Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Ставропольский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Кафедра физики, математики и биотехнологии УТВЕРЖДАЮ: Заведующий кафедрой физики, математики и биотехнологии ___________________________Е.И. Дискаева 31 августа 2015 г МЕТОДИЧЕСКОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ВНЕАУДИТОРНОЙ РАБОТЫ ПО ДИСЦИПЛИНЕ «Генетическая инженерия и протеомика» Направление подготовки 19.03.01 - Биотехнология Профиль подготовки – Технология лекарственных препаратов Квалификация (степень) «бакалавр» Форма обучения - очная г. Ставрополь 2015 г. 1. Вопросы, выносящиеся на самостоятельное изучение (внеаудиторная работа) № п/п 1. Кол-во Коды часов формируемых компетенций Раздел 1. Генетическая инженерия и ее инструменты 1. Использование вирусов 1. Работа с литературными 12 ОПК-2, ПК-3. источниками для переноса генов в 2. Ответы на контрольные растения. вопросы 2. Типы генетических 3. Выполнение творческих библиотек. заданий 3. Анализ генетических 4. Подготовка докладов, библиотек. сообщений 4. Микроорганизмы, 5. Ответы на тесты используемые в генетической инженерии. 5. Взаимосвязи векторхозяин. 6. Экспрессия и повышенная продукция рекомбинантных белков в микробных клетках. 7. Проблемы гетерологичной экспрессии. 8. Причины возможной неидентичности генноинженерных белков и их природных аналогов. 9. Конструирование in vivo гибридных вирусов простого герпеса. 10. Разработка живых вакцин на основе герпесвирусов животных 11. HSV-ампликоны. 12. Генетическая организация дрожжей-сахаромицетов. 13. Плазмиды. 14. Плазмидная трансформация клеток дрожжей. 15. Молекулярные векторы Saccharomyces cerevisiae. 16. Экспрессирующие векторные системы S. Cerevisiae. 17. Секреция чужеродных белков из клеток S. Сerevisiae. 18. Продукция чужеродных белков S. Cerevisiae. Наименование разделов дисциплины Виды самостоятельной работы 2. 19. Двухгибридная система дрожжей. 20. Коринеформные бактерии. 21. Проблемы синтеза в бактериях эукариотических белков. 22. Микроорганизмы, используемые в генетической инженерии. 23. Методы сайтнаправленного мутагенеза. 24. Методы определени нуклеотидной последовательности ДНК. 25. Клонирование и идентификация клонированных ДНК. 26. Определение нуклеотидной последовательности по Максему-Гилберту, Сэнджеру Раздел 2. Основы протеомики 1. Работа с литератур1. Проблемы современной ными источниками протеомики. 2. Ответы на контрольные вопросы 3. Выполнение творческих заданий 4. Подготовка докладов, сообщений 5. Ответы на тесты 12 ОПК-3 Раздел 3. Молекулярная диагностика и современные проблемы белковой инженерии 3. 1. Топология репликации. 1. Работа с литератур12 ПК-3 2. Проблемы денатурации ными источниками ДНК матрицы. 2. Ответы на 3. Геликазы. контроль-ные вопросы 4. Топоизомеразы. 3. Выполнение 5. Современная схема творче-ских заданий репликации ДНК E. Сoli. 4. Подготовка докла6. Особенности репликации дов, сообщений ДНК эукариот. 5. Ответы на тесты 7. Полирепликонность. 8. Проблема репликации концов линейных молекул. 9. Репарация. 10. Причины ошибок при синтезе ДНК. 11. Этапы проверки точности синтеза ДНК. 12. Основные репарабельные повреждения в ДНК и принципы их устранения. 13. Апуринизация. 14. Дезаминирование. 15. Тиминовые димеры 16. Общая характеристика гистонов. 17. Четыре уровня компактизации ДНК. 18. Классификация генов в геноме. 19. Основы метода ренатурации ДНК. 20. Быстрые повторы. 21. Умеренные повторы. 22. Уникальные гены. 23. Классификация генов. 24. Нестабильность генома. 25. Обратная транскрипция. 26. Классы мобильных генетических элементов. 27. IS- элементы. 28. Tn-транспозоны. 29. Умеренные фаги. 30. Эффекты, вызываемые мобильными элементами. 31. Молекулярные основы канцерогенеза. 4. Экзамен 36 ОПК-2, ОПК-3, ПК-3 2. Оценочные средства 2.1. Примеры оценочных средств для текущего контроля Примеры тестовых заданий Задание 1 – на выбор одного или нескольких правильных ответов. Какие ферменты необходимы для конструирования рекомбинантных ДНК: 1) рестриктазы; 2) ДНК-лигазы; 3) инвертазы; 4) гидроксилазы Какая из перечисленных технологий является основой генетической инженерии: 1) создание рекомбинантных ДНК; 3) расщепление ДНК на фрагменты; 2) выделение ДНК из организмов; 4) выделение хромосом; 5) получение плазмид; Первая рекомбинантная ДНК была получена в 1) 1956 г. 2) 1972 г. 3) 1983 г. 4) 2002 г. Первую рекомбинантную ДНК получил 1) П. Берг 2) Д. Уотсон 3) Ф. Сэнжер 4) Ф. Мишер Формальной датой рождения генной инженерии считают 1) 1955 г. 2) 1932 г. 3) 1972 г. 4) 2000 г Активное развитие технологии клеточной инженерии приходится на 1) 30-е годы 20 в. 2) 50-е годы 20 в. 3) 70-е годы 20 в. 4) конец 19 века. К векторам, используемым для конструирования рекомбинантных ДНК, относятся: 1) плазмиды 2) бактерии 3) вирусы 4) дрожжи 5) лигазы Какая из перечисленных технологий является основой генетической инженерии: 1) создание рекомбинантных ДНК 2) выделение ДНК из организмов 3) расщепление ДНК на фрагменты 4) выделение хромосом 5) получение плазмид Какие ферменты необходимы для конструирования рекомбинантных ДНК 1) рестриктазы 2) ДНК-лигазы 3) инвертазы 4) гидроксилазы Культура изолированных тканей растений представлена 1) меристематическими тканями 2) каллусными тканями 3) паренхимными тканями 4) опухолевыми тканями Культура изолированных клеток и тканей может быть использована 1) для получения вторичных метаболитов 2) для хлебопечения 3) для клонального микроразмножения растений 4) для производства синтетических волокон Специальным методом, применяемым при культивировании одиночных клеток является: 1) метод гибридизации 2) метод трансформации 3) метод ткани-«няньки» 4) метод центрифугирования Задание 2 – на соответствие Установите соответствие между процессами транскрипции и трансляции и образующимися в результате этих процессов соединениями. Ответ приведите в виде буквы и соответствующей ей цифры. Тип процесса: А. Транскрипция Б. Трансляция Образующиеся соединения: 1. Аминокислоты 2. ДНК 3. РНК 4. Жиры 5. Углеводы 6. Белки Установите соответствие между направлением современной биотехнологии и его биологической основой. Ответ приведите в виде буквы и соответствующей ей цифры. Направление биотехнологии: А. Клеточная инженерия Б. Генетическая инженерия Биологическая основа: 1. Основана на получении гибридных молекул ДНК и введении этих молекул в клетки других организмов 2. Основана на изучении биологических особенностей клеток и внедрении компьютерных методов контроля технологических решений, позволяющих максимально реализовать полезные свойства клеток Задание 3 – на выбор правильной последовательности Укажите правильную последовательность реакций, происходящую при синтезе белка в дрожжевой клетке. Используйте данные слова и словосочетания: – инициация транскрипции – удаление интронов – транскрипция – трансляция – аберрация – сплайсинг Темы рефератов 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. Строение и физико-химические свойства ДНК Характеристика В-формы спирали ДНК Альтернативные формы двойной спирали ДНК Характеристика Z-формы ДНК и ее биологическое значение Суперспирализация ДНК Характеристика ДНК-полимераз E. Coli Характеристика ДНК-полимераз эукариот Секвенирование Экологические риски генной инженерии Биоэтические проблемы генной инженерии Достижения генной инженерии в биотехнологиии Преимущества генной инженерии Преимущества микроклонального размножения растений Медицинские риски использования доситижений генной инженерии Социально-экономические риски генной инженерии 2.2. Примеры оценочных средств для промежуточного контроля Примерные вопросы для самостоятельной работы 1. История возникновения и развития протеомики 2. Современные методы секвенирования ДНК (секвенаторы II и III поколения, их возможности и области применения) 3. Вычислительные и экспериментальные подходы к идентификации генов в геномных последовательностях и определению их функций 4. Синтетическая геномика: достижения и возможности 5. Технология синтезирования искусственных генов Современные методы исследования генома 6. Постгеномные подходы к биологическим исследованиям 7. Суть электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия 8. Двумерный электрофорез, сочетающий разделение белков по молекулярной массе и по изоэлектрической точке 9. Иммуноблоттинг (вестерн-блоттинг) 10. Принципы и методы анализа протеома 11. Технологии, основанные на индикации белков и других биомолекул 12. Подходы к анализу структурно-функциональной организации белковых молекул 13. Белковая инженерия стабильности 14. Анализ фрагментов ДНК и определение полных нуклеотидных последовательностей 15. Построение рестрикционных карт ДНК 16. Методы секвенирования фрагментов ДНК 17. Амплификация фрагментов ДНК с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) 18. Характеристика метода ПЦР и его основные стадии 19. Использование ПЦР в диагностике наследственных заболеваний 20. Генная дактилоскопия 21. Методы рекомбинантных ДНК и культивирования изолированных тканей и клеток 22. Инструменты генетической инженерии 23. Классификации белковых семейств 24. Структурная, функциональная и прикладная протеомика 25. Предсказание функции белков Принципы и методы анализа протеома 26. Рентгеновская кристаллография и ядерно-магнитный резонанс 27. Генетическая паспортизация населения – новая технология профилактики и реабилитации в медицине 28. Методы молекулярно-генетической диагностики Диагностика с использованием метода Fluorescence in situ Hybridization 29. Диагностика с использованием биологических микрочипов Методическое обеспечение современной белковой инженерии 30. Современные подходы моделирования структуры и функции белков 31. Принципы конструирования векторов 32. Клонирование генов 33. Введение молекул ДНК в клетки млекопитающих 34. Использование вирусных геномов в качестве векторов для введения генетической информации в клетки животных 35. Генетическая трансформация клеток млекопитающих 36. Создание трансгенных растений 37. Методы синтезирования в растения чужеродных белков медицинского назначения Критерии оценки итоговой формы контроля – экзамен Оценка уровня освоения общекультурных и профессиональных компетенций ФГОС в результате реализации дисциплины проводится на основе Положения о балльнорейтинговой системе, утвержденном на кафедре, который предусматривает учет: 1) посещаемости лекций и практических занятий; 2) выполнения заданий для самостоятельной работы – написание и защиты реферата и выполнение контрольных заданий; 3) результатов устного опроса по вопросам для проверки выполнения самостоятельной работы. 3. Библиотечно-информационные ресурсы 8.1. Литература а) основная: 1. Биология [Текст]: учеб. для вузов : в 2 т. / под ред. В. Н. Ярыгина. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2012. Т. 1. - 736 с., Т. 2. - 560 с. – 240 экз. 2. Биология. Современный курс. 3-е изд., испр. и доп [Электронный ресурс] / Под ред. А.Ф. Никитина. – СПб.: СпецЛит, 2008. – 494 с. – Режим доступа: http://www.studentlibrary.ru/book/ISBN9785299003741.html 3. Пехов, А.П. Биология: медицинская биология,генетика и паразитология [Текст] :учеб. / А.П. Пехов. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 656 с. – 138 экз. б) дополнительная: 1. Иванова Е.П. Основы микробиологии и биотехнологии [Электронный ресурс]: учеб. пособие / Е.П. Иванова, Т.Е. Дроздова, Н.А. Кустова – Издательство Московского государственного открытого университета, 2010. – 91 с. – Режим доступа: http://www.knigafund.ru/books/148912 (ЭБС «КнигаФонд») 2. Жимулев И.Ф Общая и молекулярная генетика [Электронный ресурс]: учеб. пособие / И. Ф. Жимулев – Издательство: Сибирское университетское издательство, 2007. – 480 с. – Режим доступа: http://www.knigafund.ru/books/18890 (ЭБС «КнигаФонд») 3. Мутовин Г.Р. Клиническая генетика. Геномика и протеомика наследственной патологии [Электронный ресурс]: учеб. пособие / Г.Р. Мутовин – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. –832 с. – Режим доступа: http://www.studentlibrary.ru/book/ISBN9785970411520.html 3.2. Базы данных, справочные и поисковые системы, Интернет-ресурсы, ссылки 1. Медицинская энциклопедия [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://znaiu.ru/ . – Загл. с экрана (дата обращения: 13.05.2014). 2. Каталог файлов. Лекции по биологии [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://oadk.at.ua/load/shpargalka/lekcii_po_biologii/geneticheskaja_inzhenerija/56-1-01815. – Загл. с экрана (дата обращения: 17.03.2014). 3. Научно-образовательный портал [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://www.textronica.com/. – Загл. с экрана (дата обращения: 5.06.2014). Разработчик: Доцент кафедры физики, математики и биотехнологии СтГМУ, к.б.н., доцент __________________ Т.М. Чурилова