Экз. ответы по Микробиологии (инфекция и иммунитет)

ИНФЕКЦИЯ И ИММУНИТЕТ
1. Типы взаимодействия между микро – и макроорганизмами. Различия между
паразитизмом и патогенностью.
Различают следующие типы биотических отношений:
Мутуализм – такая форма сожительства, при которой микроорганизм и его хозяин получают
взаимную выгоду. Например, некоторые виды микроорганизмов, обитая в кишечнике животных,
продуцируют витамины, используемые организмом хозяина для своих метаболических процессов.
Например, кишечная палочка синтезирует витамины группы В и витамин К. еще одним примером
мутуализма может служить сожительство растений с клубеньковыми бактериями, которые
используют для своего питания вещества растений, а растения используют азотистые органические
соединения, синтезированные бактериями из азота воздуха.
Комменсализм – это такая форма сожительства, когда микроорганизм живет за счет хозяина,
пользуется его защитой, но не причиняет ему вреда. Микробы-комменсалы (стафилококки,
стрептококки) населяют в качестве нормальной микрофлоры кожные покровы и слизистые
оболочки животных. Однако в этом случае комменсализм таких микроорганизмов не является
абсолютным. При некоторых условиях представители условно-патогенной микрофлоры могут стать
причиной тяжелых заболеваний.
Паразитизм – такая форма сожительства, при которой микроорганизмы-паразиты получают
питательные вещества за счет тканей хозяина, при этом причиняя ему вред, т.е. вызывают
инфекционное заболевание. При паразитической форме сожительства организмы, ведущие
паразитический образ жизни не способны существовать без организма хозяина. Организм хозяина
является средой обитания для паразитического организма (внешняя среда первого порядка), к
которой паразит адаптируется в процессе эволюции. Эта среда непосредственно влияет на
паразитов, как и паразиты влияют на организм хозяина.
В некоторых случаях, после попадания микроорганизмов в организм хозяина, взаимоотношения
между макро- и микроорганизмом не складываются. Таким образом, микро- и макроорганизм
существуют не влияя друг на друга. Такой вид сожительства называется нейтрализмом.
В некоторых случаях инфекционный процесс вызывается двумя и более возбудителями. Такие
инфекции называются ассоциированными, а сообщества разных видов микроорганизмов,
существующие в естественных или искусственных условиях называются ассоциациями
микроорганизмов. Различают следующие виды микробных ассоциаций:
Синергизм – форма сожительства в микробной ассоциации, для которой характерны одинаковые
физиологические процессы у различных групп микроорганизмов. Результатом жизнедеятельности
такой ассоциации является увеличение количества конечных продуктов жизнедеятельности.
Сателлизм - форма сожительства в микробной ассоциации, для которой характерна стимуляции
роста одного микроорганизма продуктами жизнедеятельности другого.
Антагонизм - форма сожительства в микробной ассоциации, для которой характерно
противоположное действие членов микробной ассоциации. Это сложное взаимоотношение, при
котором бактерии одного вида угнетают, а иногда и полностью уничтожают, других членов
ассоциации. Например, многие штаммы кишечной палочки способны подавлять развитие и
уничтожать стафилококки, сальмонеллы, микобактерии туберкулеза.
1
Паразитизм – форма отношений между двумя организмами разных видов, из которых один,
называемый паразитом, использует другого, именуемого хозяином, как источник питания и место
постоянного или временного обитания. Свойство паразитизма генетически закреплено за видом и
передается по наследству. К паразитам относятся все возбудители инфекционных (из мира
растений) и инвазионных (из мира животных) болезней человека.
Патогенность – видовой признак, передающийся по наследству, закрепленный в геноме
микроорганизма, в процессе эволюции паразита, т. е. это генотипический признак, отражающий
отенциальную возможность
потенциальную возможность микроорганизма проникать в макроорганизм (инфективность) и
размножаться в нем (инвазионность), вызывать комплекс патологических процессов, возникающих
при заболевании. Фенотипическим признаком патогенного микроорганизма является его
вирулентность, т.е. свойство штамма, которое проявляется в определенных условиях (при
изменчивости микроорганизмов, изменении восприимчивости макроорганизма и т.д.).
2. Понятие об инфекционном процессе. Основные факторы, обуславливающие развитие
инфекционного процесса.
Термин инфекция или синоним инфекционный процесс обозначает совокупность
физиологических и патологических восстановительно-приспособительных реакций, возникающих в
восприимчивом макроорганизме при определенных условиях окружающей внешней среды в
результате его взаимодействия с проникшими и размножающимися в нем патогенными или условно-патогенными бактериями, грибами и вирусами и направленных на поддержание постоянства
внутренней среды макроорганизма (гомеостаза). Сходный процесс, но вызванный простейшими,
гельминтами и насекомыми — представителями царства Animalia, носит название инвазия.
В основе инфекционного процесса лежит феномен паразитизма, т. е. такой формы взаимоотношений между двумя организмами разных видов, при которой один из них, называемый
паразитом, использует другого, называемого хозяином, в качестве источника питания и как место
постоянного или временного обитания, причем оба организма находятся между собой в
антагонистических отношениях. В отличие от сапрофитического образа существования
паразитизм — это жизнь в живой среде. Неотъемлемым критерием паразитизма является
патогенное воздействие паразита на организм хозяина и ответная, защитная реакция со стороны
организма хозяина. Паразитизм — свойство, закрепленное за видом и передающееся по наследству.
Все возбудители инфекционных и инвазионных болезней человека, животных и растений относятся
к паразитам, т. е. способны к паразитической форме существования в живой системе.
Возникновение, течение и исход инфекционного процесса определяются тремя группами
факторов: 1) количественные и качественные характеристики микроба — возбудителя
инфекционного процесса; 2) состояние макроорганизма, степень его восприимчивости к микробу;
3) действие физических, химических и биологических факторов окружающей микроб и
макроорганизм внешней среды, которая и обуславливает возможность установления контактов
между представителями разных видов, общность территории обитания разных видов, пищевые
связи, плотность и численность популяций, особенности передачи генетической информации,
особенности миграции и т. д. При этом по отношению к человеку под условиями внешней среды
прежде всего следует понимать социальные условия его жизнедеятельности. Первые два
биологических фактора являются непосредственными участниками инфекционного процесса,
развивающегося в макроорганизме под действием микроба. При этом микроб определяет
специфичность инфекционного процесса, а решающий интегральный вклад в форму
проявления инфекционного процесса, его длительность, степень тяжести проявлений и исход
вносит состояние макроорганизма, прежде всего факторы его неспецифической резистентности,
на помощь которым приходят факторы специфического приобретенного иммунитета. Третий,
2
экологический, фактор оказывает на инфекционный процесс опосредованное воздействие, снижая
или повышая восприимчивость макроорганизма, либо снижая и повышая инфицирующую дозу и
вирулентность возбудителя, активируя механизмы заражения и соответствующие им пути передачи
инфекции, и т. д.
3. Патогенность и вирулентность. Факторы вирулентности. Количественное определение
вирулентности. Аттенуация.
Патогенность — видовой признак, передающийся по наследству, закрепленный в геноме микроорганизма, в процессе эволюции паразита, т. е. это генотипи-ческий признак, отражающий
потенциальную возможность микроорганизма проникать в макроорганизм (инфективность) и размножаться в нем (инвазионность), вызывать комплекс патологических процессов, возникающих при
заболевании.
Фенотипическим признаком патогенного микроорганизма является его вирулентность, т.е.
свойство штамма, которое проявляется в определенных условиях (при изменчивости
микроорганизмов, изменении восприимчивости макроорганизма и т.д.). Вирулентность можно
повышать, понижать, измерять, т.е. она является мерой патогенности. Количественные показатели
вирулентности могут быть выражены в DLM (минимальная летальная доза), DL« (доза,
вызывающая гибель 50 % экспериментальных животных). При этом учитывают вид животных, пол,
массу тела, способ заражения, срок гибели.
К факторам патогенности относят способность микроорганизмов прикрепляться к клеткам
(адгезия), размещаться на их поверхности (колонизация), проникать в клетки (инвазия) и
противостоять факторам защиты организма (агрессия).
Адгезия является пусковым механизмом инфекционного процесса. Под адгезией понимают
способность микроорганизма адсорбироваться на чувствительных клетках с последующей
колонизацией. Структуры, ответственные за связывание микроорганизма с клеткой называются
адгезинами и располагаются они на его поверхности. Адгезины очень разнообразны по строению и
обусловливают высокую специфичность - способность одних микроорганизмов прикрепляться к
клеткам эпителия дыхательных путей, других - кишечного тракта или мочеполовой системы и т.д.
На процесс адгезии могут влиять физико-химические механизмы, связанные с гидрофобностью
микробных клеток, суммой энергии притяжения и отталкивания. У грамотрицательных бактерий
адгезия происходит за счет пилей I и общего типов. У грамположительных бактерий адгезины
представляют собой белки и тейхоевые кислоты клеточной стенки. У других микроорганизмов эту
функцию выполняют различные структуры клеточной системы: поверхностные белки,
липополисахариды, и др.
Инвазия. Под инвазивностью понимают способность микробов проникать через слизистые,
кожу, соединительно-тканные барьеры во внутреннюю среду организма и распространятся по его
тканям и органам. Проникновение микроорганизма в клетку связывается с продукцией ферментов, а
также с факторами подавляющими клеточную защиту. Так фермент гиалуронидаза расщепляет
гиалуроновую кислоту, входящую в состав межклеточного вещества, и, таким образом, повышает
проницаемость слизистых оболочек и соединительной ткани. Нейраминидаза расщепляет
нейраминовую кислоту, которая входит в состав поверхностных рецепторов клеток слизистых
оболочек, что способствует проникновению возбудителя в ткани.
Агрессия. Под агрессивностью понимают способность возбудителя противостоять защитным
факторам макроорганизма. К факторам агрессии относятся: протеазы - ферменты, разрушающие
иммуноглобулины; коагулаза - фермент, свертывающий плазму крови; фибринолизин растворяющий сгусток фибрина; лецитиназа - фермент, действующий на фосфолипиды мембран
мышечных волокон, эритроцитов и других клеток. Патогенность может быть связана и с другими
ферментами микроорганизмов, при этом они действуют как местно, так и генерализовано.
3
Токсины. Многие факторы вирулентности — это белки, которые патоген вырабатывает, а затем
выделяет (секретирует) в окружающую среду и которые вызывают повреждение тканей хозяина.
Например, при пищевых отравлениях именно токсины вызывают симптомы заболевания.
Количественное определение вирулентности.
Для характеристики вирулентности пользуются количественными показателями,
определяющими способность исследуемой микробной культуры вызывать гибель искусственно
зараженных ею подопытных животных. Изучение вирулентности бывает сопряжено с рядом
трудностей, так как она определяется не только комплексом культурно-морфологических,
токсигенных и биологических свойств микроба, но и резистентностью микроорганизма,
подверженной большим колебаниям в связи с видом, возрастом животных, режимом их питания,
температурой внешней среды, а также способом заражения, принятым в опыте. Поэтому при
установлении вирулентности микроба очень важно вести исследование, точно соблюдая
стандартность всех условий опыта.
Для определения вирулентности микробных культур чаще всего используют белых мышей. В
том случае, когда белые мыши невосприимчивы к исследуемому возбудителю заболевания,
пользуются другими видами животных: крысами, морскими свинками или кроликами.
Для определения вирулентности применяют молодую культуру микроба, так как старые
культуры содержат большое количество мертвых клеток.
Культуру микроба для заражения выращивают на мясо-пептонном агаре или другой плотной
питательной среде, так как бульон, представляя собой сложный белковый субстрат, небезразличен
для животного организма и может извращать результаты опыта. Исследуемую культуру микроба,
выра­щенную на скошенном мясо-пептонном агаре, смывают изотоническим раствором хлорида
натрия и стандартизуют по оптическому стандарту так, чтобы в 1 мл этого раствора содержалось
определенное количество микробных тел. В зависимости от вида культуры, патогенности ее для
животных, взятых в опыт, а также от цели и задач исследования количество микробных тел,
содержащееся в 1 мл взвеси, может колебаться от единиц до миллиардов. В тех случаях, когда по
каким-либо причинам получить агаровую культуру невозможно, пользуются суточной бульонной
культурой. Для определения минимальной летальной дозы из бульонной культуры готовят ряд
последовательных десятикратных разведений: 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000, 1:100000 и т.д.
Исследуемую взвесь бактерий вводят различными способами: внутривенно, внутрибрюшинно,
внутримышечно, подкожно, интраназально—в зависимости от целей и задач исследования.
Отстандартизованную взвесь микробов в изотоническом растворе хлорида натрия, а также
разведения бульонной культуры готовят с таким расчетом, чтобы различные дозы микроба,
используемые в опыте, содержались в одинаковых объемах жидкости.
Каждую дозу культуры вводят одновременно нескольким животным. При определении
минимальной смертельной дозы учитывают и отмечают в протоколе опыта следующие данные:

количество микробов, введенных в организм животного;

способ их введения;

масса тела зараженного животного;

сроки гибели после заражения.
Степень вирулентности чаще всего характеризуют тремя следующими показателями:
4

Минимальная смертельная доза Dlm (Dosis letalis minima), т.e. наименьшая доза микробов,
которая при определенном способе заражения, в определенных условиях опыта вызывает
гибель около 95% подопытных животных.

Наименьшая безусловно смертельная доза Dll (Dosis lerie letalis) — наименьшая доза
микробов, являющаяся смертельной для всех 100% животных, взятых в опыт.

Средняя смертельная доза микробов LD50 (Dosis letalis 50%)—доза микробов,
вызывающая гибель 50% зараженных животных.

Показатель LD50 позволяет получить более достоверные результаты, и потому он чаще
других используется в практике экспериментальных исследований.
В отличие от Dlm и Dll, определявшихся непосредственно по результатам опыта, LD50
вычисляется путем довольно сложных математических расчетов. Более прост метод Кербера, в
котором простота расчета удачно сочетается с достаточно высокой точностью получаемых
результатов.
Аттенуация — искусственное стойкое ослабление вирулентности патогенных микроорганизмов,
сохраняющих способность вызывать иммунитет. Аттенуация используется при изготовлении
живых вакцин против туберкулеза, оспы. Термин произошел от латинского слова attenuatio —
уменьшение.
4. Микробные токсины и их свойства. Генетические детерминанты токсигенности (tox + гены).
Важную роль в развитии инфекционного процесса играют токсины. По биологическим
свойствам бактериальные токсины делятся на экзотоксины и эндотоксины.
Экзотоксины продуцируют как грамположительные, так и грамотрицательные бактерии. По своей
химической структуре это белки. По механизму действия экзотоксина на клетку различают
несколько типов: цитотоксины, мембранотоксины, функциональные блокаторы, эксфолианты и
эритрогемины. Механизм действия белковых токсинов сводится к повреждению жизненно важных
процессов в клетке: повышение проницаемости мембран, блокады синтеза белка и других
биохимических процессов в клетке или нарушении взаимодействия и взаимокоординации между
клетками. Экзотоксины являются сильными антигенами, которые и продуцируют образование в
организме антитоксинов.
По молекулярной организации экзотоксины делятся на две группы:
• экзотоксины состоящие из двух фрагментов;
• экзотоксины, составляющие единую полипептидную цепь.
По степени связи с бактериальной клетки экзотоксины делятся условно на три класса.
• Класс А - токсины, секретируемые во внешнюю среду;
• Класс В - токсины частично секретируемые и частично связанные с микробной
клеткой;
• Класс С - токсины, связанные и с микробной клеткой и попадающие в
окружающую среду при разрушении клетки.
Экзотоксины обладают высокой токсичностью. Под воздействием формалина и температуры
экзотоксины утрачивают свою токсичность, но сохраняют иммуногенное свойство. Такие токсины
получили название анатоксины и применяются для профилактики заболевания столбняка,
гангрены, ботулизма, дифтерии, а также используются в виде антигенов для иммунизации
животных с целью получения анатоксических сывороток.
Эндотоксины по своей химической структуре являются липополисахаридами, которые
содержатся в клеточной стенке грамотрицательных бактерий и выделяются в окружающую среду
при лизисе бактерий. Эндотоксины не обладают специфичностью, термостабильны, менее
5
токсичны, обладают слабой иммуногенностью. При поступлении в организм больших доз
эндотоксины угнетают фагоцитоз, гранулоцитоз, моноцитоз, увеличивают проницаемость
капилляров, оказывают разрушающее действие на клетки. Микробные липополисахариды
разрушают лейкоциты крови, вызывают дегрануляцию тучных клеток с выделением
вазодилататоров, активируют фактор Хагемана, что приводит к лейкопении, гипертермии,
гипотонии, ацидозу, дессиминированной внутрисосудистой коагуляции (ДВК).
Эндотоксины стимулируют синтез интерферонов, активируют систему комплемента по
классическому пути, обладают аллергическими свойствами.
При введении небольших доз эндотоксина повышается резистентность организма, усиливается
фагоцитоз, стимулируются В-лимфоциты. Сыворотка животного иммунизированного эндотоксином
обладает слабой антитоксической активностью и не нейтрализует эндотоксин.
Патогенность бактерий контролируется тремя типами генов: гены - собственной хромосомами,
гены привнесенные плазмидами умеренными фагами.
Генетические детерминанты токсигенности (tox+ - гены)
Синтез белковых токсинов кодируется генами, локализованными в хромосоме и сцепленными с
генами, участвующими в спорообразовании или входящими в состав профага, а также генами,
локализованными в плазмидах. Это tox+ гены, ответственные за токсиген-ность. Активность tox+
генов контролируется белками-репрессорами микробной клетки. Первоначальной функцией этих
генов у сапрофитов был синтез структурных белков фага, компонентов оболочек спор или синтез
ферментов, необходимых для усвоения аминокислот. По мере закрепления паразитического образа
жизни эти специализированные адаптивные ферменты превратились в яды — белковые токсины.
Способность микроорганизмов образовывать белковые токсины необходимо учитывать также
при проведении микробиологической диагностики. При этом необходимо помнить, что все
патогенные штаммы данного вида могут продуцировать только один тип токсина по антигенной
структуре и механизму действия(С. diphtheriae, С. tetani), разные по антигенной структуре, но
одинаковые по механизму действия токсины (С. botulinum). С другой стороны, один и тот же вид
микроба может образовывать разные типы белковых токсинов, а также эндотоксины, например
диареегенные Е. coli, шигеллы и сальмонеллы, возбудитель холеры.
5. Динамика развития и периоды инфекционного процесса. Носительство патогенных
микроорганизмов.
Под инфекционной болезнью следует понимать индивидуальный случай определяемого
лабораторно и/или клинически инфекционного состояния данного макроорганизма, обусловленного
действием микробов и их токсинов, и сопровождающегося различными степенями нарушения
гомеостаза. Это частный случай проявления инфекционного процесса у данного конкретного
индивидуума. Об инфекционной болезни говорят тогда, когда происходит нарушение функции
макроорганизма, сопровождающееся формированием патологического морфологического субстрата
болезни.
Для инфекционного заболевания характерны определенные стадии развития:
1. Инкубационный период — время, которое проходит с момента заражения до начала
клинических проявлений болезни. В зависимости от свойств возбудителя, иммунного статуса макроорганизма, характера взаимоотношений между макро- и микроорганизмом инкубационный
период может колебаться от нескольких часов до нескольких месяцев и даже лет;
2. Продромальный период — время появления первых клинических симптомов общего
характера, неспецифических для данного заболевания, например слабость, быстрая утомляемость,
отсутствие аппетита и т. д.;
6
3. Период острых проявлений заболевания — разгар болезни. В это время проявляются типичные
для данного заболевания симптомы: температурная кривая, высыпания, местные поражения и т. п.;
4. Период реконвалесценции — период угасания и исчезновения типичных симптомов и
клинического выздоровления.
Не всегда клиническое выздоровление сопровождается освобождением макроорганизма от
микроорганизмов. Иногда на фоне полного клинического выздоровления практически здоровый человек продолжает выделять в окружающую среду патогенные микроорганизмы, т.е. наблюдается
острое носительство, иногда переходящее в хроническое носительство (при брюшном тифе —
пожизненное).
Носительство — собирательное понятие, под ним подразумевается выделение микроба в
последние дни инкубационного периода, в острый период перенесения бессимптомной инфекции, в
период реконвалесценции и т. д.
Подавляющее большинство носителей можно разделить на две основные группы. Первую группу
составляют люди, переболевшим какими-либо заболеваниями, у которых клиническое
выздоровление наступило раньше полного освобождения организма от возбудители . Такого рода
носительство встречается в первые недели выздоровления у 10—20% переболевших брюшным
тифом, у 15—25% переболевших дифтерией и т. д.
Как правило, в течение ближайшего времени, соответствующего периоду реконвалесценции при
данной болезни, у основной части переболевших выделение патогенных микробов прекращается.
Такое носительство переболевших, продолжающееся до 2—3 месяцев, называется острым.
Отдельные лица остаются выделителями патогенных микробов по истечении периода
реконвалесценции, т. е. более 2—3 месяцев после выздоровления. В этом случае носительство
называется хроническим. Оно может продолжаться ряд лет и даже пожизненно (брюшной тиф).
6. Формы инфекций в зависимости от источника, числа инфицирующих агентов, от
остроты течения и продолжительности пребывания микробов в организме, от локализации и
путей распространения возбудителей, от интенсивности распространения заболеваемости.




сапронозные инфекции - заболевания, основным местом обитания и размножения
возбудителей которых являются объекты окружающей среды, откуда и попадают в
организм человека. К таким инфекциям можно отнести заболевания, вызванные
легионеллами, синегнойной палочкой и другими;
антропонозные инфекции - заболевания, при которых единственным источником
возбудителя является человек. К ним относятся менингококковая инфекция, дизентерия,
холера, дифтерия, сифилис, гепатит В, эпидемический сыпной тиф, эпидемический
возвратный тиф и другие;
зоонозные инфекции - заболевания, при которых единственным источником возбудителя
являются животные. К ним относят туляремию, бруцеллез, бешенство;
зооантропонозные инфекции - заболевания, при которых источником являются животное
и больной человек (в том числе и трупы умерших). К ним относятся чума, сибирская язва,
туберкулез, риккетсиозы.
По распространенности различают:


эндемические заболевания (регистрируются на строго определенных территориях),
эпидемические заболевания, распространенные на различных территориях.
7
При этом эндемии тесно связаны с ареалом (местом) обитания животных-хозяев и переносчиков.
К ним можно отнести, например: эндемические риккетсиозы,клещевой возвратный тиф
(боррелиоз), клещевые вирусные энцефалиты и другие.
По тяжести течения все инфекционные заболевания делят на:



легкие;
средней тяжести;
тяжелые.
Степень тяжести инфекционного заболевания имеет прямую зависимость от вирулентности
микроорганизма-возбудителя и обратную зависимость от силы защитных механизмов
макроорганизма. Степень тяжести инфекционного заболевания также непосредственно связана с
локализацией возбудителя в макроорганизме.
По этому критерию все инфекции делятся на:


очаговые, при которых микроорганизмы локализуются в местном очаге и не
распространяются по организму (например, ангина, фурункулез);
генерализованные, при которых возбудитель распространяется по организму
лимфогенным или гематогенным путем (например, сепсис).
7. Особенности вирусных инфекций. Роль вирусной нуклеиновой кислоты и белка в
инфекционном процессе. Токсические вещества вирусов.
8. Роль макроорганизма, внешней среды и социальных факторов в возникновении, течении
и исходе инфекционного процесса. Понятие о летальности при инфекционных заболеваниях.
Возникновение, развитие, течение и исход инфекционной болезни в значительной степени
зависят от состояния макроорганизма, в который проникли патогенные микробы. Основным
фактором является восприимчивость к тому или иному микроорганизму, которая может быть
видовой, присущей данному виду животного или человеку, и индивидуальной, зависящей от
общего состояния организма каждого человека или животного.
Видовая восприимчивость обусловлена генетически. Существуют заболевания, которыми
болеют только животные. Такие заболевания получили название зоонозов. Инфекционные болезни,
к возбудителям которых восприимчив только человек, называются антропонозами (гонорея,
сифилис, брюшной тиф, дизентерия). Инфекционные болезни, которыми болеют животные, но
может поражаться и человек, называются антропозоонозами (чума, туляремия, бруцеллез,
сибирская язва).
Индивидуальная восприимчивость человека зависит от многих факторов, но прежде всего — от
особенностей возбудителя, обладающего выраженными инвазивными и агрессивными свойствами.
К таким микробам, например, относится возбудитель чумы, к которому восприимчивы все люди.
Возникновение инфекционной болезни зависит также от инфицирующей дозы микроба; при малом
ее количестве болезнь может не развиться.
Восприимчивость зависит от места заражения — так называемых входных ворот, т.е. от той
ткани или органа, через которые проникает патогенный микроб. Большинству микробов для
развития заболевания необходимо проникновение через определенные входные ворота. Так,
например, при дизентерии, брюшном тифе и других кишечных инфекциях входными воротами
8
является пищеварительный тракт, при вирусном гриппе — верхние дыхательные пути и т. д.
Однако есть такие микроорганизмы, которые способны проникать через любые входные ворота,
например, возбудитель чумы, стафилококк.
Развитие инфекционного заболевания зависит от общей физиологической реактивности
макроорганизма и факторов, угнетающих его резистентность (чрезмерное физическое и
психическое напряжение, недостаточное питание, охлаждение, травма, возраст и т.д.). Так,
нарушение питания, витаминная и белковая недостаточность снижают защитные силы организма,
нарушают процесс аптителообразования. Инфекционные олезни делятся на детские и
развивающиеся в любом эзрасте. Дети до 6 мес невосприимчивы к ряду инфекционных болезней
(корь, дифтерия и др.). что связано с наличием у них иммунитета от матери. В то же время дети
раннего возраста легко заболевают стафилококковыми, кишечными инфекциями, вызываемыми
энтеропатогенными кишечными палочками.
Развитие инфекционного заболевания тесно связано с иммунобиологическими особенностями
организма, способностью патогенных микробов преодолеть естественные защитные барьеры.
Действие окружающей среды на развитие инфекционного процесса определяется влиянием как
на микроорганизм, его устойчивость и сохраняемость во внешней среде, так и на резистентность
макроорганизма. Снижение резистентности макроорганизма и сезонные подъемы заболеваемости
связаны с влиянием на восприимчивость человека к инфекционным болезням температуры,
атмосферного давления, солнечной радиации, влажности окружающей среды. Например, наиболее
часто поражения верхних дыхательных путей наблюдаются в осеннезимний период.
Летальность (от лат. letalis — смертельный) — статистический показатель, равный отношению
числа умерших от какой-либо болезни, ранения и т. п. к числу переболевших (раненых) этой
болезнью, за определенный временной промежуток.[1] Не следует путать летальность со
смертностью — отношением числа умерших от данной болезни к средней численности популяции.
9. Биологический метод диагностики инфекционных заболеваний.
Биологический метод состоит в заражении различным материалом (клиническим, лабораторным)
лабораторных животных для индикации возбудителя, а также для определения некоторых свойств
микроорганизмов, характеризующих их патогенность (токсигенность, токсичность, вирулентность).
В качестве лабораторных животных используют белых мышей, белых крыс, морских свинок,
кроликов и др.
Воспроизведение заболевания у животного — абсолютное доказательство патогенности
выделенного микроорганизма (в случае бешенства, столбняка и др.). Поэтому биологическая проба
на животных является ценным и достоверным диагностическим методом, особенно при тех
инфекциях, возбудители которых в исследуемых биологических средах организма человека
содержатся в малых концентрациях и плохо или медленно растут на искусственных средах.
10. Понятие об иммунитете. Классификация противоинфекционного иммунитета.
Основные отличия и механизмы естественного (врожденного) и приобретенного иммунитета.
Иммунология— наука, изучающая иммунитет и использование иммунологических понятий и
методов в других областях науки и практики.
Иммунитетом (Immunitas— свобода от чего-либо) называют совокупность свойств и
механизмов, обеспечивающих постоянство состава организма и его защиту от инфекционных и
других чужеродных для него агентов. Конкретно это сводится к контролю за развитием и действием
в организме микроорганизмов и иммунологическому надзору за гомеостазом (постоянством
9
состава) собственных клеток и тканей, включая процессы формообразования, регенерации, а также
своевременного удаления отживших, поврежденных, мутантных и опухолевых клеток.
Иммунологические функции осуществляются на двух уровнях.
Первый — филогенетически более древний уровень— составляют неспециализированные
защитные механизмы, действующие против любого чужеродного фактора. Эти механизмы
действуют постоянно и обеспечивают состояние, получившее название «врожденный,
естественный, иммунитет, или неспецифическая резистентность».
Механизмы неспецифической резистентности функционируют в организме постоянно,
обуславливая в случаях массивного микробного или иного дестабилизирующего воздействия
воспалительную реакцию, одинаковую при разных возбудителях. Развитие воспалительной реакции
способствует возникновению специфического иммунного ответа, который можно рассматривать
как развитие второй, более эффективной линии обороны против возбудителя инфекционного
процесса.
Второй уровень иммунологических функций составляют механизмы, определяющие способность
организма к избирательному (специфическому) ответу на конкретные чужеродные структуры,
именуемые антигенами. Эта способность формируется в каждом организме в ответ на воздействие
конкретного антигенного вещества. Данная группа функций получила название приобретенного,
или специфического, иммунитета
Естественный иммунитет обуславливает постоянный уровень резистентности организма к
любому чужеродному субстрату, но вследствие однотипного неспециализированного ответа на
разные потенциально-опасные для организма агенты менее эффективен, чем приобретенный
иммунитет. Развитие специализированной реакции обеспечивает локальное высокоэффективное
воздействие на объект, интенсивность которого на пике реакции на несколько порядков выше, чем в
начале процесса. Врожденный и приобретенный иммунитет реализуются действием клеток и
гуморальных факторов, что привело к формулировке терминов - клеточный и гуморальный
иммунитет.
Особенностью приобретенного иммунитета является развитие иммунологической памяти способности к быстрому и сильному ответу на повторное воздействие антигена. В соответствии с
этим реакция организма на первое воздействие антигена получила название «первичный ответ», а
реакция на повторное воздействие антигена - «вторичный ответ». После перенесения
инфекционного заболевания формируется состояние, именуемое постинфекционным иммунитетом,
которое состоит в высокой устойчивости к возможности повторного развития того же заболевания.
Аналогом постинфекционного иммунитета является поствакцинальный иммунитет, развивающийся
после проведения прививок (вакцинации). При некоторых заболеваниях (туберкулез, сифилис)
устойчивость к повторному заражению сохраняется на протяжении того времени, пока в организме
присутствует возбудитель болезни. Такой иммунитет называют инфекционным, или нестерильным.
Формирование приобретенного иммунитета - процесс активной перестройки иммунной системы,
приводящий к образованию гуморального либо клеточного иммунитета - антител и клеток,
способных эффективно взаимодействовать с антигенами, вызвавшими развитие иммунной реакции.
В этих случаях возникший иммунитет называют активным.
11. Роль неспецифических гуморальных факторов защиты в противоинфекционном
иммунитете.
В неспецифическом иммунитете против микробов участвуют белки острой фазы воспаления: Среактивный протеин (белок), сывороточный амилоид, альфа2-макроглобулин, фибриноген, bлизины, интерфероны, система комплемента, лизоцим и др.
10
Система комплемента. Система комплемента это комплекс растворимых белков и белков
клеточной поверхности, взаимодействие которых опосредует разные биологические эффекты:




разрушение (лизис) клеток,
привлечение лейкоцитов в очаг инфекции или воспаления (хемотаксис),
облегчение фагоцитоза (опсонизация),
стимуляция воспаления и реакций гиперчувствительности (анафилотоксины).
Большая часть компонентов комплемента синтезируются гепатоцитами и мононуклеарными
фагоцитами. Компоненты комплемента циркулируют в крови в неактивной форме. При
определенных условиях самопроизвольный каскад ферментативных реакций ведет к
последовательной активации каждого из компонентов системы комплемента. Компоненты
комплемента обозначают латинской буквой С и арабскими цифрами (С1, С2 .... С9).
Существуют два взаимосвязанных пути активации комплемента: классический и
альтернативный. В результате формируется мембраноатакующий комплекс, который способен
пенетрировать (формирование поры) клеточную мембрану и вызывать лизис микроорганизмов.
Интерфероны. Интерфероны (ИФН или IFN) представляют собой разновидность специфических
гликопротеинов, которые оказывают множество биологических эффектов широкого спектра,
вырабатываются многими клетками в ответ на внедрение вируса или сложных биополимеров.
Интерферон, образованный клетками человека, функционально активен только в организме
человека, но не животных, и наоборот, т.е. обладает видовой специфичностью.
Выделяют три главных класса интерферонов: альфа-интерферон вырабатывают В-лимфоциты,
его получают из лейкоцитов крови (лейкоцитарный); бетта-интерферон получают при заражении
вирусами культуры клеток фибробластов человека (фибробластный) и
гамма-интерферон
получают из иммунных Т-лимфоцитов, сенсибилизированных антигенами (иммунный).
Действие интерферона не связано с непосредственным влиянием на вирусы или клетки, т.е.
интерферон не действует вне клетки. Адсорбируясь на поверхности клетки или проникая внутрь
клетки, он через геном клетки влияет на процессы репродукции вируса или пролиферацию клетки
(активирует синтез ферментов и ингибиторов, блокирующих трансляцию вирусных иРНК, тем
самым предохраняя соседние клетки от вирусной инфекции).
Значение интерферонов. Интерфероны играют большую роль в поддержании резистентности к
вирусам, поэтому его применяют для профилактики и лечения многих вирусных инфекций.
Антипролиферативное действие, особенно гамма-интерферона, используют для лечения
злокачественных опухолей, а иммуномодулирующее действие - для коррекции работы иммунной
системы с целью ее нормализации при различных иммунодефицитах.
Лизоцим. Лизоцим - термостабильный белок типа муколитического фермента. Он содержится в
тканевых жидкостях животных и растений, у человека - в слезах, слюне, перитонеальной жидкости,
плазме и сыворотке крови, в лейкоцитах, материнском молоке и др. Лизоцим продуцируется
моноцитами крови и тканевыми макрофагами. Он вызывает лизис многих сапрофитных бактерий,
оказывая менее выраженное литическое действие на ряд патогенных микроорганизмов и неактивен
в отношении вирусов.
Пропердин (от лат. perdere — разрушать) был обнаружен Пиллимером в сыворотке крови. Это
белок-глобулин, который в сочетании с комплементом и ионами магния губительно действует на
бактерии и инактивирует некоторые вирусы. Снижение уровня пропердина в сыворотке крови
11
человека при инфекционных заболеваниях, облучении, шоке считается неблагоприятным
признаком.
С-реактивный белок (протеин) обнаружен в сыворотке больных людей. Увеличение его
количества свидетельствует о наличии в организме патологического процесса.
Из клеток крови и сыворотки человека выделены вещества, которые также губительно действуют
на микробы, например лейкины — термостабильные бактерицидные вещества, выделенные из
лейкоцитов, плакины — из тромбоцитов, (В-лизины — из сыворотки крови человека. Все эти
вещества устойчивы к прогреванию (термостабильны) и активны даже в отсутствие солей. В крови
человека имеются и другие субстанции — ингибиторы, которые задерживают рост и развитие
микробов, особенно вирусов. Одной из таких субстанций является интерферон.
12. Роль неспецифических клеточных факторов защиты в противоинфекционном
иммунитете.
К клеточным факторам неспецифической защиты относятся фагоцитирующие клетки и
натуральные киллеры.
Фагоцитирующие клетки. Одним из мощных факторов резистентности является фагоцитоз.
И.И.Мечников установил, что фагоцитарными свойствами обладают зернистые лейкоциты крови и
лимфы, главным образом полиморфноядерные нейтрофилы (микрофаги - нейтрофилы, эозинофилы
и базофилы) и по-другому обозначаются как полиморфноядерные лейкоциты, или гранулоциты, а
также моноциты и различные клетки ретикулоэндотелиальной системы, которую он назвал
макрофагами. В настоящее время под макрофагами понимают клетки, которые обладают высокой
фагоцитарной активностью. Они различаются по форме и размерам, в зависимости от тканей, где
они обнаруживаются. По классификации ВОЗ все макрофаги объединены в систему
мононуклеарных фагоцитов (СМФ).
Фагоцитам присущи три функции:



Защитная. Фагоцитозом уничтожаются чужеродные объекты, т.е. происходит очистка
организма от инфекционных агентов, продуктов распада, отмирающих клеток,
неметаболизируемых органических веществ.
Секреторная. Взаимодействие объекта фагоцитоза с фагоцитом стимулирует
бактерицидные системы последнего. К основным системам бактерицидности относят
окислительную (О2-зависимую) и неокислительные (ферментные). Окислительная
бактерицидная система убивает микроб за счет прямого действия продуцируемых
фагоцитом О2, ОН и Н2О2 или галогенизацию. Из ферментных систем самым сильным
бактериологическим потенциалом обладают лизоцим и катепсин. Кроме того фагоциты
синтезируют и секретируют множество цитокинов - биологически активных веществ,
необходимых для поддержания иммунного ответа организма на чужеродное вещество.
Представляющая. Переработка антигена (процессинг) и представление его
иммунокомпетентным клеткам, принимающим участие в формировании иммунного
ответа.
Процесс фагоцитоза складывается из следующих стадий:
1. Хемотаксис - продвижение фагоцита к объекту фагоцитоза, осуществляется с помощью
псевдоподий.
2. Адгезия (прикрепление). На мембране фагоцитов размещены различные рецепторы для
захвата микроорганизмов.
12
3. Эндоцитоз (поглощение). Принципы поглощения бактерий идентичны таковым у амеб:
захваченные частицы погружаются в протоплазму и в результате образуется фагосома с
заключенным внутри объектом.
4. Внутриклеточное переваривание. К фагосоме устремляются лизосомы, затем оболочки
фагосомы и лизосомы сливаются и ферменты лизосом изливаются в фаголизосому.
Фагоцитированные микроорганизмы подвергаются атаке комплекса различных
микробицидных факторов.
Завершенность фагоцитарных реакций. Микробицидный потенциал фагоцитирующих клеток
эффективен против большей части патогенных микроорганизмов (завершенный фагоцитоз), но
некоторые возбудители резистентны к его действию и способны длительно существовать внутри
фагоцитов. Многие факультативные и облигатные внутриклеточные паразиты не только сохраняют
жизнеспособность, но и способны размножаться внутри клеток. В этом случае фагоцитоз остается
незавершенным.
Для полноценного фагоцитоза нужен фагоцитарный стимул определенной силы:
А. Микробные факторы. При низком соотношении микроб/фагоцит (1:1) реакция почти
отсутствует. Увеличение соотношения до 25:1 несколько стимулирует процесс, при соотношении
до 60:1 фагоцитируется около 80% микробов, но дальнейшее увеличение соотношения резко
подавляет фагоцитоз.
Б. Универсальными стимуляторами фагоцитов являются опсонизированные частицы и иммунные
комплексы.
Опсонизация - процесс, облегчающий фагоцитоз. Обусловлен связыванием опсонинов (антител и
компонента С3b комплемента) с поверхностными антигенами бактерий.
В. Лимфокины, гамма-интерферон - медиаторы, продуцируемые активированными Тлимфоцитами в местном клеточно-опосредованном иммунном ответе, активируют макрофаги и
привлекают другие провоспалительные клетки.
Для характеристики активности фагоцитоза введен фагоцитарный показатель. Для определения
его подсчитывают под микроскопом число бактерий, поглощенных одним фагоцитом.
Натуральные киллеры. Натуральные киллеры (НК или NK) или естественные киллеры (ЕК)
представляют собой популяцию лимфоидных клеток, лишенных признаков Т- и В-лимфоцитов. Их
участие в неспецифическом иммунном ответе состоит в способности оказывать прямое
цитотоксическое действие на злокачественнотрансформированные и вирусинфицированные клетки,
а также клетки, поглотившие некоторые внутриклеточные бактериальные патогены. . В процессе
цитолиза различают три основных стадии: распознавание, выделение цитотоксинов («летальный
удар») и лизис клетки-мишени.
13. Приобретенный иммунитет: клеточный и гуморальный.
Клеточный и гуморальный иммунитет – это не одно и то же. Все-таки существует разница между
этими понятиями. Каждый из представленных видов имеет собственную схему работы и
определенный набор функций, за выполнение которых он отвечает.
Сегодня под клеточным иммунитетом подразумевается действие В- и Т-лимфоцитов, которое
направлено на разрушение особого рода клеток. В их мембранах содержатся чужеродные
человеческому организму вещества, которые способны негативно на него влиять.
13
Обычно клеточный иммунитет отвечает за противостояние бактериальный и вирусным
инфекциям: туберкулезу, проказе и др. Кроме этого, только благодаря клеточному иммунитету,
находящемуся на должном уровне, в здоровом организме человека не появляются и не
распространяются раковые клетки, которые являются причиной возникновения опухолей.
Известный российско-французский биолог Илья Ильич Мечников разработал клеточную теорию
иммунитета, получившую развитие со стороны его последователей. Однако все было не так просто,
потому что этой теории противостояли противники взглядов Мечникова.
Нужно сказать, что клеточные факторы иммунитета и его звенья действительно существуют.
Основным клеточным звеном иммунной системы являются лейкоциты. К звеньям также относятся
и фагоциты, а также вспомогательные клетки: тучные клетки, базофилы, тромбоциты и
эозинофилы. Механизм клеточного иммунитета выглядит со стороны как слаженная работа всех
компонентов системы, которая направлена на поддержание и обеспечение полноценного
функционирования различных органов организму человека.
Если взрослый или ребенок повторно заболевают болезнями, за борьбу с которыми отвечает
клеточный иммунитет, то нужно обязательно провести тщательное исследование для того, чтобы
проверить все его показатели и найти причину появляющихся заболеваний.
Гуморальный иммунитет – это защитная система организма, инструментами которой являются
иммуноглобулины крови, а также В-лимфоциты, ими вырабатываемые. Они относятся к
гуморальному звену иммунитета, деятельность которого обеспечивает выработку особых антител,
борющихся с инфекциями, порой возникающими в организме человека.
В принципе, провести четкую границу между клеточным и гуморальным иммунитетами очень
сложно, так как они оба не являются приобретенными и находятся между собой в тесной
взаимосвязи. У гуморального, как и у клеточного иммунитета, есть свои собственные факторы –
цитокины и эйкозаноиды.
Эйкозаноиды делят на простагландины, которые влияют на повышение температуры тела, и на
лейкотриены, которые привлекают лейкоциты. К цитокинам относятся чаще всего интерлейкины,
благодаря которым обеспечивается наличие необходимых отношений между хемокинами и
лейкоцитами.
Они развивают элементы, противостоящие развитию вирусов. Отдельно выделяют
цитоксические факторы вместе с факторами роста. Именно они распознают очаг инфекции и
привлекают к нему клетки иммунитета, чтобы уничтожить возбудителей болезни. По такому
принципу строится механизм работы гуморального иммунитета, который также время от времени
необходимо подпитывать.
Чтобы работа иммунной системы была полноценной, необходимо регулярно принимать
витамины, заниматься спортом, дышать свежим воздухом и поддерживать себя в прекрасном
расположении духа. Также необходимо особое значение придавать полноценному сну.
14. Антигены и их характеристика.
Антиген – это биополимер органической природы, генетически чужеродный для
макроорганизма, который при попадании в последний распознаётся его иммунной системой и
вызывает иммунные реакции, направленные на его устранение.
Антигены обладают рядом характерных свойств: антигенностью, специфичностью и
иммуногенностью.
14
Антигенность. Под антигенностью понимают потенциальную способность молекулы антигена
активировать компоненты иммунной системы и специфически взаимодействовать с факторами
иммунитета (антитела, клон эффекторных лимфоцитов). Иными словами, антиген должен
выступать специфическим раздражителем по отношению к иммунокомпетентным клеткам. При
этом взаимодействие компоненты иммунной системы происходит не со всей молекулой
одновременно, а только с ее небольшим участком, который получил название «антигенная
детерминанта», или «эпитоп».
Чужеродность является обязательным условием для реализации антигенности. По этому
критерию система приобретенного иммунитета дифференцирует потенциально опасные объекты
биологического мира, синтезированные с чужеродной генетической матрицы. Понятие
«чужеродность» относительное, так как имму-нокомпетентные клетки не способны напрямую
анализировать чужеродный генетический код. Они воспринимают лишь опосредованную
информацию, которая, как в зеркале, отражена в молекулярной структуре вещества.
Иммуногенность — потенциальная способность антигена вызывать по отношению к себе в
макроорганизме специфическую защитную реакцию. Степень иммуногенности зависит от ряда
факторов, которые можно объединить в три группы: 1. Молекулярные особенности антигена; 2.
Клиренс антигена в организме; 3. Реактивность макроорганизма.
К первой группе факторов отнесены природа, химический состав, молекулярный вес, структура и
некоторые другие характеристики.
Иммуногенность в значительной степени зависит от природы антигена. Важна также оптическая
изомерия аминокислот, составляющих молекулу белка. Большое значение имеет размер и
молекулярная масса антигена. На степень иммуногенности также оказывает влияние
пространственная структура антигена. Оказалась также существенной стерическая стабильность
молекулы антигена. Еще одним важным условием иммуногенности является растворимость
антигена.
Вторая группа факторов связана с динамикой поступления антигена в организм и его выведения.
Так, хорошо известна зависимость иммуногенности антигена от способа его введения. На
иммунный ответ влияет количество поступающего антигена: чем его больше, тем более выражен
иммунный ответ.
Третья группа объединяет факторы, определяющие зависимость иммуногенности от состояния
макроорганизма. В этой связи на первый план выступают наследственные факторы.
Специфичностью называют способность антигена индуцировать иммунный ответ к строго
определенному эпитопу. Это свойство обусловлено особенностями формирования иммунного
ответа — необходима комплементарность рецепторного аппарата иммунокомпетентных клеток к
конкретной антигенной детерминанте. Поэтому специфичность антигена во многом определяется
свойствами составляющих его эпитопов. Однако при этом следует учитывать условность границ
эпитопов, их структурное разнообразие и гетерогенность клонов антигенреактивных лимфоцитовой
специфичности. В результате этого организм на антигенное раздражение всегда отвечает
поликлональными иммунным ответом.
15. Антигенная структура бактериальной клетки: О -, Vi -, К -, Н – антигены. Групповые и
видовые антигены микробов.
В структуре бактериальной клетки различают жгутиковые, соматические, капсульные и
некоторые другие антигены. Жгутиковые, или Н-антигены, локализуются в локомоторном аппарате
бактерий — их жгутиках. Они представляют собой эпитопы сократительного белка флагеллина.
15
При нагревании флагеллин денатурирует, и Н-антиген теряет свою специфичность. Фенол не
действует на этот антиген.
Соматический, или О-антиген, связан с клеточной стенкой бактерий. Его основу составляют
ЛПС. О-антиген проявляет термостабильные свойства — он не разрушается при длительном
кипячении. Однако соматический антиген подвержен действию альдегидов (например, формалина)
и спиртов, которые нарушают его структуру.
Капсулъные, или К-антигены, располагаются на поверхности клеточной стенки. Встречаются у
бактерий, образующих капсулу. Как правило, К-антигены состоят из кислых полисахаридов
(уроновые кислоты). В то же время у бациллы сибирской язвы этот антиген построен из полипептидных цепей. По чувствительности к нагреванию различают три типа К-антигена: А, В, и L.
Наибольшая термостабильность характерна для типа А, он не денатурирует даже при длительном
кипячении. Тип В выдерживает непродолжительное нагревание (около 1 часа) до 60 "С. Тип L
быстро разрушается при этой температуре. Поэтому частичное удаление К-антигена возможно
путем длительного кипячения бактериальной культуры.
На поверхности возбудителя брюшного тифа и других энтеробактерий, которые обладают
высокой вирулентностью, можно обнаружить особый вариант капсульного антигена. Он получил
название антигена вирулентности, или Vi-антигена. Обнаружение этого антигена или специфичных
к нему антител имеет большое диагностическое значение.
Видовые антигены (Аг) представлены антигенными детерминантами, присутствующими у
особей одного вида. Отдельные штаммы микроорганизмов могут содержать внутривидовые Аг, по
которым их разделяют на серологические варианты (серовары).
Групповые антигены (Аг) представлены антигенными детерминантами, обусловливающими
внутривидовые различия у особей одного вида, что позволяет разделять их на группы.
16. Антитела (иммуноглобулины), их структура. Классы иммуноглобулинов, их функции.
В ответ на введение антигена иммунная система вырабатывает антитела — белки, способные
специфически соединяться с антигеном, вызвавшим их образование, и таким образом участвовать в
иммунологических реакциях. Относятся антитела к γ-глобулинам, т. е. наименее подвижной в
электрическом поле фракции белков сыворотки крови. В организме γ-глобулины вырабатываются
особыми клетками — плазмоцитами. γ-глобулины, несущие функции антител, получили название
иммуноглобулинов и обозначаются символом Ig. Следовательно, антитела — это
иммуноглобулины, вырабатываемые в ответ на введение антигена и способные специфически
взаимодействовать с этим же антигеном.
Функции. Первичная функция состоит во взаимодсйствии их активных центров с
комплементарными им детерминантами антигенов. Вторичная функция состоит в их способности:
• связывать антиген с целью его нейтрализации и элиминации из организма, т. е. принимать
участие в формировании защиты от антигена;
• участвовать в распознавании «чужого» антигена;
• обеспечивать кооперацию иммунокомпетентных клеток (макрофагов, Т- и В-лимфоцитов);
• участвовать в различных формах иммунного ответа (фагоцитоз, киллерная функция, ГНТ, ГЗТ,
иммунологическая толерантность, иммунологическая память).
Структура антител. Белки иммуноглобулинов по химическому составу относятся к
гликопротеидам, так как состоят из протеина и Сахаров; построены из 18 аминокислот. Имеют
16
видовые отличия, связанные главным образом с набором аминокислот. Их молекулы имеют
цилиндрическую форму, они видны в электронном микроскопе. До 80 % иммуноглобулинов имеют
константу седиментации 7S; устойчивы к слабым кислотам, щелочам, нагреванию до 60 °С. Выделить
иммуноглобулины из сыворотки крови можно физическими и химическими методами (электрофорез,
изоэлектрическое осаждение спиртом и кислотами, высаливание, аффинная хроматография и др.).
Эти методы используют в производстве при приготовлении иммунобиологических препаратов.
Иммуноглобулины по структуре, антигенным и иммунобиологическим свойствам разделяются
на пять классов: IgM, IgG, IgA, IgE, IgD.
Иммуноглобулин класса G. Изотип G составляет основную массу Ig сыворотки крови. На его
долю приходится 70—80 % всех сывороточных Ig, при этом 50 % содержится в тканевой жидкости.
Среднее содержание IgG в сыворотке крови здорового взрослого человека 12 г/л. Период
полураспада IgG — 21 день.
IgG — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (может одновременно связать 2 молекулы
антигена, следовательно, его валентность равна 2), молекулярную массу около 160 кДа и константу
седиментации 7S. Различают подтипы Gl, G2, G3 и G4. Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и
плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике первичного и при
вторичном иммунном ответе.
Обладает высокой аффинностью. IgGl и IgG3 связывают комплемент, причем G3 активнее, чем
Gl. IgG4, подобно IgE, обладает цитофильностью (тропностью, или сродством, к тучным клеткам и
базофилам) и участвует в развитии аллергической реакции I типа. В иммунодиагностических
реакциях IgG может проявлять себя как неполное антитело.
Легко проходит через плацентарный барьер и обеспечивает гуморальный иммунитет
новорожденного в первые 3—4 месяца жизни. Способен также выделяться в секрет слизистых, в
том числе в молоко путем диффузии.
IgG обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществляет запуск
комплемент-опосредованного цитолиза и антителозависимой клеточно-опосредованной
цитотоксичности.
Иммуноглобулин класса М. Наиболее крупная молекула из всех Ig. Это пентамер, который
имеет 10 антигенсвязывающих центров, т. е. его валентность равна 10. Молекулярная масса его
около 900 кДа, константа седиментации 19S. Различают подтипы Ml и М2. Тяжелые цепи молекулы
IgM в отличие от других изотипов построены из 5 доменов. Период полураспада IgM — 5 дней.
На его долю приходится около 5—10 % всех сывороточных Ig. Среднее содержание IgM в
сыворотке крови здорового взрослого человека составляет около 1 г/л. Этот уровень у человека
достигается уже к 2—4-летнему возрасту.
IgM филогенетически — наиболее древний иммуноглобулин. Синтезируется предшественниками
и зрелыми В-лимфоцитами. Образуется в начале первичного иммунного ответа, также первым
начинает синтезироваться в организме новорожденного — определяется уже на 20-й неделе
внутриутробного развития.
Обладает высокой авидностью, наиболее эффективный активатор комплемента по классическому пути. Участвует в формировании сывороточного и секреторного гуморального
иммунитета. Являясь полимерной молекулой, содержащей J-цепь, может образовывать секреторную форму и выделяться в секрет слизистых, в том числе в молоко. Большая часть
нормальных антител и изоагглютининов относится к IgM.
17
Не проходит через плаценту. Обнаружение специфических антител изотипа М в сыворотке крови
новорожденного указывает на бывшую внутриутробную инфекцию или дефект плаценты.
IgM обеспечивает нейтрализацию, опсонизацию и маркирование антигена, осуществляет запуск
комплемент-опосредованного цитолиза и антителозависимой клеточно-опосредованной
цитотоксичности.
Иммуноглобулин класса А. Существует в сывороточной и секреторной формах. Около 60 %
всех IgA содержится в секретах слизистых.
Сывороточный IgA: На его долю приходится около 10—15% всех сывороточных Ig. В сыворотке
крови здорового взрослого человека содержится около 2,5 г/л IgA, максимум достигается к 10летнему возрасту. Период полураспада IgA — 6 дней.
IgA — мономер, имеет 2 антигенсвязывающих центра (т. е. 2-валентный), молекулярную массу
около 170 кДа и константу седиментации 7S. Различают подтипы А1 и А2. Синтезируется зрелыми
В-лимфоцитами и плазматическими клетками. Хорошо определяется в сыворотке крови на пике
первичного и при вторичном иммунном ответе.
Обладает высокой аффинностью. Может быть неполным антителом. Не связывает комплемент.
Не проходит через плацентарный барьер.
IgA обеспечивает нейтрализацию, опсони-зацию и маркирование антигена, осуществляет запуск
антителозависимой клеточно-опос-редованной цитотоксичности.
Секреторный IgA: В отличие от сывороточного, секреторный sIgA существует в полимерной
форме в виде ди- или тримера (4- или 6-валентный) и содержит J- и S-пeптиды. Молекулярная масса
350 кДа и выше, константа седиментации 13S и выше.
Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и их потомками — плазматическими клетками соответствующей специализации только в пределах слизистых и выделяется в их секреты. Объем
продукции может достигать 5 г в сутки. Пул slgA считается самым многочисленным в организме —
его количество превышает суммарное содержание IgM и IgG. В сыворотке крови не
обнаруживается.
Секреторная форма IgA — основной фактор специфического гуморального местного иммунитета
слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы и респираторного тракта.
Благодаря S-цепи он устойчив к действию протеаз. slgA не активирует комплемент, но эффективно
связывается с антигенами и нейтрализует их. Он препятствует адгезии микробов на эпителиальных
клетках и генерализации инфекции в пределах слизистых.
Иммуноглобулин класса Е. Называют также реагином. Содержание в сыворотке крови крайне
невысоко — примерно 0,00025 г/л. Обнаружение требует применения специальных
высокочувствительных методов диагностики. Молекулярная масса — около 190 кДа, константа
седиментации — примерно 8S, мономер. На его долю приходится около 0,002 % всех
циркулирующих Ig. Этот уровень достигается к 10—15 годам жизни.
Синтезируется зрелыми В-лимфоцитами и плазматическими клетками преимущественно в
лимфоидной ткани бронхолегочного дерева и ЖКТ.
Не связывает комплемент. Не проходит через плацентарный барьер. Обладает выраженной
цитофильностью — тропностью к тучным клеткам и базофилам. Участвует в развитии
гиперчувствительности немедленного типа — реакция I типа.
Иммуноглобулин класса D. Сведений об Ig данного изотипа не так много. Практически
полностью содержится в сыворотке крови в концентрации около 0,03 г/л (около 0,2 % от общего
18
числа циркулирующих Ig). IgD имеет молекулярную массу 160 кДа и константу седиментации 7S,
мономер.
Не связывает комплемент. Не проходит через плацентарный барьер. Является рецептором
предшественников В-лимфоцитов.
17. Феномены и механизмы взаимодействия «антиген – антитело». Методы
иммунодиагностики инфекционных заболеваний.
Знание механизмов взаимодействия антигенов и антител раскрывает сущность многообразных
иммунологических процессов и реакций, возникающих в организме под влиянием патогенных и
непатогенных факторов.
Реакция между антителом и антигеном протекает в две стадии:


- специфическая - непосредственное соединение активного центра антитела с антигенной
детерминантой.
- неспецифическая – вторая стадия, когда, отличающийся плохой растворимостью
иммунный комплекс выпадает в осадок. Эта стадия возможна в присутствии раствора
электролита и визуально проявляется по разному, в зависимости от физического
состояния антигена. Если антигены корпускулярные, то имеет место феномен
агглютинации (склеивания различных частиц и клеток). Образующиеся конгломераты
выпадают в осадок, при этом клетки морфологически не изменяются, теряя подвижность,
они остаются живыми.
Становление иммунологических методов распознавания инфекционных заболеваний пришлось
на конец ХIХ-начало XX в. Поскольку взаимодействия иммунной системы и Аг изучали с
применением AT сыворотки крови, эти методы получили назвали серологические [от лат. serum,
сыворотка, + logos, наука] реакции. Основная идея этих методов — установить феномен ответа
организма на чужеродный Аг.
Выявление AT к инфекционному агенту даёт возможность не только выявить выраженную
текущую инфекцию, но и установить факт первичного инфицирования. Серологические реакции
активно применяют при проведении полного объёма диагностических исследований. Увеличение
титров AT — зачастую единственный дифференциально-диагностический признак, указывающий
на инфекционное заболевание. Выявление AT особенно актуально при неудачных попытках
выделить возбудитель инфекции. Однако классические реакции выявления микробных Аг и AT к
ним в значительной степени потеряли своё значение в экспресс-диагностике бактериальных
инфекций.
С одной стороны, такие реакции чувствительны к значимым титрам AT, появляющимся к концу
первой недели болезни, что не позволяет поставить диагноз на начальных этапах развития
патологического процесса. С другой стороны — при выявлении микробных Аг в серологических
реакциях с помощью коммерческих AT необходимо адекватное количество Аг. Избыток или
недостаток Аг блокирует достаточное для прочтения реакции образование иммунных комплексов.
Проявление этого — «зоны задержки» (феномен прозоны) — отсутствие агглютинации или
преципитации при малых или больших разведениях сыворотки крови
18. Особенности иммунитета при бактериальных, вирусных, грибковых инфекциях и
протозойных инвазиях.
Противовирусный иммунитет. Основой противовирусного иммунитета является клеточный
иммунитет. Клетки-мишени, инфицированные вирусом, уничтожаются цитотоксическими лимфоцитами, а также NK-клетками и фагоцитами, взаимодействующими с Fc-фрагментами антител,
19
прикрепленных к вирусспецифическим белкам инфицированной клетки. Противовирусные
антитела способны нейтрализовать только внеклеточно расположенные вирусы, как и факторы
неспецифического иммунитета — сывороточные противовирусные ингибиторы. Такие вирусы,
окруженные и блокированные белками организма, поглощаются фагоцитами или выводятся с
мочой, потом и др. (так называемый «выделительный иммунитет»). Интерфероны усиливают
противовирусную резистентность, индуцируя в клетках синтез ферментов, подавляющих
образование нуклеиновых кислот и белков вирусов. Кроме этого, интерфероны оказывают
иммуномодулирующее действие, усиливают в клетках экспрессию антигенов главного комплекса
гистосовместимости (МНС). Противовирусная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые, взаимодействуя с вирусами, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.
Противобактериальный иммунитет направлен как против бактерий, так и против их токсинов
(антитоксический иммунитет). Бактерии и их токсины нейтрализуются антибактериальными и
антитоксическими антителами. Комплексы бактерия (антигены)-антитела активируют комплемент,
компоненты которого присоединяются к Fc-фрагменту антитела, а затем образуют
мембраноатакующий комплекс, разрушающий наружную мембрану клеточной стенки
грамотрицательных бактерий. Пептидогликан клеточных стенок бактерий разрушается лизоцимом.
Антитела и комплемент (СЗЬ) обволакивают бактерии и «приклеивают» их к Fc- и С3b-рецепторам
фагоцитов, выполняя роль опсонинов вместе с другими белками, усиливающими фагоцитоз (Среактивным белком, фибриногеном, маннан-связывающим лектином, сывороточным амилоидом).
Основным механизмом антибактериального иммунитета является фагоцитоз. Фагоциты
направленно перемещаются к объекту фагоцитоза, реагируя на хемоаттрактанты: вещества
микробов, активированные компоненты комплемента (С5а, С3а) и цитокины.
Противобактериальная защита слизистых оболочек обусловлена секреторными IgA, которые,
взаимодействуя с бактериями, препятствуют их адгезии на эпителиоцитах.
Противогрибковый иммунитет. Антитела (IgM, IgG) при микозах выявляются в низких титрах.
Основой противогрибкового иммунитета является клеточный иммунитет. В тканях происходит
фагоцитоз, развивается эпителиоидная гранулематозная реакция, иногда тромбоз кровеносных
сосудов. Микозы, особенно оппортунистические, часто развиваются после длительной антибактериальной терапии и при иммунодефицитах. Они сопровождаются развитием
гиперчувствительности замедленного типа. Возможно развитие аллергических заболеваний после
реcпираторной сенсибилизации фрагментами условно-патогенных грибов родов Aspergillus,
Penicillium, Mucor, Fusarium и др.
Противоопухолевый иммунитет основан на Th1-зависимом клеточном иммунном ответе,
активирующем цитотоксические Т-лимфоциты, макрофаги и NK-клетки. Роль гуморального
(антительного) иммунного ответа невелика, поскольку антитела, соединяясь с антигенными
детерминантами на опухолевых клетках, экранируют их от цитопатогенного действиях иммунных
лимфоцитов. Опухолевый антиген распознается антигенпрезентирующими клетками (дендритными
клетками и макрофагами) и непосредственно или через Т-хелперы (Th1) представляется
цитотоксическим Т-лимфоцитам, разрушающим опухолевую клетку-мишень.
Кроме специфического противоопухолевого иммунитета, иммунный надзор за нормальным
составом тканей реализуется за счет неспецифических факторов. Неспецифические факторы,
повреждающие опухолевые клетки: 1) NK-клетки, система мононуклеарных клеток,
противоопухолевая активность которых усиливается под воздействием интерлейкина-2 (ИЛ-2) и α-,
β-интерферонов; 2) ЛАК-клетки (мононуклеарные клетки и NK-клетки, активированные ИЛ-2); 3)
цитокины (α - и β -интерфероны, ФНО- α и ИЛ-2).
Трансплантационным иммунитетом называют иммунную реакцию макроорганизма,
направленную против пересаженной в него чужеродной ткани (трансплантата). Знание механизмов
20
трансплантационного иммунитета необходимо для решения одной из важнейших проблем
современной медицины — пересадки органов и тканей. Многолетний опыт показал, что успех
операции по пересадке чужеродных органов и тканей в подавляющем большинстве случаев зависит
от иммунологической совместимости тканей донора и реципиента.
Иммунная реакция на чужеродные клетки и ткани обусловлена тем, что в их составе содержатся
генетически чужеродные для организма антигены. Эти антигены, получившие название
трансплантационных или антигенов гистосовместимости, наиболее полно представлены на ЦПМ
клеток.
Реакция отторжения не возникает в случае полной совместимости донора и реципиента по
антигенам гистосовместимости — такое возможно лишь для однояйцовых близнецов.
Выраженность реакции отторжения во многом зависит от степени чужеродности, объема
трансплантируемого материала и состояния иммунореактивности реципиента.
При контакте с чужеродными трансплантационными антигенами организм реагирует факторами
клеточного и гуморального звеньев иммунитета. Основным фактором клеточного
трансплантационного иммунитета являются Т-киллеры. Эти клетки после сенсибилизации
антигенами донора мигрируют в ткани трансплантата и оказывают на них антителонезависимую
клеточно-опосредованную цитотоксичность.
Специфические антитела, которые образуются на чужеродные антигены (гемагглютинины,
гемолизины, лейкотоксины, цитотоксины), имеют важное значение в формировании
трансплантационного иммунитета. Они запускают антителоопосредованный цитолиз трансплантата
(комплемент-опосредованный и антителозависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность).
Возможен адоптивный перенос трансплантационного иммунитета с помощью активированных
лимфоцитов или со специфической антисывороткой от сенсибилизированной особи интактному
макроорганизму.
Механизм иммунного отторжения пересаженных клеток и тканей имеет две фазы. В первой фазе
вокруг трансплантата и сосудов наблюдается скопление иммунокомпетентных клеток (лимфоидная
инфильтрация), в том числе Т-киллеров. Во второй фазе происходит деструкция клеток
трансплантата Т-киллерами, активируются макрофагальное звено, естественные киллеры,
специфический антителогенез. Возникает иммунное воспаление, тромбоз кровеносных сосудов,
нарушается питание трансплантата и происходит его гибель. Разрушенные ткани утилизируются
фагоцитами.
В процессе реакции отторжения формируется клон Т- и В-клеток иммунной памяти. Повторная
попытка пересадки тех же органов и тканей вызывает вторичный иммунный ответ, который
протекает очень бурно и быстро заканчивается отторжением трансплантата.
С клинической точки зрения выделяют острое, сверхострое и отсроченное отторжение
трансплантата. Различаются они по времени реализации реакции и отдельным механизмам.
19. Антитоксины. Применение антитоксических сывороток в медицине.
Антитоксины – антитела, образующиеся в организме под воздействием токсинов
бактериального, растительного, животного происхождения, способные нейтрализовать их
повреждающие свойства. Представляют собой иммуноглобулины класса G. А. – действующее
начало анти–токсинных сывороток, которые получают, иммунизируя животных обезвреженными
токсинами (токсоидами) либо малыми дозами нативных токсинов. А. нейтрализуют токсины,
которые еще не связались клетками организма.
21
Антитоксические сыворотки – иммунопрепараты, изготовляемые из крови иммунных людей и
животных и применяемые для лечения пассивной иммунопрофилактики токсинемических
инфекций (дифтерии, столбняка, ботулизма, некоторых форм стафилококковой инфекции и др.).
Лечебное и профилактическое действие А. с. основано на том, что содержащиеся в них
антитоксины (см.) создают пассивный иммунитет, к-рый защищает организм от токсического
влияния токсинов с момента введения до 30 - 40-го дня после введения. А. с. не оказывают прямого
ингибирующего действия на микробы, продуцирующие токсины, и их эндотоксины. Силу А. с.
измеряют в международных ед. (ME) или АЕ, соответствующих минимальному количеству с-ки,
нейтрализующему стандартную ед. того или иного токсина.
20.Агглютинины, реакция агглютинации, ее разновидности.
Агглютинин — антитело, которое выполняет реакцию агглютинации клеток крови, бактерий и
ряда других антигенных частиц. Агглютинин расположен в плазме крови.
Агглютинины имеют белковую структуру, агглютинируют корпускулярные антигены, а также
принадлежат к иммуноглобулинам. Альфа- и Бета-Агглютинины, являющиеся основными
агглютининами, определяющими групповую принадлежность крови, представлены как
иммуноглобулины IgM, реже как IgG. Их реакция как иммунный ответ протекает по принципу
«антиген-антитело».
Реакция агглютинации — простая по постановке реакция, при которой происходит связывание
антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых
частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекулярных агрегатов). Она
протекает при наличии электролитов, например при добавлении изотонического раствора натрия
хлорида.
Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная,
непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка (клетки,
«склеенные» антителами, име ющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА
используют для:
1) определения антител в сыворотке крови больных, например, при бруцеллезе (реакции Райта,
Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля) и других инфекционных болезнях;
2) определения возбудителя, выделенного от больного;
3) определения групп крови с использованием моноклональных антител против алло-антигенов
эритроцитов.
Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разведениям сыворотки крови больного добавляют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через
несколько часов инкубации при 37 ˚С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр
сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.
Характер и скорость агглютинации зависят от вида антигена и антител. Примером являются
особенности взаимодействия диагностикумов (О- и H-антигенов) со специфическими антителами.
Реакция агглютинации с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие
термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернистой агглютинации. Реакция
агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые формалином, сохранившие термолабильный
жгутиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее.
Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентировочную
реакцию агглютинации, применяя диагностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т.
е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном
стекле. К капле диагностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20
22
добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Рядом ставят контроль: вместо
сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и
микробами хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увеличивающимися разведениями агглютинирующей сыворотки, к которым добавляют по 2—3 капли
взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка и степени просветления
жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмечается в разведении, близком
к титру диагностической сыворотки. Одновременно учитывают контроли: сыворотка, разведенная
изотоническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же
растворе — равномерно мутной, без осадка.
Разные родственные бактерии могут агглютинироваться одной и той же диагностической
агглютинирующей сывороткой, что затрудняет их идентификацию. Поэтому пользуются
адсорбированными агглютинирующими сыворотками, из которых удалены перекрестно
реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыворотках
сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии.
21. Реакция непрямой гемагглютинации, ее разновидности.
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использовании
эритроцитов (или латекса) с адсорбированными на их поверхности антигенами или антителами,
взаимодействие которых с соответствующими антителами или антигенами сыворотки крови
больных вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде
фестончатого осадка.
Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади,
кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая
формалином или глютаральдегидом. Адсорбционная емкость эритроцитов увеличивается при
обработке их растворами танина или хлорида хрома.
Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микроорганизмов, экстракты
бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.
Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для
приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.
Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения
гонадотропного гормона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной
чувствительности к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.
Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой
чувствительностью и специфичностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для идентификации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации
бактериальных продуктов — токсинов в исследуемом патологическом материале. Соответственно
используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные антительные диагностикумы,
полученные путем адсорбции специфических антител на поверхности танизированных
(обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные
разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 %
суспензии нагруженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно
в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой
специфичности.
23
Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка
эритроцитов (без встряхивания): при отрицательной реакции появляется осадок в виде
компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — характерный
кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неровными краями.
22. Преципитины. Реакция преципитации, ее разновидности и применение в медицинской
практике.
Преципитины – Ат, относящиеся к классу IgG и IgM, образующие при взаимодействии с
гомологичным растворимым Аг видимый невооруженным глазом преципитат.
Реакция преципитации (РП) - это формирование и осаждение комплекса растворимого
молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он
образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количествах; избыток одного из
них снижает уровень образования иммунного комплекса.
РП ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др.
Широкое распространение получили разновидности РП в полужидком геле агара или агарозы:
двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др.
Механизм. Проводится с прозрачными коллоидными растворимыми антигенами,
экстрагированными из патологического материала, объектов внешней среды или чистых культур
бактерий. В реакции используют прозрачные диагностические преципитирующие сыворотки с
высокими титрами антител. За титр преципитирующей сыворотки принимают то наибольшее
разведение антигена, которое при взаимодействии с иммунной сывороткой вызывает образование
видимого преципитата — помутнение.
Реакция кольцепреципитации ставится в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в которые вносят
по 0,2—0,3 мл преципити-рующей сыворотки. Затем пастеровской пипеткой медленно наслаивают
0,1—0,2 мл раствора антигена. Пробирки осторожно переводят в'вертикальное положение. Учет
реакции производят через 1—2 мин. В случае положительной реакции на границе между
сывороткой и исследуемым антигеном появляется преципитат в виде белого кольца. В контрольных
пробирках преципитат не образуется.
23. Лизины. Реакция бактериолизиса и гемолиза. РСК, ее использование в диагностике
инфекционных заболеваний.
Специфические АТ, обуславливающие лизис (растворение) клеток, носят название лизинов. Эти
АТ применительно к бактериям называются бактериолизинами, к эритроцитам — гемолизинами.
Лизины способны проявить свое лизирующее действие на АГ только в присутствии
комплемента, который является составной частью любой свежей сыворотки.
Таким образом, в основе реакции лизиса лежит взаимодействие трех компонентов:
1) корпускулярного АГ (бактериальных клеток, эритроцитов и др. клеток);
2) специфических АТ иммунной сыворотки (бактериолизинов, гемолизинов и др.);
3) комплемента (сыворотка морской свинки).
В начале реакция идет по типу агглютинации, затем к комплексу АГ-АТ присоединяется
комплемент. Наступает активация компонентов комплемента, которая приводит к лизису клеток
(АГ).
В микробиологической диагностике реакция бактериолиза применяется для:
24
1) определения вида неизвестного микроба при помощи специфической сыворотки;
2) определения в исследуемой сыворотке наличия бактериолизинов к известному микробу.
Исследуемую сыворотку, для разрушения имеющегося в ней комплемента, инактивируют при 56
°С в течение 30 минут.
Под воздействием бактериолизинов в присутствии комплемента микробы теряют подвижность,
меняют форму (набухают), распадаются и, наконец, совсем растворяются.
Реакция бактериолизина применяется при холере с целью идентификации вибрионов (р.
иммобилизации вибрионов холерными сыворотками) и определения вибриолизинов в сыворотке;
при сифилисе (р. иммобилизации трепонем), при лептоспирозе (р. агглютинации-лизиса); при
возвратном тифе с целью серодиагностики (р. лизиса).
Реакция гемолиза. Под влиянием реакции с АТ-ми в присутствии комплемента мутная взвесь
эритроцитов превращается в ярко красную прозрачную жидкость — «лаковую кровь» вследствие
выхода гемоглобина. Реакция гемолиза используется как индикаторное при постановке
диагностической реакции связывания комплемента (РСК), для титрования комплемента и
гемолитической сыворотки.
Реакция связывания комплемента (РСК) заключается в том, что при соответствии друг другу
антигены и антитела образуют иммунный комплекс, к которому через Fc-фрагмент антител
присоединяется комплемент (С), т. е. происходит связывание комплемента комплексом антиген—
антитело. Если же комплекс антиген—антитело не образуется, то комплемент остается свободным.
Специфическое взаимодействие АГ и AT сопровождается адсорбцией (связыванием)
комплемента. Поскольку процесс связывания комплемента не проявляется визуально, Ж. Борде и
О.Жангу предложили использовать в качестве индикатора гемолитическую систему (эритроциты
барана + гемолитическая сыворотка), которая показывает, фиксирован ли комплемент комплексом
АГ-АТ. Если АГ и AT соответствуют друг другу, т. е. образовался иммунный комплекс, то
комплемент связывается этим комплексом и гемолиза не происходит. Если AT не соответствует АГ,
то комплекс не образуется и комплемент, оставаясь свободным, соединяется со второй системой и
вызывает гемолиз.
Компоненты. Реакция связывания комплемента (РСК) относится к сложным серологическим
реакциям. Для ее проведения необходимы 5 ингредиентов, а именно: АГ, AT и комплемент (первая
система), эритроциты барана и гемолитическая сыворотка (вторая система).
Антигеном для РСК могут быть культуры различных убитых микроорганизмов, их лизаты,
компоненты бактерий, патологически измененных и нормальных органов, тканевых липидов, вирусы и вирусосодержащие материалы.
В качестве комплемента используют свежую или сухую сыворотку морской свинки.
Механизм. РСК проводят в две фазы: 1-я фаза — инкубация смеси, содержащей три компонента
антиген + антитело + комплемент; 2-я фаза (индикаторная) — выявление в смеси свободного
комплемента путем добавления к ней гемолитической системы, состоящей из эритроцитов барана, и
гемолитической сыворотки, содержащей антитела к ним. В 1-й фазе реакции при образовании
комплекса антиген—антитело происходит связывание им комплемента, и тогда во 2-й фазе гемолиз
сенсибилизированных антителами эритроцитов не произойдет; реакция положительная. Если
антиген и антитело не соответствуют друг другу (в исследуемом образце нет антигена или
антитела), комплемент остается свободным и во 2-й фазе присоединится к комплексу эритроцит —
ан-тиэритроцитарное антитело, вызывая гемолиз; реакция отрицательная.
25
Применение. РСК применяют для диагностики многих инфекционных болезней, в частности
сифилиса (реакция Вассермана).
24. Реакция нейтрализации вирусов. РГА, РТГА. Реакция гемадсорбции и задержки
гемадсорбции.
Реакция нейтрализации основана на способности специфических вируснейтрализующих антител
блокировать инфекционные, гемагглютинирующие, гемадсорбирующие, цитопатические,
бляшкообразующие и др. свойства вирусов.
Она применяется в двух направлениях:
1) для идентификации вирусов;
2) для серодиагностики вирусных инфекций, т.е. для определения нарастания титра
вируснейтрализующих антител в «парных» сыворотках.
Компоненты:
1.
2.
3.
Исследуемый вирус (при идентификации выделенною вируса) или исследуемая сыворотка
(при серодиагностике инфекции).
Диагностическая (группе-, видо-, типоспецифическая) сыворотка (при идентификации
вируса) или известный вирус — диагностикум (при серодиагностике).
Индикаторный объект: животные, куриные эмбрионы, культуры тканей или эритроциты.
Реакции нейтрализации ставят в культурах клеток, куриных эмбрионах и на лабораторных
животных.
Принцип. Смесью вирус (исследуемый или известный) + сыворотка (диагностическая или
исследуемая), выдержанной в течение определенного времени, заражают культуру клеток, куриный
эмбрион или лабораторное животное. При (+} реакции, т.е. при нейтрализации вируса антителами
индикаторные объекты продолжают нормально существовать, а в контроле — гибель или
характерные изменения.
РГА
В основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных
антигенов. В качестве исследуемого материала при гемагглютинации используют аллантоисную,
амниотическую жидкость, суспензию хорионаллантоисных оболочек куринных эмбрионов, взвеси и
экстракты из культур или органов животных, зараженных вирусами, нативный инфекционный
материал. РГА не является серологической, поскольку происходит без участия иммунной
сыворотки и используется для выбора рабочего разведения антигена для постановки РТГА или
наличия антигена (вируса) в исследуемом материале (например, при гриппе). В реакции
используются эритроциты животных, птиц, человека I (0) группы крови.
Для постановки ориентировочной РГА на предметное стекло наносят каплю 5% взвеси
эритроцитов и каплю испытуемого материала, тщательно смешивают. При положительном
результате через 1-2 минуты макроскопически наблюдают появление хлопьевидной агглютинации
эритроцитов.
Для постановки РГА в развернутом ряду в лунках полистероловых планшетов готовят двукратно
возрастающие разведения исследуемого материала на физиологическом растворе в объёме 0,5 мл.
Во все пробирки вносят по 0,5 мл 0,25 - 1% взвеси эритроцитов. Результаты учитывают после
полного оседания эритроцитов в контроле (эритроциты + физиологический раствор). Реакцию
учитывают по характеру осадка эритроцитов. В положительных случаях степень агглютинации
26
отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из
склеившихся эритроцитов, покрывающей дно пробирки (зонтик), реакцию с просветами в пленке
отмечают тремя плюсами, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями из склеившихся
эритроцитов обозначают двумя плюсами, хлопьевидный осадок эритроцитов, окруженный зоной
комочков агглютинированных эритроцитов соответствует одному плюсу. Резко очерченный осадок
эритроцитов, неотличимый от контроля показывает отсутствие агглютинации. За титр принимают
предельное разведение исследуемого материала, вызвавшее агглютинацию эритроцитов на два
плюса.
При положительном результате РГА исследование продолжают, определяя тип выделенного
вируса с помощью реакции торможения гемагглютинации типоспецифическими сыворотками.
РТГА основана на свойстве антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как
нейтрализованный специфичными антителами вирус утрачивает способность агглютинировать
эритроциты. При ориентировочном типировании вирусов используют капельный метод на стекле.
Для окончательного установления типовой принадлежности выделенного вируса и титрования
антител в сыворотках ставят развернутую РТГА в пробирках или в лунках. С этой целью готовят
двухкратные разведения сывороток на физиологическом растворе и разливают по 0,25 мл. К
разведениям сыворотки прибавляют по одной капле материала, содержащего вирус и по одной
капле 1% взвеси эритроцитов.
При использовании РТГА для определения типа вируса, используют типоспецифические
сыворотки, которые добавляют к равному объему рабочего разведения антигена. Типовую
принадлежность выделенного вируса устанавливают по специфической иммунной сыворотке,
показавшей наивысший титр антител к этому вирусу.
РГА и РТГА широко применяется для диагностики вирусных инфекций (клещевой энцефалит,
грипп и др.) с целью обнаружения специфических антител и для идентификации многих вирусов по
их антигенам.
Реакция гемадсорбции (Ргад) ставится на культурах ткани при некоторых вирусных болезнях с
целью обнаружения вируса в клетках зараженных культур ткани на ранних стадиях размножения
вируса, то есть до появления цитопатогенного действия (ЦПД). По своей сущности эта реакция не
является серологической и основана на способности зараженных вирусом клеток культуры ткани
адсорбировать на себе эритроциты.
Для постановки РГад используют зараженные вирусом культуры ткани в пробирках. В пробирки
с культурой ткани, зараженной вирусом, не удаляя поддерживающую среду, вносят 0,2 мл 0,5%
взвеси эритроцитов. После этого пробирки оставляют в наклонном положении под углом в 7-10° на
10-15 минут и по истечению этого времени просматривают под микроскопом. При постановке
реакции во втором варианте из пробирок с зараженной культурой ткани предварительно сливают
культуральную жидкость, затем вносят 0,2 мл 0,5% взвеси эритроцитов, пробирки оставляют в
наклонном положении на 10-15 минут, затем культуру ткани промывают физиологическим
раствором (осторожно споласкивают и сливают) и смотрят под микроскопом. При положительной
реакции эритроциты адсорбируются на зараженных клетках и хорошо видны в форме гроздьев,
розеток или беспорядочных скоплений. Если клетки не инфицированы вирусом, то на них
эритроциты не адсорбируются и свободно плавают в культуральной жидкости (в первом варианте)
или смываются при промывании физраствором и не видны (во втором варианте).
Реакция задержки гемадсорбции. В основе этой серологической реакции задержки
гемадсорбции (РЗГад) лежит способность специфической иммунной сыворотки нейтрализовать
гемадсорбирующие свойства клеток культуры ткани, зараженных вирусом. С помощью РЗГад
можно идентифицировать вирус по известной иммунной сыворотке или выявлять антитела в
исследуемых сыворотках крови по известному антигену (вирусу).
27
Для постановки реакции из зараженных пробирок с культурой ткани сливают поддерживающую
среду и культуру ткани промывают ополаскиванием раствором Хенкса, затем в пробирки вносят по
0,2 мл специфической иммунной сыворотки и 0,8 мл раствора Хенкса (в контрольные пробирки
вносят только раствор Хенкса без добавления сыворотки). Сыворотку с зараженной культурой
ткани вылеживают в термостате или при комнатной температуре 40-60 минут и затем в пробирки
вносят по 0,2 мл 0,5% взвеси эритроцитов, оставляют на 10-15 минут и просматривают под
микроскопом.
25. Диагностические сыворотки. Классификация. Виды. Получение. Применение.
В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови больных,
реконвалесцентов и бактерионосителей используются серологические реакции.
Для постановки таких реакций применяются диагностикумы - препараты, содержащие взвесь
обезвреженных микроорганизмов или определенные антигены.
Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций связана не только с
явным их преимуществом перед живыми культурами микробов (безопасность в работе), но еще и
потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой
чувствительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные свойства.
Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего
используются химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом.
Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко.
В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной гемагглютинации,
реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления
специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы.
Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или
отдельные антигенные компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях
агглютинации.
Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или
формалином) с адсорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в
РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., применяют «антительные диагностикумы», т.
е. эритроциты, сенсибилизированные антителами.
Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие
жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных
соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции
торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации.
В настоящее время в лабораториях используются следующие диагноста кумы.
1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Применяется в реакции агглютинации для
обнаружения антител в сыворотке больных.
2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл
(инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-аптител при
сальмонеллезных инфекциях в реакции агглютинации с сывороткой больных.
28
3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Используются в реакции агглютинации для
определения заболевания в прошлом (анамнестическая реакция агглютинации) и реже с
диагностической целью.
4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции агглютинации при выявлении
брюшнотифозного бактерионосительства.
5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных фенолом),
подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения антител в сыворотках крови
больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона.
6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с
адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для
постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллеэной
инфекции.
7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенсибилизированные очищенным Viантигеиом S. typhi, применяется в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства.
8. Гриппозный диагностикум представляет собой аллантоисную жидкость инфицированных
вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и инактивированную мертиолатом или
формалином. Диагностикумы необходимы при постановке РТГА с парными сыворотками больных
для уточнения клинического диагноза и циркулирующего типа вируса гриппа.
9. Диагностикум вируса клещевого энцефалита получают из суспензии мозга белых мышей,
зараженных вирусом клещевого энцефалита. Суспензию подвергают центрифугированию (для
осветлення) и инактивируют химическими веществами.
Диагностикум используется в РТГА и РСК с сывороткой больных при диагностике заболевания.
26. Практическое использование кожных аллергических проб в диагностике
инфекционных заболеваний.
Аллергические пробы - биологические реакции для диагностики ряда заболеваний, основанные
на повышенной чувствительности организма, вызванной аллергеном.
При многих инфекционных заболеваниях за счет активации клеточного иммунитета
развивается повышенная чувствительность организма к возбудителям и продуктам их
жизнедеятельности. На этом основаны аллергические пробы, используемые для диагностики
бактериальных, вирусных, протозойных инфекций, микозов и гельминтозов. Аллергические пробы
обладают специфичностью, но нередко они бывают положительными у переболевших и привитых.
Все аллергические пробы подразделяют на две группы — пробы in vivo и in vitro.
К первой группе {in vivo) относятся кожные пробы, осуществляемые непосредственно на
пациенте и выявляющие аллергию немедленного (через 20 мин) и замедленного (через 24 — 48 ч)
типов.
Аллергические пробы in vitro основаны на выявлении сенсибилизации вне организма больного.
Их применяют тогда, когда по тем или иным причинам нельзя произвести кожные пробы, либо в
тех случаях, когда кожные реакции дают неясные результаты.
29
Для проведения аллергических проб используют аллергены — диагностические препараты,
предназначенные для выявления специфической сенсибилизации организма. Инфекционные аллергены, используемые в диагностике инфекционных заболеваний, представляют собой очищенные
фильтраты бульонных культур, реже взвеси убитых микроорганизмов или АГ, выделенные из них.
Кожные пробы. Инфекционные аллергены вводят, как правило, внутрикожно или накожно,
путем втирания в скарифицированные участки кожи. При внутрикожном способе в среднюю треть
передней поверхности предплечья специальной тонкой иглой вводят 0,1 мл аллергена. Через 28 —
48 ч оценивают результаты реакции ГЗТ, определяя на месте введения размеры папулы.
Неинфекционные аллергены (пыльца растений, бытовая пыль, пищевые продукты,
лекарственные и химические препараты) вводят в кожу уколом (прик-тест), накожно путем
скарификации и втирания или внутрикожной инъекцией разведенного раствора аллергена. В
качестве отрицательного контроля используют ИХН, в качестве положительного — раствор
гистамина. Результаты учитывают в течение 20 мин (ГНТ) по величине папулы (иногда до 20 мм в
диаметре), наличию отека и зуда. Внутрикожные пробы ставят в случае отрицательного или
сомнительного результата прик-теста. По сравнению с последним, дозу аллергена уменьшают в
100-5000 раз.
Кожные пробы на наличие ГЗТ широко применяют для выявления инфицированности людей
микобактериями туберкулеза (проба Манту), возбудителями бруцеллеза (проба Бюрне), лепры
(реакция Митсуды), туляремии, сапа, актиномикоза, дерматомикозов, токсоплазмоза, некоторых
гельминтозов и др.
Пробы in vitro. Эти методы исследования безопасны для больного, достаточно чувствительны,
позволяют количественно оценить уровень аллергизации организма.
27. Вакцинопрофилактика. Типы вакцин, их получение и применение.
Вакцина — медицинский препарат, предназначенный для создания иммунитета к
инфекционным болезням.
Классификации вакцин:
1.Живые вакцины - препараты, действующим началом в которых являются ослабленные тем или
иным способом, потерявшие свою вирулентность, но сохранившие специфическую антигенность
штаммы патогенных бактерий. Примером таких вакцин являются БЦЖ и вакцина против
натуральной оспы человека, в качестве которой используется непатогенный для человека вирус
оспы коров.
2.Инактивированные (убитые) вакцины – препараты, в качестве действующего начала
включающие убитые химическим или физическим способом культуры патогенных вирусов или
бактерий, (клеточные, вирионные) или же извлечённые из патогенных микробов комплексы
антигенов, содержащие в своём составе проективные антигены (субклеточные, субвирионные
вакцины). В препараты иногда добавляют консерванты и адьюванты.
Молекулярные вакцины – в них антиген находится в молекулярной форме или даже в виде
фрагментов его молекул, определяющих специфичность т. е. в виде эпитопов, детерминант.
Корпускулярные вакцины – содержащие в своем составе протективный антиген
3.Анатоксины относятся к числу наиболее эффективных препаратов. Принцип получения –
токсин соответствующей бактерии в молекулярном виде превращают в нетоксичную, но
30
сохранившую свою антигенную специфичность форму путем воздействия 0.4% формальдегида при
37t в течение 3-4 недель, далее анатоксин концентрируют, очищают, добавляют адьюванты.
4.Синтетические вакцины. Молекулы эпитопов сами по себе не обладают высокой
иммуногенностью для повышения их антигенных свойств эти молекулы сшиваются с полимерным
крупномолекулярным безвредным веществом, иногда добавляют адьюванты.
5.Ассоциированные вакцины – препараты, включающие несколько разнородных антигенов.
28-29. Серопрофилактика и серотерапия инфекционных заболеваний. Методы
изготовления и применения сывороток и иммуноглобулинов.
Серотерапия инфекционных заболеваний. Сыворотки и иммуноглобулины, их
изготовление и применение.
Серотерапия и серопрофилактика - использование препаратов сыворотки крови с целью лечения
или профилактики заболеваний (создания искусственного пассивного иммунитета). Иммунные
сыворотки и иммуноглобулины применяют при многих инфекциях как с целью экстренной
иммунопрофилактики (при непосредственной угрозе заболевания), так и с целью иммунотерапии.
Иммунные сыворотки получают путем гипериммунизации лошадей, от которых можно получить
достаточно много крови. Существуют антимикробные и антитоксические сыворотки. С целью
иммунотерапии антитоксические сыворотки применяются наиболее часто. Их получают путем
многократной иммунизации лошадей соответствующим анатоксином. Затем сыворотки
концентрируют и очищают от балластных веществ методом ферментирования и диализа ("
Диаферм"). Силу антитоксических сывороток измеряют в международных единицах (ME) по
способности нейтрализовать определенную дозу токсина. К антитоксическим относятся
противодифтерийная, противостолбнячная, противогангренозная, противоботулиническая
сыворотки.
Антитоксические сыворотки необходимо вводить как можно раньше от начала заболевания, так
как антитела способны нейтрализовать токсин только до его адсорбции на клетках-мишенях.
Вводят сыворотки после обязательного предварительного контроля на чувствительность к
лошадиному белку, поскольку они могут вызывать аллергические реакции, особенно при
повторном введении. Контроль проводят путем постановки внугрикожной пробы с лошадиной
сывороткой в разведении 1:100 в объеме 0,1 мл. Результат учитывают через 20-30 минут. При
отсутствии выраженной кожной реакции вводят необходимую дозу сыворотки.
Кроме гетерологических (ксеногенных) лошадиных сывороток используются аллогенные,
полученные из донорской или плацентарной крови. Из иммунных сывороток получают очищенные
и концентрированные иммуноглобулины.
Препараты иммуноглобулинов, полученные из нормальной или иммунной сыворотки в
настоящее время широко применяются в медицинской практике. Их вводят внутримышечно, а
специальные, дезагрегированные иммуноглобулины - внутривенно.
Нормальный донорский или плацентарный иммуноглобулин содержит много антител различной
специфичности, направленных против всех инфекций, перенесенных донором, или антител,
образовавшихся в результате вакцинации. Как правило, такие иммуноглобулины используются для
иммунотерапии затяжных, вялотекущих инфекций.
Из сыворотки крови специально иммунизированных доноров получают гипериммунные
иммуноглобулины целенаправленного действия. Эти препараты содержат высокий титр антител к
соответствующим возбудителям. Такие специфические иммуноглобулины направленного действия
31
используют для экстренной иммунотерапии (ИТ) и иммунопрофилактики (ИП) столбняка, гриппа,
клещевого энцефалита, стафилококковой инфекции. Например, противостолбнячный донорский
иммуноглобулин используют для экстренной профилактики столбняка у людей с повышенной
чувствительностью к лошадиному белку.
Противоэнцефалитный иммуноглобулин получают из сыворотки крови людей, проживающих в
природных очагах клещевого энцефалита и имеющих достаточно высокий титр специфических
противовирусных антител. Такой препарат вводят в случае появления клещей на теле человека,
находившегося в эндемическом районе.
30. Серологическая диагностика инфекционных заболеваний.
Сущность серологических методов исследования состоит в определении титра антител в
сыворотке крови больного в динамике болезни по отношению к известному антигену, вводимому в
серологическую реакцию.
В клинической практике чаще всего используется реакция агглютинации (РА) Видаля, ее
разновидности, РНГА, РСК и более информативные современные методы (ИФА, РИА, ЛИФА и
др.).
РА — определение неизвестных антител с помощью известных антигенов и установление вида
возбудителя с помощью известных антител. РИГА и РНГА — более специфичны, используются
меченные эритроциты. РТГА — основан на способности некоторых вирусов агглютинировать
эритроциты. РИ — реакция иммунодиффузии, различная способность антигенов и антител
диффундировать в геле. РСК титрование антигенов или антител по степени фиксации комплемента
с комплексом антиген-антитело. PH - способность антител нейтрализовать токсины и антигены
вирусов. ИФА — используются антитела, конъюгированные с ферментом. РИА — используется
радиоактивная метка антигенов или антител. ЛИФА — лантанидный иммунофлюоресцентный
анализ — используются в качестве метки элементы редкоземельных металлов.
32