Modified Buffered Charcoal Agar Base Основа забуференного

Modified Buffered Charcoal Agar Base
Основа забуференного угольного агара модифицированная
M892
Эта среда используется для выделения и культивирования легионелл из клинического
материала.
Состав**:
Ингредиенты
грамм/литр
Протеозопептон
Уголь активированный
Буфер ACES
Калия альфа-кетоглютарат
Агар-агар
10,00
2,00
10,00
1,00
17,00
Конечное значение рН (при 25ºС) 6,9 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 20,0 г порошка в 500 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для
полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в
течение 15 мин. Остудить до температуры примерно 50ºС и асептично добавить
предварительно регидратированную селективную добавку для легионелл (содержимое 1
пузырька Legionella Supplement, FD041). Для придания селективных свойств внести в
среду растворенное в воде содержимое 1 пузырька с добавкой MWY (FD040). Тщательно
перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри при постоянном помешивании,
чтобы равномерно распределить частицы угля.
Принцип и оценка результата:
Эта среда предложена для выделения и культивирования легионелл из клинического
материала и объектов внешней среды (1, 2).
Протеозопептон обеспечивает присутствие в среде азотистых питательных веществ. LЦистеин является важной аминокислотой, а пирофосфат железа – источником ионов
железа. Альфа-кетоглютарат стимулирует рост легионелл. Активированный уголь
разлагает токсичную для этих бактерий перекись и связывает двуокись углерода, изменяет
поверхностное натяжение среды. Буфер ACES обеспечивает рН на оптимальном для
легионелл уровне. Селективная добавка MWY (3) содержит антибиотики, позволяющие
выделять легионеллы, т.к. они подавляют рост других грамотрицательных
микроорганизмов.
Дифференциация
осуществляется
за
счет
индикаторов
бромкрезолового пурпурного и бромтимолового синего, которые окрашивают колонии.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий серый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,7%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет черную окраску, непрозрачна, если в чашках Петри формируется
гель.
Кислотность среды:
При 25ºС водный раствор (4,0% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов при 35ºС через …
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Цвет колоний (3-5 дней)
Цвет колоний (5-7 дней)
Legionella pneumophilia (33153)
Legionella dumoffii (33343)
Legionella bozemanii
Legionella miedadei
Legionella gormanii
Legionella longbeachae
Legionella jordans
Хороший
Хороший
Хороший
Хороший
Хороший
Хороший
Хороший
Почти белые
Зеленые
Ярко-зеленые
Сине-серые
Зеленые
Светло-зеленые
Светло-зеленые
Зеленые
Интенсивно-зеленые
Синие
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.