Giolitti Cantoni Broth Base

Giolitti Cantoni Broth Base
Основа бульона Жиолитти-Кантони
M584
Этот бульон с добавлением теллурита калия используют для селективного обогащения
Staphylococcus aureus в материале от персонала «пищевых» объектов.
Состав**:
Ингредиенты
Гидролизат казеина
Мясной экстракт
Дрожжевой экстракт
Маннит
Натрия хлорид
Лития хлорид
Глицин
Натрия пируват
грамм/литр
10,00
5,00
5,00
20,00
5,00
5,00
1,20
3,00
Конечное значение рН (при 25ºС) 6,9 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 54,2 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (осторожно) для
полного растворения частиц. Разлить по 19 мл в пробирки для тестирования (20 мм х 200
мм). Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Быстро
остудить до комнатной температуры и асептично добавить в каждую пробирку по 0,3 мл
3,5%-ного раствора теллурита калия (FD047). Для тестирования мяса и мясных продуктов
добавить 0,03 мл раствора. Тщательно перемешать перед использованием.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ: хлорид лития ядовит. Избегать прикосновения и вдыхания паров.
При попадании на кожу немедленно смыть большим количеством воды.
Принцип и оценка результата:
Основу бульона предложили Giolitti и Cantoni (1), а Mossel и соавт. (2) рекомендовали
использовать его для определения Staphylococcus aureus в сухом детском молоке и других
пищевых продуктах для малышей, где не допускается наличие стафилококка при
испытании 1 г продукта. Комитетом ISO (3) он рекомендован также для проверки мяса и
мясных продуктов.
Маннит и пируват натрия действуют в качестве стимуляторов роста для стафилококков,
что важно при низкой концентрации клеток в материале (4). Хлорид лития подавляет рост
грамотрицательных бактерий, ферментирующих лактозу (5). Теллурит калия и глицин
подавляют рост грамположительных бактерий. Добавление стерильного вазелинового
масла поверх засеянной среды подавляет рост микрококков, т.к. создаются анаэробные
условия. Концентрация теллурита калия должна уменьшаться в соответствии с массой
исследуемого образца (0,1–0,01 г). Желательно засевать среду как можно скорее после
остывания, так как она насыщается кислородом при хранении и если посевы делают
позже, может потребоваться выдерживание пробирок в течение 15-20 мин в струе пара.
В 2 пробирки с бульоном засевают по 1 г или 1 мл соответствующего разведения образца.
Поверх среды вносят 5 мл стерильного вазелинового масла и инкубируют при 37ºС в
течение 24-48 ч с ежедневном просмотром результатов. Почернение среды (обычно у дна
пробирки) в течение указывает на присутствие Staphylococcus aureus. Из «почерневших»
пробирок материал высевают штрихами на Агар Бэйд-Паркера (М043), на котором
стафилококк образует черные колонии, окруженные прозрачными зонами (6).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25ºС водный раствор (5,42% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 37ºС.
Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
Staphylococcus aureus (25923)
Обильный
Escherichia coli (25922)
Подавляется
Micrococcus luteus (10240)
Подавляется
Примечание: + = почернение среды (у дна или по всей среде в пробирке).
Реакция*
+
–
–
Ссылки:
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.