Лабораторная диагностика муковисцидоза

Генодиагностика
наследственных
заболеваний
Наследственные заболевания,
диагносцируемые в настоящее
время:
•Муковисцидоз
•Фенилкетонурия
•Спинальная амиотрофия
•Адрено-генитальный
синдром
•Нейросенсорная тугоухость
2
Муковисцидоз
Cystic Fibrosis – широко распространенное
наследственное заболевание, обусловленное
мутацией гена CFTR, характеризующееся
поражением экзокринных
желез жизненно важных
органов и систем и
имеющее тяжелое
течение и прогноз
3
Распространенность
• Европа и Северная Америка –
1:2000 – 1:4000 новорожденных
• Россия – в среднем 1:4900 новорожденных
• Каждый 62-й житель северо-западного
региона России – носитель мутации в гене
CFTR
4
CFTR
• Ген CFTR открыт в 1989г. В нем известно более 2500
мутаций
• Белок CFTR (cystic fibrosis transmembrane
conductance regulator) – транспорт ионов хлора
5
Частота встречаемости мутаций
CFTR в России (%)
0,4
delF508
29,6
CFTR del2,3 (21kb)
0,5
G542X
0,7
W1282X
1,8
3849+10kbC->T
1,8
2143 delT
1,9
2184insA
1,9
R334W
2
1677delTA
6,4
394 delTT
53
6
другие мутации (не >
0,4% каждая)
Наследование муковисцидоза
Аутосомнорецессивный
тип
наследования
7
Ребенок больной муковисцидозом
8
Клиническая картина
• Легочная форма (15-20%):
–
–
–
–
Частые ОРВИ, пневмонии
Частый непродуктивный приступообразный кашель
Одышка, цианоз, пальцы в виде «барабанных палочек»
Хроническое «легочное сердце», сердечно-легочная
недостаточность
– Диффузный пневмофиброз (пневмосклероз), бронхоэктазы
• Кишечная форма (10%):
–
–
–
–
–
–
Мальадсорбция
Метеоризм
Мекониальный илеус (синдром интестинальной обструкции)
Синдром «сгущения желчи»
Гепатофиброз, билиарный цирроз
Кистофиброз поджелудочной железы
• Смешанная форма (75-80%)
9
Нарушения репродуктивной
системы
Мужчины:
Отсутствие, атрофия или обструкция
семенного канатика
азооспермия
Женщины:
Повышенная вязкость цервикального
секрета
затруднение миграции
сперматозоидов
10
Методы диагностики
муковисцидоза
• Семейный анамнез
• Клиническая картина:
– Начало заболевания в раннем возрасте
– Прогрессирующее течение
– Характерное поражение бронхо-легочной и пищеварительной
системы
– Бесплодие или снижение фертильности
• Лабораторная диагностика:
– Тест на иммунореактивный трипсин (ИРТ) (1970-е гг)
– «Потовый тест» (L.E.Gibson и R.E.Cooke, 1959 г )
– Генодиагностика
11
Лабораторная диагностика
муковисцидоза
С 1 января 2007 г. во всех субъектах РФ в рамках
национального проекта “Здоровье” внедрен
массовый скрининг новорожденных на МВ
Протокол скрининга на МВ включает четыре
этапа:
1. ИРТ (чувствительность - 85–90 %, неспецифичный)
2. Повторный ИРТ на 3-4 нед. жизни
3. «Потовый тест»
4. Генодиагностика
12
Потовый тест
(L.E.Gibson и R.E.Cooke, 1959г)
Потовый тест – «золотой стандарт» прижизненной
диагностики муковисцидоза:
• Определение концентрации Na и Cl в потовой
жидкости
• Нормальные значения «потового теста» от 20 до
40 ммоль/л
• Диагностическое значение - >60 ммоль/л
•1 – 2 % больных имеют нормальные результаты
«потового теста»
13
Недостатки потового теста
• Сложность выполнения
• Недостаточная чувствительность – ложноотрицательные
результаты (при: лечении антибиотиками, Клоксациллином; наличии
безбелковых отеков)
• Недостаточная специфичность – ложноположительные
результаты при различных заболеваниях (Гипотиреоз,
Адреногенитальный синдром, Семейный гипопаратиреоз,
Гипогаммаглобулинемия, Целиакия, ВИЧ-инфекция и др.)
• Необходимость повторного анализа
• Невозможность пренатальной диагностики
• Не выявляются носители мутаций
14
Генодиагностика
Выявление наиболее типичных для популяции мутаций в гене
CFTR методом ПЦР-реакции
Показана:
•Всем парам европейской популяции
•Парам, один или оба партнера в которой евреи по
национальности
•Пациентам, имеющим в семье случаи муковисцидоза
•Пациентам с хронической бронхолегочной патологией (ХОБЛ,
хр. бронхиты), желчнокаменной болезнью и планирующим
беременность
•Пациентам с азооспермией неясной этиологии
ДНК-диагностика проводится обоим
партнерам
15
Преимущества генодиагностики
• Высокая чувствительность и
специфичность
• Выполняется 1 раз в жизни
• Выявляются носители мутаций
16
Преимущества генодиагностики
Выявление носителей мутаций позволяет:
Определить риск развития заболевания у
будущих детей
Начать своевременное лечение
Увеличить
продолжительность
жизни
Облегчить течение
заболевания
17
Перспективы:
Средняя продолжительность жизни больных МВ
Открыт
ген CFTR
Возраст
ИРТ тест
РАМН предложены
рекомендации по
генетическому
тестированию
Потовый
тест
18
Выводы:
• Правильный ранний диагноз МВ (позволяет
избежать ненужных, обременительных, дорогостоящих
диагностических и терапевтических мероприятий)
• Ранняя адекватная терапия (улучшает течение
и прогноз, позволяет избежать необратимых
бронхолегочных осложнений, гипотрофии)
• Повышение качества жизни больных МВ
• Доступность пренатальной диагностики
(генодиагностика позволяет уменьшить количество новых
больных МВ)
19
Спасибо за внимание!
Группа компаний «МедЛаб»
www.medlabspb.ru