ЗАНЯТИЕ № 1 ТЕМА: МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО

ЗАНЯТИЕ № 1
ТЕМА: МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ. БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКИЙ
МЕТОД.
ХАРАКТЕРИСТИКА
ОСНОВНЫХ
ФОРМ
БАКТЕРИЙ.
МОРФОЛОГИЯ
И
УЛЬТРАСТРУКТУРА БАКТЕРИАЛЬНОЙ КЛЕТКИ. ПРОСТЫЕ И СЛОЖНЫЕ МЕТОДЫ ОКРАСКИ.
ОКРАСКА ПО ГРАМУ. ОКРАСКА ПО НЕЙССЕРУ И ЛЕФФЛЕРУ.
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Предмет и задачи медицинской микробиологии.
2. Микробиологические методы исследований: микроскопический, культуральный, иммунологический,
молекулярно-генетический, экспериментальный.
3. Устройство бактериологической лаборатории, режим работы в ней. Правила работы с заразным материалом и
культурами микроорганизмов. Правила работы со спиртовками.
4. Бактериоскопический (микроскопический) метод исследования. Задачи, этапы, оценка.
5. Техника приготовления микроскопических препаратов из агаровых и бульонных культур микроорганизмов и
окраска их простыми методами.
6. Техника микроскопии. Различные методы микроскопии, их значение в изучении морфологии и ультраструктуры
микроорганизмов. Техника световой иммерсионной микроскопии.
7. Характеристика шарообразных, палочковидных и извитых форм истинных бактерий.
8. Принципы и подходы к систематике и номенклатуре микроорганизмов. Геносистематика. Основные
таксономические категории, их характеристика. Понятие о виде. Категории в пределах вида.
9. Морфология бактерий. Структура бактерий. Основные структуры прокариотной клетки и их функции.
10. Тинкториальные свойства микробов. Понятие о простых и сложных методах окраски.
11. Техника и механизм окраски по Граму. Грамположительные и грамотрицательные бактерии.
12. КОН-тест. Принцип метода.
13. Методы выявления волютиновых зерен. Окраска по Нейссеру.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
 Ознакомиться с организацией работы кафедры, оснащением и режимом работы бактериологической
лаборатории.
 Приготовить препараты-мазки стафилококка со скошенного агара, зафиксировать, окрасить водноспиртовым раствором метиленового синего.
 Изучить правила и технику иммерсионной микроскопии.
 Приготовить мазки из смеси бульонных культур кишечной палочки, антракоида, сарцин,
зафиксировать, окрасить водным раствором фуксина.
 Окрасить по Граму мазки из бульонной культуры стафилококка, агаровой культуры кишечной палочки
и их смеси.
 Постановка и учет результатов КОН-теста с культурами золотистого стафилококка и кишечной палочки.
Смесь бульонных
культур
Staphylococcus aureus
Окраска по ______________
Увеличение _____________
(Escherichia coli,
Bacillus anthracoides,
Sarcina flava)
Окраска по ______________
Увеличение _____________
5►В демонстрационных препаратах изучить морфологию микроорганизмов:
Стрептококки
в чистой культуре
Пневмококки
в органах белых
мышей
Гонококки
в гное уретры
Вибрионы
в чистой культуре
Боррелии
в мазке крови
(указать методы окраски микроскопических препаратов и особенности морфологии микроорганизмов – форму
и расположение в препарате)
Техника окраски по Граму
(указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом этапе окрашивания по методу Грама/ раскрасить
таблицу)
Этап окраски
Грамположительные
бактерии
Грамотрицательные
бактерии
1. Окрашивание _________________________
(время экспозиции ______ )
2. Обработка ____________________________
(время экспозиции ______ )
3. Обработка ___________________________
(время экспозиции ______ )
4. Окрашивание __________________________
(время экспозиции ______ )
Основные морфологические группы бактерий
(изобразите в виде цветных рисунков в соответствии с окраской по Граму)
КОККИ
Диплококки
Бактерии
Вибрионы
Стрептококки
Бациллы
Стафилококки
ПАЛОЧКИ
Стрептобациллы
ИЗВИТЫЕ ФОРМЫ
Спириллы
Сарцины
Клостридии
Спирохеты
1►Окраска по Граму мазков из бульонной культуры стафилококка, агаровой культуры кишечной палочки и
их смеси. Зарисовка препаратов.
Смесь бактерий
(Staphylococcus aureus, Escherichia coli)
Окраска по ______________
Увеличение _____________
2►Приготовление мазка из культуры дифтерийной палочки, окраска метиленовым синим по Леффлеру и
по Нейссеру. Зарисовка препаратов.
Corynebacterium diphtheriae
Corynebacterium diphtheriae
Окраска по ______________
Увеличение _____________
Окраска по ______________
Увеличение _____________
3►Постановка и учет результатов КОН-теста с культурами золотистого стафилококка и кишечной палочки.
Результат КОН-теста
___________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
ДЕМОНСТРАЦИИ
C.diphtheriae
Bordetella
Escherichia coli
B. anthracis
(указать методы окраски микроскопических препаратов и особенности морфологии микроорганизмов – форму
и расположение в препарате)
ЗАНЯТИЕ № 2
ТЕМА: МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ. ЗАЩИТНЫЕ ПРИСПОСОБЛЕНИЯ У
МИКРООРГАНИЗМОВ. МЕТОДЫ ИХ ВЫЯВЛЕНИЯ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОДВИЖНОСТИ.
ПОКОЯЩИЕСЯ
ФОРМЫ
МИКРООРГАНИЗМОВ.
МОРФОЛОГИЯ
СПИРОХЕТ,
АКТИНОМИЦЕТОВ, РИККЕТСИЙ, ХЛАМИДИЙ, L-ФОРМ БАКТЕРИЙ, МИКОПЛАЗМ, ГРИБОВ.
ПЕРЕЧЕНЬ КОНТРОЛЬНЫХ ВОПРОСОВ
1. Споры, стадии и условия образования спор, биологическое значение. Методы выявления спор и
кислотоустойчивых бактерий. Техника окраски по Цилю-Нельсену.
2. Капсулы бактерий, их значение. Способы обнаружения. Техника окраски по Бурри-Гинсу.
3. Определение подвижности. Жгутики, их строение. Изучение подвижности бактерий. Методы исследования
микроорганизмов в живом состоянии. Темнопольная и фазово-контрастная микроскопия.
4. Формы бактерий с дефектами клеточной стенки (протопласты, сферопласты, L-формы).
5. Микоплазмы. Классификация. Филогенез. Морфология, структура, химический состав, особенности
размножения. Методы выявления.
6. Патогенные спирохеты. Систематическое положение и морфология спирохет. Особенности ультраструктуры и
химического состава. Методы исследования.
7. Актиномицеты, морфология, ультраструктура, химический состав. Роль актиномицетов в природе и медицине.
Патогенные виды.
8. Классификация, морфология и строение грибов и методы их обнаружения.
9. Таксономия патогенных риккетсий. Морфология, структура, размножение, способы выявления.
10. Хламидии, особенности морфологии и структуры. Цикл развития хламидий. Методы выявления.
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ И ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА
1►Приготовление мазка из агаровой культуры спороносных бацилл, окраска по Цилю-Нельсену (или по
методу Ожешко), микроскопия и зарисовка.
Техника окраски по Цилю-Нельсену (указать, в какие цвета окрашиваются бактерии на каждом этапе
окрашивания/ раскрасить таблицу)
Этап окраски
1. Обработка __________________________
(время экспозиции _________ )
Также необходимо _____________________
______________________________________
Окраска спор
Окраска
кислотоустойчивых
бактерий
МТ *
← Str *
2 !. Обработка _________________________
Концентрация __________
МТ
3. Окрашивание ________________________
(время экспозиции __________ )
МТ
* МТ – Mycobacterium tuberculosis; Str – стрептококк.
2►Микроскопия препаратов микроорганизмов, окрашенных по Цилю-Нельсену. Зарисовка препаратов.
Bacillus anthracoides
Окраска по ______________
Увеличение _____________
Mycobacterium tuberculosis в
мокроте
Окраска по ______________
Увеличение _____________
3►Приготовление мазка из агаровой культуры палочки риносклеромы, окраска по Бурри-Гинсу, микроскопия
и зарисовка.
Klebsiella rhinoscleromatis
Окраска по __________________
Увеличение _________________
4►Приготовление препарата «раздавленная капля» или «висячая капля» из сенного настоя для изучения
подвижности (указать особенности микроскопии препарата)
_____________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
_____________________________________________________________________________________________
5► Приготовление мазков из агаровой культуры дрожжеподобных грибов, окраска водным раствором
фуксина, микроскопия.
6► Изучение морфологии плесневых грибов.
Candida albicans
Окраска по ______________
Увеличение _____________
Обозначьте на рисунке:
1- дрожжевая клетка;
2- псевдомицелий.
Препарат культуры
плесневых грибов
Окраска по ______________
Увеличение _____________
Обозначьте на рисунке:
1- конидии (спорангии);
2- стеригмы;
3- конидиеносец
(спорангиеносец);
4- мицелий.
► Микроскопия и зарисовка риккетсий Провацека в готовых препаратах, окрашенных по РомановскомуГимзе и Здродовскому.
8► Изучение препаратов боррелий в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе.
ДЕМОНСТРАЦИИ
Rickettsia prowazekii
в органах белых мышей
Rickettsia prowazekii
вакцинный штамм
Borrelia recurrrentis
в мазке крови
(указать методы окраски микроскопических препаратов и особенности морфологии микроорганизмов – форму
и расположение в препарате)