Лизиновый бульон

Лизиновый бульон
Lysine Decarboxylase Broth / without Peptone
M376 / M376I
Лизиновый бульон / Лизиновый бульон без пептона
Эту среду используют для дифференциации сальмонелл, цитробактеров и других
энтеробактерий.
Состав**:
M376
M376I
Ингредиенты
грамм/литр грамм/литр
Пептический перевар животной ткани
5,00
–
Дрожжевой экстракт
3,00
3,00
Глюкоза
1,00
1,00
L-Лизина гидрохлорид
5,00
5,00
Бромкрезоловый пурпурный
0,02
0,02
Конечное значение рН (при 25°С) 6,8 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 14,0 г порошка М376 или 9,0 г порошка М376I в 1000 мл дистиллированной
воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить по 5 мл в пробирки с
завинчивающимися крышками. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в
течение 15 мин.
Принцип и оценка результата:
Эту среду впервые предложил Фальков (1). Затем ее модифицировал Тейлор (2), удалив
из прописи пептон (пептический перевар животной ткани), за счет которого наблюдались
ложноположительные результаты у Citrobacter freundii и близких микроорганизмов.
Утилизация пептона приводит к выделению аммиака, имеющего щелочную реакцию,
которая маскирует отрицательный результат теста (отсутствие лизиндекарбоксилазы).
Недавно международный комитет (3) рекомендовал использовать модификацию Тейлора,
поскольку она имеет преимущества, по сравнению с модификацией Мюллера (не
требуется соблюдения специальных условий: анаэробиоз и низкие значения рН).
В начальном периоде инкубирования микроорганизмы ферментируют глюкозу с
образованием кислых продуктов, что сопровождается изменением цвета индикатора на
желтый. В дальнейшем если происходит декарбоксилирование лизина с образованием
кадаверина, развивается щелочение среды этим амином и среда снова становится
пурпурной. Если цвет среды остается желтым, это указывает на отсутствие
декарбоксилазной активности у микроорганизма.
Пептический перевар животной ткани и дрожжевой экстракт служат источником
необходимых питательных веществ для роста бактерий. Глюкоза – ферментируемый
субстрат, бромкрезоловый пурпурный – индикатор рН. Рекомендуется использовать
небольшой инокулюм и учитывать результаты не ранее 24 ч после посева, а в
сомнительных случаях – в течение 4 суток.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий зеленовато-желтый порошок.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет лиловую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М376 (1,4% вес/об) и М376I (0,9% вес/об) имеют рН 6,8 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) Лизин на среде М376 Лизин на среде М376I
Escherichia coli (25922)
–
–
Citrobacter freundii (8090)
+*
–
Enterobacter aerogenes (13048)
+
+
Klebsiella pneumoniae (13883)
+
+
Salmonella paratyphi А
–
–
Salmonella typhi (6539)
+
+
Salmonella enterica ssp. arizonae
+
+
Serratia marcescens (8100)
+
+
Proteus vulgaris (13315)
–
–
Proteus mirabilis (25933)
–
–
Shigella dysenteriae (13313)
–
–
Примечания:
"+" - положительная реакция, пурпурный цвет;
"–" - отрицательная реакция, желтый цвет или цвет не изменен;
"+*" - ложноположительная реакция.
Ссылки:
1. Falkow S., 1958, Am. J. Clin. Pathol., 29:598.
2. Taylor W.I., 1961, Appl. Microbiol., 9:487.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 6579.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на
этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.