Ю.
Цель исследования
Изучение влияния гомозиготной мутации
(PlA2/PlA2) гена субъединиц рецепторов
тромбоцитов GP IIb/IIIa у родильниц на
изменение морфометрических параметров
тромбоцитов у их детей
Контингент обследованных
Всего 334 человека
ГРУППА 1
женщины с физиологическим
течением беременности и родов
Генотип P1A1/P1A1 (n=128)
ГРУППА 3
женщины с тромбофилиями
Генотип P1A2/P1A2 (n=39)
ГРУППА 2
Их дети (n=128)
ГРУППА 4
Их дети (n=39)
Методы исследования
•
Определение генотипа по полиморфизму
PlA1/ PlA2 проводили амплификационнорестрикционным методом.
•
Источником для выделения ДНК служили
пробы цельной крови, отобранной из
вены пациентов в пробирки с 6 %
раствором ЭДТА (1:20). Выделение ДНК
осуществляли сорбционным методом при
помощи набора «ДНКсорб Б» в
соответствии с инструкцией.
•
Амплификационные смеси готовили на
основе универсального набора реактивов
и препаратов для ПЦР «Ампли Сенс-2001» производства ФГУН ЦНИИЭ
Роспотребнадзора.
•
Амплификацию проводили в
термоциклере «DNA Mastercycler 22331»
(Eppendorf)
Методы исследования
Электрофореграмма рестрикционных фрагментов специфических ампликонов.
1,13 – Ladder 100, 2,12 – Ladder 50, 3-11– рестрикционные фрагменты ДНК
соответствующие аллелям:
3, 5, 8, 9,10, 11 – PlA1/ PlA1; 4 – PlA2/ PlA2; 6,7 – PlA1/ PlA2.
Методы исследования
Компьютерная морфометрическая установка МЕКОС-Ц
(ЗАО «Медицинские компьютерные системы» г. Москва).
• Геометрические характеристики тромбоцитов: площадь
клетки, диаметр клетки, фактор формы, поляризация
клетки,
• Цветояркостные характеристики тромбоцитов: доля
синего и красного цвета в препарате, индекс омоложения
тромбоцитов (ИОТр).
Геометрические и оптические характеристики
тромбоцитов у родильниц и их новорожденных детей
(X±m; р<0,05)
Показатели, единицы
измерения
Здоровые
С тромбо-геморрагическими
осложнениями
Матери
1 группа
(n=128 чел.)
Новорожденные
2 группа
(n=128 чел.)
Матери
3 группа
(n=39 чел.)
Новорожденные
4 группа
(n=39 чел.)
Средний диаметр Тр,
мкм
2,20±0,12
2,28±0,14
2,56±0,11*
3,31±0,15**
Площадь Тр, мкм2
3,91±0,4
4,26±0,52
5,47±0,49*
10,7±0,03**
Фактор формы, у.е.
13,0±0,17
15,01±0,71
14,16±0,16*
20,25±1,34**
Доля синего цвета, у.е.
0,34±0,02
0,29±0,01
0,46±0,02*
0,40±0,02**
Доля красного цвета,
у.е.
0,35±0,01
0,38±0,003
0,29±0,01*
0,32±0,01**
ИОТр, у.е.
0,98±0,08
0,78±0,20
1,63±0,11*
1,24±0,07**
Поляризация, у.е.
0,16±0,02
0,20±0,03
0,17±0,03
0,27±0,04
*-достоверность различий в 1 и 3 группах;
**-достоверность различий в 2 и 4 группах.
Геометрические характеристики тромбоцитов у родильниц и их
новорожденных детей (X±m; р<0,05)
Средний диаметр Тр
**
3,5
3
Площадь Тр
**
16
***
14
12
2,5
2
PlA1/ PlA1
10
PlA2/ PlA2
8
1,5
*
PlA2/ PlA2
PlA1/ PlA1
6
1
4
2
0,5
0
0
матери
матери
дети
Фактор формы
40
35
30
**
*
25
PlA2/ PlA2
20
PlA1/ PlA1
15
10
5
0
матери
дети
дети
Оптические характеристики тромбоцитов у родильниц и их
новорожденных детей (X±m; р<0,05)
Доля синего цвета
0,9
0,8
Доля красного цвета
0,8
*
0,7
0,7
**
*
**
0,6
PlA2/ PlA2
0,6
PlA2/ PlA2
0,5
PlA1/ PlA1
PlA1/ PlA1
0,5
0,4
0,4
0,3
0,3
0,2
0,2
матери
матери
дети
Индекс омоложения тромбоцитов
3
2,5
*
**
2
PlA2/ PlA2
1,5
PlA1/ PlA1
1
0,5
0
матери
дети
дети
Заключение
• Таким образом, можно предположить, что наличие
мутации в гене рецепторов Тр GP IIb/IIIa (P1A2/P1A2)
матерей, оказывает влияние на морфо-функциональную
активность клеток их детей, что выражается в изменении
геометрических и цветояркостных параметров Тр и может
способствовать развитию опасных для жизни
тромбогеморрагических осложнений или более тяжелому
протеканию периода ранней постнатальной адаптации.
• А лабораторный контроль показателей Тр в раннем
постнатальном периоде у новорожденных от матерей с
тромботическими осложнениями в анамнезе, вероятно,
может быть использован для оценки риска возникновения
тромбогеморрагических осложнений.
БЛАГОДАРЮ ЗА ВНИМАНИЕ !