Инсектицидного средства молестрел
реклама
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «МОСКОВСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕТЕРИНАРНОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ ИМЕНИ К.И.СКРЯБИНА» На правах рукописи ЯКУШЕВ ЕВГЕНИЙ СЕРГЕЕВИЧ «ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЕ ИНСЕКТИЦИДНОГО СРЕДСТВА МОЛЕСТРЕЛ» 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: кандидат технических наук, доцент Гордиенко Инна Михайловна Москва – 2012 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ 5 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 10 1.1 Насекомые-кератофаги – основные вредители сырья животного 10 происхождения: общая характеристика и эффективные меры борьбы 1.1.1 Биологические особенности Платяной моли 10 1.1.2 Биологические особенности жука-кожееда 16 1.1.3 Влияние биоповреждающего действия насекомых-кератофагов на качество сырья и полуфабриката животного происхождения 20 1.1.4 Современное состояние ассортимента инсектицидных средств для защиты материалов при биоповреждающем действии насекомыхкератофагов 23 2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 34 2.1 Материалы и методы исследований 34 2.2 Результаты исследований 41 2.2.1 Разработка и оптимизация рецептуры инсектицидного средства Молестрел 41 2.2.2 Технология получения инсектицидного средства Молестрел 48 2.2.3 Токсикологические параметры инсектицидного средства Молест- 51 рел 2.2.3.1 Изучение острой токсичности 51 2.2.3.2 Изучение дермонекротического воздействия на кожу 51 2.2.3.3 Изучение раздражающего действия на слизистые оболочки (конъюнктивальная проба) 52 2.2.4 Стабильность средства Молестрел в процессе хранения 53 2.2.5 Эффективность инсектицидного средства Молестрел в отношении насекомых-кератофагов 57 2.2.5.1 Эффективность средства в отношении гусениц платяной 2 моли 57 2.2.5.2 Эффективность средства в отношении личинок жука-кожееда 61 2.2.5.3 Изучение инсектицидного действия средства Молестрел на различных тест-поверхностях 64 2.2.5.4 Изучение овицидного действия средства Молестрел 66 3. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДСТВА ИНСЕКТИЦИДНОГО СРЕДСТВА МОЛЕСТРЕЛ 67 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ 71 5. ВЫВОДЫ 75 6. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ 76 7. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ 76 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 77 ПРИЛОЖЕНИЯ 93 3 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ Беспропеллентная аэрозольная упаковка – БАУ Высокоэффективная жидкостная хроматография – ВЭЖХ Действующее вещество – ДВ Поверхностно активные вещества – ПАВ 4 ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы. Одним из основных этапов технологического цикла товародвижения является хранение, цель которого обеспечить стабильность исходных свойств или их изменить с минимальными потерями. Одной из важнейших задач некоторых отраслей легкой промышленности является изыскание и внедрение в производство доступных, дешевых и эффективных инсектицидных средств, необходимых для обеспечения заданного уровня санитарно-гигиенической безопасности сырья, полуфабриката и готовой продукции. Биоагентами, вызывающими существенные повреждения сырья и материалов, могут быть не только микроорганизмы, но и представители животного мира – насекомые, грызуны, птицы [70, 83, 124]. Насекомые-кератофаги (платяная моль, жук-кожеед) наносят достаточно высокий экономический ущерб, их присутствие опасно для ряда промышленных производств (главным образом, складов сырья и изделий). Усугубляет вред и то, что насекомые не только съедают часть материала, но и загрязняют его побочными продуктами своей жизнедеятельности – паутиной и экскрементами. Приносимый ущерб ставит их в ряд экономически значимых насекомых-вредителей, борьба с которыми во всем мире является актуальной проблемой науки и практики. Подтверждением тому, служат принятые в высокоразвитых странах государственные и фирменные стандарты методов контроля устойчивости материалов к повреждениям насекомыми- кератофагами, и постоянно обновляющиеся методы интегрированной борьбы с этими вредителями, включающие все известные современной науке направления контроля вредных насекомых [60, 61]. Организационные и технологические трудности применения средств защиты, возникновение резистентности к длительно используемым инсектицидам, экологические ограничения для ряда препаратов, со стороны токсич5 ности и аллергичности для человека, и со стороны сохранности кератинсодержащих материалов и изделий из них, требуют постоянного внимания к этому вопросу. В настоящее время широко применяют инсектицидные средства на основе пиретроидов, преимуществом которых перед традиционными инсектицидами является высокая биологическая активность против насекомых на разных стадиях развития с длительным остаточным действием, и как результат, низкие нормы расхода. Однако имеющиеся на Российском рынке пиретроидные биоциды содержат в своем составе химические растворители, снижающие качество сырья и товаров. Поэтому, разработка новых инсектицидных средств на основе пиретроидов нового поколения является актуальной проблемой для экономики страны. Цель и задачи работы. Цель работы – разработка технологии получения инсектицидного средства Молестрел и оценка его эффективности при биоповреждающем действии насекомых-кератофагов. Для реализации поставленной цели необходимо решить следующие задачи: 1. Разработать оптимальный состав и форму нового инсектицидного средства Молестрел в беспропеллентной аэрозольной упаковке; 2. Провести оценку безвредности инсектицидного средства на лабораторных животных; 3. Определить стабильность средства в процессе хранения; 4. Определить эффективность средства Молестрел при биоповреждающем действии гусениц платяной моли и личинок жука-кожееда в лабораторных условиях; 6 5. Рассчитать экономическую эффективность производства и применения инсектицидного средства; 6. Разработать проект нормативно-технической документации по изготовлению, контролю качества и применению инсектицидного средства Молестрел. Научная новизна. Впервые в России разработана технология изготовления инсектицидного средства на водной основе Молестрел для защиты сырья и полуфабриката животного происхождения от агентов биоповреждений. Средство представляет собой прозрачную бесцветную жидкость в форме спрея, содержащую 0,2 % пиретроида четвертого поколения «Трансфлутрин», 1% солюбелизатора «Неонол», 1 % поверхностно-активного вещества «феноксиэтанол» (ПАВ), 0,05 % яблочной отдушки и воду до 100 %. Установлено, что внесение в состав солюбелизатора способствует переводу трансфлутрина в жидкое состояние в водной среде. Инсектицидное средство Молестрел в концентрации 0,2 % обладает мгновенным нокдаун-эффектом в отношении гусениц моли и личинок жукакожееда. Практическая значимость работы. Предложено новое инсектицидное средство Молестрел для защиты сырья и полуфабриката животного происхождения от насекомых-кератофагов. На базе ЗАО «ДДД» разработаны технологические параметры и изготовлены экспериментальные образцы средства Молестрел. Материалы исследований включены в проект нормативной документации (технологический регламент изготовления, инструкция по применению). Разработаны методические положения «Защита кожевенного и пушномехового сырья от агентов биоповреждений» (одобрены на заседании Бюро отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии протокол № 3 от 02 ноября 2011 г.). Личный вклад соискателя. Автору принадлежит непосредственное 7 осуществление исследований по разработке состава, оценке эффективности применения инсектицидного средства Молестрел от агентов биоповреждений на некоторых видах сырья животного происхождения, а также анализ полученных результатов. В работе использованы материалы, полученные лично автором, а так же при консультативной и методической помощи старшего научного сотрудника лаборатории энтомологии НИИ БНТ Шалатиловой А.Г. Апробация работы. Основные положения и результаты работы были доложены и обсуждены на научно-практической конференции «Обеспечение качества, безопасности и конкурентоспособности потребительских товаров в посткризисный период» (Майкоп, 2010 г.), рассмотрены на Конкурсе молодой ученый Alltech (2011 г.). Материалы по разработке инсектицидного средства рассмотрены и одобрены на научно-производственном совещании ЗАО «ДДД». Публикации. По результатам исследований опубликовано 5 научных статей, в том числе 3 – в изданиях, рекомендованных ВАК РФ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 97 страницах компьютерного текста, в т.ч. 4 страницы приложений и включает следующие разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов, выводы, практическое использование полученных научных результатов, рекомендации по использованию научных выводов, список использованной литературы, включающий 151 источник, в том числе 37 иностранных. Материалы диссертации иллюстрированы 6 рисунками и 16 таблицами. Основные положения и результаты, выносимые на защиту. 1. Технология получения нового инсектицидного средства Молестрел. 2. Результаты оценки безвредности инсектицидного средства Молестрел на лабораторных животных. 3. Оценка эффективности средства Молестрел при биоповреждающем 8 действии гусениц платяной моли и личинок жука-кожееда. 9 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Насекомые-кератофаги – основные вредители сырья животного происхождения: общая характеристика и эффективные меры борьбы 1.1.1 Биологические особенности Платяной моли Моли – это собирательное название для относительно мелких насекомых из отряда чешуекрылых (бабочек, Lepidoptera). Разделение отряда чешуекрылых на дневных бабочек, ночных бабочек и молей достаточно распространено, однако не является научно обоснованным [84, 85]. Настоящие моли (Tineidae) – это семейство молевидных чешуекрылых. Моли бывают от мелких до средних размеров (размах крыльев от 7 до 30 мм). Хотя бабочки моли ничем не питаются (у них даже ротовой аппарат не развит), они опасны тем, что могут отложить яйца. Из яиц появляются гусеницы, для которых материалы животного происхождения, содержащие белки кератин и коллаген – пища, необходимая в больших количествах. Подсчитано, что одна гусеница платяной моли от рождения до окукливания съедает 5,5 мг ткани. Казалось бы, немного, но если учесть, что гусениц этих сотни, а платяная моль может давать до 8 поколений в год, то получится ощутимый ущерб [124]. Полный цикл развития этих насекомых включает стадии яйца, гусеницы, куколки и имаго (бабочка). Бабочки с длиной тела около 1 см, чисто золотистого цвета (платяная моль) или с несколькими темно-коричневыми пятнышками на передних крыльях (шубная моль), не имеют развитого ротового аппарата и не питаются. Их функция состоит исключительно в расселении и размножении. Таким образом, бабочки моли сами по себе – безобиднейшие существа. Опасность представляют яйца, которые они откладывают и гусеницы, которые впоследствии появляются из них [83, 124, 126]. Бабочки молей-кератофагов избегают яркого освещения и предпочитают жить в темных и укромных местах. Их летная активность максимальна 10 в сумерки. Однако в полутемном помещении моли активны в любое время суток [66, 110, 120]. Из огромного разнообразия отряда Чешуекрылых наибольший интерес представляет вид платяная моль Tineola bisselliella (Humm.), приносящий наибольший вред меховым товарам. Главная особенность этих молей – способность переваривать труднорастворимые склеропротеины ороговевшего эпителия кожи, коллаген, а также кератин. Кератин, входящий в состав, например, волос и пера – сложный фибриллярный белок, состоящий из длинных полипептидных цепей. Кератин можно сделать менее устойчивым к протеолитическим ферментам, если разорвать его дисульфидные связи. Процесс этот может протекать только при наличии специальных ферментов [54]. Предки молей-кератофагов – мицетофаги, жившие в гнездах позвоночных, где и приобрели способность питаться сильно заплесневевшими веществами растительного и животного происхождения. Мицетофагия играла важную роль в переходе молей к питанию трудноусвояемыми кератиносодержащими веществами в силу двух обстоятельств. Во-первых, плесневые грибы и некоторые микроорганизмы способны расщеплять кератин до аминокислот, которые и послужили источником питания для гусениц. Во-вторых, приспособление гусениц к питанию грибами, содержащими кератиноподобные вещества, обусловило развитие у гусениц ферментов, способных расщеплять кератин [44]. Питаясь материалами кератиновой природы и изделиями из них, в частности, пером, шерстью, мехом, шерстяными тканями, войлоком, коврами, гусеницы приносят существенный вред хозяйству человека. Усугубляет вред то, что гусеницы не только съедают часть материала, но и загрязняют его побочными продуктами своей жизнедеятельности – паутиной, экскрементами и линочными шкурками [117, 121]. 11 Ущерб от питания гусениц моли определяется часто не общей массой съеденного, а спецификой повреждения ими материалов и изделий. Даже небольшие отверстия, прогрызенные гусеницами в шерстяном текстиле, особенно в готовых изделиях, делают их непригодными к эксплуатации. Большой вред приносят моли-кератофаги пушно-меховому хозяйству. Съедает моль лишь небольшой кусочек каждого волоса. Но, так как гусеницы питаются скрытно, оставаясь постоянно около кожи, они фактически подстригают волос, что приводит к выпадению обширных участков меха [85]. Особенно сильно моли могут повреждать комбинированные ткани, и более других те, в которых шерсть и синтетика спрядены в одну нить. В таких случаях для получения достаточного количества пищи гусеница вынуждена съедать большее ее количество из-за невозможности усвоить часть съеденного. Описано также питание гусениц моли выделанной кожей (переплетами старинных книг, пергаментом), хотя этот материал содержит не кератин, а коллаген. Наконец, для гусениц молей-кератофагов характерны непищевые повреждения. Когда материал некератиновой природы препятствует гусенице в достижении корма или мест окукливания, она способна преодолеть препятствие, прогрызая в нем отверстие. Зарегистрированы повреждения молямикератофагами картона книжных переплетов, бумаги (писчей и фильтровальной), тканей хлопчатобумажных, льняных и ряда синтетических, полиэтиленовой пленки, хлорвиниловой пленки, изоляции телефонных проводов и других материалов. Моль платяная (Tineola biselliella), отличается небольшими размерами (размах 0,9 – 1,2 см) и светлой, соломенной с золотистым блеском окраской крыльев (рис. 1). 12 Рисунок 1. Моль платяная Tineola biselliella Humm Бабочки не имеют ротового аппарата и не питаются. Их функция состоит исключительно в расселении и размножении. К спариванию бабочки этого вида способны приступать, едва вылетев из куколки. Несмотря на то, что бабочки платяной моли, как и всех других видов молей-кератофагов, не питаются, они отличаются сравнительно большой продолжительностью жизни. При температуре около 24 0С и относительной влажности 55 – 70 % их самцы живут 16 – 25 дней, до конца жизни сохраняя способность к спариванию. Не спаривавшиеся самцы живут еще дольше – до 33 дней. Самки живут несколько меньше самцов. Плодовитость самки очень зависит от температуры культивирования гусениц и может колебаться от 30 до 221 яйца на особь. В условиях, обычных для жилища человека (22 – 25 0С, относительная влажность воздуха (ОВ) 50 – 70 %), плодовитость моли составляет 100 – 130 яиц на особь. Самка откладывает яйца на протяжении всей жизни небольшими порциями, прикрепляя их к субстрату. Она способна находить кератинсодержащие материалы и откладывать яйца на их поверхность или в непосредственной близости от них, если прямой доступ затруднен [43, 44, 95, 130]. 13 Стадии развития синантропных молей постоянны и хорошо изучены. Полный цикл развития этих насекомых включает стадии яйца, гусеницы, куколки и имаго (бабочка). Гусеницы – единственная питающаяся стадия молей-кератофагов. Платяная моль утратила сезонный ритм развития, и ее гусеницы могут активно питаться и размножаться круглый год, лишь несколько снижая темп развития в ноябре-декабре, даже при постоянной температуре и влажности воздуха. Продолжительность этой стадии, число возрастов, длительность межличиночных интервалов и размеры гусениц очень изменчивы и зависят от качества пищи, температуры, относительной влажности воздуха и особенностей географических популяций, не имеющих до сих пор объяснения. По данным А.К. Загуляева [43, 44], гусеницы разных видов молей-кератофагов имеют 6 – 8 возрастов. Число возрастов гусениц платяной моли в полном цикле развития колеблется от 5 до 17. Столь большое количество возрастов отмечено только для этого вида моли. Оптимальная температура развития молей – 23 – 25 0С. Известна стойкость гусениц молей к низким температурам. Гусеницы ведут скрытый образ жизни и имеют отрицательную реакцию на свет [4, 94 – 96]. Количество корма, съедаемого гусеницей платяной моли, изучено многими авторами [1, 45, 95, 98]. В среднем гусеница в возрасте 25 – 28 суток со дня откладки яиц в оптимальных условиях температуры и влажности (24,5±1 0 С, 65±8 % ОВ) съедает не менее 0,4 мг шерсти за 14 дней. В тонкой шерстя- ной ткани гусеница старшего возраста прогрызает сквозное отверстие за сутки. Прожорливость выращиваемых в стандартных условиях гусениц платяной моли разных популяций может различаться вдвое. Следует отметить, что это насекомое отличаются чрезвычайно ограниченными требованиями к кормовому субстрату и совершенно не нуждающееся в воде для питья, тем не менее, очень плохо развивается на чистом кератине, бедном такими аминокислотами, как триптофан, метионин, гистидин, 14 лизин. Известно [1, 32], что гусеницы моли повреждают, как правило, шерстяные изделия в местах их загрязнения потом, слюной, продуктами питания человека (томатный сок, кофе и т.п.). В то же время, излишнее загрязнение шерсти, например, ланолином (немытый состриг), также отрицательно влияет на ее потребление молями и их развитие. Установлено, что для лабораторной культуры оптимальным кормом является мытая шерсть с добавлением пивных дрожжей, как источника витаминов группы B [44, 26]. Исследования позволяют составить следующий перечень пищевых субстратов гусениц: волос, мех, шерсть, щетина, перо, кожа, рога, копыта, кости, сушеное мясо и рыба, сухие насекомые, сухие экскременты млекопитающих, птиц и насекомых, а также такие изделия, как войлок, шерстяные пряжа и ткани, выделанные меха, бархат, ковры, чучела и скелеты животных, переплеты книг, пергамент, костяная и рыбная мука, высушенный змеиный яд и т.д. [72, 96]. При оптимальном питании и оптимальных климатических условиях полное развитие особи от яйца до вылета имаго длится около 40 дней. Вид может давать до 8 поколений в год. Для этого вида моли характерно явление остановки развития (физиологического покоя). При воздействии различных негативных факторов, например, при отсутствии подходящего корма, физиологический покой гусениц продолжается нередко до 11 месяцев, а в одном случае наблюдали такую паузу длиной в 4 года. Платяная моль не переживает длительного промораживания. Отрицательная температура – 15 0С в течение 5 – 10 часов приводит к гибели всех стадий этого насекомого. При температуре 41 0С все стадии платяной моли гибнут за 4 дня. Платяная моль лучше других молей-кератофагов переносит сухость воздуха. Тем не менее, выявленный экспериментальным путем оптимум относительной влажности воздуха для развития ее гусениц составляет 65±8 %. Понижение влажности негативно сказывается на развитии платяной моли. Именно с этим фактором связывают заметное сокращение распростра15 нения платяной моли в жилых помещениях после введения системы парового отопления, при котором влажность в помещениях падает до 10 – 13 % [84]. В связи со способностью молей переваривать кератин за последние десятилетия были предприняты исследования по изучению особенностей пищеварения платяной моли. Установлено [84], что в средей кишке рН достигает 9,9, а иногда доходит до 10,2; окислительно-восстановительный потенциал средней кишки от -250 до -280 и может достигать -300 mV. Окислительновосстановительный потенциал задней кишки +250 mV. Имеется предположение, что волокна шерсти длиной 70 – 150 нм могут быть разрушены кишечной дегидрогеназой. Недавно остриженная шерсть, в которой целы все дисульфидные зненья и нет сульфогидрильной группы, полностью переваривается [84]. Таким образом, характер питания и мест обитания молей-кератофагов делает их присутствие опасным для ряда промышленных производств (главным образом, в местах складирования сырья и готовых изделий), для музеев, хранящих уникальные кератинсодержащие экспонаты и для повседневного быта. Приносимый этими молями ущерб ставит их в ряд экономически значимых насекомых-вредителей, борьба с которыми во всем мире является актуальной проблемой науки и практики. Подтверждением тому служат принятые в высокоразвитых странах государственные и фирменные стандарты методов контроля устойчивости материалов к повреждениям молью и постоянно обновляющиеся методы интегрированной борьбы с этими вредителями, включающие все известные современной науке направления контроля вредных насекомых. 1.1.2 Биологические особенности жука-кожееда Активными потребителями органических веществ волосяного и кожного покрова сырья и полуфабриката животного происхождения являются также представители сравнительно небольшого семейства отряда жуков – 16 кожеедов, насчитывающего только в фауне нашей страны около 130 видов, из них 42 – вредоносных [131, 132, 140, 141]. Жуки-кожееды представляют собой сравнительно небольшую, но очень значительную с точки зрения биоповреждений группу жуков. Это опасные вредители материалов животного и растительного происхождения, шелководства и музейных коллекций [39, 145]. Жуки-кожееды имеют овальное тело, реже удлиненное или почти круглое. Длина тела 1,3 – 11,0 мм, ширина 0,5 – 5,0 мм. Обладают булавовидными усиками, которые могут прятаться в глубокую щель впереди груда. Личинки кожеедов подвижные, с жесткими покровами, покрыты длинными торчащими волосками, часто с особенно крупным пучком волосков, образующих своеобразный «хвост». Длина личинки 1,5 – 17,0 мм, ширина 0,5 – 5,0 мм [5, 36 – 38, 116]. Самки откладывают яйца небольшими порциями в щели или на поверхность материалов. Продолжительность инкубационного периода зависит от температуры и может колебаться от 2 до 55 суток. Личинки начинают питаться вскоре после выхода их из яйца. При оптимальных условиях личинки линяют 5 – 7 раз с интервалом в 4 – 9 суток. Перед окукливанием личинки выкапывают в почве или выгрызают в субстрате ход длиной 5 – 10 см, заканчивающийся небольшой камерой. Продолжительность стадии куколки 4 – 20 суток. Большинство кожеедов имеет однолетнюю генерацию, однако в отапливаемых помещениях многие виды дают одно – четыре поколения в год [63, 111, 133]. 17 Рисунок 2. Жук-кожеед А. smirnovi Кожееды размножаются быстро, и если они прочно угнездятся в складских помещениях, с ними трудно бороться. Главное затруднение заключается в том, что личинки кожееда обладают способностью быстро передвигаться, а взрослые жучки – летать. Жизненный цикл кожееда состоит из четырех стадий: яйцо, личинка, куколка и насекомое. Цикл развития кожееда от яйца до взрослого жучка продолжается 40 – 50 дней. При благоприятных условиях кожеед может дать 3 – 4 поколения. Самки откладывают яйца на сухом сырье, обычно весной с наступлением тепла (апрель – май) [12, 111, 134]. Они развиваются практически во всех местах, где имеются скопления веществ животного происхождения. Высокая устойчивость кожеедов к действию неблагоприятных факторов среды, сравнительно высокая плодовитость жуков в сочетании с низкой смертностью личинок служат причиной того, что их численность на складах увеличивается с очень большой скоростью [31, 37, 111]. Многие виды этого семейства жуков обладают склонностью к синантропизации. Этому способствует обилие пищи и благоприятный микроклимат в отапливаемых помещениях. В связи с развитием всесторонних торговых отношений и интенсификацией культурного обмена вредные виды завозятся из других регионов и акклиматизируются в новых местах обитания [139, 146]. 18 Пищевая пластичность личинок кожеедов и активный поиск ими пищевых субстратов во многом определяют разнообразие повреждаемых ими музейных материалов: шерстяной текстиль, изделия из меха, кожи, рога, шелка, различные виды бумаги, животный и растительные клеи, многие синтетические материалы. Наиболее привлекательны для кожеедов шерстяной текстиль, изделия из меха и перьев, кожи хромового и хромтанидного дубления. К группе «умеренно привлекательных» относятся шелковые ткани, некоторые виды кож. При вынужденном питании шелком ряд видов кожеедов могут полностью завершить свой цикл развития [23]. Такие материалы, как хлопчатобумажные и льняные ткани, нейлон, полипропилен, полиэтилен, капрон, ледерин, газетную, конденсаторную и чайную бумаги и др., личинки кожеедов повреждают только при поисках пригодных пищевых материалов или места для окукливания [137, 138]. Наибольшей устойчивостью к кожеедам обладают материалы с повышенной кислотностью. Среди синтетических материалов, перспективных для использования в музеях, не повреждаются личинками кожеедов антифрикционная ткань нафтлен и огнеупорная ткань аримид. Электрофлокированные материалы, имитирующие бархат и замшеподобные, используются личинками кожеедов как среда обитания и повреждаются ими в незначительной степени. Нитроокрашивание уменьшает кожеедоустойчивость кож всех способов выделки. Хорошим аттрактантом для личинок кожеедов является реставрационный клей из пшеничной муки [45]. Размножаясь в тех или иных материалах, насекомые выгрызают в них многочисленные ходы и отверстия, загрязняют их шкурками и экскрементами, быстро приводя их в негодность. Кроме того, личинки многих видов жуков часто повреждают материалы и предметы, которыми они не питаются, а используют как субстрат для построения куколочной камеры. Перед окукливанием личинки покидают те вещества, в которых протекало их развитие, и вгрызаются в любые находящиеся рядом предметы [38]. 19 Внешний вид повреждений кожеедами тканей и кож определяется особенностями структуры поверхности материала. Так, на изделиях из фетра личинки сначала съедают волокнистый поверхностный слой, а затем начинают повреждать основу. Домотканная шерстяная ткань повреждается личинками кожеедов беспорядочно: личинки растаскивают ее на отдельные волокна. На изделиях из меха и бархата личинки «выстригают» отдельные участки. Гладкие ткани с плотным переплетением волокон кожееды повреждают, начиная, как правило, с бахромчатого края. Личинки кожеедов из рода Attagenus (кожеед Смирнова, шубный, ковровый и др.) при наличии выбора предпочитают гладким материалам ворсистые, волосистые, рыхловолокнистые – то есть с выраженным рельефом поверхности. Личинки кожеедов способны длительное время обходиться без пищи: из рода Anthrenus – до месяца, а кожееда Смирнова – несколько месяцев. При отсутствии выбора личинки кожеедов могут питаться несвойственными им материалами. Таким образом, за счет специфики и характера питания жуки-кожееды приобретают особую вредноносность и являются опасными для большинства отраслей сельского хозяйства. Поэтому для защиты кератинсодержащих материалов необходимо постоянно вести борьбу от их биоповреждающего действия. 1.1.3 Влияние биоповреждающего действия насекомых-кератофагов на качество сырья и полуфабриката животного происхождения Гусеницы моли и личинки жука-кожееда наносят достаточно высокий экономический ущерб народному хозяйству, который обусловлен не только поеданием кератина волосяного покрова, но и загрязнением его побочными продуктами своей жизнедеятельности – паутиной, экскрементами и линочными шкурками [84]. 20 Ущерб от питания насекомых-кератофагов определяется часто не общей массой съеденного, а спецификой повреждения ими материалов и изделий. Даже небольшие отверстия, прогрызенные гусеницами в меховом и пушном сырье, особенно в готовых изделиях, делают их непригодными к эксплуатации [1, 60, 107]. В результате «пищевых» и «непищевых» повреждений гусеницами моли и личинками жука-кожееда существенно изменяются товарные, а в конечном итоге и потребительские свойства шкурок. При этом сырье теряет такие основополагающие свойства волосяного покрова и шкурки в целом, как: прочность (способность волос выдерживать нагрузку при растяжении и изгибе до момента разрыва); густота (количество волос, покрывающих единицу площади шкурки, выражаемая в количестве волос на 1 см2); высота и длина волосяного покрова в местах повреждения насекомы- ми-кератофагами; носкость меха (важнейшее комплексное свойство шкурки в целом, определяющееся степенью сопротивления волосяного и кожного покровов различным разрушительным воздействиям в процессах эксплуатации, хранения и др.); эстетические свойства волосяного покрова. Все это приводит к уменьшению ценности сырья и полуфабриката с точки зрения товароведной оценки. Пушное сырье, поврежденное насекомыми-кератофагами (пороки, называемые «молеедина» и «кожеедина»), относят к браку и принимают с зачетом не более 25 % (35 % – для шкурок норки и лисицы клеточного разведения) от стоимости пушной головки [54]. Кроме того, гусеницы моли и личинки жука-кожееда, находясь в непосредственной близости с поверхностью кожи, повреждают кожевенный по21 луфабрикат с мездряной стороны. На коже образуются многочисленные ходы и бахтармяная сторона становится разрыхленной. 0собенно сильно гусеницы моли могут повреждать комбинированные ткани, и более других те, в которых шерсть и синтетика спрядены в одну нить. В таких случаях для получения достаточного количества пищи гусеница вынуждена съедать большее ее количество из-за невозможности усвоить часть съеденного. При повреждении гусеницами моли готовой шерстяной ткани, в нём образуются дыры, сырьё сильно загрязняется побочными продуктами жизнедеятельности моли – паутиной, экскрементами и личиночными шкурками. Всё это делает его не пригодным для дальнейшей выработки фабриката. Так же личинки пробуравливают ходы вдоль ткани, что уменьшает её прочность и как следствие ценность. Ухудшается внешний вид материала, его эстетические свойства. Он может легко порваться с образованием дыры. В итоге уменьшается и количество материала, пригодного для использования [41, 42, 83, 101, 117, 148]. Кожееды наиболее часто повреждают кожи и кожевенное сырье, меха, перо, шерсть, мясо, сыр, сухое молоко, сушеную и копченую рыбу, клей, музейные экспонаты, переплеты книг. На шелководческих предприятиях они сильно повреждают коконы тутового шелкопряда, прогрызая в них отверстия и делая их непригодными для размотки [23]. Для кожевенного сырья поврежденного кожеедом характерны такие пороки как кожеедины, безличины. Сухое консервированное сырье при хранении транспортировки часто поражается кожеедом. Образующийся порок, представляет собой сложную сеть ходов, слегка углубляющуюся в кожевую ткань и пронизывающую ее. Наиболее часто вызывают повреждения кожевой ткани пресно-сухих и реже сухосоленых шкур взрослые жуки и личинки ветчинного кожееда и кожееда Фриша, несколько реже-кожееды сибирский, волнистый, шиповатый и мышино-серый [83]. 22 Температура +12 0С и ниже приостанавливает развитие кожеедов во всех стадиях. При 50 – 70 и 3 0С кожееды во всех фазах развития гибнут за 20 минут. Кожевенные и другие виды животного сырья заражаются кожеедами в результате перелета жуков, переноса личинок и жуков с инвентарем, сырьем. При анализе данных литературы отмечено, что гусеницы платяной моли и личинки жука-кожееда оказывают биоповрежающее действие на сырье и полуфабрикат животного происхождения и, в конечном итоге, снижают их потребительские свойства, таким образом, снижая ценность кератинсодержащих материалов и изделий из них для реальных и потенциальных потребителей. 1.1.4 Современное состояние ассортимента инсектицидных средств для защиты материалов при биоповреждающем действии насекомыхкератофагов В начале прошлого века с насекомыми-кератофагами боролись при помощи растворов или суспензий на основе бензина, скипидара, фенола, камфоры и этилового спирта, обрабатывая одежду перед укладкой на хранение распылением растворов или суспензий. Но все эти смеси огнеопасны, и порой вместе с молью погибали и вещи, и дома, и склады, и их хозяева [11, 14 – 16, 40, 87]. Использовали так же лавандовое и пихтовое масло. Правда, моль они не уничтожают, а лишь отпугивают. Но тем самым не позволяют самкам отложить на вещах яйца. Моль не терпит запаха типографской краски. Поэтому целесообразно вещи, перед тем как сложить их на хранение, обернуть в свежие газеты, а затем уже в упаковочную бумагу или холщовые мешки [46]. Отпугивающим, действием обладают так же запах табака, перца и земляничного мыла, листья герани, ромашки. Для отпугивания насекомых ши- 23 роко используют аэрозоли Дихлофос, они эффективны, но при работе с ними нужно обязательно закрывать нос и рот марлевой повязкой [92, 97]. По типу действия современные антимольные средства бывают: контактные; фумигационные. Каждый из типов имеет как свои плюсы, так и минусы. Контактные препараты (аэрозоли и водные эмульсии) воздействуют на насекомых, попадая на самих насекомых, контактные поверхности или субстрат (питательная среда, в которой моль явно не умрет с голода, — ткань, мех и т. д.). Такие средства распыляют в помещении или замкнутом пространстве (например, в шкафу), еще ими можно обработать верхнюю одежду и чехлы, в которых она хранится. Существенный недостаток: ядовитые пары. Гусеницы моли, поедая активное вещество, погибают. Еще один недостаток аэрозолей – небольшая продолжительность эффективного действия [67]. У фумигационных средств по насекомым наносит удар не само действующее вещество, а его летучие пары, которые проникают через трахеи. Они выпускаются обычно в виде таблеток и пластин, их раскладывают и развешивают (пластины бывают и с петлей) в шкафах, коробках, чемоданах и т. д. Большой плюс фумигационных средств – достаточно большой срок действия [52]. В зависимости же от того, как действующее вещество воздействует на насекомых-кератофагов (убивает их или отпугивает), средство может быть: инсектицидом (уничтожающие средства); репеллентом (отпугивающие средства). Применяемые для борьбы с молями инсектициды подразделяются по их действию на внутренние (или кишечные), наружные (или контактные), и газообразные (удушающие или фумиганты) [34, 29, 57]. Методы применения инсектицидов различны и зависят от характера действия последних на насекомых. Инсектициды используют в виде раство24 ров, эмульсий, суспензий (опрыскивание); порошков (опыливание); газов (фумигация); туманов-аэрозолей; дымов. Если ситуация критическая, то места, где обнаружена моль, обрабатывают соответствующими инсектицидными средствами, чаще всего, в аэрозольной упаковке [102]. В аэрозоли в основном входят такие инсектициды, как перметрин и тетраметрин [119]. Инсектицидными свойствами могут обладать и пластины, если они содержат летучий инсектицид (вапортрин, трансфлутрин). Пластины или развешивают в шкафу, или раскладывают между вещами [103]. Избавиться от гусениц можно с помощью инсектицидов, если проводить обработку 3 – 4 раза в год [89]. Если же ситуация далека от критической, то необходимо своевременно проводить профилактику, используя фумигационные средства с репеллентными свойствами. Они тоже бывают в виде пластин и таблеток, но в качестве действующего вещества содержат всевозможные отдушки (лаванду, кедр, гераниевое масло и др.). Не следует забывать, что через несколько месяцев пластины и таблетки необходимо заменить на новые [49, 52, 92]. Слабая изученность видового состава молей привела к смешиванию видов, имеющих различную биологию. Поэтому применяемые методы борьбы зачастую не дают желаемых результатов. Борьба с молями может быть успешной только при знании биологии видов и сочетании профилактических и истребительных мероприятий, обусловленных конкретной обстановкой [6, 7, 10, 86, 88]. К примеру, для уничтожения моли в закрытых хранилищах одежды, используют довольно доступные химические средства Антимоль и Дезмоль. В шкафу стандартных размеров (1 м3) равномерно распределяют 3 – 4 марлевых мешочка с таблеткой того или другого препарата. Антимольное действие таблеток длится соответственно 2 – 3 недели и 4 месяца, после чего их надо заменить новыми [2]. 25 Отмечено, что наиболее же эффективным и удобным в применении антимольным средством пока остается Молемор. Разрез по намеченному контуру «окошко» в газонепроницаемой пленке, которая служит упаковкой полимерной пластинки, открывает доступ в шкаф, чемодан и т. д. микроколичествам инсектицидного вещества, достаточным для полного уничтожения моли. Повесив одну пластинку Молемора в шкафу, можно не беспокоиться за содержимое на протяжении полугода [2, 3]. Для защиты от моли вещей, которые нельзя убрать в шкаф или чемодан, созданы препараты так называемого контактного действия. Раз в 3 – 4, 5 или 9 месяцев можно обработать ковровые изделия, обивку мягкой мебели, теплую обувь жидким средством Супромит, Моримоль или Фоксид. Не ме- нее 6 месяцев действует новый жидкий препарат на основе лерметрина Миттокс. Обработку изделий, находящихся в открытом хранении, средством в аэрозольной упаковке Дифокс рекомендуется повторить через 5 месяцев [2, 60 – 62]. Чтобы убить гусениц и личинок, приходится использовать химические антимольные средства, среди которых выделяют три основные группы: 1. Фосфоорганические соединения (ФОС) – очень эффективны, но токсичны для теплокровных. Их применение сходит на нет, особенно в пищевой промшленности. На западе применение ФОС запрещено. 2. Карбаматы – так же токсичны, почему не находят применения в современной дезинсекции. 3. Пиретроиды [21, 50, 52]. Несмотря на достаточное количество публикаций и патентов [3, 8, 9, 19, 35, 48, 49, 73 – 82, 90, 91, 100, 106, 109, 112, 114, 144], в настоящее время ученые заняты разработкой более эффективных средств для защиты от моли и кожееда, которые заменят собой используемые на данный момент, и будут в большей степени отвечать возросшим требованиям к химическим средствам, применяемым в быту. 26 Особое место здесь занимают пиретроиды, в основу которых входит вещество пиретрум, впервые полученное из цветков кавказской, персидской, далматской и других видов ромашки, это естественный инсектицид [86, 112, 118, 149]. Далее началось производство синтетического аналога с введением в состав цианогрупп, фосфо- и серных групп для увеличения токсичности для насекомых [17, 142]. Пиретроиды – синтетические эфиры хризантемовой кислоты, аналоги пиретринов. Получают взаимодействием хлорангидрида хризантемовой кислоты со спиртовой компонентой в присутствии третичных аминов или переэтерификацией этилового эфира хризантемовой кислоты в присутствии натрия [13, 51, 59, 108]. Их подразделяют на два типа. Различают пиретроиды первого поколения (аллетрин и другие вещества, близкие по строению к природным соединениям), второго поколения (производные хризантемовой кислоты) и третьего поколений (эфиры перметриновой, циклопропанкарбоновой, изовалериановой кислот – перметрин, ципермстрин, фенвалерат, дельтаметрин) [55, 56, 78, 81, 106, 113]. По проявлению симптомов отравления у членистоногих пиретроиды делят на два типа. Воздействие пиретроидов первого типа (аллетрин, неопинамин) приводит к повышенной активности членистоногих, тремору, дискоординации движений и параличу. Препараты второго типа (дельтаметрин, циперметрин) вызывают медленную деполяризацию мембраны и нервных окончаний и последующую блокаду проводимости нерва, что сопровождается параличом. Препараты второго типа действуют замедленно [69, 150]. Одним из свойств, обуславливающих высокую инсектицидную активность синтетических пиретроидов, является их выраженная липофильность, которая увеличивает поступление пиретроидов в организм насекомых [58, 135, 136, 143]. В настоящее время известно, что инсектицидная активность пиретроидов усиливается с понижением температуры. Повышенная активность об27 менных процессов в организме насекомых при высоких температурах способствует более быстрому распаду пиретроидов, ослабляя тем самым их инсектицидное влияние. Действие пиретроидов ослабевает при повышении температуры и почти исчезает при температуре выше 30 0С. Параллельно снижению активности снижается и способность блокировать натриевые каналы. Поэтому у теплокровных животных токсическое действие пиретроидов не проявляется [22, 129]. Синтетические пиретроиды, быстро разлагаясь, не загрязняют окружающую среду и являются самыми безопасными на сегодняшний день препаратами. Они имеют малую токсичность по отношению к млекопитающим, отличную химическую и фотохимическую стабильность, хорошо совместимы со многими красителями и текстильно-вспомогательными веществами (ТВВ). Ценное качество синтетических пиретроидов – сравнительно малая токсичность большинства из них для млекопитающих, обусловленная быстрым разрушением и выведением их из организма теплокровных [20, 24, 33, 47, 53, 115, 125, 128]. К этой группе химических антимольных средств относятся эмпетрин, трансфлутрин, перметрин, циперметрин и другие [151]. Первое сообщение об использовании пиретроидов, в частности перметрина, против молей-кератофагов появилось в 70-х гг. прошлого века [119, 147]. В след за перметрином были синтезированы новые действующие вещества из класса пиретроидов, которые нашли применение в разнообразных препаративных формах антимольных средств, удобных для применения не только в быту, но и на объектах различного назначения. Средства, содержащие пиретроиды, могут быть предназначены для уничтожения бабочек, гусениц, яиц насекомых-кератофагов (псевоовоцидное действие), защиты от них кератинсодержащих материалов (шерсть, мех, войлок, перо, натуральный шелк и др.), льняных хлопчатобумажных тканей и изделий из них, в том чис- 28 ле ковровых и напольных покрытий, зоологических коллекций и др. [2, 3, 117]. Некоторыми исследователями [76, 104, 105] предложены инсектицидные препараты, включающие в свой состав в качестве действующего вещества пиретроид трансфлутрин, который представляет собой инсектицид контактной и ингаляционной активности с быстрым действием. Трансфлутрин относится к химическому семейству: синтетические пиретроиды, и имеет 3, 4 классы токсичности (вещества умеренно опасные). Внешний вид варьирует от бесцветной до коричневой жидкости или мягких или твердых кристаллов. Температура плавления: 30 – 35 0С. Растворимость в воде (при 20 0С) – 0,057 мг/л, растворимость в органических растворителях – > 200 г/л. Рисунок 3. Структурная формула трансфлутрина Трансфлутрин обладает широким спектром действия против сельскохозяйственных и бытовых насекомых-вредителей (в частности против моликератофага); крайне эффективен при небольших дозировках (в отличие от других синтетических пиретроидов); достигается моментальный нокдаунэффект за счет нарушения передачи нервного импульса по нервным клеткам насекомых, что вызывает паралич и дальнейшую гибель насекомых. 29 Уровень испаряемости трансфлутрина достаточно высок (испаряется даже при комнатной температуре), благодаря чему препарат может применяться как с нагреваемыми, так и с ненагреваемыми аппаратами. Испаряемость, при этом, обеспечивает длительный отталкивающий эффект, препятствуя возвращению насекомых, за счет концентрации в воздухе паров и некоторого количества активных веществ после распыления. Благодаря всем перечисленным свойствам трансфлутрин является активным компонентом многих инновационных аэрозолей, испарителей (спиралей, пластин, светодиодов, ненагреваемых аппаратов) и средств от платяной моли [122, 123, 127, 151]. Аэрозоли. Рекомендуемая дозировка для трансфлутрина составляет 0,02 – 0,04 % для ловушек для летающих насекомых (ЛЛН) и 0,02 – 0,08 % для ловушек для ползающих насекомых (ЛПН). Трансфлутрин дает ЛЛН отличный "нокдаун" и истребляющий эффект, особенно против комаров. Кроме того, благодаря высокой степени испарения, некоторое количество активных веществ остается в воздухе после распыления: это обеспечивает длительный отталкивающий эффект, препятствующий возвращению насекомых в комнату. Полное действие трансфлутрина может быть усилено дополнительными истребляющими активными компонентами или комбинацией с синергистом пиперонил бутоксид. Кроме того, пиперонил бутоксид, благодаря своим специальным свойствам, выгодно снижает количество активных компонентов в составе, приводя к большей ценовой эффективности товара. Спирали. Доза для использования в спиралях варьируется между 0,02 и 0,04 %. Кроме того, что действие трансфлутрина эффективно при довольно низкой дозировке, трансфлутрин обладает рядом других преимуществ, таких как: • никаких отходов в течение всего времени работы: полностью испаряется • доказанная эффективность, даже против стойких москитов. 30 Пластины. Концентрация трансфлутрина для эффективного инсектицидного действия в пластинах составляет 10 – 13 мг на каждую. Из-за его быстрого испарения трансфлутрин можно использовать с приборами из целлюлозы при низком уровне нагрева или со специальными пластмассовыми приборами с нормальным уровнем нагрева. Светодиоды. Рекомендуемая дозировка для испарителей составляет 0,88 % в углеводородном растворе. Главные преимущества трансфлутрина при применении в данном случае: • постоянный уровень испарения, таким образом, постоянное действие во время всего заявленного рабочего срока • не происходит засорение фитиля, поэтому жидкость полностью потребляется • отличный контроль с первых секунд действия. Испаритель с обогревом окружающим воздухом. Трансфлутрин подходит для развития инновационных продуктов работающих при комнатной температуре (липких лент, портативные устройства, и т.д), при этом эффективность сопоставима со спиралями. Трансфлутрин – наиболее эффективный и выгодный активный компонент на рынке для данного продукта. Он может быть смешан и применен как в аэрозолях, так и в твердых продуктах типа пропиточной бумаги, мешочках от моли и т.д. Сравнительные тесты, проведенные с полосками бумаги, показали большую эффективность, чем при применении эмпентрина с точки зрения: дозировки, длительности действия, биологической эффективности (профилактический эффект, уничтожение личинок, препятствие размножению, отпугивание взрослых насекомых) [127]. Согласно Реестру продукции, прошедшей государственную регистрацию, в РФ к настоящему времени зарегистрировано 16 препаратов, имеющих в своем составе вещество трансфлутрин. 31 Для уничтожения летающих насекомых (мух, комаров, бабочек моли) компанией Байер АГ предложено средство инсектицидное Байгон-аэрозоль против летающих насекомых» в форме – аэрозольного баллона, содержащее в качестве действующих веществ цифлутрин – 0,025 % и трансфлутрин – 0,04 %. Для защиты шерсти, меха и изделий из них, верхней одежды, ковров от моли в дезинфекционную практику введено средство инсектицидное фумигирующее РАПТОР Секция от моли на трансфлутрине с различными запахами (апельсин, мандарин, грейпфрут, лаванда, лимон, лайм, кедр, цветочный, без запаха) [105]. Уничтожает не только бабочек моли, но и ее личинки. Обработанный по особой технологии пористый многослойный картон обладает высокой поглощающей и испаряющей способностью, что обеспечивает продолжительное действие и высокую эффективность секций в борьбе как с бабочками, так и с личинками. Компания ЗАО Инвент представляет средство инсектицидное Антимольная секция для защиты шерсти, меха и изделий из них от повреждения молью населением в быту [104]. Эммрихом Робертом Р. с соавт. [76] запатентовано изделие для борьбы с летающими насекомыми в среде с движением воздуха и способ борьбы с летающими насекомыми. Активный ингредиент в данном препарате – трансфлутрин. Изделие для борьбы с насекомыми помещают в среду с движением воздуха, с помощью крепежного средства пропитанную подложку закрепляют для циркуляции воздуха, что позволяет действующему веществу пассивно испаряться в воздух. Анализ ассортимента средств от моли и кожееда показывает необходимость разработки препаратов, содержащих действующие вещества из новых химических классов, для возможности ротации инсектицидов в рамках интегрированной борьбы с насекомыми-кератофагами. 32 Рассматривая данные литературы можно заключить, что повысить эффективность защиты продукции звероводства и животноводства от агентов биоповреждений возможно путем применения инсектицидных средств с пролонгированным действием, так как большинство агентов биоповреждений имеет большей частью растянутые во времени циклы развития даже в пределах одной популяции. Поэтому методы и средства уничтожения насекомых-кератофагов должны постоянно совершенствоваться путем создания инсектицидов с более видоспецифичным действием. Достижение оптимального эффекта инсектицидного препарата зависит от ряда факторов: выбора оптимальной формы, природы вспомогательных веществ, технологических операций, физического состояния средства. Таким образом, современная наука предлагает довольно широкий ассортимент инсектицидных средств для защиты сырья животного происхождения и продукции из него от агентов биоповреждений. Тем не менее, в настоящее время на практике специалисты располагают инсектицидами с коротким временем действия: от нескольких часов до нескольких дней, кроме того, плохая изученность биологии видов насекомыхкератофагов, наносящих вред кератинсодержащим материалам и развитие резистентности насекомых к этим средствам не обеспечивают полностью успешной борьбы с этими биоагентами. Поэтому разработка инсектицидных средств пролонгированного действия является весьма актуальной и своевременной. 33 2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы исследований Работа выполнена в период с 2008 по 2011 гг. на кафедре товароведения и технологии сырья животного происхождения им. С.А. Каспарьянца ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины биотехнологии имени К.И.Скрябина». Ряд экспериментов был проведен на базе ЗАО «ДДД» и в лаборатории энтомологии Научно- исследовательского института биоцидов и нанобиотехнологий (НИИ БНТ). Для исследований было использовано 7620 гусениц платяной моли Tineola biselliella Humm в возрасте 3 – 4 недель, 5700 личинок и 120 имаго кожееда А. smirnovi, а так же 300 личинок и 120 имаго кожееда А. simulanus. В качестве подопытных животных использовали 60 белых мышей и 10 кроликов породы шиншилла. Изучение острой токсичности средства Молестрел проводили на беспородных белых мышах массой 18 – 20 г. Животные были разделены на 6 групп по 10 голов в каждой. Исследование проводили в соответствии с методическими рекомендациями, представленными в «Руководстве по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [93]. Наблюдение за состоянием животных осуществляли в течение 14 дней. Класс опасности препаративной формы определяли в соответствии с ГОСТ 12.1.007 – 76 [25]. Проверку дермонекротического воздействия на кожу средства Молестрел проводили на 5 кроликах породы шиншилла массой 2,0 – 2,2 кг. Для постановки опыта методом биотестирования (кожная проба) у кролика на участке кожи размером 8х9 см в области бедра тщательно выстригали волосяной покров, на выстриженный участок кожи кролика наносили по 3 капли раствора испытуемого вещества. Время экспозиции составляет 2 часа. В кон- 34 це эксперимента испытуемое средство смывали. Наблюдение за реакцией кожи осуществляли сразу после окончания экспозиции и далее продолжали в течение 14 суток [64]. Изучение местного раздражающего действия на слизистые оболочки (конъюнктивальная проба) проводили на 5 кроликах породы шиншилла массой 2,0 – 2,2 кг. Для постановки опыта 1 каплю инсектицидного средства Молестрел вводили глазной пипеткой с вытянутым тонким концом в конъюнктивальный мешок правого глаза животных, а в левый – контрольный глаз животных закапывали 1 каплю физиологического раствора. Реакцию учитывали через 15 минут и спустя 24, 48 часов по внешнему виду конъюнктивы и по реакции склеры [64, 93]. Для установления срока и режима хранения нами была изучена стабильность опытных образцов инсектицидного средства Молестрел в условиях естественного хранения [71]. Оценку качества средства в процессе хранения проводили по таким показателям как: внешний вид, номинальный объем, концентрация водородных ионов (рН), подлинность и массовая доля трансфлутрина. Определение показателей качества проводили в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи XI [27, 28]. Качество инсектицидного средства Молестрел оценивали в процессе хранения при различных режимах и времени. Подлинность трансфлутрина определяли методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в лаборатории молекулярных исследований ГУ Научно-исследовательский институт вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН (под руководством к.в.н., ведущего научного сотрудника О.Е. Латышева). Метод основан на определении времени выхода пика трансфлутрина, содержащегося в инсектицидном средстве Молестрел и сравнении его с временем выхода пика стандартного раствора трансфлутрина. Детектирование осуществляли в УФ области спектра при длине волны 235 нм. 35 Реактивы и оборудование. Высокоэффективный жидкостный хроматограф, оснащенный фотометром с переменной длинной волны, самописцем, интегратором и системой для обработки хроматографических данных «МультиХром». Колонка из нержавеющей стали 4,0х250 мм «Reprosil-Pur C8». Весы аналитические Колбы мерные вместимостью 25, 1000 см3 Ацетонитрил Вода дистиллированная Стандарт трансфлутрина Подготовка элюента. В мерную колбу на 1000 см3 вносили ацетонитрил и 0,1 %-ный водный раствор ортофосфорной кислоты в объемном соотношении 85:15. Подготовка стандартных растворов. 100 мг соответствующего стандарта трансфлутрина вносили в мерную колбу на 25 см3 и растворяли в 5 см3 ацетонитрила в течение 30 минут. Подготовка испытуемых образцов средства Молестрел. В мерную колбу на 25 см3 вносили готовую форму средства Молестрел и ацетонитрил в объемном соотношении 1:3. Ход определения. Хроматографирование испытуемого и контрольного (стандартного) образцов проводили в следующих условиях: Температура колонки 14 0С. Длина волны 235 нм. Скорость потока элюента 0,8 см3/мин Объем вводимой пробы 20 мкл Чувствительность определения трансфлутрина выше описанным методом ВЭЖХ составляет 0,5 мкг/см3. 36 Для оценки эффективности инсектицидного средства Молестрел были проведены лабораторные опыты на насекомых-кератофагах в условиях лаборатории энтомологии НИИ БНТ в соответствии с требованиями МУК 3.5.2.1759 – 03 [65]. Исследования проводили на следующих образцах пушно-мехового сырья и полуфабриката: шкурках соболя, норки, кролика, овчины, а также образцах немытой шерсти и готовой шерстяной ткани. В качестве контрольных вариантов использовали образцы чистого сукна артикул 11-34. Образцы исследуемых видов сырья и полуфабриката животного происхождения отбирали в соответствии с требованиями ГОСТ 9.055 – 75 [26]. Для изучения острого действия инсектицидного средства Молестрел на гусениц платяной моли и личинки жука-кожееда на подготовленные по ГОСТ 9.055 – 75 образцы шкурок пушно-мехового сырья и полуфабрикат размером (3×3 см) наносили инсектицидное средство путем равномерного распыления с расстояния 20 – 25 см из расчета 25 см3/м2. После высыхания образцы помещали в чашки Петри, пластиковые стаканчики и подсаживали в каждые по 10 гусениц платяной моли и личинок жука-кожееда. Оценку испытания острого действия инсектицидного средства проводили путём учёта гибели насекомых в течение 72 часов. Для определения эффективности остаточного инсектицидного действия образцы обрабатывали средством путем равномерного распыления с расстояния 20 – 25 см из расчёта 25 см3/м2 и хранили в лабораторной посуде (в каждой чашке/стаканчике по одному образцу) при комнатной температуре, естественной влажности и освещённости. Через месяц на образцы подсаживали по 10 гусениц платяной моли и по 10 личинок жука-кожееда. На 3 сутки подсчитывали число погибших и оставшихся в живых насекомыхкератофагов. Определяли процент гибели личинок [65]. 37 Оценку эффективности средств в беспропеллентных аэрозольных упаковках (БАУ) по отношению к гусеницам платяной моли и личинкам кожееда проводили в камере объёмом 1м3, снабженной вентиляционной системой. Дно камеры выстилали фильтровальной бумагой. Температура в камере при проведении эксперимента составляла 20±2 0С, относительная влажность 55 %. Для характеристики эффективности средств упакованных в БАУ с механическим распылителем, анализируемым по 2-м показателям – определяли острое действие и период остаточного действия [65]. При определении острого действия опыты проводили в трех параллельных пробах. Насекомых-кератофагов помещали в лабораторную посуду (одноразовые пластиковые стаканы объёмом 250 см3/ чашки Петри) и орошали их препаратом с высоты 20 – 25 см. Норма расхода 50 см3/м2. Затем насекомых переносили в чистую посуду через 15 минут после обработки. Учет результатов опыта проводили через 15 мин, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов и 24 часа. Для изучения длительности остаточного действия спрея предварительно в пяти точках дна камеры были расположены модельные тестповерхности (не впитывающая воду – стекло, впитывающая воду – фанера), размером 10х10 см. Эти поверхности после их обработки и подсушки хранили (1 мес) в вертикальном положении при комнатной температуре (20±2 0С) и периодически с интервалом 1 неделя на них подсаживали гусениц платяной моли и личинок жука-кожееда для выявления длительности инсектицидного действия. Поверхности орошали препаратом из БАУ с высоты 20 см, направляя струю спрея под углом 45 0С. Тест поверхности удаляли из камеры через 15 минут после орошения. Норма расхода средства 50 см3/м2 для стекла и 100 см3/м2 для фанеры. Расход препарата определяли путём взвешивания БАУ до и после опыта. Насекомых после контакта с обрабатываемыми поверхностями переносили в чистые стаканы и регистрировали их состояние в течение 38 24, 48 и 72 часов. Действие инсектицида считают законченным, когда смертность насекомых составляет менее 50 % [65]. Кроме того, оценку эффективности средства в отношении насекомыхкератофагов проводили на основе метода «ускоренного старения» [18]. С этой целью все образцы обрабатывали проверяемым инсектицидным средством до легкого увлажнения, взвешивали и выдерживали в термостате при температуре 40 0С в течение месяца. Затем на испытуемые образцы подсаживали насекомых-кератофагов (по 10 личинок в опыте). Хранили подготовленные образцы согласно «Временной инструкции И-42-2 – 82 по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре» [18]. Сроки хранения в термостате рассчитывали по формуле C=K *Сэ (1), где С – срок годности; Сэ – экспериментальный срок годности; К – коэффициент соответствия. К=Ах x= (Тэ-Тхр)/10 (2), (3), А – температурный коэффициент скорости химической реакции, Тэ – повышенная температура 40 0С, Тхр – температура хранения 20 0С. Поскольку в данной инструкции температурный коэффициент скорости химической реакции А принят равным 2, тогда в нашем случае х=2, К=22=4. Таким образом, при сохранении инсектицидности в течение 1-го месяца хранения образцов в термостате при 40 0С, срок годности препарата в обычных условиях равен 4 мес. 39 Для определения овицидного действия для яиц молей образцы сукна обрабатывали средством Молестрел путем равномерного распыления с расстояния 20 – 25 см из расчёта 25 см3/м2 и хранили в лабораторной посуде в естественных условиях. После высыхания на образцы помещали по 10 штук яиц 3 – 5 дневного возраста. Яйца, размещенные на сукне, просматривали с помощью монокулярного микроскопа серии «Biolam» Lomo с увеличением 20x0,40 на 5 и 10 сутки от начала эксперимента, и подсчитывали число погибших яиц [65]. Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием компьютерной программы «STATISTICA». 40 2.2 Результаты исследований 2.2.1 Разработка и оптимизация рецептуры инсектицидного средства Молестрел В настоящее время российский рынок инсектицидных средств активно развивается. В последние годы существенно расширился ассортимент выпускаемых инсектицидных препаратов. Однако при этом качество выпускаемой продукции не всегда соответствует запросам потребителей, несмотря на достаточно жесткие требования, предъявляемые к показателям ее характеризующим. В связи с этим возникает необходимость формирования нужных свойств и характеристик продукции на всех этапах ее жизненного цикла. Эти свойства и характеристики при создании продукции могут быть самыми разнообразными как по уровню, так и по сочетанию. Однако необходимо помнить, что качество продукта можно и должно планировать как при разработке его самого, так и при осуществлении процесса его изготовления. Современное инсектицидное средство является сбалансированным соотношением множества ингредиентов. Действующее вещество препарата совместно со всеми другими ингредиентами обеспечивает инсектицидное качество препарата и поэтому возникает необходимость тщательного подбора, контроля и соблюдения технологических режимов при его изготовлении. В процессе приготовления оптимальных рецептур препаратов существенное значение имеет подбор вспомогательных компонентов, обеспечивающих растворение, эмульгирование, суспензирование действующих веществ. Для составления оптимальной формы средства Молестрел нами проверено множество вариантов композиций, включавших различные ингредиенты, разрешенные для применения на территории РФ, а именно, трансфлутрин, солюбилизатор, поверхностно активные вещества (ПАВ), отдушку и дистиллированную воду. 41 В качестве действующего вещества (ДВ) испытывали трансфлутрин – инсектицид контактной и фумигационной активности с быстрым действием, обладающий широким спектром действия против сельскохозяйственных и бытовых насекомых-вредителей и который крайне эффективен при небольших дозировках. Механизм действия препарата основан на блокаде проведения нервных импульсов (поддержании натриевых каналов мембраны нервных волокон в открытом состоянии), приводящей к параличу и гибели насекомых. При выборе концентрации действующего вещества – трансфлутрина в готовой форме учитывали данные литературы и результаты собственных исследований по изучению инсектицидной эффективности подобранных вариантов композиций. При составлении готовой лекарственной формы препарата важно было подобрать основу раствора. Нами были испытаны три варианта основы – дистиллированная вода, этиловый спирт и глицерин при разных значениях рН, температуры и в зависимости от последовательности внесения компонентов. Из полученных данных было установлено, что глицерин в качестве основы оказался неудачным вариантом из-за нестабильности раствора трансфлутрина. Кроме того, композиция на данной основе при ее нанесении на обрабатываемый материал, оставляла следы и тем самым снижала его основополагающие свойства. В этиловом спирте и дистиллированной воде удалось получить стабильные растворы трансфлутрина. При испытании в качестве основы этилового спирта и дистиллированной воды были получены сходные результаты. Учитывая экономическую составляющую, дальнейшие испытания проводили с использованием дистиллированной воды. Кроме нескольких вариантов основы раствора в состав композиции были введены такие необходимые компоненты как солюбилизатор и ПАВ обу42 славливающие стабилизирующую и формообразующую функции. В качестве солюбилизатора был использован неонол, имеющий хорошую биоразлагаемость, что является положительным с точки зрения экологичности. Введение в состав композиции ПАВ (феноксиэтанол), который обладает хорошим антибактериальным и антисептическим свойствами. Это обеспечивает сохранность действующего вещества и, следовательно, эффективность препарата в целом. Кроме того с учетом бытового назначения использования препарата в состав вводили отдушку со вкусом зеленое яблоко. В процессе оптимизации состава препарата были изучены разные соотношения ингредиентов, величины которых варьируют в следующих пределах, % (табл.1). Таблица 1. Варианты соотношений ингредиентов при оптимизации состава инсектицидного средства Молестрел Варианты состава инсектицидного средства Наименование компонентов 1 2 3 4 Концентрации компонентов инсектицидного средства, % 0,1 0,15 0,2 5 Трансфлутрин 0,05 Солюбилизатор 1 1 1 1 1 ПАВ 1 1 1 1 1 Яблочная отдушка 0,05 0,05 0,05 0,05 0,05 Дистиллированная вода 100 100 100 100 100 0,3 В процессе проведения опытов было установлено, что при растворении составных компонентов для получения стабильного раствора, важное значение имеет последовательность их растворения и температура растворителя. Нарушение этих параметров приводило к образованию в течение 5 – 10 мин не стабильных растворов (мутный раствор, выпадение осадка, не растворение компонентов). 43 При изучении влияния температурного фактора на растворимость компонентов важно было так же учитывать, что действие трансфлутрина ослабевает и почти исчезает при температуре выше 30 0С. В результате проведенных исследований, было установлено, что наиболее оптимальной для растворения трансфлутрина оказалась комнатная температура в диапазоне 18 – 20 0С. Полученный стабильный раствор, представляющий собой прозрачную жидкость без осадка с приятным запахом зеленого яблока имел реакцию среды (рН) в пределах 6,5 – 6,7. На следующем этапе наших исследований проводили оценку эффективности острого действия выбранных композиций инсектицидного средства в соответствии с МУК 3.5.2.1759 – 03 на образцах немытой шерсти и готовой шерстяной ткани. Для этого подготавливали по три образца площадью 3х3 см2 и помещали их в лабораторную посуду (стаканы и чашки Петри). Далее полученные образцы обрабатывали различными композициями средства на расстоянии 20 – 25 см от обрабатываемой поверхности из расчета 25 см3/м2. После высыхания образцов, на них (на каждый в отдельности) подсаживали по 10 гусениц платяной моли и по 10 личинок жука-кожееда. В качестве контроля использовали не обработанные образцы сукна артикулом 1134. Анализ эффективности острого действия проводили в течение 72 часов путём подсчёта активных и погибших гусениц моли. Результаты исследований представлены в таблице 2. 44 Таблица 2. Острое действие инсектицидного средства Молестрел на насекомых-кератофагов при разной концентрации ДВ, (n=3;) Образец немытой шерстяной Контроль шерсти ткани Учет гусениц платяной моли, % а м а м а м 2 3 4 5 6 7 20 80 3 97 100 0 Состав композиции, % 1 Трансфлутрин 0,05 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,1 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,15 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,2 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,5 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,3 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 0 100 0 100 100 0 0 100 0 100 100 0 0 100 0 100 100 0 0 100 0 100 100 0 Учет личинок жука-кожееда, % 40 60 30 70 100 0 Трансфлутрин 0,05 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 45 1 Трансфлутрин 0,1 Солюбилизатор 1 ПАВ Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,15 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,2 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Трансфлутрин 0,3 Солюбилизатор 1 ПАВ 1 Яблочная отдушка 0,05 Дистиллированная вода до 100 Продолжение таблицы 2 4 5 6 7 10 90 100 0 2 30 3 70 25 65 10 90 100 0 0 100 0 100 100 0 0 100 0 100 100 0 Примечание: а – активные; м - мертвые Оценка эффективности острого действия показала (табл. 2), что концентрация ДВ 0,05 % в композиции не обеспечивает 100%-ой гибели ни гусениц моли ни личинок жука-кожееда. Это свидетельствует о малой эффективности раствора данной концентрации. С повышением концентраций до 0,1 % и 0,15 % достигается 100%-ая эффективность в отношении гусениц моли. На активность личинок жукакожееда указанные концентрации препарата не оказывают аналогичного действия 100%-ая гибель не достигнута. Следовательно, варианты рецептур с концентрацией 0,1 % и 0,15 % могут эффективно применяться только для борьбы с молью. При использовании композиции средства с концентрацией трансфлутрина 0,2 % и 0,3 % наблюдается 100%-гибель насекомых-кератофагов как гусениц платяной моли так и личинок жука-кожееда. 46 С учетом проведенных испытаний как наиболее оптимальная, выбрана рецептура следующего состава: трансфлутрин – 0,2 % неонол (солюбилизатор) – 1,0 % феноксиэтанол (ПАВ) – 1,0 % яблочная отдушка – 0,05 % дистиллированная вода – до 100,0 %. Полученная композиция представляет собой однородную бесцветную, без механических примесей жидкость в форме спрея. При более низких концентрациях трансфлутрина в готовой форме средства наблюдается снижение его инсектицидной активности на биоагентах (гусеницы платяной моли, личинки жука-кожееда), что, несомненно, приведет к необходимости увеличения нормы расхода препарата. При более высоких концентрациях действующего вещества (ДВ), возникают технологические проблемы с растворением компонентов, и неоправданно увеличивается себестоимость готовой формы при незначительном увеличении инсектицидной активности, что свидетельствует о целесообразности применения концентрации ДВ 0,2 % для дальнейшего изучения. Таким образом, на основе проведенных исследований было подобрано оптимальное соотношение компонентов, обеспечивающих высокую инсектицидную активность средства против агентов биоповреждений. Эта рецептура готовой формы препарата была названа Молестрел. Важно отметить, что концентрация трансфлутрина в полученном средстве меньше, чем в существующих на сегодняшний день аналогах (РАПТОР Секция от моли на трансфлутрине, Антимольная секция и др.), что является преимуществом с точки зрения экологичности и себестоимости готовой продукции. 47 Введение в состав такого компонента как солюбилизатор позволило перевести трансфлутрин в жидкое состояние в растворе на водной основе. 2.2.2. Технология получения инсектицидного средства Молестрел На базе ЗАО «ДДД» были изготовлены три экспериментальные серии инсектицидного средства Молестрел. Экспериментальные серии инсектицидного средства готовили в реакторе объемом 70 л. Предварительно в емкость объемом 1,5 л, снабженную постоянно работающей мешалкой, вносили 0,5 кг солюбилизатора и 0,5 кг ПАВ. Далее вносили 0,105 кг трансфлутрина. Перемешивание проводили до полного растворения трансфлутрина и получения гомогенного раствора. Полученный таким способом раствор трансфлутрина переносили в реактор объемом 70 л и постепенно, небольшими порциями вносили дистиллированную воду в объеме 49,84 л. Растворение проводили при комнатной температуре в течение 1 часа при постоянно работающей мешалке. Далее в раствор вносили 0,025 кг яблочной отдушки. Растворение очередного компонента осуществляли после полного растворения предыдущего. Приготовленное по выше описанной технологии средство (рабочее название Молестрел) фасовали во флаконы вместимостью 125 см3. Расфасованное и этикитированное инсектицидное средство контролировали по таким показателям качества, как внешний вид, номинальный объем, концентрация водородных ионов (рН), подлинность и массовая доля трансфлутрина. Технология приготовления нового инсектицидного средства Молестрел в форме спрея включает последовательность 4-х технологических операций (рис. 4): 1. Приготовление маточного раствора трансфлутрина; 2. Изготовление препаративной формы инсектицидного средства Мо- 48 лестрел: 2.1 Внесение в реактор раствора трансфлутрина и разбавление дистиллированной водой; 2.2. Внесение в полученную форму яблочной отдушки; 3. Фасовка готовой формы в беспропеллентную аэрозольную упаковку (БАУ); 4. Контроль качества инсектицидного средства Молестрел (табл. 3). Включает в себя такие показатели как: Таблица 3. Показатели качества инсектицидного средства Молестрел Наименование показателя Характеристика и норма Прозрачная бесцветная жидкость 125+2 % Внешний вид Номинальный объем, см3 pH 6,7±0,03 Подлинность и массовая доля трансфлутрина, мг/ см3 2,0±0,04 49 I. Приготовление раствора трансфлутрина (внесение солюбилизатора, ПАВ и трансфлутрина) II. Внесение дистиллированной воды и яблочной отдушки Внесение раствора трансфлутрина Смотровое окно 1 – 3 – запорные краны Емкость для смешивания Реактор Водопровод 1 2 3 III. Фасовка во флаконы средства Молестрел Рисунок 4. Схема технологического процесса изготовления инсектицидного средства Молестрел IV. Контроль качества 2.2.3 Токсикологические параметры инсектицидного средства Молестрел 2.2.3.1 Изучение острой токсичности Изучение параметров острой токсичности препарата Молестрел проводили на беспородных белых мышах массой 18 – 20 г. При этом было сформировано 6 групп животных по 10 голов в каждой, 6 – контрольная группа. Молестрел вводили перорально с помощью шприца с затупленной иглой. Контролем служила группа животных, которым вводили композицию ПАВ – солюбилизатор – яблочную отдушку без действующего вещества. Наблюдение за клиническим состоянием мышей вели в течение 14 дней с момента введения препарата. Во время наблюдения учитывали клиническую картину отравления, сроки и процент гибели. Изучение параметров острой токсичности инсектицидного средства Молестрел показало, что при однократном внутрижелудочном введении предельно допустимого объема (1см3) средства все опытные мыши оставались живы, у животных не наблюдали каких-либо признаков интоксикации. Животные были подвижны, адекватно реагировали на внешние раздражители, охотно потребляли корм и воду; в целом их поведение и видимые физиологические функции не отличались от периода до введения препарата. В результате проведенных исследований установлено, что при внутрижелудочном введении инсектицидное средство Молестрел в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.007 – 76 можно отнести к 4 классу опасности – вещества малоопасные. 2.2.3.2 Изучение дермонекротического воздействия на кожу Местное раздражающее воздействие на кожу животных исследовали на 5 кроликах породы шиншилла массой 2,0 – 2,2 кг. Для постановки опыта у кроликов на участке кожи размером 8х9 см в области бедра тщательно выстригали волосяной покров, на выстриженный участок на расстоянии 20 см 51 от кожи кроликов наносили средство. В качестве контроля использовали оголенный участок кожи размером 8х9 см, на который не наносили препарат. Воздействие средства на кожные покровы осуществляли при однократном и повторном их орошении. Наблюдение за реакцией вели в течение 14 суток. У опытных животных, как при однократном, так и повторном орошении не было отмечено каких-либо изменений на участках с нанесенным препаратом. 2.2.3.3 Изучение раздражающего действия на слизистые оболочки (конъюнктивальная проба) Местное раздражающее действие на слизистые оболочки (конъюнктивальная проба) изучали на 5 кроликах породы шиншилла массой 2,0 – 2,2 кг. Для постановки опыта 1 каплю инсектицидного средства Молестрел вводили глазной пипеткой с вытянутым тонким концом в конъюнктивальный мешок правого глаза животных, а в левый (контрольный) – закапывали 1 каплю физиологического раствора. Реакцию учитывали через 15 минут и спустя 24, 48 часов по внешнему виду конъюнктивы и по реакции склеры. В течение всего срока наблюдения отмечали небольшое слезотечение и имел место блефароспазм, которые быстро проходили и на следующие сутки состояние глаза ничем не отличалось от контроля. Воздействие на конъюнктиву глаза сопровождалось слабыми явлениями раздражения с полной нормализацией на вторые сутки. Таким образом, изучаемое средство не обладает раздражающим эффектом при воздействии на слизистые. 52 2.2.4 Стабильность средства Молестрел в процессе хранения Одним из важнейших параметров инсектицидных средств, наряду с эффективностью, является их стабильность в течение длительного периода хранения. Хранение – этап технологического цикла товародвижения от выпуска готовой продукции до потребления или утилизации. Цель данного этапа – обеспечение стабильности исходных свойств или их изменение с минимальными потерями. При разработке новых инсектицидных средств устанавливаются параметры стабильности, как действующего вещества, так и готовой формы препарата. Органолептические, физико-химические и свойства инсектицидного средства Молестрел исследовали по таким показателям качества как внешний вид, номинальный объем, показатель концентрации водородных ионов, подлинность и массовая доля трансфлутрина (табл. 4). Таблица 4. Показатели качества инсектицидного средства Молестрел Наименование показателя Характеристика и норма Прозрачная бесцветная жидкость 125+2 % Внешний вид Номинальный объем, см3 pH раствора Подлинность и массовая доля трансфлутрина, мг/ см3 6,7±0,03 Время и характер выхода пиков при ВЭЖХ должны соответствовать стандартным образцам 2±0,04 Для установления гарантированного срока годности инсектицидного средства Молестрел и условий хранения проведены исследования стабильности препарата в условиях естественного хранения (18 – 20 0С). Кроме того нами было исследовано изменение качества препарата в условиях хранения при температуре 4 – 6 0C 25 0C. 53 Исследование проводили через 6, 12 и 18 месяцев после закладки образцов на хранение. Пробы исследовали для определения изменений показателей качества в процессе хранения. В течение всего срока хранения такие показатели как внешний вид, номинальный объем, показатель концентрации водородных ионов (рН) оставались практически без изменений. Определение подлинности и количественного содержания трансфлутрина в испытуемых образцах проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Время выхода пиков, трансфлутрина на хроматограмме испытуемого образца должно соответствовать определенному времени выхода пика на хроматограмме стандарта. В предварительной серии опытов при соблюдении параметров, описанных в разделе Материалы и методы, нам удалось установить, что при одинаковой скорости элюции 0,8 см3/мин и детектировании при длине волны 235 нм, время выхода пика стандарта трансфлутрина было отмечено через 8,37 мин (рис.5) При хроматографировании образцов средства Молестрел при вышеуказанных параметрах через 8,37 мин выходил пик, характерный для трансфлутрина (рис. 6), что свидетельствует о подлинности проверяемых образцов. 54 Рисунок 5. Время выхода пика стандарта трансфлутрина (мкг/см3) Рисунок 6. Время выхода пика трансфлутрина, содержащегося в инсектицидном средстве Молестрел (мкг/см3) 55 Результаты проведенных испытаний представлены в таблицах 5 и 6. Таблица 5. Стабильность инсектицидного средства Молестрел при 4 – 6 0С, (n = 3) Наименование показателя Характеристика показателя (М±m) 6 мес. 12 мес. 18 мес. Внешний вид, цвет Номинальный объем, см3 рН раствора Соотв. 125,0 ± 2,0 Соотв. 125,0 ± 1,9 Соотв. 125,0 ± 1,6 6,75±0,01 6,75±0,01 6,76±0,01 Массовая доля трансфлутрина, мг/см3 2,0 ± 0,05 2,0 ± 0,03 1,9 ± 0,06 Таблица 6. Стабильность инсектицидного средства Молестрел при +25 0С, (n = 3) Наименование показателя Характеристика показателя (М±m) 6 мес. 12 мес. 18 мес. Внешний вид, цвет Номинальный объем, см3 рН раствора Соотв. 125,0 ± 2,0 Соотв. 125,0 ± 1,9 Соотв. 124,0 ± 1,6 6,75±0,01 6,76±0,01 6,77±0,02 Массовая доля трансфлутрина, мг/см3 2,0 ± 0,05 1,9 ± 0,03 1,8 ± 0,03 Как видно из представленных данных, содержание трансфлутрина в процессе хранения средства Молестрел при температуре 4 – 6 0С колеблется в допустимых для него пределах в течение 18 месяцев. Изучение содержания трансфлутрина в средстве Молестрел при хранении в условиях 25 0С в течение 18 месяцев также не выявило достоверных отклонений от нормативных требований к препарату (табл. 6). Из представленных результатов видно (табл. 5, 6), что исследованы параметры инсектицидного средства при хранении в течение 18 месяцев в диапазоне температур 4 – 6 0С и 25 0С изменяются не значительно (разница в 56 значениях не достоверна и находится в пределах ошибки). Из этого можно сделать заключение о сохранности основных характеристик препарата, а именно, концентрации и компонентного состава действующего вещества без существенных изменений как минимум 18 месяцев. Вследствие чего принято, что срок хранения готовой формы средства Молестрел составляет 1,5 года. 2.2.5 Эффективность инсектицидного средства Молестрел в отношении насекомых-кератофагов 2.2.5.1 Эффективность средства в отношении гусениц платяной моли Рынок пушно-меховых товаров России является одним из крупнейших в мире по производству и продаже. Насекомые-кератофаги наносят достаточно высокий экономический ущерб, их присутствие опасно для отрасли. В результате биоповреждений гусеницами моли и личинками жука-кожееда существенно изменяются товарные, а в конечном итоге и потребительские свойства шкурок. При этом сырье теряет такие основополагающие свойства как: прочность; густота; высота волосяного покрова и длина волос; носкость; эстетические свойства. Все это приводит к уменьшению ценности сырья и полуфабриката с точки зрения товароведной оценки. Пушно-меховое сырье, поврежденное насекомыми-кератофагами (пороки – «молеедина» и «кожеедина»), в соответствии с требованиями нормативной документации, на данный вид продукции, относят к браку и принимают с зачетом не более 25 % (35 % - для шкурок норки и лисицы клеточного разведения) от стоимости пушной головки. Поэтому одной из главных задач данной отрасли является сохранение качества пушно-мехового сырья, путем предупреждения биоповреждений на всех стадиях переработки до получения полуфабриката и готовой продукции. 57 Изучение эффективности инсектицидного средства Молестрел проводили при консультативной и методической помощи специалистов НИИ БНТ А.Г. Шалатиловой и О.Ю. Ереминой. Средство Молестрел применяли для защиты некоторых видов пушномехового сырья и полуфабриката (образцы шкурок соболя, норки, кролика, овчины). Контролем послужили образцы чистого сукна артикул 11-34. В качестве биологических объектов исследований использовали инсектарную культуру платяной моли Tineola biselliella Humm в возрасте 3 – 4 недель, разводимую в лаборатории НИИ БНТ. Целевую эффективность средства проверяли по показателям острого и остаточного инсектицидного действия. Острое действие инсектицидного средства Молестрел на гусениц платяной моли оценивали на обработанных образцах шкурок пушно-мехового сырья и полуфабриката размером 3×3 см. Средство на образцы наносили путем равномерного распыления с расстояния 20 – 25 см из расчёта 25 см3/м2. Контролем служили образцы, не обработанные препаратом. После высыхания образцы помещали в пластиковые стаканчики и подсаживали в каждые по 10 гусениц платяной моли. Оценку степени острого действия инсектицидного средства осуществляли путём учёта гибели гусениц моли в течение 72 часов (табл. 7). Таблица 7. Острое действие средства Молестрел в отношении гусениц платяной моли, (n=3; ср. значение) Образцы шкурок 1 0,25 2 Поражено личинок, % через, часов 0,5 1 2 24 3 4 5 6 72 7 В сырье: Соболь 100 100 100 58 100 100 100 Продолжение таблицы 7 1 2 3 4 5 6 7 Норка 100 100 100 100 100 100 Кролик 100 100 100 100 100 100 Овчина 100 100 100 100 100 100 Соболь 100 100 100 100 100 100 Норка 100 100 100 100 100 100 Кролик 100 100 100 100 100 100 Овчина 100 100 100 100 100 100 0 0 0 0 0 0 В полуфабрикате: Контроль Острое действие средства Молестрел в отношении гусениц платяной моли было показано уже через 15 – 20 минут после контакта с обработанными образцами. Тогда как на контрольных образцах, не обработанных инсектицидным препаратом, отмечена 100 %-ная активность гусениц моли. Таким образом, исходя из полученных нами данных, можно сделать вывод об эффективности острого инсектицидного действия исследуемого средства на культуру платяной моли. Вне зависимости от вида опытных образцов (сырья и полуфабриката) зафиксирована 100% гибель гусениц моли. Поскольку целевая эффективность средства не ограничена только острым действием, а с точки зрения выявления номенклатуры потребительских свойств средства необходимо определить период, в течение которого оно будет защищать кератинсодержащие материалы от повреждения вредителями, то необходимо было проанализировать остаточное действие средства. С этой целью образцы обрабатывали испытуемым средством и хранили в стаканчике по одному образцу в каждом (в трех параллельных вариантах) при температуре 20±2 0С, естественной влажности и освещённости. Через месяц на образцы подсаживали по 10 гусениц платяной моли. На 3-ие сутки 59 подсчитывали число погибших и оставшихся в живых насекомыхкератофагов. Определяли процент гибели личинок. Анализ полученных результатов проведенного эксперимента показал 100%-ную гибель гусениц моли на 3-ие сутки наблюдений, как на сырье, так и на полуфабрикате, что отвечает предъявляемым критериям оценки эффективности остаточного действия инсектицидного средства. Таким образом, можно сделать вывод, что остаточное действие исследуемого препарата сохраняется после обработки сырья и полуфабриката спустя 1 месяц. Для уточнения продолжительности остаточного действия инсектицидного средства образцы сырья и полуфабриката хранили по методу «ускоренного старения». С этой целью образцы, обработанные инсектицидным средством, выдерживали в термостате при температуре 40 0С в течение 3 месяцев. Через каждый месяц хранения на испытуемые образцы подсаживали гусениц платяной моли. Хранение в течение месяца при температуре 40 0С соответствует 4-м месяцам в пересчете на естественные условия хранения (18 – 20 0 С). Результаты исследований представлены в таблице 8. Таблица 8. Остаточное действие средства Молестрел в отношении гусениц платяной моли при хранении при 40 0С, (n=3; ср. значение) Образцы шкурок Поражено насекомых, % через, мес 1 1,5 2 3 2 3 4 5 Соболь 100 100 100 76,7 Норка 100 100 96,7 46,7 Кролик 100 100 100 53,3 1 В сырье: 60 Продолжение таблицы 8 1 2 3 4 5 100 100 100 80,0 Соболь 100 100 96,7 66,7 Норка 100 100 96,7 53,3 Кролик 100 100 100 70,0 Овчина 100 100 96,7 60,0 Овчина В полуфабрикате: Как видно из результатов, представленных в таблице 8 препарат сохраняет свою активность в течение 1 месяца хранения при температуре 40 0С, что соответствует 4-м месяцам хранения при 20±2 0С (естественные условия). На протяжении срока экспериментального хранения после второго месяца при повышенной температуре активность средства начинает снижаться. К окончанию опыта (3 месяца) инсектицидная активность препарата незначительна и составляет 46,7 – 80,0 %. Таким образом, при хранении в естественных условиях препарат будет обеспечивать защиту обработанных образцов пушно-мехового сырья и полуфабриката от повреждения гусеницами моли в течение 6 месяцев. 2.2.5.2 Эффективность средства в отношении личинок жука-кожееда После получения положительных результатов по изучению эффективности инсектицидного средства на гусениц платяной моли, нами было изучено его влияние на личинок жука-кожееда. Так данный вид насекомых имеет большую устойчивость по отношению к инсектицидным средствам. В связи с этим, следующий этап нашей работы был направлен на определение эффективности средства в отношении личинок жука-кожееда. Опыт проводили на следующих биологических тест-объектах личинках и имаго кожееда А. smirnovi и кожееда А. simulanus. 61 Для исследования использовали образцы тех же видов пушно-мехового сырья и полуфабриката, что и при изучении эффективности на гусеницах платяной моли. В качестве контрольных вариантов – образцы чистого сукна артикул 1134. Оценку эффективности средства по отношению к личинкам кожееда проводили согласно методикам по изучению острого и остаточного действия. Результаты исследований по изучению острого действия представлены в таблице 9. Таблица 9. Острое действие средства Молестрел в отношении личинок жукакожееда, (n=3; ср. значение) Образцы шкурок 0,25 Поражено насекомых, % через, часов 0,5 1 2 24 72 В сырье: Соболь 100 100 100 100 100 100 Норка 100 100 100 100 100 100 Кролик 100 100 100 100 100 100 Овчина 100 100 100 100 100 100 Соболь 100 100 100 100 100 100 Норка 100 100 100 100 100 100 Кролик 100 100 100 100 100 100 Овчина 100 100 100 100 100 100 0 0 0 0 0 0 В полуфабрикате: Контроль Острое действие средства Молестрел в отношении личинок и имаго кожееда А. smirnovi и А. simulanus , так же как и в отношении гусениц платяной моли было показано уже через 15 – 20 минут после контакта с обработанными образцами. 62 При подсадке личинок (через месяц) на обработанные инсектицидным средством образцы, зафиксирована 100%-ная гибель на 3-ие сутки наблюдений на сырье и на полуфабрикате. Так же была изучена оценка эффективности средства для борьбы с личинками кожееда методом «ускоренного старения». Результаты исследований представлены в таблице 10. Таблица 10. Остаточное действие средства Молестрел в отношении личинок жука-кожееда А. smirnovi при хранении при 400С, (n=3; ср. значение) Образцы шкурок Поражено насекомых, % через, мес 1 2 3 Соболь 100 90,0 46,7 Норка 100 90,0 40,0 Кролик 100 96,7 53,3 Овчина 100 96,7 53,3 Соболь 100 93,3 40,0 Норка 100 93,3 43,3 Кролик 100 96,7 66,7 Овчина 100 90,0 60,0 В сырье: В полуфабрикате: Из результатов, представленных в таблице 10 видно, что средство Молестрел обладает выраженным инсектицидным действием в отношении личинок жука-кожееда А. smirnovi при посадке насекомых на обработанные образцы сырья и полуфабриката в течение 1 месяца хранения при температуре 40 0С (что соответствует 4 месяцам при 20±2 0С). После третьего месяца хранения при повышенной температуре активность средства в среднем составляет около 50 %. Следовательно, в соответ63 ствии с требованиями МУК 3.5.2.1759-03 действие инсектицида можно считать оконченным. Таким образом, при хранении в естественных условиях препарат будет обеспечивать защиту обработанных образцов пушно-мехового сырья и полуфабриката от повреждения личинками жука-кожееда в течение 6 месяцев. Результаты изучения острого, длительности остаточного действия средства на насекомых-кератофагов в лабораторных условиях свидетельствуют о его высокой целевой эффективности, соответствующей современным критериям (Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных средств, 1998). Данный препарат может быть рекомендован для защиты от повреждения молью и кожеедом пушно-мехового сырья и полуфабриката в течение не менее 6 месяцев. По истечению этого срока обработку нужно повторить. Средство не оставляет следов на разных типах кератинсодержащих материалов. 2.2.5.3 Изучение инсектицидного действия средства Молестрел на различных тест-поверхностях Для характеристики эффективности средства, упакованного в беспропеллентную аэрозольную упаковку с механическим распылителем определяли острое действие и период остаточного действия. Для определения острого действия насекомых-кератофагов (гусениц моли и личинок жука-кожееда) помещали в лабораторную посуду (одноразовые пластиковые стаканы объёмом 250 см3/ чашки Петри). Опыты проводили на трёх параллельных пробах. Затем насекомых переносили в чистую посуду через 15 минут после обработки. Учёт результатов опыта проводили через 15 мин, 1 час, 2 часа, 4 часа, 6 часов и 24 часа. Норма расхода 50 см3/м2. Для определения остаточного действия спрея в пяти точках дна камеры были расположены модельные тест-поверхности (не впитывающая воду - 64 стекло, впитывающая воду - фанера), размером 10х10 см. Норма расхода препарата 50 см3/м2 на невпитывающие и 100 см3/м2 пористые поверхности: стекло и неокрашенную фанеру. Для определения продолжительности остаточного действия обработанные поверхности хранили при комнатной температуре и естественной освещенности на протяжении срока эксперимента. Затем анализировали эффективность отложений средства стандартным методом принудительного контактирования насекомых с этими поверхностями. Продолжительность принудительного контакта с обработанной поверхностью составляла: 15 минут после орошения. Учет гибели насекомых проводили через 24, 48 и 72 часа. Действие инсектицида считают законченным, когда смертность насекомых составляет 50 % и более. Результаты исследований по изучению остаточного действия для насекомых-кератофагов представлены в таблице 11. Таблица 11. Эффективность средства Молестрел при использовании метода орошения Вид Тип насекомых обрабатываемой Погибло насекомых (%) через (час) 24 48 72 Фанера 100 100 100 Стекло 100 100 100 Фанера 100 100 100 Стекло 100 100 100 Фанера 100 100 100 Стекло 100 100 100 поверхности Моль (гусеница) Кожеед А. smirnovi Кожеед А. simulanus Из результатов, представленных в таблице 11 видно, что в течение всего срока наблюдения выявлена высокая инсектицидная эффективность средства. Через 15 минут после контакта насекомых с тест-поверхностями, на 65 которые был нанесен препарат, все подопытные насекомые находились в необратимом параличе. Гибель относительно чувствительных видов биоагентов, достигала 100 %. 2.2.5.4 Изучение овицидного действия средства Молестрел При оценке эффективности средства было изучено овицидное действие средства Молестрел. Овицидное действие – это способность подавлять эмбриональное развитие яйца или убивать личинку до выхода ее из него. Для изучения эффективности средства образцы сукна обрабатывали средством Молестрел путем равномерного распыления с расстояния 20 – 25 см из расчёта 25 см3/м2 и хранили в лабораторной посуде в естественных условиях. После высыхания на образцы помещали по 10 штук яиц моли. И на 5 и 10 сутки от начала эксперимента подсчитывали число погибших яиц. В результате проведенных исследований по изучению овицидного действия препарата установлено, что и на 5-е и на 10-е сутки наблюдения отмечена 100%-ая гибель яиц. 66 3. ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОИЗВОДСТВА ИНСЕКТИЦИДНОГО СРЕДСТВА МОЛЕСТРЕЛ Оценка деятельности предприятия производится на основе комплексного анализа конечных итогов его эффективности. Экономическая суть эффективности предприятия состоит в том, чтобы на каждую единицу затрат добиться существенного увеличения прибыли. Количественно она измеряется сопоставлением двух величин: полученного в процессе производства результата и затрат на его достижение. Целью данного раздела является установление экономической эффективности производства инсектицидного средства Молестрел. За калькуляционную единицу принимали 50 л препарата. Калькулирование себестоимости товарной продукции проводили по следующим статьям расходов: ► Сырье ► Вспомогательные материалы ► Расходы на содержание и эксплуатацию оборудования ► Зарплата основных производственных рабочих ► Отчисления от ФОТ на социальные нужды 67 Таблица 12. Расчет расхода и стоимости сырья для производства экспериментальной серии 50 л средства Молестрел Расход Сырья, кг (л) Цена 1 кг (л) руб. (без НДС) Трансфлутрин 0,105 16000,00 Стоимость сырья, необходимого для производства 50 л средства Молестрел, руб. 1680,00 Солюбилизатор 0,5 179,64 89,82 ПАВ 0,5 70,50 35,25 Яблочная отдушка 0,025 823,27 20,58 Дистиллированная вода 49,84 3,50 174,44 - - 2000,09 Сырье ИТОГО: Всего на статью приходится: 2000,09 рублей Транспортно-заготовительные расходы составляют 1% от стоимости сырья – 20,00 рублей. Итого: 2000,09 рублей + 20,00 рублей = 2020,09 рублей Расходы на вспомогательные материалы: Таблица 13. Расчет расхода и стоимости вспомогательных материалов для производства 50 л инсектицидного средства Молестрел Вспомогательный материал Спрей-флакон (125 см3) Этикетка ИТОГО: Расход материалов, шт. Цена 1 шт. руб. (без НДС) 50 3,5 Стоимость вспомогательных материалов необходимых для производства 50 литров средства, руб. 175,0 50 1,0 50,0 - - 225,0 Всего на статью приходиться: 225,0 рублей 68 Расходы на содержание и эксплуатацию оборудования. Статья расходы на содержание и эксплуатацию включает в себя амортизацию оборудования, применяемого для производства 50 литров препарата. Таблица 14. Расчет стоимости оборудования Наименование оборудования и его характеристика Емкость для смешивания Реактор, V= 70 л. Количество Стоимость оборудования 1 Единицы оборудования, тыс. руб. 35,00 Остаточная стоимость, тыс. руб. 22,34 1 100,00 72,14 Ежемесячный размер амортизационных отчислений производственного оборудования составит 314,92 руб. Технологический процесс производства серии инсектицидного средства Молестрел 1 день, т.о. за 1 день размер амортизационных отчислений производственного оборудования составит 10,50 руб. Фонд оплаты труда Для производства 50 литров серии инсектицидного средства Молестрел необходима работа на производстве двух человек (оператор и помощник). Их заработная плата за проделанную работу будет составлять 1200 рублей. 69 Таблица 15. Затраты на изготовление 50 л инсектицидного средства Молестрел № Статья затрат Сумма (руб.) 1 Сырье 2 Вспомогательные материалы 225,0 3 10,50 4 Расходы на содержание и эксплуатацию оборудования Фонд оплаты труда 1200,00 5 Страховые взносы (34%) 408,00 6 Общехозяйственные расходы 360,00 7 Себестоимость 4223,59 2020,09 Себестоимость изготовления 50 литров средства Молестрел составляет – 4223,59 руб. (1 л – 84,47 руб.). Предполагаемая реализационная стоимость 1 флакона 125 см3 средства Молестрел составляет 15,00 рублей. Таблица 16. Экономическая эффективность производства 1 флакона 125 см3 средства Молестрел Показатель Значение показателя Себестоимость, руб. 10,56 Предполагаемая реализационная цена, руб. 15,00 Рентабельность производства, % 42,05 Расчеты показали, что себестоимость 50 литров инсектицидного средства Молестрел составляет – 4223,59 руб., в то время, как предполагаемая реализационная цена составляет – 6000 руб. Уровень рентабельности производства 42,05 %, что показывает достаточно высокую эффективность производства инсектицидного препарата Молестрел. 70 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ Для борьбы с синантропными насекомыми используется значительное количество инсектицидных препаратов, разработанных на основе соединений, принадлежащих к разными химическим группам. Поиск новых эффективных действующих веществ продолжается как в новых, так и в изученных классах химических соединений. В России, несмотря на существенное сокращение объемов применения средств. По мере появления новых инсектицидов и совершенствования препаративных форм на их основе, необходимо усовершенствовать имеющиеся в РФ схемы отбора и критерии оценки активности веществ по отношению к основным видам насекомых, имеющих эпидемиологическое и санитарногигиеническое значение [9]. С целью расширения ассортимента инсектицидных средств нами был предложен новый препарат, предназначенный для борьбы с вредными насекомыми, в частности с молью и кожеедом. В результате проведенных исследований разработана технология получения инсектицидного средства Молестрел, содержащего в качестве действующего вещества, синтетический пиретроид – трансфлутрин, а так же функциональные и вспомогательные компоненты. Отработана последовательность операций при формировании оптимального состава препарата, т.е. внесения ингредиентов в готовую форму. Отработанный температурный режим обеспечивает возможность полного растворения составных компонентов и сохранения стабильности как по органолептическим, так и по физикохимическим параметрам препарата. Идея создания препарата на основе трансфлутрина в нашей работе заключалась в обеспечении возможности расширения спектра инсектицидного действия. Следует отметить, что преимуществом пиретроидов перед традиционными инсектицидами является высокая биологическая активность против насекомых-кератофагов на разных стадиях их развития, и как результат, низкие нормы расхода [127, 151]. 71 Как известно, трансфлутрин – инсектицид контактной и фумигационной активности с быстрым действием, обладающий широким спектром действия против сельскохозяйственных и бытовых насекомых-вредителей и который крайне эффективен при небольших концентрациях. Механизм действия препарата основан на блокаде проведения нервных импульсов (поддержании натриевых каналов мембраны нервных волокон в открытом состоянии), приводящей к параличу и гибели насекомых [127]. Концентрация трансфлутрина в препарате Молестрел меньше, чем в существующих на сегодняшний день аналогах (РАПТОР Секция от моли на трансфлутрине, Антимольная секция и др.), это является преимуществом с точки зрения экологичности и себестоимости готовой продукции [104, 105]. Введение в состав таких компонентов как солюбилизатор (неонол), ПАВ (феноксиэтанол) и яблочная отдушка способствует оптимизации состава и консистенции средства. Данные ингредиенты выполняют стабилизирующую и формообразующую функцию. Известно, что солюбилизатор обладает хорошими антибактериальными и антисептическими свойствами [99]. Это обеспечивает длительное сохранение действующего вещества и, следовательно, эффективность средства имеет хорошую биоразлагаемость [30], что является положительным фактором с точки зрения экологичности. Для всестороннего исследования вновь создаваемых форм инсектицидных средств, необходимо изучение их токсикологических свойств, т.к. данные препараты находятся в непосредственном контакте с человеком и могут нанести вред его здоровью. При изучении параметров острой токсичности инсектицидного средства Молестрел он был отнесен к 4 классу опасности (вещества малоопасные – ЛД50 > 5000 мг/кг) согласно ГОСТ 12.1.007 – 76. При исследовании местного раздражающего воздействия на кожу кроликов породы шиншилла у опытных животных, как при однократном, так и 72 повторном орошении не было отмечено каких-либо изменений на участках с нанесенным препаратом. Изучение раздражающего действия (конъюнктивальная проба), показало, что животные хорошо переносят средство Молестрел. В течение всего срока наблюдения видимых изменений со стороны слизистой оболочки, как левого глаза, так и правого не выявлено. Таким образом, изучаемый препарат не обладает раздражающим эффектом при воздействии на кожу и слизистые. Одним из важных показателей при разработке новых препаратов является их стабильность, т.е. важно знать при каком сроке хранения и при каких условиях происходит ухудшение качества препарата. Судить об этом можно по изменению показателей качества препарата, пределы колебаний которых отражены в нормативной документации. При хранении инсектицидного средства в течение 18 месяцев в диапазоне температур 4 – 6 0С и 25 0С его параметры изменяются не значительно. Вследствие чего принято, что срок хранения готовой формы средства Молестрел составляет 1,5 года. При составлении композиции средств большое значение имеет совместимость ингредиентов между собой, но еще более важным является его эффект инсектицидного действия. Как известно [54], пушно-меховое сырье, поврежденное насекомымикератофагами (пороки – «молеедина» и «кожеедина»), в соответствии с требованиями нормативной документации, на данный вид продукции, относят к браку и принимают с зачетом не более 25 % (35 % – для шкурок норки и лисицы клеточного разведения) от стоимости пушной головки. Поэтому одной из главных задач данной отрасли является сохранение качества пушномехового сырья, путем предупреждения биоповреждений на всех стадиях переработки до получения полуфабриката и готовой продукции. В проведенных опытах по изучению инсектицидной активности на ли73 чинках платяной моли и жука-кожееда средства Молестрел была установлена его высокая эффективность. Для характеристики действия средства, упакованного в беспропеллентную аэрозольную упаковку с механическим распылителем был использован метод орошения на впитывающею поверхность – фанеру и не впитывающею – стекло. Через 15 минут после контакта насекомых с тест- поверхностями, на которые был нанесен препарат, все подопытные насекомые находились в необратимом параличе. Гибель относительно чувствительных видов биоагентов, достигала 100 %. Результаты изучения острого, длительности остаточного действия средства на насекомых-кератофагов в лабораторных условиях свидетельствуют о его высокой целевой эффективности, соответствующей современным критериям (Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных средств, 1998). Данный препарат может быть рекомендован для защиты от повреждения молью и кожеедом пушно-мехового сырья и полуфабриката в течение не менее 6 месяцев. По истечению этого срока обработку нужно повторить. В результате проведенных исследований по изучению овицидного действия препарата установлено, что и на 5-е и на 10-е сутки наблюдения отмечена 100%-ая гибель яиц моли. Предлагаемый нами новый препарат Молестрел имеет высокую эффективность против молей и жуков-кожеедов и не оставляет следов на обрабатываемой поверхности, тем самым не снижает потребительские свойства кератинсодержащих материалов. Результаты проведенной работы так же установили достаточно высокую экономическую эффективность изготовления экспериментальных серий инсектицидного средства Молестрел. Уровень рентабельности производства составил 42,05 %. 74 5. ВЫВОДЫ 1. Разработана технология изготовления комплексного инсектицидного средства Молестрел, содержащего 0,2 % трансфлутрина, 1,0 % солюбилизатора, 1,0 % ПАВ, 0,05 % яблочной отдушки и до 100 % дистиллированной воды. 2. Средство Молестрел по параметрам острой токсичности согласно ГОСТ 12.1.007 – 76 относится к 4 классу опасности – вещества малоопасные. 3. Изучаемый препарат не обладает раздражающим эффектом при воздействии на кожу и слизистые. 4. Инсектицидное средство Молестрел стабильно при хранении в диапазоне температур 4 – 25 0С в течение 18 месяцев. 5. При изучении острого и длительности остаточного действия, установлена высокая целевая эффективность средства Молестрел против гусениц платяной моли и личинок жука-кожееда в течение 6 месяцев. 6. При исследовании эффективности средства, упакованного в беспропеллентную аэрозольную упаковку с механическим распылителем, через 15 минут после контакта насекомых с тест-поверхностями, на которые был нанесен препарат, все подопытные насекомые находились в необратимом параличе. Гибель относительно чувствительных видов насекомых, достигала 100 %. 7. Установлено, что при изучении овицидного действия препарата, что и на 5-е и на 10-е сутки наблюдения отмечена 100 %-ная гибель яиц моли. 8. Уровень рентабельности опытного производства инсектицидного средства Молестрел составил 42,05 %. 75 6. ПРАКТИЧЕСКОЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ НАУЧНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ Результаты исследований включены в отчет «Лабораторно- экспериментальное изучение специфической биологической активности и оценка эффективности инсектицидных средств № 1 и № 2 на основе трансфлутрина в беспропеллентной упаковке» за 2010 г. Результаты исследований использованы при составлении проекта нормативно-технической документации на инсектицидное средство Молестрел по применению в быту против насекомых-кератофагов (технологический регламент и инструкция по применению). Разработаны методические положения «Защита кожевенного и пушномехового сырья от агентов биоповреждений» (рассмотрены и одобрены на заседании Бюро отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии протокол № 3 от 02 ноября 2011 г.). 7. РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ НАУЧНЫХ ВЫВОДОВ 1. Технология получения средства Молестрел рекомендована для разработки аналогичных инсектицидных препаратов. 2. Новое инсектицидное средство Молестрел может быть рекомендовано практическим специалистам для профилактики и защиты сырья и материалов животного происхождения в промышленных условиях и населению в быту. 76 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 1. Анисимов А.А., Смирнов В.Ф. Биоповреждения в промышленности и защита от них. – Горький: ГГУ, 1980. – 81 с. 2. Баканова Е.И. Инсектицидные средства против молей-кератофагов: анализ ассортимента по препаративным формам, действующим веществам, производителям за период с 2003 по 2009 гг. // Пест-менеджмент. – 2010. – № 4. – С. 35 – 40. 3. Баканова Е.И. Современные препаративные формы инсекто-акарицидов и некоторые аспекты их использования // Дезинфекционное дело. – 2004. – № 4. – С. 60. 4. Бессудова, Е.М. Резникова Л.А., Рязанова Г.И., Шалатилова А.Г Лабораторные испытания шерстяных материалов на устойчивость к повреждению молью // Насекомые – вредители материалов: Труды энтомологического сектора; Под ред. Е.Х. Золотарева – М.: МГУ, 1977. – Вып. 7. – С. 25 –27. 5. Биологический энциклопедический словарь / Под ред. М. С. Гилярова: 2-е изд., исправл. – М.: Сов. Энциклопедия, 1986. 6. Богданова Е.Н., Леви М.И., Кирюханцспа В.Н. Резистентность некоторых видов синантропных насекомых в г. Москве к инсектицидам // Актуальные вопросы совершенствования дезинфекционных и стерилизационных мероприятий. Материалы Всесоюзной конференции. – М., 1990. – Часть 3. – С. 126 – 133. 7. Богданов М.Р., Мигранов М.Г. Методы контроля резистентности членистоногих вредителей // Агрохимия. – 1994. – № 12. – С. 96 – 105. 8. Богданова Е.Н., Путинцева Е.Н., Смирнова С.Н и др. Инсектицидная активность некоторых зарубежных препаратов из группы пиретроидов // Актуальные вопросы совершенствования дезинфекционных и стерилиза- 77 ционных мероприятий. Материалы Всесоюзной конференции. – М., 1990. – Ч. 3. – С. 103 – 108. 9. Бондаренко В.О. Новые инсектоакарицидные препараты: фармакотоксикологические свойства, стандартизация и методы утилизации: Автореферат дис. … д-ра биол. наук: 16.00.04; ФГУ ВГНКИ. – М., 2005. – 46 с. 10. Браун А. Распространение устойчивости к инсектицидам среди вредных насекомых // Успехи в области борьбы с вредителями растений. – М.: ИЛ, 1960. – С. 587 – 654. 11. Бромберг А.И., Потшеба Т.Л., Позин З.С. и др. Новые формы применения хлорофоса для борьбы с бытовыми насекомыми (препараты "Инсектополимер" и "Инсорбцид ХЛ") II Материалы Всесоюзной конференции по вопросам дезинфекции и стерилизации. – М., 1969. – С. 100 – 101. 12. Брудная X.Ю. Кожееды и борьба с ними. М.: Гизлегпром, 1948. – 64 с. 13. Булатов М.И., Калинкин И.П. Практическое руководство по фотометрическим методам анализа. – Ленинград: «Химия», 1986. – С. 256. 14. Вашков В.И., Волков Ю.П., Волкова А.П. и др. Новые направления в изыскании химических средств для борьбы с членистоногими, имеющими медицинское значение // Материалы Всесоюзной конференции по вопросам дезинфекции и стерилизации. – М, 1969. – С. 93 – 96. 15. Вашков В.И. Руководство по дезинфекции, дезинсекции и дератизации. – М.: МЕДГИЗ, 1952. – С. 356. 16. Вашков В.И., Шнайдер Е.В. Хлорофос. – М.: Медгиз, 1962. – 182 с. 17. Волков Ю. П., Шугал Н. Ф. Синтетические аналоги пиретринов // Химическая промышленность, 1969. – № 9. – С. 14 – 19. 18. Временная инструкция И-42-2 – 82 по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе «метода ускоренного старения» и естественного хранения. – М., Минздрав СССР, Министерство медицинской промышленности, 1983. 78 19. Гаврилов М.С., Щепоткина Н.В. Молеядовитая отделка шерстяных тканей // Прогрессивные технологии в обучении и производстве: матер. II Всероссийской конференции. – Камышин: КТИ ВолгГТУ, 2003. – С. 29. 20. Гар К.А. Методы испытания токсичности и эффективности инсектицидов. – М.: Изадательсво с.-х. лит. – 1963. – 288 с. 21. Грапов А.Ф. Новые инсектициды и акарициды // Успехи химии. – 1999. – Т.68. – № 8. – С.1 – 12. 22. Герунов Т.В. Иммунотоксические эффекты синтетических пиретроидов и возможности их фармакокоррекции у животных: Автореферат дис. … кта. биол. наук: 16.00.04, 16.00.03. – Казань, 2009. – 23 с. 23. Гинзбург Р.Г. Кожееды (Dermestidae) как вредители шелководства и борьба с ними // Сб. работ Института приклад, зоол. и фигопат.– 1951. – Т. 1. – С. 29 – 35. 24. Горбачева Н.А., Орлова А.М. Синтетические пиретроиды: токсикология, метаболизм // Судебно-медицинская экспертиза. – 1999. – № 5. – С. 28 – 31. 25. ГОСТ 12.1.007 – 76. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. Введен 10.03.76. – М.: Издательство стандартов, 1977. – 5 с. 26. ГОСТ 9.055 – 75. Ткани шерстяные: Метод лабораторных испытаний на устойчивость к повреждению молью. Введен 01.07.1976– М.: Издательство стандартов, 1977. – 7 с. 27. Государственная фармакопея. Одиннадцатое издание, выпуск 1. Общие методы анализа / Гл. редактор Машковский М.Д. – М.: Медицина, 1987. – С. 198. 28. Государственная фармакопея. Одиннадцатое издание, выпуск 2. Общие методы анализа: лекарственное растительное сырье / Гл. редактор Машковский М.Д. – М.: Медицина, 1987. – С. 140. 79 29. Грязнов А.И. Инсектициды, применяемые в медицинской дезинсекции, и молекулярно-клеточный механизм их действия // РЭТ-инфо. – 1998. – №4. – С. 29 – 34. 30. Дашко И.В. Влияние комплексонов на межфазные явления в моющем процессе: Автореферат дис. … к-та. хим. наук: 02.00.11; МИТХТ им. Ломоносова – М., 2009. – 24 с. 31. Дегтярева Л.А. Биологические обоснования мер борьбы с кожеедами.М., 1975. – 20 с. 32. Дремова В.П. Городская энтомология. – Екатеринбург: ИздатНаукаСервис, 2005. – С. 243. 33. Дремова В.П., Путинцева Л.С., Котовп И. А., Терехова З.А. Инсектицидная активность и уровень токсичности препаратов Талкорд и Фендона // Вопросы дезинфекции и стерилизации: Сборник научных трудов МНИИВС им. И.И. Мечникова. – М., 1986. – С. 77 – 81. 34. Дремова В.П., Путинцева Л.С., Ходаков П.Е. Медицинская дезинсекция. Основные принципы, средства и методы. – Екатеринбург: Путиведь, 1999. – С. 120 – 121. 35. Ерёмина О.Ю. Изыскание новых фосфорорганических синергистов и пиретроидов и исследование механизмов их действия: Автореферат дис. … к-та биол. наук; ВИЗР. – СПб, 1996. – 35 с. 36. Жантиев Р.Д. Жуки-кожееды (семейство Dermestidae) фауны СССР. – МГУ, 1976. – 182 с. 37. Жантиев Р. Д. Личинки жуков-кожеедов рода Dermestes (Coleoptera, Dermestidae) России и сопредельных стран. Подрод Montandonia // Зоологический журнал. – 2001. – Т. 80. – № 3. – С. 371 – 375. 38. Жантиев Р.Д. Система и филогения жуков-кожеедов (Coleoptera, Dermestidae) // Зоологический журнал. – 2000. – В. 3. – Т. 79. – С. 297 – 311. 80 39. Жантиев Р.Д. Экология и классификация жуков-кожеедов (Coleoptera, Dermestidae) фауны Палеарктики // Зоологический журнал. – 2009. – Т. 88. – № 2. – С. 176 – 192. 40. Жужиков Д.П. Гилобиология – новая отрасль технической биологии // I Всесоюзная конференция по биоповреждениям. – М.: Наука, 1978. – С. 157 – 159. 41. Жужиков Д.П. Устойчивость материалов и изделий к повреждению насекомыми. – М.: Наука, 1982. – С. 7 – 18. 42. Жужиков Д.П., Жантиев Р.Д. Насекомые – вредители изделий и материалов. – М.: Высшая школа, 1987. – C. 33 – 65. 43. Загуляев, А.К. Новые виды настоящих молей (Lepidoptera, Tineidae, Myrmecozelinae) // Вестник зоологии. – 1972. – № 5. – С. 14-16. 44. Загуляев, А.К. Пищевые связи и эволюция типов питания настоящих молей (Lepidoptera, Tineidae) // Зоологический журнал. – 1972. – Т. 51. – Вып. 10. – 1514 с. 45. Зайцева Г.А., Проворова И.Н., Сердюкова И.Р. и др. Профилактика заражения музейных фондов молями-кератофагами // В кн.: Биологические вредители музейных художественных ценностей и борьба с ними. М.: ВНИИР. – 1991. 46. Ильичев В. Д. Бочаров Б. В. Экологические основы защиты от биоповреждений. – М.: Наука, 1985. – 264 с. 47. Каган Ю.С. Общая токсикология пестицидов. – Киев, 1981. – С. 55 – 72. 48. Костина М.Н., Мальцева М.М., Новикова Э.Л., Лопатина Ю.В. Перспективы создания препаративных форм для профессиональных обработок на основе новых зарегистрированных субстанций // Дезинфекционное дело. – 2005. – № 3. – С. 45. 49. Крейнгольд С.У. Источники информации о дезинфекционных средствах // Дезинфекционное дело. – 2003. – № 3. – С. 27. 81 50. Крейнгольд С.У. Практическое руководство по химическому анализу дезинфекционных препаратов. – М.: Экспресспринт, 2002. – С. 9. 51. Крейнгольд С.У., Шестаков К.А. Оптические характеристики некоторых инсектицидов и методы их определения в дезинфекционных средствах // Дезинфекционное дело. – 1998. – № 1. – С. 58 – 61. 52. Кроллау Е. К. Нацкий К. В. Проблемы защиты музейных ценностей от биологических повреждений (практические задачи). – М.: «Наука», 1983. – С. 229 – 232. 53. Кунчиев Ю.И. Всасывание пестицидов через кожу и профилактика отравлений. – Киев, 1975. – С. 15 – 37. 54. Кузнецов Б.А. Основы товароведения пушно-мехового сырья. – М.: Заготиздат, 1952. – 508 с. 55. Леви М.И., Богданова Е.Н., Шестаков К. А. Эффективность «Микроприма» (микрокапсулированный перметрин) по отношению к насекомым, имеющим медицинское значение // Дезинфекционное дело. – 1993. – № 2 – 3. – С. 52 –54. 56. Левченко М.А. Сравнительная оценка эффективности новых инсектицидов и опрыскивающей техники при дезинсекции животноводчеких помещений против мух: Автореферат дис. … к-та. вет. наук: 03.00.19; ГНУ УНИВИ Россельхозакадемии. – Тюмень, 2009. – 22 с. 57. Легин Г.Я. О рецептурах инсектицидных средств контактного и кишечного действия // Дезинфекционное дело. – 2000. – № 4. – С. 46 – 49. 58. Леонова И.Н., Слынько Н.М. Применение токсикологических методов в изучении механизмов резистентности к инсектицидам у насекомых // Агрохимия. – 1988. – № 8. – С. 130 – 140. 59. Мельников Н. Н., Швецова-Шиловская К. Д. Синтез инсектицидов пиретринового ряда // Химическая промышленность, 1955. – № 3. – С. 50 – 61. 60. Молоков В.Л. «Миттокс» – средство для защиты от вредителей меха // Меха мира. – 1998. – № 3. – С. 26. 82 61. Молоков В.Л., Одинец А.А. Миттокс – лучший препарат промышленного применения // Директор. – 2000. – № 11(25). – С. 30 – 31. 62. Молоков В.Л., Серебренникова М.Н, Футорянская В.В. и др. Отечественный молезащитный препарат для изделий шерстяной промышленности // Текстильная промышленность. – 1997. – № 6. – С. 24, 25. 63. Мрочковский М. Кожееды (Dermestidae) – вредители биологических коллекций и музейных ценностей в Южном Казахстане // Материалы I научной конференции молодых специалистов и аспирантов.– Алма-Ата, 1969. – С. 50 – 53. 64. МУ 1.2.1105 – 02. Оценка токсичности и опасности дезинфицирующих средств. – М., 2002. – С. 5 – 7. 65. МУ 3.5.2.1759 – 03. Методы определения эффективности инсектицидов, акарицидов, регуляторов развития и репеллентов, используемых в медицинской дезинсекции. – М., 2003. – Ч. 3.5.2. – С. 41, 47. 66. Наумов С. П. Жизнь животных. Том 3. Пауки и насекомые. – М.: «Просвещение», 1971. – 637 с. 67. Набоков В.А. Контактные инсектициды, их свойства и применение в медицинской дезинсекцию. – М.: Медгиз, 1958. – 258 с. 68. Нормативные показатели безопасности и эффективности дезинфекционных, дезинсекционных и дератизационных средств, подлежащих контролю при проведении обязательной сертификации № 01-12/75 от 05.02.96 г. – М. – 1998. – Ч. 3. – С. 22. 69. Нудельман З.Н. Синтетические инсектициды // Природа. – 1955. – № 7. – С. 83 – 86. 70. Огвоздин, В.Ю. Управление качеством: Основы теории и практики / В.Ю. Огвоздин. – М.: Дело и Сервис, 2007. – С. 107. 71. ОСТ 42-2 – 72 Лекарственные средства. Порядок установления сроков годности. Введен 01.07.73. – М., 1972. – 6 с. 83 72. Павлова, Е.А. Вредители пушно-мехового и кожевенного сырья и борьба с ними. – М.: Заготиздат, 1949. – 60 с. 73. Палиев А.В. Санитарно-гигиеническая и токсикологическая оценка продуктов убоя для птиц при отравлении экотопом: Автореферат дис. … к-та. биол. наук: 16.00.06; ТГСХА. – Тверь, 2006. – 23 с. 74. Пат. 2028055. Россия. A01N65/00, C08L91/00. Антимольное средство // Подчайнов С.Ф., Круглова Т.А., Кирова Л.С. и др. – № 93040570/05. Заявл. 17.08.93. Опубл. 09.02.95 75. Пат. 2130259 Россия. A01N25/06, A01N53/00. Аэрозольное средство для уничтожения моли и кожеедов // Рославцева С.А., Александров А.Б., Караулов Е.И. и др. – № 97107552/04. Заявл. 07.05.97 Опубл. 20.05.99 76. Пат. 2181944 Россия. А 01N25/18, A 01N 53/00, A 01M 1/20. Изделие для борьбы с летающими насекомыми в среде с движением воздуха и способ борьбы с летающими насекомыми // Эммрих Р.Р., Микконен Д.В., Лэджинесс Т.А. - № 97118366/13. Заявл.04.04.96. Опубл. 10.05.02. 77. Пат. 2111666. Россия. A01N53/00, A01N25/34, A01M1/20. Инсектицидное средство // Франц Бенчитш. – № 93005043/13. Заявл. 12.09.91. Опубл. 27.05.98. 78. Пат. 2185061. Россия. A01N25/02, A01N53/00, A01M1/20. Инсектицидный препарат на основе циперметрина // Желтова Е.В., Славашевич М.А., Костенко С.В. – № 2000129869/13. Заявл. 30.11.00. Опубл. 20.07.02. 79. Пат. 2134964. Россия. A01N25/00, A01M1/20. Инсектоакарицидный состав // Аббасов Т.Г.-О., Поляков В.А. – № 98107016/13. Заявл. 06.04.98. Опубл. 27.08.99. 80. Пат. 2111661. Россия. A01M1/00, A01N25/00, A01N25/04. Концентрированный инсектицидный гелеобразный препарат и способ борьбы с синантропными насекомыми // Рыльников В.А., Лубошникова В.М., Костырко И.Н. – № 96111344/13. Заявл. 17.06.96. Опубл. 27.05.98. 84 81. Пат. 2179805. Россия. A01N53/08, A01N37/34, A01N25/02. Масляный инсектицидный препарат на основе пиретроида // Перемитина А.Д., Славашевич М.А., Черненькая Л.Н. – № 2000129870/04. Заявл. 30.11.00. Опубл. 27.02.02. 82. Перегуда Т.А., Иваницкая Е.Г., Ахлынина Е.В., Тимофеевская Л.А., Соколова О.Н., Кабин С.В. Инсектицидное средство «Masterlac» на лаковой основе с высокой эффективностью и длительным остаточным эффектом [Электронный ресурс]. – Электрон. Дан. – 2010. – Режим доступа: http://www.treemarket.ru 83. Пехташева Е.Л. Биоповреждения и защита непродовольственных товаров. – М.: Мастерство, 2002. – 224 с. 84. Проворова И.Н. Платяная моль и новые подходы к борьбе с ней в условиях музеев: Дис. на соискание уч. ст. канд. биол. наук.03.00.09 – М.: МГУ, 1995. – 172 с. 85. Проворова И.Н. Моль платяная: такая обыкновенная и парадоксальная // Музей. – 2011. – № 5. – С. 58 – 63. 86. Романова И.Г. Сравнительное исследование ферментативных механизмов резистентности к пиретроидам у насекомых: Автореферат дис. … к-та. биол. наук: 03.00.04. – М., 2004. – 24 с. 87. Ромашкова О.П., Разумеев К.Э., Молоков В.Л. и др. Проблемы и перспективы борьбы с молями-кератофагами // РЭТ-ИНФО. – 2004. – № 3. 88. Рославцева С.А. Резистентность синантропных насекомых к инсектицидам // Дезинфекционное дело. – 1997. – № 3. – С. 48 – 50. 89. Рославцева С.А., Баканова Е.И. Некоторые вопросы совершенствования дезинсекционных средств и повышения эффективности дезинсекционных мероприятий // Дезинфекционное дело.– 2001. – № 4. – С. 34 – 38. 90. Рославцева С.А., Баканова Е.И., Еремина О.Ю. и др. Микрокапсулированное средство «Эмпайр 20» – высокоэффективный представитель современных инсектицидов // РЭТ-инфо. – 1999. – № 1. – С. 31 – 34. 85 91. Рославцева С. А., Олифер В.В., Федотова А.Н. Неоникотиноиды - новый класс инсектицидов // Актуальные проблемы дезинфекгологии в профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний. Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 100-летию В.И. Вашкова. – М.: ИТАР-ТАСС, 2002. – С. 214 – 215. 92. Рославцева С.А., Перегуда Т.А., Шалатилова А.Г. Препараты для защиты шерсти и изделий из нее от насекомых-кератофагов в условиях быта // Дезинфекционное дело. – 1996. – № 4. 93. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р.У. Хабриева. – М.: ОАО «Издательство «Медицина». – С. 45 – 47. 94. Рязанова Г.И. Моли-кератофаги // РЭТ-ИНФО. – 2004. – № 2. 95. Рязанова Г.И. Особенности популяции платяной моли Tineola bisselliella (hȕmm) и их значение для испытания материалов на устойчивость к повреждению этим вредителем. – В кн. Насекомые и грызуны – разрушители материалов и технических устройств. – М.: Наука, 1983. – С. 102 – 107. 96. Рязанова Г.И. Температура в биологических испытаниях материала на устойчивость их к повреждению молью Tineola bisselliella (Humm). – М.: МГУ, 1977. – С. 19 – 24. 97. Рязанцев В.Ф. Борьба с бытовыми насекомыми. – М.: Медицина, 1972. – С. 43. 98. Сапожникова А.И., Шалатилова А.Г., Калинин А.Г. и др. Влияние биоповреждающего действия молей-кератофагов на качество сырья и полуфабриката шкурок норки // Актуальные проблемы товароведения сырья и продуктов животного происхождения, промышленных и продовольственных товаров, экологии: межвед. юбилейный сб. науч. трудов – М.: ФГОУ ВПО МГАВМиБ. – 2009. – С. 57 – 61. 99. Сивец Н., Панкратов О., Мазолевский Д. и др. Антисептик мукосанин – инновационная разработка // Медицинский вестник. – 2009. – № 12 (898). 86 100. Смирнов А.А. Препарат на основе фенилпиразола и синтетического пиретроида для борьбы с эктопаразитами плотоядных животных: Автореферат дис. … к-та. биол. наук: 16.00.06. – М., 2002. – 24 с. 101. Суслов А.Е. Повреждение материалов при воздействии различных биофакторов. – М.: Наука, 2006. – 104 с. 102. Сухова М.Н., Колобова Е.С., Осецкий С.В., и др. Эффективность общесанитарных дезинсекционных противомушиных мероприятий в профилактике острого эпидемического конъюктивита и дизентерии в Красногорске 1952 – 62 гг. // Тезисы докладов научной конференции ЦНИИДИ. – М., 1963. – С. 138 – 139. 103. Токсина И.Н. Проблемы борьбы с насекомыми, разрушающими произведения искусства и архитектуры – В кн. Насекомые и грызуны – разрушители материалов и технических устройств. – М.: Наука, 1983. – С. 223 – 229. 104. ТУ 2386-119-05530487 – 2009. Средство инсектицидное "Антимольная секция. Введен 2009. – М.: Издательство стандартов – 2010. – 7 с. 105. ТУ 9392-025-84794429 – 2010. Средство инсектицидное фумигирующее "РАПТОР Секция от моли на трансфлутрине с различными запахами (апельсин, мандарин, грейпфрут, лаванда, лимон, лайм, кедр, цветочный, без запаха)". Введен 2010. – М.: Издательство стандартов – 2010. – 8 с. 106. Удавлиев Д.И. Инсектоакарицидные средства на основе пиретроидов и циодрина в форме полимерных изделий, аэрозолей, эмульсий и пен: Автореферат дис. … д-ра. биол. наук: 06.02.05; 06.02.03; ГНУ ВНИИВСГЭ Россельхозакадемии. – М., 2011. – 46 с. 107. Хазанов Г.И. Придание биостойкости шерстяным материалам // Текстильная промышленность. – 1998. – № 2. – С. 35. 108. Химическая энциклопедия / Под ред. Кнунянц И.Л. - М.: Советская энциклопедия, 1990. – Т. 2. – Ст. «Инсектициды». – С. 239. 87 109. Хрусталева Н.А., Рославцева С.А. Перспективы использования авермектинового комплекса авесектина С в медицинской дезинсекции и разработка новых эффективных средств на его основе // Актуальные проблемы дезинфектологии в профилактике инфекционных и паразитарных заболеваний: Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 100-летию В.И. Вашкова. – М., ИТАР-ТАСС. – 2002. – С. 224 – 226. 110. Чернышёв В. Б. Экология насекомых М.: МУ, 1996. – 304 с. 111. Шалатилова А.Г., Еремина О.Ю. Жуки-кожееды и контроль их чис- ленности // Прикладная энтомология. – 2010. – № 1 (1). – С. 43 – 45. 112. Шестаков К.А. Биологическое обоснование разработки и применения липосомальных форм инсектицидных средств для подавления численности насекомых, имеющих медико-санитарное значение: Автореферат дис. … к-та. биол. наук: 03.00.09; ГОУВПО «Московская медицинская академия». – М., 2008. – 24 с. 113. Шестаков К.А., Расницьш С.П. Эффективность композиции циперметрина и хлорпирифоса, микрокапсулированных в липосомы, против рыжих тараканов // Дезинфекционное дело. – 2005. – № 4. – С. 51 – 52. 114. Шура-Бура Б.Л., Глазунова А.Я. Применение хлорофоса в виде отравленных приманок против тараканов // Тезисы докладов научной конференции ЦНИДИ. – М., 1963. – С. 129 – 130. 115. Aldridge W.N. Toxicology of pyrethroids // Pestic. chem: Hum. Welfare and Environ. Pros.: 5th intern kongr. – Kioto 29 Aug. – 4 Sept., 1982. – № 3. – P. 485 – 490. 116. Beal R.S. Coleoptera, Dermestidae // Insects of Micronesia. –1961. – V. 16 (3). – P. 109 – 131. 117. Bry R.E., McDonald L.L., Lang J.H. 1972. Protectinig stored woolens against fabric-insect damage: along-term nonchemical method // Journal of Economic Entomology. – 1972. – V. 65(6). – P. 1735 – 1736. 88 118. Bry R.E., Boatright R.E., Lang. J.H. Ovicidal effect of permethrin against the black carpet beetle and the webbing clothes moth / Journal of Economic Entomology. – 1980. V. 73. – P. 449 – 450. 119. Bry R.E., Boatright R.E., Lang. J.H. Permethrin: effectiveness of low deposits against three species of fabric insects / Journal of the Georgia Entomological Society. 1982. – V. 17(1). P. 46 – 53. 120. Chauvin G., Vannier G. Supercooling capacity of Tineola bisselliella (Hummel) (Lepidoptera: Tineidae): Its implication for disinfestation //Journal of Stored Products Research. – 1997. V. 33. № 4. – P. 283 – 287. 121. Cheema, P.S. Studies on the bionomics of the case bearing clothes moth, Tinea pellionella L / P.S. Cheema // Bull. Ent. Res. – 1956. – № 1 (47). – P. 167 – 182. 122. Content Handbook K. The method is usable for TC and SL formulations. – 2003. – P. 121. 123. Content Handbook L. Enantiomeric purity: The stereoisomers of transfluthrin are separated by chiral capillary gas chromatography using flame ionisation dtection and the isomer 1S-trans isomer fraction is determined. – 2006. – P. 128. 124. Cox P.D., Pinniger D.B. Biology, behaviour and environmentally sustainable control of Tineola bisselliella (Hummel) (Lepidoptera: Tineidae) // Journal of Stored Products Research. – 2007. – V. 43. – № 1. – Р. 2 – 32. 125. Dileep K. Singh. Toxicology of insecticides / Applied entomolocy. – 2007. – 70 р. 126. Faucheux M.J. Morphology and distribution of antennal sensilla in the female and male clothes moth, Tineola bisselliella Humm. (Lepidoptera: Tineidae) // Journal of Zoology. – 1985. – V.63. – № 2. – P. 355 – 362. 127. Evaluation on: transfluthrin use as a public hygiene insecticide / Advisory committee on pesticides. – 1997. – № 165. – 75 p. 89 128. Gammon D.W., Lawrence L.J., Casida J.E. Pyrethroid toxicology: protective effects of diazepam and phenobarbital in the mouse and the cockroach // Toxicol. Appl. Pharmacol. – 1982. – V. 66. – P. 290 – 296. 129. Gray A.J., Soderlund D.M. Mammalian toxicology of pyrethroids // Insecticides – Chichester: John Wiley and Sons, 1985. – №. 5. – P. 207. 130. Griswold G.H., Crowell M.F. The effect of humidity on the development of the webbing clothes moth (Tineola bisselliella Hum.) // Ecolopy – 1936. – № 17. – P. 241 – 250. 131. Háva J. New nomenclatorial changes in the family Dermestidae (Coleoptera) // Acta Entomologica Slovenica. –2007. – № 15. – P. 69 –74. 132. Háva J. New taxonomic changes inthefamily Dermestidae (Coleoptera) // Heteropterus Rev. Entomol. – 2008. – № 8 (1). – P. 43 – 45. 133. Háva J. Systematic and synonymic notes upon certain species of Dermestidae (Coleoptera) // Studies and Reports of District Museum Prague-East Taxonomical Series. – 2007. – № 3. – 47 – 50. 134. Háva J. World keys to the genera and subgenera of Dermestidae (Coleoptera), with descriptions, nomenclature and distributional records. Sbornik Narodniho Muzea v Praze Rada B Prirodni Vedy. – 2004. – 60 (3 – 4) – С. 149 – 164. 135. He F., Sun J., Hak K. et al. Effect of pyrethroid insecticides on subjects engaged in packaging pyrethroids //Brit. J. Indust. Med. – 1988. – 45. – P. 548 – 551. 136. He F., Wang S., Liu L. et al. Clinical manifistations and diagnosis of acute pyrethroid poisoning // Arch. toxicol. – 1989. – V. 64. – P. 54 – 58. 137. Kingsolver J. Dermestid Beetles (Dermestidae, Coleoptera) // Insect and Mite Pests in food. An illustrated keys. – 1991. – № 1. – P. 15 – 135. 138. Kiselyova T., Mc Hugh J.V. A phylogenetic study of Dermestidae (Coleoptera) based on larval morphology // Systematic entomology. – 2006. – № 31. – С. 469 – 507. 90 139. Liria J. Insectos de importancia forense en cadaveres de ratas, Carabobo, Venezuela // Rev Peru Med Exp Salud P. – 2006. – № 23. – P. 33 – 38. 140. Mroczkowski M. Distribution of the Dermestidae (Coleoptera) of the world with a catalogue of all knows species. – 1968. – №. 26. – P. 15 – 191. 141. Mroczkowski M. Dermestidae (Coleoptera) from the Kasakh SSR // Ann. Zool. Warszawa. 1962. – Vol. 20. – № 14. – P. 229 – 259. 142. Narahashi T. Nerve membrane ionic channels as the primary target of pyrethroids // Neurotoxicology. – 1985. – V. 2. – № 6. – P. 3 – 22. 143. Ray D.E., Cremer J.E. The action of decamethrin (a synthetic pyrethroid) on the rat // Pestic. Biochem. Physiol. – 1979. – № 10. – P. 333 – 340. 144. Pat. 6123955. JP. A01N 53/00. Cockroach repellent // Stevens, Davis, Miller & Mosher. – Заявл. 09.06.98. Опубл. 26.09.00. 145. Peck S.B., Heraty J., Landry B. The introduced insect fauna of an oceanic archipelago: The Galapagos Islands, Ecuador // American Entomologist. – 1998. – № 44. – P. 218 – 237. 146. Pisfil E., Korytkowski C. Biologнa y Comportamiento de Dermestes maculatus DeGeer (Col.: Dermestidae) // Rev Per. Ent. – 1974. – № 17(1). – P. 28 – 31. 147. Provorova I.N. Variabiliti of feeding benavior of tre webbing clothes moth, Tineola bisselliella (Humme), in museum conditions: feeding and non-feeding damage to material // Rus. J. Sci. Lepidopterol. – V. 1. – № 1 – 2. – P. 83 – 89. 148. Robinson C.P., Ciccotosto S., Sparrow L.G. Identification of a Key Enzyme in the Digestion of Wool by Larvae of the Webbing Clothes Moth, Tineola bisselliella // Journal оf The Textile Institute. – 1993. – V. 84. – 1. – P. 39 – 48. 149. Sarah J. Pethybridge, Frank S. Hay, Paul D. Esker etc. Diseases of Pyrethrum in Tasmania: Challenges and Prospects for Management / Plant dissase: The American Phytopathological Society. – USA: Healthy Plants – Healthy World. – 2008. – № 9. – V. 92. – P. 1260 – 1272. 91 150. Tkachenko I.I., Kokshareva N.V., Vekovshinina S.V. et al. Delayed neurotoxic effects of combinations of organophosphorus and pyrethroid pesticides // Health, safety and ergonomic aspects in use of chemicals in agriculture and forestry / Ed. by Y. Kundiev, Kiev: Institute for occupational health. – P. 180 – 183. 151. Who specifications and evaluations for public health pesticides. Transfluth- rin. – World Health Organization, 2002. – 20 p. 92 ПРИЛОЖЕНИЯ 93
