1+ - Орловский противотуберкулезный диспансер

Лабораторная
диагностика туберкулеза
Н.В. Свечникова
Врач бактериолог
БУЗ Орловской области ОПТД
Род Mycobacterium включает в настоящее
время около 100 видов, как патогенных,
так и непатогенных.
Большинство из представителей
этого рода относятся к
сапрофитным микроорганизмам, и
лишь незначительное их число
имеет клиническое значение.
К патогенным видам относятся
возбудители туберкулеза у человека и
животных, а также возбудитель проказы.
Остальные представители рода Mycobacterium
относятся либо к так называемым атипичным
микобактериям, либо являются сапрофитами,
которые широко распространены в природе.
Атипичные микобактерии, классифицируемые как
нетуберкулезные, вызывают в организме людей и
животных те или иные патологические изменения, и по
биологическим качествам и клинической значимости
занимают среднее место между типичными
микобактериями туберкулеза и сапрофитными
микобактериями.
Разделение клинически
значимых микобактерий на
комплексы:
 комплекс M. tuberculosis - комплекс бактерий,
вызывающих туберкулез
(M. tuberculosis, M. bovis,
M. microti, M. canetti)
 комплекс M. avium
(M. avium, M. intracellulare)
 комплекс M. Fortuitum
 комплекс M. terrae
M. bovis BCG, M. africanum,
Микобактерии туберкулеза
относятся к роду Mycobacterium.
Характерной особенностью микроорганизмов,
относящихся к этому роду, является наличие
чрезвычайно устойчивой к внешним
воздействиям гидрофобной клеточной стенки.
Ее высокая гидрофобность в значительной
степени обусловлена наличием остатков
миколовых кислот в ее пептидогликолипидном
слое.
Характерными особенностями
микобактерий туберкулеза
являются:
 Способность к кислотоустойчивому
окрашиванию
(используется при специфической окраске
диагностического материала при микроскопии)
 Устойчивость к кислотам и щелочам
(используется при селективной обработке
диагностического материала с целью элиминации
нетуберкулезной микрофлоры перед посевом)
 Длительный цикл развития
Микобактерии туберкулеза
обладают значительной
устойчивостью к воздействию
факторов окружающей среды холоду, теплу, влаге, свету.
Однако некоторые виды физического
и химического воздействия приводят
к гибели микобактерий.
Количество аэрозольных
частиц
Образование аэрозоля при
кашле, разговоре, пении.
50000
40000
30000
20000
10000
0
Кашель
Разговор
Пение
На сегодняшний день микробиологические
методы исследования являются
основными в диагностике туберкулеза.
Основными методами
выявления возбудителя
туберкулеза являются
традиционные
микробиологические методы микроскопия мазка и
культуральные исследования
(посев).
Бактериологическая диагностика ТБ у
впервые выявленных больных
(Орловская обл., 2011 г.)
(265 впервые выявленных случаев туберкулеза
легких)
28%
3%
47%
22%
М+П+
М+П-
М-П+
М-П-
Характеристика
микроскопического метода
исследования
Микроскопические методы исследования
играют очень важную роль в выявлении и
диагностике туберкулеза:
 Диагностика туберкулеза легких
бактериоскопическим методом проста,
достаточно эффективна, экономически
выгодна, так как не требует особого
оборудования и химических реактивов.
 Преимуществом бактериоскопического
метода исследования является также
быстрота получения результата.
 Данный метод позволяет в короткие сроки
выявить наиболее эпидемически опасных
больных туберкулезом.
Первичное выявление больных туберкулезом в РФ методом
Циля-Нильсена осуществляется как в клиникодиагностических лабораториях общей лечебной сети,
так и в учреждениях противотуберкулезной службы.
Основная масса впервые заболевших туберкулезом
выявляется по обращаемости, т. е. среди лиц,
обратившихся за медицинской помощью из-за
появившихся различных клинических симптомов.
В
связи с этим при наличии у больного кашля, выделения
мокроты и лихорадочного состояния в течение 3-х и более
недель необходимо проведение микроскопического
исследования мазка мокроты, окрашенного по методу
Циля-Нильсена в клинико-диагностических лабораториях и
больницах общего профиля.
Микроскопия КУМ
Чувствительность
25-65% случаев с посевом+
Специфичность
> 98%
Порог обнаружения
5-10 x 103 КУМ/мл
Кумулятивная отдача
микроскопии мазка КУМ
> 95 %
1й мазок КУМ
80-82 %
2й мазок КУМ
10-14 %
3й мазок КУМ
5-8 %
Важно исследовать 3 образца!
Цель диагностики туберкулеза –
своевременное выявление очага инфекции
К основным задачам учреждений ОЛС относятся:
•заподозрить туберкулез
•качественно организовать сбор диагностического
материала до начала лечения
•организовать трехкратное исследование мокроты методом
микроскопии в КДЛ
•своевременно направить материал для культуральной
диагностики в специализированное противотуберкулезное
учреждение
Причины низкой чувствительности
методов микроскопического
исследования
 1. необоснованность назначения
 2. низкое качество диагностического
материала
 3. плохая подготовка мазков мокроты
 4. ошибки в их окрашивании
 5. неисправный или плохого качества
микроскоп
Качество диагностического
материала
 Результативность бактериоскопического
исследования непосредственно зависит от
качества диагностического материала,
поэтому необходимо строго следить за тем,
чтобы в лабораторию на исследование была
доставлена мокрота, а не слюна
 Материал в виде слюны следует
выбраковывать на этапе сбора мокроты,
слюна не должна поступать в лабораторию
и подвергаться микроскопическому
исследованию
ЗАВИСИМОСТЬ ПОЛОЖИТЕЛЬНОГО
РЕЗУЛЬТАТА МИКРОСКОПИИ МАЗКА ОТ
КАЧЕСТВА ИССЛЕДУЕМОГО ОБРАЗЦА
Амбулаторная служба *
Вид
образца
Слюна
Всего
%
Положительные
%
1125
32.9
21
1.8
Слизь
1707
49.9
68
3.5
583
17.2
220
37.7
Слизистогнойная
L.POLLAK & R.URBANCZIK, Bol Inform Inst Nac Tuberc (Caracas) 2:1969,5 - 8
Сбор диагностического
материала.
Сбор мокроты для исследования
на кислотоустойчивые
микобактерии - весьма
ответственный этап
диагностической процедуры,
от четкости проведения
которого во многом зависит
результат исследования.
Контейнеры для сбора
мокроты
Режимы обследования
 Существует несколько схем
организации обследования
пациента методом микроскопии
при выявлении туберкулезной
инфекции
 Желательно собирать утреннюю
порцию мокроты в течение трех
дней последовательно
Подбор пациентов для
обследования.
Целесообразный подбор пациентов для
обследования (при наличии у них
симптомов, подозрительных в отношении
туберкулезной инфекции) позволяет
значительно повысить эффективность
микроскопического исследования
При правильном подборе групп подозреваемых
на туберкулез для обследования методом
микроскопии эффективность выявления
в лаборатории составляет 5-20%, то есть
из 100 обследованных выявляется 5-20
положительных по мазку пациентов
Группы пациентов, подлежащих
обследованию в первую очередь:
 С симптомами кашля более 3-х недель
 С субфебрильной температурой
 В состоянии пониженного питания
 Дети и подростки из групп риска по заболеванию
туберкулезом (IV и VI группы диспансерного учета)
 С рентгенологическими изменениями в легких
ТОЛЬКО ПРИ НАЛИЧИЕ КАШЛЯ С
МОКРОТОЙ!!!
Это крайне важно с эпидемической точки зрения, так
как больной с неустановленным диагнозом
“туберкулез” наиболее контагиозен
Наличие туберкулеза легких с
положительным мазком в зависимости
от длительности кашля пациента
Д.Р. НАГПОЛ и другие, ВОЗ/TБ/Информация для лаборантов / 68.63
Длительность Кол-во человек
кашля
Количество
случаев ТБ
легких с положит.
мазком
< 14 дней
241
1
> 14 дней
381
43
Эффективность работы ОЛС в
выявлении больных туберкулезом с
бактериовыделением.
Доля впервые выявленных больных туберкулезом легких с
микроскопией плюс, выявленных в учреждениях ОЛС
55,3%
51,8%
49,3%
43,8%
45,8%
57,1%
55,1%
54,6%
48,4%
48,2%
44,4%
42,8%
32,2%
1999г. 2000г.
2001
2002
2003
2004
2005
2006
2007
2008
2009
2010
2011
Из микробиологических
методов диагностики
основным остается
диагностика туберкулеза с
использованием стандартных
питательных сред:
1. Ливеншнейна-Йенсена
2. Финн - 2
Учет результатов посева.
Интенсивность роста обозначают по 3-х балльной
системе
(1+) —
1 – 20 КОЕ
(“скудное” бактериовыделение);
(2+) —
21 – 100 КОЕ (“умеренное” бактериовыделение);
(3+) —
> 100 КОЕ
(“обильное” бактериовыделение).
Непременным условием для
бактериологической лаборатории
является определения ЛЧ к
стандартизированным препаратам
первого ряда: H,R,E,S
и
второго ряда:K,Cap,OFL
Ускоренные методы лабораторной
диагностики туберкулеза и лекарственной
устойчивости
 Автоматическая система
BACTEC MGIT 960
 Анализатор GeneXpert
 ПЦР диагностика
Автоматизированная система
BACTEC MGIT 960.
Анализатор GeneXpert
Анализатор GeneXpert
Благодарю за внимание!