MIPCP203.121211IMMUNOCOMптицыTRANSL

реклама
ImmunoComb
®
Poultry Chlamydophila psittaci
Antibody Test Kit
50PCP103
Инструкция по применению
30 тестов
I. НАЗНАЧЕНИЕ
Этот набор разработан для определения титров IgG антител к к Chlamydophila
psittaci (ранее известный как Chlamydia psittaci) в птичьих стадах.
II. Что такое ImmunoComb®
ИммуноКомб представляет собой автономный портативный комплект, основанный
на принципе твердофазного иммуноферментного анализа. Чувствительный тест,
который определяет уровень антител в плазме, сыворотке и цельной крови.
ImmunoComb® гарантирует получение результатов анализа в течение 38 минут.
III. Как работает ImmunoComb®
В тест-системе ImmunoComb® используется метод непрямого твёрдофазного
иммуноферментного анализа (ИФА).
 ИммуноКомб представляет собой пластиковую карточку в виде Гребня, на
который нанесены очищенные антигены Chlamydophila psittaci.
 Образцы от кур и индеек (диски насыщенные цельной кровью, сыворотка,
плазма) вносятся в отдельные ячейки ряда А Проявочной ванны.
 Образцы Положительного и Отрицательного контролей, поставляемые в
составе набора, вносятся в отдельные ячейки ряда А.
 Далее Гребень вставляется в ячейки с образцами (Ряд А), антитела из
образцов связываются с антигенами нанесенными на зубцы Гребня.
 Каждая Проявочная Ванна может использоваться для анализа
индивидуальных образцов или групп до 10 образцов птиц, при этом от
Гребня отламывается необходимое количество зубцов и используется
соответствующее количество столбцов в Проявочной Ванне. Каждый анализ
должен проводиться совместно с положительным и отрицательным
контролем.
 Гребень переносится в следующую ячейку (ряд B), где вымываются
несвязавшиеся антитела.
 Гребень вставляется в следующую ячейку (ряд С), которая содержит
антитела к IgG антителам птицы, помеченные ферментом (конъюгат). В то
время пока гребень погружен в конъюгат, связанные на зубцах гребня
антитела будут помечены ферментом.
 После еще двух промывок (ряд D и E) Гребень переносится в следующую
ячейку (ряд F), где проходит ферментативная реакция. Эта реакция
приводит к изменению цвета, интенсивность которого указывает на
количество антител, присутствующих в каждом образце.
 Интенсивность серо-фиолетовых точек на каждом зубце должна
переводиться в уровни антител в каждом образце при помощи
калибровочной шкалы CombScale.
IV Меры предосторожности и хранение
 Хранить набор при температуре 2-8°С. Не допускать замораживания.
 Перед проведением теста выдержите все компоненты набора и
исследуемые образцы при комнатной температуре примерно 60-120 минут
(или инкубируйте Проявочную Ванну 22 минуты при 37°C). Исследование
проводите при комнатной температуре (20-25°C).
 Избегайте проливания и перекрестного контаминирования растворов.
 Перемешивайте реагенты путем переворачивания проявочной ванны
несколько раз до использования.
 Не смешивайте реагенты из разных наборов или разных ячеек одного
набора.
 Не касайтесь зубцов Гребня.
 При использовании проявочной ванны вскрывайте покрытие каждой ячейки
строго следуя указаниям в инструкции. Не срывайте все защитное
алюминиевое покрытие единовременно.
 Набор ImmunoComb®
содержит инактивированный биологический
материал. Обращение и утилизация набора возможна только строго в
соответствии с принятыми санитарно-гигиеническими нормами.
V Состав комплекта
Компоненты
Тест на 30 исследований
A. Гребень (в алюминиевой оболочке)
3
B. Проявочная ванна, разделенная на отсеки
AF, которые подразделяются на 12 лунок.
Пластины
отсеков
предварительно
заполнены раствором реагентов.
3
C. Лист перфорированной бумаги с дисками
для работы с цельной кровью.
3
D. Ланцет для взятия крови
4
E . Одноразовый пинцет
1
F. Цветовая палитра CombScale
1
G. Сыворотки для
положительного
отрицательного контроля
и
1
VI Процедура анализа
Анализ проводится при температуре 20°-25°C.
При использовании образцов сыворотки:
Подготовьте образцы сыворотки/плазмы.
Внесите 5 мкл. образца при помощи пипетки или
капиллярной трубки.
Используя поставляемый с набором пинцет,
вскройте защитное фольговое покрытие ряда А
Проявочной
Ванны.
Вскрывайте
только
необходимое количество ячеек.
Внесите образцы (5 мкл) в каждую ячейку.
Перемешайте, аккуратно набирая и выпуская
раствор несколько раз.
Перейдите к шагу 5.
При использовании образцов с дисками пропитанными кровью.
Проколите одну из вен птицы. Возьмите
перфорированный диск и напитайте его
кровью.
Используя пинцет, поставляемый в наборе,
вскройте защитное покрытие ряда А из фольги
. Вскрывайте только необходимое количество
ячеек.
Выдавите диск пропитанный кровью.
Вставьте его в ячейку ряда А, полностью
погрузив в реактив. Подождите 60 минут для
извлечения антител.
Возьмите 5 мкл сыворотки положительного
контроля (C+), входящей в состав набора, и
влейте в ячейку рядом с лункой последнего
образца. Перемешайте содержимое в ячейке.
Выполните аналогичные операции с также
входящей
в
состав
набора
сыворткой
отрицательного контроля (C-)
в следующей
ячейке.
Извлеките Гребень из защитной упаковки и
вставьте его (печатной стороной с надписями к
себе), держа за верхнюю часть, в ряд А. Не
прикасайтесь к зубцам Гребня. Перемешайте
содержимое лунок, аккуратно покачивая Гребень
от себя – к себе и двигая Гребень вверх-вниз, не
вынимая из ячеек. Оставьте Гребень в ячейках
ряда А для инкубации на 10 минут. Повторите это
действие, по меньшей мере дважды, и для
остальных рядов.
При частичном использовании Гребня отломите
нужное
количество
зубцов,
включая
положительный и отрицательный контрольные
зубцы.
Сохраняйте для дальнейшего использования
оставшиеся
неиспользованными
зубцы
запечатанными в своих оригинальных упаковках.
В каждых последующих исследованиях следует использовать только новые
(нераспечатанные) лунки пластины.
Проколите с помощью пинцета крышки необходимого
количества лунок в ряде B.
Аккуратно стряхните избыток жидкости на ткань
(проводите данную процедуру для остальных рядов).
Вставьте Гребень в лунки ряда B (первая промывка)
и инкубируйте 2 минуты, стряхните избыток жидкости
и перенесите Гребень в ряд C (связывание с конъюгатом), инкубируйте в течение
10 минут. Установите гребень в ряд D (вторая промывка) на 2 минуты, затем в
ряд E (третья промывка) на 2 минуты и ряд F (цветная реакция) на 10 минут, что
позволит проявлению цветной реакции для обработки.
По завершении инкубации гребня в ряде F перенесите его обратно в ряд Е
(остановка реакции) на 2 минуты для фиксации проявившегося цвета.
VII. Чтение результатов по шкале
CombScale
Когда Гребень полностью высохнет,
совместите его с калибровочным цветом на
шкале CombScale, входящей в комплект.
Найдите точку пурпурно-серого цвета на
CombScale, которая
наиболее близко
соответствует цвету точки Положительного
Контроля. Двигая желтую линейку, найдите
отметку С+, появившуюся в окошке над
цветом, который вы только что нашли.
Держите линейку в таком положении на
протяжении всего чтения результатов. Этот
шаг фактически калибрует С+ и S3, с
которым и будут сравниваться точки.
Интенсивность пурпурно-серого цвета,
полученного на диагностических точках,
оценивается по шкале от 1 до 6, путём
сравнения результатов теста с цветовым
результатом
точки
Положительного
контроля, который всегда оценивается как
3 , а так же при помощи шкалы CombScale.
Прочитайте каждую из исследуемых точек
на каждом зубце отдельно: Выберите наиболее подходящий цветовой тон и
читайте значения, появившиеся в жёлтых окнах.
Другой способ чтения результатов — это использование прибора
CombScan. Это программа, которая использует компьютер и TWAIN
совместимый сканер. Когда Гребень помещается в сканер, программа
считывает цветовой результат в числовом значении. CombScan помогает
лаборатории в чтении результатов ImmunoComb и сохранении данных.
Программа устанавливается бесплатно по запросу.
VIII.
Чтение и интерпретация результатов.

Оценивайте результаты по каждой точке отдельно.

Нижняя точка ImmunoComb® предназначена для теста на Chlamydophila
psittaci.

Уровень иммуноглобулина
С. psittaci определяется путем сравнения
интенсивности цвета каждого образца по отношению к образцам
положительного контроля (С+). Инструкция по интерпретации результатов с
помощью шкалы соответствия COMBSCALE приведена в разделе VII. См.
иллюстрации 9 и 10 для получения подробной информации.

Результаты сыворотки/плазмы крови с одинаковой или более яркой
цветовой интенсивностью, чем Положительный контроль, считаются
положительными. Анализы крови с дисков считаются положительными при
S2.

Отрицательный контроль состоит из не-иммунной сыворотки и должен
рассматриваться как ноль (S=0). Сыворотки с интенсивностью цвета,
оценённые как S0 или S1 считаются отрицательными. Образцы анализов
крови с дисков оценённые как S1, считаются подозрительными.
Для помощи в интерпретации результатов, пожалуйста, обратитесь к
примеру использованного Гребня и замечаниям ниже.
Внимание! Статистическая погрешность подобна другим анализам ИФА.
Поэтому, ошибка в одном окне цветовой гаммы не приведет к
неправильному диагнозу.
Пример использованного Гребня
Номер образца
Результат анализа
1,5
Высокая положительная реакция на C. psittaci.
2,7
Положительная реакция на C. psittaci.
3
Низкая реакция C. psittaci - считается отрицательным.
В случае использования дисков с кровью, считается
подозрительным.
4
Негативная реакция на C. psittaci.
6
Высокий цвет фона с положительной реакцией.
8
Недействительный тест.
9
Высокий цвет фона. Недействительный тест.
10
Нет точки внутреннего контроля. Недействительный тест.
11
Положительный контроль.
12
Отрицательный контроль.
Скачать