оплодотворение in vitro

ОПЛОДОТВОРЕНИЕ
Клиницисту важно знать не только то, как происходит оплодотворение, но и какие
причины могут помешать беременности. Целесообразно поэтому рассмотреть возможные
нарушения процесса оплодотворения in vivo. Такие сведения помогают предвидеть
трудности, могущие встретиться при оплодотворении in vitro (ОИВ). Hertig и сотр.
исследовали 34 ранних эмбриона, найденных при промывании женских половых путей и
при патоморфологическом анализе хирургически удаленных органов размножения. В 10
зародышах были обнаружены морфологические изменения, в том числе в 4 из 8,
находившихся на предымплантационной стадии. Поскольку эти 4 «потери» произошли
еще до появления клинических признаков беременности, на 30 «клинически выявляемых»
беременностей приходится 6 «потерь».
Проводя тесты на беременность, авторы пришли к выводу, что приблизительно
25—40% оплодотворенных яйцеклеток теряются еще до того, как беременность могла бы
проявиться клинически. Такая высокая частота аномалий свидетельствует о
биологической селекции аномальных гамет и зародышей в процессе репродукции.
Морфологически измененный сперматозоид обладает меньшей, чем в норме,
способностью проникать в шеечную слизь и в маточно-трубное соустье. Механизм отбора
не срабатывает, очевидно, в отношении внешне нормальных, но имеющих аномальные
хромосомы сперматозоидов. Другой защитный механизм заключается в резком
уменьшении числа сперматозоидов на пути между влагалищем и той частью трубы, где
находится яйцеклетка. Уменьшение числа сперматозоидов, достигающих яйцеклетки,
должно снизить возможность проникновения в нее более чем одной мужской половой
клетки.
Нет данных, которые указывали бы на существование отбора оплодотворенных
яйцеклеток с хромосомными нарушениями на предымплантационной стадии. Однако
поврежденные эмбрионы на этой стадии, по-видимому, все же являются объектом
отбора. Например, кратковременное воздействие на них in vitro актиномицина D (который,
если вводить его в организм матери после имплантации, оказывает сильное тератогенное
действие) с последующей реимплантацией уменьшает число доживающих до окончания
беременности эмбрионов. Среди выживших частота нарушений не больше, чем в
контроле. Это свидетельствует о том, что «предымплантационный» эмбрион реагирует
на экзогенные воздействия по принципу «все или ничего».
Общепризнано, что в постимплантационном периоде (если брать только
клинически установленную беременность) спонтанные аборты в I триместре составляют
15%. Примерно у 50—60% таких абортусов имеются хромосомные нарушения.
Следовательно, у человека хромосомные нарушения встречаются не менее чем в 7,5%
всех оплодотворенных яйцеклеток. Тот факт, что такие нарушения наблюдаются лишь у 1
на 200 новорожденных, свидетельствует о существовании у человека мощных
механизмов отбора, функционирующих на ранних стадиях беременности.
Такие существующие in vivo защитные механизмы при оплодотворении in vitro
отсутствуют. В частности, нет «фильтрующего» эффекта шеечной слизи и маточнотрубного соустья, позволяющего избавиться от сильно поврежденных сперматозоидов. В
большинстве проводимых in vitro экспериментов к яйцеклетке добавляли довольно
большое число сперматозоидов, и это могло бы увеличивать вероятность проникновения
в нее более чем одной мужской гаметы. У мышей, по-видимому, дело обстоит именно так.
Fraser и сотр. среди эмбрионов, полученных при оплодотворении яйцеклеток мыши in
vitro, триплоидные находили чаще (12,8%), чем среди полученных при оплодотворении in
vivo (2,7%). Интересно отметить, что среди двуклеточных мышинных эмбрионов,
полученных in vitro, анэуплоидия (кроме триплоидии) наблюдалась так же часто, как и
среди полученных in vivo. К счастью, почти все триплоидные эмбрионы абортируются
спонтанно, а дополнительную гарантию можно получить при определении кариотипа
клеток плода, взятых с помощью амниоцентеза, в каждом случае оплодотворения in vitro.
Таким образом, повышенный риск триплоидии не может служить аргументом против
оплодотворения in vitro. В 4 случаях беременности при оплодотворении in vitro Steptoe и
Edwards нашли только один триплоидный эмбрион, который был абортирован спонтанно.
Доказано, что среди детей, родившихся до настоящего времени с помощи ОИВ,
частота врожденных аномалий не повышена. Начиная с рождения Луизы Браун в 1978 г.,
ОИВ производят все более успешно. Крупным достижением явилось применение
кломифенцитрата и менопаузного гормона человека (МГЧ) при ОИВ. Эти соединения
стимулируют рост сразу нескольких фолликулов, что увеличивает вероятность
беременности. Результаты улучшаются также в том случае, когда яйцеклетку перед
добавлением сперматозоидов оставляют на 5—8 ч созревать in vitro. В случае
незрелости яйцеклетки, окруженной плотным лучистым венцом и недостаточно
диспергированной массой кумулюса, ей нужно дать созревать in vitro более длительный
срок — 24 ч.
В настоящее время частота беременностей среди женщин, которым вводят
оплодотворенные in vitro яйцеклетки, составляет 20—30%, но есть надежда на
дальнейший прогресс в этой области.