Хромогенный агар для колиформных бактерийx

advertisement
Хромогенный агар для колиформных бактерий
HiCrome Coliform Agar w/SLS
Хромогенный агар для колиформных бактерий
M1300
HiCrome Coliform Agar рекомендуется для одновременного обнаружения Escherichia coli и других
колиформных бактерий в образцах пищевых продуктов и воды.
Состав*:
Ингредиенты
грамм/литр
Пептон специальный
3,0
Натрия хлорид
5,0
Натрия гидрофосфат
3,0
Калия дигидрофосфат
1,7
Натрия пируват
1,0
L-Триптофан
1,0
Натрия додецилсульфат
0,1
Хромогенная смесь
0,2
Агар-агар
12,0
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0.2
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 27,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного
растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Если
ожидается присутствие в исследуемом материале большого количества грамположительных
бактерий, то перед автоклавированием добавить в среду 5 мг/л новобиоцина.
Принцип и оценка результата:
HiCrome Coliform Agar является селективной средой, рекомендуемой для одновременного
обнаружения Escherichia coli и общего числа колиформных бактерий в образцах пищевых
продуктов и воды.
Специальный пептон и пируват натрия удовлетворяют потребности бактерий в необходимых
факторах роста. Фосфаты обеспечивают буферность среды. Состав среды обеспечивает быстрый
рост даже поврежденных бактерий. Додецилсульфат натрия подавляет рост грамположительных
бактерий.
Хромогенная смесь содержит два хромогенных субстрата: Salmon-GAL и X-глюкуронид.
Микробная β-D-галактозидаза расщепляет Salmon-Gal, что приводит к окрашиванию колоний
колиформных бактерий в оранжево-красный цвет. Вырабатываемая кишечной палочкой β-Dглюкуронидаза расщепляет X-глюкуронид. E.coli образует колонии, окрашенные в темно-синий
(до фиолетового) цвет из-за одновременного расщепления Salmon-GAL и X-глюкуронида.
Добавление наряду с двумя хромогенами триптофана улучшает продукцию индола, повышая
надежность обнаружения бактерий. Для подтверждения обнаружения E. coli следует нанести
реагент Ковача на темно-синюю или фиолетовую колонию. Развитие вишнево-красного
окрашивания расценивают как положительную реакцию.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок бежевого цвета.
Плотность готовой среды:
По плотности соответствует 1,2 % агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий бесцветный гель.
Кислотность среды:
При 25°С 2,70%-й (вес/об) водный раствор имеет рН 6,8 ± 0.2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч (при необходимости – 48 ч) при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов
(ATCC)
Цвет колоний
SalmonGAL
Escherichia coli (25922)
Темно-синие или
+
XИндол
глюкуронид
+
+
фиолетовые
Enterobacter cloacae (13047)
От оранжевого до
красного
+
-
-
Citrobacter freundii (8090)
От оранжевого до
красного
+
-
-
Klebsiella pneumoniae (13883)
Розоватые
+
-
-
Salmonella серовар Enteritidis
(13076)
Бесцветные
-
-
-
Shigella flexneri (12022)
Бесцветные
-
-
-
Enterococcus faecalis (29212)
Рост отсутствует
-
-
-
Примечание: “+” - положительная реакция; “-” - отрицательная реакция.
Ссылки:
1.
2.
3.
4.
Frampton E.W., Restaino L. and Blaszko N. 1988, J.Food Prot., 51:402.
Kilian M. and Bulow P. 1976, Acta Pathol. Microbiol. Scand., Sect.B, 84:245.
Le Minor L. and Hamida F. 1962, Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102:267.
Manafi M. and Kneifl W. 1989, Zentralbl. Hyg., 189:225.
Условия и сроки хранения:
Хранить порошок при температуре ниже 8°С в плотно закрытой таре.
Использовать до даты, указанной на этикетке.
Download