ДИАКОН-ДС КРЕАТИНКИНАЗА ДиаС CK-NAC DiaS ДИАКОН

ДИАКОН-ДС
DiaSys
КРЕАТИНКИНАЗА ДиаС
Информация для заказа
№ набора
SB 10 160 021
SB 10 160 022
Фасовка
R1 268 мл + R2 217 мл
R1 668 мл + R2 617 мл
Справка [1, 2]
Креатинкиназа (КФК) – это фермент, в основном
состоящий из изоферментов мышц (CK-M) и мозга (CK-B).
В сыворотке КФК существует в форме димеров КФК-ММ,
КФК-МБ, КФК-ББ и макроферментов. Повышенные
значения КФК наблюдаются при повреждениях сердечной
мышцы и болезнях скелетных мышц. Измерение КФК,
особенно в сочетании
с КФК-МБ, используется для
диагностики и мониторинга инфарктов миокарда.
Метод
Оптимизированный УФ
рекомендациями DGKC
Клинической Химии) и
Федерация Клинической
Медицины).
Принцип определения
тест в соответствии с
(Германское Общество
IFCC (Международная
Химии и Лабораторной
КФК
Креатинфосфат + AДФ 
 Креатин + ATФ
ГК
Глюкоза + ATФ 
 Глюкоза-6-фосфат + AДФ
Г6ФДГ
Глюкоза-6-фосфат + НAДФ+ 



Глюконат-6-фосфат + НAДФH + H+
Реагенты
Компоненты и их концентрации
в реакционной смеси
R1: Имидазол, ммоль/л
pH 6.7
60
Глюкоза, ммоль/л
27
N-Ацетил цистеин, ммоль/л
27
Ацетат магния, ммоль/л
14
EDTA-Na2, ммоль/л
2
НAДФ, ммоль/л
2,7
Гексокиназа (ГK), кЕ/л
5.0
R2: Имидазол, ммоль/л
160
Креатинфосфат, ммоль/л
160
AДФ, ммоль/л
11
Пентафосфат диаденозина, мкмоль/л 55
Глюкоза-6-фосфат
дегидрогеназа (Г6Ф-ДГ), кЕ/л
14
AMФ, ммоль/л
28
EDTA-Na2, ммоль/л
2
Стабилизаторы и консерванты
Стабильность и хранение
Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2–8°С в
защищенном от света месте. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты!
Меры предосторожности
1. В качестве консерванта реагенты содержат
азид натрия (0.95 г/л). Не глотать! Избегать
контакта реактивов с кожей и слизистыми.
2. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами.
Обезвреживание отходов
В соответствии с местными правилами.
Подготовка реагентов
Запуск реакции субстратом
Реагенты готовы к использованию.
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
CK-NAC DiaS
Запуск реакции образцом
Смешайте 4 части реагента 1 с одной частью
реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) =
монореагент
Стабильность монореагента:
3 недели при 2–8°С
2 дня при 15–25°С
Монореагент хранить в темноте!
Необходимые материалы, не включенные в
набор
• 0.9% раствор NaCl.
• Общее лабораторное оборудование.
Исследуемые образцы
• Сыворотка.
• Гепаринизированная или ЭДТА плазма.
Стабильность [7]:
7 дней
при 4–8°С
2 дня
при 20–25°С
4 недели (в темноте)
при –20°С
Загрязненные образцы хранению не подлежат.
Процедура определения
Адаптации к автоматизированным системам
запрашивайте дополнительно
Длина волны, нм
340, Hg 334, Hg 365
Длина опт. пути, см
1
Температура, °С
37
Измерение
относительно
холостой пробы
Запуск реакции субстратом
Образец/калибр.,
мкл
Дист. вода, мкл
Реагент 1, мкл
Холостая
проба
Образец
–
50
50
1000
–
1000
Перемешать, инкубировать примерно
добавить:
Реагент 2, мкл
250
3
мин,
затем
250
Перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.
А/мин = А/минобразца/калибратора
Запуск реакции образцом
Образец/калибр., мкл
Дист. вода, мкл
Монореактив, мкл
Холостая
проба
Образец
–
40
1000
40
–
1000
Перемешать. Через 3 мин измерить оптическую плотность и включить секундомер. Измерить оптическую плотность через 1, 2 и 3 мин.
А/мин = А/минобразца/калибратора
Расчет
По фактору
Из значений оптической плотности вычислить
A/мин и умножить на соответствующий фактор
из нижеследующей таблицы:
A/мин  фактор = активность КФК [Е/л].
334 нм
340 нм
365 нм
4207
4127
7429
http://www.diakonlab.ru
E-mail: [email protected]
ДИАКОН-ДС
DiaSys
КРЕАТИНКИНАЗА ДиаС
CK-NAC DiaS
По калибратору

A
/мин
образца
КФК [Е/л] =


A
/мин
калибратор
а
 Конц. кал. [Е/л]
Контроли и калибраторы
Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля
качества с каждой серией образцов проводите
измерения контрольных сывороток TruLab N и P.
Кат. №
5 9100 60 10 060
5 9000 60 10 060
5 9050 60 10 060
TruCal U
TruLab N
TruLab P
Фасовка
13 мл
15 мл
15 мл
Рабочие характеристики
Диапазон измерений
При использовании автоматических анализаторов
тест позволяет определять активности КФК в
диапазоне измерений до 1100 Е/л.
В ручном режиме измерений тест применяется для
определения активности КФК, соответствующей
изменению оптической плотности не более A/мин =
0.25 при 340 и 334 нм, или 0.14 при 365 нм. Если
значение превосходит верхнюю границу диапазона,
образец должен быть разведен 1 + 10 изотоническим
раствором NaCl (9 г/л) и полученный результат
должен быть умножен на 11.
Специфичность/Помехоустойчивость
Аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до
40 мг/дл, гемоглобин до 200 мг/дл и липемия до 2000
мг/дл триглицеридов не влияют на точ ность анализа.
Чувствительность/Пределы определения
Нижний предел определения 1 Е/л.
Воспроизводимость
(t = 37°C, число измерений n = 20)
Образец
Среднеарифметиче
ское значение, Е/л
Внутрисерийная
Образец 1
Образец 2
Образец 3
Межсерийная
Образец 1
Образец 2
Образец 3
SD, Е/л
CV, %
159
220
508
3,18
1,54
3,69
2,00
0,70
0,73
49,5
157
228
1.05
1,63
2.31
2,12
1,04
1,01
Нормальные величины
• Взрослые [3], Е/л
Женщины <145
Мужчины <171
Этот диапазон нормальных величин обеспечивает
высокую
диагностическую
чувствительность.
Однако
диагностическая
специфичность при этом низкая, но она может
быть повышена за счет дополнительного
измерения КФК-МБ.
Инфаркт миокарда: риск инфаркта миокарда
высок при наличии трех условий [5] :
Тел.: (495) 980-63-39
Тел./факс: (495) 980-66-79
1. КФК (мужчины)
>190 Е/л (3.12 мкат/л)
КФК (женщины)
>167 Е/л (2.78 мкат/л)
2. КФК-МБ
>24 Е/л (0.40 мкат/л)
3. Активность КФК-МБ составляет от 6 до 25%
от общей активности КФК.
Рассчитывается с использованием температурного
фактора конверсии 2.38 (25°С→37°С).
Если есть подозрение на инфаркт миокарда, а все
три условия не выполняются, то это может означать
недавний инфаркт. В этом случае измерения следует
повторить через 4 часа со свежими образцами.
У здоровых людей значения могут быть разными в
зависимости от расы и возраста [5, 6]. Каждая лаборатория должна проверять соответствуют ли нормальные величины конкретной популяции пациентов
и определять собственные нормальные значения при
необходимости. Для клинической цели значения КФК
должны всегда определяться в комплексе с анамнезом и результатами клинических обследований и
другими данными.
• Дети [1],
Е/л
Кровь из пуповины
175–402
Новорожденные
468–1200

5 дней
195–700
<6 месяцев
41–330
>6 месяцев
24–229
При необходимости, каждая лаборатория должна проверить, применим ли контрольный диапазон величин к местному населению, и определить свой собственный диапазон нормальных
величин. Для диагностических целей значения
СЖК всегда должны рассматриваться в сочетании с анамнезом, клиническим обследованием и другими данными.
Литература
1. Stein W. Creatine kinase (total activity), creatine kinase
isoenzymes and variants. In: Thomas L, ed. Clinical laboratory
diagnostics. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p.
71-80.
2. Moss DW, Henderson AR. Clinical enzymology. In: Burtis CA,
Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd
ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company; 1999. p. 617-721.
3. Schumann G, Bonora R, Ceriotti F, Férard G et al. IFCC
primary reference procedure for the measurement of catalytic
activity concentrations of enzymes at 37°C. Part 5: Reference
procedure for the measurement of catalytic concentration of
creatine kinase. Clin Chem Lab Med 2002; 40: 635-642.
4. Recommendations of the German Society for Clinical
Chemistry. Standardization of methods for the estimation of
enzyme activities in biological fluids: Standard method for the
determination of creatine kinase activity. J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. 1977; 15: 255-260.
5. Stein W. Strategic der klinisch-chemischen Diagnostik des
frischen Myokardinfarkts. Med Welt 1985: 36: 572–7.
6. Myocardial infarction redefined – a consensus document of
the Joint European society of Cardiology/America College of
Cardiology Committee fort he redefinition of myocardial
Infarction. Eur Heart J. 2000; 21: 1502–1513.
7. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic Samples.
1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001; p. 24-5.
Изготовитель
ЗАО «ДИАКОН-ДС»
142290, Московская область, г. Пущино,
ул. Грузовая, д. 1а.
По лицензии «DiaSys Diagnostic Systems
GmbH», Alte Strasse 9, 65558 Holzheim, Germany.
http://www.diakonlab.ru
E-mail: [email protected]